精品解析：天津市红桥区天津市第三中学2025-2026学年高二年级下学期期中质量检测生物试题

天津市第三中学2025~2026学年度第二学期 高二年级期中质量检测生物 第I卷选择题 一、单选题（共25题，每题2分，共50分） 1. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（　　） A. 该方法的原理是醋酸菌在缺少糖源时可将乙醇最终转化为乙酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死酵母菌 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的 D. 挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 2. 为了获得可进行人工种植的高品质青头菌菌株，某野生菌科研基地设计了一个实验流程，其主要内容如下图所示。 下列叙述正确的是（ ） A. ①和②均由细胞膜、液泡膜和细胞质构成，酶a代表的是纤维素酶和果胶酶 B. 操作b可运用于微生物的数量测定，其所需工具须经湿热灭菌 C. ③过程在液体培养基中进行，且需将培养基调至中性或弱碱性 D. ③过程可添加适量抗生素抑制其他微生物的生长 3. 为获得纯化的酵母菌菌落，进行如图所示的平板划线操作，划线的顺序为①→②→③→④→⑤。下列有关叙述错误的是（ ） A. 马铃薯琼脂培养基可采用湿热灭菌的方法 B. 进行划线操作时，培养皿盖不能完全打开，且需要在酒精灯火焰旁进行 C. 完成划线操作后，将平板正立放入28℃左右的恒温培养箱中培养 D. 在区域①～⑤中，最有可能在区域⑤中得到酵母菌的纯培养物 4. 根据食品安全国家标准，每毫升合格的牛奶中细菌总数不能超过50000个，研究小组为检测某品牌牛奶是否合格，进行相关实验如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 步骤①中使用的无菌水可通过高压蒸汽灭菌法制备 B. 步骤②配制培养基时需加入琼脂并将pH调至中性或弱碱性 C. 图中所示计数方法统计结果比显微计数法计数结果小 D. 若步骤③中平均菌落数为45，说明该品牌牛奶合格 5. 深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（ ） 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注： “+”表示有；“一”表示无 A. 可用平板划线法对该菌计数 B. 制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C. 由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D. 由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 6. 三七具有防治癌症、抗衰老、降血压等功能，其主要活性成分皂苷尚不能人工合成，且三七容易受多种病毒侵染，导致其生长受阻、产量下降。科研人员利用三七幼茎进行脱毒苗培育和皂苷提取的过程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 次生代谢产物皂苷是三七生长和生存所必需的 B. 过程②为再分化过程，该过程需要一定的光照 C. 过程③获得的三七幼苗具有抗病毒的遗传特性 D. 过程④主要通过增加细胞数量来提高皂苷产量 7. 利用植物组织培养技术培育新植株的两种途径如图，下列说法正确的是（　　） A. 外植体a取自植株甲的不同部位时，形成的植株A遗传性状均相同 B. 过程①可用PEG融合法直接将外植体b和c融合 C. 过程②和脱分化阶段均需要给予适当时间和强度的光照 D. D2是不定形的薄壁组织团块，过程③所用的培养基是液体培养基 8. 花椰菜的杂种优势在生产上应用广泛。利用雄性不育系生产杂交种子，可以简化制种程序。利用原生质体非对称融合技术可以实现雄性不育基因的转移，下图为利用该技术成功获得含有雄性不育基因花椰菜植株的流程图，下列说法正确的是（ ） A. 通过该技术获得的杂种植株含有供体的全部遗传物质 B. 含叶绿体且形态较大的细胞可初步判定为异源原生质体 C. 获得的异源原生质体需放在无菌水中培养，以防杂菌污染 D. 杂种植株的雄性不育基因一定来自油菜叶肉细胞的细胞核 9. 植物体细胞杂交技术中一个关键的环节是原生质体间的融合，在原生质体悬浮液中加入PEG，细胞可在PEG分子的作用下发生粘连而融合，下表表示PEG的用量对原生质体融合的影响。下列说法错误的是（　　） 编号 PEG用量（μL） 融合率（％） 细胞碎片 1 20 6.5 ＋ 2 40 15.5 ＋ 3 60 19.4 ＋ 4 80 20.4 ＋＋ 5 100 21.6 ＋＋＋ 注:各组原生质体悬浮液用量均为100μL “＋”表示少量；“＋＋”表示较多；“＋＋＋”表示非常多 A. 需用纤维素酶和果胶酶制备植物细胞的原生质体 B. 细胞碎片是细胞在悬浮液中涨破而得到的细胞结构 C. 诱导原生质体融合的方法除了使用PEG外，还可以用离心法 D. 诱导原生质体融合的最适PEG用量为100μL 10. 海洋杜氏藻是一种单细胞绿藻，具有耐盐特性；紫球藻是一种单细胞红藻，是制备重要医药原料花生四烯酸的良好材料．且对青霉素有抗性。通过植物细胞工程技术，培育出了能在高盐海水中养殖且高产花生四烯酸的杂种藻类。下列叙述错误的是（ ） A. 用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或高渗溶液中进行 B. 用高Ca2+-高pH融合法可人工诱导原生质体的融合 C. 在高盐培养基中添加青霉素可筛选出所需的杂种细胞 D. 杂种细胞需脱分化形成愈伤组织后才能进一步发育 11. 自体皮肤细胞培养移植是治疗皮肤严重烫伤、烧伤的有效方法。取受损者的皮肤进行处理后置于培养瓶中培养，直至铺满整个培养瓶的底部，单层细胞相互连接形成很薄的“皮肤”。将这些“人造皮肤”移植到患者的伤处进行治疗。下列关于皮肤细胞培养的叙述，正确的是（　　） A. 将皮肤细胞置于含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、琼脂等物质的培养基中培养 B. 在合成培养基中加入抗生素和血清为皮肤细胞提供无菌、无毒的环境 C. 松盖培养瓶应置于含95％氧气和5％CO₂的混合气体的CO₂培养箱中培养 D. “人造皮肤”的获得说明皮肤细胞具有贴壁生长和接触抑制的特点 12. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下列说法错误的是（ ） A. ①②③均通过有性生殖的方式产生 B. 胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别 C. 受体必须是同种的且生理状况相同的雌性动物 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 13. 抗体—药物偶联物（ADC）在癌症治疗中展现出独特优势。已知ADC通过将药物与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列说法错误的是（ ） A. 单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B. 制备单克隆抗体时，为获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，需进行至少两次筛选 C. ADC以胞吞的方式进入肿瘤细胞，该过程需要消耗能量 D. 释放到肿瘤细胞内的小分子药物发挥作用，最终导致肿瘤细胞坏死 14. HER-2蛋白主要在胎儿期表达，成年以后只在极少数组织内低水平表达。由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体—药物偶联物T-DMI，对HER-2有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠反复注射HER-2蛋白，以便在血清中获取曲妥珠单抗 B. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 C. DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键 D. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布 15. HER2/neu是一种原癌基因，在乳腺癌细胞中过量表达H蛋白。H蛋白是跨膜蛋白，结构如图。抗H蛋白单克隆抗体能有效抑制乳腺癌细胞的生长。下列说法正确的是（ ） A. H蛋白可作为抗体的作用靶点的原因之一是HER2/neu在正常细胞中低表达 B. 制备免疫小鼠用的H蛋白时，应将其胞内区基因片段转入工程菌表达并提纯 C. 对小鼠多次注射H蛋白可以获得大量的抗H蛋白单克隆抗体 D. 体外大量培养所需杂交瘤细胞后，需破裂细胞以提取单克隆抗体 16. 下表为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断，下列说法错误的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHⅠ -G↓GATCC- KpnⅠ -GGTAC↓C- EcoRⅠ -C↓AATTC- Sau3AⅠ -↓GATC- HindⅡ -GTY↓RAC- SmaⅠ -CCC↓GGG- 注：Y为C或T，R为A或G。 A. HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶切割后形成平末端 B. Sau3AⅠ限制酶的切割位点在识别序列的外部 C. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 D. BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端 17. 不同生物之间能进行转基因并能获得基因产物，其理论依据不包含（ ） A. 这些生物的DNA分子的空间结构和化学成分一致 B. 这些生物的DNA分子都遵循碱基互补配对原则 C. 这些生物在基因表达时共用一套遗传密码 D. 这些生物的基因结构都是相同的 18. Solexa测序是一种将PCR与荧光检测相结合的高通量测序技术。为了确保该PCR过程中，DNA聚合酶催化一个脱氧核苷酸单位完成聚合反应后，DNA链不继续延伸，应保护底物中脱氧核糖结构上的（ ） A. 1'-碱基 B. 2'-氢 C. 3'-羟基 D. 5'-磷酸基团 19. 下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是（ ） A. 耐高温的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3′端 B. 在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段 C. 引物之间或引物自身发生碱基互补配对，则不能有效扩增目的基因 D. 从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4 20. 为心梗患者注射大剂量的t-PA（一种能高效降解血栓的单链糖蛋白，主要由血管内皮细胞合成、分泌并释放进血液）会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血等副作用，据此分析错误的是（ ） A. 若利用大肠杆菌来生产t-PA，需要对其合成的t-PA进行后期改造 B. 改造t-PA的技术属于蛋白质工程 C. 欲将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，应直接对蛋白质（t-PA）进行改造 D. 可利用抗原-抗体杂交技术来检测转基因的大肠杆菌是否分泌了t-PA 21. 某科研小组利用质粒（图甲）和目的基因（图乙）构建重组DNA。下列分析错误的是 A. 用限制酶HindⅢ和PstI切割质粒，可得到2条DNA片段 B. 不能用AluI酶切割质粒和外源DNA的原因是AluI酶会破坏目的基因 C. 构建重组DNA时，需选择SmaI酶和PstⅠ酶同时切割质粒和外源DNA D. 导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长 22. 如图表示基因工程中两种工具酶的作用。下列叙述正确的是（ ） A. a表示限制酶，不同限制酶识别序列不同，产生的末端也不同 B. b表示DNA连接酶，其与DNA聚合酶催化的底物完全相同 C. a的识别序列越长，该序列在DNA中出现的概率就越小 D. 欲将图示中的切口“缝合”起来，必须使用E.coliDNA连接酶 23. 某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（　　） A. 限制酶失活，更换新的限制酶 B. 酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等 C. 质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA D. 酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 24. 图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ） A. 基因A突变为a是一种碱基增添的突变 B. 用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型相同 C. 用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致 D. 产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定 25. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“利用PCR扩增DNA片段及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置，DNA存在于上清液中 B. 将丝状物溶于体积分数95%的酒精，再加入二苯胺试剂在沸水浴中进行DNA鉴定 C. PCR反应体系需要加入脱氧核苷酸、引物、耐高温的DNA聚合酶、模板DNA等物质 D. PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强导致 第II卷非选择题 二、非选择题（共3题，共50分） 26. 我国科研人员培育出世界首只胚胎干细胞（简称ES细胞）高贡献的活体嵌合猴，部分过程如图所示。由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。 （注：GFP指绿色荧光蛋白，可监测供体干细胞的存活情况及其在嵌合体的分化、分布情况） （1）在无菌、无毒等适宜环境中进行供体猴胚胎干细胞培养时，需要定期更换培养液，其目的是_____。 （2）为获得活体嵌合猴，在胚胎移植前需要筛选含有________标记的囊胚，同时也需要对代孕雌猴进行______处理。 （3）为了繁殖更多的活体嵌合猴，可采用_____技术，在本实验中进行该技术时，应选用_____阶段的胚胎分割，要注意将______均等分割。 （4）代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质来源于________，图示过程涉及的工程技术有_______。（答出两点即可） 27. I．干扰素是动物体内的一种蛋白质，可以用于治疗病毒的感染和癌症，但在体外保存相当困难。如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在70℃下保存半年，给广大患者带来福音。回答下列问题： （1）天然蛋白质合成的过程是按照克里克提出的___________进行的，而蛋白质工程却与之相反。依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产可以保存的干扰素，其基本途径是：预期蛋白质的功能→设计___________→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 （2）上述过程设计的脱氧核苷酸序列____________（填“是”或“不是”）唯一的。该方法获得的干扰素基因与细胞内干扰素基因相比，结构上不同之处有____________________。 （3）设计改造干扰素，最终还必须通过____________来完成，原因是_____________。 II．我国研究人员通过利用一只Bmall基因（影响生物节律）敲除彻底，且生物节律紊乱特征最为明显的猕猴的体细胞细胞核，成功获得5只克隆疾病猴。请回答下列问题： （4）为得到更多的卵母细胞用于核移植，可对卵细胞供体猴使用_________________处理，使其超数排卵，收集并选取处于_____________时期的卵母细胞。 （5）在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，必须去掉______________，原因是____________________。 （6）体细胞克隆猴常作为人类疾病研究的实验动物模型，与用多只普通猴做实验相比，使用遗传背景相同的克隆猴做实验的优点是_____________________。 28. I、番茄作为一种常见的水果蔬菜，在日常生活中的需求量日益增大，但是在较低温度下运输或储存的过程中容易出现冻伤的现象，从而影响番茄的口感和品质。科学家利用基因工程技术培育出抗冻的转基因番茄。下图为外源DNA和质粒上标出的酶切位点及相关基因，其中AFPs基因为抗冻基因。回答下列问题： （1）AFPs基因的基本组成单位是______。 （2）科学家应用图中______和______两种酶切割目的基因和质粒，这样做可以避免酶切后的目的基因和质粒______或______。 II、为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （3）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的______处，DNA连接酶作用于______处。（填“a”或“b”） （4）基因工程操作的核心步骤是______。将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有花粉管通道法和______法。 （5）质粒中往往带有一个抗生素抗性基因，该抗性基因的主要作用是______。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 天津市第三中学2025~2026学年度第二学期 高二年级期中质量检测生物 第I卷选择题 一、单选题（共25题，每题2分，共50分） 1. 《齐民要术》记载了一种称为“动酒酢（“酢”同“醋”）法”的酿醋工艺：“大率酒一斗，用水三斗，合瓮盛，置日中曝之。七日后当臭，衣（指菌膜）生，勿得怪也，但停置，勿移动，挠搅之。数十日，醋成”。下列有关叙述错误的是（　　） A. 该方法的原理是醋酸菌在缺少糖源时可将乙醇最终转化为乙酸 B. 加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死酵母菌 C. “衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的 D. 挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧 【答案】B 【解析】 【分析】参与果酒制作的微生物是酵母菌，其代谢类型是异养兼性厌氧性，参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其代谢类型是异养需氧型，参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其代谢类型是异养需氧型，参与泡菜制作的微生物是乳酸菌，其代谢类型是异养厌氧型。 【详解】A、当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为乙酸，A正确； B、加水的目的是对酒进行稀释，避免酒精浓度过高杀死醋酸菌，B错误； C、醋酸菌为好氧菌，“衣”位于变酸的酒表面，是由醋酸菌大量繁殖形成的，C正确； D、醋酸菌为好氧菌，挠搅有利于酒精与醋酸菌充分接触，还可以增加溶液中的溶解氧，有利于发酵过程，D正确。 故选B。 2. 为了获得可进行人工种植的高品质青头菌菌株，某野生菌科研基地设计了一个实验流程，其主要内容如下图所示。 下列叙述正确的是（ ） A. ①和②均由细胞膜、液泡膜和细胞质构成，酶a代表的是纤维素酶和果胶酶 B. 操作b可运用于微生物的数量测定，其所需工具须经湿热灭菌 C. ③过程在液体培养基中进行，且需将培养基调至中性或弱碱性 D. ③过程可添加适量抗生素抑制其他微生物的生长 【答案】B 【解析】 【详解】A、青头菌株是真菌细胞壁是几丁质，其胞壁不是纤维素和果胶，纤维素酶和果胶酶无法去除其细胞壁，A错误； B、操作b是微生物筛选和培养获得单菌落，可运用稀释涂布平板法测定微生物的数量，其所需工具须经湿热灭菌，B正确； C、青头菌株是真菌，培养基调至酸性，不是中性或弱碱性，C错误； D、③培养过程可添加适量抗生素抑制细菌的生长，D错误。 故选B。 3. 为获得纯化的酵母菌菌落，进行如图所示的平板划线操作，划线的顺序为①→②→③→④→⑤。下列有关叙述错误的是（ ） A. 马铃薯琼脂培养基可采用湿热灭菌的方法 B. 进行划线操作时，培养皿盖不能完全打开，且需要在酒精灯火焰旁进行 C. 完成划线操作后，将平板正立放入28℃左右的恒温培养箱中培养 D. 在区域①～⑤中，最有可能在区域⑤中得到酵母菌的纯培养物 【答案】C 【解析】 【分析】平板划线法纯化大肠杆菌时不同阶段灼烧接种环的目的不同： （1）第一次操作：杀死接种环上原有的微生物； （2）每次划线之前：杀死上次划线后接种环上残留的菌种，使下次划线的菌种直接来源于上次划线的末端； （3）划线结束后：杀死接种环上残存的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者。 【详解】A、 湿热灭菌的方法通常用于实验室大部分培养基的灭菌，A正确； B、进行划线操作时需要在酒精灯火焰旁进行，防止被杂菌污染，B正确； C、划线接种结束后，将平板倒置后放入培养箱中培养，有利于表面的水分更好的挥发和防止皿盖上的水珠落入培养基造成污染，C错误； D、平板划线分离法是把混杂在一起的微生物或同一种微生物群体中的不同细胞，用接种环在培养基表面通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生成繁殖成单菌落。因此在区域①～⑤中，最有可能在区域⑤中得到酵母菌的纯培养物，D正确。 故选C。 4. 根据食品安全国家标准，每毫升合格的牛奶中细菌总数不能超过50000个，研究小组为检测某品牌牛奶是否合格，进行相关实验如图。下列相关叙述错误的是（ ） A. 步骤①中使用的无菌水可通过高压蒸汽灭菌法制备 B. 步骤②配制培养基时需加入琼脂并将pH调至中性或弱碱性 C. 图中所示计数方法统计结果比显微计数法计数结果小 D. 若步骤③中平均菌落数为45，说明该品牌牛奶合格 【答案】D 【解析】 【详解】A、本实验的目的是检测某品牌牛奶是否合格，因而步骤①中使用的无菌水可通过高压蒸汽灭菌法制备，A正确； B、培养细菌时，通常使用固体培养基，配制固体培养基需加入琼脂，并且细菌适宜在中性或弱碱性环境中生长，所以要将pH调至中性或弱碱性，B正确； C、图中所示计数方法统计结果比显微计数法计数结果小，因为图示方法统计的是活菌数，且统计的结果往往偏小，而显微计数法统计的结果中包括活菌和死菌数，C正确； D、图示操作中稀释了104倍，若步骤③中平均菌落数为45，则每毫升牛奶中细菌数目为45/0.1×104=4.5×106/毫升，根据食品安全国家标准，每毫升合格的牛奶中细菌总数不能超过50000个，可见该品牌牛奶不合格，D错误。 故选D。 5. 深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（ ） 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注： “+”表示有；“一”表示无 A. 可用平板划线法对该菌计数 B. 制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C. 由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D. 由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 【答案】D 【解析】 【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基；鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。 【详解】A、平板划线法是用来分离和纯化微生物，获得单个菌落的技术，其主要目的是分离而不是计数。用于活菌计数的方法通常是稀释涂布平板法，A错误； B、制备固体培养基（琼脂平板）的正确流程是：先将培养基成分溶解、调整pH值后，分装到三角瓶中，然后进行高压蒸汽灭菌。待培养基冷却至50℃左右时，再在无菌条件下（如超净工作台）倒入无菌的培养皿中（即“倒平板”），B错误； C、组②为常压 + 纤维素，结果无菌落，而组④为高压 + 纤维素，结果是有菌落。 这个对比恰好说明，在以纤维素为碳源的条件下，该菌不能在常压下生长，而能在高压下生长，C错误； D、③④组形成了一个对照实验，变量是碳源。实验结果表明，在高压条件下，该细菌可以利用纤维素生长（组④），但不能利用淀粉生长（组③），D正确。 故选D。 6. 三七具有防治癌症、抗衰老、降血压等功能，其主要活性成分皂苷尚不能人工合成，且三七容易受多种病毒侵染，导致其生长受阻、产量下降。科研人员利用三七幼茎进行脱毒苗培育和皂苷提取的过程如图所示。下列说法正确的是（ ） A. 次生代谢产物皂苷是三七生长和生存所必需的 B. 过程②为再分化过程，该过程需要一定的光照 C. 过程③获得的三七幼苗具有抗病毒的遗传特性 D. 过程④主要通过增加细胞数量来提高皂苷产量 【答案】D 【解析】 【分析】离体的植物组织或细胞，在培养一段时间后，会通过细胞分裂形成愈伤组织。愈伤组织的细胞排列疏松而无规则，是一种高度液泡化的呈无定形状态的薄壁细胞。由高度分化的植物组织或细胞产生愈伤组织的过程，称为植物细胞的脱分化。脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。再分化形成的试管苗，移栽到地里，可以发育成完整的植株体。 【详解】A、次生代谢产物不是植物生长所必需的，A错误； B、过程②是愈伤组织增殖的过程，不需要光照，B错误； C、由于采用的外植体是茎尖，含有病毒少，所以过程③获得的三七幼苗含有病毒少，属于脱毒苗，不属于抗毒苗，C错误； D、过程④是将愈伤组织分割扩大培养，主要通过增加细胞数量来提高皂苷产量，D正确。 故选D。 7. 利用植物组织培养技术培育新植株的两种途径如图，下列说法正确的是（　　） A. 外植体a取自植株甲的不同部位时，形成的植株A遗传性状均相同 B. 过程①可用PEG融合法直接将外植体b和c融合 C. 过程②和脱分化阶段均需要给予适当时间和强度的光照 D. D2是不定形的薄壁组织团块，过程③所用的培养基是液体培养基 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、外植体a取自植株甲的不同部位时，遗传性状不一定相同，如花粉细胞培养形成的植株的基因只有体细胞培养形成的植株的一半，A错误； B、PEG融合法是一种常用的植物细胞融合方法，但它主要用于原生质体的融合，而不是直接用于外植体的融合，B错误； C、在植物组织培养过程中，脱分化阶段需要在黑暗条件下进行，以避免光照对细胞分化的影响。而过程②（即再分化阶段）则需要给予适当时间和强度的光照，以促进细胞分化和新器官的形成，C错误； D、据题图分析可知，D2​是D1经过脱分化后形成的未分化细胞团块，通常是不定形的薄壁组织团块，也称为愈伤组织，具有分裂和分化的能力。过程③是指将愈伤组织转移到液体培养基上进行悬浮培养，D正确。 故选D。 8. 花椰菜的杂种优势在生产上应用广泛。利用雄性不育系生产杂交种子，可以简化制种程序。利用原生质体非对称融合技术可以实现雄性不育基因的转移，下图为利用该技术成功获得含有雄性不育基因花椰菜植株的流程图，下列说法正确的是（ ） A. 通过该技术获得的杂种植株含有供体的全部遗传物质 B. 含叶绿体且形态较大的细胞可初步判定为异源原生质体 C. 获得的异源原生质体需放在无菌水中培养，以防杂菌污染 D. 杂种植株的雄性不育基因一定来自油菜叶肉细胞的细胞核 【答案】B 【解析】 【详解】A、UV对供体原生质体进行了处理，可能破坏了染色体的结构，所以杂种植株不一定含有供体的全部遗传物质，A错误； B、供体是光照条件下培养的油菜雄性不育系叶肉细胞（含有叶绿体），受体是黑暗培养的花椰菜下胚轴细胞（不含叶绿体），所以含叶绿体且形态较大的细胞可初步判定为异源原生质体，B正确； C、如果将获得的异源原生质体放在无菌水中，可能会造成原生质体吸水胀破，C错误； D、油菜叶肉细胞经过UV处理，染色体结构不完整，但最终获得含有雄性不育基因花椰菜植株，所以雄性不育基因可能来自油菜叶肉细胞的细胞质，D错误。 9. 植物体细胞杂交技术中一个关键的环节是原生质体间的融合，在原生质体悬浮液中加入PEG，细胞可在PEG分子的作用下发生粘连而融合，下表表示PEG的用量对原生质体融合的影响。下列说法错误的是（　　） 编号 PEG用量（μL） 融合率（％） 细胞碎片 1 20 6.5 ＋ 2 40 15.5 ＋ 3 60 19.4 ＋ 4 80 20.4 ＋＋ 5 100 21.6 ＋＋＋ 注:各组原生质体悬浮液用量均为100μL “＋”表示少量；“＋＋”表示较多；“＋＋＋”表示非常多 A. 需用纤维素酶和果胶酶制备植物细胞的原生质体 B. 细胞碎片是细胞在悬浮液中涨破而得到的细胞结构 C. 诱导原生质体融合的方法除了使用PEG外，还可以用离心法 D. 诱导原生质体融合的最适PEG用量为100μL 【答案】BD 【解析】 【分析】植物体细胞杂交技术：指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成新植物体的技术。操作步骤：先用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁得到原生质体，再利用聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+-高pH融合法或电融合法、离心法诱导原生质体融合，融合后的杂种细胞再经过诱导可形成愈伤组织，并可进一步发育成完整的杂种植株。 【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，故制备原生质体时需用含纤维素酶和果胶酶处理细胞，A正确； B、细胞碎片产生的原因并非只是细胞在悬浮液中涨破，还可能与细胞损伤有关，B错误； C、 诱导原生质体融合的方法除了使用PEG外，还可以用离心法等物理方法，C正确； D、PEG用量为60μL时，融合率较高且细胞碎片很少，故促进原生质体融合的较适 PEG用量为60μL，D错误。 故选BD。 10. 海洋杜氏藻是一种单细胞绿藻，具有耐盐特性；紫球藻是一种单细胞红藻，是制备重要医药原料花生四烯酸的良好材料．且对青霉素有抗性。通过植物细胞工程技术，培育出了能在高盐海水中养殖且高产花生四烯酸的杂种藻类。下列叙述错误的是（ ） A. 用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或高渗溶液中进行 B. 用高Ca2+-高pH融合法可人工诱导原生质体的融合 C. 在高盐培养基中添加青霉素可筛选出所需的杂种细胞 D. 杂种细胞需脱分化形成愈伤组织后才能进一步发育 【答案】D 【解析】 【分析】1、植物体细胞杂交技术：就是将不同种的植物体细胞原生质体在一定条件下融合成杂种细胞，并把杂种细胞培育成完整植物体的技术。2、过程分析：（1）诱导融合的方法：物理法包括离心、振动、电刺激等．化学法一般是用聚乙二醇（PEG）作为诱导剂。（2）细胞融合完成的标志是新的细胞壁的生成。（3）植物体细胞杂交的终点是培育成杂种植株，而不是形成杂种细胞就结束。 【详解】A、植物细胞去除细胞壁后得到原生质体，原生质体没有细胞壁的保护和支持。如果在低渗溶液中，原生质体会吸水涨破，所以用酶解法获取原生质体的过程需在等渗或高渗溶液中进行，A正确； B、人工诱导原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇、高Ca2+ - 高 pH 等），B正确； C、海洋杜氏藻耐盐，紫球藻对青霉素有抗性，杂种细胞既耐盐又对青霉素有抗性。在高盐培养基中添加青霉素，只有杂种细胞既能适应高盐环境又能抗青霉素，从而可筛选出所需的杂种细胞，C正确； D、藻类是单细胞生物，杂种细胞直接进行有丝分裂等进一步发育，不需要脱分化形成愈伤组织，D错误。 故选D。 11. 自体皮肤细胞培养移植是治疗皮肤严重烫伤、烧伤的有效方法。取受损者的皮肤进行处理后置于培养瓶中培养，直至铺满整个培养瓶的底部，单层细胞相互连接形成很薄的“皮肤”。将这些“人造皮肤”移植到患者的伤处进行治疗。下列关于皮肤细胞培养的叙述，正确的是（　　） A. 将皮肤细胞置于含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、琼脂等物质的培养基中培养 B. 在合成培养基中加入抗生素和血清为皮肤细胞提供无菌、无毒的环境 C. 松盖培养瓶应置于含95％氧气和5％CO₂的混合气体的CO₂培养箱中培养 D. “人造皮肤”的获得说明皮肤细胞具有贴壁生长和接触抑制的特点 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌；②添加一定量的抗生素，定期更换培养液，以清除代谢废物；（2）营养物质：葡萄糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质；（3）温度和pH；（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）5%的CO2（维持培养液的pH）。 【详解】A、动物细胞培养的培养基属于液体培养基，不需要加入琼脂，A错误； B、合成培养基灭菌及培养液中加抗生素是为动物细胞培养提供无菌环境，无毒环境是通过及时更换培养基来实现的，B错误； C、培养皮肤细胞的培养皿或松盖培养瓶应置于95%的空气和5%的CO2的CO2培养箱中，C错误； D、细胞铺满培养瓶的底部，说明皮肤细胞需要贴壁生长，贴壁生长的皮肤细胞不具备无限增殖的能力，具有接触抑制，D正确。 故选D。 12. 多种方法获得的早期胚胎，均需移植给受体才能获得后代。下列说法错误的是（ ） A. ①②③均通过有性生殖的方式产生 B. 胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别 C. 受体必须是同种的且生理状况相同的雌性动物 D. ③可通过②技术实现扩大化生产，①②可通过③技术实现性状改良 【答案】A 【解析】 【分析】胚胎移植是指将通过体外受精及其 他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发育为新个体的技术。 【详解】A、①③一般通过有性生殖的方式产生，②通过无性繁殖的方式生产，A错误； B、滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，胚胎移植前可取滋养层的细胞鉴定性别，B正确； C、为保证移植的胚胎正常发育，受体必须是同种的且生理状况相同的雌性动物，C正确； D、过程②克隆技术可得到大量同种个体，为过程③提供了量产方式；过程③是利用转基因技术导入外源优良基因，为过程①、②提供了改良性状的方式，D正确。 故选A。 13. 抗体—药物偶联物（ADC）在癌症治疗中展现出独特优势。已知ADC通过将药物与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。下列说法错误的是（ ） A. 单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合 B. 制备单克隆抗体时，为获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，需进行至少两次筛选 C. ADC以胞吞的方式进入肿瘤细胞，该过程需要消耗能量 D. 释放到肿瘤细胞内的小分子药物发挥作用，最终导致肿瘤细胞坏死 【答案】D 【解析】 【分析】题图分析：抗体药物偶联物(ADC) 通过将具有生物活性的小分子药物与单克隆抗体结合，被肿瘤细胞特异性识别，通过胞吞的方式进入肿瘤细胞，导致溶酶体裂解，释放药物，实现了对肿瘤细胞的选择性杀伤。 【详解】A、单克隆抗体制备过程中通常将免疫后得到的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，产生杂交B-瘤杂交细胞，A正确； B、制备单克隆抗体时，为获得能产生特定抗体的杂交瘤细胞，需进行至少两次筛选，一是通过HAT培养基获得杂交瘤细胞，二是使用抗体检测，获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，B正确； C、ADC以胞吞的方式进入肿瘤细胞，该过程需要消耗能量ATP，C正确； D、释放到肿瘤细胞内的小分子药物发挥作用，最终导致肿瘤细胞死亡，属于细胞凋亡，由溶酶体裂解，释放药物，导致肿瘤细胞死亡，D错误。 故选D。 14. HER-2蛋白主要在胎儿期表达，成年以后只在极少数组织内低水平表达。由曲妥珠单抗和药物DMI连接而成的抗体—药物偶联物T-DMI，对HER-2有很强的靶向性，可用于治疗HER-2过度表达的转移性乳腺癌。下列叙述正确的是（ ） A. 给小鼠反复注射HER-2蛋白，以便在血清中获取曲妥珠单抗 B. 用选择培养基可筛选出产生HER-2抗体的杂交瘤细胞 C. DMI与HER-2特异性结合是T-DMI对癌细胞进行选择性杀伤的关键 D. 用灭活的病毒诱导细胞融合时细胞膜上的蛋白质分子和脂质分子重新排布 【答案】D 【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：先给小鼠注射特定抗原使之发生免疫反应，之后从小鼠脾脏中获取已经免疫的B淋巴细胞；诱导B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；进行抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞；进行克隆化培养，即用培养基培养和注入小鼠腹腔中培养；最后从培养液或小鼠腹水中获取单克隆抗体。 【详解】A、制备单克隆抗体时，需向小鼠多次注射抗原（HER-2），以激活B淋巴细胞，但免疫后的B淋巴细胞应从小鼠的脾脏中获取，而非血清（血清中含多克隆抗体，而非B细胞），A错误； B、选择培养基（如HAT培养基）的作用是筛选出杂交瘤细胞（融合的B细胞与骨髓瘤细胞），但无法直接筛选出分泌特定抗体的细胞。分泌抗体的杂交瘤细胞需通过后续的抗体检测进一步确认，B错误； C、根据题意信息可知，T-DMI中，曲妥珠单抗（抗体）负责特异性结合HER-2，而DMI是连接的细胞毒药物。特异性靶向的关键在于抗体部分，而非DMI，C错误； D、灭活病毒诱导细胞融合的原理是病毒表面的糖蛋白促使细胞膜融合。此过程依赖细胞膜的流动性，导致膜蛋白和脂质分子重新排布，D正确。 故选D。 15. HER2/neu是一种原癌基因，在乳腺癌细胞中过量表达H蛋白。H蛋白是跨膜蛋白，结构如图。抗H蛋白单克隆抗体能有效抑制乳腺癌细胞的生长。下列说法正确的是（ ） A. H蛋白可作为抗体的作用靶点的原因之一是HER2/neu在正常细胞中低表达 B. 制备免疫小鼠用的H蛋白时，应将其胞内区基因片段转入工程菌表达并提纯 C. 对小鼠多次注射H蛋白可以获得大量的抗H蛋白单克隆抗体 D. 体外大量培养所需杂交瘤细胞后，需破裂细胞以提取单克隆抗体 【答案】A 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程是：对小动物注射抗原，从该动物的脾脏中获取效应B细胞，将效应B细胞与骨髓瘤细胞融合，筛选出能产生单一抗体的杂交瘤细胞，克隆化培养杂交瘤细胞（体内培养和体外培养），最后获取单克隆抗体。 【详解】A、HER2/neu在乳腺癌细胞中过量表达H蛋白，而在正常细胞中表达量较低，所以可以作为抗体的作用靶点，A正确； B、由于抗体主要存在于细胞外液中，因此根据H蛋白的结构图可知，若用H蛋白制备抗原需要利用胞外区基因，由制备获得的抗体作用于该抗原的胞外区，B错误； C、将杂交瘤细胞经过体外培养或小鼠腹腔内培养，获得大量的单克隆抗体，C错误； D、体外大量培养所需杂交瘤细胞后，从培养液中提取单克隆抗体，无需破裂细胞，D错误。 故选A。 16. 下表为常用的限制性内切核酸酶（限制酶）及其识别序列和切割位点，由此推断，下列说法错误的是（ ） 限制酶名称 识别序列和切割位点 限制酶名称 识别序列和切割位点 BamHⅠ -G↓GATCC- KpnⅠ -GGTAC↓C- EcoRⅠ -C↓AATTC- Sau3AⅠ -↓GATC- HindⅡ -GTY↓RAC- SmaⅠ -CCC↓GGG- 注：Y为C或T，R为A或G。 A. HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶切割后形成平末端 B. Sau3AⅠ限制酶的切割位点在识别序列的外部 C. 一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列 D. BamHⅠ和Sau3AⅠ两种限制酶切割后形成相同的黏性末端 【答案】C 【解析】 【分析】限制酶主要从原核生物中分离纯化出来。特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，形成黏性末端和平末端两种。 【详解】A、HindⅡ、SmaⅠ两种限制酶沿着中轴线切口切开，切割后形成平末端，A正确； B、Sau3AⅠ限制酶识别GATC序列，切割位点在识别序列的外部，B正确； C、一种限制酶可以识别两种核苷酸序列，如Sau3AⅠ能识别GATC，也能识别GGATCC，C错误； D、BamHⅠ限制酶识别GGATCC序列，Sau3AⅠ限制酶识别GATC序列，切割后形成相同的黏性末端GATC，D正确。 故选C。 17. 不同生物之间能进行转基因并能获得基因产物，其理论依据不包含（ ） A. 这些生物的DNA分子的空间结构和化学成分一致 B. 这些生物的DNA分子都遵循碱基互补配对原则 C. 这些生物在基因表达时共用一套遗传密码 D. 这些生物的基因结构都是相同的 【答案】D 【解析】 【分析】1、基因工程又叫DNA重组技术，是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，赋予生物以新的遗传特性，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 2、研究水平：DNA分子水平。 3、原理：基因重组。 【详解】A、不同生物的DNA分子的空间结构和化学成分一致，因此不同生物的基因能连接在一起，A正确； B不同生物的DNA分子都遵循碱基互补配对原则，因此具有相同黏性末端的基因能连接起来，B正确； C、自然界所有生物共用一套遗传密码，因此一种生物的基因能在另一种生物体内表达，C正确； D、真核生物和原核生物的基因结构不同，D错误。 故选D。 18. Solexa测序是一种将PCR与荧光检测相结合的高通量测序技术。为了确保该PCR过程中，DNA聚合酶催化一个脱氧核苷酸单位完成聚合反应后，DNA链不继续延伸，应保护底物中脱氧核糖结构上的（ ） A. 1'-碱基 B. 2'-氢 C. 3'-羟基 D. 5'-磷酸基团 【答案】C 【解析】 【分析】在DNA复制过程中，在DNA聚合酶的催化作用下，将一个个的脱氧核苷酸连接形成磷酸二酯键，使子链延伸，但是DNA聚合酶催化延伸子链方向只能从5′→3′。 【详解】已知DNA聚合酶催化延伸子链方向只能从5′→3′，原因是脱氧核苷酸的3'碳有羟基，可以结合下一个脱氧核苷酸的5′碳的磷酸基团，故为了DNA聚合酶催化一个脱氧核苷酸单位完成聚合反应后，DNA链不继续延伸，应保护底物中脱氧核糖结构上的3'-羟基，使其不能结合下一个脱氧核苷酸的5′碳的磷酸基团，C正确。 故选C。 19. 下图表示利用PCR技术扩增目的基因的部分过程，其原理与细胞内DNA复制类似。下列叙述错误的是（ ） A. 耐高温的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3′端 B. 在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段 C. 引物之间或引物自身发生碱基互补配对，则不能有效扩增目的基因 D. 从理论上推测，第三轮循环产物中含有引物A的DNA片段占3/4 【答案】D 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术，所利用的原理为DNA分子的复制，因此PCR技术一般用于基因扩增。①原理：DNA复制；②条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）；③方式：以指数的方式扩增，即约2n；④过程：变性→复性→延伸。 【详解】A、耐高温的DNA聚合酶总将游离的脱氧核苷酸连接到3′端，所以子链的合成方向是从子链的5′端向3′端延伸，A正确； B、如下图所示： X基因第一次复制得到两个两种：①和②；X基因第二次复制得到四个四种：①复制得①和③、②复制得②和④；X基因第三次复制得到八个五种：①复制得①和③、③复制得③和⑤、②复制得②和④、④复制得④和⑤。故在第三轮循环产物中开始出现两条脱氧核苷酸链等长的DNA片段，B正确； C、引物A和引物B必须与目的基因配对，如果引物之间或引物自身发生碱基互补配对则不能扩增目的基因，C正确； D、由图可知，由原来的每条母链为模板经第一轮合成的两个DNA分子中，只含有引物A或引物B，而以新合成的子链为模板合成新DNA分子时，两种引物都含有，故第三轮循环共产生8个DNA分子，其中含有引物A的分子是7个，即占7/8，D错误。 故选D。 20. 为心梗患者注射大剂量的t-PA（一种能高效降解血栓的单链糖蛋白，主要由血管内皮细胞合成、分泌并释放进血液）会诱发颅内出血。研究证实，将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，能显著降低出血等副作用，据此分析错误的是（ ） A. 若利用大肠杆菌来生产t-PA，需要对其合成的t-PA进行后期改造 B. 改造t-PA的技术属于蛋白质工程 C. 欲将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，应直接对蛋白质（t-PA）进行改造 D. 可利用抗原-抗体杂交技术来检测转基因的大肠杆菌是否分泌了t-PA 【答案】C 【解析】 【分析】蛋白质工程指以蛋白质的结构规律及其与生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要．蛋白质工程是在基因工程的基础上，延伸出来的第二代基因工程。 【详解】A、由于大肠杆菌只有核糖体一种细胞器，不含内质网和高尔基体，无法对t-PA进行加工，故若利用大肠杆菌来生产t-PA，需要对其合成的t-PA进行后期改造，A正确； B、分析题意，本技术是将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，属于蛋白质工程，B正确； C、欲将t-PA第84位的半胱氨酸换成丝氨酸，应对相应的基因进行改造，C错误； D、t-PA是一种能高效降解血栓的单链糖蛋白，由于抗原与抗体的集合具有特异性，故可利用抗原-抗体杂交技术来检测转基因的大肠杆菌是否分泌了t-PA，D正确。 故选C。 21. 某科研小组利用质粒（图甲）和目的基因（图乙）构建重组DNA。下列分析错误的是 A. 用限制酶HindⅢ和PstI切割质粒，可得到2条DNA片段 B. 不能用AluI酶切割质粒和外源DNA的原因是AluI酶会破坏目的基因 C. 构建重组DNA时，需选择SmaI酶和PstⅠ酶同时切割质粒和外源DNA D. 导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长 【答案】C 【解析】 【分析】根据目的基因两端限制酶的识别、切割位点和质粒中限制酶的识别位点可选择合适的限制酶，要求既不破坏目的基因，又不会破坏质粒中的所有抗性基因。据图可知应选择HindI和PstI同时切割质粒和外源DNA。 【详解】A、限制酶HindI和PstI在质粒上各有一个识别切割位点，用HindI和PstI切割质粒，可得到2条DNA片段，A正确； B、AluI的识别、切割位点位于目的基因中，用AluI酶外源DNA会破坏目的基因，B正确； C、选择SmaI和Pst1同时切割质粒和外源DNA，质粒中的两个标记基因均会被破坏，并且会造成目的基因反向连接，C错误； D、选择HindI和PstI同时切割质粒和外源DNA，会破坏质粒中的氯霉素抗性基因，保留四环素抗性基因，所以导入了重组DNA的细菌能在含四环素的培养基上生长而不能在含氯霉素的培养基上生长，D正确。 故选C。 【点睛】选择限制酶的方法 (1)根据目的基因两端的限制酶切点确定限制酶的种类 ①应选择切点位于目的基因两端的限制酶，如图甲可选择PstⅠ。 ②不能选择切点位于目的基因内部的限制酶，如图甲不能选择SmaⅠ。 ③为避免目的基因和质粒的自身环化和随意连接，也可使用不同的限制酶切割目的基因和质粒，如图甲也可选择用PstⅠ和EcoRⅠ两种限制酶(但要确保质粒上也有这两种酶的切点)。 (2)根据质粒的特点确定限制酶的种类 ①所选限制酶要与切割目的基因的限制酶相一致，以确保具有相同的黏性末端。 ②质粒作为载体必须具备标记基因等，所以所选择的限制酶尽量不要破坏这些结构，如图乙中限制酶SmaⅠ会破坏标记基因；如果所选酶的切点不止一个，则切割重组后可能会丢失某些片段，若丢失的片段含复制起点区，则切割重组后的片段进入受体细胞后将不能自主复制。 22. 如图表示基因工程中两种工具酶的作用。下列叙述正确的是（ ） A. a表示限制酶，不同限制酶识别序列不同，产生的末端也不同 B. b表示DNA连接酶，其与DNA聚合酶催化的底物完全相同 C. a的识别序列越长，该序列在DNA中出现的概率就越小 D. 欲将图示中的切口“缝合”起来，必须使用E.coliDNA连接酶 【答案】C 【解析】 【分析】关于限制酶，考生可以从以下几方面把握：（1）来源：主要从原核生物中分离纯化出来。（2）特异性：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。（3）结果：形成黏性末端或平末端。注意：用限制酶切割DNA时，每切开一个切口需要水解两个磷酸二酯键。 【详解】A、据图可知，a表示限制酶，b表示DNA连接酶。通常情况下，不同限制酶识别双链DNA分子特定的核苷酸序列，切割产生不同的末端，有时不同限制酶虽然识别的序列不同，但是可以产生相同的末端，例如， BamH7和Sau3A7的识别序列及切割位点分别是、，产生的黏性末端都是5′-GATC-3′，A错误； B、DNA连接酶和DNA聚合酶都能连接磷酸二酯键，但是DNA连接酶是将两个片段之间的磷酸二酯键连接起来，而DNA聚合酶需要依赖DNA作模板将单个的脱氧核苷酸与片段的3′—OH末端连接形成磷酸二酯键，二者催化的底物不同，B错误； C、限制酶的识别序列越长，该序列在DNA中出现的概率就越小，C正确； D、E.coliDNA连接酶和T4DNA连接酶都能够连接黏性末端，D错误。 故选C。 23. 某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是（　　） A. 限制酶失活，更换新的限制酶 B. 酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等 C. 质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA D. 酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 【答案】B 【解析】 【分析】酶是活细胞产生的具有催化作用的有机物，大多数是蛋白质，少部分是RNA，酶具有特异性、高效性、易受环境因素影响等特点。限制酶特异性识别并切割DNA上的特定位点。 【详解】A、限制酶失活会使DNA完全不被酶切，此时应更换新的限制酶，A正确； B、酶切条件不合适通常会使切割效果下降，调整反应条件如温度和PH等，调整酶的用量没有作用，B错误； C、质粒DNA突变会导致限制酶识别位点缺失，进而造成限制酶无法进行切割，此时应更换为正常质粒，C正确； D、质粒DNA上酶切位点被甲基化修饰，会导致对DNA甲基化敏感的限制酶无法进行酶切，此时应换用对DNA甲基化不敏感的限制酶，D正确。 故选B。 24. 图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ） A. 基因A突变为a是一种碱基增添的突变 B. 用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型相同 C. 用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致 D. 产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定 【答案】D 【解析】 【详解】A 、对比 A 基因和 a 基因的序列，A 基因中 “AAGCTT” 变为 a 基因中 “AAGCTG” ，是碱基替换（T→G），并非碱基增添，A错误； B、HindⅢ 切割产生黏性末端，AluⅠ 切割后产生的是平末端，二者末端类型不相同，B错误； C、a基因中有2个Hind Ⅲ切割位点，切割后产生3个片段，有3个Alu Ⅰ切割位点，切割后产生4个片段，用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小不一致，C错误； D、因为正常基因A和致病基因a的 HindⅢ 切割位点数量不同，所以产前诊断时，该致病基因可选用 HindⅢ 限制酶开展酶切鉴定，D正确。 故选D。 25. 下列有关“DNA的粗提取与鉴定”“利用PCR扩增DNA片段及电泳鉴定”实验的叙述，错误的是（ ） A. 洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置，DNA存在于上清液中 B. 将丝状物溶于体积分数95%的酒精，再加入二苯胺试剂在沸水浴中进行DNA鉴定 C. PCR反应体系需要加入脱氧核苷酸、引物、耐高温的DNA聚合酶、模板DNA等物质 D. PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强导致 【答案】B 【解析】 【分析】DNA不溶于酒精，而某些蛋白质溶于酒精；鉴定DNA时，需要先将DNA溶解在NaCl溶液中，再与二苯胺试剂溶液混合，并在沸水浴加热条件下呈现蓝色。 【详解】A、洋葱切碎加研磨液研磨过滤后，滤液放置4℃冰箱中静置，因为在该实验中，破碎细胞释放出DNA等物质，经过离心或静置分层后DNA会溶解在上清液中，A正确； B、应该将丝状物溶于2mol/L的NaCl溶液，再加入二苯胺试剂在沸水浴中进行DNA鉴定，而不是溶于体积分数95%的酒精，B错误； C、PCR反应中，需要在一定的添加Mg2+的缓冲液中才能进行，需提供模板DNA、分别与两条模板链结合的引物、4种脱氧核苷酸和耐高温的DNA聚合酶等，C正确； D、PCR扩增后，琼脂糖凝胶电泳鉴定结果不止一条条带，可能是引物特异性不强，导致引物与模板结合位点不唯一，扩增出多种不同的DNA片段，从而在电泳结果上出现多条条带，D正确。 故选B。 第II卷非选择题 二、非选择题（共3题，共50分） 26. 我国科研人员培育出世界首只胚胎干细胞（简称ES细胞）高贡献的活体嵌合猴，部分过程如图所示。由于供体猴胚胎干细胞在体外培养和妊娠期间高度嵌合于受体胚胎，使得后代活体嵌合猴的各种组织中，高达90%的细胞来源于供体胚胎干细胞。 （注：GFP指绿色荧光蛋白，可监测供体干细胞的存活情况及其在嵌合体的分化、分布情况） （1）在无菌、无毒等适宜环境中进行供体猴胚胎干细胞培养时，需要定期更换培养液，其目的是_____。 （2）为获得活体嵌合猴，在胚胎移植前需要筛选含有________标记的囊胚，同时也需要对代孕雌猴进行______处理。 （3）为了繁殖更多的活体嵌合猴，可采用_____技术，在本实验中进行该技术时，应选用_____阶段的胚胎分割，要注意将______均等分割。 （4）代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质来源于________，图示过程涉及的工程技术有_______。（答出两点即可） 【答案】（1）清除代谢产物，同时给细胞提供足够的营养 （2） ①. 绿色荧光 ②. 同期发情 （3） ①. 胚胎分割 ②. 囊胚 ③. 内细胞团 （4） ①. 供体或受体猴 ②. 动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植 【解析】 【分析】胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎，或者通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为新个体的技术。 【小问1详解】 定期更换培养液的目的是：清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，同时给细胞提供足够的营养。 【小问2详解】 由于实验通过GFP基因（绿色荧光蛋白）监测供体细胞，因此需筛选含绿色荧光记的囊胚；对代孕雌猴需进行同期发情处理，使代孕雌猴与供体猴生理状态相同，为胚胎移植提供适宜环境。 【小问3详解】 繁殖更多活体嵌合猴采用胚胎分割技术，选用囊胚阶段的胚胎进行分割，分割时注意将内细胞团均等分割，以保证分割后胚胎的正常发育。 【小问4详解】 由图分析可知，代孕雌猴分娩的嵌合猴体细胞中，核遗传物质主要来源于供体或受体猴； 图示涉及的工程技术有动物细胞培养、早期胚胎培养和胚胎移植。 其中，动物细胞培养用于ES细胞体外培养，胚胎移植将嵌合囊胚移入代孕雌猴。 27. I．干扰素是动物体内的一种蛋白质，可以用于治疗病毒的感染和癌症，但在体外保存相当困难。如果将其分子上的一个半胱氨酸变成丝氨酸，就可在70℃下保存半年，给广大患者带来福音。回答下列问题： （1）天然蛋白质合成的过程是按照克里克提出的___________进行的，而蛋白质工程却与之相反。依据蛋白质工程原理，设计实验流程，让动物生产可以保存的干扰素，其基本途径是：预期蛋白质的功能→设计___________→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 （2）上述过程设计的脱氧核苷酸序列____________（填“是”或“不是”）唯一的。该方法获得的干扰素基因与细胞内干扰素基因相比，结构上不同之处有____________________。 （3）设计改造干扰素，最终还必须通过____________来完成，原因是_____________。 II．我国研究人员通过利用一只Bmall基因（影响生物节律）敲除彻底，且生物节律紊乱特征最为明显的猕猴的体细胞细胞核，成功获得5只克隆疾病猴。请回答下列问题： （4）为得到更多的卵母细胞用于核移植，可对卵细胞供体猴使用_________________处理，使其超数排卵，收集并选取处于_____________时期的卵母细胞。 （5）在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，必须去掉______________，原因是____________________。 （6）体细胞克隆猴常作为人类疾病研究的实验动物模型，与用多只普通猴做实验相比，使用遗传背景相同的克隆猴做实验的优点是_____________________。 【答案】（1） ①. 中心法则 ②. 预期的蛋白质结构 （2） ①. 不是 ②. 该方法获得的干扰素基因不含内含子、启动子和终止子 （3） ①. 基因 ②. 基因控制蛋白质的合成，并且基因能遗传给下一代 （4） ①. 促性腺激素 ②. 减数第二次分裂中期 （5） ①. 受体卵母细胞的核 ②. 为使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自供体细胞 （6）避免个体间差异对实验的干扰，大大减少实验动物的使用数量 【解析】 【分析】1、蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其生物功能的关系作为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需求。（基因工程在原则上只能生产自然界已存在的蛋白质） 2、基本途径：从预期的蛋白质功能出发，设计预期的蛋白质结构，推测应有的氨基酸序列，找到相对应的脱氧核苷酸序列（基因）以上是蛋白质工程特有的途径；以下按照基因工程的一般步骤进行。（注意：目的基因只能用人工合成的方法） 3、动物体细胞核移植：将动物的一个细胞的细胞核移入一个去掉细胞核的卵母细胞中，使其重组并发育成一个新的胚胎，这个新的胚胎最终发育为克隆动物。克隆动物具备双亲的遗传特性，因为其细胞核基因来自提供细胞核的生物，而细胞质基因来自提供细胞质的生物，但其性状主要与提供细胞核的生物相似。 【小问1详解】 天然蛋白质合成的过程是按照克里克提出的中心法则进行的，蛋白质工程基本途径是预期蛋白质的功能→预期蛋白质的结构→推测应有的氨基酸序列→找到并改变相对应的脱氧核苷酸序列（基因）或合成新的基因→获得所需要的蛋白质。 【小问2详解】 因为密码子具有简并性，由氨基酸序列推测相应的脱氧核苷酸序列不是唯一的，通过该方法获得的干扰素基因序列是由氨基酸序列推测的，所以与细胞内的干扰素基因相比，缺少内含子、启动子和终止子等不转录或不翻译的片段。 【小问3详解】 干扰素的本质是蛋白质，是由基因控制编码的，基因控制蛋白质的合成，并且基因能遗传给下一代，所以改造干扰素最终需要改造基因。 【小问4详解】 为得到更多的卵母细胞，可以对供体猴使用促性腺激素处理，使其超数排卵，收集处于减数第二次分裂中期的卵母细胞。 【小问5详解】 本实验是细胞核移植激素，为了使核移植的胚胎或动物的遗传物质全部来自供体细胞，所以需要在体细胞的细胞核移植到受体卵母细胞之前，必须去掉受体卵母细胞的核。 【小问6详解】 使用遗传背景相同的克隆猴做实验的优点是避免个体间差异对实验的干扰，大大减少实验动物的使用数量。 【点睛】本题考查蛋白质工程和体细胞核移植技术，需要明确蛋白质工程的基本原理和操作步骤，理解真核生物基因的结构，掌握体细胞核移植的过程。 28. I、番茄作为一种常见的水果蔬菜，在日常生活中的需求量日益增大，但是在较低温度下运输或储存的过程中容易出现冻伤的现象，从而影响番茄的口感和品质。科学家利用基因工程技术培育出抗冻的转基因番茄。下图为外源DNA和质粒上标出的酶切位点及相关基因，其中AFPs基因为抗冻基因。回答下列问题： （1）AFPs基因的基本组成单位是______。 （2）科学家应用图中______和______两种酶切割目的基因和质粒，这样做可以避免酶切后的目的基因和质粒______或______。 II、为扩大可耕地面积，增加粮食产量，黄河三角洲等盐碱地的开发利用备受关注。我国科学家应用耐盐基因培育出了耐盐水稻新品系。 （3）获得耐盐基因后，构建重组DNA分子所用的限制性内切酶作用于图中的______处，DNA连接酶作用于______处。（填“a”或“b”） （4）基因工程操作的核心步骤是______。将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有花粉管通道法和______法。 （5）质粒中往往带有一个抗生素抗性基因，该抗性基因的主要作用是______。 【答案】（1）脱氧核糖核苷酸 （2） ①. BamHI ②. HindⅢ ③. 自连 ④. 反接 （3） ①. a ②. a （4） ①. 基因表达载体的构建 ②. 农杆菌转化 （5）鉴别和筛选含有目的基因的细胞 【解析】 【分析】基因工程的步骤：目的基因的筛选与获取、构建基因表达载体、将目的基因导入受体细胞、目的基因的检测与鉴定。 【小问1详解】 基因是具有遗传效应的DNA片段，因此AFPs基因的基本组成单位是脱氧核糖核苷酸。 【小问2详解】 科学家应用BamHI和HindⅢ两种酶切割目的基因和质粒，可以避免酶切后的目的基因和质粒自连或反接。 【小问3详解】 限制性内切酶和DNA连接酶都作用于磷酸二酯键，即图中的a处。 【小问4详解】 基因工程操作的核心步骤是构建基因表达载体。将重组DNA分子导入水稻受体细胞的常用方法有花粉管通道法和农杆菌转化法。 【小问5详解】 质粒中往往带有一个抗生素抗性基因，该抗性基因的主要作用是鉴别和筛选含有目的基因的细胞。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $