广东省汕尾市陆河县陆河外国语学校2025-2026学年度第二学期高二生物5月份期中考

**基本信息** 高二生物5月期中考聚焦传统发酵技术、微生物培养与细胞工程，以泡菜制作、单克隆抗体制备等真实情境为载体，融合实验分析与科研应用，强化科学思维与探究实践。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |选择题|16题/31分|发酵操作（泡菜坛水槽保水）、微生物培养（平板划线灭菌）、细胞工程（海拉细胞培养）|结合生活实例（腐乳制作）与经典实验（刚果红染色），考查操作细节与原理辨析| |非选择题|5题/69分|发酵工程（葡萄酒酿造）、微生物驯化（敌敌畏降解菌筛选）、植物组织培养（兰花茎尖培养）、单克隆抗体（Myo检测）|以实验流程为主线（如稀释涂布计数、脱分化培养），突出方案设计与结果分析，体现科学探究与态度责任|

2025-2026学年度第二学期高二生物5月份期中考 姓名： 班级： 考号： 1.泡菜、腐乳是人们比较喜爱的传统发酵食品。在家庭制作泡菜和腐乳的过程中，下列错误的是( A.制作泡菜时，向坛中加入适量陈泡菜水 B.泡菜坛盖边沿的水槽中一定要保持有水 C.制作腐乳时，先将豆腐块进行蒸煮灭菌 D.腐乳后期发酵阶段也要防止杂菌污染 2.甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如 所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。下列评价错误的是( 夹子 注：各发酵瓶的左侧管为充气管，右侧管为排气管。 A.丙装置设置有误，排气时可能会导致发酵液溢出 B.三个装置中酵母菌均先进行有氧呼吸，再进行酒精发酵 C,用酸性重铬酸钾溶液鉴定装置中是否有酒精产生 D.三个装置中发酵液pH下降的原因可能不同 3.下列关于传统发酵技术应用的叙述，错误的是（) A.家庭制作果酒、泡菜和腐乳时，对于原材料一般不需要严格灭菌 B.工厂化生产果酒时，需采用纯化的优良菌种，以避免杂菌污染 C.制作泡菜和腐乳时，一般会加入“老汤”，其作用是加速发酵 D.02、糖源充足时，醋酸菌先将糖分解为酒精，然后转变为乙酸 4.下图为实验室中酵母菌的纯培养部分操作步骤，下列说法错误的是( A.步骤①使用的培养基先调节了pH后再进行灭菌 B.③到④过程中，每次划线后都需要对接种环进行灼烧处理 C.步骤③接种环经灼烧灭菌后应趁热快速蘸取菌液 D.划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养 ① ② ③ (4 5.某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3盘，一盘取样冷藏， 使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列叙述正确的是() 每道不食用组一 餐前取 样冷藏 A.在固体培养基X上用稀释涂布平板法进行接种 研磨取 /菜分 加1000mL样 B.固体培养基X对菜品中的细菌有选择作用 3组 使用公筷组一餐后取 菜品 样冷藏 无菌水稀释 接 C.根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类 -不使用公筷组 种 D.理论上，不食用组的培养基上不会有菌落出现 冷藏计数培养固体培养基X」 6.最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，下列关于二者的比较，正确的是( 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 ① 需在无菌条件下操作 不需无菌操作 ② 培养基中不加琼脂 培养基中加有琼脂 3 不可计算菌液中的活菌数 可计算菌液中的活菌数 ④ 需要接种环 需要涂布器 A.③④B.②④C.①④ D.②③ 7.获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下列有关无菌技术的叙述，正确的是() A.操作者的双手清洁后，用无水乙醇擦拭消毒 B.巴氏消毒法处理的食品不含有微生物，可长期保存 C.平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作 D.培养基、培养皿等均须采用干热灭菌法灭菌 8.刚果红能与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖等发生这种反应， 纤维素被纤维素分解菌分解后，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。某同学利用刚果红配制培养基， 分离土壤中能分解纤维素的微生物并观察菌落数。下列叙述正确的是( A.用平板划线法接种后统计平板上的菌落数，统计值比活菌实际数低 B.透明圈出现的原因是菌落周围的纤维素被微生物产生的纤维素酶分解 C.应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化 D.以纤维素为唯一碳源且加入刚果红的培养基从功能上分属于选择培养基 9.植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理相符的是() A.原生质体融合和动物细胞融合一生物膜选择透过性 B.动物细胞培养一细胞的全能性 C.纤维素酶、果胶酶处理—酶的高效性 D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养一细胞增殖 10.海拉细胞是从一位患宫颈癌的病人身上分离出来的宫颈癌细胞，该病人已经去世，但海拉细胞直到今 天还被用于科学研究。下列说法正确的是（) A.海拉细胞可在体外大量增殖，在细胞培养过程中会出现接触抑制现象 B.将癌变的宫颈癌组织分散为单个的海拉细胞，可用胃蛋白酶处理 C.培养海拉细胞时，02是细胞代谢所必需的，可将培养皿置于含有95%的02和5%的C02的混合气体的C02 培养箱中进行培养 D.培养液需定期更换，以便清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 11.如图为用胡萝卜韧皮部细胞培育胡萝卜植株的过程示意图，下列有关分析错误的是（ 分 脱分化再分化《 离体的韧 皮部细胞 胚状体试管苗 A.脱分化是让已分化的细胞转变成未分化的细胞 B.再分化受相关植物激素的浓度、比例的影响 C.经脱分化形成的组织细胞易受外界因素影响而产生突变 D.整个培养过程都应在无菌条件下进行，以免杂菌污染 12.目前，人造皮肤已经被应用到临床皮肤移植手术上，人造皮肤的制造过程离不开细胞培养技术。下列 有关说法错误的是() A.可通过培养患者的皮肤细胞得到人造皮肤，以降低皮肤移植后的排斥反应 B.可以用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理细胞组织，以便得到单个细胞 C.培养箱中应该设置适宜的温度和纯氧环境，以保证细胞的有氧呼吸 D.当贴壁培养细胞出现接触抑制时，需要分瓶进行传代培养 13.北京大学邓宏魁团队首次在国际上使用化学小分子诱导人成体细胞转变为多潜能干细胞（人CP$细 胞)，并获得了功能成熟的人CⅰPS细胞来源的胰岛细胞，同时还在糖尿病动物模型中验证了其安全性和有 效性。下列叙述正确的是() A.人CiPS细胞具有自我更新和分化的能力 B.人CiPS细胞分化成胰岛细胞的过程体现了细胞全能性 C.小分子化学物质通过改变体细胞的遗传物质获得了人CiPS细胞 D.成体细胞转变为人CiPS细胞过程中，蛋白质的种类未发生改变 1 14.某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。下列有关叙述正确的是( 1 mL 1mL m 0.1mL A.鲜奶常采用湿热灭菌法进行灭菌 B.若培养基需要调节pH,应该在灭菌后培养基凝固前立即进行 C.若3个培养皿中菌落数为35、33、34，则鲜奶中细菌数为 培养皿 3.4×10°个/mlL 90mL无菌水+ 9 mL 9 mL 9 mL 10mL鲜奶 无菌水无菌水无菌水 D.对鲜奶中细菌计数，常采用稀释涂布平板法，统计的结果 往往比实际值偏高 15.下列有关微生物培养基的配制，叙述错误的是（) A.培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源 B.尿素固体培养基中的KH2P04能用于维持培养基的pH C.培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需要提供有机物 D.马铃薯蔗糖固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源 16.HCG是受孕后体内分泌的一种糖蛋白激素。在妊娠早期，HCG的浓度迅速升高，检测尿中的HCG即可 检测是否妊娠。科学家以HCG为抗原制备出单克隆抗体，并发明了早孕检测试剂，可在受精后10d左右 诊断妇女是否怀孕（如图）。下列相关叙述错误的是() 控制线(C) A.用纯化的HCG反复注射到小鼠体内，产生的抗体为单克隆技术 MAX- 弱 反应线(T) 阴 B.经选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞经多次筛选才可生产单克隆抗体 性 C.用PEG诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交细胞不止一种 D.使用早孕检测试剂检测妇女是否怀孕的特点是快捷、准确、高效 怀孕 未怀孕 无效 17.发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产品的过 程。发酵工程则是通过现代工程技术，利用微生物的特定功能，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌 种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。请据此回答与发酵及发酵工程相关的问题。 ()在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别是葡萄皮上的 和空气中 的 。酿酒时，操作不当会使酒变酸，此时酒表面会观察到一层膜，这层膜是 形成的。 (2)利用发酵工程可以大量生产产品，发酵工程的中心环节是 (3)为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6×10°个，在4个培养 基上分别接种土壤样液0.1mL,培养后菌落数分别为170、155、176、139个，则土壤样品的稀释倍数为 测定的活菌数往往比实际活菌数 (填“多”“少”或“基本一致”)。 18.微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让微生物逐渐适应，从而得到对此物质高 耐受或能降解该物质的微生物。科研人员采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药 一敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题： 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL Y mL 逐步加入 物质X 接种 挑选单菌落 3 23 培养基C9mL9mL9mL9mL培养基D 驯化培养基A 培养基B 无菌水无菌水无菌水无菌水 (1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是 依照物理性质划分，驯化培养基属于 培养基。 (2)用于筛选的样品应来自 的土壤。将驯化后的微生物接种 于培养基B的方法为 (3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C中，培养24小时后，通过 测定培养基中 可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微 2 生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板D,统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养 基C中活菌数为1.25×10个/mL,则涂布的菌液Y为 ml。 19.尿素[C0(NH)]是农业生产上一种重要的氮肥，但是不能被农作物直接吸收，土壤中的某些细菌能合成 脲酶，可以将尿素分解成氨和C0，然后被植物利用。为分离和培养土壤中能分解尿素的细菌，某实验小 组要完成活动“从土壤中分离出能分解尿素的细菌”，部分操作过程如图。回答下列问题： 土壤 接种 稀释倍数为103~10的试管 含尿素培养基 (1)在该实验活动中，配制培养基需要以 为唯一氮源，还需要添加葡萄糖，原因是 配制该培养基需要采用 法灭菌。 (2)在进行实验时，甲同学从对应10°倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落，但是其他同学在同样稀 释度下只筛选出大约90个菌落。若甲同学的结果有问题，则可能的原因是 (答 一项)。若培养时观察到培养基上的菌落连成一片，则最可能的原因是 (3)测定能分解尿素的细菌的数量可以借助 直接计数，这种方法得到的结果一般比用稀释涂 布平板法得到的结果 (填“偏大”或“偏小”)。 20.（14分)我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放在培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图 是植物组织培养形成兰花植株示意图，请据图分析并回答问题。 兰花植株①茎尖的切片 (1)过程③和过程④分别表示和 @ (2)在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素及 试管植物 从切片中分离的茎尖细胞 氨基酸外，还需要在培养基中加入 。同时，在培养 ⑤ ③ 过程中，除必需的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的 胚状体 ④ 愈伤组织 一个关键是操作过程必须保证 (3)从育种的角度看，植物组织培养与有性生殖相比，优势主要有（列举2条）： (4)在植物组织培养的过程中，可以对」 进行化学或物理的诱变处理，促使其发生突变，再通过诱 导分化形成植株，从中选育出优良品种。这种作物新品种的培育方法属于 (⑤)若将兰花的茎尖细胞换成兰花的花粉粒经组织培养形成植株，再用秋水仙素处理获得新品种，这种育 种方法称为 ,其优点是 0 21.人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。以下制备抗Myo的单克隆抗体研究。 (1)科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠，取小鼠的脾中的B淋巴细胞与 细胞诱导融合。用 培养基筛选融合细胞，得到杂交瘤细胞。 (2)双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： 检测 产 固相 品底物剑，铲物 抗体o抗原。以抗体6一 固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的 (相同部位/不同部 位)结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 ①与待测抗原特异性结合；②酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 ③将抗原固定在固相载体上 (3)研究人员获得三种抗Myo单克隆抗体，分别记为A、B、C。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹 心法，科研人员需要进行 组实验，检测并比较各组实验的陆河外国语学校 ▣游回 2025-2026学年度第二学期高二生物5月份期中 准考证号 姓名： 班级： 注意事项： 1、请注意客观题填涂需清晰，完整覆盖选项。 2、保持卡面清洁，不要折叠，不要弄破。 正确填涂■ 缺考填涂标记☐ 9 9 9 、 客观题(40分) 1 ABCD 5 AB□CD 9A D 13AOBCD] 2 A B 6 D 10 D 14ABCD A 7 B D 11 D 4 AB D 8 D 12 CD 二、 填空题(60分) 17(1) 「2分1 「2分1 2分1 (2) [2分1 (3) 「2分1 [2分1 18(1) [2分1 2分1 (2) [2分1 [2分1 (3) [2分1 [2分] 191) [2分1 [2分1 [2分1 (2) [2分1 [2分1 (3) [2分1 [2分1 请在各题目的答题区域内作答，超出边框的答案无效 第1页（共4页） ■ 20(1) [1分1 [1分1 (2) 1分] [1分1 (3) 「2分1 (4) [1分1 「1分1 (5) [1分1 「1分1 21 [2分1 [2分1 [2分1 「2分1 「2分1 「2分1 ■ 请在各题目的答题区域内作答，超出边框的答案无效 ■ 第2页（共4页） 2025-2026学年度第二学期高二生物5月份期中考 1 学科网（北京）股份有限公司 姓名：_______________ 班级：__________________ 考号：_______________________ 1.(2024·吉林长春外国语学校高二期末)泡菜、腐乳是人们比较喜爱的传统发酵食品。在家庭制作泡菜和腐乳的过程中，下列操作错误的是(　　) A.制作泡菜时，向坛中加入适量陈泡菜水 B.泡菜坛盖边沿的水槽中一定要保持有水 C.制作腐乳时，先将豆腐块进行蒸煮灭菌 D.腐乳后期发酵阶段也要防止杂菌污染 答案　C 解析　陈泡菜水中有泡菜发酵需要的微生物，因此，加入适量陈泡菜水有利于加快泡菜成熟速度，A正确；泡菜发酵需要严格的无氧环境，因此泡菜发酵过程中，需要特别注意保持隔绝空气，即泡菜坛盖边沿的水槽中一定要保持有水，B正确；制作腐乳时，豆腐块不能进行蒸煮灭菌，否则不仅会影响腐乳的“形”，还会影响到天然菌种的获得，C错误；腐乳制作的后期发酵阶段时间比较长，需要注意防止杂菌污染，以防引起腐败变质，D正确。 2.(2024·东北育才中学质检)甲、乙、丙三位同学将葡萄榨成汁后分别装入相应的发酵瓶中，在温度等适宜的条件下进行发酵，如图所示。发酵过程中，每隔一段时间均需排气一次。下列评价错误的是(　　) 注：各发酵瓶的左侧管为充气管，右侧管为排气管。 A.丙装置设置有误，排气时可能会导致发酵液溢出 B.三个装置中酵母菌均先进行有氧呼吸，再进行酒精发酵 C.用酸性重铬酸钾溶液鉴定装置中是否有酒精产生 D.三个装置中发酵液pH下降的原因可能不同 答案　B 解析　丙装置排气管管口在液面以下，排气时可能会导致发酵液从排气管溢出，A正确；甲装置一直处于通气状态，酵母菌主要进行有氧呼吸，无法进行酒精发酵，B错误；检测酒精的产生可以用酸性重铬酸钾溶液，C正确；甲装置未夹住发酵瓶的充气管，可能有醋酸菌污染，从而生成乙酸，导致pH降低；乙、丙装置中酵母菌进行有氧呼吸或无氧呼吸产生CO2，导致pH降低，D正确。 3.(2024·福州一中质检)下列关于传统发酵技术应用的叙述，错误的是(　　) A.家庭制作果酒、泡菜和腐乳时，对于原材料一般不需要严格灭菌 B.工厂化生产果酒时，需采用纯化的优良菌种，以避免杂菌污染 C.制作泡菜和腐乳时，一般会加入“老汤”，其作用是加速发酵 D.O2、糖源充足时，醋酸菌先将糖分解为酒精，然后转变为乙酸 答案　D 解析　家庭制作果酒、泡菜和腐乳时所需菌种均来自原材料中天然存在的微生物，不必对原材料进行严格灭菌，A正确；工厂化生产果酒时采用纯化的优良菌种，可避免杂菌污染，提高产品品质，B正确；“老汤”中含有发酵所需的菌种，制作泡菜和腐乳时，利用“老汤”会加速发酵的进程，C正确；当O2、糖源充足时，醋酸菌能将糖分解成乙酸，D错误。 4.(2024·江苏连云港期中)下图为实验室中酵母菌的纯培养部分操作步骤，下列说法错误的是(　　) A.步骤①使用的培养基先调节了pH后再进行灭菌 B.③到④过程中，每次划线后都需要对接种环进行灼烧处理 C.步骤③接种环经灼烧灭菌后应趁热快速蘸取菌液 D.划线接种结束后，将图④平板倒置后放入培养箱中培养 答案　C 解析　步骤①为倒平板，使用的培养基需要先调节pH再进行灭菌，避免调节pH时造成污染，A正确；③到④过程中，每次划线后都要对接种环进行灼烧处理，是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，B正确；步骤③中接种环经灼烧灭菌后应冷却后再蘸取菌液，防止温度过高杀死菌种，C错误；划线接种结束后，将平板倒置放入培养箱中培养，可以防止培养皿皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确 5.(2024·湖北统考模拟预测)某兴趣小组为研究“使用公筷对餐后菜品细菌数量的影响”，将每道菜分为3盘，一盘取样冷藏，一盘使用公筷，一盘不用公筷，实验过程如下图。下列叙述正确的是(　　) A.在固体培养基X上用稀释涂布平板法进行接种 B.固体培养基X对菜品中的细菌有选择作用 C.根据菌落的特征可以准确判断细菌的种类 D.理论上，不食用组的培养基上不会有菌落出现 答案　A 解析　由题图分析可知，实验中对菌落进行了计数，采用的接种方法是稀释涂布平板法，A正确；该固体培养基属于基本培养基，所以对菜品中的细菌没有选择作用，B错误；在一定培养条件下，不同的微生物表现出各自稳定的菌落特征，根据菌落的形状、大小和颜色等特征，可以初步区分出不同种微生物，但不能准确判断，C错误；不食用组的菜品，正常情况下也有微生物存在，培养基上会有菌落出现，D错误。 6.(2024·广东中山纪念中学)最常用的接种微生物的方法是平板划线法和稀释涂布平板法，下列关于二者的比较，正确的是(　　) 项目 平板划线法 稀释涂布平板法 ① 需在无菌条件下操作 不需无菌操作 ② 培养基中不加琼脂 培养基中加有琼脂 ③ 不可计算菌液中的活菌数 可计算菌液中的活菌数 ④ 需要接种环 需要涂布器 A.③④ B.②④ C.①④ D.②③ 答案　A 解析　平板划线法和稀释涂布平板法都需要进行无菌操作，以避免杂菌污染， ①错误；平板划线法和稀释涂布平板法都使用固体培养基，培养基中都加有琼脂，②错误；稀释涂布平板法可计算菌液中的活菌数，平板划线法不能计算菌液中的活菌数，③正确；平板划线法使用接种环或接种针进行接种，而稀释涂布平板法使用涂布器进行接种，④正确。 7.(2024·江苏响水中学高二开学考试)获得纯培养物的关键是防止外来杂菌的入侵。下列有关无菌技术的叙述，正确的是(　　) A.操作者的双手清洁后，用无水乙醇擦拭消毒 B.巴氏消毒法处理的食品不含有微生物，可长期保存 C.平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作 D.培养基、培养皿等均须采用干热灭菌法灭菌 答案　C 解析　操作者的双手清洁后，用体积分数为75%的酒精擦拭消毒，不能用无水乙醇进行消毒，A错误；巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底杀死，仍会有部分较耐热的细菌或细菌芽孢存在，故不能长期保存，B错误；平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作，以保证接种时处于无菌的环境，防止杂菌污染，C正确；培养皿等玻璃器皿可采用干热灭菌法灭菌，而培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，D错误。 8.(2024·河南部分重点中学高二下月考)刚果红能与纤维素形成红色复合物，但并不与纤维素水解后形成的纤维二糖和葡萄糖等发生这种反应，纤维素被纤维素分解菌分解后，培养基中会出现以这些菌为中心的透明圈。某同学利用刚果红配制培养基，分离土壤中能分解纤维素的微生物并观察菌落数。下列叙述正确的是(　　) A.用平板划线法接种后统计平板上的菌落数，统计值比活菌实际数低 B.透明圈出现的原因是菌落周围的纤维素被微生物产生的纤维素酶分解 C.应选择菌落直径与周围透明圈直径比值大的菌落进行纯化 D.以纤维素为唯一碳源且加入刚果红的培养基从功能上分属于选择培养基 答案　B 解析　平板划线法不能用于菌落的计数，A错误；刚果红染料能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素分解菌产生的纤维素酶分解后，红色复合物消失，在菌落周围会出现透明圈，B正确；菌落周围形成的透明圈的直径与菌落直径的比值可反映菌落分解纤维素的能力，该值越大，说明该菌分解纤维素的能力越强，故应选择周围透明圈直径与菌落直径比值大的菌落进行纯化，C错误；以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选能分解纤维素的微生物，属于选择培养基，而在该培养基中加入刚果红则可以鉴别能产生纤维素酶的微生物，从功能上分属于鉴别培养基，D错误。 9.(2024·河南开封高二期中)植物体细胞杂交与动物细胞工程中所用技术与原理相符的是(　　) A.原生质体融合和动物细胞融合——生物膜选择透过性 B.动物细胞培养——细胞的全能性 C.纤维素酶、果胶酶处理——酶的高效性 D.紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养——细胞增殖 答案　D 解析　原生质体融合和动物细胞融合的过程中，都利用了细胞膜的流动性，A不符合题意；动物细胞培养没有利用细胞的全能性，利用了细胞增殖的原理，B不符合题意；植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用酶的专一性，纤维素酶和果胶酶能够去除植物细胞的细胞壁，C不符合题意；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养都利用了细胞增殖的原理，D符合题意。 10.(2024·河北承德高二期中)海拉细胞是从一位患宫颈癌的病人身上分离出来的宫颈癌细胞，该病人已经去世，但海拉细胞直到今天还被用于科学研究。下列说法正确的是(　　) A.海拉细胞可在体外大量增殖，在细胞培养过程中会出现接触抑制现象 B.将癌变的宫颈癌组织分散为单个的海拉细胞，可用胃蛋白酶处理 C.培养海拉细胞时，O2是细胞代谢所必需的，可将培养皿置于含有95%的O2和5%的CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养 D.培养液需定期更换，以便清除代谢废物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 答案　D 解析　海拉细胞为癌细胞，具有无限增殖的能力，在细胞培养过程中不会出现接触抑制现象，A错误；将癌变的宫颈癌组织分散为单个的海拉细胞，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，不能用胃蛋白酶，B错误；培养海拉细胞时，O2是细胞代谢所必需的，可将培养皿置于含有95%的空气和5%的CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，C错误。 11.(2024·湖南衡阳八中调研)如图为用胡萝卜韧皮部细胞培育胡萝卜植株的过程示意图，下列有关分析错误的是(　　) A.脱分化是让已分化的细胞转变成未分化的细胞 B.再分化受相关植物激素的浓度、比例的影响 C.经脱分化形成的组织细胞易受外界因素影响而产生突变 D.整个培养过程都应在无菌条件下进行，以免杂菌污染 答案　D 解析　脱分化是指已经分化的细胞在一定激素和营养条件的诱导下，失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞的过程，A正确；生长素和细胞分裂素的浓度、比例等均会影响脱分化和再分化过程，B正确；愈伤组织细胞处于不断分裂的状态，易受外界因素影响而产生突变，C正确；在愈伤组织长出芽等器官后，植物可以进行光合作用，进而制造有机物，此后的阶段不需要严格的无菌条件，D错误。 12.(2024·河北石家庄高二期中联考)目前，人造皮肤已经被应用到临床皮肤移植手术上，人造皮肤的制造过程离不开细胞培养技术。下列有关说法错误的是(　　) A.可通过培养患者的皮肤细胞得到人造皮肤，以降低皮肤移植后的排斥反应 B.可以用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理细胞组织，以便得到单个细胞 C.培养箱中应该设置适宜的温度和纯氧环境，以保证细胞的有氧呼吸 D.当贴壁培养细胞出现接触抑制时，需要分瓶进行传代培养 答案　C 解析　用于人造皮肤的细胞取自患者本身而非其他个体，可以有效降低皮肤移植后的排斥反应，A正确；组织中细胞间的主要成分为蛋白质，可以用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理细胞组织，以便得到单个细胞，但是处理时间不宜过长，B正确；培养箱中应该设置适宜的温度、含95%空气和5%CO2的混合气体环境，既可以保证细胞的有氧呼吸，又可以维持培养液的pH，C错误；当贴壁培养细胞出现接触抑制时，需要用胰蛋白酶等处理，将接触的细胞分散为单个细胞，之后再分瓶进行传代培养，D正确。 13.(2024·哈六中高二期末)北京大学邓宏魁团队首次在国际上使用化学小分子诱导人成体细胞转变为多潜能干细胞(人CiPS细胞)，并获得了功能成熟的人CiPS细胞来源的胰岛细胞，同时还在糖尿病动物模型中验证了其安全性和有效性。下列叙述正确的是(　　) A.人CiPS细胞具有自我更新和分化的能力 B.人CiPS细胞分化成胰岛细胞的过程体现了细胞全能性 C.小分子化学物质通过改变体细胞的遗传物质获得了人CiPS细胞 D.成体细胞转变为人CiPS细胞过程中，蛋白质的种类未发生改变 答案　A 解析　人CiPS细胞属于干细胞，具有自我更新和分化的能力，A正确；人CiPS细胞分化成胰岛细胞的过程未体现细胞全能性，B错误；使用小分子化学物质诱导改变体细胞中基因的表达获得了人CiPS细胞，但该过程中遗传物质未发生改变，C错误；成体细胞转变为人CiPS细胞的过程中，细胞的形态、结构和功能发生了改变，由此可知细胞中蛋白质的种类发生了改变，D错误。 14.(2024·广东高三校联考阶段练习)某兴趣小组按如图方法对没有加工的鲜奶进行细菌检测。下列有关叙述正确的是(　　) A.鲜奶常采用湿热灭菌法进行灭菌 B.若培养基需要调节pH，应该在灭菌后培养基凝固前立即进行 C.若3个培养皿中菌落数为35、33、34，则鲜奶中细菌数为3.4×106个/mL D.对鲜奶中细菌计数，常采用稀释涂布平板法，统计的结果往往比实际值偏高 答案　C 解析　鲜奶是不耐高温的液体，常采用巴氏消毒法进行消毒，A错误；若培养基需要调节pH，应该在灭菌前进行，B错误；从题图中可以看出涂布时添加的0.1 mL的鲜奶共稀释了104倍，所以鲜奶中细菌数为(35＋33＋34)÷3÷0.1×104＝3.4×106(个/mL)，C正确；使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。 15.(2024·吉林一中期末)下列有关微生物培养基的配制，叙述错误的是(　　) A.培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源 B.尿素固体培养基中的KH2PO4能用于维持培养基的pH C.培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需要提供有机物 D.马铃薯蔗糖固体培养基中的琼脂能作为酵母菌的碳源 答案　D 解析　硝化细菌是化能自养型生物，可利用氧化NH3获得能量，将无机物转化为有机物，故培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源，A正确；尿素固体培养基中的KH2PO4能用于维持培养基的pH，保证微生物生长繁殖所需的酸碱环境，B正确；培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需要提供有机物，蓝细菌可利用二氧化碳和水合成有机物，C正确；琼脂是凝固剂，不能作为碳源，D错误。 16.(2024·湖南长郡中学调研)HCG是受孕后体内分泌的一种糖蛋白激素。在妊娠早期，HCG的浓度迅速升高，检测尿中的HCG即可检测是否妊娠。科学家以HCG为抗原制备出单克隆抗体，并发明了早孕检测试剂，可在受精后10 d左右诊断妇女是否怀孕(如图)。下列相关叙述错误的是(　　) A.用纯化的HCG反复注射到小鼠体内，产生的抗体为单克隆技术 B.经选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞经多次筛选才可用于生产单克隆抗体 C.用PEG诱导B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交细胞不止一种 D.使用早孕检测试剂检测妇女是否怀孕的特点是快捷、准确、高效 答案　A 解析　单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞分泌的，A错误；经选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞经多次单一抗体筛选才可用于生产单克隆抗体，B正确；经PEG诱导融合后的细胞有B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞等，C正确；使用早孕检测试剂检测妇女是否怀孕，利用了抗原和抗体特异性结合的原理，其特点是快捷、准确、高效，D正确。 17.(10分)发酵是指人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产品的过程。发酵工程则是通过现代工程技术，利用微生物的特定功能，规模化生产对人类有用的产品。它涉及菌种的选育和培养、产物的分离和提纯等方面。请据此回答与发酵及发酵工程相关的问题。 (1)在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别是葡萄皮上的________和空气中的________。酿酒时，操作不当会使酒变酸，此时在酒的表面会观察到一层膜，这层膜是________________________形成的。 (2) 利用发酵工程可以大量生产产品，发酵工程的中心环节是________。 (3) 为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6×106个，在4个培养基上分别接种土壤样液0.1 mL，培养后菌落数分别为170、155、176、139个，则土壤样品的稀释倍数为________，测定的活菌数往往比实际活菌数________(填“多”“少”或“基本一致”)。 答案　(1)野生酵母菌　毛霉　醋酸菌在液面大量繁殖　(2) 发酵罐内发酵　(3)103　少 解析　(1)在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别是葡萄皮上附着的野生酵母菌和空气中的毛霉。酿酒时，操作不当会使酒变酸，这是醋酸菌活动的结果，此时在酒的表面会观察到一层膜，该膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的。(2)利用发酵工程可以大量生产产品，微生物在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。 (3) 为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6×106个，在4个培养基上分别接种土壤样液0.1 mL，培养后菌落数分别为170、155、176、139个，设稀释倍数是x，可列出方程式为(170＋155＋176＋139)÷4÷0.1×x＝1.6×106，解得x＝103，即土壤样品的稀释倍数为103，该方法测定的活菌数比实际活菌数少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 18.(12分)(2024·山东济南高二下期末)微生物驯化是指在微生物培养过程中，逐步加入某种物质，让微生物逐渐适应，从而得到对此物质高耐受或能降解该物质的微生物。科研人员采用微生物驯化结合传统接种的方法筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，并设计了如下实验流程。请据此回答以下问题： (1)已知驯化培养基成分为蛋白胨、葡萄糖、氯化钠、磷酸二氢钾、水等，驯化时逐步加入的物质X是________。依照物理性质划分，驯化培养基属于________培养基。 (2)用于筛选的样品应来自________________________________________的土壤。将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为________。 (3)将培养基B中分离得到的单菌落分别接种于以敌敌畏为唯一碳源的培养基C中，培养24小时后，通过测定培养基中________________________，可筛选分解敌敌畏能力较强的微生物。为统计培养基C中的微生物数量，在如图所示的稀释度下涂布了4个平板D，统计菌落数分别为250、247、312、253，测得培养基C中活菌数为1.25×107个/mL，则涂布的菌液Y为________mL。 答案　(1)敌敌畏　液体　(2)(常年)施用敌敌畏(或被敌敌畏污染)　平板划线法　(3)敌敌畏的剩余量　0.2 解析　(1)该实验目的是筛选能高效降解敌敌畏的微生物，故驯化时往培养液中逐步加入的物质X是敌敌畏。由题干信息可知，该驯化培养基中并未加入凝固剂(如琼脂)，故依照物理性质划分，该驯化培养基属于液体培养基。(2)为了筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏或被敌敌畏污染的土壤，这样能够增加获得目的菌的概率。结合题图可知，将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为平板划线法。 (3)单位时间内剩余的敌敌畏越少，说明筛选出的微生物分解敌敌畏的能力越强，故培养24 h后，通过测定培养基C中敌敌畏的剩余量，可筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物。微生物计数时应选择菌落数目在30～300的平板进行计数，故选择菌落数分别为250、247、253的平板，菌落的平均数(250＋247＋253)÷3＝250(个)，由图可知，培养基C中的1 mL菌液的稀释倍数是104，可得算式×104＝1.25×107，故涂布的菌液Y＝0.2(mL)。 19.(12分)(2024·河南洛阳阶段练习)尿素[CO(NH2)2]是农业生产上一种重要的氮肥，但是不能被农作物直接吸收，土壤中的某些细菌能合成脲酶，可以将尿素分解成氮和CO2，然后被植物利用。为分离和培养土壤中能分解尿素的细菌，某实验小组要完成活动“从土壤中分离出能分解尿素的细菌”，部分操作过程如图。回答下列问题： (1)在该实验活动中，配制培养基需要以________为唯一氮源，还需要添加葡萄糖，原因是____________，配制该培养基需要采用____________________法灭菌。 (2)在接种前需要对样品进行稀释处理，以保证获得菌落数在30～300个、适于计数的平板。该实验活动一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，若测定放线菌数量，则需要采用与此不一样的稀释倍数，原因是 _____________________________________________________________________。 (3)在进行实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落，但是其他同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落。若甲同学的结果有问题，则可能的原因是________________________(答出一项即可)。若培养时观察到培养基上的菌落连成一片，则最可能的原因是________________________________。 (4)测定能分解尿素的细菌的数量可以借助____________直接计数，这种方法得到的结果一般比用稀释涂布平板法得到的结果________(填“偏大”或“偏小”)。 答案　(1)尿素　分解尿素的细菌为异养生物，葡萄糖可为其提供碳源　高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)　(2)土壤中各类微生物的数量是不同的　(3)培养基被杂菌污染(或培养基中混入了其他含氮物质)　菌液浓度过高、土壤溶液稀释倍数不够或接种时未将细菌充分分散开来 (4)显微镜、血细胞计数板　偏大 解析　(1)该实验是从土壤中分离出能分解尿素的细菌，需要以尿素为唯一氮源，该培养基中需要添加葡萄糖为分解尿素的细菌提供碳源，原因是尿素分解菌为异养生物，不能利用无机碳源，只能利用现成的有机碳源。培养基要用高压蒸汽灭菌法灭菌。(2)在接种前需要对样品进行稀释处理，以保证获得菌落数在30～300个、适于计数的平板。测定土壤中细菌的数量，一般选用104、105、106倍的稀释液进行平板培养，若测定放线菌数量，则需要采用与此不一样的稀释倍数，原因是土壤中各类微生物的数量是不同的，所以分离不同的微生物需要采用不一样的稀释倍数。(3)在进行实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落，但是其他同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落，若甲同学的结果有问题，则可能的原因是培养基被杂菌污染或培养基中混入了其他含氮物质，使得培养基上不止尿素分解菌这一种微生物。菌落连成一片是因为菌液浓度过高、土壤稀释倍数不够或接种时未将细菌充分分散开。(4)分解尿素的细菌用肉眼观察不到，需要借助于显微镜和血细胞计数板观察，用显微镜和血细胞计数板直接计数，无法区分活菌和死菌，得到的数据偏大。 20.(14分)(2024·河南名校联盟)我国植物学家将名贵兰花的茎尖细胞放在培养基中进行培养，最终发育成完整的新植株。下图是植物组织培养形成兰花植株示意图，请据图分析并回答问题。 (1)过程③和过程④分别表示______和______。 (2)在培养过程中，除了提供水分、无机盐、糖类、维生素及氨基酸外，还需要在培养基中加入 ________。同时，在培养过程中，除必需的温度、光照和氧气等外界条件外，成功的另一个关键是操作过程必须保证________________。 (3)从育种的角度看，植物组织培养与有性生殖相比，优势主要有(列举2条)： ______________________________________________________________________ _____________________________________________________________________。 (4)在植物组织培养的过程中，可以对________进行化学或物理的诱变处理，促使其发生突变，再通过诱导分化形成植株，从中选育出优良品种。这种作物新品种的培育方法属于________________。 (5)若将兰花的茎尖细胞换成兰花的花粉粒经组织培养形成植株，再用秋水仙素处理获得新品种，这种育种方法称为____________，其优点是 ______________________________________________________________________。 答案　(1)脱分化　再分化　(2)植物激素(或植物生长调节剂)　无菌　(3)能保持亲本的优良性状；培养周期短，繁殖效率高；能培育无病毒植株　(4)愈伤组织　突变体的利用(或诱变育种)　(5)单倍体育种　能明显缩短育种年限 解析　(1)过程③为脱分化，过程④为再分化。(2)在植物组织培养过程中，不论是脱分化还是再分化，都需要植物激素刺激，并且要求操作过程必须保证无菌。 (3) 植物组织培养的实质是一种无性繁殖，与有性生殖相比，具有能保持亲本的优良品质、培养周期短、繁殖效率高、能培育无病毒植株等优点。(4)突变体的利用的操作对象是愈伤组织。(5)单倍体育种的突出优点是能明显缩短育种年限。 21.(14分)(2024·山东烟台调研)人肌红蛋白(Myo)是早期诊断急性心肌梗塞的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员进行研究。 (1)科研人员以Myo作为抗原免疫小鼠，取小鼠的脾中的B淋巴细胞与________细胞诱导融合。用________培养基筛选融合细胞，得到杂交瘤细胞。 (2) 双抗体夹心法是医学上常用的定量检测抗原的方法，具体原理如下图： 固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的________（相同部位/不同部位）结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是 。 ①与待测抗原特异性结合； ②酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量 ③将抗原固定在固相载体上 (3)研究人员获得三种抗Myo单克隆抗体，分别记为A、B、C。为检测它们之中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行________组实验，检测并比较各组实验的________。 答案　(1)骨髓瘤　选择　(2)　(3)不同部位　①② (4)6　产物量 解析　(1)根据题意分析，制备单克隆抗体时应该取小鼠的脾中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，再用选择培养基筛选融合细胞，得到杂交瘤细胞。(2) (3)据题图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量。(4)根据题意，为检测A、B、C中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行6组(AA、BB、CC、AB、AC、BC)实验，检测并比较各组实验的产物量。 $ 2025-2026学年度第二学期高二生物5月份期中 1.答案　C解析　陈泡菜水中有泡菜发酵需要的微生物，因此，加入适量陈泡菜水有利于加快泡菜成熟速度，A正确；泡菜发酵需要严格的无氧环境，因此泡菜发酵过程中，需要特别注意保持隔绝空气，即泡菜坛盖边沿的水槽中一定要保持有水，B正确；制作腐乳时，豆腐块不能进行蒸煮灭菌，否则不仅会影响腐乳的“形”，还会影响到天然菌种的获得，C错误；腐乳制作的后期发酵阶段时间比较长，需要注意防止杂菌污染，以防引起腐败变质，D正确。 2. 答案　B解析　丙装置排气管管口在液面以下，排气时可能会导致发酵液从排气管溢出，A正确；甲装置一直处于通气状态，酵母菌主要进行有氧呼吸，无法进行酒精发酵，B错误；检测酒精的产生可以用酸性重铬酸钾溶液，C正确；甲装置未夹住发酵瓶的充气管，可能有醋酸菌污染，从而生成乙酸，导致pH降低；乙、丙装置中酵母菌进行有氧呼吸或无氧呼吸产生CO2，导致pH降低，D正确。 3. 答案　D解析　家庭制作果酒、泡菜和腐乳时所需菌种均来自原材料中天然存在的微生物，不必对原材料进行严格灭菌，A正确；工厂化生产果酒时采用纯化的优良菌种，可避免杂菌污染，提高产品品质，B正确；“老汤”中含有发酵所需的菌种，制作泡菜和腐乳时，利用“老汤”会加速发酵的进程，C正确；当O2、糖源充足时，醋酸菌能将糖分解成乙酸，D错误。 4. 答案　C解析　步骤①为倒平板，使用的培养基需要先调节pH再进行灭菌，避免调节pH时造成污染，A正确；③到④过程中，每次划线后都要对接种环进行灼烧处理，是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，使下一次划线时接种环上的菌种直接来源于上次划线的末端，B正确；步骤③中接种环经灼烧灭菌后应冷却后再蘸取菌液，防止温度过高杀死菌种，C错误；划线接种结束后，将平板倒置放入培养箱中培养，可以防止培养皿皿盖上的水珠落入培养基造成污染，D正确 5. 答案　A解析　由题图分析可知，实验中对菌落进行了计数，采用的接种方法是稀释涂布平板法，A正确；该固体培养基属于基本培养基，所以对菜品中的细菌没有选择作用，B错误；在一定培养条件下，不同的微生物表现出各自稳定的菌落特征，根据菌落的形状、大小和颜色等特征，可以初步区分出不同种微生物，但不能准确判断，C错误；不食用组的菜品，正常情况下也有微生物存在，培养基上会有菌落出现，D错误。 6. 答案　A解析　平板划线法和稀释涂布平板法都需要进行无菌操作，以避免杂菌污染， ①错误；平板划线法和稀释涂布平板法都使用固体培养基，培养基中都加有琼脂，②错误；稀释涂布平板法可计算菌液中的活菌数，平板划线法不能计算菌液中的活菌数，③正确；平板划线法使用接种环或接种针进行接种，而稀释涂布平板法使用涂布器进行接种，④正确。 7. 答案　C解析　操作者的双手清洁后，用体积分数为75%的酒精擦拭消毒，不能用无水乙醇进行消毒，A错误；巴氏消毒法处理的食品因微生物未被彻底杀死，仍会有部分较耐热的细菌或细菌芽孢存在，故不能长期保存，B错误；平板划线接种微生物时须在酒精灯火焰旁操作，以保证接种时处于无菌的环境，防止杂菌污染，C正确；培养皿等玻璃器皿可采用干热灭菌法灭菌，而培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，D错误。 8. 答案　B解析　平板划线法不能用于菌落的计数，A错误；刚果红染料能与纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素分解菌产生的纤维素酶分解后，红色复合物消失，在菌落周围会出现透明圈，B正确；菌落周围形成的透明圈的直径与菌落直径的比值可反映菌落分解纤维素的能力，该值越大，说明该菌分解纤维素的能力越强，故应选择周围透明圈直径与菌落直径比值大的菌落进行纯化，C错误；以纤维素为唯一碳源的培养基可以筛选能分解纤维素的微生物，属于选择培养基，而在该培养基中加入刚果红则可以鉴别能产生纤维素酶的微生物，从功能上分属于鉴别培养基，D错误。 9. 答案　D解析　原生质体融合和动物细胞融合的过程中，都利用了细胞膜的流动性，A不符合题意；动物细胞培养没有利用细胞的全能性，利用了细胞增殖的原理，B不符合题意；植物细胞细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，利用酶的专一性，纤维素酶和果胶酶能够去除植物细胞的细胞壁，C不符合题意；紫草细胞培养和杂交瘤细胞的培养都利用了细胞增殖的原理，D符合题意。 10. 答案　D解析　海拉细胞为癌细胞，具有无限增殖的能力，在细胞培养过程中不会出现接触抑制现象，A错误；将癌变的宫颈癌组织分散为单个的海拉细胞，可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，不能用胃蛋白酶，B错误；培养海拉细胞时，O2是细胞代谢所必需的，可将培养皿置于含有95%的空气和5%的CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养，C错误。 11. 答案　D解析　脱分化是指已经分化的细胞在一定激素和营养条件的诱导下，失去其特有的结构和功能，转变成未分化的细胞的过程，A正确；生长素和细胞分裂素的浓度、比例等均会影响脱分化和再分化过程，B正确；愈伤组织细胞处于不断分裂的状态，易受外界因素影响而产生突变，C正确；在愈伤组织长出芽等器官后，植物可以进行光合作用，进而制造有机物，此后的阶段不需要严格的无菌条件，D错误。 12. 答案　C解析　用于人造皮肤的细胞取自患者本身而非其他个体，可以有效降低皮肤移植后的排斥反应，A正确；组织中细胞间的主要成分为蛋白质，可以用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理细胞组织，以便得到单个细胞，但是处理时间不宜过长，B正确；培养箱中应该设置适宜的温度、含95%空气和5%CO2的混合气体环境，既可以保证细胞的有氧呼吸，又可以维持培养液的pH，C错误；当贴壁培养细胞出现接触抑制时，需要用胰蛋白酶等处理，将接触的细胞分散为单个细胞，之后再分瓶进行传代培养，D正确。 13. 答案　A解析　人CiPS细胞属于干细胞，具有自我更新和分化的能力，A正确；人CiPS细胞分化成胰岛细胞的过程未体现细胞全能性，B错误；使用小分子化学物质诱导改变体细胞中基因的表达获得了人CiPS细胞，但该过程中遗传物质未发生改变，C错误；成体细胞转变为人CiPS细胞的过程中，细胞的形态、结构和功能发生了改变，由此可知细胞中蛋白质的种类发生了改变，D错误。 14. 答案　C解析　鲜奶是不耐高温的液体，常采用巴氏消毒法进行消毒，A错误；若培养基需要调节pH，应该在灭菌前进行，B错误；从题图中可以看出涂布时添加的0.1 mL的鲜奶共稀释了104倍，所以鲜奶中细菌数为(35＋33＋34)÷3÷0.1×104＝3.4×106(个/mL)，C正确；使用稀释涂布平板法对微生物计数，数值往往偏小，原因是当两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。 15. 答案　D解析　硝化细菌是化能自养型生物，可利用氧化NH3获得能量，将无机物转化为有机物，故培养硝化细菌的培养基中的铵盐可作为氮源和能源，A正确；尿素固体培养基中的KH2PO4能用于维持培养基的pH，保证微生物生长繁殖所需的酸碱环境，B正确；培养光能自养型的蓝细菌的培养基中不需要提供有机物，蓝细菌可利用二氧化碳和水合成有机物，C正确；琼脂是凝固剂，不能作为碳源，D错误。 16. 答案　A解析　单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合形成的杂交瘤细胞分泌的，A错误；经选择培养基筛选得到的杂交瘤细胞经多次单一抗体筛选才可用于生产单克隆抗体，B正确；经PEG诱导融合后的细胞有B淋巴细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞和杂交瘤细胞等，C正确；使用早孕检测试剂检测妇女是否怀孕，利用了抗原和抗体特异性结合的原理，其特点是快捷、准确、高效，D正确。 17. 答案　(1)野生酵母菌　毛霉　醋酸菌在液面大量繁殖　(2) 发酵罐内发酵　(3)103　少 解析　(1)在传统发酵生产葡萄酒和腐乳的过程中，所利用的主要的微生物分别是葡萄皮上附着的野生酵母菌和空气中的毛霉。酿酒时，操作不当会使酒变酸，这是醋酸菌活动的结果，此时在酒的表面会观察到一层膜，该膜是醋酸菌在液面大量繁殖形成的。(2)利用发酵工程可以大量生产产品，微生物在发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节。 (3) 为了研究某土壤的微生物组成，某同学测得每克土壤样品中有纤维素分解菌1.6×106个，在4个培养基上分别接种土壤样液0.1 mL，培养后菌落数分别为170、155、176、139个，设稀释倍数是x，可列出方程式为(170＋155＋176＋139)÷4÷0.1×x＝1.6×106，解得x＝103，即土壤样品的稀释倍数为103，该方法测定的活菌数比实际活菌数少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 18. 答案　(1)敌敌畏　液体　(2)(常年)施用敌敌畏(或被敌敌畏污染) 平板划线法(3)敌敌畏的剩余量　0.2【解析】(1)该实验目的是筛选能高效降解敌敌畏的微生物，故驯化时往培养液中逐步加入的物质X是敌敌畏。由题干信息可知，该驯化培养基中并未加入凝固剂(如琼脂)，故依照物理性质划分，该驯化培养基属于液体培养基。(2)为了筛选能高效降解有机磷农药——敌敌畏的微生物，用于筛选的样品应来自常年施用敌敌畏或被敌敌畏污染的土壤，这样能够增加获得目的菌的概率。结合题图可知，将驯化后的微生物接种于培养基B的方法为平板划线法。 (3)单位时间内剩余的敌敌畏越少，说明筛选出的微生物分解敌敌畏的能力越强，故培养24 h后，通过测定培养基C中敌敌畏的剩余量，可筛选出分解敌敌畏能力较强的微生物。微生物计数时应选择菌落数目在30～300的平板进行计数，故选择菌落数分别为250、247、253的平板，菌落的平均数(250＋247＋253)÷3＝250(个)，由图可知，培养基C中的1 mL菌液的稀释倍数是104，可得算式×104＝1.25×107，故涂布的菌液Y＝0.2(mL)。 19. 答案　(1)尿素　分解尿素的细菌为异养生物，葡萄糖可为其提供碳源　高压蒸汽灭菌(湿热灭菌)　(2)培养基被杂菌污染(或培养基中混入了其他含氮物质)　菌液浓度过高、土壤溶液稀释倍数不够或接种时未将细菌充分分散开来 (3)显微镜、血细胞计数板　偏大【解析】(1)该实验是从土壤中分离出能分解尿素的细菌，需要以尿素为唯一氮源，该培养基中需要添加葡萄糖为分解尿素的细菌提供碳源，原因是尿素分解菌为异养生物，不能利用无机碳源，只能利用现成的有机碳源。培养基要用高压蒸汽灭菌法灭菌。(2)在进行实验时，甲同学从对应106倍稀释的培养基中筛选出大约200个菌落，但是其他同学在同样稀释度下只筛选出大约90个菌落，若甲同学的结果有问题，则可能的原因是培养基被杂菌污染或培养基中混入了其他含氮物质，使得培养基上不止尿素分解菌这一种微生物。菌落连成一片是因为菌液浓度过高、土壤稀释倍数不够或接种时未将细菌充分分散开。(3)分解尿素的细菌用肉眼观察不到，需要借助于显微镜和血细胞计数板观察，用显微镜和血细胞计数板直接计数，无法区分活菌和死菌，得到数据偏大。 20. 答案　(1)脱分化　再分化　(2)植物激素(或植物生长调节剂)　无菌　(3)能保持亲本的优良性状；培养周期短，繁殖效率高；能培育无病毒植株　(4)愈伤组织　突变体的利用(或诱变育种)　(5)单倍体育种　能明显缩短育种年限【解析】　(1)过程③为脱分化，过程④为再分化。(2)在植物组织培养过程中，不论是脱分化还是再分化，都需要植物激素刺激，并且要求操作过程必须保证无菌。 (3) 植物组织培养的实质是一种无性繁殖，与有性生殖相比，具有能保持亲本的优良品质、培养周期短、繁殖效率高、能培育无病毒植株等优点。(4)突变体的利用的操作对象是愈伤组织。(5)单倍体育种的突出优点是能明显缩短育种年限。 21. 答案　(1)骨髓瘤　选择　(2)　不同部位　①② (3) 6　产物量【解析】　(1)根据题意分析，制备单克隆抗体时应该取小鼠的脾中的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞诱导融合，再用选择培养基筛选融合细胞，得到杂交瘤细胞。(2)据题图分析，固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合。该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合；酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量。(3)根据题意，为检测A、B、C中哪两种适合用于双抗体夹心法，科研人员需要进行6组(AA、BB、CC、AB、AC、BC)实验，检测并比较各组实验的产物量。 1 学科网（北京）股份有限公司 $