广东省广州市部分学校2-25—2026学年高二下学期期中考试生物试题

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2026-06-26
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资源信息

学段 高中
学科 生物学
教材版本 高中生物学人教版选择性必修3 生物技术与工程
年级 高二
章节 -
类型 试卷
知识点 -
使用场景 同步教学-期中
学年 2026-2027
地区(省份) 广东省
地区(市) 广州市
地区(区县) -
文件格式 PDF
文件大小 7.82 MB
发布时间 2026-06-26
更新时间 2026-06-26
作者 匿名
品牌系列 -
审核时间 2026-06-26
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来源 学科网

内容正文:

2025学年第二学期期中素养综合评估检测题 高二级生物(问卷) 学校: 姓名: 班级: 考号: 一、单选题(第1-10题每题1分,第11-25题每题2分,共40分) 1.黄酒传统酿制中,先以蒸煮的小麦或麸皮扩大培养酒曲(含多种微生物,可产生淀粉酶),再将酒曲与蒸煮 后的糯米、大米混合,然后加足量酒母(含酵母菌)完成发酵,压榨得成品。下列叙述错误的是() A.小麦、麸皮可为酒曲微生物提供碳源和氮源 B.将糯米等蒸煮可杀死杂菌并使淀粉更易分解 C.酒母发酵时需频繁开盖搅拌以提高发酵效率 D.黄酒酿造过程中伴随有pH下降和气体产生 2.从自然界中筛选具有优良性状的菌种的一般步骤为:采集样品→富集培养(使菌体数量增多)→纯种分离→ 性能测定,如图a、b是采用两种接种方法接种后纯化培养的效果图,下列相关叙 述正确的是() A.常使用固体培养基进行富集培养 B.用图中两种方法都可用于菌种的分离纯化 C.采用图b进行计数时,应对所有稀释度下菌落数在30-300范围内的平板取平 a 6 均值 D.获得图a所示结果的接种过程中,接种环共需灼烧灭菌3次 3.某中华老字号酿造企业豆瓣酱的主要生产流程如图所示。下列叙述错误的是() 精选大豆 →浸泡、蒸熟、冷却 接种、保温发酵 丬添加面粉制成酱坯 ↓ 翻晒、检验、包装← 加入辣椒、盐水等辅料后乳酸 前期米曲霉发酵并 菌、酵母菌等参与后期发酵 多次翻酱 A.添加的面粉可以为米曲霉提供碳源 B.“蒸熟”既能破坏大豆细胞结构又能杀菌 C.保温发酵时,酱豆中有机物的种类和含量均减少 D.后期发酵加入盐水的主要作用是调味和杀菌防腐 4.检测员将1L水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升水样中大肠杆菌的数量。己知每个计数室由 400(25×16)个小方格组成,容纳液体的总体积为0.1mm3。 盖片 现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e5个中方格内 计数室 日a6 放大 (每个中方格内含16个小方格)共有大肠杆菌n个,则 每毫升上述水样中的大肠杆菌数约为() 计数板计数室 d ■■■ A.5n×104个B.5n×105个 C.5n×106个 D.8n×105个t 回宾 al“"1…%o¤ 5、细菌培养常用牛肉膏蛋白胨培养基,酵母菌培养常用马铃薯琼脂培养基。下列有关细菌和酵母菌纯培养实验 的叙述正确的是() A,接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃( B.酵母菌培养基通常比细菌培养基有更高的碳氮比 C.制备培养基的步骤为配制培养基→倒平板→灭菌 D.可用血细胞计数板测定酵母菌和细菌的种群数量 6.黄连素是一种异喹啉类生物碱,属于植物次生代谢物,在抗菌、抗炎等方面有显著效果。下图为利用植物组 织培养相关技术生产黄连素的主要过程,相关叙述错误的是() 愈 ② ③ 外 胚状体 试管苗 ① 伤 体 黄连 ④ 织 细胞悬液 高产细胞系 A. 植物组织培养的过程中常用体积分数70%的酒精、质量分数5%次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 B.为了防止实验过程中因杂菌对实验的不良影响,通常需要在实验前对外植体灭菌处理后再通过①脱分化形 成愈伤组织 C,过程②为再分化,再分化时需调整培养基中生长素和细胞分裂素的比例;最后生产的产物黄连素不是细胞 基本生命活动所必需的 D.图1过程④高产细胞系产黄连素的速度和产量均优于过程③试管苗 7. 疣粒野生稻对水稻白叶枯病具有高度的抗病性,为转移这种抗病性,研究人员进行了栽培稻与疣粒野生稻不 对称体细胞杂交,过程如下。下列叙述错误的是() X射线使染色体随机消除,使细胞不可持铁分哭 扰粒野生 野生型水稻 型水稻 原生质体 杂种 植物组 栽培种 栽培种水稻 细胞 织培养 水稻 原生质体 不 碘乙酰胶使分袋相关附失活 A.制备原生质体前需将两亲本的外植体用无菌水进行消毒 B.获取原生质体时可在略高于细胞液浓度的缓冲液中操作 C.一般情况下,只有不同来源的原生质体融合成的杂种细胞才能继续分裂 D.因杂种细胞获得供体遗传物质的随机性,需通过抗病接种筛选目标植株 8.利用体细胞核移植技术和诱导PS细胞都能获得干细胞,干细胞具有分化成其他细胞的潜能。科学家可通过 精密调控细胞生长环境,将特定的干细胞在体外培养出类似内脏、骨骼甚至大脑的“类器官”,用于医疗或实验研 究。下列叙述错误的是() A.体细胞核移植技术中普遍使用显微操作法去核,去除的是纺锤体一染色体复合物 B.将特定蛋白导入细胞,或用小分子化合物来诱导都能形成PS细胞 C.特定的干细胞能在体外培养出“类器官”,体现了细胞的全能性 D.干细胞与“类器官”细胞的基因组成相同,基因表达情况不同 al“"1…%oa 可 9.为降低乳腺癌化疗副作用,科研人员在单克隆抗体技术基础上构建抗体一药物偶联物(ADC),ADC通常由单 克隆抗体、接头和药物组成,治疗过程如图。下列叙述正确的是() 识别并 胞传药物释放到 胞吞 胞质基质中 ☆自 接头结合 溶酶压 乳腺癌细胞 细胞凋亡 A.ADC依靠b最终作用于细胞核,a起靶向识别肿瘤细胞的作用, B.制备ADC中的单克隆抗体应用了体细胞核移植、动物细胞培养等技术 C.使用ADC导致肿瘤细胞发生凋亡涉及了细胞免疫过程 D.制备单克隆抗体时,用特定选择培养基就能筛选出分泌所需抗体的杂交瘤细胞 I0.下列有关“DNA的提取与鉴定“利用PCR扩增DNA片段及电泳鉴定”实验的叙述,错误的是() A.洋葱切碎加研磨液研磨过滤后,滤液放置4℃冰箱中静置,DNA存在于上清液中 B.将丝状物溶于体积分数95%的酒精,再加入二苯胺试剂在沸水浴中进行DNA鉴定 C.PCR扩增反应体系中dNTP既可以为扩增提供原料,也可以为子链的合成提供能量 D,PC℉扩增后,琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带,可能是引物特异性不强导致 11.刚果红可与纤维素反应形成红色复合物,但不能与纤维素水解产物发生反应。研究人员在富含纤维素的培养 基中加入刚果红,再接种土壤浸出液,准备从土壤中筛选高效降解纤维素的细菌。图表为平板上部分菌落周围出 现透明圈的情况,下列有关说法错误的是() 透明圈 菌落甲 菌落乙 菌落丙 菌落丁 刚果红培养基上的部分菌落 菌种 菌落甲 菌落乙 菌落丙 菌落丁 菌落直径:C(mm) 5.8 4.1 7.4 3.1 透明圈直径:H(mm) 8.4 7.6 9.1 8.0 H/C 1.4 1.9 1.2 2.6 A.培养基需要进行灭菌处理,土壤浸出液不需要 B.图示操作过程所用的接种工具为接种环 C.培养基的pH需调至中性或弱碱性 D.图中菌落丁分解纤维素的能力最强 al“"1…%oa 向 12.真菌蛋白是一种可通过微生物发酵技术生产的优质蛋白质,具有高营养价值和环保特性,其制造过程如下 所示。下列相关叙述正确的是() 真菌在发酵罐内生长 核酸从加热器中抽出 真菌在传送带 过滤器上干燥 消过毒的空气+ 消过毒的糖→ 消过喜的氨水+ 真菌蛋白收集器 A.整个制造过程中都需保持真菌的活性 B.发酵罐内的真菌代谢类型是厌氧异养型 C.对添加物进行消毒,可减弱真菌与杂菌的竞争 D,注入的氨水既可提供氮源和能源,又可调节培养液pH 13.2015年,屠呦呦因发现青蒿素治疗疟疾的新疗法获得了诺贝尔奖。工业上青蒿素一般从青蒿植株中提取,产 量低,价格高。科研人员利用基因工程改造酵母菌,使其高效生产青蒿酸(青蒿素前体),再通过优化代谢途径、 发酵条件,极大地提高青蒿酸产量,最终再经化学转化即可合成青蒿素,这一技术将青嵩素生产成本降低80%。 下列叙述正确的是() A.需要利用花粉管通道法将青蒿酸合成基因导入酵母菌 B.青蒿素属于酵母菌代谢过程中产生的次生代谢物 C.发酵结束后,可通过过滤、沉淀等手段从发酵液中获得青蒿酸 D.与上述方法相比,利用青蒿细胞工厂化生产获得青蒿素的周期更长 14.板蓝根(2n=14)具抗菌等作用。某课题组以甘蓝型油菜(2=38)与板蓝根作为原材料,通过体细胞杂交培 育了抗病菌的板蓝根-油菜杂交种。部分杂交种细胞染色体组成以及分裂过程中细胞两极染色体数目占比如表所 示,下列叙述正确的是( 减数分裂I后期细胞两极染色体数目比的细胞占比(%) 杂交种 体细胞染色体数 26:26 28:24 23:29 27:25 其它 AS1 52 63.4 10.6 7.2 14.8 0.0 AS6 52-62 32.3 9.6 8.2 11.0 38.8 AS7 52-58 40.3 9.6 7.2 12.5 30.5 A.该育种过程中,两种植物受精后用秋水仙素诱导染色体数目加倍。 B.板蓝根一油菜杂种AS1属于二倍体,体细胞中有两个染色体组 C.若要将获得的AS1、AS6和AS7等杂交种作为有性杂交的亲本,~最好选择AS1 D.AS1有10.6%的细胞两极染色体数目比为28:24,可能是有部分染色单体未分离 回 al“"1%o¤ I5.乳腺癌、胃癌细胞表面有大量的HER2蛋白,T细胞表面有CD3蛋白和CD28蛋白。研究人员将上述三种蛋 白作为抗原分别制备单克隆抗体,然后将其在体外解偶联后重新偶联制备得到三特异性抗体,简称三抗(如图)。 下列说法错误的是() CD3结 A.利用抗原-抗体杂交的原理筛选图示三抗时需要3种相应抗原蛋白 合位点② CD28结 B. 同时注射3种抗原蛋白,可刺激B细胞增殖分化为分泌三抗的浆细 HER2结 合位点 胞 合位点 C.制备单抗时可采用灭活的病毒进行诱导融合 D.与单抗相比,三抗增加了两个特异性抗原结合位点,对癌细胞的杀 伤力更强 16.科学家在特定条件下,将高度分化的人体成熟脂肪细胞诱导为PS细胞。下列叙述正确的是() A.该过程体现了人体成熟脂肪细胞具有全能性 B.PS细胞分裂产生的子细胞中染色体数目减半 C.人体的成熟红细胞在相同诱导条件下,也可转变为PS细胞 D.PS细胞与人体成熟脂肪细胞在形态、结构和功能上存在差 异 途径I 途径Ⅱ 17.右图为获得高产奶牛的两种途径。下列叙述错误的是() 高产奶牛 高产奶牛 A.途径I中卵母细胞需发育至MⅢ期再去核 体细胞 提供母牛 B.两种途径均需在移植前对早期胚胎进行性别鉴定 ↓注入 优良公牛 C.获得的胚胎移入受体前一般需发育至桑葚胚或囊胚 卵母细胞 D.途径Ⅱ中需对受体和供体母牛进行同期发情处理 人工授精 重构胚 早期胚胎 受体母牛 18.W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备 乳腺生物反应器的研究思路,制备一种膀胱生物反应器来获得W, 子代 基本过程如图所示。下列相关叙述错误的是( 雄性动物 雌性动物 w基因 载体 1 ① 精子 卵子 ② 重组表达载体 业业 受精卵 早期胚胎 代孕母体→转基因动物 尿液w A.步骤①需要用到限制性内切核酸酶和DNA连接酶 B.步骤②所用到的方法是将目的基因导入膀胱细胞 C.步骤③中受精卵早期分裂时,胚胎中细胞数目不断增加,但胚胎的总体积并不增加 D.步骤④在胚胎移植之前需要将代孕母体用孕激素处理 al“"1%o¤ 19.猴的克隆胚胎在发育过程中往往出现基因的异常甲基化修饰以及胎盘发育异常,导致克隆成功率较低。我国 科学家采用一定的技术手段对克隆胚胎进行处理,如图所示,提高了克隆成功率,并在2024年获得了首个活到 成年的克隆猴。下列分析错误的是() kdm4d基因的mRNA 酶TSA 体细胞 注入 杂种雌猴成纤维细胞 核移植 重构胚→囊胚a 1内细胞团 食蟹猴卵母细胞 构成 重组 体外受精 克隆猴 →受精卵→囊胚b 滋养层 囊胚 恒河猴精子 注:杂种雌猴由食蟹猴(♀)与恒河猴()杂交产生 A.培养杂种雌猴成纤维细胞过程中定期更换培养液的目的是除去代谢废物并提供营养物质 B.囊胚b是通过体外受精技术获得的胚胎,受精过程中防止多精入卵的两道屏障分别是透明带反应和卵细 胞膜反应 C.囊胚b的滋养层将发育为胎盘,为克隆胚胎提供营养并改变其遗传特性“ D.该技术在克隆具有特定疾病的模型动物以及辅助生殖等领域有广阔前景 20.PCR引物的3'端为结合模板DNA的关键碱基;5'端无严格限制,可用于添加限制酶切点等序列。下列相关 分析错误的是() A,在PCR的循环过程中,图示过程需要的温度最低 TTTTTTTTIITTTTTTTTTTTTTTTTTTTTT 5' 3' 5 B.四种脱氧核苷酸作为原料会依次连接到引物的3端 wwwwwwwmwww C.TagDNA聚合酶催化相邻的脱氧核苷酸之间形成磷酸二酯 键 D.用图示引物扩增至少四个循环后才能获得目的产物 21.下列关于蛋白质工程应用的叙述正确的是() A.基因工程药物与天然产物一般相同,蛋白质工程药物与天然产物可能不相同 B.蛋白质工程和基因工程的目的都是获得人类需要的蛋白质,所以二者没有区别 C.只有利用蛋白质工程才可以在大肠杆菌细胞中得到人的胰岛素 D.当得到可以在-70℃条件下保存半年的干扰素后,在相关酶、氨基酸和适宜的温度、pH条件下,干扰素 可以大量自我合成 22.Sau3AI和BamHI是两种限制酶,其识别序列和切割位点如下表所示。某DNA分子同时含有两种限制酶识别 位点,且经BamHⅢ切割后能形成1条DNA片段,经Sau3AI和BamHI同时切割后能形成3条大小不同的DNA片 段,下列有关叙述中错误的是() 识别序列和 A.Sau3AI和BamHI切割的部位都是DNA分子中的磷酸二酯键 限制酶 切割位点 B.经Sau3AI和BamHⅡ同时切割后形成的部分产物可自身环化 C.单独用Sau3AI切割能产生2个大小不同的DNA片段 BamHI GIGATOC D.未用限制酶处理时,该DNA分子中不含游离的磷酸基团 Sau3AI GATC D a^“"1%o¤ 23.如图为鸡血细胞中DNA的粗提取和鉴定实验过程中的部分操作示意图。下列相关叙述错误的是() 体积分数95%的酒精 蒸馏水 纱布 黏稠物 过滤 鸡血 含DNA DNA 2mol/L的 细胞液闺理 的溶液 滤液 某溶液 a b e A.该实验的正确操作顺序为a→c→b→e→d B.步骤b利用了DNA和某些蛋白质在酒精中的溶解度不同 C.步骤e中“某溶液”为NaCl溶液,步骤d试管中会出现紫色 D.为保证实验的顺利进行,鉴定试剂需现配现用 24.幽门螺杆菌(Hp)感染会引发胃炎、消化性溃疡等多种疾病。研究人员将H印的pp20基因作为目的基因, 用限制酶ol和XbaI切割,通过基因工程制备相应的疫苗,质粒及操作步骤如图所示。下列说法正确的是() BamH I 启动子 培养基B 复制 潮霉素 原点 抗性基因 ←-hoI 12 pp20基因 菌落 6 氯素 -Pst I 构建基因 大肠 获取 抗性基因 表达载体 杆菌 疫苗 终止子 粒 培养基A 5 6 BamH I 质粒 培养基A A,Ipp2O基因整合到大肠杆菌的DNA中属于基因突变 B.基因表达载体导入之前,可用Mg+处理大肠杆菌 C.培养基A中添加了潮霉素,培养基B中添加了氯霉素 D.能用来生产Hp疫苗的大肠杆菌在菌落1、2、4、6中 25.富含赖氨酸的蛋白质编码基因编码区共含678个碱基对,.某生物兴趣小组利用了Xbal和Sacl两种限制酶, 运用农杆菌转化法,将该基因导入某植物叶片细胞,再经植物组织培养获得转基因植株。使转基因植物中赖氨酸 的含量比对照组明显提高,如图所示是相关培育过程,下列说法错误的是() 卡那素 启动子 抗性基因 新霉素 富含赖氨酸的 Ti质粒 抗性基因 蛋白编码基因 将目的基因插入受体 细胞染色体的DNA中 终止子 T-DNA ① 00 ② ③ 亦HimdⅢ 7822bp Ti质粒 含目的基因的含重组T质 重组T质粒 表现出新性 粒的农杆菌 Sacl 1900bp 状的植株 A.Ti质粒是一种独立于拟核DNA之外,有自我复制能力的环状双链DNA分子 B.图②过程采用农杆菌转化法,自然条件下农杆菌对大多数单子叶植物没有侵染能力 C.植物组织培养过程中,培养基可添加卡那霉素或新霉素对转基因植株进行筛选 D.利用Sacl和HindⅢ切割重组质粒后能得到l500bp片段,则表明目的基因插入了质粒中 a^“"1.%o¤ 二、非选择题(4题,共60分) 26.(12分)阅读下列关于能源、环境和农业生产方面的材料,回答相关问题: 材料1:随着能源和环境问题日益严峻,利用纤维素酶降解秸秆生产撚料乙醇,对缓解全球能源危机有着重大意 义。某兴趣小组通过实验分离出能分解纤维素的微生物。 ()为了筛选出分解纤维素的微生物,实验小组尝试从收割后的小麦田里取样,配制以纤维素为唯一碳源的 (填“选择”或“鉴别)培养基。配制好的培养基需 灭菌。 (2)若要对培养的细菌计数,则需要用法进行接种,当样品的稀释度足够高时,培养一段时间后,可根据 初步鉴定并挑取产纤维素酶菌株。 材料Ⅱ:尿素是一种重要的农业氮肥,但尿素并不能直接被农作物吸收,只有当土壤中的细菌将尿素分解成氨之 后,才能被植物利用。某课题小组从土壤中分离能够分解尿素的细菌并进行计数的过程如图所示。 1 mL 1mL 1 mL 1 mL 1mL ① ② ⑤ 1g土壤 99 mL 无菌水 0.1mL (3)图中培养基应以 为唯一氮源。 (4)某同学接种了4个培养皿,一段时间后4个培养皿中分别长出了54、46、50、24个菌落,根据实验结果,该 1g土壤样本中约有分解尿素的细菌个。培养基表面生长的是单菌落,运用这种方法统计的结果往往比实际 值偏小的原因是 27.(14分)科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄一马铃薯杂种植株,为了便于杂种细胞的筛选和 鉴定,科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质,其培育过程如图所示。 据图回答下列问题: 番茄 番茄 红色荧 细胞①原生质体光标记 愈 融合、 融合的② ③伤④ 筛选原生质体 组 植物体 马铃薯■ 马铃薯绿色荧 胞 细胞①原生质体光标记 (1)为获得原生质体,过程①需要利用 处理两种植物细胞。两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是 (2)写出促进原生质体融合的方法 (写出两个)。 (3)过程③和④利用的植物细胞工程技术是 。 该技术依据的生物学原理是 (4)细胞融合完成后,融合细胞的细胞膜表面的荧光颜色可能是 (5)已知番茄细胞内有12对同源染色体,马铃薯细胞内共48条染色体,则在“番茄一马铃薯”细胞分裂过程中最多 可以观察到 条染色体。 回 al“"1%o¤ 28.(12分)某抗膜蛋白治疗性抗体药物研发过程中,需要表达N蛋白胞外段,制备相应的单克隆抗体,增加 其对N蛋白胞外段特异性结合的能力。 I.N蛋白胞外段抗原制备,流程如图1 N蛋白胞外段基因脂质体 病毒包 组装 收集 感染海拉细胞 N蛋白胞外段 重组慢病毒质粒导入 装细胞释放 病毒 表达、纯化 图1 (1)构建重组慢病毒质粒时,选用氨苄青霹素抗性基因作为标记基因,目的是 (2)质粒在包装细胞内组装出由蛋白质外壳和 组成的慢病毒,用慢病毒感染海拉细胞进而表达并分 离、纯化N蛋白胞外段。 Ⅱ.N蛋白胞外段单克隆抗体制备,流程如图2 N蛋白胞外段 免疫小鼠 B淋巴细胞悬液 骨髓瘤细胞 取脾组织 融合 多种杂交细胞 选择性 培养基 扩大培养 N蛋白胞外段抗体 单克隆杂交瘤细胞株 96孔板 杂交瘤细胞 图2 (3)用N蛋白胞外段作为抗原对小鼠进行免疫后,取小鼠脾组织用 酶处理,制成细胞悬液, 置于含有混合气体的 中培养,离心收集小鼠的B淋巴细胞,与骨髓瘤细胞进行融合。 (4)用选择性培养基对融合后的细胞进行筛选,获得杂交瘤细胞,将其接种到96孔板,进行 培养。月 技术检测每孔中的抗体,筛选既能产生N蛋白胞外段抗体,又能大量增殖的单克隆杂了 瘤细胞株,经体外扩大培养,收集 提取单克隆抗体。 (5)利用N蛋白胞外段抗体与药物结合,形成 实现特异性治疗。 a“"1%o¤ 29.稀土元素钇(Y+)在电子和新能源领域应用广泛,但其开采治炼产生的废水会导致土壤和水体重金属污染。 金属疏蛋白(MT)是一类金属结合蛋白,能使细胞从环境中吸收重金属。某科研团队将来源于美洲商陆的MT 基因与跨膜蛋白OmpA基因融合表达,将目标蛋白定位在大肠杆菌表面,构建表面展示MT工程菌,探究其对稀 土钇的吸附效果。图1、图2为质粒pET28a、质粒PLO及MT基因结构示意图。回答下列问题: Nde I Sac I Hind Nco I 终止字 Nde I Sac I Nco I 卡那素 u 抗性基因 启动子PBT28 pP-ompA终止字 质粒 基因 复制 卡那莓素 转录方向」 Nde I Hindm 点 抗性基因 ® OH链 启动子PLO质粒 HO- ®b链 1 MT基因 原点 TIIIIIIIIIT pP-ompA基因 图1 图2 (I)目的基因的获取与扩增: 从美洲商陆根部提取总RNA后,利用 催化合成cDNA链。PCR反应体系中除了引物和模板,还 需加入 (2)MT表面展示载体构建: 研究人员将大肠杆菌Lpp信号肽(引导蛋白质定位至细胞膜的短肽)与OmpA跨膜蛋白的编码基囚融合,构建 lpp-ompA融合基因,并将其克隆车质粒pET28a中,获得重组质粒PLO。为使MT基因正向插入质粒PLO,需在 MT基因左右两侧分别加入 等限制酶的识别序列。相应限制酶酶切后,再用 处理即可形成重组质粒(MT表面展示载体)。 (3)MT工程菌的扩增与表达: 将PLO-MT质粒转化大肠杆菌时,用低浓度CaC2处理的目的是 。转化后工程菌接种到含 的LB培养基,37℃振荡培养24小时后加入IPTG(一种诱导剂),促进目的基因转录,其中MT基因 (填“a链”或b链”)为转录模板链。 (4)MT工程菌表面定位的验证: 加入PTG诱导表达24小时,将MT工程菌分为两组,实验组加入胰蛋白酶处理30分钟;对照组不加酶,相同 条件孵育,收集菌体重悬于缓冲液。同时取处理前后的菌液进行蛋白质电泳。若实验组 ,对照组MT蛋白条带强度不变,说明MT蛋白暴露于细胞表面。推测MT 蛋白定位至细胞膜外表面的可能机制: (5)MT工程菌对稀土钇(Y3+)的吸附性能验证: 诱导表达后的MT工程菌与含Y3+的缓冲液振荡反应2小时, 收集菌体,并用无菌去离子水多次洗涤 菌体,目的是 测定MT工程菌中Y3+的浓度。与对照组导入 的大肠杆菌相 比,MT工程菌吸附量显著提高,说明MT蛋白是吸附Y3+的关键功能分子。 回 al“"1…%oa

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