精品解析：四川省泸州市三校联盟2025—2026学年高二下学期期中联合考试生物学试题

泸州市三校联盟2025—2026学年高二下学期期中联合考试 生物学试题 本试卷分为第I卷（选择题）和第II卷（非选择题）两部分，第I卷第1至4页，第II卷第5至6页，满分100分，考试时间75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、准考证号准确填写在答题卡上，并将考试用条形码准确粘贴在条形码区域内。 2．回答选择题时，每小题选出答案后，必须使用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。 3．回答非选择题时，必须使用0.5毫米黑色字迹的签字笔在答题卡上题目指示区域内作答，要求字体工整、笔迹清楚。 4．请按照题号顺序在各题目指定的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 5．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。 第I卷 选择题（共45分） 一、单项选择题：本部分共15个小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 学生制作发酵食品的实践活动中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ） A. 果酒和果醋的发酵温度宜控制在18—30 ℃，泡菜的发酵温度宜控制在30—35 ℃ B. 葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后可直接通入无菌空气制作葡萄醋 C. 醋酸发酵和酒精发酵过程中，分别在醋酸菌和酵母菌的线粒体中产生CO2 D. 制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2 / 3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料 2. 我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品（如酱油、腐乳、豆豉等），传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，正确的是（ ） A. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成 B. 腐乳鲜美的味道主要依赖于曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸 C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出 D. 以乙醇为底物进行果醋发酵，是因为醋酸菌含有催化乙醇转化为乙醛，进而转化为乙酸的相应酶 3. 食品保存有干制、腌制、低温保存和高温处理等多种方法。下列叙述错误的是（ ） A. 干制降低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，食品保存时间延长 B. 腌制通过添加食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖 C. 低温保存可抑制微生物的生命活动，温度越低对食品保存越有利 D. 高温处理可杀死食品中绝大部分微生物，并可破坏食品中的酶类 4. 下列关于发酵工程及其应用的说法，错误的是（ ） A. 发酵工程具有原料来源丰富廉价、产物专一、废弃物对环境的污染小等特点 B. 从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成微生物饲料，能使家畜增重快 C. 在厌氧发酵制作青贮饲料时，添加乳酸菌可提高饲料的品质 D. 微生物农药利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段 5. 消毒、灭菌、无菌是生物学实验中常见的操作，下列叙述正确的是（ ） A. 制备培养基的过程为：配制培养基→湿热灭菌→调pH→倒平板 B. 使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境 C. 无菌技术可以用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染 D. 观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征 6. 某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0.1 mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1 mL菌液中细菌数为2.4×108个。相关叙述正确的是（ ） A. 实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用湿热灭菌法进行灭菌 B. 若乙平板上菌落数平均为240个，则接种的菌液的稀释倍数为105 C. ③接种方法为稀释涂布平板法，涂布前需将涂布器灼烧灭菌后再使用 D. 乙中需要加琼脂和物质A等，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照 7. 啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（ ） A. 发芽过程中，大麦种子细胞合成的赤霉素可催化蛋白酶快速合成 B. 焙烤的目的是利用高温使淀粉酶变性失活，避免种子萌发时消耗有机物 C. 发酵是发酵工程的中心环节，需要严格控制温度、pH和溶氧量等 D. 蒸煮过程中，加入啤酒花可提供酵母菌以利于主发酵阶段的进行 8. 潘灯玉露是最具代表性的软叶类多肉植物，因其叶片晶莹剔透等特点，深受广大植物爱好者青睐。但因潘灯玉露生长速度缓慢、分生能力有限，难以在短时间内大量取得无性繁殖材料。为进一步满足市场对潘灯玉露的大量需求，某实验团队利用植物微型繁殖技术对其进行繁殖，下表为外源激素对脱分化的影响的相关数据。下列叙述正确的是（ ） 外源激素对胚性愈伤脱分化的影响 剂量 / mg / L 6-BA=0.00 6-BA=0.05 6-BA=0.10 6-BA=0.50 6-BA=1.00 诱导脱分化率 / % NAA=0.10 6.7 26.7 53.3 66.7 40.0 A. 选取无病虫害的潘灯玉露叶片为外植体，并用酒精、次氯酸钠溶液对其进行灭菌 B. 再分化需给予适当光照并按需调整培养基中植物激素等物质的用量 C. 据表可知，配制0.10 mg / L NAA和0.10 mg / L 6-BA的MS培养基诱导脱分化的效果最好 D. 完成分化的试管苗无需在培养箱内生长，直接从培养箱取出即可移栽入土 9. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法不正确的是（ ） A. 获得的植株②为纯合子，该培育方法能够明显缩短育种年限 B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，可体现细胞的全能性 C. 需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④ D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的只有④（不考虑基因突变） 10. iPS细胞诞生于21世纪初，被称为诱导多能干细胞，可通过转入相关因子来制备。iPS细胞最初是在2006年科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能在一定条件下被诱导成该类细胞。下列说法错误的是（ ） A. 导入的物质可以是DNA、蛋白质，还可用小分子物质来诱导 B. 与胚胎干细胞相比，iPS细胞具有细胞来源广泛，不需要破坏胚胎等优点 C. iPS细胞的体外培养需要在无菌的CO2培养箱中进行 D. T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞，说明体内细胞的分化是可逆的 11. 我国科学家采集了一只一岁半的、睡眠紊乱最明显的BMAL1（生物节律基因）敲除猴A6的体细胞，通过体细胞核移植技术，获得了5只克隆猴——这是国际上首次成功构建的一批遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴模型。该成就填补了生物节律紊乱研究高等动物模型的空白。下列相关叙述错误的是（ ） A. 体细胞核移植技术的基础是动物细胞培养 B. 取自新鲜卵巢的卵母细胞不需要经过培养也可以直接作为受体细胞使用 C. 使用5只克隆猴细胞的核基因型与核供体细胞的完全一致 D. 该研究可以弥补实验猕猴繁殖周期长、单胎数量少的不足 12. CD47是一种细胞膜表面糖蛋白，它与信号调节蛋白 α（SIRP α）形成信号复合物，促使癌细胞从巨噬细胞介导的吞噬作用中逃逸，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。为验证抗CD47的单克隆抗体可以减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如图流程进行了实验，下列叙述错误的是（ ） A. 实验流程中CD47充当抗原的作用 B. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生抗CD47的单克隆抗体 C. 对照组应设置为：巨噬细胞＋肿瘤细胞共培养体系＋单克隆抗体 D. 预期实验结果为实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组 13. 从目标生物提取分离DNA是进行基因工程操作的基础。下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A. 若选用鸡的成熟红细胞，可以加入一定量的蒸馏水，进行吸水涨破，进而破碎细胞 B. 若以新鲜菜花为实验材料，则研磨液过滤后保留沉淀 C. DNA溶于酒精，但某些蛋白质不溶于酒精，利用这一原理，可初步分离DNA和蛋白质 D. DNA溶液加入二苯胺试剂后就可呈蓝色 14. 脊椎动物早期胚胎发育包括：桑葚胚、囊胚及原肠胚等阶段，而原肠胚阶段包含三个将逐渐分化形成各种组织、器官的三个胚层。研究人员利用胚胎干细胞，在实验室中制造出不能发育成完整胚胎的“拟原肠胚”模型，用来揭示人类早期胚胎发育的过程。下列说法错误的是（ ） A. 囊胚阶段的滋养层细胞将来能发育成胎膜和胎盘的一部分 B. 利用核移植所得胚胎干细胞，可以诱导发育成适合移植的器官 C. 对原肠胚进行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率 D. 该模型可以研究酒精、药物和病原体对胚胎发育的影响 15. 质粒是基因工程中最常用的载体，质粒有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。质粒上箭头表示三种限制酶的酶切位点。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况不同。下表是外源基因插入后（插入点有a，b，c）细菌的生长情况。下列有关叙述正确的是（ ） 细菌在含氨苄青霉素的培养基上生长情况 细菌在含四环素的培养基上生长情况 ① 能生长 不能生长 ② 能生长 能生长 ③ 不能生长 能生长 A. 质粒的复制原点上有DNA聚合酶结合位点，是基因转录的起点 B. ①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是b，②是a，③是c C. 环状质粒被一种限制酶切开一个酶切位点时，被水解的磷酸二酯键有2个 D. 将外源基因与质粒进行切割时需用DNA连接酶 第II卷 非选择题（共55分） 二、综合填空题：本部分共5个大题，除标注外，每空2分，共55分。 16. 今年3月份，某中学高二年级的同学们在生活实践老师的指导下完成了“传统发酵食品制作”的实践活动，其中制作泡菜与果酒两项颇受学生欢迎。请根据所学知识，回答下列问题： （1）在泡菜腌制的过程中，要注意相关条件的控制。例如，要选择合格的泡菜坛，并用水封的方式密闭处理，以保证坛内发酵所需的_______环境。 （2）部分同学腌制的泡菜在进行品尝时，口味“咸而不酸”，请分析原因可能是_______。 （3）泡菜坛内常会出现一层白膜，这是由产膜酵母繁殖形成的。酵母菌的代谢类型为________可作为制作果酒的发酵生物。 （4）在果酒发酵过程中，酵母菌将葡萄糖分解为________和二氧化碳。同学们需要适时拧松发酵瓶的盖子，此操作的原因是________。 （5）制作果酒过程中，除酵母菌外还有其他微生物的生长，可以通过控制发酵条件，例如________（至少两项）等措施避免这些杂菌对发酵产生严重影响。 17. 聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题： （1）方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备_________培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有________、水、无机盐等营养物质。 （2）方法2采用________技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要________、DNA连接酶、________等“分子工具”。 （3）除了上述2种方法之外，还可以通过________技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 18. 下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： （1）在自然条件下，“矮牵牛”和“粉蓝烟草”进行有性杂交不能产生后代，原因是两者之间存在_______。 （2）利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的原理是_______。 （3）“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含_______条染色体，属_______倍体植株。 （4）植物体细胞融合技术依据的生物学原理是_______。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法，其中化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、________，植物体细胞融合完成的标志是_______。 19. Ⅰ．美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下图。回答下列问题： （1）步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射________和________。步骤②所用的SP2/0细胞的特点是_______。 （2）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入相应抗原进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是_______。 Ⅱ．随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （3）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用________（填数字）。 （4）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射_______，使用_______技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为_______。 （5）供体1完成体内受精的场所在________。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其________，胚胎移植前需要对受体进行________处理。 20. BamHI和BclI是两种限制酶，其识别序列及切割位点如表所示。探究下列问题： 限制酶 BamH Ⅰ Bcl Ⅰ 识别序列及切割位点 （1）限制酶_______（填“能”或“不能”）切割原核细胞自身的DNA，推测其理由是________。 （2）若某链状DNA分子中含有两个BamHI的识别序列，该DNA分子将被BamHI切成_______个片段，共断裂________个磷酸二酯键。 （3）科学家利用BamHI切割某DNA分子获得目的基因片段，同时用BclI切割质粒，两者切割后产生的黏性末端能不能被DNA连接酶连接，作出判断并说明理由_______。若能连接，则获得的重组DNA分子能不能被BclI再次切割，作出判断并说明理由________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 泸州市三校联盟2025—2026学年高二下学期期中联合考试 生物学试题 本试卷分为第I卷（选择题）和第II卷（非选择题）两部分，第I卷第1至4页，第II卷第5至6页，满分100分，考试时间75分钟。 注意事项： 1．答卷前，考生务必将自己的姓名、班级、准考证号准确填写在答题卡上，并将考试用条形码准确粘贴在条形码区域内。 2．回答选择题时，每小题选出答案后，必须使用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，请用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。 3．回答非选择题时，必须使用0.5毫米黑色字迹的签字笔在答题卡上题目指示区域内作答，要求字体工整、笔迹清楚。 4．请按照题号顺序在各题目指定的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 5．考试结束后，请将本试卷和答题卡一并交回。 第I卷 选择题（共45分） 一、单项选择题：本部分共15个小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 学生制作发酵食品的实践活动中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ） A. 果酒和果醋的发酵温度宜控制在18—30 ℃，泡菜的发酵温度宜控制在30—35 ℃ B. 葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后可直接通入无菌空气制作葡萄醋 C. 醋酸发酵和酒精发酵过程中，分别在醋酸菌和酵母菌的线粒体中产生CO2 D. 制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2 / 3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料 【答案】D 【解析】 【详解】A、果酒发酵适宜温度为18~25℃，果醋发酵适宜温度为30~35℃，泡菜发酵适宜温度约为18~20℃，选项中发酵温度对应关系错误，A错误； B、醋酸菌发酵不仅需要有氧环境，还要求温度为30~35℃，制作完葡萄酒后仅通入无菌空气不够，还需升高温度至醋酸菌适宜发酵温度才能制作葡萄醋，B错误； C、醋酸菌是原核生物，细胞内没有线粒体这一细胞器，不可能在线粒体中产生CO₂，C错误； D、制作果酒时葡萄汁不超过发酵瓶体积的2/3，既可以为酵母菌前期有氧呼吸繁殖提供氧气，也能避免发酵过程中发酵液溢出；制作泡菜时盐水淹没全部菜料可营造无氧环境，利于乳酸菌的厌氧发酵，D正确。 2. 我国劳动人民利用传统发酵技术制作出大量美味食品（如酱油、腐乳、豆豉等），传承和发扬了中华优秀传统饮食文化。随着科技的发展，现代发酵工程在食品领域的应用更加广泛。下列关于发酵的叙述，正确的是（ ） A. 啤酒的工业化生产过程中，酒精的产生积累主要在后发酵阶段完成 B. 腐乳鲜美的味道主要依赖于曲霉分解蛋白质产生的小分子肽和氨基酸 C. 泡菜坛装八成满可以防止发酵过程中酵母菌、乳酸菌等产生的CO2使发酵液溢出 D. 以乙醇为底物进行果醋发酵，是因为醋酸菌含有催化乙醇转化为乙醛，进而转化为乙酸的相应酶 【答案】D 【解析】 【详解】A、啤酒工业化生产中，酒精的产生积累主要在主发酵阶段完成，后发酵阶段以改善风味、沉淀杂质为主，仅产生少量酒精，A错误； B、腐乳鲜美的味道主要依赖于毛霉分解蛋白质，B错误； C、乳酸菌无氧呼吸的产物只有乳酸，不产生CO₂，C错误； D、醋酸菌为好氧菌，缺少糖源时可将乙醇转化为乙醛，再进一步转化为乙酸，该过程依赖醋酸菌细胞内的相应酶催化，D正确。 3. 食品保存有干制、腌制、低温保存和高温处理等多种方法。下列叙述错误的是（ ） A. 干制降低食品的含水量，使微生物不易生长和繁殖，食品保存时间延长 B. 腌制通过添加食盐、糖等制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖 C. 低温保存可抑制微生物的生命活动，温度越低对食品保存越有利 D. 高温处理可杀死食品中绝大部分微生物，并可破坏食品中的酶类 【答案】C 【解析】 【分析】食物腐败变质是由于微生物的生长和大量繁殖而引起的，根据食物腐败变质的原因，食品保存就要尽量的杀死或抑制微生物的生长和大量繁殖。 【详解】A、干制能降低食品中的含水量，使微生物不易生长和繁殖，进而延长食品保存时间，A正确； B、腌制过程中添加食盐、糖等可制造高渗环境，从而抑制微生物的生长和繁殖，B正确； C、低温保存可以抑制微生物的生命活动，但不是温度越低越好，一般果蔬的保存温度为零上低温，C错误； D、高温处理可杀死食品中绝大部分微生物，并通过破坏食品中的酶类，降低酶类对食品有机物的分解，有利于食品保存，D正确。 故选C。 4. 下列关于发酵工程及其应用的说法，错误的是（ ） A. 发酵工程具有原料来源丰富廉价、产物专一、废弃物对环境的污染小等特点 B. 从微生物细胞中提取的单细胞蛋白可制成微生物饲料，能使家畜增重快 C. 在厌氧发酵制作青贮饲料时，添加乳酸菌可提高饲料的品质 D. 微生物农药利用微生物或其代谢物来防治病虫害，是生物防治的重要手段 【答案】B 【解析】 【详解】A、发酵工程所用原料多为农副产品等，来源丰富且价格低廉，因酶的专一性发酵产物专一，发酵产生的废弃物多为可降解有机物，对环境的污染小，A正确； B、单细胞蛋白指的是通过发酵获得的微生物菌体本身，单细胞蛋白可制成微生物饲料使家畜增重快，B错误； C、厌氧发酵制作青贮饲料时，添加乳酸菌可促进乳酸菌快速增殖产生乳酸，抑制杂菌的生长繁殖，从而提高饲料的品质，C正确； D、微生物农药是利用微生物或其代谢产物来防治病虫害，不会造成化学农药残留、耐药性等问题，是生物防治的重要手段，D正确。 5. 消毒、灭菌、无菌是生物学实验中常见的操作，下列叙述正确的是（ ） A. 制备培养基的过程为：配制培养基→湿热灭菌→调pH→倒平板 B. 使用后的培养基在丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境 C. 无菌技术可以用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染 D. 观察菌落时，应将培养皿盖拿掉以利于看清菌落的形态特征 【答案】C 【解析】 【详解】A、制备培养基的过程为：配制培养基→调pH→高压蒸汽灭菌→倒平板，A错误； B、使用后的培养基丢弃前必须进行灭菌处理，消毒仅能杀死物体表面或内部的部分微生物，无法彻底消灭所有微生物，易污染环境，B错误； C、无菌技术除了用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染外，还能有效避免操作者自身被微生物感染，C正确； D、观察菌落时若拿掉培养皿盖，空气中的杂菌会落入培养基造成污染，还可能导致有害微生物扩散，应隔着皿盖观察菌落，D错误。 6. 某种物质A（一种含有C、H、N的有机物）难以降解，会对环境造成污染，只有某些细菌能降解A。研究人员按照如图所示流程从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株。图中③将M中的菌液稀释一定倍数后，取0.1 mL涂布到平板上，初步估测摇瓶M中1 mL菌液中细菌数为2.4×108个。相关叙述正确的是（ ） A. 实验时，淤泥及盛有培养基的摇瓶通常采用湿热灭菌法进行灭菌 B. 若乙平板上菌落数平均为240个，则接种的菌液的稀释倍数为105 C. ③接种方法为稀释涂布平板法，涂布前需将涂布器灼烧灭菌后再使用 D. 乙中需要加琼脂和物质A等，实验需设平行重复实验，无需另外设置空白对照 【答案】B 【解析】 【详解】A、实验时，要从淤泥中分离得到能高效降解A的细菌菌株，则图①为淤泥取样进行稀释，可以取淤泥加无菌水制成菌悬液，淤泥中有菌种，因此不能进行灭菌处理；盛有培养基的摇瓶通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，A错误； B、若乙平板上长出的菌落数平均为240个，假设稀释倍数为a，根据摇瓶M中1mL菌液中细菌数为2.4×108个，在每个平板上涂布0.1mL稀释后的菌液，则有240×a÷0.1=2.4×108，则稀释倍数a=105，B正确； C、③的接种方法确实是稀释涂布平板法，但涂布器灼烧灭菌后，必须冷却后才能接触菌液，否则高温会杀死目的菌，C错误； D、识图分析可知，③是稀释涂布平板法接种到以A为唯一碳源和氮源的选择培养基上，因此乙为固体培养基，需要加琼脂和物质A等，为了提高准确度，实验需设平行重复实验，且需要另外设置空白对照，检测培养基配制是否被杂菌污染，D错误。 7. 啤酒的工业化生产中，大麦经发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒等工序后，最终过滤、调节、分装。下列说法正确的是（ ） A. 发芽过程中，大麦种子细胞合成的赤霉素可催化蛋白酶快速合成 B. 焙烤的目的是利用高温使淀粉酶变性失活，避免种子萌发时消耗有机物 C. 发酵是发酵工程的中心环节，需要严格控制温度、pH和溶氧量等 D. 蒸煮过程中，加入啤酒花可提供酵母菌以利于主发酵阶段的进行 【答案】C 【解析】 【详解】A、赤霉素是植物激素，属于信息分子，仅起到调节生命活动的作用，不具有催化功能，无法催化蛋白酶合成，A错误； B、焙烤的目的是杀死发芽的大麦种子，同时保留淀粉酶的活性，以便后续糖化阶段分解淀粉，若淀粉酶变性失活会导致糖化无法正常进行，B错误； C、发酵是发酵工程的中心环节，酵母菌的增殖和酒精发酵过程需要适宜的温度、pH，且前期有氧增殖、后期厌氧产酒精的阶段对溶氧量的需求不同，因此需要严格控制温度、pH和溶氧量等条件，C正确； D、蒸煮过程为高温环境，会杀死微生物，加入啤酒花的作用是赋予啤酒特殊风味、起到防腐效果，不能提供酵母菌，酵母菌是后续发酵阶段单独接种的，D错误。 8. 潘灯玉露是最具代表性的软叶类多肉植物，因其叶片晶莹剔透等特点，深受广大植物爱好者青睐。但因潘灯玉露生长速度缓慢、分生能力有限，难以在短时间内大量取得无性繁殖材料。为进一步满足市场对潘灯玉露的大量需求，某实验团队利用植物微型繁殖技术对其进行繁殖，下表为外源激素对脱分化的影响的相关数据。下列叙述正确的是（ ） 外源激素对胚性愈伤脱分化的影响 剂量 / mg / L 6-BA=0.00 6-BA=0.05 6-BA=0.10 6-BA=0.50 6-BA=1.00 诱导脱分化率 / % NAA=0.10 6.7 26.7 53.3 66.7 40.0 A. 选取无病虫害的潘灯玉露叶片为外植体，并用酒精、次氯酸钠溶液对其进行灭菌 B. 再分化需给予适当光照并按需调整培养基中植物激素等物质的用量 C. 据表可知，配制0.10 mg / L NAA和0.10 mg / L 6-BA的MS培养基诱导脱分化的效果最好 D. 完成分化的试管苗无需在培养箱内生长，直接从培养箱取出即可移栽入土 【答案】B 【解析】 【详解】A、对潘灯玉露叶片外植体只能进行消毒处理，灭菌会杀灭外植体自身的活细胞，酒精、次氯酸钠的作用是对外植体消毒而非灭菌，A错误； B、再分化过程会形成具有叶绿体的芽等结构，需要适宜光照促进叶绿素合成，且诱导生芽、诱导生根等不同再分化阶段需要调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例等物质的用量，B正确； C、据表格数据可知，NAA为0.10mg/L、6-BA为0.50mg/L时脱分化率最高，C错误； D、完成分化的试管苗适应能力弱，需要先打开瓶盖进行炼苗，适应外界环境后再移栽，直接移栽成活率极低，D错误。 9. 如图表示植株A（杂合子Aa）和植株B培育植株①②③④⑤的过程，下列说法不正确的是（ ） A. 获得的植株②为纯合子，该培育方法能够明显缩短育种年限 B. 选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，可体现细胞的全能性 C. 需要通过植物组织培养技术获得的植株只有①③④ D. 植株①②④⑤与植株A基因型相同的只有④（不考虑基因突变） 【答案】C 【解析】 【详解】A、植株A(杂合子Aa) 的花粉(A或a)经过离体培养得到的植株①为单倍体植株(A或a)，秋水仙素处理单倍体植株①，获得的植株②(AA或aa)为纯合子，单倍体育种能够明显缩短育种年限，A正确； B、选择植物的愈伤组织进行诱变处理获得优质的突变体，通过组织培养技术获得植株③，体现了细胞的全能性，B正确； C、图中需要通过植物组织培养技术获得的植株是①③④⑤，融合细胞培养成植株也需要植物组织培养技术，C错误； D、植株①是通过花药离体培养获得的单倍体植株(A或a)，经秋水仙素处理得到植株②(AA或aa)；植株④是通过植物组织培养获得的，其基因型为Aa；植株⑤是通过植物体细胞杂交的方法获得的，其遗传物质是由植株A和植株B组成的，与植株A的基因型不同，因此与植株A基因型相同的只有④，D正确。 10. iPS细胞诞生于21世纪初，被称为诱导多能干细胞，可通过转入相关因子来制备。iPS细胞最初是在2006年科学家通过体外诱导小鼠成纤维细胞转化而来，后来发现已分化的T细胞、B细胞等也能在一定条件下被诱导成该类细胞。下列说法错误的是（ ） A. 导入的物质可以是DNA、蛋白质，还可用小分子物质来诱导 B. 与胚胎干细胞相比，iPS细胞具有细胞来源广泛，不需要破坏胚胎等优点 C. iPS细胞的体外培养需要在无菌的CO2培养箱中进行 D. T细胞、B细胞能被诱导为iPS细胞，说明体内细胞的分化是可逆的 【答案】D 【解析】 【详解】A、目前已采用多种方法来制备iPS细胞，包括借助载体将特定的基因导入细胞中，直接将特定的蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS细胞，A正确； B、胚胎干细胞需从早期胚胎或原始性腺中获取，存在伦理争议，而iPS细胞可从成纤维细胞、T细胞、B细胞等多种已分化体细胞诱导获得，来源广泛且无需破坏胚胎，B正确； C、iPS细胞的体外培养属于动物细胞培养，需要在无菌的CO₂培养箱中进行，其中CO₂的作用是维持培养液的pH稳定，C正确； D、T细胞、B细胞被诱导为iPS细胞是体外人工调控的结果，说明离体的已分化的细胞经过诱导可转化为能分化的状态，体内细胞的分化具有稳定性、不可逆性的特点，自然状态下已分化的细胞不会脱分化回到未分化状态，D错误。 11. 我国科学家采集了一只一岁半的、睡眠紊乱最明显的BMAL1（生物节律基因）敲除猴A6的体细胞，通过体细胞核移植技术，获得了5只克隆猴——这是国际上首次成功构建的一批遗传背景一致的生物节律紊乱猕猴模型。该成就填补了生物节律紊乱研究高等动物模型的空白。下列相关叙述错误的是（ ） A. 体细胞核移植技术的基础是动物细胞培养 B. 取自新鲜卵巢的卵母细胞不需要经过培养也可以直接作为受体细胞使用 C. 使用5只克隆猴细胞的核基因型与核供体细胞的完全一致 D. 该研究可以弥补实验猕猴繁殖周期长、单胎数量少的不足 【答案】B 【解析】 【详解】A、动物体细胞核移植过程中，供体细胞的培养、受体卵母细胞的培养都依赖动物细胞培养技术，因此动物细胞培养是体细胞核移植的基础，A正确； B、从新鲜卵巢中获取的卵母细胞还没有发育成熟，不能直接作为受体细胞，需要在体外培养到MⅡ期，才具备受精能力以及接受体细胞核并支持其发育的能力，B错误； C、这5只克隆猕猴是通过体细胞核移植技术获得的，其细胞核中的遗传物质来自核供体细胞，所以细胞核基因型与核供体细胞完全一致，C正确； D、体细胞核移植技术可以短时间内获得大量遗传背景一致的克隆个体，弥补了猕猴自然状态下繁殖周期长、单胎数量少的不足，D正确。 12. CD47是一种细胞膜表面糖蛋白，它与信号调节蛋白 α（SIRP α）形成信号复合物，促使癌细胞从巨噬细胞介导的吞噬作用中逃逸，从而抑制巨噬细胞的吞噬作用。为验证抗CD47的单克隆抗体可以减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，科学家按照如图流程进行了实验，下列叙述错误的是（ ） A. 实验流程中CD47充当抗原的作用 B. 融合、筛选得到的杂交瘤细胞不一定能产生抗CD47的单克隆抗体 C. 对照组应设置为：巨噬细胞＋肿瘤细胞共培养体系＋单克隆抗体 D. 预期实验结果为实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组 【答案】C 【解析】 【详解】A、用CD47免疫小鼠，则CD47充当抗原，A正确； B、小鼠脾脏中存在多种B淋巴细胞，融合后初次筛选得到的杂交瘤细胞，不一定都能产生抗CD47的单克隆抗体，需要进一步筛选，B正确； C、该实验需要验证抗CD47的单克隆抗体可以减弱CD47对巨噬细胞的抑制作用，自变量为是否加入抗CD47的单克隆抗体，故对照组应设置不加单克隆抗体的巨噬细胞和肿瘤细胞的共培养体系，C错误； D、实验组中加入了单克隆抗体，抗体与肿瘤细胞表面的CD47发生特异性结合，从而解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，而对照组中没有加入单克隆抗体，不能与肿瘤细胞表面的CD47结合，因而无法解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，因此，预期实验结果为实验组的巨噬细胞的吞噬能力高于对照组，D正确。 13. 从目标生物提取分离DNA是进行基因工程操作的基础。下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的叙述，正确的是（　　） A. 若选用鸡的成熟红细胞，可以加入一定量的蒸馏水，进行吸水涨破，进而破碎细胞 B. 若以新鲜菜花为实验材料，则研磨液过滤后保留沉淀 C. DNA溶于酒精，但某些蛋白质不溶于酒精，利用这一原理，可初步分离DNA和蛋白质 D. DNA溶液加入二苯胺试剂后就可呈蓝色 【答案】A 【解析】 【详解】A、鸡的成熟红细胞含有细胞核和DNA，将其放入蒸馏水中，细胞会因吸水涨破，从而释放出DNA，A正确； B、以新鲜菜花为实验材料时，研磨液过滤后应保留滤液（DNA溶解在滤液中），B错误； C、DNA不溶于酒精，但某些蛋白质溶于酒精，利用这一原理可以初步分离DNA和蛋白质，C错误； D、DNA溶液加入二苯胺试剂后，需要沸水浴加热才能呈现蓝色，D错误。 14. 脊椎动物早期胚胎发育包括：桑葚胚、囊胚及原肠胚等阶段，而原肠胚阶段包含三个将逐渐分化形成各种组织、器官的三个胚层。研究人员利用胚胎干细胞，在实验室中制造出不能发育成完整胚胎的“拟原肠胚”模型，用来揭示人类早期胚胎发育的过程。下列说法错误的是（ ） A. 囊胚阶段的滋养层细胞将来能发育成胎膜和胎盘的一部分 B. 利用核移植所得胚胎干细胞，可以诱导发育成适合移植的器官 C. 对原肠胚进行胚胎分割，可以提高移植胚胎的利用率 D. 该模型可以研究酒精、药物和病原体对胚胎发育的影响 【答案】C 【解析】 【详解】A、囊胚的滋养层细胞将来可发育成胎膜和胎盘的一部分，A正确； B、利用核移植得到的胚胎干细胞具有发育全能性，可诱导分化形成适合移植的器官，还可降低免疫排斥风险，B正确； C、胚胎分割需选择分化程度低、全能性高的桑葚胚或囊胚阶段进行，C错误； D、拟原肠胚模型可模拟人类早期胚胎发育过程，可用于研究酒精、药物和病原体对胚胎发育的影响，同时避免使用真实胚胎的伦理问题，D正确。 15. 质粒是基因工程中最常用的载体，质粒有标记基因如图所示，通过标记基因可以推知外源基因（目的基因）是否转移成功。质粒上箭头表示三种限制酶的酶切位点。外源基因插入的位置不同，细菌在培养基上的生长情况不同。下表是外源基因插入后（插入点有a，b，c）细菌的生长情况。下列有关叙述正确的是（ ） 细菌在含氨苄青霉素的培养基上生长情况 细菌在含四环素的培养基上生长情况 ① 能生长 不能生长 ② 能生长 能生长 ③ 不能生长 能生长 A. 质粒的复制原点上有DNA聚合酶结合位点，是基因转录的起点 B. ①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是b，②是a，③是c C. 环状质粒被一种限制酶切开一个酶切位点时，被水解的磷酸二酯键有2个 D. 将外源基因与质粒进行切割时需用DNA连接酶 【答案】C 【解析】 【详解】A、质粒的复制原点是复制的起始位点，转录的起始位点是启动子，A错误； B、如果外源基因插入点是a，会破坏此基因结构，使细菌在含有氨苄青霉素的培养基上不能生长；同理如果外源基因插入点b，使细菌在含有四环素的培养基上不能生长，①②③三种重组后细菌的外源基因插入点①是b，②是c，③是a，B错误； C、质粒被一种限制酶切开时，有两条链断裂，被水解的磷酸二酯键有2个，C正确； D、将外源基因与质粒连接时需用DNA连接酶，D错误。 故选C。 第II卷 非选择题（共55分） 二、综合填空题：本部分共5个大题，除标注外，每空2分，共55分。 16. 今年3月份，某中学高二年级的同学们在生活实践老师的指导下完成了“传统发酵食品制作”的实践活动，其中制作泡菜与果酒两项颇受学生欢迎。请根据所学知识，回答下列问题： （1）在泡菜腌制的过程中，要注意相关条件的控制。例如，要选择合格的泡菜坛，并用水封的方式密闭处理，以保证坛内发酵所需的_______环境。 （2）部分同学腌制的泡菜在进行品尝时，口味“咸而不酸”，请分析原因可能是_______。 （3）泡菜坛内常会出现一层白膜，这是由产膜酵母繁殖形成的。酵母菌的代谢类型为________可作为制作果酒的发酵生物。 （4）在果酒发酵过程中，酵母菌将葡萄糖分解为________和二氧化碳。同学们需要适时拧松发酵瓶的盖子，此操作的原因是________。 （5）制作果酒过程中，除酵母菌外还有其他微生物的生长，可以通过控制发酵条件，例如________（至少两项）等措施避免这些杂菌对发酵产生严重影响。 【答案】（1）无氧 （2）用盐过多，盐水浓度过高，抑制了乳酸菌等的代谢活动（或“杀死了乳酸菌等微生物”） （3）异养兼性厌氧型 （4） ①. 酒精 ②. 排出二氧化碳，防止发酵瓶爆裂 （5）发酵温度、溶液pH、氧气等 【解析】 【小问1详解】 乳酸菌是厌氧菌，故选择合格的泡菜坛，并用水封的方式密闭处理，目的是保证坛内乳酸菌发酵所需的无氧环境。 【小问2详解】 用盐过多， 盐水浓度过高，抑制了乳酸菌等的代谢活动，从而导致腌制的泡菜在进行品尝时，口味“咸而不酸”。 【小问3详解】 酵母菌是异养兼性厌氧型真菌，可进行有氧呼吸和无氧呼吸，其无氧呼吸会产生酒精，故酵母菌可作为制作果酒的发酵生物。 【小问4详解】 在果酒发酵过程中，酵母菌无氧呼吸将葡萄糖分解为酒精和二氧化碳。为排出二氧化碳，防止发酵瓶爆裂，故在果酒发酵过程中，需要适时拧松发酵瓶的盖子。 【小问5详解】 果酒中除了酵母菌，还有乳酸菌、醋酸菌等微生物，可以通过调节发酵温度、溶液pH、氧气等措施避免这些杂菌对发酵产生严重影响。 17. 聚对苯二甲酸乙二醇酯（PET）是一种聚酯塑料，会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题： （1）方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备_________培养基，可提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有________、水、无机盐等营养物质。 （2）方法2采用________技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要________、DNA连接酶、________等“分子工具”。 （3）除了上述2种方法之外，还可以通过________技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 【答案】（1） ①. 选择 ②. 氮源 （2） ①. 基因工程（或：转基因或重组DNA拼接） ②. 限制酶 ③. 载体 （3）诱变育种 【解析】 【小问1详解】 方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯为唯一碳源制备选择培养基，在该培养基中只有能利用磷脂酰乙醇酯的微生物能生长，其他微生物的生长被抑制，进而获得筛选出所需要的微生物，为了提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有水分、无机盐和氮源等营养物质，同时还需要提供微生物生长所需要的外界环境条件。 【小问2详解】 方法2采用基因工程技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基因，即目的基因外，该技术还需要限制酶、DNA连接酶和载体（或质粒）等“分子工具”，进而可以实现目的基因表达载体的构建。 【小问3详解】 除了上述2种方法之外，还可以通过诱变育种技术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物，该技术的原理是基因突变，由于基因突变具有不定向性，因而该技术具有盲目性。 18. 下图表示科学家通过植物细胞工程，培育“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的过程。根据所学知识完成下列问题： （1）在自然条件下，“矮牵牛”和“粉蓝烟草”进行有性杂交不能产生后代，原因是两者之间存在_______。 （2）利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的原理是_______。 （3）“矮牵牛—粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含_______条染色体，属_______倍体植株。 （4）植物体细胞融合技术依据的生物学原理是_______。人工诱导原生质体融合的方法基本可分为两大类——物理法和化学法，其中化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、________，植物体细胞融合完成的标志是_______。 【答案】（1）生殖隔离 （2）植物细胞具有全能性 （3） ①. 38 ②. 四 （4） ①. 细胞膜的流动性 ②. 高Ca2+—高pH融合法 ③. 杂种细胞再生出细胞壁 【解析】 【小问1详解】 矮牵牛和粉蓝烟草属于不同的物种，两者之间存在生殖隔离，因此在自然条件下矮牵牛和粉蓝烟草杂交不能产生后代。 【小问2详解】 利用矮牵牛的茎尖分生组织经过一系列实验操作可得到新的矮牵牛植株的原理是植物细胞的全能性，原因是矮牵牛的茎尖分生组织含有矮牵牛的全部遗传物质，所以在特定条件下其可发育为完整的植株。 【小问3详解】 “矮牵牛-粉蓝烟草”杂种植株的体细胞内含有的染色体数目是矮牵牛和粉蓝烟草的体细胞中染色体数目之和，为14+24=38，属于四倍体植株。 【小问4详解】 植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性。人工诱导原生质体融合的方法很多，基本可分为两大类：物理法和化学法，其中化学法主要用PEG（或聚乙二醇）促融、高Ca2+-高pH融合法等，杂种细胞再生出细胞壁是植物体细胞融合完成的标志。 19. Ⅰ．美西螈具有很强的再生能力。研究表明，美西螈的巨噬细胞在断肢再生的早期起重要作用。为研究巨噬细胞的作用机制，科研人员制备了抗巨噬细胞表面标志蛋白CD14的单克隆抗体，具体方法如下图。回答下列问题： （1）步骤①和步骤⑤分别向小鼠注射________和________。步骤②所用的SP2/0细胞的特点是_______。 （2）吸取③中的上清液到④的培养孔中，根据抗原—抗体杂交原理，需加入相应抗原进行专一抗体检测，检测过程发现有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体，原因是_______。 Ⅱ．随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （3）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用________（填数字）。 （4）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射_______，使用_______技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为_______。 （5）供体1完成体内受精的场所在________。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其________，胚胎移植前需要对受体进行________处理。 【答案】（1） ①. CD14蛋白##CD14抗原 ②. 分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞 ③. 能在体外无限增殖 （2）参与形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类多，有的不能分泌抗CD14抗体 （3）1、3 （4） ①. 促性腺激素 ②. 体细胞核移植 ③. 雌性 （5） ①. 输卵管 ②. 获能 ③. 同期发情 【解析】 【小问1详解】 步骤①是注射特定抗原，针对本实验目的，应该注射CD14蛋白（或CD14抗原）。步骤⑤是将分泌抗CD14抗体的杂交瘤细胞注入小鼠体内培养，以获得大量单克隆抗体。步骤②所用的SP2/0细胞是骨髓瘤细胞，特点是能在体外无限增殖。 【小问2详解】 根据抗原—抗体杂交原理，应该用CD14蛋白检测其中是否含抗CD14蛋白的抗体。因为形成杂交瘤细胞的B淋巴细胞种类很多，因此有些杂交瘤细胞不能分泌抗CD14抗体。 【小问3详解】 各途径生殖类型分析：应用1是体细胞核移植（克隆技术），属于无性繁殖；应用2是体外受精+胚胎移植，经过两性生殖细胞结合，属于有性繁殖；应用3是胚胎分割，同一个胚胎分割得到的后代基因型完全相同，属于无性繁殖；应用4仅获得组织器官，没有产生新个体。因此产生小牛的无性繁殖途径是1、3。  【小问4详解】 应用1中需要获取大量B卵母细胞，对供体2注射促性腺激素可实现超数排卵；该技术通过体细胞核移植技术将供体1的体细胞核移入去核卵母细胞，得到重组细胞；小牛的核遗传物质来自供体1（雌性高产奶牛），因此性别为雌性。 【小问5详解】 哺乳动物体内受精的场所是输卵管；体外受精时，精子必须经过获能处理才能获得与卵母细胞结合的能力；胚胎移植前需要对受体进行同期发情处理，使受体子宫的生理状态与供体一致，适宜胚胎着床发育。 20. BamHI和BclI是两种限制酶，其识别序列及切割位点如表所示。探究下列问题： 限制酶 BamH Ⅰ Bcl Ⅰ 识别序列及切割位点 （1）限制酶_______（填“能”或“不能”）切割原核细胞自身的DNA，推测其理由是________。 （2）若某链状DNA分子中含有两个BamHI的识别序列，该DNA分子将被BamHI切成_______个片段，共断裂________个磷酸二酯键。 （3）科学家利用BamHI切割某DNA分子获得目的基因片段，同时用BclI切割质粒，两者切割后产生的黏性末端能不能被DNA连接酶连接，作出判断并说明理由_______。若能连接，则获得的重组DNA分子能不能被BclI再次切割，作出判断并说明理由________。 【答案】（1） ①. 不能 ②. 原核细胞DNA中不存在限制酶的识别序列或能被识别的序列被修饰 （2） ①. 3 ②. 4 （3） ①. 能，二者切割后产生的黏性末端相同，可被DNA连接酶连接 ②. 不能，重组DNA分子中无BclI识别的核苷酸序列 【解析】 【小问1详解】 限制酶能切割外源DNA， 但不能切割原核细胞自身的DNA，其可能的原因是原核细胞DNA中不存在限制酶的识别序列或能被识别的序列被修饰。 【小问2详解】 若某链状DNA分子中含有两个BamHⅠ的识别序列，若用限制酶BamHⅠ识别并切割，则该DNA分子将被切成3个片段，每个识别序列被切割的过程中会断裂2个磷酸二酯键，共断裂4个磷酸二酯键。 【小问3详解】 BamHⅠ和BclⅠ切割后产生的黏性末端相同，均为5'-CTAG-3'，可见这两种限制酶切割产生的黏性末端能被DNA连接酶连接。连接后，碱基序列为5'-GGATCA-3'或5'-TGATCC-3'，重组DNA分子中无BclⅠ识别的核苷酸序列，因此不能被BclⅠ再次切割。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $