黑龙江省/牡丹江市海林市高级中学2025—2026学年下学期高二（生物）学科期中考试试题

**基本信息** 海林市高二生物期中试卷以传统发酵（如杜康制醋传说）和现代生物技术（如三亲试管婴儿、CRISPR/Cas9）为情境，覆盖微生物培养、细胞工程、基因工程等核心模块，注重生命观念与科学思维的综合考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|15题/30分|醋酸菌发酵、稀释涂布计数、植物组织培养|结合文化传承（醋的制作）和基础实验操作（如菌落计数）| |不定项选择题|5题/15分|基因工程酶切、琼脂糖电泳、固氮菌分离|通过实验结果分析（如DNA电泳图谱）考查科学思维| |解答题|5题/55分|体细胞杂交、核移植、单克隆抗体、基因工程|设计实验数据（如6-BA与IAA浓度对丛芽影响）和技术流程（如克隆猴培育），体现探究实践能力|

海林市高级中学2025—2026年度下学期高二学年 （生物）学科期中考试试题 一、单选题（共30分、每题2分） 1．传说杜康的儿子墨塔在一次酿酒时发酵过头，直至第21天开缸时，发现酒液已变酸但香气扑鼻、酸甜可口，于是将其命名为“醋”。下列叙述正确的是（　　） A．醋酸菌是好氧菌，最适生长温度为18-30℃ B．当缺少糖源时，醋酸菌可将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 C．果醋制作时先通气进行酒精发酵，再密封进行醋酸发酵 D．利用醋酸菌细胞呼吸发酵制作酸奶时，溶液的pH逐渐降低 2．某实验小组在对某大肠杆菌培养液中的大肠杆菌进行计数时，样品的稀释情况如图所示，涂布平板时各组所用稀释液的体积均为0.05 mL。若在F组稀释液对应的培养基中测得的菌落数的平均值为34个，则1 mL原培养液中大肠杆菌的活菌数约为（　　） A．6.8×106个 B．6.8×108个 C．1.7×107个 D．1.7×108个 培养基 配方 结果 甲 MS+6-BA1.0mg/L+NAA0.1mg/L 分化出丛状苗 乙 MS+NAA0.1mg/L 分化出根 3．用植物组织培养技术快速繁殖菊花时，所需培养基的配方如表所示。MS表示培养基，NAA为生长素类似物，6-BA为细胞分裂素类似物。 下列叙述正确的是（    ） A.MS培养基中最常用的碳源是葡萄糖 B.菊花外植体需灭菌后才能接种到培养基中 C.NAA和6-BA比植物天然激素的作用时间持续更长 D.将培养基甲中的丛状苗转移至培养基乙中培养不需要光照 4．研究人员利用植物体细胞杂交技术，尝试将耐盐碱的野生番茄（核基因组和细胞质基因均完好）与高产但不耐盐碱的栽培番茄（用X射线处理其原生质体，使核基因失活，细胞质基因完好）进行融合，以获得既耐盐碱又高产的番茄新品种丙，过程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①过程应在低渗溶液中用纤维素酶和果胶酶处理细胞 B．②和③过程中，只有③过程发生了基因的选择性表达 C．再生植株丙的形成证明了原生质体甲或乙仍具有全能性 D．丙的耐盐碱性状可能来自野生番茄的核基因和细胞质基因 5．下图为小鼠细胞的培养过程示意图。下列叙述正确的是（　　） A．传代培养至一定代数，所培养的细胞全部都会衰老死亡 B．为了保证细胞培养所需的无菌环境，可以添加适量的抗生素 C．培养过程体现了细胞的全能性且存在基因的选择性表达 D．培养过程中，需要CO2浓度维持在5%左右，以促进细胞呼吸 6．“三亲试管婴儿”的培育过程可选用如下技术路线。下列叙述正确的是（    ） A．卵母细胞捐献者携带的红绿色盲基因能够遗传给“三亲婴儿” B．“三亲婴儿”的遗传物质来自提供细胞核的母亲和提供精子的父亲 C．该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 D．通常用灭活的病毒诱导精子和卵母细胞融合实现体外受精 7．抗人绒毛膜促性腺激素（HCG）单克隆抗体做成的“早早孕诊断试剂盒”具有诊断早、准确率高的特点。下图为抗HCG单克隆抗体制备流程的示意图。下列叙述正确的是（　　） A．注射的物质甲为HCG，Z处理的目的是克隆化培养 B．图中的融合细胞均为杂交瘤细胞并能产生抗HCG的抗体 C．大规模培养需定期用胃蛋白酶处理并更换培养液 D．大规模体外培养时，需补充一定浓度的以维持培养液pH 8．哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律是胚胎工程的理论基础。下列相关叙述正确的是（　　） A．精子获能后在子宫中与卵细胞完成受精作用 B．受精卵形成桑葚胚过程中胚胎总体积不断增大 C．孵化是指原肠胚细胞突破卵细胞膜的过程 D．精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精子再进入卵内 9．奶牛的繁殖率受遗传、营养、管理等多重因素制约，已成为限制高产奶牛种群快速扩繁和牧场经济效益的瓶颈。科研人员利用如图所示的①②两种途径繁殖高产奶牛，以解决上述问题。叙述错误的是（　　） A．经①和②路径获得的子代中，仅①需进行性别鉴定 B．细胞甲处于MⅡ期，该细胞含有一个完整的细胞核 C．②路径中，获得重构胚与激活重构胚均可用电处理 D．为获得基因组成相同的子代，可运用胚胎分割技术 10．下列技术手段与对应优点不符合的是（    ） A．胚胎分割，提高优质胚胎利用率 B．核移植，解决器官移植中供体器官的短缺问题 C．体外受精，为良种家畜快速繁殖提供了可能 D．胚胎移植，充分发挥雄性优良个体的繁殖潜能 11．研究人员制备了乳腺生物反应器，用其获得具有特殊功能的蛋白质M，基本过程如图所示，①～③表示操作过程，下列说法正确的是（    ） A．具有启动子、复制原点和限制酶切割位点的质粒即可作为运载体 B．①过程常用显微注射法，②过程形成早期胚胎时不经过细胞的分化 C．该过程须选择雌性胚胎，胚胎移植前须取滋养层细胞，检测其性别 D．③过程一般选择发育良好的原肠胚，须对代孕母牛进行同期发情处理 12．科学家利用AI预测了某种致病病毒的关键蛋白（X蛋白）的三维结构，并基于此设计了一种能特异性抑制X蛋白的药物分子。下列相关叙述错误的是（　　） A．AI预测蛋白质结构可加速药物靶点的筛选，缩短药物研发周期 B．可利用蛋白质工程直接对X蛋白的氨基酸序列进行改造，增强其稳定性 C．若将编码X蛋白的基因导入大肠杆菌中并让其表达，须使用能在大肠杆菌中发挥作用的启动子 D．该药物分子与X蛋白结合后，可能改变X蛋白的空间结构，从而抑制其功能 13．CRISPR/Cas9是一种基因编辑技术，被誉为“基因剪刀”。它的核心原理是利用一段向导RNA（“定位系统”）引导Cas9蛋白（“剪刀”）精确切割目标DNA序列。CRISPR/Cas9技术在农业育种和疾病治疗等多个方面具有广泛应用。下列相关叙述正确的是（　　） A．若目标靶序列（部分）为5′-ATCCGAA-3′，向导RNA的序列应设计为5′-UAGGCUU-3′ B．Cas9类似于基因工程中的限制酶，其作用位点是磷酸二酯键 C．向导RNA的碱基序列越短，则其在基因上出现定位错误的概率越低 D．利用CRISPR/Cas9技术编辑癌细胞的原癌基因一定抑制其无限增殖 14．下图表示糖类的化学组成和种类，下列相关叙述正确的是（    ） A．①、②、③依次代表单糖、二糖、多糖，它们均可继续水解 B．①、②均是可被细胞直接吸收利用的小分子物质 C．④、⑤分别为纤维素、肌糖原，二者均储存能量，可作为储能物质 D．①→②→③过程均有水产生 15．哺乳动物的催产素具有催产和排乳的作用，其结构简式如下图所示，各氨基酸残基用3个字母缩写表示。下列叙述错误的是（　　） A．催产素含9种氨基酸，7个肽键 B．图中—S—S—可能表示一个二硫键 C．组成催产素的不同氨基酸的R基不同 D．催产素至少含一个游离的氨基和羧基 二、不定项选择题（共15分、每题3分） 16．由于某目的基因酶切后的末端为平末端，载体E只有产生黏性末端的酶切位点，需借助中间载体P 将目的基因接入载体E。据图分析，下列叙述错误的是（    ） A．为了便于该目的基因接入载体E，可用限制酶EcoRⅤ或SmaⅠ切割载体P B．最后将该目的基因接入载体E，可用限制酶XhoⅠ和PstⅠ切割载体P C．载体P不能作为基因表达载体，是因为其没有表达该目的基因的启动子与终止子 D．若受体细胞表现出抗性基因的相应性状，表明重组载体成功导入了受体细胞 17．琼脂糖凝胶电泳常用于核酸样品的分析，样品1-4的电泳结果如图所示（“+”“-”分别代表电泳槽的阳极和阴极）。已知样品1和2中的DNA分子分别是甲和乙，甲只有限制酶R的一个酶切位点，样品3和4中有一个样品是甲的酶切产物。下列叙述正确的是（    ） A．配制琼脂糖凝胶时需选用适当的缓冲液 B．该实验条件下甲、乙两种DNA分子均带负电荷 C．甲、乙两种DNA分子所含碱基对的数量可能不同 D．据图推测样品3可能是甲被酶R完全酶切后的产物 18．自生固氮菌是土壤中能独立固定空气中氮气的细菌，科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．图中所用培养基不需要添加氮源，但需要将pH调制成中性或弱酸性 B．纯化培养时，用涂布器从盛有菌液的试管中蘸取菌液进行涂布 C．步骤①获取土壤一般来自表层土壤，步骤③将土壤悬浮液稀释了10000倍 D．若④的平板上菌落平均数为72个，则每克土壤中含有的固氮菌约7.2×106个 19．肿瘤坏死因子-α（TNF-α）是一种重要的细胞因子，高浓度时会引发多种疾病。科研人员利用细胞工程技术制备了抗TNF-α的单克隆抗体用于治疗，其核心流程如图所示，下列相关叙述正确的是（　　） A．图中①一般为骨髓瘤细胞，通常从小鼠的血液中获得 B．流程中用于融合的B淋巴细胞，可从免疫小鼠的脾脏中获取 C．步骤④包含克隆化培养和抗体检测，目标杂交瘤细胞分泌的抗体可特异性识别并结合TNF-α D．步骤③用特定的选择培养基是为了筛选出能产生抗TNF-α的抗体的杂交瘤细胞 20．番茄（2N=24）是二倍体，马铃薯（4N=48）是四倍体。育种工作者利用不同的方法进行了如图所示的四组实验，其中花粉a是番茄花粉，花粉b是马铃薯花粉。下列叙述正确的是（    ） A．植物体A叶肉细胞含24条染色体，植物体B叶肉细胞含12条染色体 B．从花粉a形成幼苗B所进行的细胞分裂方式是有丝分裂 C．与传统杂交育种相比，方式Ⅱ可以大大缩短育种年限 D．植物体D可能同时具有马铃薯和番茄的特征 三、解答题（共55分、除特殊标注外每空1分） 21．利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可获得高品质、抗逆性强的杂种植株，流程如图。回答下列问题： (1)实验中常用_________酶去除细胞壁得到山金柑与早花柠檬原生质体，需要向原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____________。 (2)过程②利用化学试剂_______诱导融合，可通过观察__________进行杂种细胞的初步筛选，愈伤组织形成和生长、分化过程中，培养基中的碳源是_____（填“无机碳源”或“有机碳源”），在③、④过程中发生基因选择性表达的是_____。 (3)为探究6-BA和IAA对愈伤组织再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基，培养后统计愈伤组织再生丛芽的比例（m），以及愈伤组织上的再生丛芽的平均数（n），结果如表所示。 培养基编号 浓度/（mg·L-1） m/% n/个 6-BA IAA 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 该实验中，自变量是_____，6-BA属于_______类生长调节剂。分析实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是_____号培养基，当6-BA / IAA的值_____（填“低”或“高”）时，诱导生芽成功率较高。 (4) 与其他育种方式相比，植物体细胞杂交的突出优点是_______________________。 22．两只克隆小猴“中中”和“华华”是世界首例非人灵长类动物的体细胞克隆猴，这是我国的研究成果。一年后5只世界首例生物节律紊乱的体细胞克隆猴诞生。下图为培育克隆猴的流程，回答问题： (1)在“中中”“华华”之前，科学家已培育了胚胎细胞克隆猴，胚胎细胞核移植难度明显低于体细胞核移植的原因是________（2分）。 (2)科学家首先将采集的卵母细胞培养至________期，然后去核，这里的“去核”实际上是指去除________（2分）。核移植过程中用灭活的仙台病毒进行了短暂处理，其目的是________。体外培养重构胚时，需提供适宜的营养及环境条件，推测环境条件包括________。（2分、答出两点）。最后将胚胎移植到经过________处理的代孕母猴体内，最终产出克隆小猴。 (3)我国科研团队采集一只睡眠紊乱最明显的BMAL1基因敲除的猕猴的体细胞，通过核移植技术获得了5只克隆猴，理论上这5只克隆猴之间的细胞核基因型________（填“相同”或“不相同”或“不一定相同”）。为验证上述5只基因敲除猕猴存在昼夜节律紊乱问题，科学家用检测设备监测实验猴，通过行为学分析检测其是否明显表现出睡眠紊乱的症状，对照组的设置应为________。 23．尼帕病毒（NV）是一种新型人畜共患病毒，该病毒的结构蛋白（X蛋白）可诱导动物机体产生中和抗体，从而防御病毒感染。制备单克隆中和抗体的流程如图所示。回答下列问题。 (1)制备单克隆抗体过程中涉及的动物细胞工程技术包括________。 (2)在体外培养骨髓瘤细胞时，需要在合成培养基中添加________等一些天然成分，气体环境是________。贴壁生长的细胞除营养物质缺乏等因素外，还会出现________现象，此时需要用________等处理后分瓶培养。 (3)在特定培养基Y中不能存活的细胞包括下列________。①B淋巴细胞；②小鼠的骨髓瘤细胞；③B淋巴细胞自身融合的细胞；④小鼠的骨髓瘤细胞自身融合的细胞；⑤杂交瘤细胞 (4)图中符合生产的杂交瘤细胞具有________的特点。最终可从________或________中获得大量的单克隆抗体。 (5)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域，可将抗原（X蛋白）进行逐步截短，分别与纯化的单克隆抗体反应，实验结果如图所示（“+”表示有反应，“-”表示无反应，“aa”表示氨基酸）。结果证明，该单克隆抗体识别抗原（X蛋白）的区域大概为________（填“40~50”、“40~55”或“40~60”）（2分）位氨基酸。 24．随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 (1)图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用___________(填数字、2分)。 (2)应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射___________，使用___________技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为___________。 (3)供体1完成体内受精的场所在___________。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其___________，胚胎移植前需要对受体进行___________处理。 (4)应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过___________技术获得二分胚①和②，操作时需要注意___________（2分），否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 25．虾青素是雨生红球藻的产物，具有抗氧化和提高免疫力等特点，但并非是其基本生命活动必需的产物。某科研团队从雨生红球藻中克隆虾青素合成关键酶基因（crtZ），通过基因工程改造酿酒酵母构建工程菌株，并结合发酵工艺优化实现虾青素产业化生产。回答下列问题： (1)目的基因的获取。提取雨生红球藻的总DNA作为________，设计特异性引物扩增crtZ基因，此过程每次循环可以分为________三步。 (2)构建重组DNA分子。图中质粒还缺少的必备元件是________。质粒中启动子的作用是结合________，驱动目的基因高效转录。为使基因crtZ片段能正确连接到图中质粒，应选用限制酶________来处理质粒。 (3)目的基因导入受体细胞。将重组质粒导入大肠杆菌后，需在含________的培养基上筛选，以排除未导入质粒的大肠杆菌；再从阳性大肠杆菌中提取重组质粒，导入URA3基因缺失的酿酒酵母，应在________的培养基上筛选工程酵母，理由是________。 (4)虾青素的部分代谢途径如图所示，通过基因编辑技术将crtZ基因定向整合到酿酒酵母染色体上的ERG3基因中，该方法可避免因________（生理过程）导致的目的基因丢失，提高遗传稳定性；同时能进一步提高虾青素产量，原因是________，这一方案体现了基因工程对微生物________的定向改造。 试卷第1页，共3页 试卷第1页，共3页 学科网（北京）股份有限公司 答案第1页，共2页 答案第1页，共2页 学科网（北京）股份有限公司 $