精品解析：河北沧州市肃宁县第一中学2025-2026学年高二下学期5月期中生物试题

高二生物试卷 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，错误的是（　　） A. 该操作步骤是接种，方法是平板划线法 B. 除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端 C. 该接种方法适用于细菌的计数 D. 图中细菌密度最小的是5处末端 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法： ①平板划线法：通过接种环在固体培养基表面连续划线操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。经过数次划线后培养，可以分离得到单菌落，这种接种方法称为平板划线法。 ②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 题图分析：图中表示的是利用平板划线法进行大肠杆菌的接种，其中划线过程中需要防止杂菌污染，注意灼烧接种环和在酒精灯火焰旁进行。 【详解】A、结合图示可以看出，该操作步骤是接种，方法是平板划线法，A正确； B、除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端，目的是将聚集的菌种逐渐稀释，从而得到单菌落，B正确； C、平板划线法只能用于微生物的分离、培养，不能用于计数，即图中的接种方法不能用于细菌计数，C错误； D、图中5为最后一次划线，图中细菌密度最小的是5处末端，D正确。 故选C。 2. 下列实验程序有错误的是（ ） A. A植物原生质体+B植物原生质体杂交原生质体 B. 浆细胞+骨髓瘤细胞产生特定抗体的杂交瘤细胞 C. 动物组织制备细胞悬液原代培养传代培养 D. 离体细胞消毒、接种愈伤组织试管苗 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物原生质体融合需使用物理法（如电激）或化学法（如聚乙二醇）诱导，灭活病毒是动物细胞融合的诱导方法，不适用于植物细胞，A错误； B、单克隆抗体制备中，浆细胞与骨髓瘤细胞融合后，需通过两次筛选：第一次用选择培养基筛选杂交瘤细胞，第二次用抗原-抗体杂交筛选能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、动物细胞培养中，需先用胰蛋白酶处理动物组织分散成单个细胞，制成悬液后进行原代培养，再传代培养，C正确； D、植物组织培养需将离体细胞或组织消毒后接种，经脱分化形成愈伤组织，再经再分化形成试管苗，该程序符合植物细胞全能性实现路径，D正确。 故选A。 3. 某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 步骤①所代表的过程是逆转录 B. 步骤③可用处理大肠杆菌 C. 检验Q蛋白是否生成，可用禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体杂交 D. 可以在培养基中直接培养禽流感病毒 【答案】D 【解析】 【详解】A、步骤①是以禽流感病毒的RNA为模板合成DNA，该过程是逆转录，A正确； B、步骤③是将重组质粒转入到受体细胞大肠杆菌中，常使用CaCl2处理，使细胞处于一种能吸收周围环境中DNA分子的生理状态，B正确； C、Q蛋白是禽流感病毒的抗原，禽流感康复鸡的血清中含有针对Q蛋白的抗体，因此可用抗原-抗体杂交检验Q蛋白是否生成，C正确； D、病毒无细胞结构，必须寄生在活细胞内才能完成增殖，不能在普通培养基中直接培养，D错误。 4. 治疗性克隆技术可用于治疗糖尿病，科研人员利用人糖尿病模型鼠进行如图所示实验。下列有关叙述不正确的是（　　） A. 治疗性克隆技术需用到动物细胞培养和核移植 B. 过程①中选用小鼠的皮肤细胞有利于细胞核全能性的恢复 C. 过程④移植前，无需对受体A鼠注射免疫抑制剂 D. 生殖性克隆与治疗性克隆都需要用到动物细胞培养和核移植 【答案】B 【解析】 【详解】A、治疗性克隆过程需要体细胞核移植（过程①），后续的早期胚胎培养、胚胎干细胞培养都属于动物细胞培养技术，A正确； B、核移植中，是去核卵母细胞的细胞质环境，才能够促进供体细胞核全能性的恢复，皮肤细胞是高度分化的体细胞，细胞核全能性本身已经被抑制，B错误； C、得到的胰岛B细胞的细胞核来自A鼠，细胞基因型与A鼠一致，移植后不会发生免疫排斥，因此无需对A鼠注射免疫抑制剂，C正确； D、生殖性克隆和治疗性克隆都依赖体细胞核移植技术，流程中都需要进行动物细胞培养，因此二者都用到核移植和动物细胞培养，D正确。 5. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。相关叙述错误的是（ ） A. 此酿醋方法依据的原理是特定的微生物可将酒精转化为醋酸 B. 加水稀释的目的是避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 C. “衣（指菌膜）生”是由酵母菌在发酵液表面大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶解氧 【答案】C 【解析】 【分析】果醋制作中起到主要作用的微生物是醋酸菌，醋酸菌是—种好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，其代谢类型属于异养需氧型。当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的葡萄糖分解为醋酸; 当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。醋酸菌的最适生长温度为30-35℃。 【详解】A、该方法的原理是醋酸菌在氧气充足、缺少糖源时可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，A正确； B、加水的目的是对"酒"进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌（失水过多），B正确； C、醋酸菌对氧气的含量特别敏感，"衣" 位于变酸的酒表面，是由原酒中的醋酸菌大量繁殖形成的，C错误； D、醋酸菌是一种好氧菌，"挠搅"有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，D正确。 故选C。 6. 为培育抗旱性强、可溶性糖含量高的甘薯KT1，研究者设计如下流程。相关叙述不正确的是（ ） A. 该过程不需要考虑A、B的亲缘关系远近 B. 甘薯KT1培养过程中可能会出现基因突变和基因重组 C. 过程②需要高尔基体参与再生出新的细胞壁 D. 过程③需要控制生长素和细胞分裂素的比例 【答案】B 【解析】 【分析】题图分析：图中①表示去除细胞壁，获得原生质体；②表示诱导原生质体融合形成杂种细胞；③表示采用植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株。 【详解】A、植物体细胞杂交克服了远缘杂交不亲和的障碍，所以该过程不需要考虑甘薯A、B的亲缘关系远近，A正确； B、甘薯KT1培养过程中可能会出现基因突变，不会出现基因重组，B错误； C、杂种细胞形成的标志是形成新的细胞壁，植物细胞壁的形成与高尔基体有关，故过程②需要高尔基体参与再生出新的细胞壁，C正确； D、过程③包括脱分化和再分化过程，需要控制生长素和细胞分裂素的比例，D正确。 故选B。 7. 用荧光标记的特定的DNA片段作为探针，与染色体上对应的DNA片段结合可在染色体上定位特定的基因。探针与染色体上待测基因结合的原理如下图所示，下列叙述错误的是 A. 合成探针的原料是脱氧核苷酸 B. 此处煮沸的作用相当于解旋酶的作用 C. 复性时，探针与基因杂交遵循碱基互补配对原则 D. 对成熟叶肉细胞进行基因标记时，一条染色体上可观察到两个荧光点 【答案】D 【解析】 【分析】基因探针是用放射性同位素、荧光分子等标记的DNA分子作为探针，原理是DNA分子杂交。 DNA分子是一个独特的双螺旋结构，是由两条平行的脱氧核苷酸长链盘旋而成，外侧由脱氧核糖和磷酸交替连接构成基本骨架，内侧是碱基对（A-T；C-G）通过氢键连接。 【详解】A、探针为DNA片段，故合成探针的原料是脱氧核苷酸，A正确； B、煮沸使DNA双链的氢键断裂，形成单链，相当于DNA解旋酶的作用，B正确； C、复性时，探针单链和具有特定的基因的单链按照碱基互补配对原则杂交，C正确； D、由题图可知一条DNA链上能观察到一个荧光点，成熟叶肉细胞中DNA没有复制，也只能观察到一个荧光点，D错误。 故选D。 8. 下列对于生物技术安全与伦理问题认识不合理的是（　　） A. 通过防止转基因作物花粉的传播，减少对野生植物的基因污染 B. 通过禁止销售、食用转基因食品，提高转基因产品的安全性 C. 对植入前的胚胎进行遗传学诊断，有助于父母生育健康婴儿 D. 参观细菌战历史陈列馆，可帮助人们认识生物武器的危害 【答案】B 【解析】 【分析】目前对转基因生物安全性的争论主要是食物安全和环境安全，另外还有生物安全问题，转基因生物的安全性问题。转基因食品、产品上都要标注原料来自转基因生物。当今社会的普遍观点是反对生殖性克隆人实验，但不反对转基因；试管婴儿可以设计婴儿的性别，反对设计试管婴儿的原因之一是有人滥用此技术选择性设计婴儿。 【详解】A、转基因作物可以通过花粉或种子将外源基因扩散到其他植物，从而对生态环境造成潜在的危害，所以通过防止转基因作物花粉的传播，减少对野生植物的基因污染，A正确； B、转基因食品的安全性问题还有待进一步研究，现在还没有禁止销售、食用转基因食品，可以通过标注转基因食品，增加转基因产品的安全性，B错误； C、胚胎植入前遗传学诊断可以排除男女双方或一方患有的多种遗传病，有助于父母生育健康婴儿，C正确； D、可以参观细菌战历史陈列馆或观看相关影像资料，帮助人们认识生物武器的危害，D正确。 故选B。 9. 在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”探究实践中，要规范地进行无菌操作。下列与无菌操作相关的说法，正确的是（　　） A. 为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌 B. 将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释 C. 将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作 D. 待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数 【答案】C 【解析】 【分析】获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术应围绕着如何避免杂菌的污染展开，主要包括消毒和灭菌。 【详解】A、配制好的选择培养基高压蒸汽灭菌，再在无菌环境中分装到培养皿中，A错误； B、将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL无菌水水的试管中依次等比稀释，B错误； C、将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作，防止高温杀死菌种，C正确； D、待长成的菌落稳定后，可直接观察，无需在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数，D错误。 故选C。 10. 植物次生代谢产物是一类具有特殊作用的活性成分，例如丹参中的活性成分丹参酮以及酚酸类成分在心脑血管疾病的治疗方面效果显著。以丹参为材料，可通过植物细胞工程获得丹参酮用于临床应用。下列相关叙述正确的是（ ） A. 次生代谢物是植物基本生命活动所必需的 B. 次生代谢物一般在特定的组织或器官中生成 C. 应对丹参的外植体做消毒处理以获得脱毒组织 D. 该过程利用了植物细胞全能性的原理 【答案】B 【解析】 【分析】1、植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。 2、植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、次生代谢物不是植物基本生命活动所必需的，A错误； B、次生代谢物一般在特定的组织或器官中生成，B正确； C、用植物分生区细胞进行组织培养才能获得脱毒苗，C错误； D、该过程用到的原理是细胞增殖，D错误。 故选B。 11. 某科研小组利用质粒（图甲）和目的基因（图乙）构建重组DNA。下列分析错误的是 A. 用限制酶HindⅢ和PstI切割质粒，可得到2条DNA片段 B. 不能用AluI酶切割质粒和外源DNA的原因是AluI酶会破坏目的基因 C. 构建重组DNA时，需选择SmaI酶和PstⅠ酶同时切割质粒和外源DNA D. 导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长 【答案】C 【解析】 【分析】根据目的基因两端限制酶的识别、切割位点和质粒中限制酶的识别位点可选择合适的限制酶，要求既不破坏目的基因，又不会破坏质粒中的所有抗性基因。据图可知应选择HindI和PstI同时切割质粒和外源DNA。 【详解】A、限制酶HindI和PstI在质粒上各有一个识别切割位点，用HindI和PstI切割质粒，可得到2条DNA片段，A正确； B、AluI的识别、切割位点位于目的基因中，用AluI酶外源DNA会破坏目的基因，B正确； C、选择SmaI和Pst1同时切割质粒和外源DNA，质粒中的两个标记基因均会被破坏，并且会造成目的基因反向连接，C错误； D、选择HindI和PstI同时切割质粒和外源DNA，会破坏质粒中的氯霉素抗性基因，保留四环素抗性基因，所以导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长，D正确。 故选C。 【点睛】选择限制酶的方法 (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。 (2)根据质粒的特点确定限制酶的种类 ①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。 ②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能会丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后将不能自主复制。 12. 细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理 B. 对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数 C. 由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性 D. 野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、为避免杂菌的污染，实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理，A错误； B、对活菌进行计数的方法是稀释涂布平板法，具体方法是：先将菌体进行梯度稀释，再涂布到滤膜的表面，待菌落数稳定时进行计数，不能用显微镜直接计数的原因是显微镜直接计数不能区分死菌和活菌，B错误； C、tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白，乙组中野生型可产生tce1蛋白作用于tcel-tcil双突变体，后者无法产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生菌在竞争中占据优势；而在丙组中，野生型可产生tce1蛋白作用于tcel突变体，后者可以产生tci1蛋白中和tcel蛋白的毒性，使野生型的生长受到抑制，由此推测， tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性，C正确； D、由甲组、乙组可知，野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体的竞争中均占优势，由甲组、丙组可知，野生型细菌X在与tcel突变体的竞争中不占优势，D错误。 故选C。 13. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法错误的是（ ） A. 过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B. 过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂 C. 过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合 D. 耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段 【答案】C 【解析】 【分析】从图中看出①是去掉植物细胞壁，②是用紫外线诱导染色体变异，③融合形成杂种细胞。 【详解】A、过程1是获得植物细胞的原生质体，需要用纤维素酶和果胶酶将细胞壁分解，A正确； B、根据题干信息“将其中一个细胞的染色体在融合前断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，”故过程②通过紫外线照射是使中间偃麦草的染色体断裂，B正确； C、灭活的病毒诱导是动物细胞融合特有的方法，诱导植物原生质体融合常用物理法、化学法，C错误； D、实验最终将不抗盐的普通小麦和抗盐的偃麦草整合形成耐盐小麦，说明耐盐小麦染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段，D正确。 故选C。 【点睛】本题的难点是对过程②的分析，考生需要结合题干中的信息作答。 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每个小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（ ） A. 将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B. 涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C. 需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间 D. 挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析 【答案】AB 【解析】 【分析】培养基的配制：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板。微生物的接种方法有稀释涂布平板法和平板划线法。预实验可以为正式实验进一步的摸索条件，可以检验实验设计的科学性和可行性，避免人力、物力和财力的浪费。 【详解】A、培养基应先灭菌再分装于培养皿中，A符合题意； B、涂布用的菌液体积为0.1mL，培养皿中菌落数要求在30~300个，则涂布用的菌浓度应控制在300~3000个/mL，B符合题意； C、辐射剂量和诱变时间都是正式实验的无关变量，可通过预实验确定，C不符合题意； D、石油降解菌能分解石油获得碳源，形成菌落，挑取培养基上长出的较大单菌落，经纯化后进行降解效率分析，以获得能高效降解石油的菌种，D不符合题意。 故选AB。 15. 我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流程如图所示。下列相关叙述正确的有（　　） A. 猴的成纤维细胞和胚胎干细胞功能不同，但具有相同的基因组 B. 囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的基因都不同 C. 移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满CO₂的培养箱中进行 D. 移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌 【答案】AD 【解析】 【分析】胚胎干细胞具有全能性，利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，是利用了胚胎干细胞的全能性。 【详解】A、由于猴的成纤维细胞和胚胎干细胞是由猴胚胎干细胞分裂分化而来，虽然功能不同，但基因组相同，A正确； B、囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的基因有部分不同，但有部分基因所有细胞都表达（如呼吸酶基因），B错误； C、动物细胞培养和早期胚胎培养需要在95%空气和5%二氧化碳的环境中培养，C错误； D、胚胎移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌，D正确。 故选AD。 16. 图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ） A. 基因A突变为a是一种碱基增添的突变 B. 用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同 C. 用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致 D. 产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定 【答案】BD 【解析】 【分析】“分子手术刀”——限制酶：（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端。 【详解】A 、对比 A 基因和 a 基因的序列，A 基因中 “AAGCTT” 变为 a 基因中 “AAGCTG” ，是碱基替换（T→G），并非碱基增添，A 错误； B、HindⅢ 切割产生黏性末端，AluⅠ 切割后产生的是平末端，二者末端类型不相同，B正确； C、a基因中有2个Hind Ⅲ切割位点，切割后产生3个片段，有3个Alu Ⅰ切割位点，切割后产生4个片段，用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小不一致，C 错误； D、因为正常基因 A 和致病基因 a 的 HindⅢ 切割位点数量不同，所以产前诊断时，该致病基因可选用 HindⅢ 限制酶开展酶切鉴定，D 正确。 故选BD。 17. 转基因作物是通过转基因技术对农作物进行精确改造而产生的。一方面，在产量、抗逆性及品质等方面有显著改进，极大地降低了农业生产成本;另一方面，科学家通过动物实验发现转基因作物可能对人类健康存在着危害。下列关于转基因作物的叙述，正确的是（　　） A. 转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物 B. 国家必须对转基因作物的研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制 C. 科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险及采取相应的防范措施 D. 若转基因作物产生了对人类健康及环境的负面影响，我们应该放弃转基因技术 【答案】ABC 【解析】 【详解】转基因技术的基本原理为基因重组，其技术产物可称为转基因作物。因将外源基因导入进生物体内，可能引发食品安全与生态安全等问题，所以国家必须对转基因作物的研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制，科学家也必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险及采取相应的防范措施，而非因为一些负面影响放弃转基因技术，ABC正确，D错误。 18. 某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如图）。下列说法正确的是（ ） A. 利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞 B. 制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体 C. 用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存 D. 单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白 【答案】AD 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备：用特定的抗原对小鼠进行免疫，并从该小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞，将多种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，利用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长。对上述经选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外条件下大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体。 【详解】A、胶原蛋白酶可以催化分解细胞外的胶原蛋白，因此利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞，A正确； B、由于蛋白S含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体，单克隆抗体A和单克隆抗体B来自不同的杂交瘤细胞，因此制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B不是相同的单克隆抗体，B错误； C、用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，也可以冷冻保存，C错误； D、单克隆抗体A和单克隆抗体B都来自筛选出的杂交瘤细胞，因此都能够特异性识别S蛋白上的抗原决定簇，D正确。 故选AD。 三、非选择题：本题共5小题，共59分。 19. 青梅果肉营养丰富，成熟的青梅果实易腐烂，不易运输保存。进行青梅果酒研究，既可提高青梅资源利用率，又可提高产品附加值。图1为制作青梅果酒的简易装置图；由于青梅果肉含糖量低，往往在青梅果浆中加入白砂糖后再进行酿制，图2为在青梅果浆中添加白砂糖对酒精度和果酒感官评分的影响（感官评分越高，果酒的品质越高）。 （1）在青梅果酒发酵过程中，图1装置中的充气口应处于______状态，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是______。可在酸性条件下，用______（填试剂名称）检测有无果酒产生，若有果酒产生，则颜色变化为______。 （2）从图2可看出，青梅果酒酿制时果浆中初始糖浓度为______时效果最佳，在此浓度之前，果酒酒精度随初始糖浓度的增加而增加，原因是______。（答出2点） （3）在青梅果酒酿制过程中，若发酵时间过长，产酒率不再增加，但会增加被杂菌污染的风险，若被醋酸菌污染，______（填“会”或“不会”）经发酵产生大量醋酸，理由是______。（答出2点） 【答案】（1） ①. 关闭     ②. 避免空气中其他微生物进入发酵装置（或防止空气中的微生物污染） ③. 重铬酸钾溶液   ④. 由橙色变成灰绿色 （2） ①. 20% ②. 糖类是主要的能源物质，可为酵母菌的生长、繁殖提供能源物质，还可作为酒精发酵的原料 （3） ①. 不会     ②. 酒精发酵是无氧环境，而醋酸发酵需要氧气，且酒精发酵与醋酸发酵的温度不同 【解析】 【分析】果酒制作利用的是酵母菌，发酵过程中先通气后密封，发酵10—12d；果醋制作利用的是醋酸菌，过程中温度控制在30—35℃，全程通气，发酵7—8d。 【小问1详解】 果酒发酵利用的是酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧型真菌，在无氧环境中发酵产生酒精，因此在青梅果酒发酵时，图1装置中的充气口应关闭；排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是避免空气中其他微生物进入发酵装置（或防止空气中的微生物污染）。酒精可用酸性重铬酸钾来检测，颜色由橙色变成灰绿色，因此，可在酸性条件下，用重铬酸钾溶液与发酵液反应检测有无果酒产生。 【小问2详解】 从图2曲线可看出，当初始糖浓度为20%时，酒精度及果酒感官评分均最高。糖类是主要的能源物质，在果汁中加入糖可为酵母菌的生长繁殖提供能源物质，另外，糖是发酵的原料，加入的糖可作为酒精发酵的原料，所以在初始糖度低于20%时，果酒酒精度随初始糖度的增加而增加。 【小问3详解】 果酒发酵后期若被醋酸菌污染，不会经发酵产生醋酸，因为酒精发酵和醋酸发酵利用的菌种不同，酒精发酵是无氧环境，而醋酸菌是需氧型生物，醋酸发酵需要氧气，且酒精发酵与醋酸发酵的温度不同，故在果酒发酵期间被醋酸菌污染，也不会发酵产生大量醋酸。 20. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如下图所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____细胞。对小鼠多次注射该抗原的目的_____ （2）步骤①常用方法中与植物不同的是_____。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，其中步骤③筛选的目的是_____。杂交瘤细胞可采用进行体外培养的方式或注射到小鼠_____培养进行扩大培养。 （4）步骤④是将获得的a_____和b_____这两部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC． （5）研究发现，ADC在患者体内的作用如下图所示。 ①单克隆抗体除了运载药物外，还有_____等应用（答出两点）。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的_____（填细胞器名称）可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞_____（凋亡/坏死）。 【答案】（1） ①. 人的乳腺癌 ②. 刺激小鼠产生更多的浆细胞 （2）用灭活的病毒诱导 （3） ①. 选择出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞 ②. 腹腔 （4） ①. 单克隆抗体 ②. 治疗乳腺癌的药物 （5） ①. 作为诊断试剂、治疗疾病 ②. 溶酶体 ③. 凋亡      【解析】 【分析】1、单克隆抗体制备过程：用特定的抗原免疫，从小鼠的脾中得到能产生特定抗体的B淋巴细胞→诱导与培养好的骨髓瘤细胞融合→用特定的选择培养基进行筛选：在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长→对选择培养的杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞→将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞在体外大规模培养或者注射小鼠腹腔中增殖→从细胞培养液或小鼠腹水中获取大量的单克隆抗体； 2、题图分析：①表示动物细胞的融合，②表示筛选杂交瘤细胞，③表示克隆化培养和专一抗体检测，④表示构建抗体药物偶联物时，将单克隆抗体和治疗乳腺癌的药物结合形成ADC。ADC不识别正常细胞，能识别并结合乳腺癌细胞。 【小问1详解】 本实验目的是构建治疗乳腺癌的抗体药物偶联物（ADC），为了产生能特异性识别乳腺癌细胞的抗体，应该选择人的乳腺癌细胞作为抗原对小鼠进行免疫处理。对小鼠多次注射该抗原，是为了刺激小鼠的免疫系统，使其产生更多的浆细胞，从而获得更多能产生特异性抗体的B淋巴细胞； 【小问2详解】 步骤①是诱导动物细胞融合，植物原生质体融合常用物理方法（如电激）和化学方法（如聚乙二醇），动物细胞融合除了这些方法外，常用的与植物不同的方法是用灭活的病毒诱导； 【小问3详解】 ②表示筛选杂交瘤细胞，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，故需要进行③克隆化培养和抗体检测两个过程，其目的是选择出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞，杂交瘤细胞具有能大量增殖，又能产生特定抗体的特点；杂交瘤细胞可采用进行体外培养的方式或注射到小鼠腹腔培养进行扩大培养； 【小问4详解】 步骤④是将获得的a单克隆抗体和b治疗乳腺癌的药物这两部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC。因为单克隆抗体具有特异性识别能力，能将药物精准带到乳腺癌细胞处； 【小问5详解】 ①ADC中的单克隆抗体能精确地定位乳腺癌细胞，让药物作用于乳腺癌细胞，而不是正常的细胞，可以降低乳腺癌治疗药物的副作用，这个过程依赖于特异性的抗原与抗体反应，可以有效地治疗疾病；单克隆抗体还可以作为诊断试剂，如检测相关基因有没有表达成蛋白质，或检测抗原的有无，故单克隆抗体除了运载药物外，还有作为诊断试剂、治疗疾病等应用； ②由图2可知，ADC进入乳腺癌细胞，溶酶体可以将ADC水解，释放出的药物进入细胞质基质，最终作用于细胞核，引起乳腺癌细胞的凋亡。 21. 油酸是一种单不饱和脂肪酸，稳定性高，具有较高的营养和保健功能，富含油酸的食用油可长时间保存且在高温条件下不易氧化变质。油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要指标。研究人员利用转基因技术抑制大豆内源FAD2－1基因的表达，获得了油酸比例显著提高的大豆，其油酸含量高51.71%。回答下列问题： （1）从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列后，可用_____________的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理是_________________。利用PCR技术获得目的基因的过程中，需要在PCR反应体系中加入模板、TaqDNA聚合酶及_____________、__________________。 （2）对FAD2－1基因进行XbaⅠ、SacⅠ双酶切，这两种酶作用的化学键是______________。将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体。FAD2－1基因、重组表达载体的结构如下图所示，a~d 表示 FAD2－1基因的4个位点。 将FAD2－1基因的________（填图中的字母）位点连接到重组表达载体模板链启动子端。重组表达载体转录产生的mRNA可抑制细胞内FAD2－1基因的表达，其原因是_________________。 （3）重组表达载体中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，转化后可以通过_________________的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测_________________，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。 【答案】（1） ①. 人工合成 ②. DNA的半保留复制 ③. 引物 ④. 四种游离的脱氧核苷酸(dNTP) （2） ①. 磷酸二酯键 ②. b ③. 重组表达载体中目的基因转录产生的mRNA与FAD2-1基因转录产生的mRNA 可发生碱基互补配对，形成双链结构，从而抑制FAD2一1基因的mRNA进行翻译 （3） ①. 喷施草铵磷 ②. 大豆的油酸含量 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列后，可用人工合成的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增。PCR技术的原理是DNA的半保留复制。PCR技术获得目的基因的过程中，需要在PCR反应体系中加入模板、TaqDNA聚合酶、引物、四种游离的脱氧核苷酸(dNTP)。 【小问2详解】 XbaⅠ、SacⅠ两种限制酶作用的化学键是磷酸二酯键。据题可知，需要将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体，故应将FAD2－1基因模板链的互补链接入重组表达载体的模板链中，再结合图示，观察转录方向，根据同向连接原则，可将FAD2－1基因的b位点连接到重组表达载体模板链的启动子端，重组表达载体中目的基因转录产生的mRNA与FAD2－1基因转录产生的mRNA可发生碱基互补配对，形成双链结构，从而抑制FAD2－1基因的mRNA进行翻译，抑制细胞内FAD2－1基因的表达。 【小问3详解】 重组质粒中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，该基因为标记基因，则转化后可通过喷施草铵磷的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测大豆的油酸含量，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。 22. 原中山大学眼科中心主任葛坚领导的研究小组培育成了猴鼠嵌合体，期待将成果用于人体角膜等组织或器官的移植。请回答下列问题： （1）人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和______，目前临床通过应用免疫抑制剂抑制______细胞的增殖来提高移植器官的成活率。 （2）①过程中，通过______来保证无毒环境，然后加入诱导因子，作用是______，获得皮肤干细胞。再将皮肤干细胞注入小鼠囊胚的______部位，最终培养成组织或器官。 （3）实验中雌鼠甲和代孕雌鼠需要同时注射某激素，在操作上称为______。②过程中，所选代孕雌鼠应满足的条件是______。 【答案】（1） ①. 免疫排斥 ②. T （2） ①. 定期更换培养液 ②. 促使皮肤细胞恢复分裂增殖能力 ③. 内细胞团 （3） ①. 同期发情处理 ②. 同种、健康、生理状态相同 【解析】 【小问1详解】 人体器官移植面临的两大核心问题是供体器官短缺、移植后发生免疫排斥；免疫排斥反应主要由T淋巴细胞介导，临床应用免疫抑制剂抑制T细胞增殖，可以降低排斥反应，提高移植器官的成活率。 【小问2详解】 ①是动物细胞体外培养过程，为维持无毒的培养环境，需要定期更换培养液，清除细胞代谢废物；已分化的皮肤细胞需要诱导因子诱导脱分化促使皮肤细胞恢复分裂增殖能力，才能转变为具有分裂分化能力的皮肤干细胞；囊胚的内细胞团将来会分化为胎儿的各种组织，因此外源干细胞需要注入囊胚的内细胞团，才能随胚胎发育形成嵌合体的组织器官。 【小问3详解】 胚胎移植前需要对供体雌鼠和代孕雌鼠进行同期发情处理，使二者生理状态一致，保证胚胎能成功着床；代孕雌鼠需要满足：同种、身体健康、具有正常繁殖能力的条件，且生理状态相同才能保证胚胎正常发育。 23. 2010年，中科院昆明动物研究所培育出中国首例转基因猕猴。这一研究成果标志着中国科学家在非人灵长类转基因动物研究方面达到世界领先水平，为未来人类重大疾病的非人灵长类动物模型的深入研究奠定了坚实的基础。下图是转基因猕猴培育过程的示意图，请据图回答： （1）在构建基因表达载体过程中，它的组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及_____。过程②中常用________________的方法将目的基因导入受精卵。 （2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供CO2气体以维持________________。 （3）图中过程⑦称为________，为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同，此前需要用促性腺激素对代孕雌猴作________处理。 （4）若要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴，可对早期胚胎进行________，操作时选择发育到桑椹胚或囊胚期的胚胎进行。若选用囊胚期的胚胎，操作过程需要特别注意的问题是：____________。 （5）下列关于现代生物工程技术的安全性和伦理问题的分析，不合理的观点是：（ ） A．转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒 B．运用DNA重组技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器 C．我国的政策是禁止进行生殖性克隆人 D．转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存 【答案】 ①. 标记基因 ②. 显微注射 ③. 培养液的Ph ④. 胚胎移植 ⑤. 同期发情 ⑥. 胚胎分割 ⑦. 均等分割内细胞团 ⑧. D 【解析】 【分析】1、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素；③定期更换培养液，以清除代谢废物．（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质。（3）温度和PH：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH）。 2、进行胚胎分割时，应选择发育良好、形态正常的桑葚胚或囊胚．对囊胚阶段的胚胎进行分割时要注意将内细胞团均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育．胚胎分割后，可取滋养层细胞做DNA分析进行性别鉴定胚胎的早期培养：（1）培养目的：精子与卵子在体外受精后，应将受精卵移入发育培养液中继续培养，以检查受精状况和受精卵的发育能力.（2）培养液成分：除一些无机盐和有机盐外，还需添加维生素、激素、氨基酸、核苷酸等营养成分，以及血清等物质。（3）当胚胎发育到适宜的阶段时，可将其取出向受体移植或冷冻保存．不同动物胚胎移植的时间不同。 【详解】（1）基因表达载体的组成包括目的基因、启动子、终止子以及标记基因。过程②是将构建的基因表达载体导入受精卵中，常用显微注射技术。 （2）在动物细胞培养时，需要提供CO2气体的目的是：维持培养液的pH。 （3）过程⑦称为胚胎移植。在胚胎移植前，需对代孕雌猴作同期发情处理，以使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同。 （4）对早期胚胎进行胚胎分割，可同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴。若选用囊胚期的胚胎进行胚胎分割，操作过程需要特别注意将内细胞团进行均等分割。 （5）A、转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒，A正确； B、运用DNA重组技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器，B正确； C、我国的政策是禁止进行生殖性克隆人，C正确； D、转基因生物进入自然界后可能与野生物种杂交而威胁其他生物的生存，D错误。 故选D。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 高二生物试卷 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每个小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 如图为纯化大肠杆菌的一个操作环节，下列相关叙述中，错误的是（　　） A. 该操作步骤是接种，方法是平板划线法 B. 除第一次划线外，以后的每一次划线的起点是上一次划线的末端 C. 该接种方法适用于细菌的计数 D. 图中细菌密度最小的是5处末端 2. 下列实验程序有错误的是（ ） A. A植物原生质体+B植物原生质体杂交原生质体 B. 浆细胞+骨髓瘤细胞产生特定抗体的杂交瘤细胞 C. 动物组织制备细胞悬液原代培养传代培养 D. 离体细胞消毒、接种愈伤组织试管苗 3. 某研究小组为了研制预防禽流感病毒的疫苗，开展了前期研究工作。其简要的操作流程如下图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 步骤①所代表的过程是逆转录 B. 步骤③可用处理大肠杆菌 C. 检验Q蛋白是否生成，可用禽流感康复的鸡的血清进行抗原—抗体杂交 D. 可以在培养基中直接培养禽流感病毒 4. 治疗性克隆技术可用于治疗糖尿病，科研人员利用人糖尿病模型鼠进行如图所示实验。下列有关叙述不正确的是（　　） A. 治疗性克隆技术需用到动物细胞培养和核移植 B. 过程①中选用小鼠的皮肤细胞有利于细胞核全能性的恢复 C. 过程④移植前，无需对受体A鼠注射免疫抑制剂 D. 生殖性克隆与治疗性克隆都需要用到动物细胞培养和核移植 5. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺，“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。相关叙述错误的是（ ） A. 此酿醋方法依据的原理是特定的微生物可将酒精转化为醋酸 B. 加水稀释的目的是避免酒精浓度过高抑制微生物的生长繁殖 C. “衣（指菌膜）生”是由酵母菌在发酵液表面大量繁殖形成的 D. “挠搅”有利于酒精与微生物的充分接触，且可增加溶解氧 6. 为培育抗旱性强、可溶性糖含量高的甘薯KT1，研究者设计如下流程。相关叙述不正确的是（ ） A. 该过程不需要考虑A、B的亲缘关系远近 B. 甘薯KT1培养过程中可能会出现基因突变和基因重组 C. 过程②需要高尔基体参与再生出新的细胞壁 D. 过程③需要控制生长素和细胞分裂素的比例 7. 用荧光标记的特定的DNA片段作为探针，与染色体上对应的DNA片段结合可在染色体上定位特定的基因。探针与染色体上待测基因结合的原理如下图所示，下列叙述错误的是 A. 合成探针的原料是脱氧核苷酸 B. 此处煮沸的作用相当于解旋酶的作用 C. 复性时，探针与基因杂交遵循碱基互补配对原则 D. 对成熟叶肉细胞进行基因标记时，一条染色体上可观察到两个荧光点 8. 下列对于生物技术安全与伦理问题认识不合理的是（　　） A. 通过防止转基因作物花粉的传播，减少对野生植物的基因污染 B. 通过禁止销售、食用转基因食品，提高转基因产品的安全性 C. 对植入前的胚胎进行遗传学诊断，有助于父母生育健康婴儿 D. 参观细菌战历史陈列馆，可帮助人们认识生物武器的危害 9. 在“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”探究实践中，要规范地进行无菌操作。下列与无菌操作相关的说法，正确的是（　　） A. 为了防止杂菌污染，应将配制好的选择培养基分装到培养皿中再进行高压蒸汽灭菌 B. 将土样进行10倍稀释后，取1mL上清液加入盛有9mL蒸馏水的试管中依次等比稀释 C. 将涂布器在火焰上灼烧，待其上的酒精燃尽后，必须先冷却再进行涂布平板操作 D. 待长成的菌落稳定后，要在无菌条件下进行尿素分解菌菌落的观察和计数 10. 植物次生代谢产物是一类具有特殊作用的活性成分，例如丹参中的活性成分丹参酮以及酚酸类成分在心脑血管疾病的治疗方面效果显著。以丹参为材料，可通过植物细胞工程获得丹参酮用于临床应用。下列相关叙述正确的是（ ） A. 次生代谢物是植物基本生命活动所必需的 B. 次生代谢物一般在特定的组织或器官中生成 C. 应对丹参的外植体做消毒处理以获得脱毒组织 D. 该过程利用了植物细胞全能性的原理 11. 某科研小组利用质粒（图甲）和目的基因（图乙）构建重组DNA。下列分析错误的是 A. 用限制酶HindⅢ和PstI切割质粒，可得到2条DNA片段 B. 不能用AluI酶切割质粒和外源DNA的原因是AluI酶会破坏目的基因 C. 构建重组DNA时，需选择SmaI酶和PstⅠ酶同时切割质粒和外源DNA D. 导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长 12. 细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势，其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验：在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜，将一种菌（下层菌）滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜，滴加等量的另一种菌（上层菌），共同培养后，对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理 B. 对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数 C. 由甲、乙，丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性 D. 野生型细菌X在与tcel—tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势 13. 两种远缘植物的细胞融合后会导致一方的染色体被排出。若其中一个细胞的染色体在融合前由于某种原因断裂，形成的染色体片段在细胞融合后可能不会被全部排出，未排出的染色体片段可以整合到另一个细胞的染色体上而留存在杂种细胞中。依据该原理，将普通小麦与耐盐性强的中间偃麦草进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如下图所示。下列说法错误的是（ ） A. 过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B. 过程②的目的是使中间偃麦草的染色体断裂 C. 过程③中常用灭活的病毒诱导原生质体融合 D. 耐盐小麦的染色体上整合了中间偃麦草的染色体片段 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每个小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项是符合题目要求的，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 为提高一株石油降解菌的净化能力，将菌涂布于石油为唯一碳源的固体培养基上，以致死率为90%的辐照剂量诱变处理，下列叙述不合理的是（ ） A. 将培养基分装于培养皿中后灭菌，可降低培养基污染的概率 B. 涂布用的菌浓度应控制在30~300个/mL C. 需通过预实验考察辐射时间对存活率的影响，以确定最佳诱变时间 D. 挑取培养基上长出的较大单菌落，给纯化后进行降解效率分析 15. 我国科学家利用猴胚胎干细胞首次创造了人工“猴胚胎”，研究流程如图所示。下列相关叙述正确的有（　　） A. 猴的成纤维细胞和胚胎干细胞功能不同，但具有相同的基因组 B. 囊胚细胞②③都由细胞①分裂分化形成，但表达的基因都不同 C. 移植前细胞和囊胚的培养都要放在充满CO₂的培养箱中进行 D. 移植后胚胎的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌 16. 图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ） A. 基因A突变为a是一种碱基增添的突变 B. 用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同 C. 用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致 D. 产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定 17. 转基因作物是通过转基因技术对农作物进行精确改造而产生的。一方面，在产量、抗逆性及品质等方面有显著改进，极大地降低了农业生产成本;另一方面，科学家通过动物实验发现转基因作物可能对人类健康存在着危害。下列关于转基因作物的叙述，正确的是（　　） A. 转基因技术应用的基本原理是基因重组，转基因作物是转基因技术的一种产物 B. 国家必须对转基因作物的研究制定相应的法律法规，并进行严格管理与有效控制 C. 科学家必须在现有知识与技术的基础上尽量考虑转基因作物可能存在的风险及采取相应的防范措施 D. 若转基因作物产生了对人类健康及环境的负面影响，我们应该放弃转基因技术 18. 某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗-S单克隆抗体（如图）。下列说法正确的是（ ） A. 利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的骨髓瘤细胞 B. 制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体 C. 用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存 D. 单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白 三、非选择题：本题共5小题，共59分。 19. 青梅果肉营养丰富，成熟的青梅果实易腐烂，不易运输保存。进行青梅果酒研究，既可提高青梅资源利用率，又可提高产品附加值。图1为制作青梅果酒的简易装置图；由于青梅果肉含糖量低，往往在青梅果浆中加入白砂糖后再进行酿制，图2为在青梅果浆中添加白砂糖对酒精度和果酒感官评分的影响（感官评分越高，果酒的品质越高）。 （1）在青梅果酒发酵过程中，图1装置中的充气口应处于______状态，排气口要通过一个长而弯曲的胶管与瓶身连接，目的是______。可在酸性条件下，用______（填试剂名称）检测有无果酒产生，若有果酒产生，则颜色变化为______。 （2）从图2可看出，青梅果酒酿制时果浆中初始糖浓度为______时效果最佳，在此浓度之前，果酒酒精度随初始糖浓度的增加而增加，原因是______。（答出2点） （3）在青梅果酒酿制过程中，若发酵时间过长，产酒率不再增加，但会增加被杂菌污染的风险，若被醋酸菌污染，______（填“会”或“不会”）经发酵产生大量醋酸，理由是______。（答出2点） 20. 为降低乳腺癌治疗药物的副作用，科研人员尝试在单克隆抗体技术的基础上，构建抗体药物偶联物（ADC），过程如下图所示。 （1）本实验中，小鼠注射的特定抗原应取自_____细胞。对小鼠多次注射该抗原的目的_____ （2）步骤①常用方法中与植物不同的是_____。 （3）步骤②的细胞必须经过步骤③才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，其中步骤③筛选的目的是_____。杂交瘤细胞可采用进行体外培养的方式或注射到小鼠_____培养进行扩大培养。 （4）步骤④是将获得的a_____和b_____这两部分，通过接头结合在一起，从而获得ADC． （5）研究发现，ADC在患者体内的作用如下图所示。 ①单克隆抗体除了运载药物外，还有_____等应用（答出两点）。 ②ADC进入乳腺癌细胞后，细胞中的_____（填细胞器名称）可将其水解，释放出的药物最终作用于细胞核，可导致癌细胞_____（凋亡/坏死）。 21. 油酸是一种单不饱和脂肪酸，稳定性高，具有较高的营养和保健功能，富含油酸的食用油可长时间保存且在高温条件下不易氧化变质。油酸含量是评价大豆油食用品质和稳定性的重要指标。研究人员利用转基因技术抑制大豆内源FAD2－1基因的表达，获得了油酸比例显著提高的大豆，其油酸含量高51.71%。回答下列问题： （1）从大豆基因组数据库查找到FAD2－1基因的序列后，可用_____________的方法获得FAD2－1基因片段，接着用PCR技术进行扩增，PCR技术的原理是_________________。利用PCR技术获得目的基因的过程中，需要在PCR反应体系中加入模板、TaqDNA聚合酶及_____________、__________________。 （2）对FAD2－1基因进行XbaⅠ、SacⅠ双酶切，这两种酶作用的化学键是______________。将FAD2－1基因反向连接到pCAMBIA3300－BCSP质粒中，构建反义基因表达载体。FAD2－1基因、重组表达载体的结构如下图所示，a~d 表示 FAD2－1基因的4个位点。 将FAD2－1基因的________（填图中的字母）位点连接到重组表达载体模板链启动子端。重组表达载体转录产生的mRNA可抑制细胞内FAD2－1基因的表达，其原因是_________________。 （3）重组表达载体中包含草铵磷（一种除草剂）抗性基因，转化后可以通过_________________的方法挑选出存活的大豆植株，收获大豆后检测_________________，鉴定成功转基因的大豆植株并评价其效果。 22. 原中山大学眼科中心主任葛坚领导的研究小组培育成了猴鼠嵌合体，期待将成果用于人体角膜等组织或器官的移植。请回答下列问题： （1）人体器官移植面临的主要问题有供体器官短缺和______，目前临床通过应用免疫抑制剂抑制______细胞的增殖来提高移植器官的成活率。 （2）①过程中，通过______来保证无毒环境，然后加入诱导因子，作用是______，获得皮肤干细胞。再将皮肤干细胞注入小鼠囊胚的______部位，最终培养成组织或器官。 （3）实验中雌鼠甲和代孕雌鼠需要同时注射某激素，在操作上称为______。②过程中，所选代孕雌鼠应满足的条件是______。 23. 2010年，中科院昆明动物研究所培育出中国首例转基因猕猴。这一研究成果标志着中国科学家在非人灵长类转基因动物研究方面达到世界领先水平，为未来人类重大疾病的非人灵长类动物模型的深入研究奠定了坚实的基础。下图是转基因猕猴培育过程的示意图，请据图回答： （1）在构建基因表达载体过程中，它的组成除了目的基因外，还必须有启动子、终止子以及_____。过程②中常用________________的方法将目的基因导入受精卵。 （2）在体外培养受精卵时，除了给予一定量的O2以维持细胞呼吸外，还需要提供CO2气体以维持________________。 （3）图中过程⑦称为________，为使代孕雌猴与供体雌猴生殖器官的生理变化相同，此前需要用促性腺激素对代孕雌猴作________处理。 （4）若要同时获得多只与此转基因猕猴相同的小猴，可对早期胚胎进行________，操作时选择发育到桑椹胚或囊胚期的胚胎进行。若选用囊胚期的胚胎，操作过程需要特别注意的问题是：____________。 （5）下列关于现代生物工程技术的安全性和伦理问题的分析，不合理的观点是：（ ） A．转基因生物合成的某些新的蛋白质有可能成为某些人的过敏原或者引起中毒 B．运用DNA重组技术可以将致病菌或病毒改造成威力巨大的生物武器 C．我国的政策是禁止进行生殖性克隆人 D．转基因生物进入自然界后不会与野生物种杂交而威胁其他生物的生存 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