精品解析：四川内江市第六中学2025—2026学年下学期高二第一次月考生物试题

内江六中2018—2019学年（下）高2027届第一次月考生物学科试题 考试时间：75分钟 满分：100分 第Ⅰ卷 选择题（满分50分） 一、选择题（每题2.5分，共50分） 1. 蓉蓉在家中制作泡菜时，发现泡菜坛内出现了少量霉斑，泡菜口感偏软且有异味。造成这种现象的主要原因可能是（ ） A. 食盐添加比例过高，抑制乳酸菌活动 B. 坛口密封不严，需氧型杂菌大量繁殖 C. 腌制的时间过短，亚硝酸盐含量较高 D. 环境的温度过低，发酵进程显著延缓 2. 生活中我们经常会接触到发酵食品，如果酒、果醋、泡菜等，下列叙述正确的是（　　） A. 上述发酵食品制作前都需对原料进行灭菌处理 B. 变酸的果酒表面的菌膜是由酵母菌繁殖形成的 C. 制作果醋时发酵液中的醋酸菌通过有丝分裂增殖 D. 制作果酒时酵母菌需要先进行有氧呼吸大量增殖 3. 齐民要术记载了一种酿酒的方法：“一斗曲，杀（消耗）米二石一斗。其酒饭，欲得弱炊（要蒸到很软），炊如食饭法。舒（摊开）使极冷，然后纳之（下酿瓮中）。”下列叙述错误的是（ ） A. 一斗曲中微生物种类会影响酒的风味 B. 二石一斗米被曲中微生物代谢生成酒精等 C. “弱炊”可促进微生物对二石一斗米的利用 D. “舒使极冷”可降低发酵时被杂菌污染的风险 4. PL是一种天然防腐剂，可以由微生物产生。研究人员欲从土壤中分离能分泌PL的微生物，做了如下图所示的实验，已知PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列说法正确的是（　　） A. 为扩大培养目的菌株，培养基甲中需要添加亚甲基蓝 B. 需进行灭菌处理的是土样、培养基、接种环和涂布器 C. 接种Ⅲ是挑取③号单菌落进行划线，得到培养Ⅳ的结果 D. 丁培养基是液体，目的是增加目的菌的数量 5. 水胺硫磷（）是一种广谱性杀虫、杀螨剂，但水胺硫磷的残效期长、毒性大。某地区近十年来一直受水胺硫磷污染，下图为从土壤中分离能高效分解水胺硫磷的细菌的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 图中接种细菌的方法为稀释涂布平板法，土壤被稀释了倍 B. 若培养基A中培养细菌的时间过长，则导致菌落计数结果较实际大 C. 培养基B中单菌落周围的分解圈越小，说明该菌株的降解能力越强 D. 培养基A中的唯一碳源为水胺硫磷，从功能上划分属于选择培养基 6. 玉米赤霉烯酮（ZEN）是一种由镰刀菌属真菌产生的真菌毒素，研究人员从连作玉米田的土壤样品中分离出了可高效降解ZEN的细菌菌株，实验流程如图。下列叙述错误的是（　　） A. 可衡量b瓶中菌株的ZEN降解能力 B. 实验过程中，需要将培养皿、培养瓶和培养基进行干热灭菌 C. 步骤②③④中所用的培养基均为以ZEN为唯一碳源的选择培养基 D. 步骤③中培养基上长出的菌落数量可能约等于涂布到平板上的活菌数量 7. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物某些特定功能，为人类生产有用的产品。常用好氧菌谷氨酸棒状杆菌利用图1的发酵罐来大量生产味精，发酵流程如图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 B. 为了保证发酵产品的产量和品质，图中发酵配料及发酵罐需经过严格的灭菌 C. 图中发酵过程需通入无菌空气，并通过搅拌使培养液与菌种充分接触后关闭通气口 D. 发酵中所使用的谷氨酸棒状杆菌菌种可从自然界筛选也可通过诱变育种、杂交育种获得 8. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 生产黄酮的两条技术路径均证明了植物细胞具有全能性 B. 获得愈伤组织的过程应保持在无菌、有光和5%的CO2环境中 C. ①②③的培养基中含有植物激素和多种无机盐，还需要添加蔗糖等能源物质 D. 路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体，使用纤维素酶也可以达成该目的 9. 下图为利用植物体细胞杂交技术培养得到杂种植株的过程，下列叙述正确的是（　　） ①育种过程中叶片和所有的器材都要进行灭菌 ②图中过程①培养皿中加入的是含胶原蛋白酶的等渗溶液 ③图中过程③中，可使用聚乙二醇或灭活的病毒来诱导原生质体融合 ④图中过程④中需要避光进行 ⑤杂种细胞再生出细胞壁，标志着融合过程结束 ⑥由杂种细胞培育到杂种植株，体现了植物细胞的全能性 ⑦植物体细胞杂交技术可克服远缘杂交不亲和的障碍 ⑧再分化时降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽 A. ⑤⑥⑦ B. ⑤⑥⑦⑧ C. ①④⑤⑧ D. ③⑥⑦ 10. CMV 是危害烟草的主要病毒，CMV 侵染烟草后，发病的叶片会褪绿变成黄色。为筛选抗 CMV的烟草突变株，科研小组进行的实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 烟草幼苗茎尖病毒极少，直接取其进行组织培养可得到抗 CMV 植株 B. 若发病叶片中出现绿色区域，取该区域进行组织培养可能得到抗CMV 植株 C. 选取的叶片组织需先进行灭菌处理，再经过脱分化和再分化培养成抗 CMV 植株 D. 接种CMV起到了选择作用，因此经组织培养后得到的植株无需再进行抗CMV 鉴定 11. 生姜中含有姜黄素等物质，具有抗氧化和抗肿瘤作用，有助于预防癌症的发生。科研人员利用生姜的姜段生产姜黄素，如下图所示，下列分析正确的是（　　） A. 姜段用次氯酸钠溶液处理后，立即用清水清洗 B. 培养姜段获得愈伤组织的培养基为不含有机物的无机培养基 C. 培养液中悬浮振荡培养能让愈伤组织细胞获得较多营养与氧气 D. 利用姜段生产姜黄素的过程中进行体细胞的有丝分裂，不会发生变异 12. 有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给“渐冻症”实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是（ ） A. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多 B. iPS细胞分化成的多种细胞中遗传物质不相同，蛋白质也不相同 C. 若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则可以起到良好的治疗作用 D. 植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使“渐冻症”病情改善 13. 细胞工程中，正确选择实验材料是生物实验成功的关键。下列叙述不合理的是（　　） A. 选择花粉作为外植体培育后经染色体加倍得到的植株是研究遗传突变的理想材料 B. 选择胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 C. 选择X射线处理培养瓶中的薄壁组织团块，进一步培养可获得突变体 D. 选择高产奶牛胚胎细胞作为核供体进行核移植，可提高胚胎移植的成功率 14. 某跨膜蛋白（A）能在多种癌细胞中特异性高表达，能够促进癌细胞的分裂、转移。环磷酰胺是一种有效抑制癌细胞的化疗药物，但对患者的副作用较大。为了减少该药的副作用，生物学家研究了一种生物导弹“抗体-药物偶联物”（ADC），其制作部分过程及作用机制，如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 向小鼠体内注射的特定抗原是特异性强的跨膜蛋白（A） B. 经步骤②筛选得到的是多种杂交瘤细胞，可产多种抗体 C. “抗体-药物偶联物”的b是环磷酰胺，a是单克隆抗体 D. 释放出的药物最终作用于细胞质基质，导致癌细胞凋亡 15. CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞活性甚至使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1的单克隆抗体有较好的抗肿瘤效果。科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞（能够悬浮在液体培养基中生长繁殖），可以从培养液中筛选出同时抗CTLA-4和PD-1的双特异性抗体（如图），实验显示疗效更好。下列叙述正确的是（ ） A. 双杂交瘤细胞需要CTLA-4和PD-1刺激，才能产生双特异性抗体 B. 双特异性抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用 C. 对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶处理 D. 双特异性抗体可以靶向作用两种受体分子，增强细胞免疫达到更好的抗肿瘤效果 16. 某国批准了首例“三亲婴儿”的申请，其大致技术路线如图所示。下列相关分析错误的是（　　） A. 利用该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B. 图中的“去核”实质指的是去除卵母细胞的纺锤体——染色体复合物 C. 图中“三亲婴儿”的培育用到了细胞核移植等技术，“三亲婴儿”的培育属于无性繁殖 D. 若为体细胞核移植，则完成后可用物理方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 17. 某同学在学习细胞工程时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，下列内容错误的是（ ） 比较内容 植物体细胞杂交 动物细胞融合 A. 特殊处理 用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶 等处理可分离出单个细胞 B. 诱导融合法 离心法、电融合法、PEG融合法等 PEG融合法、灭活病毒诱导法等 C. 典型应用 培育种间杂种植物 制备iPS细胞 D. 培养基区别 通常为固体培养基，含蔗糖、植物激素等 液体培养基，含葡萄糖、动物血清等 A. A B. B C. C D. D 18. 我国科学家经过反复实验，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍，能在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞内。2017年，世界上首例体细胞克隆猴“中中”、“华华”的诞生，标志着我国的克隆技术走在了世界前列。培育体细胞克隆猴的简要流程如下图，相关分析正确的是（　　） A. 供卵母猴的卵母细胞“去核”是指通过显微操作去掉MⅡ期的染色体 B. 重构胚的激活，除用图中TSA、Kdm4d的mRNA外，还可用Ca2+等处理 C. “中中”“华华”与胎猴长的最像，性别为一雌一雄有利于繁衍后代 D. 若用遗传背景相同的“中中”“华华”进行药物研发实验，能更好地控制无关变量 19. 双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。具体做法是：在无菌培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至45~48℃，然后加入敏感指示菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板（见下图）。培养一段时间后，在双层培养基的上层会出现透亮的无菌圆形空斑—噬菌斑，下列有关说法正确的是（　　） A. 上层平板中噬菌斑的数量与待测噬菌体稀释悬液的浓度呈反比 B. 若利用双层平板法对T2噬菌体进行计数，可选用农杆菌作敏感指示菌 C. 上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是噬菌体单独在培养基上繁殖形成的噬菌斑 D. 倒上层平板时需将培养基冷却至45~48℃后再进行接种，目的是防止培养基温度过高引起敏感指示菌和待测噬菌体死亡 20. 人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通常采用双抗体夹心法对抗原进行定量检测，具体过程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 可将Myo基因导入小鼠骨髓瘤细胞，来制备抗Myo的单克隆抗体 B. 抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，用于诊断急性心肌梗塞 C. 固相抗体和酶标抗体虽都能与抗原结合，但二者仍具有不同的结构 D. 加入酶标抗体的目的是通过测定酶促反应的产物量来判断待测抗原量 第Ⅱ卷 非选择题（满分50分） 21. 桂圆也称龙眼，是一种药食两用的水果。科研团队比较了5种酵母菌(3种酿酒酵母，2种非酿酒酵母)对桂圆果浆的发酵效果，并从中选择适宜的菌种进行发酵，以期得到品质更好的桂圆果酒。生产桂圆果酒的工艺流程如图所示。回答下列问题： 新鲜桂圆去皮去核→桂圆果肉→打浆→调酸→酶解→调糖→接种→发酵→过滤 （1）在发酵流程中未展示对材料的清洗环节，该操作应在上述工艺流程的______________环节之前，这样做的目的是____________________。 （2）酶解的过程是在调酸物料中加入适量的__________酶，作用是_______________。 （3）下表中表示5种酵母(Y1-SY果酒活性干酵母；Y2-RW果酒活性干酵母；Y3-葡萄酒高活性干酵母；Y4-耐高温高活性干酵母；Y5-生香活性干酵母)发酵的桂圆果酒品质（总酯与果酒的香味有关），据表可得出的结论是酿酒酵母主要参与____________（填物质）的生成，非酿酒酵母可将原料中的物质转化为__________从而提高了果酒的甜度。从中选择__________两种酵母菌作为桂圆果酒发酵优良菌种。 酵母 酒精度/%vol 总糖/（g/L） 总酸/（g/L） 总酯/（g/L） 感官评分/分 Y1 13.4 1.3 6.8 0.19 72 Y2 13.1 2.4 6.4 0.18 67 Y2 13.3 1.6 6.2 0.15 64 Y4 12.6 3.4 8.1 0.11 62 Y5 11.0 8.5 7.6 0.38 74 22. 谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取味精（主要成分为谷氨酸钠）。图1为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径。谷氨酸发酵的培养基成分主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图2所示。回答下列问题： （1）从物理性质看，谷氨酸发酵的培养基属于________培养基。从培养基的成分与发酵装置可看出，谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是_________。 （2）谷氨酸的发酵生产中，通常需要分次加入氨水（弱碱性），从氨水的作用角度分析，原因是______。 （3）若要监测发酵液中谷氨酸棒状杆菌的数目，可采用显微镜直接计数，使用该方法的计数过程是先将稀释100倍的发酵液加入计数板（由25中方格×16小方格=400个小方格组成，容纳液体总体积为0.1mm3）的计数室中，然后计数菌体数。若计数室中有36个菌体，则1mL的原发酵液中估计有谷氨酸棒状杆菌______个。此外还可以用________法监测发酵液中谷氨酸棒状杆菌的数目。通常情况下，前者计数结果比后者计数结果更______（填“大”或“小”），原因是___________。 （4）研究发现：发酵过程中当溶氧量不足时，谷氨酸棒状杆菌的代谢产物是乳酸或琥珀酸，所以谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气并不断搅拌。当培养基中碳、氮比为4：1时，菌体大量繁殖，而产生的谷氨酸量较少；当碳、氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。 ①发酵过程中搅拌的作用是________。 ②结合上述发现，写出一种利用一定起始数量的菌种通过发酵得到大量谷氨酸的发酵思路：________。 23. 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀气病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀气病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同） （1）常用酶解法获得紫花苜蓿与百脉根原生质体，优点是_________；步骤①诱导二者原生质体融合时除可用PEG处理外，还有_________（答两种）等方法。 （2）据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是_________。此种育种方式的优点是_________。 （3）上述过程中需要提供光照的是_________（填序号），光照的作用是_________。得到的杂种植株是_________倍体，理论上是否可育？_________。请回答并阐述理由_________。 （4）在实验前需要通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是_________。 24. 丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程，回答下列问题： （1）为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______，融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是_____。 （2）诱导动物细胞融合的方法_____（答3种），筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_____来完成。 （3）得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_________。 25. 现代社会压力使人类的作息时间很难严格遵循体内的生物钟。因为加班、频繁跨越时区、熬夜、肥胖等，越来越多的人面临着生物钟紊乱的困扰，导致失眠、睡眠中断、日间过度嗜睡，与人交流出现障碍等问题。2019年我国科研团队获得了5只基因BMAL1缺失（或敲除）的克隆猴，极大地推动了生物钟紊乱相关问题的研究。下图为克隆猴的培育过程，请回答下列问题。 （1）5只克隆猴是科学家利用_________技术获得的。首先需将A猴卵母细胞培养至___________期，并通过显微操作法进行_________处理，然后将B猴体细胞注入去核A猴卵母细胞形成重组细胞。 （2）重组细胞体外培养时首先应保证被培养的细胞处于___________的环境，在细胞体外培养过程中应定期更换培养液，目的是_________。 （3）为判断是否属于真的克隆猴，研究团队仔细检测了这些克隆猴的基因型，发现细胞核基因型与_________相同，由此证明5只猴是真的克隆猴。 （4）为了验证这5只基因敲除猴是否存在昼夜节律紊乱问题，科学家给它们佩戴了检测设备，可以随时监测它们的昼夜活动情况，通过行为学分析检测其是否明显表现出类似精神分裂症的症状。对照组的设置应为_________。观察发现，与对照组相比，实验组猴的神经内分泌激素褪黑素分泌减少；与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达增强；不再按照24h的周期活动，在夜间活动明显增多，有人靠近时双手抱头，蜷缩在角落里，不敢活动。由此证明___________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 内江六中2018—2019学年（下）高2027届第一次月考生物学科试题 考试时间：75分钟 满分：100分 第Ⅰ卷 选择题（满分50分） 一、选择题（每题2.5分，共50分） 1. 蓉蓉在家中制作泡菜时，发现泡菜坛内出现了少量霉斑，泡菜口感偏软且有异味。造成这种现象的主要原因可能是（ ） A. 食盐添加比例过高，抑制乳酸菌活动 B. 坛口密封不严，需氧型杂菌大量繁殖 C. 腌制的时间过短，亚硝酸盐含量较高 D. 环境的温度过低，发酵进程显著延缓 【答案】B 【解析】 【分析】泡菜的制作所使用的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型，在无氧条件下乳酸菌能够将蔬菜中的葡萄糖分解为乳酸。泡菜坛内出现了少量霉斑，说明有杂菌污染。 【详解】A、食盐过高虽会抑制乳酸菌，但更可能造成发酵缓慢或失败，而非直接导致霉斑和异味，A错误； B、泡菜发酵需严格厌氧环境。坛口密封不严会使氧气进入，导致需氧型杂菌（如霉菌、酵母菌）大量繁殖，产生霉斑、异味，并分解蔬菜纤维素，造成口感偏软，B正确； C、亚硝酸盐是发酵初期产物，含量高可能引起健康风险或轻微异味，但不会导致霉斑或明显软化，C错误； D、低温会延缓乳酸菌发酵，但通常不会引发霉斑或异味，反而可能抑制杂菌生长，D错误。 故选B。 2. 生活中我们经常会接触到发酵食品，如果酒、果醋、泡菜等，下列叙述正确的是（　　） A. 上述发酵食品制作前都需对原料进行灭菌处理 B. 变酸的果酒表面的菌膜是由酵母菌繁殖形成的 C. 制作果醋时发酵液中的醋酸菌通过有丝分裂增殖 D. 制作果酒时酵母菌需要先进行有氧呼吸大量增殖 【答案】D 【解析】 【详解】A、传统发酵依赖原料表面附着的天然野生菌种，若对原料灭菌会杀死发酵所需的菌种，因此制作前无需灭菌，通常仅对原料进行清洗处理，A错误； B、果酒变酸是醋酸菌将酒精转化为醋酸导致的，表面的菌膜是醋酸菌大量繁殖形成的，并非酵母菌，B错误； C、醋酸菌是原核生物，有丝分裂是真核生物特有的增殖方式，醋酸菌通过二分裂的方式增殖，C错误； D、制作果酒时先通气，可让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，增加菌种数量，之后再密封进行无氧发酵产生酒精，D正确。 3. 齐民要术记载了一种酿酒的方法：“一斗曲，杀（消耗）米二石一斗。其酒饭，欲得弱炊（要蒸到很软），炊如食饭法。舒（摊开）使极冷，然后纳之（下酿瓮中）。”下列叙述错误的是（ ） A. 一斗曲中微生物种类会影响酒的风味 B. 二石一斗米被曲中微生物代谢生成酒精等 C. “弱炊”可促进微生物对二石一斗米的利用 D. “舒使极冷”可降低发酵时被杂菌污染的风险 【答案】D 【解析】 【分析】酵母菌是兼性厌氧菌，无氧呼吸产生酒精和二氧化碳。酿酒就是利用酵母菌的无氧呼吸，但在酿酒前期需通气培养，以利于酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖。 【详解】A、酒曲中含有多种微生物（如霉菌、酵母菌），不同微生物代谢产物不同，影响酒的风味，A正确； B、米的主要成分是淀粉，淀粉需先经微生物水解生成葡萄糖，再由酵母菌在无氧条件下呼吸生成酒精，B正确； C、“弱炊”使米松软，便于微生物分泌的酶水解淀粉，提高淀粉利用率，C正确； D、“舒使极冷”可以避免高温杀死发酵所需的菌种，D错误。 故选D。 4. PL是一种天然防腐剂，可以由微生物产生。研究人员欲从土壤中分离能分泌PL的微生物，做了如下图所示的实验，已知PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。下列说法正确的是（　　） A. 为扩大培养目的菌株，培养基甲中需要添加亚甲基蓝 B. 需进行灭菌处理的是土样、培养基、接种环和涂布器 C. 接种Ⅲ是挑取③号单菌落进行划线，得到培养Ⅳ的结果 D. 丁培养基是液体，目的是增加目的菌的数量 【答案】D 【解析】 【详解】A、为扩大培养目的菌株，可用液体培养基进行培养，PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈，固体培养基添加亚甲基蓝可用于分离分泌PL的微生物，A错误； B、土样中含有目的菌种，不能灭菌，只能进行稀释处理，培养基、接种环、涂布器需要灭菌，B错误； C、PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈，图中①号菌落的透明圈最大，接种Ⅲ应该是挑取①号单菌落进行划线，得到培养Ⅳ的结果，C错误； D、丁培养基是液体，为目的菌提供增殖生长所需的全部营养，其中包括水、碳源、氮源和无机盐等营养物质，D正确。 5. 水胺硫磷（）是一种广谱性杀虫、杀螨剂，但水胺硫磷的残效期长、毒性大。某地区近十年来一直受水胺硫磷污染，下图为从土壤中分离能高效分解水胺硫磷的细菌的过程。下列叙述正确的是（ ） A. 图中接种细菌的方法为稀释涂布平板法，土壤被稀释了倍 B. 若培养基A中培养细菌的时间过长，则导致菌落计数结果较实际大 C. 培养基B中单菌落周围的分解圈越小，说明该菌株的降解能力越强 D. 培养基A中的唯一碳源为水胺硫磷，从功能上划分属于选择培养基 【答案】D 【解析】 【分析】在培养基中加入某种化学成分抑制部分菌落的生长，但允许特定菌落生长的培养基为选择培养基。 【详解】A、图中接种细菌的方法为稀释涂布平板法，1g土壤被稀释了105倍，A错误； B、若培养基A中培养细菌的时间过长，导致菌落之间连接，计数时误以为是一个菌落，导致菌落计数结果较实际小，B错误； C、培养基B中单菌落周围的分解圈越小，说明该菌株的降解能力越弱，C错误； D、培养基A中的唯一碳源为水胺硫磷，从而起到选择目的菌株的作用，从功能上划分属于选择培养基，D正确。 故选D。 6. 玉米赤霉烯酮（ZEN）是一种由镰刀菌属真菌产生的真菌毒素，研究人员从连作玉米田的土壤样品中分离出了可高效降解ZEN的细菌菌株，实验流程如图。下列叙述错误的是（　　） A. 可衡量b瓶中菌株的ZEN降解能力 B. 实验过程中，需要将培养皿、培养瓶和培养基进行干热灭菌 C. 步骤②③④中所用的培养基均为以ZEN为唯一碳源的选择培养基 D. 步骤③中培养基上长出的菌落数量可能约等于涂布到平板上的活菌数量 【答案】B 【解析】 【详解】A、a瓶ZEN浓度代表初始ZEN浓度，“a瓶ZEN浓度-b瓶ZEN浓度”代表菌株降解的ZEN浓度，因此“（a瓶ZEN浓度-b瓶ZEN浓度）/a瓶ZEN浓度”代表菌株的ZEN降解率，可衡量b瓶中菌株的ZEN降解能力，A正确； B、培养皿、培养瓶可以用干热灭菌； 但培养基含有水分、有机物，干热灭菌会导致水分蒸发、营养成分分解，因此培养基应使用高压蒸汽灭菌，B错误； C、要分离出可高效降解ZEN的细菌菌株，需以ZEN为唯一碳源，只有能利用ZEN的细菌才能生长。步骤②扩大培养、③涂布培养、④振荡培养，都是为筛选和培养能降解ZEN的细菌，所以所用培养基均应以ZEN为唯一碳源，C正确； D、理论上，当接种的菌液稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落。所以步骤③中培养基上长出的菌落数量理论上可能等于涂布到平板上的活菌数量，D正确。 7. 发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物某些特定功能，为人类生产有用的产品。常用好氧菌谷氨酸棒状杆菌利用图1的发酵罐来大量生产味精，发酵流程如图2所示。下列叙述正确的是（　　） A. 通过发酵工程可以从微生物细胞中提取单细胞蛋白 B. 为了保证发酵产品的产量和品质，图中发酵配料及发酵罐需经过严格的灭菌 C. 图中发酵过程需通入无菌空气，并通过搅拌使培养液与菌种充分接触后关闭通气口 D. 发酵中所使用的谷氨酸棒状杆菌菌种可从自然界筛选也可通过诱变育种、杂交育种获得 【答案】B 【解析】 【详解】A、单细胞蛋白本身就是指微生物菌体（如酵母菌、细菌等），不需要从细胞中提取，直接收集菌体即可，A错误； B、发酵工程中，培养基（发酵配料）和发酵罐都必须经过严格灭菌，防止杂菌污染，避免杂菌与生产菌竞争营养、产生有害物质，从而保证产品的产量和品质，B正确； C、谷氨酸棒状杆菌是好氧菌，整个发酵过程都需要持续通入无菌空气，搅拌的目的是增加培养液中的溶氧量，同时使菌种与营养物质充分接触，不能关闭通气口，C错误； D、谷氨酸棒状杆菌是细菌，属于原核生物，不能进行有性生殖，因此无法通过杂交育种获得菌种，只能通过诱变育种、基因工程育种或自然界筛选，D错误。 8. 甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列相关叙述正确的是（　　） A. 生产黄酮的两条技术路径均证明了植物细胞具有全能性 B. 获得愈伤组织的过程应保持在无菌、有光和5%的CO2环境中 C. ①②③的培养基中含有植物激素和多种无机盐，还需要添加蔗糖等能源物质 D. 路径二添加果胶酶的目的是获得原生质体，使用纤维素酶也可以达成该目的 【答案】C 【解析】 【详解】A、路径二并未从已分化的植物细胞获得完整植株，不能体现植物细胞的全能性，A错误； B、获得愈伤组织的过程是植物组织培养中的脱分化过程，此过程应保持无菌、无毒的环境。 而5%CO2环境是动物细胞培养时需要的条件，目的是维持培养液的pH，植物组织培养一般不需要5%CO2环境，B错误； C、①②③的培养过程均为植物组织培养的相关过程。植物组织培养的培养基中除了含有植物激素（如生长素、细胞分裂素等）和多种无机盐外，还需要添加蔗糖等能源物质，蔗糖可以为植物细胞提供碳源和能量，C正确； D、图示过程中添加果胶酶的主要目的是瓦解植物的胞间层，更快获得细胞悬液，D错误。 9. 下图为利用植物体细胞杂交技术培养得到杂种植株的过程，下列叙述正确的是（　　） ①育种过程中叶片和所有的器材都要进行灭菌 ②图中过程①培养皿中加入的是含胶原蛋白酶的等渗溶液 ③图中过程③中，可使用聚乙二醇或灭活的病毒来诱导原生质体融合 ④图中过程④中需要避光进行 ⑤杂种细胞再生出细胞壁，标志着融合过程结束 ⑥由杂种细胞培育到杂种植株，体现了植物细胞的全能性 ⑦植物体细胞杂交技术可克服远缘杂交不亲和的障碍 ⑧再分化时降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生芽 A. ⑤⑥⑦ B. ⑤⑥⑦⑧ C. ①④⑤⑧ D. ③⑥⑦ 【答案】A 【解析】 【分析】植物体细胞杂交的操作流程为首先 去除细胞壁获得两种植物细胞的原生质体，然后诱导原生质体融合，通常采用的诱导原生质体融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇等，杂种细胞融合成功的标志是再生出细胞壁，而后用杂种细胞经过组织培养获得杂种植株。 【详解】①叶片只能消毒，所有的器材要进行灭菌，①错误； ②过程①去除细胞壁，培养皿中加入的是应该含纤维素酶和果胶酶的等渗溶液，②错误； ③过程③诱导原生质体融合不能用灭活的病毒，③错误； ④过程④表示植物组织培养，脱分化时需要避光进行，再分化时需要光照，④错误； ⑤杂种细胞融合成功的标志是再生出细胞壁，杂种细胞再生出细胞壁，标志着融合过程结束，⑤正确； ⑥由杂种细胞培育到杂种植株，体现了植物细胞的全能性，⑥正确； ⑦植物体细胞杂交技术可克服远缘杂交不亲和的障碍，⑦正确； ⑧再分化时降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生根，⑧错误。 综上所述⑤⑥⑦正确，BCD错误，A正确。 故选A。 10. CMV 是危害烟草的主要病毒，CMV 侵染烟草后，发病的叶片会褪绿变成黄色。为筛选抗 CMV的烟草突变株，科研小组进行的实验流程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 烟草幼苗茎尖病毒极少，直接取其进行组织培养可得到抗 CMV 植株 B. 若发病叶片中出现绿色区域，取该区域进行组织培养可能得到抗CMV 植株 C. 选取的叶片组织需先进行灭菌处理，再经过脱分化和再分化培养成抗 CMV 植株 D. 接种CMV起到了选择作用，因此经组织培养后得到的植株无需再进行抗CMV 鉴定 【答案】B 【解析】 【分析】物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A 、烟草幼苗茎尖病毒极少，但不能直接确定其就是抗 CMV 的，直接取其进行组织培养不一定能得到抗 CMV 植株，A 错误； B、若发病叶片中出现绿色区域，说明可能存在对 CMV 有抗性的细胞，取该区域进行组织培养有可能得到抗 CMV 植株，B 正确； C 、叶片组织不能先进行灭菌处理，这样会杀死细胞，应该先进行脱分化形成愈伤组织，再进行再分化培养成抗 CMV 植株，C 错误； D、 接种 CMV 起到了选择作用，但经组织培养后得到的植株仍需再进行抗 CMV 鉴定来确保其抗性，D 错误。 故选B。 11. 生姜中含有姜黄素等物质，具有抗氧化和抗肿瘤作用，有助于预防癌症的发生。科研人员利用生姜的姜段生产姜黄素，如下图所示，下列分析正确的是（　　） A. 姜段用次氯酸钠溶液处理后，立即用清水清洗 B. 培养姜段获得愈伤组织的培养基为不含有机物的无机培养基 C. 培养液中悬浮振荡培养能让愈伤组织细胞获得较多营养与氧气 D. 利用姜段生产姜黄素的过程中进行体细胞的有丝分裂，不会发生变异 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、接种用的外植体需先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒，消毒后需用无菌水冲洗，A错误； B、培养姜段获得愈伤组织的培养基中需添加一定的营养和激素，其中激素、蔗糖等属于有机物，B错误； C、振荡培养的目的是增加培养液的溶氧量，目的是让愈伤组织细胞获得较多营养与氧气，C正确； D、利用姜段生产姜黄素的过程中进行体细胞的有丝分裂，该过程中也会发生变异，且在植物组织培养过程中变异率还有可能更高，D错误。 故选C。 12. 有研究表明“渐冻症”是由突变的基因导致运动神经元合成了某种毒蛋白，从而阻碍了轴突内营养物质的流动。也有最新研究结果表明，利用诱导多功能干细胞（iPS细胞）制作前驱细胞，然后移植给“渐冻症”实验鼠，能延长其寿命。下列相关描述错误的是（ ） A. iPS细胞分化的实质是基因的选择性表达，细胞种类增多 B. iPS细胞分化成的多种细胞中遗传物质不相同，蛋白质也不相同 C. 若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则可以起到良好的治疗作用 D. 植入神经干细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使“渐冻症”病情改善 【答案】B 【解析】 【分析】细胞分化的结果是形成形态、结构和生理功能不同的细胞，使细胞的种类增多，其实质是基因的选择性表达。 【详解】A、细胞分化的结果是形成形态、结构和生理功能不同的细胞，使细胞的种类增多，A正确； B、细胞分化的实质是基因的选择性表达，因此iPS细胞分化成的多种细胞中DNA相同，RNA和蛋白质不完全相同，B错误； C、若控制运动神经元合成毒蛋白的基因替换，则无法合成该毒蛋白，所以可以起到治疗该病的作用，C正确； D、植入神经干细胞，诱导分化成前驱细胞，恢复受损的运动功能，也许会在一定程度上使“渐冻症”病情改善，D正确。 故选B。 13. 细胞工程中，正确选择实验材料是生物实验成功的关键。下列叙述不合理的是（　　） A. 选择花粉作为外植体培育后经染色体加倍得到的植株是研究遗传突变的理想材料 B. 选择胃蛋白酶处理牛肌肉组织，获得分裂能力强的肌肉母细胞 C. 选择X射线处理培养瓶中的薄壁组织团块，进一步培养可获得突变体 D. 选择高产奶牛胚胎细胞作为核供体进行核移植，可提高胚胎移植的成功率 【答案】B 【解析】 【详解】A、花粉经植物组织培养可获得单倍体植株，经染色体加倍后为纯合子，不存在等位基因的掩盖作用，突变性状可直接表现，是研究遗传突变的理想材料，A正确； B、动物细胞培养时分散组织细胞需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶，胃蛋白酶的最适pH为强酸性，在动物细胞生存的近中性环境中会失活，无法发挥作用，B错误； C、X射线属于物理诱变因子，可诱导分裂旺盛的薄壁组织细胞发生基因突变，进一步培养并筛选可获得突变体，C正确； D、高产奶牛胚胎细胞分化程度低，细胞核全能性更容易表达，作为核供体进行核移植得到的重组胚胎发育能力强，可提高胚胎移植的成功率，D正确。 14. 某跨膜蛋白（A）能在多种癌细胞中特异性高表达，能够促进癌细胞的分裂、转移。环磷酰胺是一种有效抑制癌细胞的化疗药物，但对患者的副作用较大。为了减少该药的副作用，生物学家研究了一种生物导弹“抗体-药物偶联物”（ADC），其制作部分过程及作用机制，如下图所示。下列叙述错误的是（　　） A. 向小鼠体内注射的特定抗原是特异性强的跨膜蛋白（A） B. 经步骤②筛选得到的是多种杂交瘤细胞，可产多种抗体 C. “抗体-药物偶联物”的b是环磷酰胺，a是单克隆抗体 D. 释放出的药物最终作用于细胞质基质，导致癌细胞凋亡 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体制备的基本步骤：对小鼠进行免疫→提取B淋巴细胞→将B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合→通过筛选、克隆化培养和扩大化培养→最终注入小鼠体内→从腹腔腹水中提取单克隆抗体。 【详解】A、跨膜蛋白（A）能在多种癌细胞中特异性高表达，所以向小鼠体内注射的特定抗原是特异性强的跨膜蛋白（A），A正确； B、②表示筛选杂交瘤细胞，由于受抗原纯度的影响，杂交瘤细胞产生的抗体不一定是需要的，步骤②的细胞必须经过步骤③克隆化培养和抗体检测才能筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，即经过步骤②筛选得到的是多种杂交瘤细胞，可产多种抗体，需要进行进一步的筛选，B正确； C、抗体-药物偶联物（ADC）通常由单克隆抗体（a）和药物（b）组成，题干中提到环磷酰胺是药物，因此b是环磷酰胺，a是单克隆抗体，C正确； D、跨膜蛋白A是位于癌细胞的细胞膜上，所以释放出的药物首先释放到细胞质基质，最终作用于细胞膜，D错误。 故选D。 15. CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，与特定分子结合后，能抑制T细胞活性甚至使T细胞凋亡，从而使机体肿瘤细胞免受T细胞攻击。抗CTLA-4或抗PD-1的单克隆抗体有较好的抗肿瘤效果。科研人员将两种不同的杂交瘤细胞融合得到双杂交瘤细胞（能够悬浮在液体培养基中生长繁殖），可以从培养液中筛选出同时抗CTLA-4和PD-1的双特异性抗体（如图），实验显示疗效更好。下列叙述正确的是（ ） A. 双杂交瘤细胞需要CTLA-4和PD-1刺激，才能产生双特异性抗体 B. 双特异性抗体与肿瘤细胞的结合具有更强的特异性，从而减少副作用 C. 对培养到一定密度的双杂交瘤细胞进行传代培养时，需使用胰蛋白酶处理 D. 双特异性抗体可以靶向作用两种受体分子，增强细胞免疫达到更好的抗肿瘤效果 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：①给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，然后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；②诱导B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合；③利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；④进行克隆化培养和专一抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；⑤用培养基培养筛选出来的杂交瘤细胞或将其注入小鼠腹腔中培养，最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、杂交瘤细胞是由已免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，无需接触抗原就能产生双特异性抗体，A错误； B、由题意可知：CTLA-4和PD-1均是T细胞表面的受体分子，双克隆抗体应该与T细胞结合，而不是肿瘤细胞，B错误； C、杂交瘤细胞是悬浮培养的细胞，细胞之间并未接触，若要传代培养，细胞培养液直接离心，去除上清液培养基，加入新鲜培养基即可，不用胰蛋白酶处理，C错误； D、根据抗原-抗体特异性结合的原理可知，双特异性抗体可靶向作用于T细胞表面的CTLA-4和PD-1，避免这两类受体分子与特定分子结合后抑制T细胞活性甚至使T细胞凋亡，增强细胞免疫达到更好的抗肿瘤效果，D正确。 故选D。 16. 某国批准了首例“三亲婴儿”的申请，其大致技术路线如图所示。下列相关分析错误的是（　　） A. 利用该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代 B. 图中的“去核”实质指的是去除卵母细胞的纺锤体——染色体复合物 C. 图中“三亲婴儿”的培育用到了细胞核移植等技术，“三亲婴儿”的培育属于无性繁殖 D. 若为体细胞核移植，则完成后可用物理方法激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程 【答案】C 【解析】 【详解】A、该技术用了捐献者卵母细胞的细胞质、母亲卵母细胞的细胞核，所以与精子受精后形成的受精卵不含母亲的细胞质。线粒体位于细胞质，因此，利用该技术可避免母亲的线粒体遗传病基因传递给后代，A正确； B、将卵母细胞培养到减数分裂Ⅱ中期后进行去核操作，此时细胞核已解体，出现的是纺锤体-染色体复合物，故去核的实质是去除卵母细胞中的纺锤体一染色体复合物，而不是细胞核，B正确； C、据图可知，“三亲婴儿”的培育要利用核移植技术构建卵母细胞，再利用体外受精技术形成受精卵，由此受精卵培养而成的个体即为“三亲婴儿”，该过程也经过了受精作用，因此属于有性繁殖，C错误； D、核移植完成后可用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，D正确。 17. 某同学在学习细胞工程时，列表比较了动植物细胞工程的有关内容，下列内容错误的是（ ） 比较内容 植物体细胞杂交 动物细胞融合 A. 特殊处理 用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁 用胰蛋白酶、胶原蛋白酶 等处理可分离出单个细胞 B. 诱导融合法 离心法、电融合法、PEG融合法等 PEG融合法、灭活病毒诱导法等 C. 典型应用 培育种间杂种植物 制备iPS细胞 D. 培养基区别 通常为固体培养基，含蔗糖、植物激素等 液体培养基，含葡萄糖、动物血清等 A. A B. B C. C D. D 【答案】C 【解析】 【分析】植物体细胞杂交和动物细胞融合的比较，二者融合的原理都是细胞膜的流动性、植物体细胞杂交的原理还包括了植物细胞的全能性；诱导原生质体融合的方法有 离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，而诱导动物细胞融合的方法有离心、电刺激、聚乙二醇、灭活病毒等试剂诱导。植物体细胞杂交的主要目的是培育新品种，而动物细胞融合的主要目的是用于获得单克隆抗体。 【详解】A、植物细胞有细胞壁，根据酶的专一性，植物体细胞杂交时用酶解法（纤维素酶和果胶酶）去除细胞壁，动物细胞培养时用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理分离出单个细胞，A正确； B、诱导原生质体融合的方法有物理法和化学法（例如离心法、电融合法、聚乙二醇融合法等），诱导动物细胞融合的方法是物理方法、化学方法、生物方法（主要是灭活的病毒），B正确； C、植物体细胞杂交技术可用于培育种间杂种植物，动物细胞融合技术典型的应用是制备单克隆抗体，制备iPS细胞用到转基因技术和动物细胞培养技术，C错误； D、植物组织培养的培养基属于固体培养基，其中含有蔗糖和植物激素；动物细胞培养的培养基属于液体培养基，其中含有葡萄糖和动物血清等，D正确。 故选C。 18. 我国科学家经过反复实验，攻克了多年来导致体细胞克隆猴失败的障碍，能在10s之内对卵母细胞进行去核操作，在15s之内将体细胞注入去核的卵母细胞内。2017年，世界上首例体细胞克隆猴“中中”、“华华”的诞生，标志着我国的克隆技术走在了世界前列。培育体细胞克隆猴的简要流程如下图，相关分析正确的是（　　） A. 供卵母猴的卵母细胞“去核”是指通过显微操作去掉MⅡ期的染色体 B. 重构胚的激活，除用图中TSA、Kdm4d的mRNA外，还可用Ca2+等处理 C. “中中”“华华”与胎猴长的最像，性别为一雌一雄有利于繁衍后代 D. 若用遗传背景相同的“中中”“华华”进行药物研发实验，能更好地控制无关变量 【答案】D 【解析】 【详解】A、供卵母猴的卵母细胞“去核”是去掉MⅡ期的纺锤体-染色体复合物，A错误； B、重构胚的激活除图中TSA、Kdm4d的mRNA外，还可用物理法（电刺激等）和化学法（如Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等处理），B错误； C‌、“中中”“华华”的细胞核来自胎猴，所以与胎猴长的最像，性别相同，C错误； D、“中中”“华华”是遗传背景高度一致的克隆体，进行药物研发实验时，能显著降低个体差异带来的干扰，更好地控制无关变量，使实验结果更可靠，D正确。 19. 双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。具体做法是：在无菌培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后，将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至45~48℃，然后加入敏感指示菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液，充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板（见下图）。培养一段时间后，在双层培养基的上层会出现透亮的无菌圆形空斑—噬菌斑，下列有关说法正确的是（　　） A. 上层平板中噬菌斑的数量与待测噬菌体稀释悬液的浓度呈反比 B. 若利用双层平板法对T2噬菌体进行计数，可选用农杆菌作敏感指示菌 C. 上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是噬菌体单独在培养基上繁殖形成的噬菌斑 D. 倒上层平板时需将培养基冷却至45~48℃后再进行接种，目的是防止培养基温度过高引起敏感指示菌和待测噬菌体死亡 【答案】D 【解析】 【详解】A、噬菌斑是噬菌体感染并裂解细菌后形成的无菌空斑。悬液中噬菌体浓度越高，感染的细菌越多，形成的噬菌斑数量也越多，二者呈正比关系，A错误； B、T2噬菌体专门寄生在大肠杆菌体内，所以不可选用农杆菌作敏感指示菌，B错误； C、噬菌体无法单独在培养基上繁殖，上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是敏感菌裂解后形成的，C错误； D、倒上层平板时需将培养基冷却至45～48℃时进行接种，目的是防止培养基温度过高引起敏感指示菌和待测噬菌体死亡，D正确。 20. 人肌红蛋白（Myo）是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一。为制备抗Myo的单克隆抗体，科研人员通常采用双抗体夹心法对抗原进行定量检测，具体过程如图所示。下列说法错误的是（ ） A. 可将Myo基因导入小鼠骨髓瘤细胞，来制备抗Myo的单克隆抗体 B. 抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，用于诊断急性心肌梗塞 C. 固相抗体和酶标抗体虽都能与抗原结合，但二者仍具有不同的结构 D. 加入酶标抗体的目的是通过测定酶促反应的产物量来判断待测抗原量 【答案】A 【解析】 【分析】杂交瘤细胞的特点：既能大量增殖，又能产生特异性抗体；单克隆抗体与常规的血清抗体相比．最大的优势在于特异性强，灵敏度高，可大量制备。 【详解】A、抗体是浆细胞产生的，仅有骨髓瘤细胞是不能产生抗体，且Myo基因表达出来的是抗原，A错误； B、Myo是早期诊断急性心肌梗寒的生化标志物之一，而抗原和抗体的结合具有特异性，故利用抗Myo的单克隆抗体可与Myo特异性结合，可用于诊断急性心肌梗塞，B正确； C、固相抗体和酶标抗体均能与抗原结合，这是由于不同抗体与同一抗原表面的不同部位结合，二者仍具有不同的结构，C正确； D、该检测方法中，酶标抗体的作用是与待测抗原结合，而酶催化检测底物反应，可通过测定酶反应产物量来判断待测抗原量，D正确。 故选A。 第Ⅱ卷 非选择题（满分50分） 21. 桂圆也称龙眼，是一种药食两用的水果。科研团队比较了5种酵母菌(3种酿酒酵母，2种非酿酒酵母)对桂圆果浆的发酵效果，并从中选择适宜的菌种进行发酵，以期得到品质更好的桂圆果酒。生产桂圆果酒的工艺流程如图所示。回答下列问题： 新鲜桂圆去皮去核→桂圆果肉→打浆→调酸→酶解→调糖→接种→发酵→过滤 （1）在发酵流程中未展示对材料的清洗环节，该操作应在上述工艺流程的______________环节之前，这样做的目的是____________________。 （2）酶解的过程是在调酸物料中加入适量的__________酶，作用是_______________。 （3）下表中表示5种酵母(Y1-SY果酒活性干酵母；Y2-RW果酒活性干酵母；Y3-葡萄酒高活性干酵母；Y4-耐高温高活性干酵母；Y5-生香活性干酵母)发酵的桂圆果酒品质（总酯与果酒的香味有关），据表可得出的结论是酿酒酵母主要参与____________（填物质）的生成，非酿酒酵母可将原料中的物质转化为__________从而提高了果酒的甜度。从中选择__________两种酵母菌作为桂圆果酒发酵优良菌种。 酵母 酒精度/%vol 总糖/（g/L） 总酸/（g/L） 总酯/（g/L） 感官评分/分 Y1 13.4 1.3 6.8 0.19 72 Y2 13.1 2.4 6.4 0.18 67 Y2 13.3 1.6 6.2 0.15 64 Y4 12.6 3.4 8.1 0.11 62 Y5 11.0 8.5 7.6 0.38 74 【答案】（1） ①. 新鲜桂圆去皮去核 ②. 防止去皮去核后清洗造成的杂菌污染 （2） ①. 纤维素酶和果胶酶 ②. 分解细胞壁，充分释放细胞内的物质（增加果汁的出汁率和澄清度） （3） ①. 酒精 ②. 总糖 ③. Y1、Y5 【解析】 【分析】果酒的制作需要利用酵母菌发酵，20℃左右最适合酵母菌繁殖，酒精发酵时一般将温度控制在18-25℃。在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。 【小问1详解】 为防止去皮去核后清洗造成的杂菌污染，所以应该在桂圆去皮去核之前进行清洗，即去皮去核安排在清洗之后是为了防止杂菌污染。 【小问2详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，因此，在酶解的过程是在调酸物料中加入适量的纤维素酶和果胶酶，其目的是为了分解细胞壁，充分释放细胞内的物质（增加果汁的出汁率和澄清度）。 【小问3详解】 酿酒酵母主要完成酒精发酵；非酿酒酵母可将原料中的物质转化总糖，因而其培养液总糖含量较高，从而提高了果酒的甜度，从表格中可以看出，Y5将原料中的物质转变为糖类能量较强，Y1中酒精度数较高，说明产酒能力强，说明选择Y1和Y5两种酵母菌作为桂圆果酒发酵优良菌种。 22. 谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取味精（主要成分为谷氨酸钠）。图1为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径。谷氨酸发酵的培养基成分主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，发酵装置如图2所示。回答下列问题： （1）从物理性质看，谷氨酸发酵的培养基属于________培养基。从培养基的成分与发酵装置可看出，谷氨酸棒状杆菌的代谢类型是_________。 （2）谷氨酸的发酵生产中，通常需要分次加入氨水（弱碱性），从氨水的作用角度分析，原因是______。 （3）若要监测发酵液中谷氨酸棒状杆菌的数目，可采用显微镜直接计数，使用该方法的计数过程是先将稀释100倍的发酵液加入计数板（由25中方格×16小方格=400个小方格组成，容纳液体总体积为0.1mm3）的计数室中，然后计数菌体数。若计数室中有36个菌体，则1mL的原发酵液中估计有谷氨酸棒状杆菌______个。此外还可以用________法监测发酵液中谷氨酸棒状杆菌的数目。通常情况下，前者计数结果比后者计数结果更______（填“大”或“小”），原因是___________。 （4）研究发现：发酵过程中当溶氧量不足时，谷氨酸棒状杆菌的代谢产物是乳酸或琥珀酸，所以谷氨酸棒状杆菌在发酵过程中要不断地通入无菌空气并不断搅拌。当培养基中碳、氮比为4：1时，菌体大量繁殖，而产生的谷氨酸量较少；当碳、氮比为3：1时，菌体繁殖受抑制，但谷氨酸的合成量大增。 ①发酵过程中搅拌的作用是________。 ②结合上述发现，写出一种利用一定起始数量的菌种通过发酵得到大量谷氨酸的发酵思路：________。 【答案】（1） ①. 液体 ②. 异养需氧型 （2）氨水既可以为谷氨酸棒状杆菌提供氮源，又能调节发酵液的pH （3） ①. 3.6×107 ②. 稀释涂布平板 ③. 大 ④. 显微镜直接计数法把活菌和死菌都计算在内，而稀释涂布平板法只计数活菌，且可能存在多个菌体形成一个菌落的情况，导致计数偏小 （4） ①. 增加溶氧量，使菌种与营养物质充分接触 ②. 先将培养基中碳、氮比设置为4:1，通入无菌空气并搅拌，让菌体大量繁殖；然后将培养基中碳、氮比改为3:1，继续通入无菌空气并搅拌，促进谷氨酸大量合成 【解析】 【分析】发酵过程是指人们借助微生物在有氧或无氧条件下的生命活动来制备微生物菌体本身、或者直接代谢产物或次级代谢产物的过程。发酵过程主要应用于食品工业、生物、化工等领域。根据微生物的种类不同（好氧、厌氧、兼性厌氧），可以分为好氧性发酵和厌氧性发酵两大类。 【小问1详解】 谷氨酸发酵的培养基成分主要有葡萄糖、氨水、磷酸盐、生物素等，没有添加琼脂等凝固剂，从物理性质看属于液体培养基。培养基中有葡萄糖（碳源），发酵装置需要通入无菌空气，说明谷氨酸棒状杆菌需要从外界获取有机物作为碳源，且需要氧气进行呼吸作用，所以其代谢类型是异养需氧型； 【小问2详解】 氨水可以为谷氨酸棒状杆菌提供氮源；同时，发酵过程中会产生酸性物质使发酵液pH下降，氨水是弱碱性物质，能够调节发酵液的pH，维持适宜的发酵环境； 【小问3详解】 已知计数板由25中方格×16小方格 = 400个小方格组成，容纳液体总体积0.1mm3，先将发酵液稀释100倍，计数室中有36个菌体。则1mL(1cm3=1000mm3)原发酵液中菌体数为36÷0.1×100×1000=3.6×107个。除显微镜直接计数外，还可以用稀释涂布平板法监测发酵液中谷氨酸棒状杆菌的数目。通常情况下，显微镜直接计数法计数结果比稀释涂布平板法计数结果大，原因是显微镜直接计数法把活菌和死菌都计算在内，而稀释涂布平板法只计数活菌，且可能存在多个菌体形成一个菌落的情况，导致计数偏小； 【小问4详解】 发酵过程中搅拌的作用是增加溶氧量，使菌种与营养物质充分接触，有利于营养物质的充分利用。利用一定起始数量的菌种通过发酵得到大量谷氨酸的发酵思路为：先将培养基中碳、氮比设置为4:1，通入无菌空气并搅拌，让菌体大量繁殖，增加菌体数量；当菌体数量达到一定程度后，将培养基中碳、氮比改为3:1，继续通入无菌空气并搅拌，创造适宜条件，促进谷氨酸大量合成。 23. 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜胀气病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜胀气病的发生。某研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗胀病的新型苜蓿。（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同） （1）常用酶解法获得紫花苜蓿与百脉根原生质体，优点是_________；步骤①诱导二者原生质体融合时除可用PEG处理外，还有_________（答两种）等方法。 （2）据图可知，本研究主要利用的生物技术的原理是_________。此种育种方式的优点是_________。 （3）上述过程中需要提供光照的是_________（填序号），光照的作用是_________。得到的杂种植株是_________倍体，理论上是否可育？_________。请回答并阐述理由_________。 （4）在实验前需要通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是_________。 【答案】（1） ①. 不破坏细胞膜 ②. 高Ca2+-高pH融合，电融合法 （2） ①. 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 ②. 打破生殖隔离，实现远缘杂交 （3） ①. ③ ②. 促进叶绿素的合成 ③. 六 ④. 可育 ⑤. 杂种植株细胞中含有成对的同源染色体 （4）将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况 【解析】 【小问1详解】 细胞壁成分是纤维素和果胶，用纤维素酶和果胶酶获得原生质体，细胞膜无纤维素和果胶，由于酶具有专一性，不会破坏细胞膜。步骤①诱导二者原生质体融合时除可用PEG处理外，还有高Ca2+-高pH融合、电融合法等方法。 【小问2详解】 由图可知，新型苜蓿的培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。植物体细胞杂交获得杂种植株，打破生殖隔离，实现远缘杂交。 【小问3详解】 将愈伤组织经③再分化形成根芽的过程需要提供光照，因为叶绿素的合成需要光照。紫花苜蓿是同源四倍体，体细胞含有4个染色体组，百脉根是二倍体，体细胞含有2个染色体组，融合后得到的杂种细胞含有4+2=6个染色体组是六倍体，可见，杂种植株细胞中含有成对的同源染色体，因而能进行正常的减数分裂过程，因而表现为可育。 【小问4详解】 由图可知，新型苜蓿的培育过程采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性；在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得 具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。 24. 丙肝病毒引起的丙型肝炎可导致肝脏慢性炎症坏死和纤维化，部分患者可能发展为肝硬化甚至肝癌。为研制丙肝病毒的单克隆抗体，某研究者以小鼠为实验材料设计了以下实验流程，回答下列问题： （1）为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要进行的操作是______，融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是_____。 （2）诱导动物细胞融合的方法_____（答3种），筛选1利用______进行筛选，而筛选2通过多次的_____来完成。 （3）得到大量丙肝病毒单克隆抗体的方法之一是将杂交瘤细胞在体外培养液中进行培养，接入培养液中杂交瘤细胞的量是单克隆抗体产量的重要影响因素之一，为探究一定培养液中接种杂交瘤细胞的最佳数量，实验思路为_________。 【答案】（1） ①. 给小鼠注射丙肝病毒使小鼠产生免疫反应 ②. 骨髓瘤细胞 （2） ①. 物理法（离心、振动）、化学法(聚乙二醇)、灭活的病毒诱导法 ②. 选择培养基 ③. 克隆化培养和抗体检测 （3）将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的几组（可自设组数）。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程： （1）制备产生特异性抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞。 （2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与脾细胞中形成的B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体。 （3）克隆化培养和抗体检测。 （4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖。从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【小问1详解】 为使单细胞悬液中的B淋巴细胞产生的抗体中一定含有能与丙肝病毒结合的抗体，需要用丙肝病毒（作为抗原）对小鼠进行免疫后，小鼠的B淋巴细胞能产生抗丙肝病毒的抗体，从该小鼠的脾细胞中能获得产生该抗体的B淋巴细胞。B淋巴细胞在体外培养条件下不能无限增殖，而骨髓瘤细胞能无限增殖，故融合之前的两种细胞中，能通过动物细胞培养大量增加数量的是骨髓瘤细胞。 【小问2详解】 诱导动物细胞融合的方法有物理法（离心、振动）、化学法(聚乙二醇)、灭活的病毒诱导法等；筛选1是指利用选择培养基进行筛选得到杂交瘤细胞。由于杂交瘤细胞产生的抗体除了抗丙肝病毒的抗体外，还可能有其他类型，故筛选2是指进行多次的克隆化培养和专一性抗体检测，以得到能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 实验的自变量是培养液中接种杂交瘤细胞的数量，因变量为一定时间内抗丙肝病毒抗体的数量，除自变量外，其他条件要相同且适宜。所以实验思路为：将适宜的动物细胞培养液分为体积相同的若干组。在不同组别中接种不同量的能产生丙肝病毒的单克隆抗体的杂交瘤细胞，一定时间后测定培养液中的抗体含量，提取抗体数量最多的实验组对应的接种量即为最适接种量。 25. 现代社会压力使人类的作息时间很难严格遵循体内的生物钟。因为加班、频繁跨越时区、熬夜、肥胖等，越来越多的人面临着生物钟紊乱的困扰，导致失眠、睡眠中断、日间过度嗜睡，与人交流出现障碍等问题。2019年我国科研团队获得了5只基因BMAL1缺失（或敲除）的克隆猴，极大地推动了生物钟紊乱相关问题的研究。下图为克隆猴的培育过程，请回答下列问题。 （1）5只克隆猴是科学家利用_________技术获得的。首先需将A猴卵母细胞培养至___________期，并通过显微操作法进行_________处理，然后将B猴体细胞注入去核A猴卵母细胞形成重组细胞。 （2）重组细胞体外培养时首先应保证被培养的细胞处于___________的环境，在细胞体外培养过程中应定期更换培养液，目的是_________。 （3）为判断是否属于真的克隆猴，研究团队仔细检测了这些克隆猴的基因型，发现细胞核基因型与_________相同，由此证明5只猴是真的克隆猴。 （4）为了验证这5只基因敲除猴是否存在昼夜节律紊乱问题，科学家给它们佩戴了检测设备，可以随时监测它们的昼夜活动情况，通过行为学分析检测其是否明显表现出类似精神分裂症的症状。对照组的设置应为_________。观察发现，与对照组相比，实验组猴的神经内分泌激素褪黑素分泌减少；与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达增强；不再按照24h的周期活动，在夜间活动明显增多，有人靠近时双手抱头，蜷缩在角落里，不敢活动。由此证明___________。 【答案】（1） ①. 动物细胞核移植 ②. 减数分裂Ⅱ中（MⅡ） ③. 去核 （2） ①. 无菌、无毒 ②. 清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 （3）B猴 （4） ①. 给没有做基因敲除的猴佩戴检测设备，监测它们的昼夜活动情况，分析其是否明显表现出类似精神分裂症的症状 ②. 5只基因敲除猴存在昼夜节律紊乱问题 【解析】 【小问1详解】 结合题图，克隆猴通过A猴去核卵母细胞与B猴体细胞的核重组后经发育得到，故5只克隆猴是科学家利用体细胞核移植技术获得的，核移植前需将A猴卵母细胞培养至减数第二次分裂时期，因卵母细胞培养到减数分裂Ⅱ中（MⅡ）期才成熟；并通过显微操作法进行去核操作，这样做的目的是保证克隆猴的遗传物质主要来自B猴，然后将B猴体细胞注入去核A猴卵母细胞形成重组细胞。 【小问2详解】 重组细胞体外培养时首先应保证被培养的细胞处于无菌、无毒的环境，在细胞体外培养过程中应定期更换培养液，目的是清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。 【小问3详解】 结合题图，该克隆猴的重组细胞的细胞核由B猴提供，故为判断是否是真的克隆猴，研究团队仔细检测了这些克隆猴的基因型，发现细胞核基因型与B猴相同，说明这些猴子的核基因都是由B猴提供的，由此证明5只小猴是真的克隆猴。 【小问4详解】 为了验证这5只基因敲除猕猴是否存在昼夜节律紊乱问题，科学家给猴子们佩戴了“小米手环”等检测设备，可以随时监测到它们的昼夜活动情况，通过行为学分析检测其是否明显表现出类似精神分裂症的症状。对照组的设置应为给没有做基因敲除的猴佩戴检测设备，监测它们的昼夜活动情况，分析其是否明显表现出类似精神分裂症的症状。观察发现，与对照组相比，实验组猕猴的神经内分泌激素褪黑素分泌减少；与睡眠剥夺、抑郁症以及衰老等相关的基因表达增强；不再按照24小时的周期活动，在夜间活动明显增多，有人靠近时双手抱头，蜷缩在角落里，不敢活动。由此证明5只基因敲除猴存在昼夜节律紊乱问题。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $