广东深圳高级中学2025-2026学年第二学期期中测试题 高二生物

深圳高级中学（集团）2025-2026学年第二学期期中测试题 高二生物参考答案 1.D【详解】植物组织培养时外植体用流水充分清洗后用体积分数为70%的酒精消毒30s,用无菌水清洗 2-3次，再用次氯酸钠溶液处理30分钟，立即用无菌水清洗2-3次，A正确：愈伤组织细胞分裂旺盛，易 受射线诱变发生基因突变，筛选后可获得优良性状突变体。B正确：植物组织培养中培养基生长素用量比 细胞分裂素用量，比值高时，诱导生根，比值低时，诱导生芽，C正确：②过程为脱分化，不需要光照处 理，D错误。 2.B【详解】定期更换培养液，可清除代谢废物，防止细胞代谢产物积累对细胞造成毒害，同时补充营 养，维持无菌、无毒环境，A正确：动物细胞培养需要一定的气体环境：95%空气和5%的C02,其中5%的 C02能维持培养液pH,B错误；使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分，以保证其能正常生 长，C正确；部分细胞（如某些肿瘤细胞）能够悬浮在培养液中生长增殖，D正确。 3.B【详解】对小鼠注射GP3蛋白的目的是获得能产生抗GP3蛋白抗体的B淋巴细胞，A错误；由于分离 出的B细胞有多种类型，而一种B细胞经分化为浆细胞后分泌一种抗体，故经选择培养基一次筛选后获得 的杂交瘤细胞能无限增殖但分泌抗体类型不一定相同，B正确：最后一步是将抗体检测为阳性的杂交瘤细 胞进行体外培养，以便获取大量的单克隆抗体，C错误；筛选出符合要求的杂交瘤细胞后，既可利用动物 细胞培养技术进行体外培养，也可以注射到小鼠腹腔内培养，D错误。 4.C【详解】进行核移植时需用培养至MⅡ期的卵母细胞，此时的卵母细胞的细胞质中有促进细胞核全能 性发挥的物质，A错误；去核方法有显微操作、梯度离心、紫外线照射和化学物质处理，C2+载体是激活 重构胚的方法，B错误；动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，因此胚胎细胞核移植难度更 低，C正确；仔猪的性别由粤东黑猪提供的遗传物质决定，因为细胞核中的遗传物质来自粤东黑猪，D错 误。 5.D【详解】A正确，精子入卵后，卵细胞膜会发生反应（卵细胞膜反应），阻止其他精子入卵，这是防止 多精入卵的重要机制。B正确，在胚胎发育早期（桑椹胚之前），细胞通过有丝分裂数量不断增加，但胚胎 总体积并不增加，因为胚胎依靠卵黄物质提供营养。C正确，囊胚阶段胚胎内部出现含有液体的腔，称为 囊胚腔，标志着囊胚的形成。D错误，自然条件下，哺乳动物的受精过程是在输卵管内完成的，早期胚胎 发育也在输卵管中开始，随后才进入子宫，并非全程在子宫内完成。 6.D【详解】A错误，超数排卵通常使用促性腺激素（如FSH、PMSG),而非促性腺激素释放激素 (GnRH)。GRH用于调节垂体分泌促性腺激素。B错误，F后代通过核移植获得，其细胞核遗传物质来自 B,但线粒体DNA一部分来自去核卵母细胞，因此与B不完全一致。C错误，从C获得的精子需要经过获能 处理后才具备受精能力，不能直接用于受精。D正确，卵母细胞需在体外培养至MⅡ中期（减数第二次分 1/4 裂中期)才成熟，具备与精子受精的能力。 7.B【详解】EcoR I是限制酶，限制酶能够识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定 部位的磷酸二酯键断开，具有特异性，A错误；用DNA连接酶将BamHI和MboI形成的黏性末端连接后形 成的新的序列仍然是Mb0I识别的序列，仍可以被Mb0I重新切开，B正确；选用两种不同的限制酶是同尾 酶切割质粒，同尾酶切割之后形成相同的黏性末端，切开之后的黏性末端仍可以自连，C错误：构建的基 因表达载体必须要有至少一个标记基因，若用限制酶Ⅱ切割质粒，则会使两个标记基因都会破坏，故应该 用限制酶I切割质粒；若用限制酶I切割目的基因，则只能切割目的基因的左侧，不能切割目的基因的右 侧，目的基因不能取出，故应该用限制酶Ⅱ切割目的基因，D错误。 8.D【详解】戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，过程①是以病毒RNA为模板合成DNA,获取目的基因的过 程，需要的酶是逆转录酶，原料是四种脱氧核苷酸，脱氧核苷酸不含有碱基U,A错误；若目的基因和质 粒用限制酶剪切之后产生平末端，则不需要考虑是否用同种限制酶切割：若限制酶剪切之后产生的是黏性 末端，只需要使黏性末端互补即可，可以是同种限制酶产生相同的黏性末端，也可以是同尾酶产生相同的 粘性末端，B错误；T1质粒是农杆菌中的质粒，常用于将基因表达载体运送到植物细胞。题目中的质粒是 来自大肠杆菌的质粒，不是Ti质粒，C错误；过程⑥大量制备pOP2蛋白前应对受体大肠杆菌进行目的基 因的检测与鉴定，筛选出能表达pOF2蛋白的大肠杆菌进行培养，大量制备pORF2蛋白，D正确。 9.C【详解】科学家将人凝血因子基因与乳腺蛋白基因的启动子连接在一起，从而使人凝血因子基因只在乳 腺细胞中特异表达，进而使羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子，A错误；该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因 子，但不含人的凝血因子基因，B错误；该受精卵发育成的羊必须是雌性，才能使转基因动物在进入泌乳期 后，可通过分泌乳汁来生产所需要的药物，C.正确：这项研究体现了基因工程在医药卫生方面的应用，D错 误。 10.B【详解】干扰素是抗病毒的糖蛋白（干扰病毒复制），而非抗细菌一不能用于治疗细菌感染性疾 病，A错误：蛋白质工程需通过改造基因实现蛋白质改造（不能直接改造蛋白质分子，因体外改造后无法 遗传)→对天然干扰素的改造是通过改造基因（替换半胱氨酸对应的密码子），比较半胱氨酸和丝氨酸 的密码子，若第二个碱基由G替换为C,就可引起氨基酸的替换，所以基因上发生定点突变(C→G),可实 现基因的改造，B正确：替换氨基酸导致干扰素结构改变，但关键功能区域未受影响，故仍能发挥作用，C 错误。大肠杆菌细胞是原核细胞，只有核糖体这一种细胞器，没有内质网和高尔基体，无法对干扰素进行 加工，因此新的干扰素基因在大肠杆菌体内正常表达不可得到预期的新的干扰素，D错误。 11.D【详解】猪的成熟红细胞无细胞核，DNA含量极少，无法有效提取：而香蕉为植物细胞，需破碎细胞 壁，方法不同。但猪血中白细胞含细胞核，若处理得当仍可提取，但高中实验中通常不选用猪血，A错 误；加入9%冷酒精后，DNA因溶解度降低而析出，应存在于沉淀中，而非滤液，B错误；用玻璃棒沿一个 2/4 方向轻缓搅拌，快速搅拌会破坏DNA分子的完整性，C错误；鉴定DNA时需将DNA溶于2 nol/L Nac1溶 液，加入二苯胺试剂后沸水浴加热显蓝色，设置对照组的目的是为了排除二苯胺试剂本身或其他实验条件 可能产生的颜色变化，从而确保实验结果的特异性，D正确； 12.D【详解】据题图分析可知，磷酸基团为DNA的5端，羟基为DNA的3端，由于DNA聚合酶只能从 5→3'延伸子链，所以在PC扩增中引物与DNA模板链的3端结合进行延伸，故选择图中引物②和引物 ③，A错误；DNA带负电，DNA在电场中会向着它所带电荷相反的电极移动的原理，B错误；电泳中DNA迁 移速率与分子大小呈负相关（小片段迁移快），C错误；由题干信息和图b可知，2号来自含蛛丝蛋白基因 的质粒，3、5、8号羊的电泳结果与2号相似，说明3、5、8号羊含有蛛丝蛋白基因，使用抗原-抗体结 合法可能在3、5、8号羊的乳汁中检测到蛛丝蛋白，D正确。 13.C【详解】A错误：方法一将转基因细胞培育为完整植株，体现植物细胞全能性；方法三只培养到愈 伤组织，未发育成完整个体，不体现全能性。B错误：大肠杆菌为原核生物，无内质网、高尔基体，无法 对蛋白质进行加工，只能生产紫杉醇前体，不能合成有生物活性的紫杉醇。C正确：方法三采用愈伤组织 培养，不受植株生长周期、季节、地域限制，可通过调控培养条件稳定提高紫杉醇产量。D错误：制备原 生质体需在等渗溶液中进行，低渗溶液会导致原生质体吸水涨破。 14.C【详解】A错误：逆转录是以RNA为模板合成cDNA(DNA),原料为四种脱氧核糖核苷酸，而非核 糖核苷酸。B错误：噬菌体侵染大肠杆菌是病毒自然感染过程，无需Ca2+处理；Ca+处理仅用于将质粒 导入大肠杆菌的转化过程。C正确：专一抗体检测的核心原理是抗原与抗体的特异性结合。D错误：该技 术制备的抗体需经纯化、改造与安全检测后才能用于人体治疗，未经处理直接使用仍存在免疫排斥风险。 15.C【详解】PC℉扩增只能检测目的基因是否存在，无法判断植株是纯合子还是杂合子，A错误。泳道2 无条带，可能是未成功转化，但也可能是PCR体系故障、模板DNA质量差或存在抑制剂等原因导致的假阴 性。应重新提取DNA或重复PCR验证，不能直接丢弃，因此B错误。泳道3对应的植株中出现不止一条条 带，说明有非特异性扩增片段的产生，非特异性扩增片段产生的原因可能是引物与非目的序列有同源性， 因此C正确。电泳条带的亮度（强度）主要反映PCR产物量的多少，受模板DNA浓度、循环数等因素影 响，不能直接代表目的基因在转录或翻译水平的表达量，因此D错误。 16.A【详解】A正确：叶绿体基因为细胞质基因，主要随卵细胞进行母系遗传，花粉几乎不传递叶绿体 基因，不易通过花粉造成基因污染。B错误：碱基编辑改变了psbA基因内部的碱基排列顺序，属于基因 突变（碱基对替换）。C错误：内含子不编码氨基酸，编辑内含子不会改变翻译产物；转录产物不变、翻 译产物改变与内含子无关。D错误：基因整合到核基因组后，其遗传遵循孟德尔遗传定律，只有细胞质基 因不遵循。 3/4 17.(共12分，每空2分) (1)细胞膜具有流动性 植物细胞具有全能性 （2)高Ca2-高pH融合 异源融合的原生质体才能完整进行有氧呼吸的三个阶段，可恢复生长并获得再生能力 (3)植物细胞培养 愈伤组织 18.（共12分，每空2分) (1)抗原X灭活的病毒处理(2)通过基因工程向浆细胞中导入pG或利用核移植技术将浆细胞的细胞 核移植到去核的无限增殖细胞中 (3)受体子宫不会对移入的胚胎发生免疫排斥反应(4)胚胎分割 注意将囊胚的内细胞团进行均等分割 19.(共12分，每空2分) (1)DNA的半保留复制B(2)EcoR I和BamH I使用两种不同的限制酶切割目的基因和质粒，可以 产生不同的黏性末端，保证目的基因定向插入质粒，防止质粒自身环化，提高连接效率。(3)胰蛋白酶、 胶原蛋白酶 Wnt基因对小鼠成纤维细胞再生有促进作用 20.(共12分，每空2分) (1)重组质粒（或外源基因插入破坏1acZ基因） 普通质粒（或空质粒或lacZ基因完整） DNA连接酶 (2)保证多个基因的同步表达 (3)过表达大肠杆菌内源的法尼基焦磷酸合成酶基因，增加℉PP的合成量，为外源B-胡萝卜素合成途径 提供更多前体。 (4)目的基因未正确插入、启动子失效、BS失效、基因突变造成终止密码子提前、表达菌株选择不当（任 选两点回答即可，合理可给分) 21.（共12分，除特殊说明外，每空2分) (1)EcoR V和Xbal (2)T-DNA (3) 植物组织培养抗原一抗体杂交 LEA通过促进AC的表达使植物油脂增加，VOC通过抑制ATGL的表达从而减弱油脂的降低(4分) 4/4深圳高级中学（集团）2025-2026学年第二学期期中测试题 高二生物 命题人：东校区高二生物备课组审题人：中心校区高二生物备课组 本试卷由两部分组成。第I卷单项选择题，共40分：第Ⅱ卷非选择题，共60 分。全卷共计100分。考试时间为75分钟。 注意事项： 1.答题前，考生先将自己的姓名、准考证号填写清楚，并填涂相应的考号信 息点。 2.选择题必须使用2B铅笔填涂；解答题必须使用黑色墨水的签字笔书写， 不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清楚。 3.请按照题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出答题区域书写的答题无 效：在草稿纸、试题卷上答题无效。 4.保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 一、单项选择题（共16小题，1-12题每题2分，13-16题每题4分，共40分) 1.藿香是一种重要的中草药，《本草纲目》记载“豆叶曰藿，其叶似之，而草 味芳香，故名藿香”。科研人员利用藿香的叶片为外植体进行培养，过程如图所 示。下列说法错误的是 接种外植体诱导愈伤组织诱导生芽诱导生根 A.①过程对外植体消毒时先用酒精处理，再用无菌水冲洗后用次氯酸钠处理 B.用射线处理愈伤组织细胞后，通过筛选可能获得具有优良性状的突变体 C.诱导生芽和生根阶段，可通过调整植物激素比例实现不同发育方向 D.过程②需要光照培养以促进愈伤组织的形成 2.下列有关动物细胞培养的叙述，错误的是 A.定期更换培养液可以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害 B.培养箱气体环境为95%02+5%C02,C02的作用是维持培养液的pH C.使用合成培养基时，应加入动物的血清等一些天然成分 试卷第1页，共12页 D.部分细胞能够悬浮在培养液中生长增殖 3.猪繁殖与呼吸综合征是一种由P病毒引发的传染病。为诊断和治疗猪繁殖与 呼吸综合征，科学家制备出抗P一GP3蛋白的单克隆抗体，制备过程如图所示， 图中Sp20细胞是小鼠的骨髓瘤细胞。下列说法正确的是 注射GP3蛋白sp20细胞一①，细胞第1次细胞第2次细胞扩大瓜芝 产一细胞甲心乙筛选丙筛选丁培养代 A.对小鼠注射GP3蛋白的目的是获得抗GP3蛋白抗体 B.经第一次筛选获得的杂交瘤细胞能无限增殖但分泌抗体类型不一定相同 C.最后一步是将抗体检测为阴性的杂交瘤细胞进行扩大培养，以便获取大量的 单克隆抗体 D.细胞丁只能注射到小鼠腹腔内培养，从而获得抗P一GP3蛋白单克隆抗体 4.为了保护粤东黑猪的遗传资源，下图为体细胞核移植的部分操作流程，有关 分析正确的是 了小耳花猪 粤东黑猪 获取 将供体细胞注入 剪下粤东黑猪的猪 卵巢 去核的卵母细胞 耳组织，进行培养 通过显微 操作去核 将重构胚移入 杜洛克母猪体内 仔猪 A.直接将取自小耳花猪卵巢的卵母细胞用作受体细胞 B.还可用梯度离心、紫外线照射或Ca2载体去除卵母细胞的核 C.用粤东黑猪胚胎细胞进行核移植难度更低，因其表现全能性相对容易 D.仔猪的性别由粤东黑猪和小耳花猪提供的遗传物质共同决定，与杜洛克母猪 无关 5.胚胎工程的许多技术，实际上是在体外条件下，对动物的自然受精和早期胚 胎发育条件进行的模拟操作。因此，了解哺乳动物受精和早期胚胎发育规律十 分重要。下列有关描述错误的是 试卷第2页，共12页 A.精子入卵后，卵细胞膜会发生反应阻止其他精子入卵 B.胚胎发育早期，细胞数量不断增加，但胚胎总体积并不增加 C.在囊胚阶段，胚胎的内部开始出现含有液体的腔，称为囊胚腔 D.自然条件下，哺乳动物的受精过程和早期胚胎发育都是在子宫内完成的 6.亚洲黑熊在野外因栖息地丧失和人为捕猎几乎灭绝。科学家期望通过体外受 精、动物体细胞核移植、胚胎移植等方法拯救亚洲黑熊，其过程如下图。下列 关于该过程的说法正确的是 动物园亚洲黑熊♀A 动物园亚洲黑熊♀B 超数排卵 ② 野生亚 洲黑熊C3① 去核卵母细胞体细胞 (88 受体雌性D←-Q8)重构胚 8o8 ↓… 妊娠分娩 妊娠分娩 后代E 后代F? A.胚胎工程一般采用促性腺激素释放激素处理A使其超数排卵 B.E后代遗传性状与A和C完全一致，F后代遗传性状与B完全一致 C.若过程①表示体外受精过程，从C获得的精子可直接受精 D.A排出的卵母细胞体外培养到MⅡ期时，才具备与精子受精的能力 7.同尾酶指一组识别序列不同，但切出的黏性末端相同的限制酶。图1是ECoR I、BamH I、Bg1IⅡ、和MboI四种限制酶的识别序列及酶切位点，图2表示构 建基因表达载体时的某种质粒和目的基因，限制酶I的识别序列和酶切位点是 G↓GATCC-,限制酶Ⅱ的识别序列和酶切位点是-↓GATC-。下列说法正确的是 GGATCC GATC EcoR I 5'-GAATTC-3 5'-GGATCC-3' CCTAGG BamH I CTAG 3'-CTTAAG-5 3'-CCTAGG-5' Gene I GeneⅡ 5'-AGATCT-3 BgLⅡ3-TCTAGA-5' Mbo I 5'-GATC-3 GGATCC日的基因GATC II■ 3-CTAG-5' CCTAGG CTAG 注：Cene I和Gene II表示两种标记基因 ○表示限制酶仅有的识别序列放大 图1 图2 A.EcoR I切割双链DNA分子时不具有特异性 试卷第3页，共12页 B.用DNA连接酶将BamH I和MboI形成的黏性末端连接后，可被MboI重新切 开 C.选用两种不同的限制酶切割质粒，都可以防止质粒自连 D.由图2可知，最好选用限制酶Ⅱ切割质粒、限制酶I切割目的基因 8.戊型肝炎病毒是一种RNA病毒，ORF2基因编码的结构蛋白(pORF2)位于病 毒表面，构成病毒的衣壳。我国科研人员利用基因工程技术，在大肠杆菌中表 达pOF2,制备戊型肝炎疫苗，过程如图。下列关于该疫苗的叙述，正确的是 ① T 戊型肝炎病毒 ④PORF2 大肠杆菌 蛋白 大肠杆菌 A.过程①需要的酶是RNA聚合酶，原料是A、U、G、C B.过程①的产物和③必须用同种限制酶切割 C.过程⑤是将Ti质粒导入大肠杆菌 D.过程⑥大量制备pOF2蛋白前应做相应的检测与鉴定 9.我国科学家将含有人凝血因子基因的DNA片段注射到羊的受精卵中，由该受精 卵发育而成的羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子，可以治疗血友病。下列叙述正 确的是 A.凝血因子基因应与凝血因子基因的启动子重组在一起 B.该羊分泌的乳汁中含有人的凝血因子基因 C.该受精卵发育成的羊必须是雌性 D.这项研究体现了基因工程在改善畜产品品质方面的应用 10.干扰素是动物体内合成的一种糖蛋白，体外很难保存。如果将干扰素分子 上的一个半胱氨酸（密码子：UGU、UGC)变成丝氨酸（密码子：UCU、UCC UCA、UCG),就可以延长干扰素的体外保存时间。下列相关叙述，正确的是 A.干扰素是干扰细菌复制的糖蛋白，被广泛应用于治疗细菌感染性疾病 B.对天然干扰素的改造可通过对干扰素基因进行定点突变来实现 C.替换后的干扰素仍能发挥作用，说明其结构未改变 试卷第4页，共12页 D.将新的干扰素基因导入大肠杆菌体内，正常表达即可得到预期的新的干扰素 11.某同学经“研磨→过滤→离心→析出→鉴定”步骤，提取花菜DNA并鉴 定。相关叙述正确的是 A.该同学也可选择猪血中成熟的红细胞、香蕉为实验材料提取DNA,但方法可 能有所不同 B.向含有DNA的粗提取液加入体积分数为95%的冷酒精后搅拌几分钟后过滤， DNA主要存在于滤液中 C.用玻璃棒沿一个方向快速搅拌卷起丝状物，可提高DNA的提取量 D.在溶有DNA的NaC1溶液中加入二苯胺试剂，沸水浴冷却后呈蓝色，设置对 照组用来排除二苯胺受热变蓝的可能 12.蛛丝有超强韧性，将蛛丝蛋白基因转入羊的乳腺中可以生产蛛丝蛋白。图 a是蛛丝蛋白基因的DNA片段；利用PCR技术对蛛丝蛋白基因进行检测，电泳 结果如图b。其中1号来自普通羊，2号来自含蛛丝蛋白基因的质粒，其余来自 转基因羊。下列叙述正确的是 ① ② 12345678 ® -OH OH-。 蛛丝蛋白基因 ③ ④ 图a 图b A.用PCR技术扩增图中的蛛丝蛋白基因，可选择图中的引物①和④ B.电泳鉴定DNA利用了DNA在电场中会向着它所带电荷相同的电极移动的原理 C.在凝胶中DNA分子的迁移速率与DNA分子的大小呈正相关 D.使用抗原-抗体结合法可能在3、5、8号羊的乳汁中检测到蛛丝蛋白 13.紫杉醇是存在于红豆杉属植物体内具有高抗癌活性的物质，但从红豆杉中提 取产量很低。科学家利用不同技术获得高产紫杉醇，获取途径如图所示。下列 叙述正确的是 试卷第5页，共12页 将紫杉醇合成的关键酶基因转入红 通过植物组织培养技术获得高产 方法 豆杉体细胞 植株 将紫杉醇合成的关键酶基因转入大 利用微生物发酵技术生产紫杉醇 方法二 肠杆菌 前体 对红豆杉愈伤组织利用CRISPR/Cas9 方法三 直接从培养物中提取紫杉醇 进行基因编辑改造 A.方法一和方法三都利用了植物细胞的全能性 B.方法二相较于方法一，可以通过发酵工程快速生产有生物活性的紫杉醇， 大幅降低生产成本 C.方法三相较于方法一，能通过调控培养条件提高紫杉醇产量，不受植株培育 的周期、季节的限制 D.方法一和方法三中，原生质体制备需用纤维素酶和果胶酶处理，应在低渗溶 液中完成以维持细胞形态 14.噬菌体展示技术是将编码噬菌体表面蛋白的基因与外源肽段基因融合，使外 源蛋白/肽段展示在噬菌体表面的筛选技术。下图是利用该技术备人丙型肝炎 病毒(HCV)单克隆抗体的流程。下列有关叙述正确的是 重叠PCR、 分离丙肝患 、提取总逆转录 PCR VH基因 拼接 CDNA +scFv基因、 者淋巴细胞 RNA 重组 VL基因 噬菌体 噬菌体载体 侵染 专 抗 裂解 氨苄青霉素 抗HCV 克隆化 体检测 抗性筛遥 单克隆抗体 培养 分离噬菌体←一大肠杆菌菌落 大肠杆菌 注：抗体重链可变区(VH)基因和轻链可变区(VL)基因连接获得单链抗体(scFv)基因 A.逆转录合成cDNA的过程，需要加入总RNA、逆转录酶和四种游离的核糖核 苷酸 B.重组噬菌体侵染大肠杆菌时，应该使用Ca2*处理使大肠杆菌处于吸收DNA分 子的状态 C.专一抗体检验利用的原理是抗原和抗体的特异性结合 D.该技术产生的单克隆抗体可以直接用于人体疾病治疗，没有免疫排斥风险 试卷第6页，共12页 15.科研人员利用农杆菌转化法将含有目的基因（GUS基因，长度500bp)的Ti 质粒导入拟南芥，经筛选获得若干候选转基因植株。提取各植株的基因组DNA, 利用目的基因特异性引物进行PC扩增，并通过琼脂糖凝胶电泳检测产物。电泳 结果如下图所示(M为DNA分子标准参照物，泳道1~4为待测植株样品)，下列 叙述正确的是 M 泳道1 泳道2 泳道3 泳道4 2000bp 1000bp 750bp 500bp 250 bp A.泳道1对应的植株一定是纯合的转基因植株 B.泳道2对应的植株未成功转化，应直接丢弃 C.泳道3对应的植株中出现非特异性扩增片段的原因可能是引物与非目的序列 有同源性 D.泳道4对应的植株中目的基因的表达量较低 16.某科研小组研究了苋菜叶绿体基因pbsA编码的D1蛋白在特定位点发生突 变，可获得对除草剂的抗性，野生型品系和突变品系的部分DNA碱基序列和氨 基酸位置，结果如表所示。下列叙述正确的是 野生型品系 CGA丙氨酸 AGT丝氨酸 AAG苯丙氨酸 TTA天冬氨酸 突变品系 CGT丙氨酸 GGT脯氨酸 AAG苯丙氨酸 TTA天冬氨酸 氨基酸位置 227 228 229 230 A.叶绿体基因主要随卵细胞传递， 该抗除草剂性状不易通过花粉造成基因污染 B.碱基编辑仅改变pSbA基因的碱基排列顺序，不改变基因数量，不属于基因 突变 C.若编辑后基因转录产物不变，仅翻译产物改变，说明编辑发生在内含子区段 D.若将该抗除草剂基因通过农杆菌转化法整合到苋菜核基因组，其遗传仍不遵 循孟德尔定律 试卷第7页，共12页 二、非选择题（共5题，共60分) 17.紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜鼓胀病：百脉根富含单宁，饲 喂时可防止家畜鼓胀病的发生。研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗鼓 胀病的新型苜蓿。（注：I0A可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体 的功能) 清水紫花苜 蓿原生质体 用R6G处理原生质体及同源融合体不能再生愈伤组织 ①，杂种细胞团②，杂种愈伤组织③，再生植株 里奥百脉根 原生质体 用IOA处理 →原生质体及同源融合体不能再生愈伤组织 (1)据图可知，本研究主要利用的两个生物技术的原理分别是 (2)①过程的发生，必须进行人工诱导，人工诱导原生质体融合的化学法除聚乙 二醇融合法外，还有 法等。其中只有异源融合体才能存活和具有再生 能力，请推测原因是 (3)百脉根富含单宁，单宁具有收敛止血、抗氧化、抗菌等作用被用于各类产 品，若要通过 技术生产单宁，需将百脉根细胞培养到 阶段，再筛选出稳定高产单宁的细胞进行培养。 18.如图1表示利用生物技术制备抗X的单克隆抗体的过程：图2表示体外受 精培育优质奶牛的过程；请据图回答下面的问题。 已免疫的 今小鼠B细胞 体外培养 提取 ◆单克隆抗体 小鼠骨髓 瘤细胞 A体内培养 图1 卵子 透明带 囊胚腔 优质奶牛 精子 内细胞团 图2 (1)图1中注射到小鼠体内的物质是 与植物原生质体融合相 比，细胞A的形成过程中特有的诱导融合方法是 试卷第8页，共12页 (2)科学家从某些无限增殖细胞的细胞质中分离出了无限增殖调控基因 (prG),该基因能激发动物细胞分裂。据此，为获得既能产生抗体又能无限增 殖的细胞，请简要写出一种新思路 (3)图2优质奶牛的培育过程需要进行体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植。 胚胎移植后的胚胎能在受体子宫中存活，其生理基础是 (4)若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图2所示囊胚阶段的胚 胎进行 ，操作过程需要特别注意的问题是 否 则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 19.水螅具备很强的再生能力，其大部分身体结构被破坏都能够复原，理论上可 以无限再生，近乎永生。研究表明，水螅的再生能力依赖体内的Wt基因。为 了研究Wt基因的作用机理和对小鼠成纤维细胞再生是否有促进作用，科学家 利用基因工程和细胞工程技术做了以下实验。回答下列问题： (1)获取Wnt基因的途径之一是：提取了水螅细胞全部DNA后，采用PCR技术 扩增Wnt基因，该技术的原理是 。 已知Wnt基因一条链 两端的序列为5’-AATTGCGG-Wnt基因-TCGAAACT-3',根据其两端序列，则 需要选择的一对引物序列是 (填字母)。 A.引物I是5-AATTGCGG-3',引物IⅡ是5’-TCGAAACT-3' B.引物I是5'-AATTGCGG-3',引物IⅡ是5'-AGTTTCGA-3' C.引物I是5'-CCGCAATT-3',引物IⅡ是5'-TCGAAACT-3 D.引物I是5'-CCGCAATT-3',引物IⅡ是5'-AGTTTCGA-3 (2)如图甲为获取的含有Wt基因的DNA片段，为保证目的基因和质粒丙正确 连接，在该实验中，切割含有目的基因DNA片段使用的限制酶为 原 因是 启动子 BamHI Sau3AI BamHI EcoRI一4形 EcoRI Sau3AI BamHI二CCTAGG -GGATCC- 复制原点 因终止子 Sau3AI Wnt基因 EcoRI EcoRI Sau3AIC 转录方向 抗生素抗性基因 甲 乙 丙 试卷第9页，共12页 (3)若要验证Wt基因在小鼠成纤维细胞再生中是否起到促进作用，可以将对 小鼠成纤维细胞进行体外培养，需先用 处理使组织分散成单个细 胞。实验组小鼠细胞注入含有Wnt基因的重组载体，对照组注入不含Wnt基因 的空载体，实验结果显示实验组小鼠细胞增殖和再生能力显著高于对照组，说 明 20.B-胡萝卜素是一种抗氧化剂和维生素A前体。科研人员将crtE、crtB、 crtI三个关键酶基因导入大肠杆菌，使其能利用内源前体法尼基焦磷酸 (PP)合成B-胡萝卜素。构建的表达载体如下图，三个目的基因以多顺反子 结构（共用一个启动子，各自带有核糖体结合位点BS)插入多克隆位点 (MCS)。转化宿主为大肠杆菌，在含氨苄青霉素和X-gal的平板上筛选，挑取 白色菌落验证后，再转入表达菌株诱导表达。 注：lacZ基因编码产生的B-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质，使菌 落呈现蓝色，否则菌落为白色。请回答下列问题： 多顺反子表达质粒结构 lacZ基因片段 MCS (蓝白斑筛选) 复制起点 ctE(前带RBS) 多克嘴位点 (MCS) ctB(前带RBS)→ ctl(前带RBS) 氨苄青霉素抗性 基因(Amp) (1)在含氨苄青霉素和X-gl的平板上，白色菌落代表大肠杆菌导入 质 粒，蓝色菌落代表大肠杆菌导入质粒。在构建基因表达载体时，除需要限 制酶外，还需要 酶。 (2)该载体采用多顺反子结构，三个基因共用一个启动子的作用是 (任写一点即可) 试卷第10页，共12页 (3)实验测得重组菌的B-胡萝卜素产量较低。科研人员推测可能是由于FPP 供应不足。请提出一种基因工程层面的改进策略（不改变培养基成 分)， (4)若最终检测发现重组菌的B-胡萝卜素产量几乎为零，但菌落能在含氨苄 青霉素的平板上正常生长，且菌落为白色。分析可能的原因（写出两 点) 21.为研究干旱胁迫基因LEA和V0C对甘蓝型油菜油脂的积累机制，科研人员 构建了两个基因表达载体。其中基因LEA与荧光素酶基因(LuC)构建成基因表 达载体甲，基因V0C和标记基因构建成基因表达载体乙，相关序列如图所示。 箭头表示转录方向。 部分载体结构： LEA基因序列： 多酶切位点 5'ATGGGC……CACTAG3' 3'TACCCG·…GTGATC5' 启动子 Luc基因 多酶切位点： BamH I 终止子 5'GATATC…TCTAGA…GGATCC3' EcoRV Xbal BamH I (1)利用PCR扩增LEA基因时，需要在引物上添加的限制酶是 (2)常用农杆菌转化法将目的基因导入油菜受体细胞，目的基因将插入T1质粒 的 上，并最终将其整合到染色体DNA上，从而使其得以维持稳 定和表达。 (3)乙酰-CoA羧化酶基因(AC)是油脂合成过程的关键酶基因，甘油三酯酯酶 基因(ATGL)是油脂分解过程的关键酶基因。将基因表达载体甲、乙分别导入 植物细胞，通过 技术获得转基因植物A、B,在干旱胁迫的环境 下培养两种转基因植物和正常植物，分别检测植物体内AC和ATGL基因的表达 水平，结果如下图。 试卷第11页，共12页 正常植株 转基因A植株 转基因B植株 AC酶 ATGL酶 ①在分子水平上，用 方法检测AC酶和ATGL酶的含量可得到上 述表格结果。 ②基于以上研究，千旱胁迫基因LEA和VOC在甘蓝型油菜油脂积累中的调控机 制是 试卷第12页，共12页