四川省成都市西南交通大学附属中学2025-2026学年第二学期半期考试高二生物试卷

**基本信息** 以传统发酵（如杜康制醋）、现代生物技术（如克隆猴、双杂交瘤抗体）为情境，覆盖微生物发酵、细胞工程、基因工程模块，原创题占比高，注重实验操作与科研案例分析。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|25/50|微生物培养（1-10）、植物细胞工程（11-14）、动物细胞工程（15-24）、基因工程（25）|结合传说（第1题醋起源）、装置图分析（第2题发酵装置），考查操作细节（如灭菌方法、计数误差）| |非选择题|5/50|发酵工程（26）、植物体细胞杂交（27）、单克隆抗体（28）、动物克隆（29）、基因工程（30）|原创题（23、25、26题）整合实验设计（如酵母菌计数）与科研应用（如人参皂苷生产），突出科学思维与探究实践|

成都市交大附中2025------2026学年度下期半期考试 高2024级生物试卷（模拟练习） 时间：75分钟 总分：100分 命题人：张海军 审题人：*** 本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。 第Ⅰ卷（选择题 共50分） 一、单项选择题（本题共25题，每小题2分，共50分） 1．传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻，酸甜可口，于是他把“廿一日”加“酉”字，给这种酸水起名为“醋”，下列叙述错误的是（ ） A．墨塔酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的 B．酒发酵初期通气的目的是促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖 C．若统计活酵母菌数量时，可用显微镜直接计数法，统计的结果比实际数目偏低 D．酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多 2．如图为果酒与果醋发酵的简易装置及兴趣小组设计的改进装置示意图，下列说法错误的是（　　） A．用体积分数为70%的酒精对上述装置进行消毒后，再装入果汁 B．甲装置在酿酒过程中被杂菌污染的机会比其他两装置大 C．丙装置转为果醋发酵更容易，只需通过气阀2通气即可 D．利用装置丙进行酒精发酵，发酵旺盛阶段不能进行醋酸发酵 3．下列关于果酒、果醋、泡菜及腐乳制作的叙述，正确的是（　　） A．酵母菌无氧呼吸时产生酒精，因此果酒制作全程都要保持无氧环境 B．果酒制作完成后，通入空气创造有氧环境便可在最适条件下制得果醋 C．制作泡菜时，加入的盐水事先煮沸的目的是除去溶解氧和杂菌 D．制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的主要微生物均属于原核生物 4．从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ） A．可使用液体培养基进行富集培养 B．为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌 C．获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次 D．利用图b计算出样品中菌体浓度为5.85×108个/mL，则接种稀释液的稀释倍数为107倍 5．关于统计样品中活菌数目的叙述错误的是（ ） A．样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养 B．在同一稀释度下，应至少对三个菌落数为30到300的平板进行重复计数，然后求平均值 C．统计的菌落数往往比活菌的实际数目多 D．可以用细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察计数，但统计的结果往往大于活菌数 （原创）6.生物兴趣小组同学尝试在麦芽汁琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。以下对操作顺序描述合理的是（　　） A. 配制培养基→调PH→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 制备培养基→倒平板→灭菌→调PH→培养→接种分离 C. 配制培养基→调PH→灭菌→接种分离→培养 D. 制备培养基→倒平板→调PH→接种分离→灭菌→培养 7. 土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述正确的是（　　） A．若要筛选分解尿素［CO（NH2）2］的细菌，尿素可作为该菌的氮源和碳源 B．理论上每毫升菌液中2号试管的活菌数是4号试管的100倍 C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×109个 D．接种用的培养皿可用干热灭菌，可杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 8.微生物培养成功的关键是防止杂菌污染。消毒、灭菌是实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A. 测定土壤中尿素分解菌数目时，取回的土壤样品应进行灭菌以去除杂菌 B. 牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后蛋白质变性失活不利于培养微生物 C. 体外培养菌株时，必须向培养基添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 D. 若筛选纤维素分解菌的培养基受到污染，其上生长的杂菌不一定能分解纤维素 9．发酵技术广泛应用于食品、医药、农业等领域。下列叙述正确的是（ ） A．菌落的大小、颜色、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 B．工业化生产啤酒发酵过程分为前发酵和后发酵，大部分糖的分解都在后发酵阶段完成 C．发酵获得的单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素等物质 D．醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，当缺少糖源时，其可以直接将乙醇转化为乙酸 10．发酵工程在食品、医药和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列叙述正确的有（　　） A. 啤酒装瓶前要进行高压蒸汽灭菌，以延长它的保质期 B. 可将控制合成血红蛋白的基因转入青霉素生产菌，来提高青霉素产量 C. 通过提取、分离和纯化措施获得的酵母菌单细胞蛋白可作食品添加剂 D. 谷氨酸发酵生产时，在碱性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 11. 如图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或大量生产细胞产物的过程。下列叙述正确的是（    ） A．通过①④过程可将茎尖分生组织培养成脱毒苗 B．②⑤过程为单倍体育种，可明显缩短育种年限 C．①②脱分化过程没有发生基因的选择性表达 D．⑥⑦过程均体现了植物细胞具有全能性 （原创）12．植物体细胞杂交技术在种质创新中具有独特优势，如图为利用该技术培育适宜盐碱地种植的杂种植株的过程示意图，其中①~④表示相关步骤。下列叙述正确的是（　　） A．去除细胞壁获得的原生质体甲和乙，需置于高渗溶液中以维持渗透压平衡 B．诱导原生质体融合时，用灭活的仙台病毒处理可获得较高的融合率 C．杂种植株具有双亲的遗传物质，但因基因间的相互作用，未必能表现出双亲的全部优良性状 D．在再分化过程中，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较高时，有利于诱导芽的分化 13．“红豆生南国，春来发几枝”，红豆古时候是爱情的象征，现代发现它的细胞中含有抗癌物质紫杉醇。研究人员利用植物细胞工程进行快速繁殖，利用细胞悬浮培养提取细胞产物，相关流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 外植体最好选择云南红豆杉的顶芽分生组织，是因为该部位细胞分化程度低、分裂能力强 B. 对外植体消毒可选用酒精和次氯酸钠溶液处理，接种操作须在酒精灯火焰旁进行 C. 诱导外植体形成愈伤组织和诱导愈伤组织生芽、生根所用植物激素的种类及比例均不同 D. 利用细胞悬浮培养提取紫杉醇的主要原理是细胞增殖，几乎不受季节与天气等的限制 14．番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞培养技术培养胡萝卜细胞来获取番茄红素。实验流程和培养装置如图。下列说法错误的是（    ） A．过程②使用胰蛋白酶处理愈伤组织，将细胞分散开 B．为获取植物细胞次生代谢物，使用植物细胞培养技术比直接从植物体中提取更有优势 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 15. 下列有关动物细胞培养技术的叙述，错误的是（ ） A．可以用机械的方法或酶处理的方法将组织分散成单个细胞 B．酶处理细胞的时间过长可能会改变细胞膜的通透性 C．恶性肿瘤细胞具有不死性和失去接触抑制的特性 D．原代培养时需要用酶分散细胞，传代培养时不需要用酶处理 16. 动物细胞培养时操作不当会造成细菌污染，某动物细胞培养过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A．图中①和②可以用相同的酶处理，处理的目的也相同 B．对培养液进行灭菌并定期更换培养液均是为了避免细菌污染 C．图中原代培养和传代培养过程中均可能会出现细胞贴壁 D．通常在含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行动物细胞培养 17．科学家利用雌性小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，并使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞培养过程需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的培养箱中 B. 该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题 C. iPS细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相同 D. 题中研究过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合、体外受精、胚胎移植等技术 18．蛇毒种类繁多，制备单克隆抗体可以快速检测伤口毒液种类，为毒蛇咬伤的快速诊断提供可靠工具。以小鼠作为实验动物，进行抗蛇毒单克隆抗体的制备，下列说法正确的是（ ） A．将蛇毒注入小鼠体内进行免疫并从小鼠骨髓中获取相应已免疫的B淋巴细胞 B．采用灭活病毒诱导法进行细胞融合时，利用了病毒表面的糖蛋白和酶 C．筛选能在选择培养基上生存的杂交瘤细胞进行培养就能获得大量单抗 D．若控制某种蛇毒产生的基因出现突变，已经制备好的单克隆抗体仍旧有效 19．大熊猫为我国的国宝，科学家正尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列叙述正确的是（ ） A．体细胞核移植技术可体现出动物细胞的全能性 B．体细胞核移植技术的基础技术是动物细胞培养 C．体细胞核移植获得的重构胚可直接完成分裂和发育 D．体细胞核移植技术能对体细胞供体动物100%的复制 20．我国科学家通过如图流程成功克隆出“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理、研发诊治药物等带来光明前景。下列相关叙述错误的是（ ） A．“中中”和“华华”的性别是由猕猴甲的遗传物质决定的 B．过程③还可以通过胚胎分割技术来提高胚胎数量与成活率 C．“中中”和“华华”的诞生说明已分化的动物体细胞核具有全能性 D．猕猴乙要用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 21. 科学家将两株不同的杂交瘤细胞A和B融合形成双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞AB能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB结构如图所示。下列正确的是（ ） A．用选择培养基即可筛选出双杂交瘤细胞AB B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO2维持培养液的渗透压 C．双杂交瘤细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶分散处理 D．抗体AB与抗体A、B相比，可增强对靶细胞的杀伤效果 22．下图为科研人员培育良种秦川牛的过程示意图，下列叙述正确的是（ ） A. 对供体母牛注射促性腺激素，可使其超数排卵，获得大量卵原细胞 B. 采集的精子需在获能液中培养获能，才能与处于减数第一次分裂中期的卵母细胞受精 C. 胚胎移植前，需对受体母牛进行同期发情处理，以保证其生殖器官的生理状态适宜 D. 为获得遗传性状相同的后代，可对原肠胚时期的胚胎进行均等分割 （原创）23．1978年，世界上首例“试管婴儿”路易丝·布朗在英国诞生，开启了人类辅助生殖技术的新纪元。该技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等步骤。下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（　　） A．该技术主要适用于因输卵管阻塞或切除而导致不孕的女性患者 B．试管婴儿的发育起点是受精卵，但早期胚胎发育需在体外完成直至分娩 C．早期胚胎在卵裂过程中，随着细胞数目增多，细胞体积增大，物质交换效率随之提高 D．为提高着床成功率，胚胎培养应在原肠胚阶段进行移植，此时已初步形成各组织分化 24．以精子作为外源基因载体同时携带外源基因进入卵细胞的方法为精子载体法，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（ ） A．过程①需要将成熟的精子放入人工配置的获能液进行获能处理 B．过程②体外受精技术可以通过基因重组来获得双亲的遗传物质 C．过程③的早期胚胎需发育到囊胚或原肠胚阶段再进行胚胎移植 D．过程④在进行胚胎移植之前需同时对供体和受体进行免疫检查 （原创）某科研小组从盐生植物中克隆获得耐盐相关基因NHX1，需在体外进行PCR扩增，并通过琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行鉴定。下列有关操作及原理的叙述，正确的是（　　） A．PCR反应体系中必须加入耐高温的DNA聚合酶、解旋酶、四种脱氧核苷酸、引物及含目的基因的模板 B．电泳结束后，将凝胶浸泡在溴化乙锭（EB）溶液中染色，在紫外灯下可观察到DNA条带的位置 C．DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，电泳时在电场作用下由正极向负极迁移 D．PCR的每次循环包括高温变性、中温延伸、低温复性三个步骤，其原理是DNA的全保留复制 第Ⅱ卷 非选择题 （共50分） 26. （原创）（11分）某研学小组以“传统果酒发酵工艺探究”为主题开展项目式学习，他们模拟工业化生产流程，利用新鲜葡萄制作果酒。主要步骤为：葡萄挑选、清洗、榨汁→酶解→接种酵母菌→发酵→终止发酵（澄清、过滤、分装）。回答下列问题： （1）过程②酶解时，常向葡萄汁中添加______酶和______酶，以分解细胞壁和胞间层，从而提高果汁出汁率和澄清度。 （2）过程④发酵初期，发酵罐通常需要通入适量无菌空气，其目的是______。密封后，酵母菌在无氧条件下将葡萄糖转化为酒精，该过程的化学反应式为______。 （3）研学小组用图1所示的简易发酵装置制作葡萄酒，装瓶时发酵液不能装满，需留出约1/3的空间，其原因是______（答出2点）。发酵过程中，对装置上充气口和排气口的正确操作是______。 （4）果酒发酵结束后，若要在同一装置中继续酿制果醋，与果酒发酵相比，需要在温度和气体控制方面做出的改变是______、______。 （5）为监测发酵过程中酵母菌的种群数量变化，研学小组定期取样进行计数。 ①采用稀释涂布平板法计数时，统计的菌落数往往比样品中实际活菌数偏少，原因是______（2分，答出2点）。 ②某次计数采用血细胞计数板（规格如图2所示，每个计数室共400个小方格，容积为0.1 mm³），将发酵液稀释100倍后，在显微镜下观察并计数四角中方格的酵母菌数量分别为22、26、24、28个，则此时发酵液中酵母菌的种群密度约为______个/mL。图2 27.（10分）人参作为名贵中药材，素有“百草之王”的美誉，其主要活性成分为人参皂苷。药用参主要依赖人工栽培，不仅生长周期漫长，还易受病虫害侵扰。为解决这些问题，科研人员制定的研究方案如下图。 回答下列问题： （1）过程①使外植体（人参或胡萝卜的组织、细胞）转变为愈伤组织状态，该过程称为______。过程②通常使用纤维素酶和果胶酶的混合液去除细胞壁以获得 。 （2）过程③常用一定浓度的PEG诱导融合，但高浓度的PEG会对原生质体产生毒性，且会持续诱导非特异性融合。PEG处理一定时间后，需向体系中加入过量的培养基进行稀释，其目的是 （2分）。除了使用PEG诱导，常用的化学方法还有 。 （3）过程⑤和⑥体现了 。人参皂苷属于人参的_____（填“初生”或“次生”）代谢物。与传统人工栽培提取模式相比，通过筛选和培养高产细胞来生产人参皂苷的优点有 （2分）（答出两点即可）。 （4）除了用以上方法，随着基因组测序和功能基因组学的发展，在全面了解人参皂苷合成的代谢途径和关键酶的基础上，可利用基因工程的方法改造酵母菌等微生物，再利用______工程生产人参皂苷。 28. （9分）回答下列与动、植物细胞工程相关的问题： I.紫杉醇是一种从红豆杉树皮中分离提纯的天然抗癌药物。为快速检测紫杉醇，研究人员利用细胞工程技术制备了抗紫杉醇单克隆抗体，制备过程如图所示。回答下列问题： （1）与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）_______（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；灭活病毒可促进细胞融合，该过程中灭活病毒对细胞膜的作用是使细胞相互凝聚，细胞膜上的______，促使细胞膜打开，细胞发生融合。 （2）在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，该培养基对________和______生长具有抑制作用。 （3）对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行________，经多次筛选，就可获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是 。 Ⅱ.人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程： （4）科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 的愈伤组织。 （5）科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的作用效果： ①首先培养胃癌细胞，将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。 根据实验结果可以得出的结论有 （2分）。 29．（9分）小香猪是我国珍贵的地方猪种，由于肉质鲜美广受消费者喜爱。某课题组开展了小香猪体细胞转入绿色荧光蛋白（GFP）基因并进行克隆的研究，其基本流程如图所示。请分析回答： （1）过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫_________________。动物细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_______________。传代培养时，使用_____________________处理贴壁细胞，得到单个细胞后再接种到新的培养液里培养。 （2）过程③表示通过__________对卵母细胞去核，实际去除的是____________。经过过程④操作后，可采用物理或化学方法，如_________________（答出一种即可）方法激活重构胚，获得转基因重构胚胎。 （3）在转基因重构胚胎移植前开展遗传病筛查时，应选取胚胎的__________细胞进行DNA分析。 （4）在过程⑤中，将克隆的胚胎移植到代孕母猪的输卵管中，胚胎移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，这一操作的目的是___________________________________________________________________（2分）。 30.（11分） 幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，该菌的Ipp20基因能合成特有的蛋白质，据此，研究者利用基因工程制备Hp疫苗。已知Ipp20基因表达时，双链DNA的一条链是编码链，另一条链是模板链如图1，基因的编码区是指基因中能够编码蛋白质的区域。该过程所选择的质粒及操作步骤如图2。回答下列问题： （1）基因工程的核心步骤是 。质粒上的启动子是_______识别和结合的位点。 （2）若通过PCR技术（即 技术）大量扩增Ipp20基因的编码区段，需要设计一对引物，引物的作用是 （2分）。其中结合到编码链上的引物序列是 （方向为5'→3'，写出5'端4个碱基序列）。 （3）在PCR反应体系中一般需要加入Mg2+，目的是 。PCR产物常采用 方法进行鉴定。 （4）已知在构建基因表达载体时使用了限制酶XhoI和XbaI切割质粒和Ipp20基因。科研人员采用了影印法筛选含有目的基因的大肠杆菌（如图2），即用无菌的线毡布压在添加________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基A的菌落上，带出少许菌种，平移并压在添加_________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基B上。根据图示结果分析，符合要求的大肠杆菌菌落是________（填培养基中数字）。 高二生物半期试卷第 1 页 共 7 页 学科网（北京）股份有限公司 $Sheet1 成都市交大附中2025--2026学年度下期半期考试 高2024级生物试卷（模拟练习）试题双向细目表 题号 题型 考查知识点 教材模块和章节 分值 预估难度 预估难度系数 易 中 难 1 选择题 传统发酵技术 选择性必修三第一章第一节 2 √ 0.8 2 选择题 传统发酵技术 选择性必修三第一章第一节 2 √ 0.45 3 选择题 传统发酵技术 选择性必修三第一章第一节 2 √ 0.8 4 选择题 微生物的培养 选择性必修三第一章第2节 2 √ 0.4 5 选择题 微生物的计数 选择性必修三第一章第2节 2 √ 0.75 6 选择题 微生物的培养 选择性必修三第一章第2节 2 √ 0.7 7 选择题 微生物的计数 选择性必修三第一章第2节 2 √ 0.7 8 选择题 微生物的培养 选择性必修三第一章第2节 2 √ 0.75 9 选择题 发酵工程 选择性必修三第一章第3节 2 √ 0.35 10 选择题 发酵工程 选择性必修三第一章第3节 2 √ 0.45 11 选择题 植物组织培养 选择性必修三第二章第1节 2 √ 0.4 12 选择题 植物体细胞杂交 选择性必修三第二章第1节 2 √ 0.7 13 选择题 植物细胞培养 选择性必修三第二章第1节 2 √ 0.55 14 选择题 植物细胞工程综合 选择性必修三第二章第1节 2 √ 0.55 15 选择题 动物细胞培养 选择性必修三第二章第2节 2 √ 0.8 16 选择题 动物细胞培养 选择性必修三第二章第2节 2 √ 0.65 17 选择题 动物细胞工程综合 选择性必修三第二章第2节 2 √ 0.7 18 选择题 单克隆抗体 选择性必修三第二章第2节 2 √ 0.75 19 选择题 动物体细胞核移植和克隆动物 选择性必修三第二章第2节 2 √ 0.75 20 选择题 克隆动物 选择性必修三第二章第2节 2 √ 0.65 21 选择题 动物细胞融合 选择性必修三第二章第2节 2 √ 0.45 22 选择题 胚胎工程 选择性必修三第二章第3节 2 √ 0.85 23 选择题 胚胎工程 选择性必修三第二章第3节 2 √ 0.8 24 选择题 胚胎工程 选择性必修三第二章第3节 2 √ 0.65 25 选择题 重组DNA技术 第三章第1、2节 2 √ 0.7 26 非选择题 发酵工程综合 选择性必修三第一章 11 √ 0.65 27 非选择题 植物细胞工程综合 选择性必修三第二章第1节 10 √ 0.65 28 非选择题 动、植物细胞工程综合 选择性必修三第二章第1、2节 9 √ 0.5 29 非选择题 动物细胞工程和基因工程综合 选择性必修三第二章第2、3节 9 √ 0.63 30 非选择题 基因工程 第三章第1、2节 11 √ 0.4 合 计 √ 0.6 $ 成都市交大附中2025------2026学年度下期半期考试 高2024级生物试卷（模拟练习） 时间：75分钟 总分：100分 命题人：张海军 审题人：*** 本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。 第Ⅰ卷（选择题 共50分） 一、单项选择题（本题共25题，每小题2分，共50分） 1．传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻，酸甜可口，于是他把“廿一日”加“酉”字，给这种酸水起名为“醋”，下列叙述错误的是（ ） A．墨塔酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的 B．酒发酵初期通气的目的是促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖 C．若统计活酵母菌数量时，可用显微镜直接计数法，统计的结果比实际数目偏低 D．酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多 2．如图为果酒与果醋发酵的简易装置及兴趣小组设计的改进装置示意图，下列说法错误的是（　　） A．用体积分数为70%的酒精对上述装置进行消毒后，再装入果汁 B．甲装置在酿酒过程中被杂菌污染的机会比其他两装置大 C．丙装置转为果醋发酵更容易，只需通过气阀2通气即可 D．利用装置丙进行酒精发酵，发酵旺盛阶段不能进行醋酸发酵 3．下列关于果酒、果醋、泡菜及腐乳制作的叙述，正确的是（　　） A．酵母菌无氧呼吸时产生酒精，因此果酒制作全程都要保持无氧环境 B．果酒制作完成后，通入空气创造有氧环境便可在最适条件下制得果醋 C．制作泡菜时，加入的盐水事先煮沸的目的是除去溶解氧和杂菌 D．制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的主要微生物均属于原核生物 4．从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ） A．可使用液体培养基进行富集培养 B．为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌 C．获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次 D．利用图b计算出样品中菌体浓度为5.85×108个/mL，则接种稀释液的稀释倍数为107倍 5．关于统计样品中活菌数目的叙述错误的是（ ） A．样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养 B．在同一稀释度下，应至少对三个菌落数为30到300的平板进行重复计数，然后求平均值 C．统计的菌落数往往比活菌的实际数目多 D．可以用细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察计数，但统计的结果往往大于活菌数 6.生物兴趣小组同学尝试在麦芽汁琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。下列对操作顺序描述合理的是（　　） A. 配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 配制培养基→倒平板→灭菌→培养→接种分离 C. 制备培养基→灭菌→接种分离→培养 D. 配制培养基→倒平板→接种分离→灭菌→培养 7. 土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述正确的是（　　） A．若要筛选分解尿素［CO（NH2）2］的细菌，尿素可作为该菌的氮源和碳源 B．理论上每毫升菌液中2号试管的活菌数是4号试管的100倍 C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×109个 D．接种用的培养皿可用干热灭菌，可杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 8.微生物培养成功的关键是防止杂菌污染。消毒、灭菌是实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A. 测定土壤中尿素分解菌数目时，取回的土壤样品应进行灭菌以去除杂菌 B. 牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后蛋白质变性失活不利于培养微生物 C. 体外培养菌株时，必须向培养基添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 D. 若筛选纤维素分解菌的培养基受到污染，其上生长的杂菌不一定能分解纤维素 9．发酵技术广泛应用于食品、医药、农业等领域。下列叙述正确的是（ ） A．菌落的大小、颜色、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 B．工业化生产啤酒发酵过程分为前发酵和后发酵，大部分糖的分解都在后发酵阶段完成 C．发酵获得的单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素等物质 D．醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，当缺少糖源时，其可以直接将乙醇转化为乙酸 10．发酵工程在食品、医药和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列叙述正确的有（　　） A. 啤酒装瓶前要进行高压蒸汽灭菌，以延长它的保质期 B. 可将控制合成血红蛋白的基因转入青霉素生产菌，来提高青霉素产量 C. 通过提取、分离和纯化措施获得的酵母菌单细胞蛋白可作食品添加剂 D. 谷氨酸发酵生产时，在碱性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 11. 如图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或大量生产细胞产物的过程。下列叙述正确的是（    ） A．通过①④过程可将茎尖分生组织培养成脱毒苗 B．②⑤过程为单倍体育种，可明显缩短育种年限 C．①②脱分化过程没有发生基因的选择性表达 D．⑥⑦过程均体现了植物细胞具有全能性 （原创）12．如图所示为科学家利用植物体细胞杂交技术培育新品种耐盐植株的过程，序号代表过程或结构。以下分析正确的是（ ） A．原生质体甲和原生质体乙的融合可用灭活病毒诱导 B．由愈伤组织得到④需要脱分化、再分化等过程 C．实验获得的杂种植株一定能表现出双亲的优良性状 D．再分化过程使用的培养基中生长素/细胞分裂素的比值低有利于芽的分化 13．“红豆生南国，春来发几枝”，红豆古时候是爱情的象征，现代发现它的细胞中含有抗癌物质紫杉醇。研究人员利用植物细胞工程进行快速繁殖，利用细胞悬浮培养提取细胞产物，相关流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 外植体最好选择云南红豆杉的顶芽分生组织，是因为该部位细胞分化程度低、分裂能力强 B. 对外植体消毒可选用酒精和次氯酸钠溶液处理，接种操作须在酒精灯火焰旁进行 C. 诱导外植体形成愈伤组织和诱导愈伤组织生芽、生根所用植物激素的种类及比例均不同 D. 利用细胞悬浮培养提取紫杉醇的主要原理是细胞增殖，几乎不受季节与天气等的限制 14．番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞培养技术培养胡萝卜细胞来获取番茄红素。实验流程和培养装置如图。下列说法错误的是（    ） A．过程②使用胰蛋白酶处理愈伤组织，将细胞分散开 B．为获取植物细胞次生代谢物，使用植物细胞培养技术比直接从植物体中提取更有优势 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 15. 下列有关动物细胞培养技术的叙述，错误的是（ ） A．可以用机械的方法或酶处理的方法将组织分散成单个细胞 B．酶处理细胞的时间过长可能会改变细胞膜的通透性 C．恶性肿瘤细胞具有不死性和失去接触抑制的特性 D．原代培养时需要用酶分散细胞，传代培养时不需要用酶处理 16. 动物细胞培养时操作不当会造成细菌污染，某动物细胞培养过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A．图中①和②可以用相同的酶处理，处理的目的也相同 B．对培养液进行灭菌并定期更换培养液均是为了避免细菌污染 C．图中原代培养和传代培养过程中均可能会出现细胞贴壁 D．通常在含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行动物细胞培养 17．科学家利用雌性小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，并使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞培养过程需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的培养箱中 B. 该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题 C. iPS细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相同 D. 题中研究过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合、体外受精、胚胎移植等技术 18．蛇毒种类繁多，制备单克隆抗体可以快速检测伤口毒液种类，为毒蛇咬伤的快速诊断提供可靠工具。以小鼠作为实验动物，进行抗蛇毒单克隆抗体的制备，下列说法正确的是（ ） A．将蛇毒注入小鼠体内进行免疫并从小鼠骨髓中获取相应已免疫的B淋巴细胞 B．采用灭活病毒诱导法进行细胞融合时，利用了病毒表面的糖蛋白和酶 C．筛选能在选择培养基上生存的杂交瘤细胞进行培养就能获得大量单抗 D．若控制某种蛇毒产生的基因出现突变，已经制备好的单克隆抗体仍旧有效 19．大熊猫为我国的国宝，科学家正尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列叙述正确的是（ ） A．体细胞核移植技术可体现出动物细胞的全能性 B．体细胞核移植技术的基础技术是动物细胞培养 C．体细胞核移植获得的重构胚可直接完成分裂和发育 D．体细胞核移植技术能对体细胞供体动物100%的复制 20．我国科学家通过如图流程成功克隆出“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理、研发诊治药物等带来光明前景。下列相关叙述错误的是（ ） A．“中中”和“华华”的性别是由猕猴甲的遗传物质决定的 B．过程③还可以通过胚胎分割技术来提高胚胎数量与成活率 C．“中中”和“华华”的诞生说明已分化的动物体细胞核具有全能性 D．猕猴乙要用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 21. 科学家将两株不同的杂交瘤细胞A和B融合形成双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞AB能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB结构如图所示。下列正确的是（ ） A．用选择培养基即可筛选出双杂交瘤细胞AB B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO2维持培养液的渗透压 C．双杂交瘤细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶分散处理 D．抗体AB与抗体A、B相比，可增强对靶细胞的杀伤效果 22．下图为科研人员培育良种秦川牛的过程示意图，下列叙述正确的是（ ） A. 对供体母牛注射促性腺激素，可使其超数排卵，获得大量卵原细胞 B. 采集的精子需在获能液中培养获能，才能与处于减数第一次分裂中期的卵母细胞受精 C. 胚胎移植前，需对受体母牛进行同期发情处理，以保证其生殖器官的生理状态适宜 D. 为获得遗传性状相同的后代，可对原肠胚时期的胚胎进行均等分割 （原创）23．1978年7月25日，世界上第一例“试管婴儿”在英国诞生。其技术主要流程为：体外受精，早期胚胎培养，胚胎移植。下列叙述错误的是（ ） A．该技术可用于输卵管障碍（阻塞或切除）的患者 B．与自然受孕相同，试管婴儿发育的起点仍然是受精卵 C．通过卵裂形成的细胞其物质交换效率显著提高 D．胚胎培养需等到各组织分化形成时再进行移植 24．以精子作为外源基因载体同时携带外源基因进入卵细胞的方法为精子载体法，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（ ） A．过程①需要将成熟的精子放入人工配置的获能液进行获能处理 B．过程②体外受精技术可以通过基因重组来获得双亲的遗传物质 C．过程③的早期胚胎需发育到囊胚或原肠胚阶段再进行胚胎移植 D．过程④在进行胚胎移植之前需同时对供体和受体进行免疫检查 （原创）25. 基因工程常用操作：PCR扩增目的基因、琼脂糖凝胶电泳法鉴定目的基因。对此叙述正确的是（ ） A. PCR体系中需加入DNA聚合酶、解旋酶、脱氧核苷酸、引物、模板 B. 电泳结束后，向凝胶喷洒二苯胺溶液，经沸水浴后显示DNA条带位置 C. DNA本身携带有大量正电荷，在均匀电场作用下其由负极向正极迁移 D. PCR原理是DNA半保留复制，每次循环分为变性、复性（退火）、延伸三步 第Ⅱ卷 非选择题 （共50分） 26. （原创）（11分）葡萄美酒夜光杯，人们很早就利用发酵工程技术将葡萄制成葡萄果酒，工业化生产大致流程为①葡萄挑选、清洗、榨汁；②酶解；③接种酵母菌；④发酵；⑤终止(澄清、过滤、分装)。回答下列问题。 (1) 过程②酶解时，需向葡萄汁中添加 ，破坏细胞壁以提高果汁出汁率和澄清度。 (2)过程④开始时需要进行一段时间的通氧，目的是_____ ______。密封后，酵母菌进行发酵产生酒精，该生理过程的化学反应式为 。 (3)用图2所示装置制作葡萄酒时，发酵液不能装满发酵瓶，目的是 （2分）（答出2点）。进行葡萄酒发酵时，对充气口和排气口的控制情况是 。 (4葡萄果酒发酵完成后可以继续进行果醋发酵，与果酒发酵相比，进入果醋发酵后，在温度和气体控制方面需要改变的是 、 。 (5)为及时了解发酵进程，研究人员还需定期对发酵液中酵母菌进行计数。采用稀释涂布平板法计数时，统计的活菌数目往往比实际数目少，原因是 （2分）。若某次检测时采用图甲所示规格的血细胞计数板进行计数，检测时将发酵液稀释100倍，经过一系列操作，检测四角中方格的酵母菌数量分别为22、26、24、28个，则此时发酵液中酵母菌的种群密度约为___________。 27.（10分）人参作为名贵中药材，素有“百草之王”的美誉，其主要活性成分为人参皂苷。药用参主要依赖人工栽培，不仅生长周期漫长，还易受病虫害侵扰。为解决这些问题，科研人员制定的研究方案如下图。 回答下列问题： （1）过程①使外植体（人参或胡萝卜的组织、细胞）转变为愈伤组织状态，该过程称为______。过程②通常使用纤维素酶和果胶酶的混合液去除细胞壁以获得 。 （2）过程③常用一定浓度的PEG诱导融合，但高浓度的PEG会对原生质体产生毒性，且会持续诱导非特异性融合。PEG处理一定时间后，需向体系中加入过量的培养基进行稀释，其目的是 （2分）。除了使用PEG诱导，常用的化学方法还有 。 （3）过程⑤和⑥体现了 。人参皂苷属于人参的_____（填“初生”或“次生”）代谢物。与传统人工栽培提取模式相比，通过筛选和培养高产细胞来生产人参皂苷的优点有 （2分）（答出两点即可）。 （4）除了用以上方法，随着基因组测序和功能基因组学的发展，在全面了解人参皂苷合成的代谢途径和关键酶的基础上，可利用基因工程的方法改造酵母菌等微生物，再利用______工程生产人参皂苷。 28. （9分）回答下列与动、植物细胞工程相关的问题： I.紫杉醇是一种从红豆杉树皮中分离提纯的天然抗癌药物。为快速检测紫杉醇，研究人员利用细胞工程技术制备了抗紫杉醇单克隆抗体，制备过程如图所示。回答下列问题： （1）与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）_______（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；灭活病毒可促进细胞融合，该过程中灭活病毒对细胞膜的作用是使细胞相互凝聚，细胞膜上的______，促使细胞膜打开，细胞发生融合。 （2）在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，该培养基对________和______生长具有抑制作用。 （3）对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行________，经多次筛选，就可获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是 。 Ⅱ.人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程： （4）科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 的愈伤组织。 （5）科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的作用效果： ①首先培养胃癌细胞，将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。 根据实验结果可以得出的结论有 （2分）。 29．（9分）小香猪是我国珍贵的地方猪种，由于肉质鲜美广受消费者喜爱。某课题组开展了小香猪体细胞转入绿色荧光蛋白（GFP）基因并进行克隆的研究，其基本流程如图所示。请分析回答： （1）过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫_________________。动物细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_______________。传代培养时，使用_____________________处理贴壁细胞，得到单个细胞后再接种到新的培养液里培养。 （2）过程③表示通过__________对卵母细胞去核，实际去除的是____________。经过过程④操作后，可采用物理或化学方法，如_________________（答出一种即可）方法激活重构胚，获得转基因重构胚胎。 （3）在转基因重构胚胎移植前开展遗传病筛查时，应选取胚胎的__________细胞进行DNA分析。 （4）在过程⑤中，将克隆的胚胎移植到代孕母猪的输卵管中，胚胎移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，这一操作的目的是___________________________________________________________________（2分）。 30.（11分） 幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，该菌的Ipp20基因能合成特有的蛋白质，据此，研究者利用基因工程制备Hp疫苗。已知Ipp20基因表达时，双链DNA的一条链是编码链，另一条链是模板链如图1，基因的编码区是指基因中能够编码蛋白质的区域。该过程所选择的质粒及操作步骤如图2。回答下列问题： （1）基因工程的核心步骤是 。质粒上的启动子是_______识别和结合的位点。 （2）若通过PCR技术（即 技术）大量扩增Ipp20基因的编码区段，需要设计一对引物，引物的作用是 （2分）。其中结合到编码链上的引物序列是 （方向为5'→3'，写出5'端4个碱基序列）。 （3）在PCR反应体系中一般需要加入Mg2+，目的是 。PCR产物常采用 方法进行鉴定。 （4）已知在构建基因表达载体时使用了限制酶XhoI和XbaI切割质粒和Ipp20基因。科研人员采用了影印法筛选含有目的基因的大肠杆菌（如图2），即用无菌的线毡布压在添加________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基A的菌落上，带出少许菌种，平移并压在添加_________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基B上。根据图示结果分析，符合要求的大肠杆菌菌落是________（填培养基中数字）。 高二生物半期试卷第 1 页 共 7 页 学科网（北京）股份有限公司 $ 成都市交大附中2025------2026学年度下期半期考试 高2024级生物答题卡（模拟练习） 姓 名 班 级 准考证号 ( 贴 条 形 码 区 （正面朝上切勿贴出虚线框外） ) 注 意 事 项 1.答题前先将姓名、班级、准考证号填写清楚。 2.选择题用2B铅笔将对应题目的答案标号涂黑。 3.非选择题使用黑色字迹签字笔书写，笔迹清楚。 4.保持卡面清洁，严禁折叠，严禁做标记。 填 涂 样 例 正确填涂 错误填涂 缺 考 （考生禁填） 第Ⅰ卷 选择题（共50分） （用2B铅笔填涂） 1、 单项选择题（共25个小题，每小题2分，共50分） 第Ⅱ卷 非选择题（共50分） （须用0.5毫米的黑色字迹中性笔书写） 26. （11分） （1） 。 （2） 。 （3） ______（答出2点）。 ___ ___。 （4） 、 。 （5）① （2分，答出2点）。 ②___ ___。 27. （10分） （1） ； （2） （2分） ； （3） （2分）（答出两点即可）； （4） 。 请在各题规定的黑色矩形区域内答题，超出该区域的答案无效 请在各题规定的黑色矩形区域内答题，超出该区域的答案无效 28. （9分） (1) 。 (2) ， 。 (3) 。（2分） (4) 。 (5) （2分）。 29. （9分） (1) 。 (2) 。 (3) 。 (4) （2分）。 30.（11分） (1) 。 (2) （2分）， 。 (3) 。 (4) 。 请在各题规定的黑色矩形区域内答题，超出该区域的答案无效 学科网（北京）股份有限公司 $ 成都市交大附中2025------2026学年度下期半期考试 高2024级生物试卷（模拟练习）解析 时间：75分钟 总分：100分 本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。 第Ⅰ卷（选择题 共50分） 一、单项选择题（本题共25题，每小题2分，共50分） 1．传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻，酸甜可口，于是他把“廿一日”加“酉”字，给这种酸水起名为“醋”，下列叙述错误的是（ ） A．墨塔酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的 B．酒发酵初期通气的目的是促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖 C．若统计活酵母菌数量时，可用显微镜直接计数法，统计的结果比实际数目偏低 D．酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多 答案：C 【详解】A、酵母菌无氧呼吸产生酒精，醋酸菌在糖源不足是有氧呼吸将酒精氧化为醋酸。发酵装置密封不严，氧气进入醋酸菌增殖，将酒精转化为醋酸，使酒变酸，A正确； B、酒发酵初期通气，酵母菌进行有氧呼吸，释放大量能量，大量增殖，B正确； C、显微镜直接计数法会将死酵母菌和活酵母菌一同计数，结果偏高，C错误； D、酵母菌的发酵过程中， 酒精积累会抑制器活性同时代谢产生的酸性物质使PH降低，进一步影响酶活性，即使糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，D正确。 2．如图为果酒与果醋发酵的简易装置及兴趣小组设计的改进装置示意图，下列说法错误的是（　　） A．用体积分数为70%的酒精对上述装置进行消毒后，再装入果汁 B．甲装置在酿酒过程中被杂菌污染的机会比其他两装置大 C．丙装置转为果醋发酵更容易，只需通过气阀2通气即可 D．利用装置丙进行酒精发酵，发酵旺盛阶段不能进行醋酸发酵 答案．C 【详解】A、果酒、果醋发酵实验中用70%左右的酒精对实验装置进行消毒后，再装入果汁进行发酵，目的是避免杂菌污染，A正确； B、甲装置无特殊的防杂菌污染结构（如乙装置的导管、丙装置的气阀），瓶口密封或防护能力较弱，杂菌更易进入装置污染发酵液，因此甲装置被杂菌污染的机会更大，B正确； C、丙装置转为果醋发酵时，需通过气阀1通气，且需提高发酵温度，C错误； D、酒精发酵旺盛阶段，酵母菌进行无氧呼吸，装置内为无氧环境，而醋酸菌是好氧菌，无氧条件下无法进行醋酸发酵，因此该阶段不能进行醋酸发酵，D正确。 故选C。 3．下列关于果酒、果醋、泡菜及腐乳制作的叙述，正确的是（　　） A．酵母菌无氧呼吸时产生酒精，因此果酒制作全程都要保持无氧环境 B．果酒制作完成后，通入空气创造有氧环境便可在最适条件下制得果醋 C．制作泡菜时，加入的盐水事先煮沸的目的是除去溶解氧和杂菌 D．制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的主要微生物均属于原核生物 答案．C 【详解】 A.果酒制作初期需提供少量氧气,使酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖以增加菌体数量。A错误。 B.果酒制作完成后，除了通入空气创造有氧环境,还需要接种醋酸菌，并且控制最适温度和PH。B 错误。 C.制作泡菜时加入的盐水是先煮沸，可以通过高温灭菌杀死杂菌，同时除去溶解氧,为乳酸菌创造无氧环境，利于其进行无氧呼吸，产生乳酸。C正确。 D.制作果酒的主要微生物是酵母菌，腐乳是毛霉，都是真核生物。D错误。 4．从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ） A．可使用液体培养基进行富集培养 B．为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌 C．获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次 D．利用图b计算出样品中菌体浓度为5.85×108个/mL，则接种稀释液的稀释倍数为107倍 答案．A 【详解】 A.与使用固体培养基相比，使用液体培养基培养菌种时，菌体可以分布在整个培养基中，可充分利用其中的营养物质，提高培养液中氧气含量，菌体数量增加的更快。A正确。 B.需从采集的样品分离得到目的菌种，不能对样品进行灭菌。B错误。 C.图a所示结果的接种次数为三次，接种环需灭菌4次。C错误。 D.利用稀释涂布平板法计算菌体浓度的方法为：菌落数除以接种液的体积×稀释倍数。用于计数的平板的菌落数应在30~300之间。因此58.5个除以0.1毫升乘以稀释倍数为5.85×108个/mL，接种稀释液的稀释倍数为106倍。D错误。 5．关于统计样品中活菌数目的叙述错误的是（ ） A．样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养 B．在同一稀释度下，应至少对三个菌落数为30到300的平板进行重复计数，然后求平均值 C．统计的菌落数往往比活菌的实际数目多 D．可以用细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察计数，但统计的结果往往大于活菌数 答案．C 【详解】 A.样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在30~300之间，便于计数。A正确。 B.为了保证结果准确，在同一稀释度下，应至少对三个菌落数为30~300的平板进行重复计数，然后求出平均值。B正确。 C.由于两个或多个细菌连在一起时，在培养基上只出现一个菌落，因此统计的菌落数往往总比活菌的实际数目少。C错误 D.可以用细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察计数，但该方法会将死菌和活菌均计数在内，因此统计的结果往往大于活菌数。D正确 （原创）6.生物兴趣小组同学尝试在麦芽汁琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。以下对操作顺序描述合理的是（　　） A. 配制培养基→调PH→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 制备培养基→倒平板→灭菌→调PH→培养→接种分离 C. 配制培养基→调PH→灭菌→接种分离→培养 D. 制备培养基→倒平板→调PH→接种分离→灭菌→培养 7. 土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述正确的是（　B　） A．若要筛选分解尿素［CO（NH2）2］的细菌，尿素可作为该菌的氮源和碳源 B．理论上每毫升菌液中2号试管的活菌数是4号试管的100倍 C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×109个 D．接种用的培养皿可用干热灭菌，可杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 答案．B 【详解】A.筛选分解尿素的细菌时，尿素作为该菌的氮源，不能作为碳源。A错误。 B. 样品稀释示意图分析可知，2号试管的稀释倍数是103，4号试管的稀释倍数是105，所以理论上每毫升菌液当中2号试管的活菌数是4号试管的100倍，B正确。 C. 4号试管中三个平板菌落数的平均值为110，每克土壤的活菌数约为110÷0.1×105=1.1×10 8个。错误。 D. 采用用干热灭菌可以杀死生物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。错误。 8.微生物培养成功的关键是防止杂菌污染。消毒、灭菌是实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A. 测定土壤中尿素分解菌数目时，取回的土壤样品应进行灭菌以去除杂菌 B. 牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后蛋白质变性失活不利于培养微生物 C. 体外培养菌株时，必须向培养基添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 D. 若筛选纤维素分解菌的培养基受到污染，其上生长的杂菌不一定能分解纤维素 答案．D 【详解】 A. 土壤样品不能灭菌，它会杀死包括目标菌在内的所有微生物，导致无法计数。A错误。 B. 牛肉膏蛋白冻培养基灭菌的目的是杀死培养基中的微生物而非破坏营养物质，灭菌过程中蛋白质虽然空间结构被破坏，但仍可作为氮源等营养物质，被微生物分解利用，不影响微生物培养。B错误。 C. 体外培养菌株时，抗生素会抑制或杀死部分微生物如细菌，若目标菌株对抗生素敏感，添加抗生素会导致目标菌株死亡，且严格的无菌操作已经能够有效防控杂菌污染，添加抗生素并非必须操作C错误。 D. 筛选纤维素分解菌的培养基以纤维素为唯一碳源，理论上仅能分解纤维素的微生物可以生长，但若培养基受到污染，部分不能分解纤维素的杂菌可依靠纤维素分解菌的代谢产物增殖，因此其上生长的杂菌不一定能分解纤维素，D正确。 9．发酵技术广泛应用于食品、医药、农业等领域。下列叙述正确的是（ ） A．菌落的大小、颜色、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 B．工业化生产啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵，大部分糖的分解都在后发酵阶段完成 C．发酵获得的单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素等物质 D．醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，当缺少糖源时，其可以直接将乙醇转化为乙酸 答案．C 【详解】A.菌落的大小、颜色可以作为菌种鉴定的依据，但有无荚膜属于细胞微观结构肉眼不可见。A错误。 B.啤酒主发酵阶段酵母菌活跃，大部分糖在此阶段分解，B错误。 C.单细胞蛋白是微生物菌体本身，含有蛋白质，糖类，脂质，维生素等成分，C正确。 D.醋酸菌在缺少糖源时，会先将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸，而不是直接转化为乙酸。D错误。 10．发酵工程在食品、医药和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列叙述正确的有（　　） A. 啤酒装瓶前要进行高压蒸汽灭菌，以延长它的保质期 B. 可将控制合成血红蛋白的基因转入青霉素生产菌，来提高青霉素产量 C. 通过提取、分离和纯化措施获得的酵母菌单细胞蛋白可作食品添加剂 D. 谷氨酸发酵生产时，在碱性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 答案．C 【详解】A.啤酒装瓶前的灭菌，需要采用的是巴氏消毒法，以杀死微生物并保留啤酒风味，而高压蒸汽灭菌法会破坏啤酒中的营养成分和风味物质，无法用于啤酒灭菌。A错误. B.提高青霉素产量需要通过基因工程导入与青霉素合成相关的基因，以增强其合成能力；血红蛋白基因的功能是合成血红蛋白，与青霉素合成无关，导入该基因无法提高青霉素产量。B错误。 C.单细胞蛋白是微生物菌体本身，含有蛋白质，糖类，脂质，维生素等成分，经提取、分离和纯化后，可以作为食品添加剂。C正确。 D.谷氨酸发酵生产中中性和弱碱性条件有利于谷氨酸的积累，在酸性条件下，谷氨酸会转化为谷氨酰胺和氮乙酰谷氨酰胺而非碱性条件，D错误。 11. 如图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或大量生产细胞产物的过程。下列叙述正确的是（    ） A．通过①④过程可将茎尖分生组织培养成脱毒苗 B．②⑤过程为单倍体育种，可明显缩短育种年限 C．①②脱分化过程没有发生基因的选择性表达 D．⑥⑦过程均体现了植物细胞具有全能性 答案．A 【详解】A.植物茎尖分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以将茎尖分生区组织通过①和④过程，培养成脱毒苗，A正确。 B.②⑤过程是用花粉离体培养法获得单倍体植株的过程，再用秋水仙素处理单倍体植株，才是单倍体育种，单倍体育种可以明显缩短育种年限错误。B C.①②脱分化过程形成愈伤组织，实质上发生了基因的选择性表达。C错误。 D.愈伤组织经过⑥过程形成完整植株，体现了植物细胞具有全能性，⑦过程培养愈伤组织细胞，获得细胞产物，未体现植物细胞的全能性。D错误。 （原创）12．植物体细胞杂交技术在种质创新中具有独特优势，如图为利用该技术培育适宜盐碱地种植的杂种植株的过程示意图，其中①~④表示相关步骤。下列叙述正确的是（　　） A．去除细胞壁获得的原生质体甲和乙，需置于高渗溶液中以维持渗透压平衡 B．诱导原生质体融合时，用灭活的仙台病毒处理可获得较高的融合率 C．杂种植株具有双亲的遗传物质，但因基因间的相互作用，未必能表现出双亲的全部优良性状 D．在再分化过程中，培养基中生长素与细胞分裂素的比值较高时，有利于诱导芽的分化 答案：C 【详解】 A项错误：获取原生质体时，为保证其形态完整和活力，应将原生质体置于等渗溶液中。高渗溶液会使原生质体失水皱缩，低渗则会使其吸水涨破。 B项错误：灭活的仙台病毒是动物细胞融合的诱导剂，在植物体细胞杂交中通常使用物理法（如电融合、离心）或化学法（如聚乙二醇PEG） 促进原生质体融合。 C项正确：杂种植株虽然集合了双亲的遗传物质，但由于基因间的相互作用（如基因沉默、互作抑制、性状连锁等），并不一定能够同时、完整地表现出两个亲本的全部优良性状。 D项错误：在组织培养再分化阶段，生长素/细胞分裂素比值高有利于诱导根的分化，比值低才有利于诱导芽的分化。 13．“红豆生南国，春来发几枝”，红豆古时候是爱情的象征，现代发现它的细胞中含有抗癌物质紫杉醇。研究人员利用植物细胞工程进行快速繁殖，利用细胞悬浮培养提取细胞产物，相关流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 外植体最好选择云南红豆杉的顶芽分生组织，是因为该部位细胞分化程度低、分裂能力强 B. 对外植体消毒可选用酒精和次氯酸钠溶液处理，接种操作须在酒精灯火焰旁进行 C. 诱导外植体形成愈伤组织和诱导愈伤组织生芽、生根所用植物激素的种类及比例均不同 D. 利用细胞悬浮培养提取紫杉醇的主要原理是细胞增殖，几乎不受季节与天气等的限制 答案．C 【详解】 C.诱导外植体形成愈伤组织，不需要使用植物激素，C错误。 14．番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞培养技术培养胡萝卜细胞来获取番茄红素。实验流程和培养装置如图。下列说法错误的是（    ） A．过程②使用胰蛋白酶处理愈伤组织，将细胞分散开 B．为获取植物细胞次生代谢物，使用植物细胞培养技术比直接从植物体中提取更有优势 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 答案：A 【详解】A、过程②是将愈伤组织分散成单个细胞，而植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，用纤维素酶或果胶酶处理愈伤组织，可去除细胞壁，将细胞分散开来，A错误； B、植物组织培养技术可实现大规模生产，不受季节、气候等环境因素限制，且能通过优化培养条件提高次生代谢产量，相比之下直接从植物体内提取可能需要大量资源，且产量不稳定，B正确； C、充气口增设无菌过滤器，可防止杂菌污染，加料口加入原料要进行灭菌处理，这样才能保证整个培养过程不受杂菌干扰，维持细胞培养的无菌环境，C正确； D、细胞培养需要适宜的温度条件，增设温度监测和控制设备可以实时监测和调节装置内的温度，维持装置适宜温度，有利于细胞的正常生长和代谢，D正确。 故选A。 15. 下列有关动物细胞培养技术的叙述，错误的是（ ） A．可以用机械的方法或酶处理的方法将组织分散成单个细胞 B．酶处理细胞的时间过长可能会改变细胞膜的通透性 C．恶性肿瘤细胞具有不死性和失去接触抑制的特性 D．原代培养时需要用酶分散细胞，传代培养时不需要用酶处理 答案．D 【详解】A.动物细胞培养中将组织分散成单个细胞的方法，包括机械方法和酶处理方法，A正确。 B.酶处理细胞时，若时间过长，酶可能会分解细胞膜上的蛋白质，导致细胞膜结构受损，进而改变细胞膜的通透性。B正确。 C.恶性肿瘤细胞的主要特性包括能够无限增殖，即不死性，细胞膜上糖蛋白减少导致细胞间黏着性降低，失去接触抑制。C正确。 D.原代培养是指从机体取出后立即进行的细胞培养，需要酶处理分散细胞，传代培养是指将原代培养的细胞分瓶后继续培养，当细胞贴满瓶壁时，同样需要用酶处理，分散成单个细胞再进行传代，因此传代培养时也需要用酶处理。D错误。 16. 动物细胞培养时操作不当会造成细菌污染，某动物细胞培养过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A．图中①和②可以用相同的酶处理，处理的目的也相同 B．对培养液进行灭菌并定期更换培养液均是为了避免细菌污染 C．图中原代培养和传代培养过程中均可能会出现细胞贴壁 D．通常在含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行动物细胞培养 答案．B 【详解】A.在动物细胞培养过程中，①将动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，目的是使组织细胞分散成单个细胞，②将贴壁细胞常用胰蛋白酶处理，目的同样是使贴壁细胞分散成单个细胞，因此两者可以用相同的酶处理处理的目的也相同。 A正确。 B.对培养液进行灭菌并定期更换营养液均是为了防止代谢物的积累对细胞自身造成危害。B错误。 C.在动物细胞培养中，原代培养和传代培养过程里大多数细胞都会贴附在培养瓶的瓶壁上生长，即均可能会出现细胞贴壁现象。C正确。 D.动物细胞培养通常会在含有95%的空气和5%的CO2的混合气体的CO2培养箱中进行，其中空气为细胞呼吸提供氧气，CO2能维持培养液的ph。D正确。 17．科学家利用雌性小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，并使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞培养过程需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的培养箱中 B. 该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题 C. iPS细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相同 D. 题中研究过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合、体外受精、胚胎移植等技术 答案．D 【详解】A.动物细胞培养需在特定气体环境中进行，95%的空气可以满足细胞代谢对氧气的需求，5%的CO2能维持培养液的PH稳定，iPS细胞培养属于动物细胞培养，需置于该混合气体的培养箱中。A正确。 B.该技术可通过体细胞诱导形成卵细胞，为无法自然产生卵细胞的女性提供了获得卵细胞的可能，有望解决此类女性的不育问题。B正确。 C.原始生殖细胞样细胞由iPS细胞分化而来，细胞分化过程中遗传物质不发生改变，故iPS细胞与原始生殖细胞样细胞的遗传信息相同。C正确。 D.题中研究过程包括：体t细胞诱导为iPS细胞（需要动物细胞培养技术），iPS细胞诱导为原始生殖细胞样细胞(需动物细胞培养技术)，体外受精、胚胎移植，而动物细胞融合技术是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，题目中未设计该技术。D错误。 18．蛇毒种类繁多，制备单克隆抗体可以快速检测伤口毒液种类，为毒蛇咬伤的快速诊断提供可靠工具。以小鼠作为实验动物，进行抗蛇毒单克隆抗体的制备，下列说法正确的是（ ） A．将蛇毒注入小鼠体内进行免疫并从小鼠骨髓中获取相应已免疫的B淋巴细胞 B．采用灭活病毒诱导法进行细胞融合时，利用了病毒表面的糖蛋白和酶 C．筛选能在选择培养基上生存的杂交瘤细胞进行培养就能获得大量单抗 D．若控制某种蛇毒产生的基因出现突变，已经制备好的单克隆抗体仍旧有效 答案．B 【详解】A.将蛇毒注入小鼠体内可刺激机体产生特异性免疫反应，从而获得能产生抗蛇毒抗体的B淋巴细胞，但B淋巴细胞主要存在于脾脏中而非骨髓，骨髓是造血干细胞的场所，不能直接获取已免疫的B淋巴细胞.A错误。 B.采用灭活病毒诱导动物细胞融合时，病毒表面的糖蛋白可与细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合，同时病毒携带的酶能催化细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，使细胞膜打开，从而实现细胞融合，该描述符合灭活病毒诱导细胞融合的原理，B正确。 C.选择培养基可筛选出杂交瘤细胞，但筛选出的杂交瘤细胞并非都能产生目标抗体，还需通过克隆化培养和抗体检测筛选出能稳定分泌特定抗体的杂交瘤细胞，才能获得大量单克隆抗体。C错误。 D.单克隆抗体与抗原的结合具有特异性，其结合位点与抗原的特定结构互补，若控制蛇毒产生的基因发生突变，可能导致蛇毒的氨基酸序列或空间结构改变，使单克隆抗体无法与突变后的蛇毒特异性结合，从而失去检测或中和作用。D错误。 19．大熊猫为我国的国宝，科学家正尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列叙述正确的是（ ） A．体细胞核移植技术可体现出动物细胞的全能性 B．体细胞核移植技术的基础技术是动物细胞培养 C．体细胞核移植获得的重构胚可直接完成分裂和发育 D．体细胞核移植技术能对体细胞供体动物100%的复制 答案．B 【详解】A.体细胞核移植技术是将供体细胞核移入去核的卵母细胞中，由细胞核控制发育成新个体，体现的是细胞核的全能性而非动物细胞的全能性，动物细胞的全能性受到限制，只有细胞核具有全能性。A错误。 B.体细胞核移植过程中需要培养供体细胞和卵母细胞，重构胚的培养，也依赖动物细胞培养技术，动物细胞培养是体细胞核移植技术的基础技术。B正确。 C.体细胞核移植获得的重构胚需要移植到代孕母体的子宫内，在适宜的体内环境中才能完成分裂和发育，不能直接完成。C错误。 D.克隆动物的遗传物质主要来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质来自去核的卵母细胞，并且环境因素会影响性状的表现，无法实现100%复制。D错误。 20．我国科学家通过如图流程成功克隆出“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理、研发诊治药物等带来光明前景。下列相关叙述错误的是（ B ） A．“中中”和“华华”的性别是由猕猴甲的遗传物质决定的 B．过程③还可以通过胚胎分割技术来提高胚胎数量与成活率 C．“中中”和“华华”的诞生说明已分化的动物体细胞核具有全能性 D．猕猴乙要用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 答案．B 【详解】A.“中中”和“华华”的性别是由细胞核基因（猕猴甲的遗传物质决定的）。A正确。 B.过程③还可以通过胚胎分割技术来提高胚胎数量，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小。B错误。 C.克隆猴的成功，正是通过将体细胞核植入去核卵母细胞，使其重编程并发育为完整个体，直接证明了动物体细胞核的全能性。C正确。 D.猕猴乙要用外源促性腺激素处理，使其卵巢卵泡发育和超数排卵。D正确。 21. 科学家将两株不同的杂交瘤细胞A和B融合形成双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞AB能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB结构如图所示。下列正确的是（ ） A．用选择培养基即可筛选出双杂交瘤细胞AB B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO2维持培养液的渗透压 C．双杂交瘤细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶分散处理 D．抗体AB与抗体A、B相比，可增强对靶细胞的杀伤效果 答案．D 【详解】A.单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞需要进行两次筛选，第1次利用选择培养基，筛选出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细胞，第2次筛选可用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞本身就是由两个杂交瘤细胞融合而成，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞AB，A错误。 B.培养双杂交瘤细胞时，需提供二氧化碳维持培养液的PH。B错误. C.双杂交瘤细胞AB能够悬浮在培养液中生长繁殖，不需使用胰蛋白酶分散处理。C错误。 22．下图为科研人员培育良种秦川牛的过程示意图，下列叙述正确的是（ ） A. 对供体母牛注射促性腺激素，可使其超数排卵，获得大量卵原细胞 B. 采集的精子需在获能液中培养获能，才能与处于减数第一次分裂中期的卵母细胞受精 C. 胚胎移植前，需对受体母牛进行同期发情处理，以保证其生殖器官的生理状态适宜 D. 为获得遗传性状相同的后代，可对原肠胚时期的胚胎进行均等分割 答案．C 【详解】A.对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵，获得大量卵母细胞而不是卵原细胞。A错误。 B.采集的精子需获能处理，才能与处于减数第2次分裂中期的卵母细胞完成受精，B错误。 C.胚胎移植前对受体母牛同期发情处理，使得供体、受体生殖器官生理状态一致，保证胚胎移植后正常发育。C正确。 D.胚胎分割应选择桑葚胚或囊胚时期的胚胎，原肠胚细胞分化程度高，分割后难以发育成新个体。D错误。 （原创）23．1978年，世界上首例“试管婴儿”路易丝·布朗在英国诞生，开启了人类辅助生殖技术的新纪元。该技术主要包括体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植等步骤。下列关于试管婴儿技术的叙述，正确的是（　　） A．该技术主要适用于因输卵管阻塞或切除而导致不孕的女性患者 B．试管婴儿的发育起点是受精卵，但早期胚胎发育需在体外完成直至分娩 C．早期胚胎在卵裂过程中，随着细胞数目增多，细胞体积增大，物质交换效率随之提高 D．为提高着床成功率，胚胎培养应在原肠胚阶段进行移植，此时已初步形成各组织分化 答案：A 【详解】A项正确：试管婴儿技术将精子和卵细胞在体外结合形成受精卵，并培养成早期胚胎后移植入母体子宫，这一过程绕过了输卵管，因此适用于输卵管阻塞或切除的女性患者。 B项错误：试管婴儿的发育起点确实是受精卵，早期胚胎发育在体外进行，但胚胎移植入母体子宫后，后续发育至分娩仍在母体内完成，并非全程在体外。 C项错误：卵裂过程中，细胞数目不断增加，但胚胎总体积基本不变，单个细胞的体积逐渐减小，细胞的相对表面积增大，有利于提高物质交换效率。选项中"细胞体积增大"表述错误。 D项错误：胚胎移植通常在卵裂期（8~16细胞期）或囊胚期进行，此时尚未发生明显的组织分化。原肠胚阶段已开始形成三胚层，若在体外培养至该阶段再移植，反而会降低着床成功率。 24．以精子作为外源基因载体同时携带外源基因进入卵细胞的方法为精子载体法，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（ ） A．过程①需要将成熟的精子放入人工配置的获能液进行获能处理 B．过程②体外受精技术可以通过基因重组来获得双亲的遗传物质 C．过程③的早期胚胎需发育到囊胚或原肠胚阶段再进行胚胎移植 D．过程④在进行胚胎移植之前需同时对供体和受体进行免疫检查 答案．A 【详解】A.哺乳动物的精子必须在雌性生殖道内完成或能才能具备受精能力，在体外操作中需将成熟精子放入人工配制的获能液中进行获能处理，才能与卵细胞完成体外受精。A正确。 B.体外受精的本质是精子和卵细胞的结合，其遗传物质的来源是减数分裂产生的配子结合，属于基因重组，但体外受精技术本身只是实现了精卵结合，并不直接发生基因重组。B错误。 C.鼠等啮齿动物的胚胎移植通常选择桑葚胚或囊胚阶段，原肠胚阶段已经发生了细胞分化和胚层形成，不适合进行胚胎移植。C错误。 D.受体子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植的生理学基础之一，因此胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查错误。D （原创）25. 某科研小组从盐生植物中克隆获得耐盐相关基因NHX1，需在体外进行PCR扩增，并通过琼脂糖凝胶电泳对扩增产物进行鉴定。下列有关操作及原理的叙述，正确的是（　　） A．PCR反应体系中必须加入耐高温的DNA聚合酶、解旋酶、四种脱氧核苷酸、引物及含目的基因的模板 B．电泳结束后，将凝胶浸泡在溴化乙锭（EB）溶液中染色，在紫外灯下可观察到DNA条带的位置 C．DNA分子在碱性缓冲液中带负电荷，电泳时在电场作用下由正极向负极迁移 D．PCR的每次循环包括高温变性、中温延伸、低温复性三个步骤，其原理是DNA的全保留复制 答案：B 【详解】A项错误：PCR反应体系中需要加入耐高温的DNA聚合酶（如Taq酶）、四种脱氧核苷酸、引物和模板。PCR通过高温变性解开DNA双链，不需要额外加入解旋酶。 B项正确：琼脂糖凝胶电泳后，常用荧光染料如溴化乙锭（EB）或新型核酸染料对凝胶进行染色，DNA与染料结合后在紫外灯照射下发出荧光，从而显示DNA条带的位置。 C项错误：DNA分子在电泳缓冲液（通常为中性或微碱性）中因磷酸基团解离而带负电荷，在电场作用下由负极向正极迁移。选项中"由正极向负极迁移"方向表述错误。 D项错误：PCR的每次循环包括高温变性、低温复性（退火）、中温延伸三个步骤，顺序不可颠倒。其原理是DNA的半保留复制，而非全保留复制。 第Ⅱ卷 非选择题 （共50分） （原创）26.（原创）（11分）某研学小组以“传统果酒发酵工艺探究”为主题开展项目式学习，他们模拟工业化生产流程，利用新鲜葡萄制作果酒。主要步骤为：葡萄挑选、清洗、榨汁→酶解→接种酵母菌→发酵→终止发酵（澄清、过滤、分装）。回答下列问题： （1）过程②酶解时，常向葡萄汁中添加______酶和______酶，以分解细胞壁和胞间层，从而提高果汁出汁率和澄清度。 （2）过程④发酵初期，发酵罐通常需要通入适量无菌空气，其目的是______。密封后，酵母菌在无氧条件下将葡萄糖转化为酒精，该过程的化学反应式为______。 （3）研学小组用图1所示的简易发酵装置制作葡萄酒，装瓶时发酵液不能装满，需留出约1/3的空间，其原因是______（答出2点）。发酵过程中，对装置上充气口和排气口的正确操作是______。 （4）果酒发酵结束后，若要在同一装置中继续酿制果醋，与果酒发酵相比，需要在温度和气体控制方面做出的改变是______、______。 （5）为监测发酵过程中酵母菌的种群数量变化，研学小组定期取样进行计数。 ①采用稀释涂布平板法计数时，统计的菌落数往往比样品中实际活菌数偏少，原因是______（2分，答出2点）。 ②某次计数采用血细胞计数板（规格如图2所示，每个计数室共400个小方格，容积为0.1 mm³），将发酵液稀释100倍后，在显微镜下观察并计数四角中方格的酵母菌数量分别为22、26、24、28个，则此时发酵液中酵母菌的种群密度约为______个/mL。 答案：参考答案 （1）纤维素　果胶（两空顺序可互换） （2）让酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖 C₆H₁₂O₆酶(此处为箭头)2C₂H₅OH＋2CO₂＋少量能量 （3）原因：①为酵母菌有氧呼吸提供氧气，使其快速增殖；②防止发酵过程中产生的CO₂导致瓶内压强过大（或防止发酵液溢出） 充气口和排气口的操作：发酵前充气口打开通入无菌空气，密封后关闭充气口；排气口保持开放（或在排气管中保留适量水形成水封） （4）温度由18~25℃调整为30~35℃；气体控制由无氧（密封）调整为持续通入无菌空气（或氧气） （5）①当两个或多个细胞连在一起时，平板上只形成一个菌落；某些菌落微小或生长缓慢，可能未被观察到（答出其中两点且合理即可） ②1×10⁷ 第（5）题计算解析： 四角中方格酵母菌数平均值 = (22+26+24+28)÷4 = 25个 每个中方格的体积计算： 血细胞计数板规格通常为25中方格×16小方格（或16中方格×25小方格），此处按图甲信息推测为25中方格型。 每个中方格体积 = 0.1 mm³ ÷ 25 = 0.004 mm³ = 4×10⁻⁶ mL 25个酵母菌对应4×10⁻⁶ mL，则 未稀释的原液密度 = 25 ÷ (4×10⁻⁶) = 6.25×10⁶ 个/mL 稀释100倍后原发酵液中密度 = 6.25×10⁶ × 100 = 6.25×10⁸ 个/mL 若题干中中方格数目信息与常规不同的（如中方格为16个小方格），则： 每个中方格体积 = 0.1 mm³÷25×16÷16不变，仍为4×10⁻⁶ mL，结果同上。 综上，答案为 1×10⁷ 对应稀释后的计数密度。 27.（10分）人参作为名贵中药材，素有“百草之王”的美誉，其主要活性成分为人参皂苷。药用参主要依赖人工栽培，不仅生长周期漫长，还易受病虫害侵扰。为解决这些问题，科研人员制定的研究方案如下图。 回答下列问题： （1）过程①使外植体（人参或胡萝卜的组织、细胞）转变为愈伤组织状态，该过程称为______。过程②通常使用纤维素酶和果胶酶的混合液去除细胞壁以获得 。 （2）过程③常用一定浓度的PEG诱导融合，但高浓度的PEG会对原生质体产生毒性，且会持续诱导非特异性融合。PEG处理一定时间后，需向体系中加入过量的培养基进行稀释，其目的是 （2分）。除了使用PEG诱导，常用的化学方法还有 。 （3）过程⑤和⑥体现了 。人参皂苷属于人参的_____（填“初生”或“次生”）代谢物。与传统人工栽培提取模式相比，通过筛选和培养高产细胞来生产人参皂苷的优点有 （2分）（答出两点即可）。 （4）除了用以上方法，随着基因组测序和功能基因组学的发展，在全面了解人参皂苷合成的代谢途径和关键酶的基础上，可利用基因工程的方法改造酵母菌等微生物，再利用______工程生产人参皂苷。 【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 原生质体 （2） ①. 降低PEG浓度，终止融合并减少对原生质体的损伤 ②. 高Ca2+-高pH融合法 （3） ①. 植物细胞的全能性 ②. 次生 ③. 保护野生人参资源、不占用土地、不受季节和天气限制、产量稳定、生产周期短 （4）发酵 【解析】 【分析】1、植物组织培养过程：离体的植物组织经过脱分化形成愈伤组织，经过再分化愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 2、植物体细胞杂交可以克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离，操作过程包括：原生质体制备、原生质体融合、杂种细胞筛选、杂种细胞培养、杂种植株再生以及杂种植株鉴定等步骤。 【小问1详解】 外植体失去原有分化状态，转变为未分化愈伤组织的过程叫作脱分化；植物细胞壁主要由纤维素和果胶组成，需纤维素酶与果胶酶共同作用，才能去除细胞壁获得原生质体。 【小问2详解】 高浓度PEG具有毒性且会持续诱导融合，稀释可快速降低其浓度，从而终止融合反应并减轻对原生质体的损伤；除PEG法外，另一种常用的诱导原生质体融合的化学方法是高Ca2+—高pH融合法。 【小问3详解】 杂种细胞能够发育成完整植株体现了植物细胞的全能性；人参皂苷并非细胞基本生命活动所必需的代谢物，是次生代谢物；植物细胞大规模培养可摆脱天气和季节的限制，同时有效保护野生人参资源，不占用土地，还能实现产量稳定、缩短生产周期。 【小问4详解】 改造后的酵母菌可通过发酵工程实现人参皂苷的规模化、高效生产。 28. （9分）回答下列与动、植物细胞工程相关的问题： I.紫杉醇是一种从红豆杉树皮中分离提纯的天然抗癌药物。为快速检测紫杉醇，研究人员利用细胞工程技术制备了抗紫杉醇单克隆抗体，制备过程如图所示。回答下列问题： （1）与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）_______（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；灭活病毒可促进细胞融合，该过程中灭活病毒对细胞膜的作用是使细胞相互凝聚，细胞膜上的______，促使细胞膜打开，细胞发生融合。 （2）在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，该培养基对________和______生长具有抑制作用。 （3）对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行________，经多次筛选，就可获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是 。 Ⅱ.人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程： （4）科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 的愈伤组织。 （5）科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的作用效果： ①首先培养胃癌细胞，将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。 根据实验结果可以得出的结论有 （2分）。 【答案】（1） ①. 不需要 ②. 蛋白质分子和脂质分子重新排布 （2） ①. 未融合的亲本细胞 ②. 融合的具有同种核的细胞 （3） ①. 克隆化培养和抗体检测 ②. 维持培养液的pH （4）人参/人参种子胚 （5）5-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长，5-FU和Rg3联合给药效果更好 【解析】 【分析】植物的组织培养指的是在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或是叶片等切成小块，培养在特制的培养基上，通过细胞的增殖和分化，使它逐渐发育成完整的植物体。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，通常采用杂交瘤技术来制备。 【小问1详解】 B淋巴细胞在体外不能大量增殖，故已免疫的脾细胞（含浆细胞）不需要通过原代培养扩大细胞数量；灭活病毒可促进细胞融合，该过程中灭活病毒对细胞膜的作用是使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，促使细胞膜打开，细胞发生融合。 【小问2详解】 在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。 【小问3详解】 对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是维持培养液的pH。 【小问4详解】 由图可知，Rg3具有抗癌作用，若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择人参（种子胚）的愈伤组织，其Rg3含量最多。 【小问5详解】 ①首先培养胃癌细胞，将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。根据实验结果，分析图像，可以得出的结论有5-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长，5-FU和Rg3联合给药效果更好。 29．（9分）小香猪是我国珍贵的地方猪种，由于肉质鲜美广受消费者喜爱。某课题组开展了小香猪体细胞转入绿色荧光蛋白（GFP）基因并进行克隆的研究，其基本流程如图所示。请分析回答： （1）过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫_________________。动物细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_______________。传代培养时，使用_____________________处理贴壁细胞，得到单个细胞后再接种到新的培养液里培养。 （2）过程③表示通过__________对卵母细胞去核，实际去除的是____________。经过过程④操作后，可采用物理或化学方法，如_________________（答出一种即可）方法激活重构胚，获得转基因重构胚胎。 （3）在转基因重构胚胎移植前开展遗传病筛查时，应选取胚胎的__________细胞进行DNA分析。 （4）在过程⑤中，将克隆的胚胎移植到代孕母猪的输卵管中，胚胎移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，这一操作的目的是___________________________________________________________________（2分）。 答案：（1）接触抑制（1分） 血清（1分） 胰蛋白酶或胶原蛋白酶（1分）（答到1点，即可给分） （2）显微操作（1分） 纺锤体-染色体复合物（1分） 电刺激、乙醇、钙离子载体等（1分，答对一点即可得分） （3）滋养层（1分） （4）使代孕母猪生殖器官处于接受胚胎的生理状态（1分） 30.（11分） 幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，该菌的Ipp20基因能合成特有的蛋白质，据此，研究者利用基因工程制备Hp疫苗。已知Ipp20基因表达时，双链DNA的一条链是编码链，另一条链是模板链如图1，基因的编码区是指基因中能够编码蛋白质的区域。该过程所选择的质粒及操作步骤如图2。回答下列问题： （1）基因工程的核心步骤是 。质粒上的启动子是_______识别和结合的位点。 （2）若通过PCR技术（即 技术）大量扩增Ipp20基因的编码区段，需要设计一对引物，引物的作用是 （2分）。其中结合到编码链上的引物序列是 （方向为5'→3'，写出5'端4个碱基序列）。 （3）在PCR反应体系中一般需要加入Mg2+，目的是 。PCR产物常采用 方法进行鉴定。 （4）已知在构建基因表达载体时使用了限制酶XhoI和XbaI切割质粒和Ipp20基因。科研人员采用了影印法筛选含有目的基因的大肠杆菌（如图2），即用无菌的线毡布压在添加________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基A的菌落上，带出少许菌种，平移并压在添加_________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基B上。根据图示结果分析，符合要求的大肠杆菌菌落是________（填培养基中数字）。 【答案】（1） ①. 基因表达载体构建 ②. RNA聚合酶 （2）聚合酶链式反应 ①. 使DNA聚合酶能够从引物的3' 开始连接脱氧核苷酸 ②. 5'-TCTA3' （3） ①. 激活DNA聚合酶 ②. 琼脂糖凝胶电泳 （4） ①. 潮霉素 ②. 氯霉素 ③. 3、5 【解析】 【分析】基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定。 【小问1详解】 基因表达载体的构建是最关键的环节，它决定了目的基因能否在受体细胞中稳定存在并正确表达。因此基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；启动子是位于基因上游的一段特定DNA序列，RNA聚合酶识别并结合启动子后，启动基因的转录过程，将遗传信息从DNA传递到mRNA。 【小问2详解】 若通过PCR技术大量扩增Ipp20基因的编码区段，需要设计一对引物，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3' 开始连接脱氧核苷酸。设计引物序列的主要依据是Ipp20基因编码区两端的部分核苷酸序列，按照碱基互补配对原则，其中结合到编码链上的引物序列是5'-TCTA3'。 【小问3详解】 在PCR 反应体系中一般需要加入Mg2+，原因是激活DNA聚合酶。PCR产物常采用琼脂糖凝胶电泳方法进行鉴定。 【小问4详解】 在构建基因表达载体时使用了限制酶Xho I和Xba I切割质粒和Ipp20基因，会使质粒中的氯霉素抗性基因破坏，但是质粒中的潮霉素抗性基因没有被破坏。导入重组质粒的大肠杆菌能在含有潮霉素的培养基上生长，但不能在含有氯霉素的培养基上生长。为筛选出含有目的基因大肠杆菌，故培养基A、B中应分别添加潮霉素、氯霉素，根据图示结果分析，符合要求的大肠杆菌菌落是3、5。 高二生物半期试卷第 1 页 共 7 页 学科网（北京）股份有限公司 $ 成都市交大附中2025------2026学年度下期半期考试 高2024级生物试卷（模拟练习）解析 时间：75分钟 总分：100分 本试卷分第Ⅰ卷和第Ⅱ卷两部分。第Ⅰ卷为选择题，第Ⅱ卷为非选择题。 第Ⅰ卷（选择题 共50分） 一、单项选择题（本题共25题，每小题2分，共50分） 1．传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻，酸甜可口，于是他把“廿一日”加“酉”字，给这种酸水起名为“醋”，下列叙述错误的是（ ） A．墨塔酿酒反成醋可能是由于发酵装置密封不严造成的 B．酒发酵初期通气的目的是促进酵母菌进行有氧呼吸，大量增殖 C．若统计活酵母菌数量时，可用显微镜直接计数法，统计的结果比实际数目偏低 D．酿酒时糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，原因可能是pH降低和酒精含量增多 答案：C 【详解】A、酵母菌无氧呼吸产生酒精，醋酸菌在糖源不足是有氧呼吸将酒精氧化为醋酸。发酵装置密封不严，氧气进入醋酸菌增殖，将酒精转化为醋酸，使酒变酸，A正确； B、酒发酵初期通气，酵母菌进行有氧呼吸，释放大量能量，大量增殖，B正确； C、显微镜直接计数法会将死酵母菌和活酵母菌一同计数，结果偏高，C错误； D、酵母菌的发酵过程中， 酒精积累会抑制器活性同时代谢产生的酸性物质使PH降低，进一步影响酶活性，即使糖类未耗尽，酵母菌的发酵也会停止，D正确。 2．如图为果酒与果醋发酵的简易装置及兴趣小组设计的改进装置示意图，下列说法错误的是（　　） A．用体积分数为70%的酒精对上述装置进行消毒后，再装入果汁 B．甲装置在酿酒过程中被杂菌污染的机会比其他两装置大 C．丙装置转为果醋发酵更容易，只需通过气阀2通气即可 D．利用装置丙进行酒精发酵，发酵旺盛阶段不能进行醋酸发酵 答案．C 【详解】A、果酒、果醋发酵实验中用70%左右的酒精对实验装置进行消毒后，再装入果汁进行发酵，目的是避免杂菌污染，A正确； B、甲装置无特殊的防杂菌污染结构（如乙装置的导管、丙装置的气阀），瓶口密封或防护能力较弱，杂菌更易进入装置污染发酵液，因此甲装置被杂菌污染的机会更大，B正确； C、丙装置转为果醋发酵时，需通过气阀1通气，且需提高发酵温度，C错误； D、酒精发酵旺盛阶段，酵母菌进行无氧呼吸，装置内为无氧环境，而醋酸菌是好氧菌，无氧条件下无法进行醋酸发酵，因此该阶段不能进行醋酸发酵，D正确。 故选C。 3．下列关于果酒、果醋、泡菜及腐乳制作的叙述，正确的是（　　） A．酵母菌无氧呼吸时产生酒精，因此果酒制作全程都要保持无氧环境 B．果酒制作完成后，通入空气创造有氧环境便可在最适条件下制得果醋 C．制作泡菜时，加入的盐水事先煮沸的目的是除去溶解氧和杂菌 D．制作果酒、果醋、泡菜、腐乳的主要微生物均属于原核生物 答案．C 【详解】 A.果酒制作初期需提供少量氧气,使酵母菌通过有氧呼吸大量繁殖以增加菌体数量。A错误。 B.果酒制作完成后，除了通入空气创造有氧环境,还需要接种醋酸菌，并且控制最适温度和PH。B 错误。 C.制作泡菜时加入的盐水是先煮沸，可以通过高温灭菌杀死杂菌，同时除去溶解氧,为乳酸菌创造无氧环境，利于其进行无氧呼吸，产生乳酸。C正确。 D.制作果酒的主要微生物是酵母菌，腐乳是毛霉，都是真核生物。D错误。 4．从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为：采集样品→富集培养（使菌体数量增多）→纯种分离→性能测定，如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图。下列相关叙述正确的是（ ） A．可使用液体培养基进行富集培养 B．为获得纯种的目的菌种，需对采集的样品进行灭菌 C．获得图a所示结果的接种过程中，接种环需灼烧灭菌3次 D．利用图b计算出样品中菌体浓度为5.85×108个/mL，则接种稀释液的稀释倍数为107倍 答案．A 【详解】 A.与使用固体培养基相比，使用液体培养基培养菌种时，菌体可以分布在整个培养基中，可充分利用其中的营养物质，提高培养液中氧气含量，菌体数量增加的更快。A正确。 B.需从采集的样品分离得到目的菌种，不能对样品进行灭菌。B错误。 C.图a所示结果的接种次数为三次，接种环需灭菌4次。C错误。 D.利用稀释涂布平板法计算菌体浓度的方法为：菌落数除以接种液的体积×稀释倍数。用于计数的平板的菌落数应在30~300之间。因此58.5个除以0.1毫升乘以稀释倍数为5.85×108个/mL，接种稀释液的稀释倍数为106倍。D错误。 5．关于统计样品中活菌数目的叙述错误的是（ ） A．样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，通常选用一定稀释范围的样品液进行培养 B．在同一稀释度下，应至少对三个菌落数为30到300的平板进行重复计数，然后求平均值 C．统计的菌落数往往比活菌的实际数目多 D．可以用细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察计数，但统计的结果往往大于活菌数 答案．C 【详解】 A.样品的稀释度将直接影响平板上的菌落数目，选用一定稀释范围的样品液进行培养，保证获得菌落数在30~300之间，便于计数。A正确。 B.为了保证结果准确，在同一稀释度下，应至少对三个菌落数为30~300的平板进行重复计数，然后求出平均值。B正确。 C.由于两个或多个细菌连在一起时，在培养基上只出现一个菌落，因此统计的菌落数往往总比活菌的实际数目少。C错误 D.可以用细菌计数板或血细胞计数板在显微镜下观察计数，但该方法会将死菌和活菌均计数在内，因此统计的结果往往大于活菌数。D正确 6.生物兴趣小组同学尝试在麦芽汁琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。下列对操作顺序描述合理的是（　　） A. 配制培养基→灭菌→倒平板→接种分离→培养 B. 配制培养基→倒平板→灭菌→培养→接种分离 C. 制备培养基→灭菌→接种分离→培养 D. 配制培养基→倒平板→接种分离→灭菌→培养 答案．A 【详解】本题的解答需明确微生物纯培养的基本操作流程。 7. 土壤中有丰富的微生物，若要利用其中某种微生物，则需要进行菌种的分离和纯化，过程如图。下列相关叙述正确的是（　B　） A．若要筛选分解尿素［CO（NH2）2］的细菌，尿素可作为该菌的氮源和碳源 B．理论上每毫升菌液中2号试管的活菌数是4号试管的100倍 C．4号试管的结果表明每克土壤中的活菌数约为1.1×109个 D．接种用的培养皿可用干热灭菌，可杀死微生物的营养细胞和部分芽孢 答案．B 【详解】A.筛选分解尿素的细菌时，尿素作为该菌的氮源，不能作为碳源。A错误。 B. 样品稀释示意图分析可知，2号试管的稀释倍数是103，4号试管的稀释倍数是105，所以理论上每毫升菌液当中2号试管的活菌数是4号试管的100倍，B正确。 C. 4号试管中三个平板菌落数的平均值为110，每克土壤的活菌数约为110÷0.1×105=1.1×10 8个。错误。 D. 采用用干热灭菌可以杀死生物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子。错误。 8.微生物培养成功的关键是防止杂菌污染。消毒、灭菌是实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A. 测定土壤中尿素分解菌数目时，取回的土壤样品应进行灭菌以去除杂菌 B. 牛肉膏蛋白胨培养基灭菌后蛋白质变性失活不利于培养微生物 C. 体外培养菌株时，必须向培养基添加一定量的抗生素以防止杂菌污染 D. 若筛选纤维素分解菌的培养基受到污染，其上生长的杂菌不一定能分解纤维素 答案．D 【详解】 A. 土壤样品不能灭菌，它会杀死包括目标菌在内的所有微生物，导致无法计数。A错误。 B. 牛肉膏蛋白冻培养基灭菌的目的是杀死培养基中的微生物而非破坏营养物质，灭菌过程中蛋白质虽然空间结构被破坏，但仍可作为氮源等营养物质，被微生物分解利用，不影响微生物培养。B错误。 C. 体外培养菌株时，抗生素会抑制或杀死部分微生物如细菌，若目标菌株对抗生素敏感，添加抗生素会导致目标菌株死亡，且严格的无菌操作已经能够有效防控杂菌污染，添加抗生素并非必须操作C错误。 D. 筛选纤维素分解菌的培养基以纤维素为唯一碳源，理论上仅能分解纤维素的微生物可以生长，但若培养基受到污染，部分不能分解纤维素的杂菌可依靠纤维素分解菌的代谢产物增殖，因此其上生长的杂菌不一定能分解纤维素，D正确。 9．发酵技术广泛应用于食品、医药、农业等领域。下列叙述正确的是（ ） A．菌落的大小、颜色、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 B．工业化生产啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵，大部分糖的分解都在后发酵阶段完成 C．发酵获得的单细胞蛋白不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素等物质 D．醋酸菌的最适生长温度为30～35℃，当缺少糖源时，其可以直接将乙醇转化为乙酸 答案．C 【详解】A.菌落的大小、颜色可以作为菌种鉴定的依据，但有无荚膜属于细胞微观结构肉眼不可见。A错误。 B.啤酒主发酵阶段酵母菌活跃，大部分糖在此阶段分解，B错误。 C.单细胞蛋白是微生物菌体本身，含有蛋白质，糖类，脂质，维生素等成分，C正确。 D.醋酸菌在缺少糖源时，会先将乙醇转化为乙醛，再将乙醛转化为乙酸，而不是直接转化为乙酸。D错误。 10．发酵工程在食品、医药和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列叙述正确的有（　　） A. 啤酒装瓶前要进行高压蒸汽灭菌，以延长它的保质期 B. 可将控制合成血红蛋白的基因转入青霉素生产菌，来提高青霉素产量 C. 通过提取、分离和纯化措施获得的酵母菌单细胞蛋白可作食品添加剂 D. 谷氨酸发酵生产时，在碱性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 答案．C 【详解】A.啤酒装瓶前的灭菌，需要采用的是巴氏消毒法，以杀死微生物并保留啤酒风味，而高压蒸汽灭菌法会破坏啤酒中的营养成分和风味物质，无法用于啤酒灭菌。A错误. B.提高青霉素产量需要通过基因工程导入与青霉素合成相关的基因，以增强其合成能力；血红蛋白基因的功能是合成血红蛋白，与青霉素合成无关，导入该基因无法提高青霉素产量。B错误。 C.单细胞蛋白是微生物菌体本身，含有蛋白质，糖类，脂质，维生素等成分，经提取、分离和纯化后，可以作为食品添加剂。C正确。 D.谷氨酸发酵生产中中性和弱碱性条件有利于谷氨酸的积累，在酸性条件下，谷氨酸会转化为谷氨酰胺和氮乙酰谷氨酰胺而非碱性条件，D错误。 11. 如图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或大量生产细胞产物的过程。下列叙述正确的是（    ） A．通过①④过程可将茎尖分生组织培养成脱毒苗 B．②⑤过程为单倍体育种，可明显缩短育种年限 C．①②脱分化过程没有发生基因的选择性表达 D．⑥⑦过程均体现了植物细胞具有全能性 答案．A 【详解】A.植物茎尖分生区附近的病毒极少，甚至无病毒，因此可以将茎尖分生区组织通过①和④过程，培养成脱毒苗，A正确。 B.②⑤过程是用花粉离体培养法获得单倍体植株的过程，再用秋水仙素处理单倍体植株，才是单倍体育种，单倍体育种可以明显缩短育种年限错误。B C.①②脱分化过程形成愈伤组织，实质上发生了基因的选择性表达。C错误。 D.愈伤组织经过⑥过程形成完整植株，体现了植物细胞具有全能性，⑦过程培养愈伤组织细胞，获得细胞产物，未体现植物细胞的全能性。D错误。 （原创）12．如图所示为科学家利用植物体细胞杂交技术培育新品种耐盐植株的过程，序号代表过程或结构。以下分析正确的是（ ） A．原生质体甲和原生质体乙的融合可用灭活病毒诱导 B．由愈伤组织得到④需要脱分化、再分化等过程 C．实验获得的杂种植株一定能表现出双亲的优良性状 D．再分化过程使用的培养基中生长素/细胞分裂素的比值低有利于芽的分化 答案．D 【详解】A.灭活病毒诱导融合是动物细胞融合特有的方法，植物原生质体融合不能使用灭活病毒。A错误。 B.愈伤组织是已脱分化的细胞团，由愈伤组织形成目的植株的过程称为再分化，该过程不需要脱分化。B错误。 C.杂种植株的遗传物质来自双亲，但基因的表达受到环境、基因间相互作用等多种因素影响，并非所有双亲的优良性状都能在杂种植株中表现。C错误。 D.在植物组织培养的再分化阶段，培养基中生长素与细胞分裂素的比值会影响分化方向，比值高时有利于根的分化，比值低时有利于芽的分化。D正确。 13．“红豆生南国，春来发几枝”，红豆古时候是爱情的象征，现代发现它的细胞中含有抗癌物质紫杉醇。研究人员利用植物细胞工程进行快速繁殖，利用细胞悬浮培养提取细胞产物，相关流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 外植体最好选择云南红豆杉的顶芽分生组织，是因为该部位细胞分化程度低、分裂能力强 B. 对外植体消毒可选用酒精和次氯酸钠溶液处理，接种操作须在酒精灯火焰旁进行 C. 诱导外植体形成愈伤组织和诱导愈伤组织生芽、生根所用植物激素的种类及比例均不同 D. 利用细胞悬浮培养提取紫杉醇的主要原理是细胞增殖，几乎不受季节与天气等的限制 答案．C 【详解】 C.诱导外植体形成愈伤组织，不需要使用植物激素，C错误。 14．番茄红素在食品业应用广泛。某兴趣小组尝试利用植物细胞培养技术培养胡萝卜细胞来获取番茄红素。实验流程和培养装置如图。下列说法错误的是（    ） A．过程②使用胰蛋白酶处理愈伤组织，将细胞分散开 B．为获取植物细胞次生代谢物，使用植物细胞培养技术比直接从植物体中提取更有优势 C．充气口增设无菌过滤器，加料口加入原料要灭菌处理 D．增设温度监测和控制设备以维持装置适宜温度 答案：A 【详解】A、过程②是将愈伤组织分散成单个细胞，而植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，用纤维素酶或果胶酶处理愈伤组织，可去除细胞壁，将细胞分散开来，A错误； B、植物组织培养技术可实现大规模生产，不受季节、气候等环境因素限制，且能通过优化培养条件提高次生代谢产量，相比之下直接从植物体内提取可能需要大量资源，且产量不稳定，B正确； C、充气口增设无菌过滤器，可防止杂菌污染，加料口加入原料要进行灭菌处理，这样才能保证整个培养过程不受杂菌干扰，维持细胞培养的无菌环境，C正确； D、细胞培养需要适宜的温度条件，增设温度监测和控制设备可以实时监测和调节装置内的温度，维持装置适宜温度，有利于细胞的正常生长和代谢，D正确。 故选A。 15. 下列有关动物细胞培养技术的叙述，错误的是（ ） A．可以用机械的方法或酶处理的方法将组织分散成单个细胞 B．酶处理细胞的时间过长可能会改变细胞膜的通透性 C．恶性肿瘤细胞具有不死性和失去接触抑制的特性 D．原代培养时需要用酶分散细胞，传代培养时不需要用酶处理 答案．D 【详解】A.动物细胞培养中将组织分散成单个细胞的方法，包括机械方法和酶处理方法，A正确。 B.酶处理细胞时，若时间过长，酶可能会分解细胞膜上的蛋白质，导致细胞膜结构受损，进而改变细胞膜的通透性。B正确。 C.恶性肿瘤细胞的主要特性包括能够无限增殖，即不死性，细胞膜上糖蛋白减少导致细胞间黏着性降低，失去接触抑制。C正确。 D.原代培养是指从机体取出后立即进行的细胞培养，需要酶处理分散细胞，传代培养是指将原代培养的细胞分瓶后继续培养，当细胞贴满瓶壁时，同样需要用酶处理，分散成单个细胞再进行传代，因此传代培养时也需要用酶处理。D错误。 16. 动物细胞培养时操作不当会造成细菌污染，某动物细胞培养过程如图所示。下列叙述错误的是（ ） A．图中①和②可以用相同的酶处理，处理的目的也相同 B．对培养液进行灭菌并定期更换培养液均是为了避免细菌污染 C．图中原代培养和传代培养过程中均可能会出现细胞贴壁 D．通常在含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行动物细胞培养 答案．B 【详解】A.在动物细胞培养过程中，①将动物组织用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，目的是使组织细胞分散成单个细胞，②将贴壁细胞常用胰蛋白酶处理，目的同样是使贴壁细胞分散成单个细胞，因此两者可以用相同的酶处理处理的目的也相同。 A正确。 B.对培养液进行灭菌并定期更换营养液均是为了防止代谢物的积累对细胞自身造成危害。B错误。 C.在动物细胞培养中，原代培养和传代培养过程里大多数细胞都会贴附在培养瓶的瓶壁上生长，即均可能会出现细胞贴壁现象。C正确。 D.动物细胞培养通常会在含有95%的空气和5%的CO2的混合气体的CO2培养箱中进行，其中空气为细胞呼吸提供氧气，CO2能维持培养液的ph。D正确。 17．科学家利用雌性小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），随后添加生物活性物质诱导生成原始生殖细胞样细胞，并使其完成减数分裂形成卵细胞，进行体外受精，最后生育健康小鼠。下列说法错误的是（ ） A. iPS细胞培养过程需置于95%空气和5%二氧化碳混合气体的培养箱中 B. 该技术有望解决某些女性不能产生卵细胞的不育问题 C. iPS细胞与原始生殖细胞样细胞遗传信息相同 D. 题中研究过程涉及动物细胞培养、动物细胞融合、体外受精、胚胎移植等技术 答案．D 【详解】A.动物细胞培养需在特定气体环境中进行，95%的空气可以满足细胞代谢对氧气的需求，5%的CO2能维持培养液的PH稳定，iPS细胞培养属于动物细胞培养，需置于该混合气体的培养箱中。A正确。 B.该技术可通过体细胞诱导形成卵细胞，为无法自然产生卵细胞的女性提供了获得卵细胞的可能，有望解决此类女性的不育问题。B正确。 C.原始生殖细胞样细胞由iPS细胞分化而来，细胞分化过程中遗传物质不发生改变，故iPS细胞与原始生殖细胞样细胞的遗传信息相同。C正确。 D.题中研究过程包括：体t细胞诱导为iPS细胞（需要动物细胞培养技术），iPS细胞诱导为原始生殖细胞样细胞(需动物细胞培养技术)，体外受精、胚胎移植，而动物细胞融合技术是指两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程，题目中未设计该技术。D错误。 18．蛇毒种类繁多，制备单克隆抗体可以快速检测伤口毒液种类，为毒蛇咬伤的快速诊断提供可靠工具。以小鼠作为实验动物，进行抗蛇毒单克隆抗体的制备，下列说法正确的是（ ） A．将蛇毒注入小鼠体内进行免疫并从小鼠骨髓中获取相应已免疫的B淋巴细胞 B．采用灭活病毒诱导法进行细胞融合时，利用了病毒表面的糖蛋白和酶 C．筛选能在选择培养基上生存的杂交瘤细胞进行培养就能获得大量单抗 D．若控制某种蛇毒产生的基因出现突变，已经制备好的单克隆抗体仍旧有效 答案．B 【详解】A.将蛇毒注入小鼠体内可刺激机体产生特异性免疫反应，从而获得能产生抗蛇毒抗体的B淋巴细胞，但B淋巴细胞主要存在于脾脏中而非骨髓，骨髓是造血干细胞的场所，不能直接获取已免疫的B淋巴细胞.A错误。 B.采用灭活病毒诱导动物细胞融合时，病毒表面的糖蛋白可与细胞膜上的糖蛋白发生特异性结合，同时病毒携带的酶能催化细胞膜上的蛋白质和脂质分子重新排布，使细胞膜打开，从而实现细胞融合，该描述符合灭活病毒诱导细胞融合的原理，B正确。 C.选择培养基可筛选出杂交瘤细胞，但筛选出的杂交瘤细胞并非都能产生目标抗体，还需通过克隆化培养和抗体检测筛选出能稳定分泌特定抗体的杂交瘤细胞，才能获得大量单克隆抗体。C错误。 D.单克隆抗体与抗原的结合具有特异性，其结合位点与抗原的特定结构互补，若控制蛇毒产生的基因发生突变，可能导致蛇毒的氨基酸序列或空间结构改变，使单克隆抗体无法与突变后的蛇毒特异性结合，从而失去检测或中和作用。D错误。 19．大熊猫为我国的国宝，科学家正尝试采用体细胞核移植技术来克隆大熊猫。下列叙述正确的是（ ） A．体细胞核移植技术可体现出动物细胞的全能性 B．体细胞核移植技术的基础技术是动物细胞培养 C．体细胞核移植获得的重构胚可直接完成分裂和发育 D．体细胞核移植技术能对体细胞供体动物100%的复制 答案．B 【详解】A.体细胞核移植技术是将供体细胞核移入去核的卵母细胞中，由细胞核控制发育成新个体，体现的是细胞核的全能性而非动物细胞的全能性，动物细胞的全能性受到限制，只有细胞核具有全能性。A错误。 B.体细胞核移植过程中需要培养供体细胞和卵母细胞，重构胚的培养，也依赖动物细胞培养技术，动物细胞培养是体细胞核移植技术的基础技术。B正确。 C.体细胞核移植获得的重构胚需要移植到代孕母体的子宫内，在适宜的体内环境中才能完成分裂和发育，不能直接完成。C错误。 D.克隆动物的遗传物质主要来自供体细胞核，但细胞质中的遗传物质来自去核的卵母细胞，并且环境因素会影响性状的表现，无法实现100%复制。D错误。 20．我国科学家通过如图流程成功克隆出“中中”和“华华”两姐妹，突破了现有技术无法体细胞克隆非人灵长类动物的世界难题，为建立人类疾病的动物模型、研究疾病机理、研发诊治药物等带来光明前景。下列相关叙述错误的是（ B ） A．“中中”和“华华”的性别是由猕猴甲的遗传物质决定的 B．过程③还可以通过胚胎分割技术来提高胚胎数量与成活率 C．“中中”和“华华”的诞生说明已分化的动物体细胞核具有全能性 D．猕猴乙要用促性腺激素处理使其卵巢卵泡发育和超数排卵 答案．B 【详解】A.“中中”和“华华”的性别是由细胞核基因（猕猴甲的遗传物质决定的）。A正确。 B.过程③还可以通过胚胎分割技术来提高胚胎数量，分割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小。B错误。 C.克隆猴的成功，正是通过将体细胞核植入去核卵母细胞，使其重编程并发育为完整个体，直接证明了动物体细胞核的全能性。C正确。 D.猕猴乙要用外源促性腺激素处理，使其卵巢卵泡发育和超数排卵。D正确。 21. 科学家将两株不同的杂交瘤细胞A和B融合形成双杂交瘤细胞AB。双杂交瘤细胞AB能够悬浮在培养基中生长繁殖，产生的双特异性抗体AB结构如图所示。下列正确的是（ ） A．用选择培养基即可筛选出双杂交瘤细胞AB B．培养双杂交瘤细胞时，需提供CO2维持培养液的渗透压 C．双杂交瘤细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶分散处理 D．抗体AB与抗体A、B相比，可增强对靶细胞的杀伤效果 答案．D 【详解】A.单克隆抗体制备过程中，杂交瘤细胞需要进行两次筛选，第1次利用选择培养基，筛选出能在特定培养基生长且能无限增殖的杂交瘤细胞，第2次筛选可用抗原-抗体杂交的方法筛选出产生特异性抗体的杂交瘤细胞，双杂交瘤细胞本身就是由两个杂交瘤细胞融合而成，利用选择培养基无法筛选出双杂交瘤细胞AB，A错误。 B.培养双杂交瘤细胞时，需提供二氧化碳维持培养液的PH。B错误. C.双杂交瘤细胞AB能够悬浮在培养液中生长繁殖，不需使用胰蛋白酶分散处理。C错误。 22．下图为科研人员培育良种秦川牛的过程示意图，下列叙述正确的是（ ） A. 对供体母牛注射促性腺激素，可使其超数排卵，获得大量卵原细胞 B. 采集的精子需在获能液中培养获能，才能与处于减数第一次分裂中期的卵母细胞受精 C. 胚胎移植前，需对受体母牛进行同期发情处理，以保证其生殖器官的生理状态适宜 D. 为获得遗传性状相同的后代，可对原肠胚时期的胚胎进行均等分割 答案．C 【详解】A.对供体母牛注射促性腺激素使其超数排卵，获得大量卵母细胞而不是卵原细胞。A错误。 B.采集的精子需获能处理，才能与处于减数第2次分裂中期的卵母细胞完成受精，B错误。 C.胚胎移植前对受体母牛同期发情处理，使得供体、受体生殖器官生理状态一致，保证胚胎移植后正常发育。C正确。 D.胚胎分割应选择桑葚胚或囊胚时期的胚胎，原肠胚细胞分化程度高，分割后难以发育成新个体。D错误。 （原创）23．1978年7月25日，世界上第一例“试管婴儿”在英国诞生。其技术主要流程为：体外受精，早期胚胎培养，胚胎移植。下列叙述错误的是（ ） A．该技术可用于输卵管障碍（阻塞或切除）的患者 B．与自然受孕相同，试管婴儿发育的起点仍然是受精卵 C．通过卵裂形成的细胞其物质交换效率显著提高 D．胚胎培养需等到各组织分化形成时再进行移植 答案．D 【详解】A.试管婴儿技术通过体外受精替代自然受精过程，适用于输卵管功能障碍导致精卵细胞无法结合的患者。A正确。 B.个体发育起点都是受精卵，试管婴儿虽在体外形成受精卵，但是发育起点与自然受孕一致。B正确。 C.卵裂期细胞分裂后体积减小，细胞相对表面积增大，物质交换效率提高，C正确。 D.胚胎移植通常在桑椹胚或囊胚期进行，此时只含未分化的细胞团；若待各组织分化形成，那么超出适宜移植阶段，D错误。 24．以精子作为外源基因载体同时携带外源基因进入卵细胞的方法为精子载体法，下图表示用该方法制备转基因鼠的基本流程。下列叙述正确的是（ ） A．过程①需要将成熟的精子放入人工配置的获能液进行获能处理 B．过程②体外受精技术可以通过基因重组来获得双亲的遗传物质 C．过程③的早期胚胎需发育到囊胚或原肠胚阶段再进行胚胎移植 D．过程④在进行胚胎移植之前需同时对供体和受体进行免疫检查 答案．A 【详解】A.哺乳动物的精子必须在雌性生殖道内完成或能才能具备受精能力，在体外操作中需将成熟精子放入人工配制的获能液中进行获能处理，才能与卵细胞完成体外受精。A正确。 B.体外受精的本质是精子和卵细胞的结合，其遗传物质的来源是减数分裂产生的配子结合，属于基因重组，但体外受精技术本身只是实现了精卵结合，并不直接发生基因重组。B错误。 C.鼠等啮齿动物的胚胎移植通常选择桑葚胚或囊胚阶段，原肠胚阶段已经发生了细胞分化和胚层形成，不适合进行胚胎移植。C错误。 D.受体子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应，这是胚胎移植的生理学基础之一，因此胚胎移植前不需要对供体和受体进行免疫检查错误。D （原创）25. 基因工程常用操作：PCR扩增目的基因、琼脂糖凝胶电泳法鉴定目的基因。对此叙述正确的是（ ） A. PCR体系中需加入DNA聚合酶、解旋酶、脱氧核苷酸、引物、模板 B. 电泳结束后，向凝胶喷洒二苯胺溶液，经沸水浴后显示DNA条带位置 C. DNA本身携带有大量正电荷，在均匀电场作用下其由负极向正极迁移 D. PCR原理是DNA半保留复制，每次循环分为变性、复性（退火）、延伸三步 答案．D 【详解】A. PCR体系中需要加入的物质，包括DNA聚合酶、引物、模板DNA，脱氧核糖核苷酸。 PCR过程中DNA双链的解开通过高温变性实现，无需解旋酶。A错误。 B.电泳结束后，DNA条带的显示需使用溴化乙锭，或者SYBR Green等染色剂，在紫外灯下观察;二苯胺溶液用于溶液中DNA的定性检测（“沸水浴”后变蓝），不能直接用于凝胶中DNA条带的显示。B错误。 C.DNA分子的磷酸基团带负电荷，因此DNA整体携带大量负电荷，在均匀电场中，带负电荷的DNA会向正极迁移，该选项中正电荷表述错误，C错误。 D.PCR的原理是DNA半保留复制，每次循环包括三个阶段，变性、复性、延伸，该选项叙述正确。 第Ⅱ卷 非选择题 （共50分） 26. （原创）（11分）葡萄美酒夜光杯，人们很早就利用发酵工程技术将葡萄制成葡萄果酒，工业化生产大致流程为①葡萄挑选、清洗、榨汁；②酶解；③接种酵母菌；④发酵；⑤终止(澄清、过滤、分装)。回答下列问题。 (1) 过程②酶解时，需向葡萄汁中添加 ，破坏细胞壁以提高果汁出汁率和澄清度。 (2)过程④开始时需要进行一段时间的通氧，目的是_____ ______。密封后，酵母菌进行发酵产生酒精，该生理过程的化学反应式为 。 (3)用图2所示装置制作葡萄酒时，发酵液不能装满发酵瓶，目的是 （2分）（答出2点）。进行葡萄酒发酵时，对充气口和排气口的控制情况是 。 (4葡萄果酒发酵完成后可以继续进行果醋发酵，与果酒发酵相比，进入果醋发酵后，在温度和气体控制方面需要改变的是 、 。 (5)为及时了解发酵进程，研究人员还需定期对发酵液中酵母菌进行计数。采用稀释涂布平板法计数时，统计的活菌数目往往比实际数目少，原因是 （2分）。若某次检测时采用图甲所示规格的血细胞计数板进行计数，检测时将发酵液稀释100倍，经过一系列操作，检测四角中方格的酵母菌数量分别为22、26、24、28个，则此时发酵液中酵母菌的种群密度约为___________。 答案：(1) 纤维素酶和果胶酶 (2)让酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖 C₆H₁₂O₆​2C₂H₅OH+2CO₂+能量 (3) 保证初期酵母菌进行有氧呼吸，为自身繁殖提供大量能量；防止发酵旺盛时产生大量的CO2使菌液溢出 充气口关闭；排气口打开 (4) 适当升高温度 打开充气口 (5) 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 4×108个/mL 【解析】(1) 针对细胞壁的成分选用，纤维素酶和果胶酶 ； (2)让酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖 C₆H₁₂O₆​2C₂H₅OH+2CO₂+能量 （3）果酒制作时，为了让酵母菌有氧呼吸大量繁殖，或防止发酵过程中产生的CO2使发酵液溢出，发酵瓶中不能装满果汁。酵母菌在无氧条件下发酵产生酒精和二氧化碳，因此进行果酒发酵时，对充气口应关闭，排气口应打开。 （4）醋酸菌可利用酒精发酵产生醋酸，因此果酒发酵完成后酿制成果醋过程的反应式为C2H5OH＋O2→CH3COOH＋H2O+能量；果酒发酵时需要无氧环境，酵母菌发酵的最适温度为18-30℃，醋酸菌最适宜的生长温度为30-35℃，比酵母菌酒精发酵时的温度高，且醋酸菌是好氧菌，氧气必须充足才能发酵产生醋酸，因此由果酒转变成果醋的制作时，需要升高温度和打开软管夹和连接充氧泵，通入氧气（保持通氧）。（5）血细胞计数板计数时，检测四角中方格的酵母菌数量分别为22、26、24、28个，则平均每个中方格的酵母菌数为(22+26+24+28)÷4=25个。血细胞计数板的计数室规格为16×25型，则0.1 mm3计数室中酵母菌数量为25×16=400个。已知检测时将发酵液稀释100倍，0.1 mm3=10-4mL，所以此时发酵液中酵母菌的种群密度约为400÷10-4×100=4×108个/mL。 27.（10分）人参作为名贵中药材，素有“百草之王”的美誉，其主要活性成分为人参皂苷。药用参主要依赖人工栽培，不仅生长周期漫长，还易受病虫害侵扰。为解决这些问题，科研人员制定的研究方案如下图。 回答下列问题： （1）过程①使外植体（人参或胡萝卜的组织、细胞）转变为愈伤组织状态，该过程称为______。过程②通常使用纤维素酶和果胶酶的混合液去除细胞壁以获得 。 （2）过程③常用一定浓度的PEG诱导融合，但高浓度的PEG会对原生质体产生毒性，且会持续诱导非特异性融合。PEG处理一定时间后，需向体系中加入过量的培养基进行稀释，其目的是 （2分）。除了使用PEG诱导，常用的化学方法还有 。 （3）过程⑤和⑥体现了 。人参皂苷属于人参的_____（填“初生”或“次生”）代谢物。与传统人工栽培提取模式相比，通过筛选和培养高产细胞来生产人参皂苷的优点有 （2分）（答出两点即可）。 （4）除了用以上方法，随着基因组测序和功能基因组学的发展，在全面了解人参皂苷合成的代谢途径和关键酶的基础上，可利用基因工程的方法改造酵母菌等微生物，再利用______工程生产人参皂苷。 【答案】（1） ①. 脱分化 ②. 原生质体 （2） ①. 降低PEG浓度，终止融合并减少对原生质体的损伤 ②. 高Ca2+-高pH融合法 （3） ①. 植物细胞的全能性 ②. 次生 ③. 保护野生人参资源、不占用土地、不受季节和天气限制、产量稳定、生产周期短 （4）发酵 【解析】 【分析】1、植物组织培养过程：离体的植物组织经过脱分化形成愈伤组织，经过再分化愈伤组织又能重新分化为有结构的组织和器官，最终形成完整的植株。 2、植物体细胞杂交可以克服植物有性杂交不亲和性、打破物种之间的生殖隔离，操作过程包括：原生质体制备、原生质体融合、杂种细胞筛选、杂种细胞培养、杂种植株再生以及杂种植株鉴定等步骤。 【小问1详解】 外植体失去原有分化状态，转变为未分化愈伤组织的过程叫作脱分化；植物细胞壁主要由纤维素和果胶组成，需纤维素酶与果胶酶共同作用，才能去除细胞壁获得原生质体。 【小问2详解】 高浓度PEG具有毒性且会持续诱导融合，稀释可快速降低其浓度，从而终止融合反应并减轻对原生质体的损伤；除PEG法外，另一种常用的诱导原生质体融合的化学方法是高Ca2+—高pH融合法。 【小问3详解】 杂种细胞能够发育成完整植株体现了植物细胞的全能性；人参皂苷并非细胞基本生命活动所必需的代谢物，是次生代谢物；植物细胞大规模培养可摆脱天气和季节的限制，同时有效保护野生人参资源，不占用土地，还能实现产量稳定、缩短生产周期。 【小问4详解】 改造后的酵母菌可通过发酵工程实现人参皂苷的规模化、高效生产。 28. （9分）回答下列与动、植物细胞工程相关的问题： I.紫杉醇是一种从红豆杉树皮中分离提纯的天然抗癌药物。为快速检测紫杉醇，研究人员利用细胞工程技术制备了抗紫杉醇单克隆抗体，制备过程如图所示。回答下列问题： （1）与小鼠骨髓瘤细胞融合前，已免疫的脾细胞（含浆细胞）_______（填“需要”或“不需要”）通过原代培养扩大细胞数量；灭活病毒可促进细胞融合，该过程中灭活病毒对细胞膜的作用是使细胞相互凝聚，细胞膜上的______，促使细胞膜打开，细胞发生融合。 （2）在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，该培养基对________和______生长具有抑制作用。 （3）对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行________，经多次筛选，就可获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是 。 Ⅱ.人参和西洋参是五加科人参属的药用植物，它们含有的人参皂苷具有抗肿瘤等作用。科研人员选用人参和西洋参有性杂交获得的杂种胚细胞以及人参种子胚、西洋参种子胚的愈伤组织进行悬浮细胞培养，建立其单细胞株系并对三者的部分特性进行比较研究，下图1是主要流程： （4）科研人员研究了三种愈伤组织中的人参皂苷Re、Rg3、Rb1和M-Rb1含量，结果见图2，其中Re具有治疗心肌缺血的功能，Rg3具有抗癌作用。若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择 的愈伤组织。 （5）科研人员继续研究了Rg3和常见的化疗药物5-FU对肿瘤的作用效果： ①首先培养胃癌细胞，将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。 根据实验结果可以得出的结论有 （2分）。 【答案】（1） ①. 不需要 ②. 蛋白质分子和脂质分子重新排布 （2） ①. 未融合的亲本细胞 ②. 融合的具有同种核的细胞 （3） ①. 克隆化培养和抗体检测 ②. 维持培养液的pH （4）人参/人参种子胚 （5）5-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长，5-FU和Rg3联合给药效果更好 【解析】 【分析】植物的组织培养指的是在无菌的条件下，将植物的茎尖、茎段或是叶片等切成小块，培养在特制的培养基上，通过细胞的增殖和分化，使它逐渐发育成完整的植物体。单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体，通常采用杂交瘤技术来制备。 【小问1详解】 B淋巴细胞在体外不能大量增殖，故已免疫的脾细胞（含浆细胞）不需要通过原代培养扩大细胞数量；灭活病毒可促进细胞融合，该过程中灭活病毒对细胞膜的作用是使细胞相互凝聚，细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布，促使细胞膜打开，细胞发生融合。 【小问2详解】 在杂交瘤细胞筛选过程中，常使用特定的选择培养基，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。 【小问3详解】 对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。若要在体外培养液中培养筛选的杂交瘤细胞，需要将培养液放置在95%空气和5%CO2的培养箱中培养，CO2的作用是维持培养液的pH。 【小问4详解】 由图可知，Rg3具有抗癌作用，若要获得具有抗癌作用的药物应优先选择人参（种子胚）的愈伤组织，其Rg3含量最多。 【小问5详解】 ①首先培养胃癌细胞，将准备好的胃癌细胞悬浊液皮下接种小鼠裸鼠，每只裸鼠接种0.1mL细胞悬浊液。接种后2周可见背部长出肿块，证明接种成功。 ②将上述40只裸鼠随机分为四组，生理盐水组对照组、5-FU组、Rg3组和5-FU+Rg3组（联合给药组）。各组均采用腹腔注射给药，给药前测定肿瘤的体积，给药后每2日测量1次肿瘤体积。根据实验结果，分析图像，可以得出的结论有5-FU和Rg3均能抑制肿瘤生长，5-FU和Rg3联合给药效果更好。 29．（9分）小香猪是我国珍贵的地方猪种，由于肉质鲜美广受消费者喜爱。某课题组开展了小香猪体细胞转入绿色荧光蛋白（GFP）基因并进行克隆的研究，其基本流程如图所示。请分析回答： （1）过程①在原代培养时，细胞分裂生长到表面相互接触就会停止分裂增殖，这种现象叫_________________。动物细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_______________。传代培养时，使用_____________________处理贴壁细胞，得到单个细胞后再接种到新的培养液里培养。 （2）过程③表示通过__________对卵母细胞去核，实际去除的是____________。经过过程④操作后，可采用物理或化学方法，如_________________（答出一种即可）方法激活重构胚，获得转基因重构胚胎。 （3）在转基因重构胚胎移植前开展遗传病筛查时，应选取胚胎的__________细胞进行DNA分析。 （4）在过程⑤中，将克隆的胚胎移植到代孕母猪的输卵管中，胚胎移植前需对代孕母猪进行同期发情处理，这一操作的目的是___________________________________________________________________（2分）。 答案：（1）接触抑制（1分） 血清（1分） 胰蛋白酶或胶原蛋白酶（1分）（答到1点，即可给分） （2）显微操作（1分） 纺锤体-染色体复合物（1分） 电刺激、乙醇、钙离子载体等（1分，答对一点即可得分） （3）滋养层（1分） （4）使代孕母猪生殖器官处于接受胚胎的生理状态（1分） 30.（11分） 幽门螺杆菌（Hp）是慢性胃炎、淋巴增生性胃淋巴瘤的主要致病菌，该菌的Ipp20基因能合成特有的蛋白质，据此，研究者利用基因工程制备Hp疫苗。已知Ipp20基因表达时，双链DNA的一条链是编码链，另一条链是模板链如图1，基因的编码区是指基因中能够编码蛋白质的区域。该过程所选择的质粒及操作步骤如图2。回答下列问题： （1）基因工程的核心步骤是 。质粒上的启动子是_______识别和结合的位点。 （2）若通过PCR技术（即 技术）大量扩增Ipp20基因的编码区段，需要设计一对引物，引物的作用是 （2分）。其中结合到编码链上的引物序列是 （方向为5'→3'，写出5'端4个碱基序列）。 （3）在PCR反应体系中一般需要加入Mg2+，目的是 。PCR产物常采用 方法进行鉴定。 （4）已知在构建基因表达载体时使用了限制酶XhoI和XbaI切割质粒和Ipp20基因。科研人员采用了影印法筛选含有目的基因的大肠杆菌（如图2），即用无菌的线毡布压在添加________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基A的菌落上，带出少许菌种，平移并压在添加_________（填“潮霉素”或“氯霉素”）培养基B上。根据图示结果分析，符合要求的大肠杆菌菌落是________（填培养基中数字）。 【答案】（1） ①. 基因表达载体构建 ②. RNA聚合酶 （2）聚合酶链式反应 ①. 使DNA聚合酶能够从引物的3' 开始连接脱氧核苷酸 ②. 5'-TCTA3' （3） ①. 激活DNA聚合酶 ②. 琼脂糖凝胶电泳 （4） ①. 潮霉素 ②. 氯霉素 ③. 3、5 【解析】 【分析】基因工程的基本操作步骤包括：目的基因的获取、基因表达载体的构建、将目的基因导入受体细胞和目的基因的检测和鉴定。 【小问1详解】 基因表达载体的构建是最关键的环节，它决定了目的基因能否在受体细胞中稳定存在并正确表达。因此基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建；启动子是位于基因上游的一段特定DNA序列，RNA聚合酶识别并结合启动子后，启动基因的转录过程，将遗传信息从DNA传递到mRNA。 【小问2详解】 若通过PCR技术大量扩增Ipp20基因的编码区段，需要设计一对引物，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3' 开始连接脱氧核苷酸。设计引物序列的主要依据是Ipp20基因编码区两端的部分核苷酸序列，按照碱基互补配对原则，其中结合到编码链上的引物序列是5'-TCTA3'。 【小问3详解】 在PCR 反应体系中一般需要加入Mg2+，原因是激活DNA聚合酶。PCR产物常采用琼脂糖凝胶电泳方法进行鉴定。 【小问4详解】 在构建基因表达载体时使用了限制酶Xho I和Xba I切割质粒和Ipp20基因，会使质粒中的氯霉素抗性基因破坏，但是质粒中的潮霉素抗性基因没有被破坏。导入重组质粒的大肠杆菌能在含有潮霉素的培养基上生长，但不能在含有氯霉素的培养基上生长。为筛选出含有目的基因大肠杆菌，故培养基A、B中应分别添加潮霉素、氯霉素，根据图示结果分析，符合要求的大肠杆菌菌落是3、5。 高二生物半期试卷第 1 页 共 7 页 学科网（北京）股份有限公司 $