黑龙江大庆铁人中学2025-2026学年高二下学期期中考试生物试题

**基本信息** 大庆铁人中学2024级高二下学期期中生物试卷，聚焦微生物培养、基因工程等生物技术模块，融合《齐民要术》酿醋传统与器官培育前沿情境，实现基础巩固与探究能力的梯度考查。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|20/40|稀释涂布平板法、植物组织培养|第5题以“动酒酢法”考查醋酸菌发酵，渗透文化传承与生命观念| |不定项选择题|5/15|单克隆抗体制备、基因工程伦理|第23题结合杂交瘤技术流程分析，强化科学思维与实验逻辑| |非选择题|4/45|果酒果醋发酵、基因工程操作|29题通过限制酶选择与Southern杂交实验，突出探究实践与技术应用|

大庆铁人中学2024级高二年级下学期期中考试 生 物 2026.06 注意事项： 1．答题前，考生先将自己的姓名、班级、考场号/座位号填写在答题卡上，如有条形码，认真核对条形码上的姓名、准考证号，并将条形码粘贴在答题卡的指定位置上。 2．选择题答案使用2B铅笔填涂，如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案的标号；非选择题答案使用0.5毫米黑色中性（签字）笔或碳素笔书写，字体工整，笔迹清楚。 3．请按照题号在答题卡上各题的答题区域内作答，超出答题区域书写的答案无效。 4．保持卷面及答题卡清洁，不折叠，不破损，不准使用涂改液、修正带、刮纸刀。 一、单选题: 本题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1．用稀释涂布平板法来统计样品中的活菌数时，通过统计平板上的菌落数就能推测出样品中的活菌数，原因是（  ） A．菌落中的细菌数目是固定的 B．平板上的一个菌落一般来源于稀释液中的一个活菌 C．平板上的一个菌落就是一个细菌 D．通过此方法统计的菌落数与活菌的实际数目相同 2．学校生物兴趣小组按下图流程制作苹果醋。相关叙述正确的是（  ） 挑选苹果→冲洗、切片，碾碎→加糖→添加菌种甲→苹果酒→添加菌种乙→苹果醋 A．菌种甲、乙都具有线粒体，都能进行有氧呼吸 B. 加糖的目的是直接为菌种甲、乙提供碳源和能源 C．菌种甲、乙发酵过程中，发酵液pH下降、温度上升 D．发酵结束后取苹果醋加酸性重铬酸钾检测发酵效果 3．关于微生物培养技术灭菌和消毒的理解，正确的是（  ） A．灭菌是指杀灭物体内外的一切微生物，但不包括芽孢和孢子 B．消毒是利用物理、化学或生物方法杀死物体表面的微生物 C．常用的灭菌法有灼烧灭菌、干热灭菌、酒精灭菌等 D．常用的消毒方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线消毒法、化学药物法 4．肺炎支原体的药敏实验中，将蘸有相同浓度的阿奇霉素、克拉霉素和青霉素的滤纸片放置于平板不同位置。培养一段时间后，平板上出现的抑菌圈情况如图所示。下列叙述正确的是（  ） A．医学检验中可依据菌落特征判断是否有支原体感染 B．支原体与病毒的根本区别是细胞内无核糖体 C．? 处作为对照组，圆形滤纸片上滴加蒸馏水 D．阿奇霉素抑制支原体增殖效果比克拉霉素好 5．《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（‘酢’同‘醋’）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成。”下列叙述错误的是（  ） A．该酿醋工艺应控制的最适温度为30-35OC B．加水的目的是对酒进行稀释，避免渗透压过高杀死醋酸菌 C．“衣”位于变酸的酒表面，是由原酒中的酵母菌大量繁殖形成的 D．“挠搅”有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 6．红薯是我国种植面积较大的一类作物,但长期以来的连种,造成了红薯品种退化,产量和品质逐年下降,其主要原因是所用的种薯携带了大量的病毒。研究人员利用现代生物技术,对红薯进行脱毒培养。下列说法错误的是( 　) A．培育红薯脱毒苗过程中,激素使用不当会导致性状分离 B．若选择的外植体体积过大,可能会导致脱毒率降低 C．培育红薯脱毒苗的过程中,需要适时调整激素的比例 D．可以选择红薯茎尖或根尖的分生区作为外植体 7．蝴蝶兰（4N=76）的观赏价值极高，其快速大量的繁殖离不开植物组织培养技术。下列关于植物细胞工程技术应用的叙述，正确的是（  ） A．接种蝴蝶兰幼嫩茎段时应将其形态学下端朝下以便于生根 B．蝴蝶兰幼嫩的茎段和操作者的双手都要用95%的酒精消毒 C．蝴蝶兰幼嫩茎段组织培养过程中细胞中会出现38个四分体 D．由外植体得到愈伤组织的整个过程中都需要提供充足的光照 8．为研究多种血糖调节因子的作用，我国科学家开发出胰岛素抵抗模型鼠。为扩增模型鼠数量，科学家通过诱导优良模型鼠体细胞转化获得iPS细胞，继而利用iPS细胞培育出与模型鼠遗传特性相同的克隆鼠，具体步骤如图。下列叙述错误的是（  ） A．图中黑鼠体细胞转化为iPS细胞的过程与植物组织培养的脱分化类似 B．胚胎移植后，重构胚进一步扩大导致滋养层破裂，胚胎伸展出来称为孵化 C．为获得更多的双细胞胚可对灰鼠进行超数排卵处理 D．为判断克隆鼠培育是否成功，需对X鼠进行胰岛素抵抗的相关检测 9．在实验室内利用胚胎干细胞(ES细胞)制作小鼠胚胎模型，探究人类某些疾病的发病机制。下图表示制作小鼠癌症模型的流程，下列叙述错误的是（  ） A．ES细胞可以分化成为小鼠体内的任何一种组织细胞 B．将外源致癌基因导入ES细胞常用显微注射法 C．可以通过体外诱导成纤维细胞获得类似ES细胞的细胞 D．可将早期胚胎培养至原肠胚期，再移植入代孕小鼠体内 10．某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（  ） A．限制酶失活，更换新的限制酶 B．酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等 C．质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA D．酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 11．下列关于“DNA 粗提取与鉴定”实验的叙述，错误的是（  ） A．在一定温度下，DNA遇二苯胺试剂呈现蓝色 B．实验中如果将研磨液更换为蒸馏水，DNA提取的效率会降低 C．利用DNA和蛋白质在酒精中的溶解度差异，可初步分离DNA D．离心研磨液是为了加速DNA的沉淀 12．右图是表达新基因用的质粒示意图，若要将目的基因插入质粒上的A处，则切割基因时可用的是（  ） A．Hind Ⅲ B．EcoRⅠ C．EcoB D．PstⅠ 13．单峰骆驼凭借巨大的体型、强悍的环境忍受力，成为了名副其实的沙漠之舟，单峰骆驼在野外几乎灭绝。近些年，在我国干燥、缺水的戈壁无人区，科学家又发现了小规模野化单峰骆驼群。科学家欲通过胚胎工程的方法拯救野化单峰骆驼。下列叙述正确的是（  ） A．使用性激素对野化单峰雌骆驼A处理以进行超数排卵 B．为提高体外受精成功率，从野化单峰骆驼B中新采集的精子应直接用于体外受精 C．通过胚胎移植技术可以充分发挥雌性优良个体的繁殖潜力 D．对囊胚或原肠胚进行胚胎分割，可以产生更多的单峰骆驼 14．从生物技术的原理分析，下列设想中无法实现的是（  ） A．用基因工程技术获得抗凝血酶 B．用细胞工程技术制备SARS病毒的单克隆抗体 C．用蛋白质工程技术改造天冬氨酸激酶 D．用胚胎工程技术培育生长迅速的优质鲤鱼 15．转基因玉米能高效合成一种多肽类的蛋白酶抑制剂,积累于茎叶中,让取食它的害虫因消化酶受抑制无法消化食物而死亡。下列就该玉米对人类安全性的评论中,不符合生物学原理的（  ） A．不安全。这种玉米的果实(种子)可能含有蛋白酶抑制剂,食用后使人因无法消化食物而患病 B．不安全。该玉米的蛋白酶抑制剂基因可通过食物链富集并表达,使人体无法消化食物而患病 C．安全。因为人与害虫消化酶的结构存在差异,玉米的蛋白酶抑制剂对人体很可能无影响 D．安全。人类食用煮熟的玉米,玉米的蛋白酶抑制剂已被高温破坏,不会影响人的消化功能 16．已知引发某传染病的病原体为RNA病毒，该病毒表面的A蛋白为主要抗原，其疫苗生产和抗体制备的流程如下图所示。下列说法错误的是（  ） A．过程①需要使用限制酶和DNA连接酶 B．过程②是基因工程操作的核心步骤 C．过程③可用灭活的病毒诱导 D．抗A蛋白的单克隆抗体可用于制备该传染病的抗原检测试剂盒 17．下列关于基因工程的叙述，错误的是（  ） A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性内切核酸酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 18．蛋白质工程开创了按照人类意愿改造、创造符合人类需要的蛋白质的新时代。如通过蛋白质工程，将干扰素结构上的两个半胱氨酸改为丝氨酸，就可以使其保存半年，而活性不受影响。下列关于蛋白质工程的叙述，正确的是（  ） A．蛋白质工程需要改造或合成蛋白质的编码基因 B．蛋白质工程的操作流程与中心法则的方向相同 C．对干扰素的改造无需考虑其空间结构 D．蛋白质工程需要改变蛋白质分子的所有氨基酸序列 19．将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新导入大肠杆菌的细胞内，再通过发酵工程就能大量生产人生长激素。下列相关叙述正确的是（  ） A．转录生长激素基因需要解旋酶和DNA连接酶 B．发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初生代谢物 C．大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传 D．大肠杆菌质粒标记基因中腺嘌呤和尿嘧啶的含量相等 20．通过PCR扩增可得到含有部分未知序列的DNA片段的扩增产物，具体操作步骤如图所示，图中白色为未知片段，黑色为已知片段，M、N为限制酶的识别序列，下列相关叙述错误的（  ） A．已知片段中没有除了M之外的其他限制酶的识别序列 B．将最终的PCR产物进行测序即可知道未知片段的DNA序列 C．该PCR过程中所使用的引物应依据a、b的序列进行设计 D．第一步酶切时可更换限制酶，只要所用限制酶的识别序列在已知片段中不存在即可 二、不定项选择题: 本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。全部选对得3 分，选对但选不全得 1 分，有选错得 0 分。 21．关于生物技术的安全与伦理问题在我国相关法规明令禁止的是（  ） A．试管动物的培育 B．转基因食品的生产 C．生殖性克隆的实验 D．生物武器的发展和生产 22．中国传统白酒多以泥窖为发酵基础，素有“千年老窖万年糟”“以窖养糟，以糟养泥”之说。多年利用的老窖池内壁窖泥中含有大量与酿酒相关的微生物。下列叙述正确的是（  ） A．传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B．窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，使酿造过程不易污染杂菌 C．从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时，需在或环境中进行 D．从谷物原料发酵形成的酒糟中，可分离出产淀粉酶的微生物 23．某病毒颗粒表面有一特征性的大分子结构蛋白S（含有多个不同的抗原决定基，每一个抗原决定基能够刺激机体产生一种抗体）。为了建立一种灵敏、高效检测S蛋白的方法，研究人员采用杂交瘤技术制备了抗S单克隆抗体（如图）。下列说法正确的是（  ） A．利用胶原蛋白酶处理，可分散贴壁生长的细胞 B．制备的单克隆抗体A和单克隆抗体B是相同的单克隆抗体 C．用于生产单克隆抗体的杂交瘤细胞可传代培养，但不能冻存 D．单克隆抗体A和单克隆抗体B都能够特异性识别S蛋白 24．重组乙肝疫苗生产技术利用酿酒酵母来表达乙肝病毒的表面抗原(HBsAg),然后将表面抗原(HBsAg)纯化后混合佐剂制成乙肝疫苗。下列相关说法正确的是（  ） A．传统乙肝疫苗的生产方式是在培养液中培养乙肝病毒,再对乙肝病毒进行减毒或灭活处理 B．HBsAg基因能导入酵母中并成功表达,是由于酵母和乙肝病毒共用一套遗传密码 C．不选大肠杆菌作受体,可能是因为HBsAg需要依赖内质网和高尔基体进行后期加工和包装 D．该技术的原理是基因重组,通过该技术生产出的疫苗化学本质是蛋白质 25．某科研小组采用PCR 技术构建了红色荧光蛋白基因(dsred2)和α-淀粉酶基因(amy)的dsred2-amy融合基因，其过程如图所示，其中引物②和引物③中部分序列(黑色区域)可互补配对。下列说法正确的是（  ） A．利用PCR 技术扩增基因时不需要解旋酶来打开 DNA 双链 B．不能在同一反应体系中进行dsred2 基因和amy基因的扩增 C．dsred2基因和amy 基因扩增混合后只能得到一种类型的杂交链 D．杂交链延伸得到 dsred2-amy融合基因的过程不需要加引物 三、非选择题: 本题共4 小题，共45 分。 26．课内教材基础知识过关填空： （1）单克隆抗体的制备过程中需要两次筛选，其中第一次筛选的目的是筛选出杂交瘤细胞，方法是用特定的 进行筛选。第二次筛选的目的是筛选出能分泌所需抗体的杂交瘤细胞。方法是 和 。 （2）在微生物培养中，能对微生物计数的纯化方法是 。统计结果时一般选用 来表示。 （3）在啤酒工业化生产时，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解都在 阶段完成。 （4）基因工程技术的三种工具，限制性内切核酸酶能够识别双链DNA 分子中特定的 。DNA连接酶能恢复被限制酶切开的 。质粒进入受体细胞后，能在细胞中 或 ，随受体DNA同步复制。 （5）PCR产物一般通过 来鉴定，在其中DNA分子的迁移速率与 （答对一方面即可）等有关。 27．猕猴桃营养丰富，维生素C和多种抗氧化成分含量极高，能够中和体内自由基，减少氧化应激对细胞的损伤，延缓衰老过程，降低某些慢性疾病的发生概率，因而被称为“水果之王”。下图是以猕猴桃为原料发酵制作果酒和果醋的过程简图。结合所学知识，回答下列问题： (1)酿制果酒时，一般要先通气的目的是 。在无氧条件下进行酒精发酵的反应式为 。 (2)醋酸菌将乙醇变为醋酸的环境条件是糖源 （填“充足”或“不足”）。为鉴定果醋是否酿制成功，除可以通过观察菌膜、尝、嗅之外，还可以通过检测 作进一步的鉴定。果酒和果醋发酵中都没有进行严格的消毒灭菌，但杂菌却不能正常生长繁殖，原因是 。 (3)酿制成功的果酒，如果暴露在空气中会逐渐出现酸味，气温高的夏天更易如此，其原因是 。 28．据中国科学院广州生物医药与健康研究院消息，该院在国际权威学术期刊Cell Stem Cell（《细胞干细胞》）发表封面研究论文，显示科研团队通过基因编辑和干细胞技术，成功在猪胚胎中培育出具有功能性的人类心脏雏形和人源化中肾结构。这也是世界范围内首次报告人源化功能器官异种体内培育案例。下图为相关过程，SIX1和SALLI基因是猪肾脏发育和肾脏细胞自我更新的必需基因。请分析回答问题： (1)可用 （写出1种即可）化学方法激活重构胚。 (2)取猪的去核卵母细胞步骤中的“核”指的是 。这里的去核普遍使用 法。 (3)从干细胞的特点角度分析注入人源干细胞的作用 。 (4)在胚胎移植前需要对代孕母猪进行 处理。人源肾脏用于器官移植， （填“会”或“不会”）产生免疫排斥。 (5)用基因工程等技术，选取囊胚中的某些细胞，可以确定得到的嵌合胚胎是否为人源胚胎，请简要写出实验思路： 。 29．土壤盐渍化影响水稻生长发育。科研人员将水稻耐盐基因OsMYB56导入不耐盐碱水稻品种吉粳88中，培育出了4株耐盐碱水稻新品种。其操作流程及相关限制酶识别序列和切割位点如下图，图中Ⅰ~Ⅲ为限制酶的酶切位点，bar为抗除草剂基因，Kanr为卡那霉素抗性基因。请回答： （1）过程①需要______的催化。过程③需要用________处理根瘤农杆菌，使其成为感受态细胞。 限制酶 EcoRⅠ BamHⅠ HindⅢ SacⅠ 识别序列和切割位点 G↓AATTC G↓GATCC A↓AGCTT GAGCT↓C （2）过程①所用引物如下，则过程②使用的限制酶是_________和_________。 5'-CGCGGATCCATGAGAAAGGGCCCGTGG-3' 5'-CGAGCTCCTATCCCCAGAGAGGTAGCGA-3' （3）花椰菜病毒启动子的作用是_____________，本研究中设计两个相同启动子分别连接bar和目的基因，其目的是____________________。 （4）科研人员采用特定的方法大量提取成功转化的4株植株叶片的基因组DNA（目的基因中不含AAGCTT），用HindⅢ完全酶切，酶切产物经电泳、转膜后与做标记的目的基因杂交，其杂交结果如图所示（图中数字标号代表转化成功的植株）。下列有关分析正确的有_________。 ①还有不含目的基因的DNA条带在图中没有显示 ②杂交带位置不同说明HindⅢ酶切形成的DNA片段长度不同 ③相同位置上杂交带对应DNA片段的脱氧核苷酸序列相同 ④目的基因插入到受体细胞核DNA的位置和数量都是随机的 大庆铁人中学2024级高二年级下学期期中考试 第 2 页 共 5 页 学科网（北京）股份有限公司 $■13■ 报告查询：登录zhixue.com或扫描二维码下载App (用户名和初始密码均为准考证号) ▣踩▣ 大庆铁人中学2024级高二年级下学期期中考试 灯 百 生物答题卡 姓名： 班级： 考场/座位号： 准考证号 注意事项 [0] [0] [0] [o] [o] [0] [o] [o] 1. 答题前请将姓名、班级、考场、准考证号填写清楚。 [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] [1] 客观题答题，必须使用2B铅笔填涂，修改时用橡皮擦干净。 [2] 「21 [2] [21 [2] [2] [2] [2] 3 主观题答题，必须使用黑色签字笔书写。 [3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] [3] 4. 必须在题号对应的答题区域内作答，超出答题区域书写无效 [4] [4] [4] [4] [4] [4] [4] [4] 保持答卷清洁、完整。 [5] [5] [5] [5] [5j [5] [5] [5] [6] 6] [6] [6] [6] [6] [6] [6] 正确填涂 缺考标记 口 [7] [7] [7] [7] [7] [7] [7] z] [8] [8] [8] [8] [8] [8] [8] [8 [9] [9] [9] [9] [9] [9] [9] [9] 一、单选题 1[A][B][c][D] 6[A][B][C][D]11[A][B][C][D]16[A][B][C][D] 2[A][B][C][D] T[A][B][C][D]12[A][B][C][D]17[A][B][C][D] 3[A][B][c][D] 8[A][B][C][D]13[A][B][C][D]18[A][B][C][D] 4[A][B][c][D] 9[A][B][C][D]14[A][B][C][D]19[A][B][c][D] 5[A][B][C][D] 10[A][B][c][D] 15[A][B][C][D]20[A][B][c][D] 二、不定项多选题 21[A][B][C][D] 22[A][B][C][D] 23[A][B][C][D] 24[A][B][C][D] 25[A][B][C][D] 三 非选择题 26. (1) (2) (3) (4) (5) ■ 27. (1) (2) (3) 28. (1) (2) (3) (4) (5) 29.(1) (2) (3) (4) ■ 大庆铁人中学2024级高二年级下学期期中考试 生物参考答案 一、选择题: 本题共20小题，每小题2分，共40分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1-5 BCDAC 6-10 AABDB 11-15 DCCDB 16-20 BDACD 二、选择题: 本题共 5 小题，每小题 3 分，共 15 分。在每小题给出的四个选项中，有一项或多项是符合题目要求的。全部选对得3 分，选对但选不全得 1 分，有选错得 0 分。 21．CD 22.ABD 23．AD 24．BCD 25．ABD 三、非选择题: 本题共4 小题，共45 分。 26：（每空1分，共12分） （1）特定的选择培养基 克隆化培养 抗体检测 （2）稀释涂布平板法 菌落数 （3）主发酵 （4）核苷酸序列 磷酸二酯键 进行自我复制 整合到受体DNA上 （5）琼脂糖凝胶电泳 凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象 27.（除标记外每空2分，共11分） (1)让酵母菌在有氧条件下大量繁殖 C6H12O62C2H5OH＋2CO2＋少量能量 (2)不足（1分） 发酵前后的pH 酵母菌及醋酸菌大量的代谢产物如酒精及醋酸抑制了其他杂菌的生长繁殖 (3) 醋酸菌是好氧细菌，最适生长温度为30~35℃（夏天温度较高），导致醋酸菌大量生长产生醋酸 28.（除标记外每空2分，共11分） (1) Ca2+载体（乙醇、蛋白酶合成抑制剂）（写出1种即可） （1分） (2)纺锤体-染色体复合物 显微操作去核法（1分） (3)使人源干细胞分化产生人的组织、器官 (4) 同期发情 （1分） 不会 (5)选取囊胚的滋养层细胞，检测是否有人特有的DNA序列 29． （除标记外每空2分，共11分） （1）耐高温的DNA聚合酶（1分） Ca2+（或CaCl2） （1分） （2） BamHI SacI （3）RNA聚合酶识别、结合 （1分） 依据bar表达推测目的基因同时表达 （4）①②④ 学科网（北京）股份有限公司 $