山东德州市齐河县一中2025-2026学年高二下学期5月月考生物学科试题

**基本信息** 高二生物月考试卷聚焦生物技术实践与前沿应用，通过泡菜制作、三亲婴儿培育等真实科研情境，考查微生物发酵、基因工程等核心知识，渗透科学思维与探究实践素养。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单项选择|15题/45分|微生物培养（1题泡菜制作）、基因工程（11题THP9基因导入）|结合生活实践（如1题泡菜处理）与技术细节（如11题限制酶选择）| |不定项选择|5题/20分|抑菌实验（16题数据解读）、细胞融合（17题草莓改良）|通过实验数据（16题抑菌圈增幅）考查科学分析能力| |简答题|5题/35分|微生物分离（21题）、单克隆抗体制备（23题）、蛋白质工程（25题）|22题整合植物组织培养与体细胞杂交，25题衔接蛋白质工程与基因表达载体构建，体现综合应用|

高二生物学科试题 2026.05 班级：________________姓名：________________考号：________________ 一、单项选择题 1.以下是以泡菜坛为容器制作泡菜时的4个处理：①沸盐水冷却后再倒入坛中；②盐水需要浸没全部菜料；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水；④检测泡菜中亚硝酸盐的含量。下列说法正确的是 A.①主要是为了防止菜料表面的醋酸菌被杀死 B.②的主要目的是用盐水杀死菜料表面的杂菌 C.③是为了使气体只能从泡菜坛排出而不能进入 D.④可检测到完整发酵过程中亚硝酸盐含量逐渐降低 2.我国科学家发明的三菌两步发酵法生产维生素C的工艺流程如下。该流程中第二步发酵是由氧化葡萄糖酸杆菌和巨大芽孢杆菌混合发酵完成的，前者为产酸菌俗称小菌，单独培养时增殖慢，产酸能力较低；后者为伴生菌俗称大菌，它不产酸。两者混合培养时产酸显著提高。下列叙述正确的是 A．发酵工程的中心环节是灭菌，发酵罐内要严格控制温度、pH和溶解氧等条件 B．可通过将培养液的pH调制中性或弱碱性筛选获得巨大芽孢杆菌 C．混合发酵产酸显著提高的原因可能是大菌产生了促进小菌生长和繁殖的物质 D．从发酵液中提取2—酮基—L—古龙酸需采用过滤、沉淀等方法 3.灭菌、消毒、无菌操作是生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是 A.培养乳酸菌时，需在培养基中添加维生素，配制好的培养基需先灭菌后调节pH B.微生物、动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染 C.为防止蛋白质变性，不能用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌 D.可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌 4.养殖场粪便是农家肥的重要来源，其中某些微生物可使氨氮化合物转化为尿素进而产生NH3，影响畜禽健康。为筛选粪便中能利用氨氮化合物且减少NH3产生的微生物。兴趣小组按图进行实验获得目的菌株，正确的是 A.①通常在等比稀释后用平板划线法获取单个菌落 B.②挑取在2种培养基上均能生长的用于后续的实验 C.③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙 D.粪便中添加菌株甲比乙更有利于NH3的减少 5．植物体细胞杂交使远缘杂交不亲和的植物有可能实现遗传物质重组,创造和培养植物新品种。科研人员为改良猕猴桃品质特性，通过PEG融合，进行了中华猕猴桃与美味猕猴桃种间体细胞杂交并成功获得了杂种植株。下列相关叙述正确的是 A．过程a需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，且处理时间相同 B．过程b还可使用电融合法、高Ca2+-高pH法和灭活的仙台病毒法诱导原生质体融合 C．过程d通常需要避光培养，愈伤组织需培养在有氧的容器中 D．过程f从试管中的再生小猕猴桃植株同时具有中华猕猴桃与美味猕猴桃的优良性状 6．红豆杉是濒危植物，其树皮产生的紫杉醇对抗癌有一定的疗效。如图是红豆杉植物组织培养和细胞培养的流程图，图中②为愈伤组织，通过B过程可最终产生新的植株，通过C过程可产生大量细胞。下列相关叙述正确的是 A．紫杉醇属于细胞次生代谢物，可从⑤中获取 B．a过程是脱分化，该过程中细胞增殖的方式是有丝分裂或减数分裂 C．b过程的实质是基因的选择性表达，b过程和a过程的光照条件相同 D．c过程通常采用固体培养基扩大⑤的培养 7．重组人抗肿瘤坏死因子-α单克隆抗体药物可用于治疗类风湿性关节炎、强直性脊柱炎及银屑病等。如图为利用小鼠制备该单克隆抗体的过程，下列叙述错误的是 A．图中的“抗原”应为肿瘤坏死因子-α B．细胞1为 B细胞，一般取自脾脏且种类繁多 C．融合处理可以使所有收集的细胞发生两两融合 D．将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞大规模培养或注射到小鼠腹腔增殖 8．下图是三亲婴儿的培育过程。据图分析，以下说法错误的是 A．该技术涉及动物细胞培养、细胞核移植等操作 B．可以采取梯度离心、紫外线短时照射等无需穿透卵母细胞透明带的方法去核 C．“三亲婴儿”同时拥有父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因 D．该技术可以有效降低血友病等严重遗传病婴儿的概率 9．下列关于动物细胞工程和胚胎工程的叙述，正确的是 A．同期发情处理和超数排卵处理的是同一个体 B．使用免疫抑制剂可以避免受体母牛对植入胚胎的排斥反应 C．高等哺乳动物受精作用和卵裂过程发生于输卵管，卵裂期细胞数量不断增多，但胚胎总体积不增加 D．精子接触透明带时，透明带发生生理反应阻止多精入卵 10.1987年，美国科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细胞的染色体上，获得高水平的表达。长成的植物通体光亮，堪称自然界的奇迹。这一研究成果表明 ①萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同   ②萤火虫与烟草植物共用一套遗传密码 ③烟草植物体内合成了荧光素  ④基因工程可以克服不同种生物之间的杂交障碍 A.①和③ B.②和③ C.①和④ D.①②③④ 11.THP9基因是野生玉米中控制高蛋白含量的优良基因，研究者利用基因工程技术将THP9基因转到玉米细胞内，从而获得转基因高蛋白玉米新品种。已知图中THP9基因转录的方向为从左往右。下列相关叙述错误的是 EcoRI BamHI KpnI MfeI HindIII 5′−G↓AATTC−3′ 3′−CTTAA↑G−5′ 5′−G↓GATCC−3′ 3′−CCTAG↑G−5′ 5′−G↓GTACC−3′ 3′−CCATG↑G−5′ 5′−C↓AATTG−3′ 3′−GTTAA↑C−5′ 5′−A↓AGCTT−3′ 3′−TTCGA↑A−5′ A.THP9基因有2个游离的磷酸基团，而且游离的磷酸基团在5′端 B.构建基因表达载体时，用MfeI、HindIII切割质粒，用EcoRI、HindIII切割目的基因 C.利用PCR技术获取THP9基因时应选择引物1和引物4 D.为了检测转基因玉米新品种的培育是否成功，需要在个体水平上检测其蛋白质含量 12.下列有关“DNA粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是 A.DNA在2 mol·L-1的NaCl溶液中溶解度较低 B.滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA降解 C.研磨液离心后弃上清液，取沉淀加入预冷95%的酒精静置 D.鉴定粗提取的DNA时，对照组与实验组的区别是加不加二苯胺试剂 13.OsGLO1、EcCAT、EcGCL和TSR四个基因分别编码四种不同的酶，研究人员将这些基因分别与叶绿体转运肽（引导合成的蛋白质进入叶绿体）基因连接，构建多基因表达载体（载体中部分序列如图所示），利用农杆菌转化法转化棉花，在棉花叶绿体内构建了一条新的代谢途径，提高了棉花的产量。下列说法正确的是 A.四个基因都在棉花叶绿体内进行转录、翻译 B.OsGLO1、EcCAT基因转录时以DNA的相同单链为模板 C.应选用含卡那霉素的培养基筛选被农杆菌转化的棉花细胞 D.可用抗原—抗体杂交技术检测四种酶在转基因棉花中的表达情况 14.将突变基因导入拟南芥的染色体DNA时，可出现三种结果：仍为野生型(导入失败)、突变杂合子(在一对同源染色体上只导入1个突变基因)及突变纯合子。研究人员进行了如图1转基因操作后，用引物LP、RP和BP对拟南芥DNA进行PCR扩增并电泳检测，得到结果如图2。不考虑突变基因插入染色体的其他位置。下列说法错误的是 A.乙组、丙组分别为突变纯合子、突变杂合子 B.由LP+RP组电泳结果可知，加样孔位于电泳条带上方 C.模板链过长导致使用引物BP+LP无法产生PCR产物 D.甲与乙杂交后代的DNA利用上述引物PCR扩增后，电泳结果与丙相同 15.生物技术的安全性和伦理问题是社会关注的热点。下列叙述错误的是 A.转基因技术可用来增加酵母双乙酰的生成，缩短啤酒的发酵周期 B.把抗虫基因整合到植物叶绿体基因组中,可减少因花粉扩散造成的基因污染 C.反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿 D.生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等 二、不定项选择题 16.某同学研究植物提取物W的抑菌效果，采用打孔法在试验菌平板上加入W，培养后测量抑菌圈直径及平均增幅速率，结果如表。根据实验数据分析，下列说法错误的是 提取物W扩散时间/h 2 4 6 8 10 12 14 抑菌圈直径/mm 8.0 12.0 18.0 26.0 36.0 48.0 55.0 抑菌圈平均增幅速率（mm/h） 1.00 1.50 2.00 2.50 3.00 3.50 3.50 （注：平均增幅速率为单位时间内抑菌圈直径的增量） A．抑菌圈直径随扩散时间延长持续增大，表明提取物W的抑菌效果逐渐增强 B．抑菌圈平均增幅速率在12小时达到最大值，可能因为提取物已达最大扩散范围 C．实验操作中，钢管打孔后需灼烧灭菌以避免杂菌污染 D．抑菌圈的形成是由于提取物W抑制了细菌的分裂，导致菌体死亡 17.草莓营养价值高，被誉为“水果皇后”。如图为利用现代生物技术改良草莓品系的过程，下列相关叙述错误的 A．过程Ⅰ能定向改变生物的遗传性状 B．过程Ⅱ可直接用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导植物细胞融合 C．凤梨风味绿色草莓植株的培育原理有细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 D．杂种细胞A形成的标志是再生出新的细胞壁，该过程与高尔基体有关 18.如图表示生物工程常用技术的流程，下列叙述不正确的是 A．若该图表示用良种牛体细胞克隆牛的培育流程，要通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞 B．若该图表示利用胚胎工程繁殖试管牛的操作流程，若要进一步增大良种牛的繁殖数量可对胚胎4进行分割处理 C．若该图表示单克隆抗体的制备流程，用来促进细胞1和细胞2融合的灭活病毒，并未破坏其抗原结构 D．若该图表示植物体细胞杂交流程，形成3的过程表示原生质层的融合，完成融合的标志是再生出新的细胞壁 19.由于某目的基因酶切后的末端为平末端，载体E只有产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P 将目的基因接入载体E。据图分析，下列叙述错误的是 A.为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶EcoRⅤ或SmaⅠ切割载体P B.最后将该目的基因接入载体E，可用限制酶XhoⅠ和PstⅠ切割载体P C.载体P不能作为基因表达载体，是因为其没有表达该目的基因的启动子与终止子 D.若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入了受体细胞 20.科学家将鼠抗人大肠癌单克隆抗体基因（ND-1）与酵母菌胞嘧啶脱氨酶基因（YCD）融合，在大肠杆菌中成功地表达了单链抗体与酶的融合蛋白，这类蛋白的疗法称为抗体介导的酶解前药疗法（ADEPT）。ND-1-YCD融合基因的构建方法如图所示。下列有关叙述错误的是 A.图中两条杂交链的获得至少需要经过2次扩增循环 B.图中杂交链延伸生成ND-1-YCD融合基因的过程，需要加入引物 C.获得的融合基因在构建好基因表达载体后可直接被正常状态的大肠杆菌吸收 D.该融合蛋白应是利用抗体部分特异性地识别人大肠癌细胞并将酶带到靶部位 三、简答题 21.自生固氮菌是土壤中能固定空气中N2的细菌，将玉米种子用自生固氮菌拌种后播种，可显著提高产量。科研人员进行了如图的操作，以从土壤中分离得到自生固氮菌。 (1)相对于一般的微生物培养基，本实验中所用培养基成分上的特点是__________________；培养基乙相对于培养基甲需额外添加___________________。用培养基甲扩大培养时需置于摇床上进行，目的是________________以及充分利用培养基中营养物质。 (2)用移液器取0.1mL菌液接种到培养基乙上用涂布器进行涂布，涂布前需要对涂布器进行_____________（填“干热”“湿热”或“灼烧”）灭菌；涂布后、待____________________，再将平板进行倒置并培养。 (3)根据图示结果推测，每毫升培养基甲中微生物数为__________________个。一般情况下，用该法测得的数目比培养基甲中微生物实际数目___________（填“偏大”“偏小”或“相同”)，原因是_______________。 22.抗癌药物紫杉醇是从红豆杉树皮中提取出来的生物活性物质，可抑制肿瘤细胞增殖。由于红豆杉生长缓慢，资源短缺，因此紫杉醇的提取受到了极大限制，科研人员正试图通过多种方法提高紫杉醇的产量。回答下列问题： (1)紫杉醇属于红豆杉产生的________(填“初生”或“次生”)代谢物，该物质________(填“是”或“不是”)生物生长所必需的。紫杉醇能与细胞内的微管蛋白结合，推测其可通过影响________的形成，从而抑制肿瘤细胞的有丝分裂，达到抗癌效果。 (2)研究人员利用离体培养的红豆杉细胞生产紫杉醇，过程如图所示： 为了筛选出高产紫杉醇细胞，研究者常用诱变的方法处理愈伤组织，选择愈伤组织作为处理材料的原因______________________________________________________________。 (3)研究人员还尝试运用植物体细胞杂交技术，将红豆杉与柴胡培育获得可产生紫杉醇的柴胡植株。实验过程中可用____________________酶处理获得原生质体，再用化学法，如PEG融合法、______________________融合法诱导原生质体融合，融合后得到的杂种细胞再经脱分化、再分化等进而发育成完整植株，其中启动脱分化和再分化的关键植物激素是____________________________________________________________________。 (4)传统游离紫杉醇药物的注射液采用蓖麻油和乙醇作为溶剂，易引起严重过敏反应。科研人员制备出一种紫杉醇脂质体药物，利用肝肿瘤模型鼠开展了研究，结果如表。 组别 对照组 脂质体药物组 游离药物组 药物浓度/(mg·kg－1) 0 20 35 20 35 肿瘤重量/g 1.379 0.696 0.391 0.631 死亡 肿瘤抑制率/% / 49.4 71.6 50.1 死亡 下列说法正确的是________(多选)。 A.紫杉醇药物应处于图示脂质体的b位置 B.与游离紫杉醇药物相比，紫杉醇脂质体药物对小鼠的副作用小 C.在脂质体表面加上靶向信号分子可以实现定向药物输送 D.35 mg·kg－1的脂质体药物组比20 mg·kg－1脂质体药物组抗肿瘤效果更好 23.人心肌细胞中的肌钙蛋白由三种结构不同的亚基组成，即肌钙蛋白T(cTnT)、肌钙蛋白I(cTnI)和肌钙蛋白C(cTnC)，其中cTnI在血液中含量上升是心肌损伤的特异性指标。为制备抗cTnI的单克隆抗体，科研人员完成了以下过程。请据图分析回答下列问题： (1)细胞培养中，为防止有害代谢物的积累，可采用____________________的方法。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是____________________________，最后一次免疫后第3天，取脾脏内部分组织制成细胞悬液与骨髓瘤细胞诱导融合，常用的化学诱导因素是__________________________________________________________________。 (2)甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是__________，过程②表示将乙细胞接种到多孔培养板上，进行抗体阳性检测，之后稀释、培养、再检测，并多次重复上述操作，其目的是筛选获得____________________________________________。 (3)酶联免疫吸附双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如图所示： 据图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体能与同一抗原表面的__________结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是___________________________________，可通过测定产物量来判断待测抗原量。 24.某植物的A基因是一个受低温等因素诱导表达的基因，其表达产物A蛋白是该种植物获得耐寒性不可或缺的一种防冷冻蛋白。科研小组欲利用A基因培育转基因抗冻番茄新品种。A基因上的两个限制酶切割位点及载体结构如图所示，回答下列问题： (1)研究人员用限制酶EcoRⅠ切出的末端Ⅰ为，用限制酶SmaⅠ切出的末端Ⅱ为，请依次写出这两种限制酶的识别序列，并用箭头标出切割位点_________________________、______________________________________。 (2)利用PCR扩增目的基因时，需加入两种引物，引物的作用是__________________________ __________________,图中启动子的作用是__________________________________________。 (3)A基因转录时以图一中α链为模板链，mRNA自身的延伸方向为5'→3'。A基因应插入图二中________________（填“启动子甲”或“启动子乙”）的下游，并且酶切位点_______（填“1”或“2”）离该启动子更近些。 (4)为使甘蓝具有抗除草剂能力，科研人员将除草剂草甘膦抗性基因转入甘蓝植株，获得抗草甘膦转基因甘蓝。回答下列问题： a.草甘膦抗性基因一条链的两端序列如图1所示，采用PCR 技术获取和扩增草甘膦抗性基因时应选用的2种引物序列是______（标出5'端和 3'端）。若初始加入1个草甘膦抗性基因，则历经 4 次 PCR 循环需要消耗引物数量为______个。 b.图2中步骤③将农杆菌与甘蓝愈伤组织共培养后，在步骤④的培养基中添加_____________以便筛选出含目的基因的甘蓝植株。添加此抗生素而不选用添加另一种抗生素筛选的原因______________________________________。 c.若要检测转基因甘蓝植株是否产生抗除草剂蛋白，所用的方法是____________________。 25.水蛭素是水蛭唾液腺分泌的一种蛋白质，具有良好的抗凝血作用。已知天然的水蛭素抗凝血活性较低，产量和来源有限。研究发现，若将其第47位天冬酰胺替换成赖氨酸，可以提高其抗凝血活性。某科研团队拟通过不同的生物技术获得活性高、产量大的重组水蛭素。回答下列问题： (1)图1所示运用____________工程得到凝血活性更高的水蛭素，该技术的直接操作对象是_________，图中的物质a是____________。在生产过程中，物质b的碱基序列可能不同，却合成了相同的物质a，这是因为____________。 (2)基因工程中常利用PCR获取和扩增目的基因。PCR扩增时，反应体系中需要加入模板、4种dNTP、____________、____________及缓冲液，4种dNTP的作用是____________。在制备PCR反应体系时，每次用微量移液器吸取不同试剂前，需要确认或调整刻度和量程，还需要____________。 (3)利用基因工程生产水蛭素时，依据图2信息构建基因表达载体，为使水蛭素基因与质粒高效连接，应选用的限制酶是____________，原因是____________。若采用大肠杆菌作为受体细胞，需要在培养基中加入____________以筛选转化成功的工程菌，并选择颜色为____________的大肠杆菌菌落进一步培养。 注：neor为新霉素抗性基因；malcZ的表达产物会使菌落呈蓝色，否则菌落呈白色。 (4)工业生产中，还可利用制备乳腺生物反应器来生产高抗凝血活性的水蛭素，但制备时需将高抗凝血活性的水蛭素基因与乳腺中特异表达的基因的_________等调控原件重组在一起。某研究小组大胆推测，用类似方法制备膀胱生物反应器比乳腺生物反应器更有优势，因为它可以不受转基因动物的____________（答1点）的限制。 1 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物学科试题答案 1.C 解析 盐水煮沸是为了杀灭杂菌，冷却之后使用是为了保证乳酸菌等微生物的生命活动不受影响，A错误；②盐水需要浸没全部菜料，造成无氧环境，有利于乳酸菌无氧呼吸，B错误；③盖好坛盖后，向坛盖边沿的水槽中注满水，能达到排气减压、隔绝空气、防止杂菌污染等目的，C正确；腌制泡菜过程中亚硝酸盐的含量先增多后减少，D错误。 2.C 【详解】A、发酵工程中，发酵罐内发酵是中心环节，A错误；B、培养液的pH调制中性或弱碱性是大部分细菌的生活环境，无法起到筛选作用，B错误；C、据题意推测，第二步混合发酵产酸显著提高的原因很可能是大菌为小菌提供某种生长因子促进了小菌生长和繁殖，C正确；D、2-酮基-L-古龙酸是微生物的代谢物，从发酵液中提取需采用提取、分离和纯化等措施，D错误。故选C。 3.D 解析 培养乳酸菌时，需要在培养基中添加维生素，配制好的培养基需先调节pH后灭菌，A错误；动物细胞培养基中需添加一定量的抗生素以防止污染，保证无菌环境，而微生物的培养基中一般不能加入抗生素，B错误；一般用湿热灭菌法对牛肉膏蛋白胨培养基进行灭菌，以防止杂菌污染，C错误；可用湿热灭菌法对实验中所使用的微量离心管、细胞培养瓶等进行灭菌，以防止杂菌污染，D正确。 4.C 解析 平板划线法无需稀释，A错误；由图可知，②筛选不能在尿素唯一氮源培养基上生长，而能在牛肉膏蛋白胨培养基上生长的菌株用于后续的实验，B错误；所筛选出的菌株之所以不能利用尿素，可能是由于不产生脲酶或分泌脲酶抑制剂，所以③可通过添加脲酶并检测活性，筛选得到甲、乙，C正确；由图可知，甲不产生脲酶而乙可以产生脲酶，且乙同时分泌脲酶抑制剂，粪便中可能还含有其他能产生脲酶的菌株，所以粪便中添加菌株乙比甲更有利于NH3的减少，D错误。 5．C 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，过程a（原生质体制备）需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得有活性的原生质体，但是不同品种的细胞壁成分和结构略有差异，处理时间不一定相同，A错误； B、过程b（原生质体融合）的诱导方法包括PEG融合法、电融合法、高Ca2+-高pH法等，但是灭活的仙台病毒只能诱导动物细胞融合，B错误； C、过程d（脱分化）通常需要避光培养，愈伤组织需培养在有氧的容器中，进行有氧呼吸，C正确； D、再生小猕猴桃植株具有中华猕猴桃与美味猕猴桃的基因，但是所有基因不一定都能表达，所以不一定具有中华猕猴桃与美味猕猴桃的全部优良性状，D错误。 6．A 【详解】A、通过c过程可产生大量细胞，紫杉醇属于细胞代谢的产物，只需要培养到细胞阶段就可以，因此可以从⑤中获取紫杉醇，A正确； B、②为愈伤组织，因此a过程是脱分化，该过程中细胞存在有丝分裂过程，但没有减数分裂，B错误； C、a过程是脱分化，不需要光照，b过程是再分化，需要光照，则a、b过程的光照条件不同，C错误； D、c过程，培养⑤一般采用的培养基是液体培养基，产生大量细胞，D错误。 7．C 【详解】A、本实验目的是制备抗肿瘤坏死因子 -α 单克隆抗体，因此注射的抗原应为肿瘤坏死因子 -α，A正确； B、细胞 1 是经抗原免疫的小鼠B 淋巴细胞，通常取自脾脏，且脾脏中 B 细胞种类繁多，B正确； C、细胞融合是随机且概率性的过程，融合处理只能提高融合概率，无法使所有收集的细胞发生两两融合，还会存在未融合细胞，C错误； D、抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞，可通过体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖的方式获取大量单克隆抗体，D正确。 8．D 【详解】A、从图中可以看到，该技术涉及细胞核移植（将母亲卵母细胞的核移植到捐献者去核卵母细胞中）、动物细胞培养（体外培养卵母细胞和受精卵）等操作，A正确； B、去除卵母细胞的细胞核时，梯度离心、紫外线短时照射等方法不需要穿透透明带，属于无需穿透卵母细胞透明带的去核方法，B正确； C、“三亲婴儿”的细胞核基因来自母亲和父亲，细胞质基因来自卵母细胞捐献者，因此同时拥有父亲、母亲及卵母细胞捐献者的部分基因，C正确； D、三亲婴儿技术主要用于预防线粒体遗传病（线粒体基因来自捐献者的卵母细胞），而血友病是X染色体上的隐性遗传病（属于细胞核基因遗传病），该技术无法降低血友病婴儿的概率，D错误。 9．C 【详解】A、同期发情处理的是受体，超数排卵处理的是供体，二者不是同一个体，A错误； B、受体母牛对植入的胚胎基本不会发生免疫排斥反应，因此不需要使用免疫抑制剂，B错误； C、高等哺乳动物的受精作用发生在输卵管，卵裂过程也在输卵管中进行，卵裂期细胞数量不断增多，但胚胎总体积不增加，甚至略有缩小，C正确； D、精子接触卵细胞膜时，透明带发生生理反应阻止多精入卵，D错误。 10-15.DCBDCA 16.ABD 【详解】A、抑菌圈直径随扩散时间延长持续增大，表明提取物W能够以提取物W为圆心向周围扩散，将周围一定范围内的细菌全部杀死，但不能表明提取物W的抑菌效果逐渐增强，A错误；B、表中信息显示：抑菌圈平均增幅速率在12小时达到最大值，但此时提取物W还没有达到最大扩散范围，因为扩散14小时的抑菌圈直径大于扩散12小时的抑菌圈直径，B错误；C、实验操作中，在试验菌平板上用钢管打孔后需灼烧灭菌，以避免杂菌污染，C正确； D、抑菌圈的形成是由于提取物W抑制了细菌的生长，导致菌体死亡，但不能说明提取物W对细菌的分裂有抑制作用，D错误。故选ABD。 17.B　[过程Ⅱ必须先利用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体，再用聚乙二醇作为化学诱导剂来诱导原生质体的融合，B错误。] 18.D　[为避免接触抑制并使细胞与培养液充分接触，通过细胞培养得到大量的供体细胞1，需将动物组织块分散成单个细胞，A正确；若题图表示植物体细胞杂交过程，形成3的过程表示原生质体的融合，完成融合的标志是再生出新的细胞壁，D错误。] 19.AD 20.BC 21.【答案】(1) 不添加氮源 凝固剂（琼脂） 增加培养基中O2（和N2）的含量 (2) 灼烧 涂布的菌液被培养基吸收 (3) 1.7×108 偏小 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只有一个菌落 22.(1)次生　不是　纺锤体　(2)愈伤组织细胞一直处于不断增殖的状态，在诱变因素下容易产生突变　(3)纤维素酶和果胶　高Ca2＋—高pH　生长素和细胞分裂素　(4)BCD 解析　(4)据图可知，该脂质体的内部和外部都是磷脂分子亲水的头部，紫杉醇难溶于水，则紫杉醇药物应处于图示脂质体的a位置，A错误。 23.(1)定期更换培养液　加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞　聚乙二醇(PEG)　(2)乙和丙　能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞　(3)不同部位　抗体与待测抗原结合，酶催化特定底物反应 解析　(1)细胞培养中，为防止有害代谢物的积累对细胞自身造成危害，可采用定期更换培养液的方法，以便清除代谢物。每隔2周用cTnI作为抗原注射小鼠1次，共注射3次，其目的是加强免疫，刺激小鼠机体产生更多的B淋巴细胞；诱导动物细胞融合常用的化学诱导因素是聚乙二醇(PEG)。(2)图中过程①②依次表示单克隆抗体制备过程中的两次筛选，其中过程①第一次筛选是用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，过程②第二次筛选是通过克隆化培养和抗体检测筛选出能产生抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。因此，甲、乙、丙中，只含杂交瘤细胞的是乙和丙；过程②的目的是筛选获得能产生特异性强、灵敏度高的抗cTnI抗体的杂交瘤细胞。 24．(1) (2)使DNA聚合酶能够从引物的3’端开始连接脱氧核苷酸 RNA 聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录 (3)启动子乙 2 (4)5′-CTTGGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3' 30 潮霉素 由图可知潮霉素抗性基因在T-DNA片段中，卡那霉素抗性基因不在T-DNA片段中，所以潮霉素抗性基因可随T-DNA转移到被侵染的细胞，并且随其整合到该细胞的染色体DNA上，从而使含目的基因的甘蓝植株有抗潮霉素的抗性，所以能在含潮霉素的培养基上筛选含目的基因的甘蓝植株 抗原-抗体杂交 25．(1)蛋白质工程 基因 多肽链 密码子的简并性 (2)引物 TaqDNA聚合酶 为PCR提供原料和能量（缺一不可） 更换移液器枪头 (3)XmaI和BglII 这两种限制酶切割产生的黏性末端与目的基因的黏性末端相同 新霉素 白色 (4)启动子 性别或生理状态 1 学科网（北京）股份有限公司 $