精品解析：河北省衡水市部分学校2025—2026学年高二年级下学期4月质量检测生物试卷

4月高二质量检测 生物 注意事项： 1．考试时间为75分钟，满分100分。 2．全部答案在答题卡上完成，答在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 传统发酵技术是人类利用微生物的智慧结晶，相关叙述正确的是（　　） A. 为了提高果酒的产出量，果汁应尽量装满发酵瓶 B. 醋酸菌在缺少糖源和O2时可直接将乙醇转化为乙醛，再转变为乙酸 C. 制作泡菜过程，应对洗净切好的新鲜蔬菜进行加热消毒处理 D. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题 【答案】D 【解析】 【详解】A、果酒发酵时果汁不能装满发酵瓶，需预留约1/3的空间，一方面为初期酵母菌有氧呼吸大量繁殖提供氧气，另一方面可避免发酵产生的CO2导致发酵液溢出，A错误； B、醋酸菌是好氧细菌，生命活动始终需要氧气，仅在氧气充足、缺少糖源的条件下，才能将乙醇转化为乙醛，再转变为乙酸，缺少O2时醋酸菌无法正常代谢，B错误； C、制作泡菜利用的是新鲜蔬菜表面附着的天然乳酸菌，若对蔬菜进行加热消毒会杀死乳酸菌，导致发酵无法正常进行，C错误； D、传统发酵通常利用天然混合菌种进行发酵，因此存在杂菌情况不明、发酵过程控制缺乏标准等问题，D正确。 2. 防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的关键。下列叙述正确的是（　　） A. 有的微生物能够寄生于多种细菌体内，使细菌裂解，可实现生物消毒 B. 用浸泡在体积分数为70%的酒精中的涂布器直接涂布 C. 对无菌室、超净台和实验员可采用紫外线杀菌 D. 使用后的培养基丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境 【答案】A 【解析】 【详解】A、可寄生在细菌体内使细菌裂解的微生物为噬菌体（细菌病毒），利用噬菌体特异性裂解病原菌的特性进行生物消毒，无化学试剂残留问题，可达到减少杂菌的效果，A正确； B、浸泡在70%酒精中的涂布器需先放在酒精灯火焰上灼烧灭菌，待冷却后才能进行涂布操作，B错误； C、紫外线可用于无菌室、超净台的消毒，但紫外线会损伤人体的皮肤、黏膜，不能用于实验员的杀菌，实验员需通过酒精擦拭双手、穿戴实验防护装备的方式进行消毒，C错误； D、使用后的培养基丢弃前必须进行灭菌处理，消毒仅能杀死物体表面的部分微生物，无法杀灭芽孢、孢子等抗性较强的休眠体，仍可能会造成环境污染，D错误。 3. 下列关于植物细胞工程的操作和应用的叙述，正确的是（　　） A. 外植体是离体的植物器官、组织或细胞等，培养前需要对其进行灭菌处理 B. 培养瓶封口膜可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C. 培养基中需添加一定量的蔗糖以利于调节渗透压和提供营养物质 D. 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 【答案】C 【解析】 【详解】A、外植体是具有活性的离体植物器官、组织或细胞，培养前仅需进行消毒处理，灭菌会杀死外植体自身的活细胞导致培养失败，A错误； B、培养瓶封口膜具有透气性，可在阻挡外界杂菌侵入的同时保证瓶内外气体交换，满足植物细胞有氧呼吸的气体需求，不会阻止气体交换，B错误； C、培养基中添加的蔗糖既可以作为碳源、能源，为外植体生长提供营养，也能够调节培养基渗透压，维持植物细胞的正常形态和生理功能，C正确； D、二倍体植株的花粉经脱分化和再分化得到的是仅含1个染色体组的单倍体植株，高度不育，不能稳定遗传，需经染色体加倍处理后才可获得稳定遗传的植株，D错误。 4. 下面对动物细胞融合技术的叙述，不合理的是（　　） A. 动物细胞融合是指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B. 细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究 C. 杂交瘤技术是在动物细胞融合技术基础上发展起来的 D. 融合的动物细胞在适宜的条件下，可产生完整个体 【答案】D 【解析】 【详解】A、动物细胞融合的定义就是将两个或多个动物细胞结合形成一个杂种细胞的过程，A正确； B、细胞融合技术可应用于细胞遗传、细胞免疫、肿瘤机制研究以及单克隆抗体制备等领域，B正确； C、杂交瘤技术通过将免疫的B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合获得能分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞，是在动物细胞融合技术基础上发展而来的，C正确； D、动物体细胞的全能性受到严格限制，目前技术条件下融合的动物细胞无法发育为完整个体，仅动物细胞核具备全能性（需借助核移植技术才能体现），D错误。 5. 利用现代生物工程技术繁殖后代，属于有性生殖的是（　　） A. 植物组织培养 B. 试管婴儿 C. 动物细胞核移植 D. 胚胎分割 【答案】B 【解析】 【详解】A、植物组织培养利用植物细胞的全能性，直接由离体的植物组织、器官或细胞发育为完整个体，未经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，A错误； B、试管婴儿的培育依托体外受精-胚胎移植技术，首先完成精子和卵细胞的体外受精形成受精卵，再将受精卵发育成的早期胚胎移植到母体子宫内发育，经过两性生殖细胞的结合，属于有性生殖，B正确； C、动物细胞核移植是将供体体细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中构建重组细胞，再由重组细胞发育为完整个体，未经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，C错误； D、胚胎分割是将早期胚胎切割为多等份，每一份都独立发育为完整个体，未经过两性生殖细胞的结合，属于无性生殖，D错误。 6. 下列关于基因工程操作的基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，一般不能剪切自身的DNA B. E.coliDNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远高于T4 DNA连接酶 C. 基因工程中用的载体大多数为天然质粒 D. 作为载体的质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 【答案】A 【解析】 【详解】A、限制酶主要从原核生物中分离纯化获得，原核生物自身DNA不含该限制酶的识别序列，或识别序列已被甲基化修饰，因此限制酶一般不能剪切自身的DNA，A正确； B、E.coliDNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4 DNA连接酶，B错误； C、天然质粒通常无法同时满足具备多个限制酶切位点、标记基因、能在受体细胞中稳定复制等载体的要求，因此基因工程中使用的载体大多为人工改造后的质粒，C错误； D、作为载体的质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选标记基因，抗性基因可使受体细胞在含相应抗生素的选择培养基上存活，从而完成筛选，D错误。 7. 天然胰岛素易形成二聚体，使得其疗效被延缓。通过蛋白质工程将胰岛素第28位的脯氨酸替换为天冬氨酸，从而抑制了胰岛素的聚合，以下叙述错误的是（　　） A. 利用蛋白质工程对胰岛素的改造需要以基因工程为基础 B. 改造胰岛素的过程实际是改造胰岛素基因的过程 C. 改造前后胰岛素在细胞内合成过程中遗传信息的流向不同 D. 蛋白质工程难度很大是因为对蛋白质的高级结构了解不够 【答案】C 【解析】 【详解】A、蛋白质工程是第二代基因工程，其对蛋白质的改造需要通过改造对应的基因实现，必须以基因工程为基础，A正确； B、蛋白质直接改造后无法遗传，且基因控制蛋白质的合成，因此改造胰岛素的实质是对胰岛素基因进行改造，B正确； C、改造前后的胰岛素都是蛋白质，在细胞内合成时遗传信息的流向均为DNA转录为mRNA，再翻译为蛋白质，遗传信息流向相同，C错误； D、蛋白质的功能依赖其高级结构，目前人类对大多数蛋白质的高级结构了解较少，因此蛋白质工程的实施难度很大，D正确。 8. 下列关于生物武器的说法，错误的是（　　） A. 生物武器具有致病能力强，攻击范围广的特点 B. 彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望 C. 生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类和毒品类等 D. 生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等侵入人体 【答案】C 【解析】 【详解】A、生物武器的致病成分多为高致病性的微生物或生化毒剂，具有致病能力强、攻击范围广的特点，A正确； B、生物武器危害性极大且违背人道主义原则，彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望，B正确； C、生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类、基因重组的致病菌等，毒品类不属于生物武器范畴，C错误； D、生物武器的传播侵入途径较多，可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等方式侵入人体，D正确。 9. 我国卫生部门规定了饮用水标准，1mL自来水检出的菌落总数不可以超过100个，不得检出总大肠菌群（包含大肠杆菌等）。下列检测方法不合理的是（　　） A. 采集水样的试管在使用前要灭菌，采集水样后立即密封并尽快检测 B. 将待测水样滴加到细菌计数板上，在显微镜下计数 C. 取一待测水样过滤，将滤膜贴在平板培养基上，培养后计数 D. 固体培养基中添加伊红—亚甲蓝，接种合规水样后不应产生深紫色菌落 【答案】B 【解析】 【详解】A、采集水样的试管使用前灭菌可避免试管自带杂菌污染水样，采集后立即密封、尽快检测可避免水样被外界微生物污染，保证检测结果的准确性，方法合理，A不符合题意； B、显微镜直接计数法会同时统计死菌和活菌，而饮用水标准中要求统计的是可形成菌落的活菌数，同时可能无法区分细菌种类，统计结果是大肠菌群，B符合题意； C、该方法为滤膜法，过滤后水样中的细菌会留在滤膜上，将滤膜贴在平板培养基上培养后，每个活菌可形成一个单菌落，通过菌落计数可准确计算水样中的活菌数量，方法合理，C不符合题意； D、伊红—亚甲蓝可用来鉴别大肠杆菌，大肠杆菌在此培养基上会形成深紫色带金属光泽的菌落，合规水样不得检出总大肠菌群（包含大肠杆菌），因此接种后不会产生深紫色菌落，方法合理，D不符合题意。 10. 科学家将四种转录因子的基因：c-Myc、Oct3/4、Sox2和Klf4导入成纤维细胞，成功培育出了诱导多能干细胞（iPS），并能诱导其定向分化成多种细胞，下列说法正确的是（　　） A. 培养iPS的培养基中必须添加血清，因为它含有生长因子、生长素等多种成分 B. iPS经过定向诱导分化，用于器官移植，体现了细胞的全能性 C. iPS分化成的多种细胞中核酸均相同，蛋白质不完全相同 D. 还可以直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS 【答案】D 【解析】 【详解】A、生长素是植物特有的激素，动物血清中不含生长素，且iPS也可在无血清的合成培养基中培养，A错误； B、细胞全能性是指已分化的细胞具有发育成完整个体的潜能，iPS仅定向分化为器官，未发育为完整个体，不能体现细胞全能性，B错误； C、核酸包括DNA和RNA，细胞分化的实质是基因的选择性表达，分化得到的细胞中核DNA相同，但mRNA种类存在差异，即核酸不完全相同，蛋白质也不完全相同，C错误； D、诱导形成iPS的方法较多，除导入特定转录因子基因外，还可直接导入特定功能蛋白、使用小分子化合物诱导等，D正确。 11. 营养缺陷型细菌是指因丧失合成某些生活必需物质的能力，不能在基本培养基上生长的细菌。下图为获得赖氨酸营养缺陷型大肠杆菌的过程（原位影印是指用无菌绒布将一个平板的菌落“复制”到另外的空白平板上）。下列叙述错误的是（　　） A. 图中紫外线处理的目的是诱导大肠杆菌产生基因突变 B. 平板接种细菌后，放入恒温培养箱中倒置培养 C. ③所用培养基不含赖氨酸，甲菌落为所需的赖氨酸缺陷菌株 D. 实验操作过程中必须打开超净工作台上的紫外灯消毒 【答案】D 【解析】 【详解】A、紫外线可以提高突变的频率，从而提高突变菌株的数量，故图中紫外线处理的目的是诱导大肠杆菌产生基因突变，A正确； B、平板接种后恒温培养时需要倒置培养，这样可以防止冷凝水滴落污染菌落，同时避免培养基水分过快蒸发，B正确； C、根据题意，图中培养基中①②④为完全培养基，只有培养基③为缺乏赖氨酸的基本培养基，③所用培养基不含赖氨酸，甲菌落为所需的赖氨酸缺陷菌株，C正确； D、超净工作台的紫外灯消毒是在操作前进行的，实验操作过程中不能打开紫外灯：紫外线会杀死实验用的大肠杆菌，还会对操作人员造成伤害，D错误。 12. 随着转基因技术的发展，基因污染相伴而生，下列有关基因污染的说法错误的是（　　） A. 抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，从而产生“超级杂草” B. 转入抗虫基因的植物，有可能会导致昆虫群体抗性基因频率增加 C. 基因污染可能对生物多样性、生态环境和人体健康造成潜在威胁 D. 基因污染是基因工程的“死结”，科学家对此束手无策 【答案】D 【解析】 【详解】A 、抗除草剂基因确实可能通过花粉传播到近缘杂草中，使杂草获得抗除草剂性状，从而产生 “超级杂草”，A正确； B 、转入抗虫基因的植物会对昆虫种群进行定向选择，具有抗性基因的个体更容易存活繁殖，导致昆虫群体抗性基因频率增加，B正确； C 、基因污染（如转基因生物的外源基因扩散）可能对生物多样性、生态环境和人体健康造成潜在威胁，C正确； D 、基因污染并非 “死结”，科学家可以通过多种措施来防范和控制，例如培育不育系、限制转基因植物的传播、加强监管等，并非束手无策，D错误。 13. 组织纤维溶酶原激活物（t-PA）能高效降解血栓，是心梗和脑血栓的急救药。临床使用发现t-PA有诱发颅内出血的副作用，为此研究人员利用重叠延伸PCR技术对t-PA基因进行改造，过程如图所示。下列说法错误的是（　　） A. PCR1和PCR2不可以在同一体系中进行 B. 该技术成功的关键是引物2和引物3互补 C. 产物甲和产物乙混合、变性后，杂交延伸产生突变基因的过程需要引物1和引物4 D. 突变后的t-PA基因与原基因编码的蛋白质氨基酸数目相同 【答案】C 【解析】 【详解】A、PCR1和PCR2不能在同一体系中同时进行，因为诱变引物2和3会发生碱基互补配对，A正确； B、重叠延伸PCR技术需要产物甲和产物乙拥有互补的重叠末端才能后续杂交延伸，这个互补末端来自引物2和引物3的互补序列，因此该技术成功的关键是引物2和引物3存在互补序列，B正确； C、产物甲和产物乙混合、变性后，杂交延伸产生突变基因的过程不需要引物，产物甲和产物乙的部分碱基序列作为模板，C错误； D、突变后的t-PA基因是发生了碱基替换导致的，与原基因编码的蛋白质氨基酸数目相同，D正确。 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 发酵工程是指采用工程技术手段，利用微生物为人类生产有用生物产品的一种技术。下列相关说法正确的是（　　） A. 发酵工程的中心环节是对微生物细胞本身或其代谢物进行分离、提纯 B. 谷氨酸的发酵生产在酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 C. 在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力 D. 酿制啤酒的过程，焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 【答案】BC 【解析】 【详解】A、发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，A错误； B、谷氨酸的发酵生产中，在酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸，B正确； C、青贮饲料中添加乳酸菌后，乳酸菌厌氧发酵产生乳酸，可抑制杂菌繁殖，实现饲料保鲜、提高饲料品质，同时乳酸菌属于益生菌，可调节动物肠道菌群，提高动物免疫力，C正确； D、酿制啤酒时焙烤大麦的目的是杀死大麦胚终止发芽，同时保留大麦中淀粉酶的活性，焙烤温度不足以实现灭菌，D错误。 15. 苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用，科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是（　　） A. 下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B. 过程①需要光照，有利于离体细胞进行光合作用 C. 由无毒下胚轴切段经过程①②③所得苦参幼苗具有抗病毒的特性 D. 过程④不同于过程①②③，需选用液体培养基 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、下胚轴切段需用体积分数为70%的酒精和质量分数为5%左右的次氯酸钠溶液进行消毒处理，其目的是防止杂菌污染，A错误； B、过程①为脱分化过程，该过程不需要光照，B错误； C、由无毒下胚轴经组织培养获得的苦参幼苗只是病毒极少甚至不带病毒，是脱毒苗，但不能抗病毒，C错误； D、过程④是为了实现工厂化培养，原理是细胞增殖，需要提供液体培养基，有利于细胞获得营养，过程①②③为植物组织培养获得完整幼苗的过程，原理是植物细胞的全能性，需要选用固体培养基，D正确。 16. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可以为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的有（　　） A. 从卵巢中获得发育成熟的卵母细胞与获能的精子进行体外受精 B. 在移植前应对供体和受体进行同期发情处理，使二者处于相同的生理状态 C. 给供体动物饲喂一定量的激素后可实现超数排卵，以增加胚胎的数量 D. 对桑葚胚、囊胚或原肠胚进行胚胎分割移植，可以提高胚胎的利用率 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、卵巢中获得的卵母细胞需要经过成熟培养，即培养到减数第二次分裂中期，才能与获能的精子进行体外受精，A错误； B、胚胎移植前对供体与受体进行同期发情处理，使二者子宫生理状态同步，确保胚胎可正常着床，B正确； C、给供体动物注射一定量的激素后可实现超数排卵，以增加胚胎的数量，饲喂会导致使用的激素被消化而无效，C错误； D、对桑葚胚、囊胚进行胚胎分割移植，可以提高胚胎的利用率，原肠胚已经分化，不可进行胚胎分割移植和胚胎移植，D错误。 17. “第四代试管婴儿”技术是将妻子的卵母细胞核移植到捐赠者去核卵母细胞中获得的重构卵母细胞，与丈夫的精子进行受精，从而获得重构胚胎也就是通常说的“三亲胚胎”，其过程如图所示。下列有关叙述合理的是（　　） A. “试管婴儿”技术能解决所有的不孕不育问题 B. 图中新生儿因涉及三个亲代而面临社会伦理问题 C. 卵母细胞去核的实质是去除细胞中的纺锤体一染色体复合物 D. “第四代试管婴儿”技术可避免母亲的线粒体疾病传递给下一代 【答案】BCD 【解析】 【详解】A、试管婴儿”技术不能解决所有的不孕不育问题，比如男性无精症、女性子宫严重病变等情况，该技术无法适用，A不符合题意； B、新生儿的遗传物质主要来自母亲（核遗传物质）、父亲（精子）和捐献者（线粒体遗传物质，线粒体含少量DNA），因涉及三个亲代的遗传物质贡献，会面临社会伦理争议，B符合题意； C、卵母细胞去核通常针对MⅡ期细胞，此时无完整细胞核，实质是去除纺锤体-染色体复合物，C符合题意； D、第四代试管婴儿”中，妻子的卵母细胞仅提供细胞核，线粒体来自捐赠者的卵母细胞，因此可以避免母亲的线粒体疾病传递给下一代，D符合题意。 18. CRISPR/Cas9基因编辑系统是常用的基因编辑技术，是科学家于1987年在大肠杆菌中发现的，其原理是通过设计向导RNA中的识别序列，引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。下列有关叙述正确的是（　　） A. 向导RNA可以特异性识别一个特定的DNA序列，保证了切割的精确性 B. Cas9蛋白相当于限制酶，能作用于脱氧核糖和碱基之间的化学键 C. CRISPR-Cas9基因组编辑系统使大肠杆菌获得抵抗溶菌酶的能力 D. CRISPR-Cas9基因编辑技术的发现，为器官移植供体的来源开辟了新思路 【答案】AD 【解析】 【详解】A、向导RNA中的识别序列可以与特定的DNA序列碱基互补配对，从而特异性识别目标DNA位点，引导Cas9蛋白精准切割，保证了切割的精确性，A正确； B、Cas9蛋白能从中间切割双链DNA，相当于限制酶，作用于脱氧核糖和磷酸之间的磷酸二酯键，B错误； C、CRISPR-Cas9系统可以定向切割外源DNA，故该系统使大肠杆菌获得抵抗噬菌体的能力，但不能获得抵抗溶菌酶的能力，C错误； D、CRISPR-Cas9基因编辑技术可以对基因进行精准修饰，可用于改造器官供体的基因组，为解决器官移植的免疫排斥和供体不足问题开辟了新思路，D正确。 三、非选择题：本题共5小题，共59分。 19. 淀粉酶用途最广，从土壤中筛选出产生淀粉酶的高产菌株，进行了以下实验，回答相关问题： （1）在淀粉分解菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以______为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有______。在培养细菌时，一般需要将培养基的pH调至______。 （2）实验中选用______（方法）接种微生物，根据结果可以估算每克土壤中的细菌数为______个，该方法统计的结果往往比活菌的实际数目______，原因是______。 （3）在接种微生物时还需设置不接种微生物的空白培养基作为对照，目的是______。 （4）还可以在培养基中添加______（试剂），根据______（特征）初步判断微生物分解淀粉的能力。 【答案】（1） ①. 淀粉 ②. 氮源、水、无机盐、琼脂 ③. 中性或弱碱性 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 9.9×107 ③. 少 ④. 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 （3）检测培养基是否被污染（检测培养基灭菌是否合格） （4） ①. 碘液 ②. 菌落周围产生的透明圈直径与菌落直径比值的大小（菌落周围产生的透明圈大小） 【解析】 【小问1详解】 要筛选“淀粉分解菌”，必须使用以淀粉为唯一碳源的选择培养基——只有能分泌淀粉酶分解淀粉的菌才能生长。微生物培养基基本成分包括：碳源、氮源、水、无机盐；固体培养基还需加凝固剂（如琼脂）。细菌适宜生长的pH一般为中性或弱碱性（pH 6.5~7.5），真菌偏酸，放线菌偏碱。 【小问2详解】 从图示可知，采用的是梯度稀释+涂布平板的方法，即稀释涂布平板法。有效菌落数取平均值：(204+193+197)÷3=198， 稀释倍数：初始10g土样+90mL水，稀释101；后续4次稀释，每次取1mL加9mL水，每次稀释101，最终稀释倍数为105，再取0.2mL涂布，每克土壤菌数：198÷0.2×105=9.9×107个。当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，导致计数结果比实际活菌数低。 【小问3详解】 设置“不接种的空白培养基”是为了检验实验操作和培养基本身是否无菌。若空白组长菌，说明灭菌失败或操作污染， 实验数据不可信。 【小问4详解】 淀粉遇碘变蓝黑色​→若菌落分泌淀粉酶→分解周围淀粉→不变色→出现透明圈。透明圈越大，或透明圈/菌落直径比值越大​→表明该菌株产淀粉酶能力越强→可用于初步筛选高产菌株。 20. 将普通小麦（6N＝42）与耐盐性强的中间偃麦草（2N＝14）进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图所示。请回答下列问题： （1）过程①需要利用______处理两种植物细胞，过程②常用的方法有______（写出两个）。 （2）选择具有______荧光标记的原生质体继续培养，获得杂种细胞，杂种细胞形成的标志是______。 （3）杂种细胞内最多含有______条染色体，经______（过程）可培育成杂种植株，杂种植株一定耐盐吗？为什么？______，______。 （4）植物体细胞杂交技术的意义是______。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 离心法、电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法（写出任意两个即可） （2） ①. 红色和绿色 ②. 再生出新的细胞壁 （3） ①. 112 ②. 脱分化、再分化 ③. 不一定 ④. 生物体内基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控，相互影响的 （4）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种 【解析】 【小问1详解】 过程①需要利用纤维素酶和果胶酶处理两种植物细胞，进而获得原生质体，因为植物细胞壁的成分主要是纤维素和果胶，过程②为原生质体的融合过程，促进原生质体融合常用的方法有离心法、电融合法、聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法。 【小问2详解】 带有红色和绿色荧光标记的细胞为融合成功的杂种细胞，因此需要选择具有红色和绿色荧光标记的原生质体继续培养，获得杂种细胞，原生质体再生出细胞壁是杂种细胞形成的标志。 【小问3详解】 杂种细胞内含有42+14=56条染色体，在有丝分裂后期会有112条染色体，即杂种细胞内最多含有112条染色体，经脱分化、再分化可培育成杂种植株，该杂种植株的培育应用了植物组织培养技术。由于生物体内基因的表达不是孤立的，它们之间是相互调控，相互影响的，因而杂种植株不一定耐盐。 【小问4详解】 通过植物体细胞杂交获得了杂种植株，该操作打破了不同物种之间的生殖隔离，实现了远缘杂交，可见植物体细胞杂交技术的意义是打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培育植物新品种。 21. 肿瘤晚期患者的治疗，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类。回答下列问题： （1）在单克隆抗体制备过程中，初步筛选出来的杂交瘤细胞进行______和______才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 （2）将制备出的单克隆抗体与______、______三部分构成ADC（抗体一药物偶联物），利用ADC治疗肿瘤的优势是______。 （3）下图表示过继性细胞治疗过程，最后得到的能够特异性地识别并处理肿瘤细胞的淋巴细胞是指______，这些细胞回输后能有效避免免疫排斥的原因是______。在淋巴细胞进行单克隆培养的过程中会出现分裂受阻，其原因主要有细胞密度过大、______、______，还会发生接触抑制现象，可用______处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。 【答案】（1） ①. 克隆化培养 ②. 抗体检测 （2） ①. 接头 ②. 药物 ③. ADC能通过实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，不对健康细胞造成伤害 （3） ①. 细胞毒性T细胞 ②. 这些免疫细胞来自自体，与人体细胞的组织相容性抗原相同 ③. 有害代谢物积累 ④. 培养液中营养物质缺乏 ⑤. 胰蛋白酶##胶原蛋白酶 【解析】 【小问1详解】 在单克隆抗体制备过程中，初步筛选出杂交瘤细胞后，需要进行克隆化培养，以增加杂交瘤细胞的数量，同时进行抗体检测，从而获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 【小问2详解】 ADC（抗体-药物偶联物）由单克隆抗体、接头、药物三部分构成。利用ADC治疗肿瘤的优势是ADC能通过实现对肿瘤细胞的选择性杀伤，不对健康细胞造成伤害。 【小问3详解】 在过继性细胞治疗过程中，最后得到的能够特异性地识别并处理肿瘤细胞的淋巴细胞是细胞毒性T细胞。这些细胞回输后能有效避免免疫排斥的原因是这些免疫细胞来自自体，与人体细胞的组织相容性抗原相同。在淋巴细胞进行单克隆培养时，出现分裂受阻的原因主要有细胞密度过大、有害代谢物积累、培养液中营养物质缺乏，对于贴壁生长的细胞发生接触抑制现象，可用胰蛋白酶（或胶原蛋白酶）处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。 22. 蓖麻毒蛋白（Ricin）是常用于杀伤肿瘤细胞的药物之一。为了提取并扩增编码Ricin的基因，科研人员进行了如下操作。回答下列问题： （1）从蓖麻植株的幼嫩组织提取DNA，为了检验提取物中是否含有DNA，将提取物溶解于______溶液，用______试剂，在______条件下检验，如果呈______色，说明提取物中含有DNA。 （2）利用提取到的DNA，通过PCR技术扩增目的基因，PCR技术的原理是：______和______。PCR扩增DNA时需要添加Mg2+和引物，作用分别是______、______。 （3）一个DNA分子经过10次循环后得到的DNA分子中，理论上只含有一个引物的DNA有______个。 （4）PCR产物一般通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，在凝胶中，DNA分子的迁移速率与______、__________等有关。在电场作用下，DNA会向______的电极移动。 【答案】（1） ①. 2mol/LNaCl ②. 二苯胺 ③. 沸水浴 ④. 蓝 （2） ①. DNA半保留复制 ②. DNA热变性 ③. 激活DNA聚合酶 ④. 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 （3）2##二##两 （4） ①. 凝胶的浓度 ②. DNA分子的大小和构象 ③. 与它所带电荷相反 【解析】 【小问1详解】 从蓖麻植株的幼嫩组织提取DNA，为了检验提取物中是否含有DNA，应先将提取物溶解于2mol/LNaCl溶液中，检验DNA是用二苯胺试剂在沸水浴条件下进行，如果实验结果呈现蓝色，说明提取物中含有DNA。 【小问2详解】 利用提取到的DNA，通过PCR技术扩增目的基因，PCR技术的原理是：①DNA半保留复制，②DNA热变性。PCR扩增DNA时需要添加Mg2+和引物，Mg2+的作用是激活DNA聚合酶，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸。 【小问3详解】 一个DNA分子（2条脱氧核糖核苷酸链）经过10次循环后得到的DNA分子中，DNA分子的复制为半保留复制，所以理论上只含有一个引物的DNA有两个。 【小问4详解】 PCR产物一般通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，在凝胶中，DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关。在电场作用下，DNA会向与它所带电荷相反的电极移动。 23. 番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因的抗冻番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （1）质粒上启动子的作用是：______，AtCOR15a基因转录时的模板链是______（填“①”或“②”）链。 （2）基因工程常用来自______（生物）的Ti质粒作为载体，当该生物侵染植物后，Ti质粒上的T-DNA能够______。 （3）如果要将目的基因与质粒正确构建成重组质粒，一般采用双酶切法，选用双酶切法的优势是______。 （4）为了将AtCOR15a基因与Ti质粒连接构建表达载体，PCR扩增At-COR15a基因时需在引物的______（填“5′端”或“3′端”）添加限制酶识别序列，结合图表，AtCOR15a基因上下游分别添加限制酶______、______的识别序列，并写出上游引物的碱基序列是5′-______-3′（写出10个碱基即可）。 （5）制备培养基，并在培养基中添加______，可以筛选出成功导入基因AtCOR15a的番茄细胞，还可以通过______技术检验目的基因是否导入受体细胞。另外检测基因AtCOR15a在番茄细胞中是否成功表达，在分子水平上的检测方法是______。 【答案】（1） ①. RNA聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录出mRNA ②. ② （2） ①. 土壤农杆菌 ②. 转移至被侵染的细胞，并且整合到该细胞的染色体DNA上 （3）可防止目的基因和质粒的自身环化以及两者之间反向连接，确保目的基因与质粒正向连接 （4） ①. 5′ ②. BglⅡ ③. EcoRI ④. AGATCTATCC （5） ①. 四环素 ②. PCR等 ③. 抗原—抗体杂交 【解析】 【小问1详解】 质粒上启动子是RNA聚合酶识别和结合位点，驱动基因转录出mRNA，因此，插入的启动子需要放在启动子的后面，根据子链延伸的方向为5’→3’，且与模板链表现为反向平行可判断，AtCOR15a基因转录时的模板链是②链。 【小问2详解】 基因工程常用来自土壤农杆菌的Ti质粒作为载体，因为土壤农杆菌能侵染植物细胞，因而其可以实现对植物的侵染转移，当该生物侵染植物后，Ti质粒上的T-DNA能够转移至被侵染的细胞，并且整合到该细胞的染色体DNA上，进而实现目的基因的转移。 【小问3详解】 如果要将目的基因与质粒正确构建成重组质粒，一般采用双酶切法，选用双酶切法的优势是可防止目的基因和质粒的自身环化以及两者之间反向连接，确保目的基因与质粒正向连接，为后续的正常表达做好基础。 【小问4详解】 为了将AtCOR15a基因与Ti质粒连接构建表达载体，根据目的基因和质粒上的酶切位点可以判断，首先需要排除限制酶XbaⅠ的使用，因为目的基因上有该酶的切割位点，对于质粒的切割，需要选择限制酶BamHⅠ和EcoRⅠ切割，但在目的基因上存在限制酶BamHⅠ的酶切位点，因而在构建时需要设计其同尾酶BglⅡ的酶切位点，因此，PCR扩增AtCOR15a基因时需在引物的“5′端”添加限制酶识别序列，结合图表，AtCOR15a基因上下游分别添加限制酶BglⅡ、EcoRI的识别序列，结合目的基因两端的核苷酸序列可写出上游引物的碱基序列是5′-AGATCTATCC-3′，该序列包括了BglⅡ的识别序列和目的基因的上游转录的非模板链（①链）5’端的四个碱基。 【小问5详解】 重组质粒上带有四环素抗性基因，因而在制备培养基时，需要在培养基中添加四环素，根据细胞的生长情况可以筛选出成功导入基因AtCOR15a的番茄细胞，还可以通过PCR等技术检验目的基因是否导入受体细胞。另外检测基因AtCOR15a在番茄细胞中是否成功表达，可采用抗原—抗体杂交技术，该操作的原理是抗原-抗体的特异性结合。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 4月高二质量检测 生物 注意事项： 1．考试时间为75分钟，满分100分。 2．全部答案在答题卡上完成，答在本试卷上无效。 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1. 传统发酵技术是人类利用微生物的智慧结晶，相关叙述正确的是（　　） A. 为了提高果酒的产出量，果汁应尽量装满发酵瓶 B. 醋酸菌在缺少糖源和O2时可直接将乙醇转化为乙醛，再转变为乙酸 C. 制作泡菜过程，应对洗净切好的新鲜蔬菜进行加热消毒处理 D. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题 2. 防止杂菌污染是获得纯净的微生物培养物的关键。下列叙述正确的是（　　） A. 有的微生物能够寄生于多种细菌体内，使细菌裂解，可实现生物消毒 B. 用浸泡在体积分数为70%的酒精中的涂布器直接涂布 C. 对无菌室、超净台和实验员可采用紫外线杀菌 D. 使用后的培养基丢弃前一定要进行消毒处理，以免污染环境 3. 下列关于植物细胞工程的操作和应用的叙述，正确的是（　　） A. 外植体是离体的植物器官、组织或细胞等，培养前需要对其进行灭菌处理 B. 培养瓶封口膜可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C. 培养基中需添加一定量的蔗糖以利于调节渗透压和提供营养物质 D. 二倍体植株的花粉经脱分化与再分化后得到稳定遗传的植株 4. 下面对动物细胞融合技术的叙述，不合理的是（　　） A. 动物细胞融合是指将两个或多个动物细胞结合形成一个细胞的过程 B. 细胞融合技术能应用于细胞遗传、细胞免疫等研究 C. 杂交瘤技术是在动物细胞融合技术基础上发展起来的 D. 融合的动物细胞在适宜的条件下，可产生完整个体 5. 利用现代生物工程技术繁殖后代，属于有性生殖的是（　　） A. 植物组织培养 B. 试管婴儿 C. 动物细胞核移植 D. 胚胎分割 6. 下列关于基因工程操作的基本工具的叙述，正确的是（　　） A. 限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，一般不能剪切自身的DNA B. E.coliDNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远高于T4 DNA连接酶 C. 基因工程中用的载体大多数为天然质粒 D. 作为载体的质粒通常采用抗生素合成基因作为筛选标记基因 7. 天然胰岛素易形成二聚体，使得其疗效被延缓。通过蛋白质工程将胰岛素第28位的脯氨酸替换为天冬氨酸，从而抑制了胰岛素的聚合，以下叙述错误的是（　　） A. 利用蛋白质工程对胰岛素的改造需要以基因工程为基础 B. 改造胰岛素的过程实际是改造胰岛素基因的过程 C. 改造前后胰岛素在细胞内合成过程中遗传信息的流向不同 D. 蛋白质工程难度很大是因为对蛋白质的高级结构了解不够 8. 下列关于生物武器的说法，错误的是（　　） A. 生物武器具有致病能力强，攻击范围广的特点 B. 彻底销毁生物武器是全世界爱好和平的人民的共同期望 C. 生物武器的种类包括致病菌类、病毒类、生化毒剂类和毒品类等 D. 生物武器可通过吸入、误食、接触带菌物品、被带菌昆虫叮咬等侵入人体 9. 我国卫生部门规定了饮用水标准，1mL自来水检出的菌落总数不可以超过100个，不得检出总大肠菌群（包含大肠杆菌等）。下列检测方法不合理的是（　　） A. 采集水样的试管在使用前要灭菌，采集水样后立即密封并尽快检测 B. 将待测水样滴加到细菌计数板上，在显微镜下计数 C. 取一待测水样过滤，将滤膜贴在平板培养基上，培养后计数 D. 固体培养基中添加伊红—亚甲蓝，接种合规水样后不应产生深紫色菌落 10. 科学家将四种转录因子的基因：c-Myc、Oct3/4、Sox2和Klf4导入成纤维细胞，成功培育出了诱导多能干细胞（iPS），并能诱导其定向分化成多种细胞，下列说法正确的是（　　） A. 培养iPS的培养基中必须添加血清，因为它含有生长因子、生长素等多种成分 B. iPS经过定向诱导分化，用于器官移植，体现了细胞的全能性 C. iPS分化成的多种细胞中核酸均相同，蛋白质不完全相同 D. 还可以直接将特定蛋白导入细胞中或者用小分子化合物等来诱导形成iPS 11. 营养缺陷型细菌是指因丧失合成某些生活必需物质的能力，不能在基本培养基上生长的细菌。下图为获得赖氨酸营养缺陷型大肠杆菌的过程（原位影印是指用无菌绒布将一个平板的菌落“复制”到另外的空白平板上）。下列叙述错误的是（　　） A. 图中紫外线处理的目的是诱导大肠杆菌产生基因突变 B. 平板接种细菌后，放入恒温培养箱中倒置培养 C. ③所用培养基不含赖氨酸，甲菌落为所需的赖氨酸缺陷菌株 D. 实验操作过程中必须打开超净工作台上的紫外灯消毒 12. 随着转基因技术的发展，基因污染相伴而生，下列有关基因污染的说法错误的是（　　） A. 抗除草剂基因有可能通过花粉传播进入杂草，从而产生“超级杂草” B. 转入抗虫基因的植物，有可能会导致昆虫群体抗性基因频率增加 C. 基因污染可能对生物多样性、生态环境和人体健康造成潜在威胁 D. 基因污染是基因工程的“死结”，科学家对此束手无策 13. 组织纤维溶酶原激活物（t-PA）能高效降解血栓，是心梗和脑血栓的急救药。临床使用发现t-PA有诱发颅内出血的副作用，为此研究人员利用重叠延伸PCR技术对t-PA基因进行改造，过程如图所示。下列说法错误的是（　　） A. PCR1和PCR2不可以在同一体系中进行 B. 该技术成功的关键是引物2和引物3互补 C. 产物甲和产物乙混合、变性后，杂交延伸产生突变基因的过程需要引物1和引物4 D. 突变后的t-PA基因与原基因编码的蛋白质氨基酸数目相同 二、多项选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。在每小题给出的四个选项中，有两个或两个以上选项符合要求，全部选对的得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14. 发酵工程是指采用工程技术手段，利用微生物为人类生产有用生物产品的一种技术。下列相关说法正确的是（　　） A. 发酵工程的中心环节是对微生物细胞本身或其代谢物进行分离、提纯 B. 谷氨酸的发酵生产在酸性条件下容易形成谷氨酰胺和N-乙酰谷氨酰胺 C. 在青贮饲料中添加乳酸菌，可以提高饲料的品质，使饲料保鲜，同时提高动物免疫力 D. 酿制啤酒的过程，焙烤是为了利用高温杀死大麦种子胚并进行灭菌 15. 苦参碱具有调节免疫、抗癌等作用，科研人员利用苦参下胚轴进行育苗和生物碱提取，过程如图。下列说法错误的是（　　） A. 下胚轴切段需用无水乙醇和次氯酸钠进行消毒处理 B. 过程①需要光照，有利于离体细胞进行光合作用 C. 由无毒下胚轴切段经过程①②③所得苦参幼苗具有抗病毒的特性 D. 过程④不同于过程①②③，需选用液体培养基 16. 体外受精技术是提高动物繁殖能力的有效措施，该技术还可以为胚胎移植提供可用的胚胎。下列关于体外受精和胚胎移植的叙述，错误的有（　　） A. 从卵巢中获得发育成熟的卵母细胞与获能的精子进行体外受精 B. 在移植前应对供体和受体进行同期发情处理，使二者处于相同的生理状态 C. 给供体动物饲喂一定量的激素后可实现超数排卵，以增加胚胎的数量 D. 对桑葚胚、囊胚或原肠胚进行胚胎分割移植，可以提高胚胎的利用率 17. “第四代试管婴儿”技术是将妻子的卵母细胞核移植到捐赠者去核卵母细胞中获得的重构卵母细胞，与丈夫的精子进行受精，从而获得重构胚胎也就是通常说的“三亲胚胎”，其过程如图所示。下列有关叙述合理的是（　　） A. “试管婴儿”技术能解决所有的不孕不育问题 B. 图中新生儿因涉及三个亲代而面临社会伦理问题 C. 卵母细胞去核的实质是去除细胞中的纺锤体一染色体复合物 D. “第四代试管婴儿”技术可避免母亲的线粒体疾病传递给下一代 18. CRISPR/Cas9基因编辑系统是常用的基因编辑技术，是科学家于1987年在大肠杆菌中发现的，其原理是通过设计向导RNA中的识别序列，引导核酸内切酶Cas9到一个特定的基因位点进行切割。下列有关叙述正确的是（　　） A. 向导RNA可以特异性识别一个特定的DNA序列，保证了切割的精确性 B. Cas9蛋白相当于限制酶，能作用于脱氧核糖和碱基之间的化学键 C. CRISPR-Cas9基因组编辑系统使大肠杆菌获得抵抗溶菌酶的能力 D. CRISPR-Cas9基因编辑技术的发现，为器官移植供体的来源开辟了新思路 三、非选择题：本题共5小题，共59分。 19. 淀粉酶用途最广，从土壤中筛选出产生淀粉酶的高产菌株，进行了以下实验，回答相关问题： （1）在淀粉分解菌筛选过程中，将土壤样品稀释液接种至以______为唯一碳源的固体培养基上进行培养，除碳源外，该培养基还含有______。在培养细菌时，一般需要将培养基的pH调至______。 （2）实验中选用______（方法）接种微生物，根据结果可以估算每克土壤中的细菌数为______个，该方法统计的结果往往比活菌的实际数目______，原因是______。 （3）在接种微生物时还需设置不接种微生物的空白培养基作为对照，目的是______。 （4）还可以在培养基中添加______（试剂），根据______（特征）初步判断微生物分解淀粉的能力。 20. 将普通小麦（6N＝42）与耐盐性强的中间偃麦草（2N＝14）进行体细胞杂交获得了耐盐小麦新品种，过程如图所示。请回答下列问题： （1）过程①需要利用______处理两种植物细胞，过程②常用的方法有______（写出两个）。 （2）选择具有______荧光标记的原生质体继续培养，获得杂种细胞，杂种细胞形成的标志是______。 （3）杂种细胞内最多含有______条染色体，经______（过程）可培育成杂种植株，杂种植株一定耐盐吗？为什么？______，______。 （4）植物体细胞杂交技术的意义是______。 21. 肿瘤晚期患者的治疗，主要分为单克隆抗体治疗和过继性细胞治疗两类。回答下列问题： （1）在单克隆抗体制备过程中，初步筛选出来的杂交瘤细胞进行______和______才可以获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞。 （2）将制备出的单克隆抗体与______、______三部分构成ADC（抗体一药物偶联物），利用ADC治疗肿瘤的优势是______。 （3）下图表示过继性细胞治疗过程，最后得到的能够特异性地识别并处理肿瘤细胞的淋巴细胞是指______，这些细胞回输后能有效避免免疫排斥的原因是______。在淋巴细胞进行单克隆培养的过程中会出现分裂受阻，其原因主要有细胞密度过大、______、______，还会发生接触抑制现象，可用______处理贴壁细胞使之分散成单个细胞进行传代培养。 22. 蓖麻毒蛋白（Ricin）是常用于杀伤肿瘤细胞的药物之一。为了提取并扩增编码Ricin的基因，科研人员进行了如下操作。回答下列问题： （1）从蓖麻植株的幼嫩组织提取DNA，为了检验提取物中是否含有DNA，将提取物溶解于______溶液，用______试剂，在______条件下检验，如果呈______色，说明提取物中含有DNA。 （2）利用提取到的DNA，通过PCR技术扩增目的基因，PCR技术的原理是：______和______。PCR扩增DNA时需要添加Mg2+和引物，作用分别是______、______。 （3）一个DNA分子经过10次循环后得到的DNA分子中，理论上只含有一个引物的DNA有______个。 （4）PCR产物一般通过琼脂糖凝胶电泳进行鉴定，在凝胶中，DNA分子的迁移速率与______、__________等有关。在电场作用下，DNA会向______的电极移动。 23. 番茄不耐寒，冬季容易冻坏，难以储藏。我国科研人员从某植物中提取了一种抗冻基因AtCOR15a，经过一系列过程获得转基因的抗冻番茄新品种，操作流程如图。回答下列问题： （1）质粒上启动子的作用是：______，AtCOR15a基因转录时的模板链是______（填“①”或“②”）链。 （2）基因工程常用来自______（生物）的Ti质粒作为载体，当该生物侵染植物后，Ti质粒上的T-DNA能够______。 （3）如果要将目的基因与质粒正确构建成重组质粒，一般采用双酶切法，选用双酶切法的优势是______。 （4）为了将AtCOR15a基因与Ti质粒连接构建表达载体，PCR扩增At-COR15a基因时需在引物的______（填“5′端”或“3′端”）添加限制酶识别序列，结合图表，AtCOR15a基因上下游分别添加限制酶______、______的识别序列，并写出上游引物的碱基序列是5′-______-3′（写出10个碱基即可）。 （5）制备培养基，并在培养基中添加______，可以筛选出成功导入基因AtCOR15a的番茄细胞，还可以通过______技术检验目的基因是否导入受体细胞。另外检测基因AtCOR15a在番茄细胞中是否成功表达，在分子水平上的检测方法是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $