精品解析:广东广州市实验外语学校2025-2026学年第二学期期中测试高二年级生物试题
2026-05-14
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2份
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资源信息
| 学段 | 高中 |
| 学科 | 生物学 |
| 教材版本 | 高中生物学人教版选择性必修3 生物技术与工程 |
| 年级 | 高二 |
| 章节 | - |
| 类型 | 试卷 |
| 知识点 | - |
| 使用场景 | 同步教学-期中 |
| 学年 | 2026-2027 |
| 地区(省份) | 广东省 |
| 地区(市) | 广州市 |
| 地区(区县) | 白云区 |
| 文件格式 | ZIP |
| 文件大小 | 6.70 MB |
| 发布时间 | 2026-05-14 |
| 更新时间 | 2026-05-14 |
| 作者 | 学科网试题平台 |
| 品牌系列 | - |
| 审核时间 | 2026-05-14 |
| 下载链接 | https://m.zxxk.com/soft/57854743.html |
| 价格 | 5.00储值(1储值=1元) |
| 来源 | 学科网 |
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内容正文:
广州市实验外语学校2025-2026学年第二学期期中测试
高二年级生物试题
本试卷共8页,21小题,满分100分,考试用时75分钟。
一、单选题(共36分,1-12小题每题2分,13-16小题,每题4分)
1. 我国的酿酒文化历史悠久,许多古老的酿酒工艺得以保留并传承至今。传统发酵技术的主要特征是( )
A. 利用了天然存在的菌种
B. 发酵各个环节不用消毒
C. 接种的菌种往往比较单一
D. 制作的产品是家庭常用品
【答案】A
【解析】
【详解】A、传统发酵技术的核心特点是直接利用原材料中天然存在的微生物,或前次发酵留存的微生物进行发酵,确实利用了天然存在的菌种,A正确;
B、传统发酵过程中需要对部分环节消毒,例如果酒发酵的容器需消毒,避免杂菌污染导致发酵失败,并非所有环节都不用消毒,B错误;
C、传统发酵利用的是天然混合菌种,菌种组成复杂,并非单一菌种,接种单一菌种是现代工业化发酵的特点,C错误;
D、传统发酵的产品类型不属于技术本身的特征,且传统发酵产品不局限于家庭常用品,D错误。
2. 黑曲霉(好氧型真菌)能够以纤维素为原料生产柠檬酸。下列叙述错误的是( )
A. 黑曲霉有以核膜为界限的细胞核
B. 纤维素的基本单位是葡萄糖
C. 高产黑曲霉可来自自然选育或诱变育种
D. 黑曲霉可直接从纤维素中获得碳源
【答案】D
【解析】
【详解】A、黑曲霉属于真菌,是真核生物,具有以核膜为界限的细胞核,A正确;
B、纤维素属于多糖类生物大分子,其基本组成单位是葡萄糖,B正确;
C、高产黑曲霉既可以通过从自然环境中筛选优良菌株的自然选育方式获得,也可以通过诱变处理诱导基因突变,再筛选高产变异株的诱变育种方式获得,C正确;
D、纤维素是大分子有机物,黑曲霉无法直接吸收利用,需要先分泌纤维素酶将纤维素分解为葡萄糖等小分子物质后,才能从中获取碳源,因此黑曲霉不能直接从纤维素中获得碳源,D错误。
3. 纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液,均匀涂布在固体平板培养基上,再放上4片含有链霉素(抗生素的一种)的圆形滤纸,然后在无菌适宜条件下培养12~16h,滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈(简称抑菌圈,见下图)。下列相关叙述正确的是( )
A. 图1中的培养基需冷却至80℃左右时再倒平板
B. 图2培养基置于恒温培养箱中的方法是错误的
C. 图3中Ⅱ形成的抑菌圈较小,可能是病原微生物对该浓度的链霉素较敏感
D. 图3抑菌圈中的菌落可能是在链霉素作用下产生的抗性突变株
【答案】B
【解析】
【详解】A、对培养液进行灭菌后需冷却(至50℃左右)再倒平板,倒平板时应在酒精灯前进行,可以尽可能减少培养基污染,A错误;
B、平板培养时,正确的放置方式是倒置培养,这样可以防止冷凝水滴落到培养基表面造成污染。图 2 中培养基正放,方法是错误的,B正确;
C、抑菌圈越小说明抑菌效果越差,即大肠杆菌对该抗生素敏感性越弱,C错误;
D、图3抑菌圈中的菌落可能是抗链霉素的抗性突变株,抗性突变株是在接触链霉素之前就已经产生,并非在链霉素作用下产生的,D错误。
4. 酯化酶是红曲酒发酵的关键酶之一,筛选高产酯化酶的优质红曲霉菌流程如图。酯化酶可分解培养基中的三丁酸甘油酯从而形成透明圈。下列说法错误的是( )
A. ②过程应注意第一次划线和最后一次划线不能相连
B. 培养基上的一个菌落可能来源于菌液中的一个甚至几个活菌
C. 选择菌落Ⅱ后续进行纯培养即可获得高产酯化酶的红曲霉菌
D. 利用蛋白质工程也可能获得高产酯化酶的优质红曲霉菌
【答案】C
【解析】
【详解】A、②过程利用平板划线法,平板划线时应注意第一次划线和最后一次划线不能相连,因为最后一次划线的菌种来源于上一次划线的末端,若相连则不能达到逐步稀释菌种的目的,A正确;
B、菌落是由一个或几个同种细菌在适宜的固体培养基表面生长繁殖到一定程度形成肉眼可见的子细胞群体,所以培养基上的一个菌落可能来源于菌液中的一个甚至几个活菌,B正确;
C、菌落Ⅱ透明圈大,说明产生的酯化酶活性强,但不能确定就是高产,还需要进行高产测定才能获得高产酯化酶的红曲霉菌,C错误;
D、蛋白质工程可以定向改造蛋白质及对应的基因,所以可通过改造酯化酶相关基因,获得高产酯化酶的优质红曲霉菌,D正确。
5. 为将尾菜(蔬菜废弃物)转化为优质饲料,研究人员常使用乳酸菌、酵母菌等进行混合发酵。下列叙述正确的是( )
A. 发酵前对尾菜进行高温处理,为发酵提供了合适的温度
B. 发酵过程中控制pH稳定,有利于维持酶的空间结构和活性
C. 为获得优质乳酸菌,需用以纤维素为唯一碳源的选择培养基
D. 采用平板划线法计数,可有效监测发酵液中菌种数量的变化
【答案】B
【解析】
【详解】A、发酵前对尾菜进行高温处理的目的是灭菌,杀灭杂菌避免影响发酵,高温会杀死后续接种的乳酸菌、酵母菌等发酵菌种,并非为发酵提供合适温度,A错误;
B、酶的活性受pH影响,过酸或过碱都会破坏酶的空间结构使酶失活,发酵过程中控制pH稳定,有利于维持微生物胞内酶的空间结构和活性,保证发酵正常进行,B正确;
C、乳酸菌无法分解利用纤维素,若使用纤维素为唯一碳源的选择培养基,乳酸菌不能生长繁殖,无法获得优质乳酸菌,该培养基仅用于筛选纤维素分解菌,C错误;
D、平板划线法的作用是分离纯化微生物,无法对微生物进行计数,监测发酵液中菌种数量变化应采用稀释涂布平板法或血细胞计数板计数法,D错误。
6. 惠州客家糯米酒酿造技艺是广东省非物质文化遗产,其制作流程主要包括浸米、蒸饭、摊凉、拌曲、落缸发酵、压榨、炙烤等步骤。下列叙述正确的是( )
A. 蒸饭后摊凉,目的是防止高温导致微生物中的蛋白质肽键断裂
B. 拌曲时,加入的酒曲含有的糖化菌能将淀粉分解为葡萄糖
C. 落缸发酵后期,缸内酒精浓度升高促进了酵母菌的种群数量增加
D. 炙烤时,使酒液保持90℃ 1~2小时,可彻底杀灭其中的微生物
【答案】B
【解析】
【详解】A、高温会使微生物的蛋白质空间结构被破坏而变性失活,但不会断裂肽键,摊凉的目的是防止高温杀死酒曲中的功能微生物,A错误;
B、糯米的主要成分为淀粉,酒曲中的糖化菌可合成淀粉酶,将淀粉分解为葡萄糖,为后续酵母菌发酵提供底物,B正确;
C、酒精对酵母菌有毒害作用,发酵后期酒精浓度升高会抑制酵母菌的繁殖,甚至导致酵母菌死亡,其种群数量会下降,C错误;
D、90℃处理1~2小时仅能杀死大部分微生物,无法杀灭芽孢和孢子,不能实现彻底灭菌,D错误。
7. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验原理及操作步骤。下列叙述错误的是( )
A. DNA溶于酒精,加入冷酒精析出的白色丝状物即为蛋白质杂质
B. DNA在沸水浴条件下遇二苯胺试剂显蓝色,此时DNA的双螺旋结构已解开
C. DNA片段在电泳时的迁移速率与DNA分子量的大小和构象有关
D. 指示剂不会使DNA着色,待指示剂前沿接近凝胶边缘时停止电泳
【答案】A
【解析】
【详解】A、DNA不溶于酒精,蛋白质等杂质可溶于酒精,加入冷酒精后析出的白色丝状物是粗提取的DNA,A错误;
B、用二苯胺试剂鉴定DNA时需沸水浴加热,高温会破坏DNA的双螺旋结构使其解旋,此时DNA遇二苯胺显蓝色,B正确;
C、DNA电泳时,迁移速率受DNA分子的分子量大小、构象、凝胶浓度等因素影响,分子量越小、构象越紧凑的DNA迁移速率越快,C正确;
D、电泳时加入的指示剂仅用于指示核酸的迁移进度,不会使DNA着色,待指示剂前沿接近凝胶边缘时即可停止电泳,后续再用专门的染色剂对DNA进行染色观察,D正确。
8. 某中草药植物富含护肤活性化合物,但人工种植过程中易出现农药残留、重金属污染等问题。植物细胞工程可在稳定的人工环境中实现中草药植物细胞、组织及器官的规模化工业生产,为人工种植进行了有效补充。下列叙述正确的是( )
A. 植物细胞工程获取所需代谢产物通常使用固体培养基
B. 基因工程技术可提高目标植物细胞相应代谢产物产量
C. 目标植物细胞提取的护肤活性化合物为持续表达产物
D. 植物细胞工程提取的活性化合物无污染且对皮肤无害
【答案】B
【解析】
【详解】A、植物细胞工程获取代谢产物常用液体培养基进行悬浮培养,而非固体培养基,A错误;
B、可通过基因工程导入相关基因,提高目标植物细胞代谢产物的产量,B正确;
C、护肤活性化合物通常是次生代谢产物,不一定是持续表达产物,C错误;
D、植物细胞工程产物可减少污染,但可能存在副作用如浓度过高等,不能直接判定对皮肤无害,D错误。
9. 研究发现,过敏性哮喘患者体内IgE浓度显著高于正常范围,下图是生产一种用于治疗该病的单克隆抗体的流程图。下列叙述错误的是( )
A. 构建的表达载体含有抗IgE抗体的基因
B. 转化并培养大肠杆菌可获得大量的表达载体
C. 该生产流程运用了动物细胞融合技术
D. 该单克隆抗体进入患者体内后不会作为抗原被清除
【答案】C
【解析】
【详解】A、图示目的是生产抗IgE单克隆抗体,因此构建的表达载体含有抗IgE抗体的基因,从而可以在CHO细胞株中稳定高效的表达,A正确;
B、通过大肠杆菌的增殖,使得表达载体在大肠杆菌内扩增,从而获得大量的表达载体,B正确;
C、该实验是将质粒导入单克隆CHO细胞株中稳定高效表达抗IgE单克隆抗体,没有涉及动物细胞融合技术,C错误;
D、该单克隆抗体是由人源化抗IgE抗体的cDNA表达产生的,因此进入患者体内后不会作为抗原被清除,D正确。
故选C。
10. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示,下列叙述错误的是( )
A. 卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行
B. 要对牛乙和牛丙注射激素进行同期发情处理
C. 要对牛乙和牛丙进行免疫检查,以防止发生免疫排斥反应
D. 可用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育过程
【答案】C
【解析】
【详解】A、体细胞核移植中,用作受体的卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期,此时卵母细胞细胞质具备支持发育全能性的物质,A正确;
B、胚胎移植前需要对供体(牛乙)和受体(牛丙)注射性激素进行同期发情处理,保证二者生殖器官的生理状态同步,利于胚胎着床,B正确;
C、受体子宫对外来移植的胚胎基本不发生免疫排斥反应,因此不需要进行免疫检查来预防免疫排斥,C错误;
D、得到重构胚后,可使用蛋白酶合成抑制剂等化学方法激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育进程,D正确。
11. 中外科学家团队成功构建了世界首例人猴嵌合胚胎,即同时具有人类细胞和猴细胞来源的胚胎,为解决异种嵌合效率低下等问题提供了新的思路,对器官再生研究具有指导意义。嵌合胚胎培育的部分过程如图所示。下列分析错误的是( )
A. 嵌合胚胎早期发育所依据的原理是细胞分裂和分化
B. 图中获得的胚胎发育成器官移植到个体用于治疗时,不会发生免疫排斥反应
C. 上述技术只能用于治疗性克隆,不能用于生殖性克隆
D. 嵌合胚胎研究为人类器官异体再生提供了潜在模型
【答案】B
【解析】
【详解】A、嵌合胚胎早期发育需通过细胞分裂增加细胞数量,通过细胞分化形成不同组织和器官,其原理是细胞分裂和分化,A正确;
B、胚胎发育成的器官包含人类细胞和猴细胞来源的成分,将其移植到人体时,猴细胞成分可能会被人体免疫系统识别为 “异物”,从而引发免疫排斥反应,B错误;
C、该技术的目的是为器官再生研究提供思路,属于治疗性克隆(利用克隆技术获得用于治疗的组织或器官),而非生殖性克隆(克隆完整个体),C正确;
D、嵌合胚胎研究可探索不同物种细胞的相互作用及器官发育机制,为人类器官异体再生(如培育可供移植的器官)提供了潜在模型,D正确。
故选B。
12. 人神经生长因子(hNGF)是一种对人的神经性疾病具有良好治疗作用的蛋白,国内科研团队利用基因编辑技术并结合细胞克隆制备了在唾液腺中特异高效表达hNGF蛋白的转基因猪,下图表示其生产流程。下列相关叙述正确的是( )
A. 从猪卵巢中采集卵母细胞后需培养到MI期再利用显微操作技术去除细胞核
B. 获得的重构胚需用电刺激、Ca2+载体和聚乙二醇等激活才能完成细胞分裂和发育进程
C. 制备唾液腺生物反应器时,需对滋养层细胞做DNA分析筛选出所需的雌性胚胎
D. hNGF基因需要在唾液腺中高效表达,生成生长因子
【答案】D
【解析】
【详解】A、从猪卵巢中采集卵母细胞后需培养到MⅡ期再利用显微操作技术去除细胞核,A错误;
B、重构胚需用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等激活后才能完成细胞分裂和发育进程,聚乙二醇用于细胞融合,B错误;
C、制备唾液腺生物反应器时,不受性别限制,C错误;
D、hNGF基因需要在唾液腺中高效表达,生成生长因子,D正确。
故选D。
13. “默科特”橘橙和“早金”甜橙是优良的二倍体品种。研究人员按照下图的流程进行体细胞杂交,以培育无核的柑橘品种。
下列叙述错误的是( )
A. 在低渗溶液中进行酶解更有利于保持原生质体活力
B. 图示中的电融合法可用高Ca2+-高pH融合法代替
C. 可依据叶绿体在细胞的分布情况初步挑选出杂种细胞
D. 三倍体杂种植株不能正常减数分裂而表现为果实无核
【答案】A
【解析】
【详解】A、酶解过程必须在等渗溶液(如 0.5~0.6mol/L 的甘露醇溶液)中进行,维持原生质体的形态和活力,避免涨破,A错误;
B、植物原生质体的融合方法有多种:物理法(电融合法、离心法等)和化学法(PEG 融合法、高 Ca²⁺- 高 pH 融合法等),B正确;
C、融合后的杂种细胞,会同时具备两种细胞的特征,可观察到叶绿体的分布,因此可依据叶绿体的分布情况初步筛选出杂种细胞(后续还需进一步鉴定),C正确;
D、三倍体植株在减数分裂时,同源染色体联会紊乱,无法正常形成可育的配子,因此无法正常受精发育出种子,最终表现为果实无核,符合培育目标,D正确。
故选A。
14. 黄酮类物质具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生物活性,传统提取方法效率低下,难以满足市场需求。为解决这一问题,科研人员利用芒果悬浮培养细胞技术提高黄酮类物质的产量。生产的基本流程如下图所示,下列叙述正确的是( )
A. 愈伤组织是由外植体脱分化形成的,细胞排列紧密、形态规则
B. 黄酮类物质是芒果细胞在生长过程中产生的初生代谢产物,对细胞生命活动至关重要
C. 芒果悬浮培养体系中需通过充气口通入无菌空气,以满足细胞有氧呼吸的需求
D. 该生产技术最终培育出完整芒果植株,充分体现了植物细胞的全能性
【答案】C
【解析】
【详解】A、愈伤组织是外植体脱分化形成的,细胞排列疏松、无定形,A错误;
B、黄酮类物质属于次生代谢物,可在细胞内积累或分泌到细胞外,B错误;
C、芒果悬浮培养体系中需通过充气口通入无菌空气,防止杂菌污染,以满足细胞有氧呼吸的需求,C正确;
D、该技术是利用悬浮细胞生产黄酮类物质,并未培育出完整植株,不能体现细胞的全能性,D错误。
15. 研究表明,COX-2基因与肿瘤细胞的迁移有关,科研人员通过构建COX-2基因表达载体(如图),用于进一步研究COX-2基因表达产物对肿瘤细胞迁移的作用机制。图中1链为转录的模板链,BamHⅠ、SacⅠ为限制酶识别序列,LacZ基因表达产物可使显色剂X-gal变蓝。下列说法正确的是( )
A. 通过PCR扩增COX-2基因片段,需要加入引物A和引物D
B. 为构建COX-2表达载体,需在与1链结合的引物的5'端添加BamHⅠ识别序列
C. 在含氨苄青霉素的培养基中能生长的是含重组质粒的菌落
D. 在含X-gal培养基中长出的蓝色菌落含重组质粒
【答案】B
【解析】
【详解】A、已知COX-2基因的1链为转录的模板链,根据PCR扩增引物的设计原则,引物需要与模板链的两端互补。由图可以看出,引物C与1链的3'端互补,引物B与2链的3'端互补,DNA聚合酶是从引物的3''端进行延伸的,所以应该选择引物B和C扩增COX-2基因,A错误;
B、使基因准确插入质粒,需要在引物的5'端添加限制酶的识别序列。DNA聚合酶是从引物的3'端开始延伸DNA链的,在5'端添加序列不影响DNA链的延伸,同时可以利用限制酶对引物和质粒进行切割,以便后续连接。从质粒的结构(有BamHⅠ和SacⅠ的酶切位点)以及实验目的来看,与1链结合的引物的5'端需添加限制酶BamHⅠ,与2链结合的引物的5'端需添加限制酶SacⅠ的识别序列,B正确;
C、在含氨苄青霉素的培养基中能生长的是含重组质粒的菌落,也可能是空载质粒,C错误;
D、根据题意,在含X-gal培养基中长出的白色菌落含重组质粒,D错误。
故选B。
16. 科研人员将ETS1基因中①②之间的片段(图1)切除,从而获得雌雄各一头系统性红斑狼疮(SLE)猪(亲本),并分别使用荧光标记的P1、P2、P3三种探针对两者的个体甲、乙、丙进行基因检测,结果如图2所示,相关基因用E/e表示。下列叙述错误的是( )
A. 亲本雌雄猪的基因型分别为Ee、Ee
B. 图2中Ⅰ、Ⅱ使用的探针分别是P2、P3
C. 只有的乙才是纯合SLE模型猪
D. 中含大条带与小条带的猪占1/2
【答案】B
【解析】
【详解】A、因e基因是E基因敲除部分外显子得到的,故大条带(分子量大)表示E基因,小条带(分子量小)表示e基因。亲本交配后子代出现不同条带组合,说明亲本都是杂合子,基因型均为Ee,A正确;
B、据图1可知,P1与外显子1附近序列结合,P2与外显子6附近序列结合,P3与外显子12附近序列结合,E基因和e基因都含有外显子1和外显子12,所以探针P1、P3与E基因序列结合能形成大条带,与e基因序列结合形成小条带,而e基因因外显子6缺失无法与探针P2结合,图2-Ⅰ中甲只有大条带,丙有大条带和小条带,乙只有小条带,故甲、乙、丙的基因型分别为EE、ee和Ee,因此Ⅰ使用的探针为P1或P3,图2-Ⅱ中甲、丙只有大条带,乙无条带,故Ⅱ使用的探针为P2,B错误;
C、乙的基因型为ee,该个体没有正常的基因,因而为纯合的SLE疾病模型猪,C正确;
D、亲本基因型为Ee,的基因型理论比为EE∶Ee∶ee=1∶2∶1,故中含大条带与小条带的猪占1/2,D正确。
故选B。
二、简答题(共60分)
17. 乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶的分泌量较少,导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖,从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时,需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。为了提高乳糖酶的产量,科研人员从牧民的奶酪(一种近似固体的发酵牛奶制品)中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌,下图为流程示意图。请回答下列问题:
(1)将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是______。从用途上看,培养基甲和乙都属于同一类型的培养基,对成分的要求是______。将菌液接种到培养基乙所采用的方法是______。
(2)X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时,应挑选______菌落。
(3)在牛奶中添加适量乳糖酶,以获得无乳糖牛奶,此过程并不会破坏牛奶中的其他营养成分,原因是______。
【答案】(1) ①. 增加产乳糖酶酵母菌的浓度 ②. 以乳糖为唯一碳源 ③. 稀释涂布平板法
(2)直径最大的蓝色菌落
(3)乳糖酶具有专一性,只能分解乳糖
【解析】
【小问1详解】
培养基甲为选择培养基,将奶酪悬浮液接种其中,可筛选并富集能利用乳糖、产乳糖酶的酵母菌,提高目的菌比例。 甲、乙均为选择培养基,必须以乳糖为唯一碳源,不能利用乳糖的微生物无法生长,从而筛选目标菌株。 培养基乙上菌落均匀分散,符合稀释涂布平板法的接种特征。
【小问2详解】
根据题干信息,产生乳糖酶的酵母菌能将无色的X-gal分解成蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色,因此从含X-gal的培养基中挑选目的菌(能高效生产乳糖酶的酵母菌)时,应挑选直径最大的蓝色菌落。
【小问3详解】
酶具有专一性,乳糖酶只能催化乳糖水解,对牛奶中的其他营养物质没有催化作用,因此不会破坏其他营养成分。
18. 中医治疗疾病多用复方,三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物,二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究者欲利用植物细胞工程技术将复方的配伍(两种或两种以上药物配合使用)提前到个体生长或生产过程,并实现有效成分的工厂化生产,具体操作如图。
(1)图示过程采用的是______技术。该技术过程依据的生物学原理是______。其中过程②可以利用化学诱导剂______、高Ca2+-高pH等诱导融合,融合成功的标志是______。
(2)通常情况下,能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响,科研人员取同种小鼠30只,雌雄各半,随机均分为三组,实验处理如下表。
组别
A组
B组
C组
实验处理
三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物
三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物
每天一次等量灌胃,连续一周,检测各组小鼠的胸腺重量
①在表格中将C组的实验处理补充完整______。
②若实验结果为______,则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。
【答案】(1) ①. 原生质体融合 ②. 细胞膜的流动性 ③. 聚乙二醇##PEG ④. 形成杂种细胞
(2) ①. 等量的蒸馏水 ②. A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组
【解析】
【小问1详解】
图示中首先获取三白草和鱼腥草的原生质体,然后进行原生质体的融合,形成杂种细胞脱分化、分裂形成愈伤组织,最终获得代谢产物,该工程采用的是原生质体融合技术,该技术过程依据的生物学原理是细胞膜具有一定的流动性。过程②可以利用化学诱导剂聚乙二醇、高Ca2+-高pH等诱导融合,融合成功的标志是杂种细胞的形成。
【小问2详解】
①分析题意,实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响,C组为对照组,根据对A、B两组的处理,C组应用等量的蒸馏水。
②C组为对照组,若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组,则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。
19. 急性髓系白血病是由于造血干细胞癌变引发的,图1是癌变的造血干细胞的一种免疫逃逸机制。图2是科研人员利用动物细胞工程研制抗CD47的单克隆抗体(一种IgG)的过程示意图。请回答下列问题:
(1)图1中癌变的造血干细胞过表达CD47实现免疫逃逸的机制是_____。
(2)图2中过程①诱导细胞融合的方法有PEG融合法、______(写出两种方法)。过程②的目的是筛选出_____。过程③利用了_____的原理。
(3)过程④使用无血清体外培养成为当前研究的主要方向,无血清体外培养的优点有_______(答出一点即可)。
(4)科研人员继续研究了抗CD47单克隆抗体对白血病小鼠的治疗效果,实验结果见下图。阿糖胞苷是一种常见的治疗白血病的药物。
①IgG组是指给小鼠注射了一种抗体,这种抗体与抗CD47的单克隆抗体相比,最大的区别是______。
②根据实验结果可以得出的结论有______。
【答案】(1)巨噬细胞表面的信号识别蛋白与CD47结合,抑制了巨噬细胞的吞噬作用
(2) ①. 电融合法、灭活病毒诱导法 ②. 杂交瘤细胞 ③. 抗原与抗体特异性结合
(3)可以避免血清中某些未知成分对细胞的影响,实验结果更可靠;降低成本,便于大规模生产;减少病原体污染的风险等
(4) ①. 无特异性 ②. 抗CD47单克隆抗体与阿糖胞苷联合使用对白血病小鼠的治疗效果更好##抗CD47单克隆抗体单独使用有一定治疗效果,联合阿糖胞苷效果更佳等
【解析】
【小问1详解】
从图1可知,癌变的造血干细胞过表达CD47,其实现免疫逃逸的机制是巨噬细胞表面的信号识别蛋白与CD47结合,抑制了巨噬细胞的吞噬作用,从而逃避免疫攻击。
【小问2详解】
诱导动物细胞融合的方法有PEG融合法、电融合法、灭活病毒诱导法。过程②在HAT培养基中培养,目的是筛选出杂交瘤细胞,因为只有杂交瘤细胞能在该培养基上生长。过程③是克隆化培养和抗体筛选,利用了抗原与抗体特异性结合的原理来筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞。
【小问3详解】
无血清体外培养的优点是可以避免血清中某些未知成分对细胞的影响,实验结果更可靠;降低成本,便于大规模生产;减少病原体污染的风险等。
【小问4详解】
①IgG组注射的抗体为普通IgG,与抗CD47的单克隆抗体相比,最大区别是无特异性,单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点,而普通IgG不具备特异性。
②根据实验结果,抗CD47单克隆抗体与阿糖胞苷联合使用对白血病小鼠的治疗效果更好(或抗CD47单克隆抗体单独使用有一定治疗效果,联合阿糖胞苷效果更佳等)。
20. 端稳“中国饭碗”,守好“大国粮仓”。水稻是我国重要的粮食作物。水稻在生长过程中容易感染病虫害,从而引起作物减产。C蛋白和V蛋白分别对水稻螟蛾科害虫和夜蛾科害虫有较强的杀伤效果。科研人员构建了C-V抗虫融合基因(简称C-V基因)表达载体,通过农杆菌转化法将C-V基因表达载体导入水稻叶肉细胞,使其表达出C-V联合蛋白,从而培育出转基因抗虫水稻新品种,过程如图1所示。回答下列问题:
(1)科研人员进行PCR1和PCR2时,扩增体系中需要分别加入C基因和V基因,其作用均是_______。
(2)据图分析,PCR扩增时需要设计引物,为了使C基因和V基因能够正确相连,设计引物2和引物3时,引物序列除了能与模板DNA结合,还需要遵循的原则是_______,因此PCR1和PCR2需要在_______(填“同一个”或“不同”)PCR反应体系中进行。
(3)用抗C蛋白抗体和抗V蛋白抗体检测转基因抗虫水稻中的蛋白质,结果如图2所示,1~7为被检测的转基因抗虫水稻,WT表示野生型水稻。
①转基因抗虫水稻6体内未检测到C蛋白和V蛋白,其原因可能是_______(答出2点)。
②为评价转基因抗虫水稻的抗虫效果,探究思路是:向非转基因水稻和转基因抗虫水稻_______(填序号)接种等量的_______,观察其抗虫效果。
【答案】(1)提供DNA复制的模板
(2) ①. 引物2和引物3的5'端存在部分碱基序列能互补配对 ②. 不同
(3) ①. 转基因抗虫水稻6中的C-V基因不能转录,转基因抗虫水稻6中的C-V基因转录产生的mRNA不能翻译,转基因抗虫水稻6中未导入C-V基因(或导入的是空载体) ②. 2、5、7 ③. 水稻螟蛾科害虫和夜蛾科害虫
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤:
(1)目的基因的获取:方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成;
(2)基因表达载体的构建:是基因工程的核心步骤,基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等;
(3)将目的基因导入受体细胞:根据受体细胞不同,导入的方法也不一样;
(4)目的基因的检测与鉴定:分子水平上的检测和个体水平上的鉴定。
【小问1详解】
扩增体系中需要加入C基因和V基因,其作用是提供DNA复制的模板。
【小问2详解】
设计引物2和引物3时,引物序列除了能与模板DNA结合,还需要引物2和引物3的5'端存在部分碱基序列能互补配对,由于引物2和引物3部分碱基序列互补,若在同一PCR反应体系中进行PCR1、PCR2,则可能会出现引物互补及降低PCR效率等情况,因此PCR1 和PCR2需要在不同PCR反应体系中进行。
【小问3详解】
①根据图2电泳结果可知,转基因抗虫水稻2、5、7成功导入C-V基因且能表达,而转基因抗虫水稻6体内未检测到C蛋白和V蛋白,可能是因为转基因抗虫水稻6中的C-V基因不能转录或C-V基因转录产生的mRNA不能翻译,还可能是因为转基因抗虫水稻6中未导入C-V基因(或导入的是空载体)。
②若要评价转基因抗虫水稻的抗虫效果,则应该向非转基因水稻和转基因抗虫水稻2、5、7接种等量的水稻螟蛾科害虫和夜蛾科害虫,然后观察其抗虫效果。
21. CAR-T是指通过基因工程技术表达CAR基因的T细胞。CAR-T能更好地识别肿瘤细胞表面特定抗原,在肿瘤治疗中疗效显著。构建CAR-T过程见图。
回答下列问题:
(1)构建含CAR基因的重组质粒,选用的限制酶组合是______。将连接产物导入Ca2+处理后的大肠杆菌,使用添加氨苄青霉素的固体培养基培养。使用固体培养基的原因是______。
(2)将获得的重组质粒导入T细胞并成功表达后,为了研究CAR-T识别肿瘤细胞的特异性及抗肿瘤效果,除了有CAR-T与肿瘤细胞共同培养的实验组,还需设置的对照组有______,肿瘤细胞凋亡率的检测指标有______(至少写出2点)。
(3)研究发现,肿瘤细胞高表达的PD-L1与CAR-T表达的PD-1结合会启动免疫抑制。为了阻断免疫抑制,可采取的策略是减少CAR-T细胞表面PD-1的表达。同时,肿瘤周围组织过于致密会使CAR-T难以接触肿瘤细胞,也会影响疗效。可通过设计减弱原有PD-1启动的抑制通路和降解肿瘤胞外基质的途径解决上述两个问题。已知溶解酶可以降解细胞外基质,多种酶同时作用可提高降解效率;与PD-1连接的生物开关,在该PD-1与PD-L1结合后会被打开,释放P因子激活P启动子。依据上述特性构建新的重组质粒并使其在T细胞中表达。该新的重组质粒部分结构见图,其中①是______,②是终止子,③是溶解酶基因序列,④是______。
【答案】(1) ①. EcoR Ⅰ、Not Ⅰ ②. 便于含有质粒的大肠杆菌形成单菌落
(2) ①. 肿瘤细胞单独培养、不含CAR基因的T细胞(正常T细胞)与肿瘤细胞共同培养 ②. 肿瘤细胞的体积、肿瘤细胞死亡数和存活数等
(3) ①. 抑制PD-1基因表达的基因序列 ②. 多种酶基因序列
【解析】
【小问1详解】
构建含CAR基因的重组质粒,为了避免质粒和目的基因自连、目的基因反向插入,常采用双酶切法,目的基因CAR基因需要插入质粒的启动子和终止子区域,而限制酶Cla Ⅰ和Hind Ⅲ位于启动子和终止子区域之外,且CAR基因片段中间含有BamH Ⅰ识别序列,故应该选用EcoR Ⅰ和Not Ⅰ分别切割CAR基因和质粒。固体培养基通常是在液体培养基中添加一定量的凝固剂制成的,在固体培养基上,人们可以清楚地观察到在培养基表面由单个细胞生长繁殖成的菌落,质粒上含有氨苄青霉素抗性基因,将连接产物导入Ca2+处理后的大肠杆菌,使用添加氨苄青霉素的固体培养基培养的目的是便于含有质粒的大肠杆菌形成单菌落,方便后续筛选出重组质粒。
【小问2详解】
研究目的是探究CAR-T识别肿瘤细胞的特异性及抗肿瘤效果,自变量为是否含有CAR基因的T细胞,而因变量抗肿瘤效果,即肿瘤细胞凋亡率的检测指标为肿瘤细胞的体积、肿瘤细胞死亡数和存活数等,实验组为CAR-T与肿瘤细胞共同培养,对照组为肿瘤细胞单独培养、不含CAR基因的T细胞(正常T细胞)与肿瘤细胞共同培养。
【小问3详解】
根据题干信息可知,与PD-1连接的生物开关,在该PD-1与PD-L1结合后会被打开,释放P因子激活P启动子,且需要减弱原有PD-1启动的抑制通路,可知新的重组质粒中①是抑制PD-1基因表达的基因序列,溶解酶可以降解细胞外基质,多种酶同时作用可提高降解效率,且P启动子是双向启动子,可知②是终止子,③是溶解酶基因序列,④是多种酶基因序列。
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广州市实验外语学校2025-2026学年第二学期期中测试
高二年级生物试题
本试卷共8页,21小题,满分100分,考试用时75分钟。
一、单选题(共36分,1-12小题每题2分,13-16小题,每题4分)
1. 我国的酿酒文化历史悠久,许多古老的酿酒工艺得以保留并传承至今。传统发酵技术的主要特征是( )
A. 利用了天然存在的菌种
B. 发酵各个环节不用消毒
C. 接种的菌种往往比较单一
D. 制作的产品是家庭常用品
2. 黑曲霉(好氧型真菌)能够以纤维素为原料生产柠檬酸。下列叙述错误的是( )
A. 黑曲霉有以核膜为界限的细胞核
B. 纤维素的基本单位是葡萄糖
C. 高产黑曲霉可来自自然选育或诱变育种
D. 黑曲霉可直接从纤维素中获得碳源
3. 纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液,均匀涂布在固体平板培养基上,再放上4片含有链霉素(抗生素的一种)的圆形滤纸,然后在无菌适宜条件下培养12~16h,滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈(简称抑菌圈,见下图)。下列相关叙述正确的是( )
A. 图1中的培养基需冷却至80℃左右时再倒平板
B. 图2培养基置于恒温培养箱中的方法是错误的
C. 图3中Ⅱ形成的抑菌圈较小,可能是病原微生物对该浓度的链霉素较敏感
D. 图3抑菌圈中的菌落可能是在链霉素作用下产生的抗性突变株
4. 酯化酶是红曲酒发酵的关键酶之一,筛选高产酯化酶的优质红曲霉菌流程如图。酯化酶可分解培养基中的三丁酸甘油酯从而形成透明圈。下列说法错误的是( )
A. ②过程应注意第一次划线和最后一次划线不能相连
B. 培养基上的一个菌落可能来源于菌液中的一个甚至几个活菌
C. 选择菌落Ⅱ后续进行纯培养即可获得高产酯化酶的红曲霉菌
D. 利用蛋白质工程也可能获得高产酯化酶的优质红曲霉菌
5. 为将尾菜(蔬菜废弃物)转化为优质饲料,研究人员常使用乳酸菌、酵母菌等进行混合发酵。下列叙述正确的是( )
A. 发酵前对尾菜进行高温处理,为发酵提供了合适的温度
B. 发酵过程中控制pH稳定,有利于维持酶的空间结构和活性
C. 为获得优质乳酸菌,需用以纤维素为唯一碳源的选择培养基
D. 采用平板划线法计数,可有效监测发酵液中菌种数量的变化
6. 惠州客家糯米酒酿造技艺是广东省非物质文化遗产,其制作流程主要包括浸米、蒸饭、摊凉、拌曲、落缸发酵、压榨、炙烤等步骤。下列叙述正确的是( )
A. 蒸饭后摊凉,目的是防止高温导致微生物中的蛋白质肽键断裂
B. 拌曲时,加入的酒曲含有的糖化菌能将淀粉分解为葡萄糖
C. 落缸发酵后期,缸内酒精浓度升高促进了酵母菌的种群数量增加
D. 炙烤时,使酒液保持90℃ 1~2小时,可彻底杀灭其中的微生物
7. 关于“DNA的粗提取与鉴定”和“DNA片段的扩增及电泳鉴定”的实验原理及操作步骤。下列叙述错误的是( )
A. DNA溶于酒精,加入冷酒精析出的白色丝状物即为蛋白质杂质
B. DNA在沸水浴条件下遇二苯胺试剂显蓝色,此时DNA的双螺旋结构已解开
C. DNA片段在电泳时的迁移速率与DNA分子量的大小和构象有关
D. 指示剂不会使DNA着色,待指示剂前沿接近凝胶边缘时停止电泳
8. 某中草药植物富含护肤活性化合物,但人工种植过程中易出现农药残留、重金属污染等问题。植物细胞工程可在稳定的人工环境中实现中草药植物细胞、组织及器官的规模化工业生产,为人工种植进行了有效补充。下列叙述正确的是( )
A. 植物细胞工程获取所需代谢产物通常使用固体培养基
B. 基因工程技术可提高目标植物细胞相应代谢产物产量
C. 目标植物细胞提取的护肤活性化合物为持续表达产物
D. 植物细胞工程提取的活性化合物无污染且对皮肤无害
9. 研究发现,过敏性哮喘患者体内IgE浓度显著高于正常范围,下图是生产一种用于治疗该病的单克隆抗体的流程图。下列叙述错误的是( )
A. 构建的表达载体含有抗IgE抗体的基因
B. 转化并培养大肠杆菌可获得大量的表达载体
C. 该生产流程运用了动物细胞融合技术
D. 该单克隆抗体进入患者体内后不会作为抗原被清除
10. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示,下列叙述错误的是( )
A. 卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行
B. 要对牛乙和牛丙注射激素进行同期发情处理
C. 要对牛乙和牛丙进行免疫检查,以防止发生免疫排斥反应
D. 可用蛋白酶合成抑制剂激活重构胚,使其完成细胞分裂和发育过程
11. 中外科学家团队成功构建了世界首例人猴嵌合胚胎,即同时具有人类细胞和猴细胞来源的胚胎,为解决异种嵌合效率低下等问题提供了新的思路,对器官再生研究具有指导意义。嵌合胚胎培育的部分过程如图所示。下列分析错误的是( )
A. 嵌合胚胎早期发育所依据的原理是细胞分裂和分化
B. 图中获得的胚胎发育成器官移植到个体用于治疗时,不会发生免疫排斥反应
C. 上述技术只能用于治疗性克隆,不能用于生殖性克隆
D. 嵌合胚胎研究为人类器官异体再生提供了潜在模型
12. 人神经生长因子(hNGF)是一种对人的神经性疾病具有良好治疗作用的蛋白,国内科研团队利用基因编辑技术并结合细胞克隆制备了在唾液腺中特异高效表达hNGF蛋白的转基因猪,下图表示其生产流程。下列相关叙述正确的是( )
A. 从猪卵巢中采集卵母细胞后需培养到MI期再利用显微操作技术去除细胞核
B. 获得的重构胚需用电刺激、Ca2+载体和聚乙二醇等激活才能完成细胞分裂和发育进程
C. 制备唾液腺生物反应器时,需对滋养层细胞做DNA分析筛选出所需的雌性胚胎
D. hNGF基因需要在唾液腺中高效表达,生成生长因子
13. “默科特”橘橙和“早金”甜橙是优良的二倍体品种。研究人员按照下图的流程进行体细胞杂交,以培育无核的柑橘品种。
下列叙述错误的是( )
A. 在低渗溶液中进行酶解更有利于保持原生质体活力
B. 图示中的电融合法可用高Ca2+-高pH融合法代替
C. 可依据叶绿体在细胞的分布情况初步挑选出杂种细胞
D. 三倍体杂种植株不能正常减数分裂而表现为果实无核
14. 黄酮类物质具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等生物活性,传统提取方法效率低下,难以满足市场需求。为解决这一问题,科研人员利用芒果悬浮培养细胞技术提高黄酮类物质的产量。生产的基本流程如下图所示,下列叙述正确的是( )
A. 愈伤组织是由外植体脱分化形成的,细胞排列紧密、形态规则
B. 黄酮类物质是芒果细胞在生长过程中产生的初生代谢产物,对细胞生命活动至关重要
C. 芒果悬浮培养体系中需通过充气口通入无菌空气,以满足细胞有氧呼吸的需求
D. 该生产技术最终培育出完整芒果植株,充分体现了植物细胞的全能性
15. 研究表明,COX-2基因与肿瘤细胞的迁移有关,科研人员通过构建COX-2基因表达载体(如图),用于进一步研究COX-2基因表达产物对肿瘤细胞迁移的作用机制。图中1链为转录的模板链,BamHⅠ、SacⅠ为限制酶识别序列,LacZ基因表达产物可使显色剂X-gal变蓝。下列说法正确的是( )
A. 通过PCR扩增COX-2基因片段,需要加入引物A和引物D
B. 为构建COX-2表达载体,需在与1链结合的引物的5'端添加BamHⅠ识别序列
C. 在含氨苄青霉素的培养基中能生长的是含重组质粒的菌落
D. 在含X-gal培养基中长出的蓝色菌落含重组质粒
16. 科研人员将ETS1基因中①②之间的片段(图1)切除,从而获得雌雄各一头系统性红斑狼疮(SLE)猪(亲本),并分别使用荧光标记的P1、P2、P3三种探针对两者的个体甲、乙、丙进行基因检测,结果如图2所示,相关基因用E/e表示。下列叙述错误的是( )
A. 亲本雌雄猪的基因型分别为Ee、Ee
B. 图2中Ⅰ、Ⅱ使用的探针分别是P2、P3
C. 只有的乙才是纯合SLE模型猪
D. 中含大条带与小条带的猪占1/2
二、简答题(共60分)
17. 乳糖酶缺乏症患者体内乳糖酶的分泌量较少,导致患者无法完全消化母乳或牛乳中的乳糖,从而引起非感染性腹泻。工业化生产无乳糖奶粉时,需用乳糖酶将奶中的乳糖除去。为了提高乳糖酶的产量,科研人员从牧民的奶酪(一种近似固体的发酵牛奶制品)中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌,下图为流程示意图。请回答下列问题:
(1)将奶酪悬浮液接种到培养基甲中的目的是______。从用途上看,培养基甲和乙都属于同一类型的培养基,对成分的要求是______。将菌液接种到培养基乙所采用的方法是______。
(2)X-gal是一种无色物质,能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝,使菌落呈蓝色。从含X-gal的培养基中挑选目的菌时,应挑选______菌落。
(3)在牛奶中添加适量乳糖酶,以获得无乳糖牛奶,此过程并不会破坏牛奶中的其他营养成分,原因是______。
18. 中医治疗疾病多用复方,三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物,二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”。研究者欲利用植物细胞工程技术将复方的配伍(两种或两种以上药物配合使用)提前到个体生长或生产过程,并实现有效成分的工厂化生产,具体操作如图。
(1)图示过程采用的是______技术。该技术过程依据的生物学原理是______。其中过程②可以利用化学诱导剂______、高Ca2+-高pH等诱导融合,融合成功的标志是______。
(2)通常情况下,能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响,科研人员取同种小鼠30只,雌雄各半,随机均分为三组,实验处理如下表。
组别
A组
B组
C组
实验处理
三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物
三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物
每天一次等量灌胃,连续一周,检测各组小鼠的胸腺重量
①在表格中将C组的实验处理补充完整______。
②若实验结果为______,则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。
19. 急性髓系白血病是由于造血干细胞癌变引发的,图1是癌变的造血干细胞的一种免疫逃逸机制。图2是科研人员利用动物细胞工程研制抗CD47的单克隆抗体(一种IgG)的过程示意图。请回答下列问题:
(1)图1中癌变的造血干细胞过表达CD47实现免疫逃逸的机制是_____。
(2)图2中过程①诱导细胞融合的方法有PEG融合法、______(写出两种方法)。过程②的目的是筛选出_____。过程③利用了_____的原理。
(3)过程④使用无血清体外培养成为当前研究的主要方向,无血清体外培养的优点有_______(答出一点即可)。
(4)科研人员继续研究了抗CD47单克隆抗体对白血病小鼠的治疗效果,实验结果见下图。阿糖胞苷是一种常见的治疗白血病的药物。
①IgG组是指给小鼠注射了一种抗体,这种抗体与抗CD47的单克隆抗体相比,最大的区别是______。
②根据实验结果可以得出的结论有______。
20. 端稳“中国饭碗”,守好“大国粮仓”。水稻是我国重要的粮食作物。水稻在生长过程中容易感染病虫害,从而引起作物减产。C蛋白和V蛋白分别对水稻螟蛾科害虫和夜蛾科害虫有较强的杀伤效果。科研人员构建了C-V抗虫融合基因(简称C-V基因)表达载体,通过农杆菌转化法将C-V基因表达载体导入水稻叶肉细胞,使其表达出C-V联合蛋白,从而培育出转基因抗虫水稻新品种,过程如图1所示。回答下列问题:
(1)科研人员进行PCR1和PCR2时,扩增体系中需要分别加入C基因和V基因,其作用均是_______。
(2)据图分析,PCR扩增时需要设计引物,为了使C基因和V基因能够正确相连,设计引物2和引物3时,引物序列除了能与模板DNA结合,还需要遵循的原则是_______,因此PCR1和PCR2需要在_______(填“同一个”或“不同”)PCR反应体系中进行。
(3)用抗C蛋白抗体和抗V蛋白抗体检测转基因抗虫水稻中的蛋白质,结果如图2所示,1~7为被检测的转基因抗虫水稻,WT表示野生型水稻。
①转基因抗虫水稻6体内未检测到C蛋白和V蛋白,其原因可能是_______(答出2点)。
②为评价转基因抗虫水稻的抗虫效果,探究思路是:向非转基因水稻和转基因抗虫水稻_______(填序号)接种等量的_______,观察其抗虫效果。
21. CAR-T是指通过基因工程技术表达CAR基因的T细胞。CAR-T能更好地识别肿瘤细胞表面特定抗原,在肿瘤治疗中疗效显著。构建CAR-T过程见图。
回答下列问题:
(1)构建含CAR基因的重组质粒,选用的限制酶组合是______。将连接产物导入Ca2+处理后的大肠杆菌,使用添加氨苄青霉素的固体培养基培养。使用固体培养基的原因是______。
(2)将获得的重组质粒导入T细胞并成功表达后,为了研究CAR-T识别肿瘤细胞的特异性及抗肿瘤效果,除了有CAR-T与肿瘤细胞共同培养的实验组,还需设置的对照组有______,肿瘤细胞凋亡率的检测指标有______(至少写出2点)。
(3)研究发现,肿瘤细胞高表达的PD-L1与CAR-T表达的PD-1结合会启动免疫抑制。为了阻断免疫抑制,可采取的策略是减少CAR-T细胞表面PD-1的表达。同时,肿瘤周围组织过于致密会使CAR-T难以接触肿瘤细胞,也会影响疗效。可通过设计减弱原有PD-1启动的抑制通路和降解肿瘤胞外基质的途径解决上述两个问题。已知溶解酶可以降解细胞外基质,多种酶同时作用可提高降解效率;与PD-1连接的生物开关,在该PD-1与PD-L1结合后会被打开,释放P因子激活P启动子。依据上述特性构建新的重组质粒并使其在T细胞中表达。该新的重组质粒部分结构见图,其中①是______,②是终止子,③是溶解酶基因序列,④是______。
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