2026届高三生物一轮复习课件微生物的培养技术及应用

微生物的培养技术及应用 1 微生物的基本培养技术 考点一 2 人体内分泌的乳糖酶数量不足以完全消化和分解乳糖时,就会引起腹泻,称为乳糖不耐受症。为提高乳糖酶的产量,我国科研人员通过图的实验过程筛选出生产乳糖酶的优良酵母菌菌株 奶酪含乳糖,可为酵母菌提供唯一碳源 ①应为适合酵母菌生长的选择培养基，其中奶酪的最主要作用是？ 考点情境 什么是培养基？如何配制？ 3 (1)培养基的概念、用途和类型 培养基 ↓(加入 ，如琼脂) 培养基 液体 凝固剂 固体 概念： 人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质 作用： 用以培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物。 种类： 按物理性质分 按功能用途分 选择培养基 鉴别培养基 概述培养基的概念、用途、类型及营养构成 任务 1 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 4 水、碳源、氮源、无机盐。 ①碳源 无机碳源： 有机碳源： ②氮源 NH4＋、NO3-、NH3等。 牛肉膏、蛋白胨、尿素、氨基酸等。 CO2、CO32-、HCO3-。 葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等。 无机氮源： 有机氮源： 来源于动物，含有糖、维生素和有机氮等营养物质 ③无机盐 Zn、Cu、Mn、Co、Mo等 大量元素： 微量元素： Ca、K 、Mg等 牛肉膏、蛋白胨： （自养微生物） （异养微生物） （异养微生物） （自养微生物） ④水 成分： (2)基本成分： (3)其他条件： pH、 和氧气。如下表： 微生物 乳酸杆菌 霉菌 细菌 厌氧微生物 特殊需求 添加______ pH调至____ pH调至_____________ _______ 维生素 酸性 中性或弱碱性 无氧 特殊营养物质 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 什么是无菌技术？ 人体内分泌的乳糖酶数量不足以完全消化和分解乳糖时,就会引起腹泻,称为乳糖不耐受症。为提高乳糖酶的产量,我国科研人员通过图的实验过程筛选出生产乳糖酶的优良酵母菌菌株 ②中培养出的单个菌落是否全部由单 一个体繁殖所得？ 不是;如果两个细菌挨得很近，它们各 自繁殖的后代相互交叠在一起分不出彼此，肉眼看来也就是一个菌落 把①置于合适的环境下培养一段时间，通过稀释后涂布于②固体培养基 上,对涂布器和培养基的灭菌方法依次为 灼烧灭菌、高压蒸汽灭菌 考点情境 什么是无菌技术？ 根据上图，怎样进行酵母菌的纯培养？ 6 (1)目的：__________________________。 (2)关键：________________。 获得纯净的微生物培养物 防止杂菌污染 项目 消毒 灭菌 作用强度 较为______ _______的物理、化学因素 消灭微生物 的数量 物体表面或内部　　 　微生物 物体内外的　　 微生物 能否消灭 芽孢、孢子 消灭 芽孢 能消灭 芽孢和孢子 适用对象 操作空间、操作者 的衣着和手等 接种环、接种针、 玻璃器皿、培养基等 常用方法 温和 强烈 一部分 所有 部分 全部 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 湿热灭菌、干热灭菌灼烧灭菌 运用表格，比较无菌技术的种类及区别 任务 2 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 7 人体内分泌的乳糖酶数量不足以完全消化和分解乳糖时,就会引起腹泻,称为乳糖不耐受症。为提高乳糖酶的产量,我国科研人员通过图的实验过程筛选出生产乳糖酶的优良酵母菌菌株 考点情境 根据上图，归纳总结酵母菌纯培养的流程？ 8 最常用的接种方法是______________和__________________。 灭菌 分离 平板划线法 稀释涂布平板法 ①培养物： ②纯培养物： 接种于培养基内，在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体 ③纯培养： 获得纯培养物的过程 (1)培养物、纯培养物、纯培养的概念 (2)菌落的概念 由一个微生物细胞繁殖而来的肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。 配制培养基、________、接种、________和培养等。 由单一个体繁殖所获得的微生物群体 概念： 步骤： ④接种方法： 理清微生物纯培养的基本操作要求 任务 3 【活动1】归纳总结以下概念 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 培养基灭菌: ; 培养四灭菌: ; 【活动2】梳理酵母菌纯培养的操作步骤： 配制培养基： 灭菌： 倒平板： 制备培养基 湿热灭菌(高压蒸汽灭菌)法 干热灭菌 去皮马铃薯200g,切成块 加水1000ml，加热煮沸至马铃薯软烂 用纱布过滤 用蒸馏水定容至1000ml 加入20g葡萄糖15-20g琼脂 待培养基冷却至50℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。 等待平板冷却凝固后才能进行 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 平板划线法 方法： 原理： 接种和分离 对照组： 实验组： 培养酵母菌 未接种平板倒置培养 接种平板倒置培养 单个细胞 微生物群 单个菌落 连续划线 分散或稀释 生长繁殖 结果分析 ①在未接种的培养基表面是否有菌落生长 ②在接种酵母菌的培养基上可观察到单菌落。如果培养基上生长的菌落的颜色、形状、大小基本一致，并符合酵母菌菌落的特点， ③如果观察到了不同形态的菌落，可能是接种的菌种不纯或者无菌操作不规范等原因引起的。 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 11 ① ③ ② ④ ⑤ ⑥ ⑦ ⑥ ⑤ ③ ① ② ④ ⑦ 【活动3】接种和分离酵母菌的方法——平板划线法 下图是平板划线操作的示意图，据图回答下列问题： (1)平板划线操作的正确步骤是： 。 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 (2)在划线操作结束时，仍然需要灼烧接种环吗？为什么？ 灼烧时期 目的 取菌种前 每次划线前 接种结束后 杀死接种环上原有微生物。 杀死上次划线残留菌种,使下次划线菌种直接来自上次划线末端 杀死接种环上残留的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 ⑤在灼烧接种环之后，要等其冷却后再进行划线以免接种环温度太高，杀死菌种。 第1区划线 接种环灭菌 第2区划线 接种环灭菌 第3区划线 接种环灭菌 接种环灭菌 1 2 3 4 5 ①接种环只蘸一次菌液,在培养基不同位置连续划线多次 (3)平板划线法在划线时注意哪些问题？ ④划线后,培养皿倒置培养 ②划线首尾不能相接 ③每次划线前接种环进行灼烧灭菌，待冷却后再开始画线 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 (4)第二次及其后的划线操作时，为什么总是从上一次划线的末端开始划线？ 划线后，线条末端细菌的数目比线条起始处要少，每次从上一次划线的末端开始，能使细菌的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细菌繁殖而来的菌落。 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 (5)接种结束后，为什么要将一个未接种的培养基和一个已接种的培养基放在一起培养，未接种的培养基表面如果有菌落生长，说明了什么？ 培养未接种的培养基的作用是对照，未接种的培养基经过培养后无菌落生长，说明培养基的制备是成功的；若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底，或培养基被污染了，需要重新制备。 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点一 微生物的基本培养技术 (1)培养基一般都含有水、碳源、氮源和无机盐，有时还需要加入一些特殊的物质(　　) (2)培养霉菌时需将培养基的pH调至中性或弱碱性(　　) (3)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上(　　) √ × × (4)消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害(　) (5)为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落(　　) (6)对实验操作的空间、操作者的衣着和手，进行清洁和灭菌(　　) √ × × 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 易错辨析 考点一 微生物的基本培养技术 1.(2023·河北邢台高三模拟)在实验室培养微生物，需要人为地为微生物提供适宜的营养和环境条件。下列关于培养基配制的说法正确的是（ ） A.培养基中需要碳源、氮源、水和无机盐齐全 B.培养基中必须添加琼脂 C.培养基制备中均需调节pH至酸性 D.无论哪种培养基均需要灭菌 D 考向一：培养基的配制和无菌技术 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点一 微生物的基本培养技术 【解析】 培养固氮微生物时，培养基中可以不添加氮源，A错误； 只有配制固体(或半固体)培养基时才需要添加琼脂，B错误； 适宜的pH是微生物生长的必需条件，因此配制过程中需要调节pH，但培养霉菌时一般需要将pH调至酸性，C错误； 培养基均需要灭菌，D正确。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点一 微生物的基本培养技术 培养基种类 特点 用途 液体培养基 不加凝固剂 工业生产 半固体培养基 加凝固剂(如琼脂) 观察微生物运动,微生物的分离、鉴定 固体培养基 加凝固剂(如琼脂) 微生物分离、鉴定,活菌计数,菌种保藏 培养基的种类和作用 (1)按物理状态分类 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 归纳提示 考点一 微生物的基本培养技术 种类 制备方法 原理 用途 举例 选择培 养基 培养基中加入某些化学物质 依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计 从众多微生物中分离所需的微生物 加入青霉素分离得到酵母菌和霉菌 鉴别培 养基 培养基中加入某种指示剂或化学药品 产生特定的颜色或其他变化 鉴别不同种类的微生物 用伊红美蓝培养基鉴别大肠杆菌 培养基的种类和作用 (2)按功能分类 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 归纳提示 考点一 微生物的基本培养技术 1.(2024·广东深圳联考)某同学将5个手指尖在贴有“洗手前”标签的固体培养基上轻轻按一下，然后用肥皂将该手洗干净，再将5个手指尖在贴有“洗手后”标签的同种培养基上轻轻按一下。将这两个培养皿放入37 ℃恒温培养箱中培养24 h后，发现贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少。下列相关叙述错误的是(　　) A.这个实验中需要进行灭菌处理的材料用具有培养皿和培养基等 B.“将手指尖在培养基上轻轻按一下”相当于微生物培养中的接种 C.从实验结果来看，洗手后的操作不会污染培养基 D.培养基中的氮元素是微生物合成蛋白质、核酸等物质所必需的 C 考向一：培养基的配制和无菌技术 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点一 微生物的基本培养技术 【解析】　从实验结果看，贴有“洗手后”标签的培养皿中菌落较少，并不能说明洗手后的操作不会污染培养基，C错误。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点一 微生物的基本培养技术 常见物品的消毒或灭菌方法 煮沸消毒法 消毒 巴氏消毒法 化学药剂消毒法 紫外线消毒法 灭菌 灼烧灭菌 干热灭菌 湿热灭菌 日常食品，罐装食品 牛奶等不耐高温的液体等 用酒精擦拭操作者双手、用氯气消毒水源等 接种室、接种箱或超净工作台等 接种工具、其他金属用具等 玻璃器皿、金属用具 培养基等 考点一 微生物的基本培养技术 D 3.(2024·东北育才中学模拟)下列关于“酵母菌的纯培养”实验的叙述，错误的是(　　) A.马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分 B.接种环灭菌时，顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧 C.平板划线时，接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线 D.完成平板划线后，应将平板立刻倒置培养以免污染培养基 考向二：微生物的纯培养 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点一 微生物的基本培养技术 【解析】　马铃薯捣烂后的滤液中含有酵母菌生长所需的多种营养成分，如碳源、氮源和无机盐等，A正确；接种环灭菌时，顶端的环和环后的部分柄均需通过火焰灼烧，防止杂菌的污染，B正确；平板划线时，接种环应在固体培养基表面轻轻地连续划线，防止划破培养基表面，影响实验结果的观察，C正确；完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，再将平板倒置培养，D错误。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点一 微生物的基本培养技术 B 4.(2024·广州联考)为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种分解尿素的细菌，培养结果如图所示。下列叙述错误的是(　　) A.为保证无菌操作，接种针、接种环使用 前都必须灭菌 B.倒平板后需间歇晃动，以保证表面平整 C.图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从 Ⅲ区挑取单菌落 D.该实验结果出现了单菌落，能达到菌种纯化的目的 考向二：微生物的纯培养 【解析】　倒平板后无需晃动，B错误。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点一 微生物的基本培养技术 微生物的选择培养和计数 考点二 28 大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，当样品稀释度足够高时，每一个菌落都来源于分散的单个细菌 (2)通过稀释涂布平板法来统计土壤中活菌的数目，该方法计数的原理是? 考点情境 (1)科研小组将菌种接种到选择培养基上进行分离纯化，该选择培养基需以________________为唯一碳源； 聚丙烯纤维 怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理? 在对抗新型冠状病毒的同时消耗了大量的一次性口罩(主要成分是聚丙烯), 被消耗的口罩如不及时处理会对环境造成污染。某科研小组准备从土壤中 筛选出能够高效降解一次性口罩的细菌，进行了如图所示的实验。 29 1.选择培养基 (1)概念： 允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基 不加氮源 自养微生物 酵母菌和霉菌(青霉素能杀死细菌、放线菌) 固氮微生物 加入青霉素 加高浓度食盐 金黄色葡萄球菌 石油是唯一碳源 能消除石油污染的微生物 不加碳源 (2)举例： 阐明微生物的选择培养的原理 任务 4 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 2.微生物的选择培养 ②火焰旁将10g土样加入盛有90mL无菌水的锥形瓶中,充分摇匀,制成菌液。取1mL上清液加入盛有9mL无菌水的试管中，依次等比稀释。 1×10 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1 mL 1×102 1×103 1×104 1×105 1×106 1×107 9mL无菌水 90mL无菌水 10g ①铲取土壤，将样品装入纸袋中 (1)梯度稀释 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 ③取0.1mL菌液，滴加到培养基表面。 ④将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中。 ⑤将涂布器放在火焰上灼烧，待酒精燃尽、涂布器冷却后，再进行涂布。 ⑥用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。涂布时可转动培养皿，使涂布均匀。 各梯度分别涂布3个平板1个不涂布作空白对照 (2)涂布平板 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 待涂布的菌液被培养基吸收 将平板倒置 30～37℃恒温培养1～2d后进行计数 (2)涂布平板 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 (2)上图是通过稀释涂布平板法来统计土壤中活菌的数目，该方法计数的原理是________________________________________________________________。 ________________________________________________，根据图中菌落个数的结果分析，还需对稀释104倍的土壤浸出液进行______处理，这样处理的目的是_______________________________，从而保证计数结果的准确性。 考点情境 在对抗新型冠状病毒的同时消耗了大量的一次性口罩(主要成分是聚丙烯), 被消耗的口罩如不及时处理会对环境造成污染。某科研小组准备从土壤中 筛选出能够高效降解一次性口罩的细菌，进行了如图所示的实验。 大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，当样品稀释度足够高时，每一个菌落都来源于分散的单个细菌 稀释 获得降低最终菌落个数，便于计数 (1)显微镜直接计数法 原理： 利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计数一定容积的样品中微生物的数量 方法： 用计数板计数 缺点： 不能区分死菌与活菌而使计数结果偏大 阐述微生物的数量测定 任务 5 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。 (2)间接计数法——活菌计数法(即稀释涂布平板法) ①原理： 选择30-300个菌落的平板进行计数； 每个稀释度至少取3个平板取其平均值； ②计数原则: 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 ③为什么用此种方法统计的菌落数目往往比活菌的实际数目低？ 因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落。 ④某同学在稀释倍数为106的培养基中测得平板上菌落数的平均值为234个(涂布平板时所用稀释液的体积为0.1 mL)，那么稀释倍数为106的试管中细菌的浓度是 个/mL，稀释倍数为10的锥形瓶中细菌的浓度为 个/mL，所以每克样品中的细菌数是 个。 2.34×103 2.34×108 2.34×109 每g样品中菌落数＝ (C÷V)×M M代表稀释倍数 C代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数 V代表涂布平板时所用的稀释液的体积(mL) ⑤计算公式: 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 (1)实验原理 ①士壤中的细菌之所以能分解尿素，是因为它们能合成脲酶； ②配制以尿素为唯一氮源的培养基，能够在该培养基中生长的细菌就是能分解尿素的细菌 葡萄糖 10.0g 尿素 1.0g KH2PO4 1.4g Na2HPO4 2.1g MgSO4·7H2O 0.2g 琼脂 15.0g 蒸馏水 1000ml ①制备选择培养基（尿素为唯一氮源） 提供无机盐；调节pH ②制备牛肉膏蛋白胨培养基 (2)培养基的制备 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数的实验操作 任务 6 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 (3)实验流程 酸碱度接近中性的潮湿土壤中,铲去表层，取距地表3～8cm的土壤层,将样品装入事先准备好的信封中。 取土样时用的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌。操作完成后，一定要洗手。 土壤取样 样品稀释 涂布平板 观察培养 菌落计数 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 测细菌数：一般用104、105、106稀释液。 测放线菌：一般用103、104、105稀释液。 测真菌数：一般用102、103、104稀释液。 不同微生物在土壤中含量不同，分离不同的微生物采用不同的稀释度，以保证获得菌落数在30～300之间适于计数的平板。 B A C 在初次实验中，对于稀释的范围没有把握，怎样做才能保证从中选择出菌落数在30～300的平板进行计数？ 选用稀释范围更大的稀释液进行平板培养 土壤取样 样品稀释 涂布平板 观察培养 菌落计数 (3)实验流程 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 土壤取样 样品稀释 涂布平板 观察培养 菌落计数 ①每个浓度至少设置4个平板 选择培养基（平行重复） 牛肉膏蛋白胨培养基 ②本实验使用的平板和试管较多，为了避免混淆，最好在使用前做好标记。 例：标记注明组别、培养日期和平板上培养样品的稀释度等。 接种：稀释液涂布平板法 (3)实验流程 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 土壤取样 样品稀释 涂布平板 观察培养 菌落计数 不涂布稀释液的选择培养基和牛肉膏蛋白胨培养基 牛肉膏蛋白胨培养基 判断选择培养基是否具有筛选作用 ③设置两个空白对照： 以验证培养基中是否含有杂菌 通用型培养基上所有菌种都生长 选择培养基上部分菌种才能生长 (3)实验流程 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 稀释涂布平板法 土壤取样 样品稀释 涂布平板 观察培养 菌落计数 ①接种： ②培养条件： 30-37℃的温度下培养1-2d。 ③观察： 根据菌落的特征区分微生物； ④计数： 每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 (3)实验流程 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 土壤取样 样品稀释 涂布平板 观察培养 菌落计数 稀释度 104 105 106 107 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 1 2 3 平均值 菌落数/平板 当菌落数目稳定时，选取菌落数在30～300的平板进行计数，同一稀释度下至少计数3个平板，求出平均值，并根据所对应的稀释度计算出样品中细菌的数目。设计如下表格记录并计数: (3)实验流程 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 (4)结果分析与评价 内容 现象 结论 有无杂菌污染的判断 对照的培养皿中无菌落生长 未被杂菌污染 选择培养基中菌落数偏高 被杂菌污染 菌落形态多样，菌落数偏高 培养基中混入其他氮源 选择培养基的筛选作用 牛肉膏蛋白胨培养基上的菌落数目大于选择培养基上的数目 选择培养基具有筛选作用 样品的稀释操作 得到3个或3个以上菌落数目在30～300的平板 操作成功 重复组的结果 若选取同一种土样，统计结果应接近 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 (3)在培养基中加入能与该物质结合的染色剂,该物质被分解后会出现透明圈， 假设菌落面积为X,菌落周围透明圈的面积为Y,Y/X的比值越大,说明什么？ 对聚丙烯纤维的降解能力越强 考点情境 怎样运用生物与环境相适应的观点来理解选择培养的原理? 在对抗新型冠状病毒的同时消耗了大量的一次性口罩(主要成分是聚丙烯), 被消耗的口罩如不及时处理会对环境造成污染。某科研小组准备从土壤中 筛选出能够高效降解一次性口罩的细菌，进行了如图所示的实验。 46 (1)分离方法与原理 方法： 鉴定原理： 利用富含纤维素的选择培养基进行选择培养 以纤维素为唯一碳源，加入刚果红染料 纤维素 刚果红 红色复合物 培养基成分： 纤维素酶 红色消失 现透明圈 纤维素分解菌 红色环带直径与菌落直径比值越大，说明分解能力越强。 分解纤维素的微生物的分离 任务 7 教学分析 易错辨析 考向突破 归纳提示 必备知识 考点二 微生物的选择培养和计数 (1)利用稀释涂布平板法统计菌落数目时,统计的菌落数就是活菌的实际数(　) (2)统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计(　　) (3)利用稀释涂布平板法和平板划线法均可实现细菌的分离和计数(　　) (4)倒平板时，应将打开的皿盖放到一边，以免培养基溅到皿盖上 (　 ) (5)分解尿素的细菌可以将尿素转化为氨，使得培养基的酸碱度降低 ( ) × × × × × 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 易错辨析 考点二 微生物的选择培养和计数 1.(2024·广东佛山模拟)野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，下图为纯化某氨基酸营养缺陷型突变株的部分流程图，①②③④代表培养基，A、B、C表示操作步骤，D、E为菌落。下列叙述错误的是(　　) 考向一：微生物的选择培养 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 A.图中①②④为基本培养基，③为完全培养基 B.A操作的目的是提高突变频率，增加突变株的数量 C.B的正确操作是用涂布器把菌液均匀地涂布在②表面 D.经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D进行纯化培养 下列叙述错误的是(　　) A 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 【解析】　野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，氨基酸营养缺陷型突变株无法合成某种氨基酸，只能在完全培养基上生长，根据题图可知，图中①②④为完全培养基，③为基本培养基，A错误；紫外线可以提高突变的频率，从而增加突变株的数量，B正确；B的正确操作是将菌液滴加到培养基表面，再用涂布器将菌液均匀地涂布在②表面，C正确；从图中可知，D在基本培养基中无法生长，在完全培养基中可生长，说明D是氨基酸营养缺陷型突变株菌落，故经C过程原位影印及培养后，可从④中挑取D菌落进行纯化培养，D正确。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 2.(2024·江西新余调研)耐高温淀粉酶在大规模工业生产中有很大的实用性。嗜热菌可以在高温环境中生存，其产生的淀粉酶最适温度较高。筛选能产生耐高温淀粉酶的嗜热菌过程如图1所示，其中Ⅰ号培养基用碘液处理的结果如图2所示。下列叙述正确的是(　　) 图1 图2 考向一：微生物的选择培养 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 A.图2中周围不显蓝色的菌落含有所需菌种 B.倒平板后对培养皿进行高压蒸汽灭菌 C.淀粉是图2所示固体培养基的唯一碳源 D.甲、乙试管中均为选择培养基 图1 图2 下列叙述正确的是(　　) A 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 【解析】　淀粉与碘液反应呈现蓝色，能分解淀粉的嗜热菌在培养基上生长时可释放淀粉酶，分解培养基中的淀粉，故周围不显蓝色的菌落含有所需菌种，A正确；倒平板前培养皿和培养基都已灭菌处理，因此倒平板后不需要对培养皿再进行高压蒸汽灭菌，B错误；据图2可知，培养基上出现周围显蓝色的菌落和周围不显蓝色的菌落，因此淀粉可能不是图2所示固体培养基的唯一碳源，C错误；图1中①过程是梯度稀释，②过程是用稀释涂布平板法进行接种，因此甲、乙试管主要是对嗜热菌样品进行稀释，不具备选择作用，不属于选择培养基，D错误。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 3.(2024·河北石家庄调研)北京冬奥会食堂让各国运动健儿爱上中国味道，其餐余垃圾在垃圾集中点采用生化＋雾化＋膜过滤技术处理后，可以达到无二次污染的标准。为筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，提高“生化”处理的效率，研究人员将餐余垃圾机械化处理后加入装有无菌水的锥形瓶中制备餐余垃圾浸出液，然后进行如图所示操作，下列说法错误的是(　　) 考向二：结合微生物的分离与计数 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 A.餐余垃圾浸出液在接种前通常需要进行高压蒸汽灭菌处理 B.可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上 C.X培养基含有淀粉和抗生素，Y培养基是不含琼脂的液体培养基 D.图中高效降解淀粉的微生物是⑤，可根据菌落特征初步判断微生物类型 下列说法错误的是(　　) A 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 【解析】　若对餐余垃圾浸出液进行高压蒸汽灭菌会杀死菌种，导致实验失败，A错误；微生物的接种方法包括稀释涂布平板法和平板划线法，可用稀释涂布平板法将餐余垃圾浸出液接种在X培养基上，B正确；结合题意可知，本实验的目的是筛选对抗生素有抗性、高效降解淀粉的微生物，故图中X培养基以淀粉为唯一碳源，且应添加抗生素起选择作用；Y培养基是液体培养基，进行扩大培养，其中不含凝固剂琼脂，C正确；淀粉遇碘变蓝色，加入碘液后，能够分解淀粉的菌落周围出现透明圈，图中能高效降解淀粉的微生物是⑤(透明圈最大)，不同微生物形成的菌落特征不同，可根据菌落特征初步判断微生物类型，D正确。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 4.(2024·广东湛江模拟)自生固氮菌是土壤中能独立进行固氮的细菌。科研人员进行了土壤中自生固氮菌的分离和固氮能力测定的研究，部分实验流程如图。已知步骤④获得的3个平板的菌落数分别为90、95、100，对照组平板为0。下列相关叙述正确的是(　　) 考向二：结合微生物的分离与计数 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 A.步骤②振荡20 min的目的是扩大菌种数量，属于选择培养 B.步骤④→⑤使用接种环划线接种，使用前需要灼烧灭菌 C.1 g土壤中平均自生固氮菌数约为9.5×106个 D.所用培养基应加入碳源、氮源、无机盐、水和琼脂 下列相关叙述正确的是(　　) C 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 【解析】　步骤②需充分振荡的主要目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，A错误；由题图可知，步骤⑤平板中的菌落分布均匀，故步骤④→⑤所用的接种工具是涂布器，接种方法是稀释涂布平板法，B错误；1 g土壤中平均自生固氮菌数约为(90＋95＋100)/3÷0.1×104＝9.5×106(个)，C正确；本实验需要分离的自生固氮菌可以利用空气中的氮气作为氮源，故所用培养基中不能加入氮源，D错误。 必备知识 易错辨析 考向突破 归纳提示 考向突破 考点二 微生物的选择培养和计数 构建网络 选择培养基的作用 稀释涂布平板法 科学实例 筛选原则 选择培养基的概念及举例 稀释涂布平板法操作过程 间接计数法—稀释涂布平板法 直接计数—计数板计数法 培养基的制备 土壤取样 样品的稀释 稀释涂布平板法接种 微生物的培养与观察 实验设计 无菌技术 微生物的纯培养 紫外线消毒 化学药物消毒 巴氏消毒 煮沸消毒 培养基的配制 培养基的种类 培养基营养成分 消毒 灭菌 湿热灭菌 干热灭菌 灼烧灭菌 平板划线法 稀释涂布平办法 微 生 物 的 选 择 培 养 和 计 数 微生物的基本培养技术 微生物数量测定 选择培养基 微生物选择培养 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 61 $