精品解析：江苏省徐州市第七中学2025-2026学年下学期高二3月学情调研生物试题

徐州七中高二年级3月学情调研生物试卷 试卷总分：100分 考试时间：75分钟 一、单项选择题：共15题，每题2分，共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 下列有关基因工程的说法，不正确的是（ ） A. 基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的 B. 工具酶和载体的发现使基因工程的实施成为可能 C. 遗传密码的破译为基因工程的诞生提供了理论依据 D. “自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后，其DNA整合到细菌DNA上”，这符合基因工程的概念 【答案】D 【解析】 【详解】A、基因工程是在生物化学对核酸的研究、分子生物学对遗传信息传递规律的研究、微生物学对微生物类群及功能的研究等学科基础上发展起来的，A正确； B、限制酶、DNA连接酶等工具酶可实现目的基因的切割和拼接，载体可将目的基因转运进入受体细胞，二者是基因工程实施的必要工具，B正确； C、遗传密码的破译证明了不同生物共用一套遗传密码，为外源基因导入受体细胞后可以正常表达提供了理论依据，C正确； D、基因工程是按照人们的意愿进行严格设计，通过人为的体外DNA重组、转基因等操作定向改造生物遗传特性的技术，天然噬菌体自行感染细菌后DNA整合是自然发生的过程，无人工干预操作，D错误。 2. 透明质酸是一种应用广泛的黏多糖，透明质酸合成酶在透明质酸的合成中发挥重要作用。透明质酸合成酶基因H上的一段核苷酸序列为“—ATCTCGAGCGGG—”，某限制酶可对该段序列进行识别和切割，则该限制酶识别的核苷酸序列最可能为（ ） A. —TCTCGA— B. —CTCGAG— C. —CGAGCG— D. —TCGAGC— 【答案】B 【解析】 【详解】该核苷酸序列“—ATCTCGAGCGGG—”的互补序列为“—TAGAGCTCGCCC—”，限制酶切割DNA需两条链都有识别位点（即识别片段两条链序列成倒序），若选—TCTCGA—片段，则另一互补链上（从右到左）应该含有—AGAGCT—，互补链上不存在该序列片段，不能选该片段；若选—CTCGAG—片段，则另一互补链上（从右到左）应该含有—CTCGAG—，互补链上存在该序列片段，能选该片段；若选—CGAGCG—片段，则另一互补链上（从右到左）应该含有—GCTCGC—，互补链上不存在该序列片段，不能选该片段；若选—TCGAGC—片段，则另一互补链上（从右到左）应该含有—AGCTCG—，互补链上不存在该序列片段，不能选该片段，综上分析可知，对该序列进行切割的限制酶识别的核苷酸序列最可能为—CTCGAG—，B正确，ACD错误。 3. 一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割，切割产物通过电泳分离，用长度已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（图中左边第一列）。关于该双链DNA，下列说法错误的是（ ） A. 呈环状结构 B. 长度为10kb C. 有一个限制酶NotI和两个限制酶EcoRI切割位点 D. 其限制酶NotI切割位点与限制酶EcoRI切割位点的最短距离为2kb 【答案】D 【解析】 【详解】AB、单用EcoRI处理和利用EcoRI和NotI双酶切时产生的结果不同，说明DNA含有NotI酶切位点，因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，所以该分子必须是环状的，且长度一定是10kb，AB正确； C、因为用NotI处理只产生了一个10kb的条带，说明该环状DNA上含有一个NotI切割位点，单用EcoRI处理后产生了4kb和6kb两条带，说明该环状DNA上含有2个EcoRI切割位点，C正确； D、用EcoRI处理后产生的4kb的片段，进一步被NotI酶切为3kb和1kb的片段，可以得知NotI切点与EcoRI切点的最短距离为1kb，最大距离为3kb，D错误。 4. 限制性内切酶EcoRI识别并切割双链DNA，用EcoRI完全酶切果蝇基因组DNA，理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为（ ） A. 6 B. 250 C. 4000 D. 24000 【答案】C 【解析】 【分析】限制性核酸内切酶能识别特定的DNA序列，切割特定的位点，在特定的碱基之间切割磷酸二酯键。 【详解】据图可知，EcoRI的酶切位点有6个碱基对，由于DNA分子的碱基组成为A、T、G、C，则某一位点出现该序列的概率为1/4×1/4×1/4×1/4×1/4×1/4=1/4096，即4096≈4000个碱基对可能出现一个限制酶EcoRI的酶切位点，故理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为4000。C符合题意。 故选C。 5. DNA连接酶是基因工程的必需工具，下列有关DNA连接酶的叙述，正确的是（ ） A. DNA连接酶可以将任意的两个DNA片段连接成一个重组DNA分子 B. DNA连接酶发挥作用时需要识别特定的脱氧核苷酸序列 C. DNA连接酶可以催化两个DNA片段的连接 D. T4DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于E.coliDNA连接酶 【答案】C 【解析】 【详解】A、DNA连接酶只能连接具有互补黏性末端或匹配平末端的DNA片段，无法连接任意的两个DNA片段，A错误； B、识别特定脱氧核苷酸序列是限制酶的作用特点，DNA连接酶仅催化DNA片段间磷酸二酯键的形成，不需要识别特定序列，B错误； C、DNA连接酶的核心功能就是催化两个DNA片段之间形成磷酸二酯键，实现两个DNA片段的连接，C正确； D、E.coliDNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于T4DNA连接酶，D错误。 6. 基因工程中将外源基因送入细胞需要一定的载体，下列关于载体的叙述，错误的是（ ） A. 具有1个至多个限制酶切割位点以供目的基因插入其中 B. 具有特殊的标记基因以便于目的基因能准确定位并与之结合 C. 能在受体细胞中稳定存在并复制以利于目的基因的存在和复制 D. 基因工程中所用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 【答案】B 【解析】 【详解】A、基因工程的载体需要具备1个至多个限制酶切割位点，便于限制酶切割后插入目的基因，A正确； B、载体上标记基因的作用是鉴别和筛选含有目的基因的受体细胞，目的基因是插入到限制酶切割位点，B错误； C、载体需要能在受体细胞中稳定存在且可以自主复制，从而保证目的基因能随之稳定存在和扩增，C正确； D、基因工程常用载体除质粒外，还包括λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等，D正确。 7. 构建基因表达载体时，可利用碱性磷酸单酯酶催化载体的5'-Р变成5'-0H，如图所示。将经过该酶处理的载体与外源DNA连接时，由于5'-0H与3'-0H不能连接而形成切口（nick）。下列说法错误的是（ ） A. 经碱性磷酸单酯酶处理的载体不会发生自身环化 B. 外源DNA也必需用碱性磷酸单酯酶处理 C. T4DNA连接酶可连接黏性末端和平末端 D. 重组DNA经过2次复制可得到不含nick的子代DNA 【答案】B 【解析】 【分析】 基因表达载体的构建（即目的基因与运载体结合）是实施基因工程的第二步，也是基因工程的核心。其构建目的是使目的基因能在受体细胞中稳定存在，并且可以遗传给下一代，同时，使目的基因能够表达和发挥作用。 【详解】A、将经过该酶处理的载体与外源DNA连接时，由于5'-0H与3'-0H不能连接而形成切口（nick），因此经碱性磷酸单酯酶处理的载体不会发生自身环化，A正确； B、外源DNA不能用碱性磷酸单酯酶处理，如用碱性磷酸单酯酶处理，载体与外源DNA连接不能连接形成重组DNA，B错误； C、DNA连接酶（DNA Ligase）也称DNA黏合酶，在分子生物学中扮演一个既特殊又关键的角色，那就是连接DNA链3‘-OH末端和，另一DNA链的5’-P末端，使二者生成磷酸二酯键，从而把两段相邻的DNA链连成完整的链。连接酶的催化作用需要消耗ATP。T-DNA连接酶可连接黏性末端和平末端，C正确； D、DNA是半保留复制，重组DNA经过2次复制，可得到2个不含nick的子代DNA，D正确。 故选B。 8. PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，与人体细胞内DNA分子复制相比，下列有关叙述错误的是（ ） A. 都遵循碱基互补配对原则 B. DNA聚合酶作用的最适温度不同 C. 都是边解旋边复制的过程 D. 复制方式都是半保留复制 【答案】C 【解析】 【分析】1、PCR原理：在解旋酶作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。DNA的复制需要引物，其主要原因是DNA聚合酶只能从3′端延伸DNA链。 2、PCR反应过程是：变性→复性→延伸。变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，延伸：72℃左右时，TaqDNA聚合酶有最大活性，可使DNA新链由5'端向3'端延伸。 【详解】A、DNA分子的体外复制和体内复制都遵循碱基互补配对原则，A正确； B、PCR技术是在较高温度条件下进行的，因此PCR与细胞内DNA复制相比所需要酶的最适温度较高，B正确； C、PCR技术是在较高温度条件下打开双链后进行扩增的，不是边解旋边复制的，C错误； D、DNA复制方式都是半保留复制，D正确。 故选C。 【点睛】 9. 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因工程操作的基本步骤中，无需进行碱基互补配对的步骤是（ ） A. 人工合成目的基因 B. 基因表达载体的构建 C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测与鉴定 【答案】C 【解析】 【详解】A、人工合成目的基因常用反转录法、PCR扩增法，上述过程均存在核酸链之间的碱基互补配对，A不符合题意； B、基因表达载体构建时，经限制酶切割产生的黏性末端之间通过碱基互补配对结合，再由DNA连接酶连接，存在碱基互补配对过程，B不符合题意； C、将目的基因导入受体细胞是通过农杆菌转化法、显微注射法、钙离子处理法等方法，将重组DNA分子送入受体细胞，该过程不存在核酸之间的碱基互补配对行为，C符合题意； D、目的基因的检测与鉴定中，利用PCR等方法检测目的基因是否插入、目的基因是否转录出mRNA等步骤，都存在碱基互补配对过程，D不符合题意。 10. 基因工程中，目的基因的获取方法有多种，如从基因文库中获取、PCR扩增、人工合成等。下列关于目的基因获取方法的叙述，错误的是（　　） A. 从基因组文库中获取的目的基因可能含内含子，而cDNA文库中的目的基因不含内含子 B. PCR扩增目的基因时，需要已知目的基因的核苷酸序列来设计引物 C. 人工合成目的基因适用于目的基因序列较短、已知核苷酸序列的情况 D. 从cDNA文库中获取目的基因时，需先提取受体细胞的mRNA，再反转录合成cDNA 【答案】D 【解析】 【详解】A、基因组文库包含某生物全部基因（含内含子和外显子），而cDNA文库由mRNA反转录获得，仅含表达基因的外显子序列，不含内含子，A正确； B、PCR扩增需依据目的基因两端的已知核苷酸序列设计特异性引物，以引导DNA聚合酶进行扩增，B正确； C、人工合成法（如化学合成或基因拼接）适用于已知核苷酸序列且长度较短的目的基因。C正确； D、cDNA文库构建需提取供体细胞（提供目的基因的生物）的mRNA，经反转录合成cDNA，而非受体细胞（接受基因的宿主细胞），D错误。 故选D。 11. 甲醇酵母菌是基因工程中常用的受体菌，它可以高效表达外源蛋白，但自身蛋白分泌到培养基的较少。研究人员将人的胶原蛋白基因导入甲醇酵母中并成功表达。下列有关叙述错误的是（　　） A. 用两种酶切割目的基因和质粒，可防止目的基因反向连接和质粒的自身环化 B. 常用显微注射法将胶原蛋白基因导入甲醇酵母中 C. 与大肠杆菌相比，甲醇酵母作受体菌所表达出的胶原蛋白与人体产生的胶原蛋白结构更相近 D. 与其他酵母菌相比，甲醇酵母作受体菌便于表达出的胶原蛋白的分离与纯化 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤：（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。（4）目的基因的检测与鉴定。 【详解】A、用两种酶切割目的基因和质粒，能形成不同的末端。不同的末端进行连接，就可防止目的基因反向连接和质粒的自身环化，A正确； B、常用Ca2+处理法将目的基因导入微生物细胞，而不是显微注射法，显微注射法常用于将目的基因导入动物细胞，B错误； C、大肠杆菌是原核生物，甲醇酵母为真核生物。真核生物表达出的胶原蛋白经过内质网和高尔基体的加工，所以与人体产生的胶原蛋白结构更相近，C正确； D、与其他酵母菌相比，甲醇酵母可以高效表达外源蛋白，自身蛋白分泌到培养基的较少，这就便于表达出的胶原蛋白的分离与纯化，D正确。 故选B。 12. 筛选是生物技术中的一个重要环节。下列叙述正确的是（ ） A. 基因工程中，利用目的基因对受体细胞进行筛选 B. 通过在培养基中添加抗生素，可以初步筛选出含有质粒或重组质粒的受体细胞 C. 检测目的基因能否稳定遗传的关键是看目的基因是否成功构建为基因表达载体 D. 只要检测到目的基因成功表达出蛋白质，就证明基因工程取得成功 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程中标记基因的作用：是为了鉴定受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 【详解】A、基因工程中，利用标记基因对受体细胞进行筛选，A错误； B、在培养基中添加抗生素，可以筛选出含有质粒或重组质粒的受体细胞，B正确； C、检测目的基因能否稳定遗传的关键是看目的基因有没有整合到受体细胞的染色体DNA上，C错误； D、在生物体内检测到了该基因对应的蛋白质且生物体表现出了相应的性状，才证明基因工程取得成功，D错误。 故选B。 13. 下列有关基因工程的成果及应用的叙述，错误的是（ ） A. 基因工程可实现基因在不同物种之间的转移 B. 将人的胰岛素基因导入大肠杆菌后，表达出的胰岛素与人的胰岛素结构完全相同 C. 基因工程在给人类生产和生活带来益处的同时，也使人们产生关于其安全性方面的担忧 D. 基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物 【答案】B 【解析】 【分析】基因工程是指按照人们的意愿，进行严格的设计，并通过体外DNA重组和转基因等技术，从而创造出更符合人们需要的新的生物类型和生物产品。 【详解】A、基因工程育种可将特定的基因进行定向转移，同时打破了自然状态下的生殖隔离，所以基因工程可以实现基因在不同物种之间的转移，人们可以定向选育新品种，A正确； B、利用基因工程技术，将人的产生胰岛素的基因转入大肠杆菌后，大肠杆菌内表达出的胰岛素与人的胰岛素结构不完全相同，因为大肠杆菌属于原核生物，无内质网与高尔基体，无法对胰岛素进行加工，B错误； C、基因工程在给人类生产和生活带来益处的同时，也使人们产生关于其安全性方面的担忧，C正确； D、基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物，如转基因植物打破自然物种的原有界限，可能破坏生态系统稳定性，D正确。 故选B。 14. 应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到目的。这里的基因探针是指（ ） A. 能够指导合成免疫球蛋白的DNA分子 B. 细胞工程生产的单克隆抗体 C. 用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子 D. 用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 【答案】D 【解析】 【分析】用放射性同位素（或荧光分子）标记的DNA单链称为探针。 【详解】基因探针是用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA单链；基因探针与患者基因进行DNA分子杂交，进行碱基互补配对产生杂交带，即可从浩瀚的基因组中把致病基因显示出来，D正确。 故选D。 15. 基因治疗是治疗遗传病的有效手段，分为体外基因治疗和体内基因治疗。复合型免疫缺陷症是由于腺苷酸脱氨酶（ADA）基因缺失导致的遗传病，患者免疫系统功能异常，目前常采用体外基因治疗方案：抽取患者淋巴细胞，导入正常ADA基因，培养后回输患者体内。下列关于该体外基因治疗的叙述，正确的是（　　） A. 该治疗方案可彻底改变患者所有体细胞的基因组成 B. 导入正常ADA基因的淋巴细胞可在患者体内无限增殖 C. 治疗的核心是将正常基因导入受体细胞以替代缺陷基因 D. 该方法操作复杂，但效果比体内基因治疗更可靠 【答案】D 【解析】 【详解】A、体外基因治疗仅对被改造的受体细胞（如淋巴细胞）进行基因导入，无法改变患者所有体细胞的基因组成，A错误； B、导入正常ADA基因的淋巴细胞经培养后回输体内，淋巴细胞属于高度分化的细胞，不具备无限增殖的能力，只有癌细胞才会无限增殖，B错误； C、基因治疗的核心是通过载体将正常基因导入患者受体细胞，使其表达正常功能蛋白以替代缺陷基因功能，而非替代缺陷基因（缺陷基因仍存在于细胞中），C错误； D、体外基因治疗需要进行细胞培养、基因导入、筛选等步骤，操作复杂，但因在体外完成基因导入和筛选，能确保导入成功的细胞回输，效果比体内基因治疗更可靠，D正确。 故选D。 二、多项选择题：共4小题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对得3分，选对但不全对得1分，错选或不答得0分。 16. 下列关于基因工程基本工具的叙述，错误的是（ ） A. 限制性内切核酸酶能够识别新冠病毒特定的核苷酸序列并在特定位点切开磷酸二酯键 B. EcoRI识别序列和切割位点为G↓AATTC，则形成的黏性末端为AATTC- C. 与DNA聚合酶不同，DNA连接酶发挥作用时不需要DNA模板 D. 用限制酶切割DNA分子中部，获得一个目的基因时被水解的磷酸二酯键有2个 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、限制性内切核酸酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开，而新冠病毒是RNA病毒，遗传物质是RNA，A错误； B、EcoRI识别序列和切割位点为G↓AATTC，切割位点在G和A之间，因此产生的两个黏性末端分别为AATTC-(5’端突出)和-G(3’端突出)，B错误； C、DNA连接酶连接DNA片段的磷酸二酯键，发挥作用不需要模板，也不需要识别特定序列，C正确； D、DNA分子是双链结构，要获得一个目的基因，需要限制酶切割目的基因的两端，该基因在DNA中部，要水解的磷酸二酯键有4个，D错误。 17. 热启动PCR可提高扩增效率，其基本方法是：进行反应之前将TaqDNA聚合酶、dNTP和引物等先不要加入样品管内，而是将样品加热，待温度升到70度以上时，再将上述试剂加入，开始PCR反应，下列叙述正确的有（ ） A. Taq酶最适催化温度范围为50—60℃ B. 与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物 C. 两条子链合成一定都是从端向端延伸 D. PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了TaqDNA聚合酶的特异性 【答案】BC 【解析】 【分析】PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术；原理是DNA复制；条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶（Taq酶）。 【详解】A、Taq酶最适催化温度范围为60—70℃，即延伸时的温度，A错误； B、分析题意可知，热启动PCR进行反应之前将TaqDNA聚合酶、dNTP和引物等先不要加入样品管内，故可减少反应起始时引物错配形成的产物，B正确； C、DNA分子两条链反向平行，PCR扩增时引物加到3'端，复制时子链只能是从5′端向到3'端延伸，C正确； D、PCR产物DNA碱基序列的特异性是碱基互补配对的结果，不能体现TaqDNA聚合酶的特异性，D错误。 故选BC。 18. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量，其原理是在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述错误的是（ ） A. 引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则 B. Taq酶催化子链从3端向5端延伸，需dNTP作为原料 C. 若某次PCR反应共产生52个等长DNA，则需加入6个荧光探针 D. 反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关 【答案】BC 【解析】 【分析】PCR技术： (1) 概念：PCR全称为聚合酶链式反应，是一项在生物体外复制特定DNA的核酸合成技术。 (2) 原理：DNA双链复制。 (3) 前提条件：要有一段已知目的基因的核苷酸序以便合成一-对引物。 (4) 条件：模板DNA、四种脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Taq酶)。 (5) 过程：高温变性：DNA解旋过程(PCR扩 增中双链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解开) ；低温复性：引物结合到互补链DNA上；中温延伸：合成子链。 【详解】A、引物与探针均为根据某条模板链设计的单链，因而具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则，A正确； B、根据图示中引物延伸的方向可以确定Taq酶可以催化子链沿着5'向3'方向延伸，需dNTP作为原料，B错误； C、PCR扩增时在加入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，每扩增一条DNA链，就有一个荧光分子形成，实现了荧光信号的累积与PCR产物形成完全同步，若某次PCR反应共产生52个等长的DNA，则至少扩增六次，其余为不等长的DNA，根据扩增过程可知，每利用引物1延伸一次，就会水解探针一个，则需加入26-1=63个荧光探针，C错误； D、题干中提出“加入一个与某条模板链互补的荧光探针”，且加入的原料具有荧光标记，故“每扩增一次，就有一个荧光分子生成”，因此反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关，D正确。 故选BC。 19. 基因组编辑技术是研究基因生物功能的重要手段，下图是对某生物B基因进行定点编辑的过程，该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，相关说法正确的是（　　） A. 靶基因部分序列与sgRNA通过碱基互补配对原则进行配对 B. 核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键 C. 被编辑后的B基因与编辑前的B基因互称为非等位基因 D. 通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能 【答案】ABD 【解析】 【分析】等位基因是指位于同源染色体相同位置，控制相对性状的一对基因。 分析题图：用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点并进行切割，进而将基因Ⅱ切除，连接基因Ⅰ和Ⅲ，形成新的B基因。 【详解】A、sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，因此基因定点编辑前需要设计与被切割基因两端碱基序列配对的sgRNA，A正确； B、核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的化学键，即磷酸二酯键，B正确； C、被编辑后的B基因与编辑前的B基因由于位于同源染色体的相同位置，所以它们互称为等位基因，C错误； D、通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因原有的功能，D正确。 故选ABD。 三、非选择题：共5题，共58分。除特殊说明外，每空1分。 20. 某小组进行了“DNA的粗提取与鉴定”实验，部分实验步骤如图所示，其中B为可能会加入的某试剂。回答下列问题： （1）该实验利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是______。 （2）若实验材料A为菜花等硬度较高的植物，则B可能是______酶等，上述酶可以破坏植物细胞的细胞壁，加强研磨效果。 （3）该小组向滤液C中加入了适量的嫩肉粉（含有木瓜蛋白酶）并将其置于55~60℃下5～10分钟，推测嫩肉粉的作用是______。 （4）将上述滤液C冷却后加入______溶液，静置几分钟后得到的白色丝状物就是粗提取的DNA。将丝状物处理后溶于适量______；mol·L-1的NaCl溶液中进行鉴定。鉴定时所用的是______试剂，DNA遇该试剂会呈现______色，该试剂在使用时应注意的事项有______（答出1点）。 【答案】（1）DNA不溶于酒精，某些蛋白质溶于酒精 （2）纤维素（或纤维素酶、果胶） （3）促使部分蛋白质水解 （4） ①. （预冷的体积分数为95%的）酒精 ②. 2 ③. 二苯胺 ④. 蓝 ⑤. 需要沸水浴加热、需要现用现配 【解析】 【分析】DNA的溶解性： （1）DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同（0.14mol/L溶解度最低），利用这一特点，选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。 （2）DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。 【小问1详解】 DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原理，可以将DNA与蛋白质进一步的分离。 【小问2详解】 若实验材料A为菜花等硬度较高的植物，则B可能是纤维素酶等，上述酶可以破坏植物细胞的细胞壁，加强研磨效果，提高DNA粗提取的效率。 【小问3详解】 嫩肉粉含有木瓜蛋白酶，可促使部分蛋白质水解，从而有利于蛋白质和DNA分离。 【小问4详解】 DNA不溶于冷酒精，因此将上述滤液C冷却后加入（预冷的体积分数为95%的）酒精溶液，静置几分钟后得到的白色丝状物就是粗提取的DNA。 将丝状物处理后溶于适量2mol·L-1的NaCl溶液中加入二苯胺试剂，水浴加热条件下溶液会呈现蓝色，该试剂在使用时应注意沸水浴加热、需要现用现配。 21. 水稻基因组中的B基因仅在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，科研人员设计了下图1所示实验。请回答下列问题： （1）为获取图1中水稻B基因编码蛋白的序列（740bp），通常采用从_______中提取总RNA，经______技术从而获得大量的B基因编码序列。 （2）检测转基因水稻是否含有融合基因，可通过PCR技术对融合基因进行扩增并通过______电泳进行鉴定，需注意观察当_______前沿接近凝胶边缘时，停止电泳，取出凝胶置于_______下观察和照相。对于电泳结果符合预期的基因片段，通常还需进一步通过基因测序确认，原因是_______。 （3）检测转基因水稻是否成功表达，可从转基因水稻的_______中提取蛋白质，并在其中加入______，观察是否发出荧光。 （4）已知蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为0.11kDa，将融合基因表达的蛋白先进行凝胶电泳，然后用B蛋白抗体进行杂交，显示的条带应是_______（从图2的“A～D”中选填）。 （5）从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明_______。 【答案】（1） ①. 体细胞或精子  ②. RT-PCR （2） ①. 琼脂糖凝胶 ②. 指示剂    ③. 紫外灯下 ④. 琼脂糖凝胶电泳仅能检测DNA分子的相对大小，无法测定其碱基序列 （3） ①. 卵细胞     ②. 荧光素 （4）C （5）B基因表达能使卵细胞不经受精直接发育成胚      【解析】 【小问1详解】 通过题干信息可知，水稻的体细胞或精子中B基因可正常表达，故可从水稻的体细胞或精子中提取总RNA，经RT-PCR技术从而获得大量的B基因编码序列。 【小问2详解】 在检测转基因水稻是否含有融合基因时，对融合基因扩增后，常用琼脂糖凝胶电泳来鉴定，为了防止目的基因片段跑出凝胶，需要注意观察当指示剂前沿接近凝胶边缘时，停止电泳，取出凝胶置于紫外灯下观察和照相。琼脂糖凝胶电泳仅能检测DNA分子的相对大小，无法测定其碱基序列，因此对于电泳结果符合预期的基因片段，通常还需进一步通过基因测序确认。 【小问3详解】 该实验的目的是研究B基因表达对卵细胞的影响，检测转基因水稻是否成功表达，可从转基因水稻的卵细胞中提取蛋白质，并在其中加入荧光素（荧光素酶能催化荧光素发出荧光），观察是否发出荧光。 【小问4详解】 已知蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为0.11kDa，Luc基因为460bp、水稻B基因编码蛋白为740bp，则形成的融合基因蛋白质大约含有（460+740）÷3=400个氨基酸，则融合基因蛋白相对分子质量为0.11×400=44，将表达的蛋白先进行凝胶电泳，然后用B蛋白抗体进行杂交，显示的条带应是C。 【小问5详解】 当从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含有一个染色体组，推断该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明B基因表达能使卵细胞不经受精作用直接发育成胚。 22. 科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草，培育过程如下图所示，图1中SalI、HindIII、BamHI代表相关限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答下列问题。 （1）复制原点是复制起始序列，是_______酶的作用位点，该序列富含_______碱基对。启动子是_______酶的作用位点，转录沿DNA模板链的_______方向进行。 （2）过程①构建重组质粒应选用_______酶切割，酶切后通过DNA连接酶作用后获得重组质粒，以保证重组DNA序列的唯一性，过程②将其转入处于_______态的农杆菌。 （3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______技术，愈伤组织经过程⑤_______形成完整植株。 （4）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______、______。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是_______（填图中数字）菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，需使用_______方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 【答案】（1） ①. DNA聚合 ②. A-T（腺嘌呤−胸腺嘧啶） ③. RNA聚合 ④. 3′→5′ （2） ①. Sal I、HindIII    ②. 感受 （3） ①. 植物组织培养   ②. 再分化 （4） ①. 氨苄青霉素 ②. 四环素 ③. 4 和 6 ④. 一定浓度的盐水浇灌烟草植株（将烟草植株移栽到盐碱地中） 【解析】 【小问1详解】 复制原点是DNA复制的起始位点，是DNA聚合酶识别结合的位点；A-T碱基对氢键更少，更易解旋，因此复制原点富含A-T碱基对。启动子是RNA聚合酶的识别结合位点，启动转录；转录时RNA沿5′→3′合成，因此转录沿DNA模板链的3′→5′方向进行。 【小问2详解】 质粒和含有目的基因的外源DNA分子上都含有SalI、HindIII、BamHI三种限制酶切割位点，其中BamHI的切割位点位于目的基因内部，用该酶切割会破坏目的基因；若只用SalI一种限制酶切割可能会导致目的基因与运载体反向连接；因此在构建重组质粒时，应选用SalI和HindIII两种限制酶对质粒和抗盐基因进行切割，以保证重组DNA序列的唯一性，过程②将其转入处于感受态的农杆菌。 【小问3详解】 将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用植物组织培养技术，愈伤组织经再分化进而形成完整植株。 【小问4详解】 用SalI和HindIII两种限制酶对质粒进行切割时，会破坏四环素抗性基因，但不会破坏氨苄青霉素抗性基因，因此导入重组质粒的农杆菌能在含有氨苄青霉素的培养基上能生存，但不能在含有四环素培养基上生存，所以培养基A和培养基B分别还含有氨苄青霉素、四环素，含目的基因的是4和6菌落中的细菌。除了从分子水平上进行检测，还可以从个体水平上进行鉴定，即用一定浓度的盐水浇灌烟草植株来鉴定烟草的耐盐性。 23. 基因工程在生产中有很多应用。为给转基因生物安全的监管提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。请回答下列问题： （1）PCR反应体系中通常含有模板DNA、引物（引物A和引物B）、4种dNTP、_______、缓冲液（含Mg2+）等。其中dNTP的作用是_______。根据目的基因序列设计引物时，下列说法不正确的是_______。 A.每种引物自身不能折叠后发生碱基互补配对 B.两种引物中G+C的含量相差不宜过大，否则复性温度难于统一 C.引物的长度不宜过短，防止与模板链难以结合 D.两种引物之间不能发生碱基互补配对 （2）PCR一般要经历三十多次循环，在循环之前，常要进行一次预变性，其目的是_______。PCR过程中断开或形成的化学键是_______。 （3）若PCR循环5次，共消耗引物_______个，含引物B的DNA占全部DNA的比例为_______。 （4）某基因一条链的两端序列如下图所示，采用PCR技术扩增该基因时，应选用的引物组合为______。 A. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3' B. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3' C. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-ATCATCCAAG-3' D. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3' （5）经PCR得到的目的基因进入受体细胞后是否表达出相应的蛋白质还需要进一步检测，所用的方法是_______。 【答案】（1） ①. Taq酶     ②. 提供原料和能量 ③. C （2） ①. 增加大分子模板 DNA 彻底变性的概率（使模板 DNA 充分解旋）  ②. 磷酸二酯键 （3） ①. 62 ②. 31/32 （4）A （5）抗原一抗体杂交 【解析】 【小问1详解】 PCR 反应体系中通常含有模板DNA、引物（引物A 和引物B）、4种dNTP、Taq酶、缓冲液（含Mg2+）等； dNTP 是脱氧核苷三磷酸，既能提供能量，也能作为原料合成DNA。 A、引物是与模板链结合，启动DNA复制，因此每种引物自身不能折叠后发生碱基互补配对，A正确； B、复性又称退火，是降低温度使引物与模板结合，两种引物中G+C 的含量相差不宜过大，否则复性温度难于统一，B正确； C、引物的长度不宜过短，若过短则能与很多地方结合，导致特异性降低，出来的条带有很多非目标条带，C错误； D、两种引物之间不能发生碱基互补配对，否则引物无法与模板配对，D正确。 【小问2详解】 PCR 一般要经历三十多次循环，在循环之前，常要进行一次预变性，其目的是增加大分子模板 DNA 彻底变性的概率（使模板 DNA 充分解旋）；新链延伸时，脱氧核苷酸之间形成的磷酸二酯键（DNA 聚合酶催化，将脱氧核苷酸连接成链）。氢键是分子间弱作用力，不属于化学键， 【小问3详解】 只要合成一条子链（新链），都需要一个引物，若PCR 循环5次，共合成25=32个DNA分子，减去原来1个模板DNA，共合成了32-1=31个DNA，共合成了新链31×2=62条，因此共消耗引物62个；32个DNA分子，有30个为一条有引物A、一条有引物B，1个DNA为模板链和含引物A的链，1个DNA为模板链和含引物B的链，因此引物B所在的DNA为31个，占比31/32。 【小问4详解】 引物与模板链的3' 端互补配对，-OH端为3' 端，因此与模板链3' 端配对的引物为5'-CTTGGATGAT-3'和 5'-TCTGTTGAAT-3' ，A正确，BCD错误。 【小问5详解】 检测目的基因是否表达可以用抗原-抗体杂交的方法，将待测蛋白质当作抗原，加入与其能特异性结合的物质，当作抗体，若有杂交条带，则说明目的基因成功表达，反之则无。 24. 基因测序技术在基因工程中被广泛运用，SOLID测序是基于DNA连接酶法，利用四色荧光标记寡核苷酸探针进行测序的技术。其一般流程如下图所示。请回答下列问题。 （1）流程1利用PCR技术扩增目的基因时，反应体系中需加入引物，引物结合的位置为_______（填字母），其作用是______。 （2）流程2构建8碱基单链荧光探针时，其第1位和第2位碱基是确定的，探针的_______端分别添加了红蓝绿黄4种颜色的荧光蛋白。DNA连接酶催化形成_______键连接两个DNA片段。 （3）流程3测序时，荧光探针与待测序列通过_______原则配对，之后通过化学方法在第_______位碱基之间进行切割并发出代表探针第1、2位碱基的荧光信号被计算机记录，每次测序的位置间隔_______个碱基。在测序完成后，要将新连接的DNA单链变性并洗脱。接着用引物n-1进行第二轮测序。引物n-1与引物n的区别是，二者在与接头配对的位置上相差一个碱基。以此类推，直至第_______轮测序结束可以完成所有位置的碱基测序。 （4）下图为某次测序结果，结合碱基组合和荧光颜色对应表，待测序列前6位碱基依次为_______。该测序法的最大优点在于每个测量位点进行了_______次测序，大大提高了准确率。 【答案】（1） ①. b、c ②. 使DNA聚合酶沿着3′端聚合脱氧核苷酸 （2） ①. 5' ②. 磷酸二酯 （3） ①. 碱基互补配对 ②. 5和6 ③. 3##三 ④. 五 （4） ①. CGTGTG ②. 2##二##两 【解析】 【小问1详解】 流程1利用PCR技术扩增目的基因时，反应体系中需加入引物，子链的延伸发生在引物的3′端，且DNA单链之间是反向平行的，因此引物需要反向接在模板链的3'端，因此，图示引物结合的位置为b、c，引物的作用是使脱氧核苷酸依次连在引物的3'端，并与模板链之间进行碱基互补配对，即引物的作用表现为使DNA聚合酶沿着3′端连接脱氧核苷酸。 【小问2详解】 流程2构建8碱基单链荧光探针时，其第1位和第2位碱基是确定的，结合图示可知，探针的5′端分别添加了红蓝绿黄4种颜色的荧光蛋白。DNA连接酶催化形成磷酸二酯键连接两个DNA片段，进而形成DNA分子的基本骨架。 【小问3详解】 流程3测序时，荧光探针与待测序列通过碱基互补配对原则配对，之后通过化学方法在第5和6位碱基之间进行切割并发出代表探针第1、2位碱基的荧光信号被计算机记录，每次测序的位置间隔3个碱基。在测序完成后，要将新连接的DNA单链变性并洗脱。接着用引物n-1进行第二轮测序。引物n-1与引物n的区别是，二者在与接头配对的位置上相差一个碱基。以此类推，直至第五轮测序结束可以完成所有位置的碱基测序。 【小问4详解】 下图为某次测序结果，根据黄的第一位碱基是A并结合表格可推测，黄色荧光对应的序列为AG，因而对应红色荧光序列为GC，结合表格可分析出四个绿色依次为CA、AC、CA、AC，而后对应的红色为CG，因此相应的子链序列为AGCACAC，由于第一个碱基A对应的T是已知的，因此，根据碱基互补配对原则可以看出模板上对应的碱基序列为CGTGTG。该测序法的最大优点在于每个测量位点进行了2次测序，即进行了两次重复的配对，因而大大提高了准确率。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 徐州七中高二年级3月学情调研生物试卷 试卷总分：100分 考试时间：75分钟 一、单项选择题：共15题，每题2分，共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 下列有关基因工程的说法，不正确的是（ ） A. 基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的 B. 工具酶和载体的发现使基因工程的实施成为可能 C. 遗传密码的破译为基因工程的诞生提供了理论依据 D. “自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后，其DNA整合到细菌DNA上”，这符合基因工程的概念 2. 透明质酸是一种应用广泛的黏多糖，透明质酸合成酶在透明质酸的合成中发挥重要作用。透明质酸合成酶基因H上的一段核苷酸序列为“—ATCTCGAGCGGG—”，某限制酶可对该段序列进行识别和切割，则该限制酶识别的核苷酸序列最可能为（ ） A. —TCTCGA— B. —CTCGAG— C. —CGAGCG— D. —TCGAGC— 3. 一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割，切割产物通过电泳分离，用长度已知的DNA片段的电泳结果作为分子量标记（图中左边第一列）。关于该双链DNA，下列说法错误的是（ ） A. 呈环状结构 B. 长度为10kb C. 有一个限制酶NotI和两个限制酶EcoRI切割位点 D. 其限制酶NotI切割位点与限制酶EcoRI切割位点的最短距离为2kb 4. 限制性内切酶EcoRI识别并切割双链DNA，用EcoRI完全酶切果蝇基因组DNA，理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为（ ） A. 6 B. 250 C. 4000 D. 24000 5. DNA连接酶是基因工程的必需工具，下列有关DNA连接酶的叙述，正确的是（ ） A. DNA连接酶可以将任意的两个DNA片段连接成一个重组DNA分子 B. DNA连接酶发挥作用时需要识别特定的脱氧核苷酸序列 C. DNA连接酶可以催化两个DNA片段的连接 D. T4DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于E.coliDNA连接酶 6. 基因工程中将外源基因送入细胞需要一定的载体，下列关于载体的叙述，错误的是（ ） A. 具有1个至多个限制酶切割位点以供目的基因插入其中 B. 具有特殊的标记基因以便于目的基因能准确定位并与之结合 C. 能在受体细胞中稳定存在并复制以利于目的基因的存在和复制 D. 基因工程中所用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 7. 构建基因表达载体时，可利用碱性磷酸单酯酶催化载体的5'-Р变成5'-0H，如图所示。将经过该酶处理的载体与外源DNA连接时，由于5'-0H与3'-0H不能连接而形成切口（nick）。下列说法错误的是（ ） A. 经碱性磷酸单酯酶处理的载体不会发生自身环化 B. 外源DNA也必需用碱性磷酸单酯酶处理 C. T4DNA连接酶可连接黏性末端和平末端 D. 重组DNA经过2次复制可得到不含nick的子代DNA 8. PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，与人体细胞内DNA分子复制相比，下列有关叙述错误的是（ ） A. 都遵循碱基互补配对原则 B. DNA聚合酶作用的最适温度不同 C. 都是边解旋边复制的过程 D. 复制方式都是半保留复制 9. 基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因工程操作的基本步骤中，无需进行碱基互补配对的步骤是（ ） A. 人工合成目的基因 B. 基因表达载体的构建 C. 将目的基因导入受体细胞 D. 目的基因的检测与鉴定 10. 基因工程中，目的基因的获取方法有多种，如从基因文库中获取、PCR扩增、人工合成等。下列关于目的基因获取方法的叙述，错误的是（　　） A. 从基因组文库中获取的目的基因可能含内含子，而cDNA文库中的目的基因不含内含子 B. PCR扩增目的基因时，需要已知目的基因的核苷酸序列来设计引物 C. 人工合成目的基因适用于目的基因序列较短、已知核苷酸序列的情况 D. 从cDNA文库中获取目的基因时，需先提取受体细胞的mRNA，再反转录合成cDNA 11. 甲醇酵母菌是基因工程中常用的受体菌，它可以高效表达外源蛋白，但自身蛋白分泌到培养基的较少。研究人员将人的胶原蛋白基因导入甲醇酵母中并成功表达。下列有关叙述错误的是（　　） A. 用两种酶切割目的基因和质粒，可防止目的基因反向连接和质粒的自身环化 B. 常用显微注射法将胶原蛋白基因导入甲醇酵母中 C. 与大肠杆菌相比，甲醇酵母作受体菌所表达出的胶原蛋白与人体产生的胶原蛋白结构更相近 D. 与其他酵母菌相比，甲醇酵母作受体菌便于表达出的胶原蛋白的分离与纯化 12. 筛选是生物技术中的一个重要环节。下列叙述正确的是（ ） A. 基因工程中，利用目的基因对受体细胞进行筛选 B. 通过在培养基中添加抗生素，可以初步筛选出含有质粒或重组质粒的受体细胞 C. 检测目的基因能否稳定遗传的关键是看目的基因是否成功构建为基因表达载体 D. 只要检测到目的基因成功表达出蛋白质，就证明基因工程取得成功 13. 下列有关基因工程的成果及应用的叙述，错误的是（ ） A. 基因工程可实现基因在不同物种之间的转移 B. 将人的胰岛素基因导入大肠杆菌后，表达出的胰岛素与人的胰岛素结构完全相同 C. 基因工程在给人类生产和生活带来益处的同时，也使人们产生关于其安全性方面的担忧 D. 基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物 14. 应用基因工程技术诊断疾病的过程中必须使用基因探针才能达到目的。这里的基因探针是指（ ） A. 能够指导合成免疫球蛋白的DNA分子 B. 细胞工程生产的单克隆抗体 C. 用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子 D. 用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 15. 基因治疗是治疗遗传病的有效手段，分为体外基因治疗和体内基因治疗。复合型免疫缺陷症是由于腺苷酸脱氨酶（ADA）基因缺失导致的遗传病，患者免疫系统功能异常，目前常采用体外基因治疗方案：抽取患者淋巴细胞，导入正常ADA基因，培养后回输患者体内。下列关于该体外基因治疗的叙述，正确的是（　　） A. 该治疗方案可彻底改变患者所有体细胞的基因组成 B. 导入正常ADA基因的淋巴细胞可在患者体内无限增殖 C. 治疗的核心是将正常基因导入受体细胞以替代缺陷基因 D. 该方法操作复杂，但效果比体内基因治疗更可靠 二、多项选择题：共4小题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对得3分，选对但不全对得1分，错选或不答得0分。 16. 下列关于基因工程基本工具的叙述，错误的是（ ） A. 限制性内切核酸酶能够识别新冠病毒特定的核苷酸序列并在特定位点切开磷酸二酯键 B. EcoRI识别序列和切割位点为G↓AATTC，则形成的黏性末端为AATTC- C. 与DNA聚合酶不同，DNA连接酶发挥作用时不需要DNA模板 D. 用限制酶切割DNA分子中部，获得一个目的基因时被水解的磷酸二酯键有2个 17. 热启动PCR可提高扩增效率，其基本方法是：进行反应之前将TaqDNA聚合酶、dNTP和引物等先不要加入样品管内，而是将样品加热，待温度升到70度以上时，再将上述试剂加入，开始PCR反应，下列叙述正确的有（ ） A. Taq酶最适催化温度范围为50—60℃ B. 与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物 C. 两条子链合成一定都是从端向端延伸 D. PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了TaqDNA聚合酶的特异性 18. 荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量，其原理是在PCR反应体系中每加入一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的荧光探针，当Taq酶催化子链延伸至探针处，会水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述错误的是（ ） A. 引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循碱基互补配对原则 B. Taq酶催化子链从3端向5端延伸，需dNTP作为原料 C. 若某次PCR反应共产生52个等长DNA，则需加入6个荧光探针 D. 反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关 19. 基因组编辑技术是研究基因生物功能的重要手段，下图是对某生物B基因进行定点编辑的过程，该过程中用sgRNA可指引核酸内切酶Cas9结合到特定的切割位点，相关说法正确的是（　　） A. 靶基因部分序列与sgRNA通过碱基互补配对原则进行配对 B. 核酸内切酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键 C. 被编辑后的B基因与编辑前的B基因互称为非等位基因 D. 通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能 三、非选择题：共5题，共58分。除特殊说明外，每空1分。 20. 某小组进行了“DNA的粗提取与鉴定”实验，部分实验步骤如图所示，其中B为可能会加入的某试剂。回答下列问题： （1）该实验利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是______。 （2）若实验材料A为菜花等硬度较高的植物，则B可能是______酶等，上述酶可以破坏植物细胞的细胞壁，加强研磨效果。 （3）该小组向滤液C中加入了适量的嫩肉粉（含有木瓜蛋白酶）并将其置于55~60℃下5～10分钟，推测嫩肉粉的作用是______。 （4）将上述滤液C冷却后加入______溶液，静置几分钟后得到的白色丝状物就是粗提取的DNA。将丝状物处理后溶于适量______；mol·L-1的NaCl溶液中进行鉴定。鉴定时所用的是______试剂，DNA遇该试剂会呈现______色，该试剂在使用时应注意的事项有______（答出1点）。 21. 水稻基因组中的B基因仅在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，科研人员设计了下图1所示实验。请回答下列问题： （1）为获取图1中水稻B基因编码蛋白的序列（740bp），通常采用从_______中提取总RNA，经______技术从而获得大量的B基因编码序列。 （2）检测转基因水稻是否含有融合基因，可通过PCR技术对融合基因进行扩增并通过______电泳进行鉴定，需注意观察当_______前沿接近凝胶边缘时，停止电泳，取出凝胶置于_______下观察和照相。对于电泳结果符合预期的基因片段，通常还需进一步通过基因测序确认，原因是_______。 （3）检测转基因水稻是否成功表达，可从转基因水稻的_______中提取蛋白质，并在其中加入______，观察是否发出荧光。 （4）已知蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为0.11kDa，将融合基因表达的蛋白先进行凝胶电泳，然后用B蛋白抗体进行杂交，显示的条带应是_______（从图2的“A～D”中选填）。 （5）从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育，由此表明_______。 22. 科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草，培育过程如下图所示，图1中SalI、HindIII、BamHI代表相关限制酶切割位点，同时还含有抗四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答下列问题。 （1）复制原点是复制起始序列，是_______酶的作用位点，该序列富含_______碱基对。启动子是_______酶的作用位点，转录沿DNA模板链的_______方向进行。 （2）过程①构建重组质粒应选用_______酶切割，酶切后通过DNA连接酶作用后获得重组质粒，以保证重组DNA序列的唯一性，过程②将其转入处于_______态的农杆菌。 （3）将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用_______技术，愈伤组织经过程⑤_______形成完整植株。 （4）基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法）检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基A和培养基B分别还含有______、______。从检测筛选的结果分析，含有目的基因的是_______（填图中数字）菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功，需使用_______方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 23. 基因工程在生产中有很多应用。为给转基因生物安全的监管提供依据，采用PCR方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。请回答下列问题： （1）PCR反应体系中通常含有模板DNA、引物（引物A和引物B）、4种dNTP、_______、缓冲液（含Mg2+）等。其中dNTP的作用是_______。根据目的基因序列设计引物时，下列说法不正确的是_______。 A.每种引物自身不能折叠后发生碱基互补配对 B.两种引物中G+C的含量相差不宜过大，否则复性温度难于统一 C.引物的长度不宜过短，防止与模板链难以结合 D.两种引物之间不能发生碱基互补配对 （2）PCR一般要经历三十多次循环，在循环之前，常要进行一次预变性，其目的是_______。PCR过程中断开或形成的化学键是_______。 （3）若PCR循环5次，共消耗引物_______个，含引物B的DNA占全部DNA的比例为_______。 （4）某基因一条链的两端序列如下图所示，采用PCR技术扩增该基因时，应选用的引物组合为______。 A. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TCTGTTGAAT-3' B. 5'-CTTGGATGAT-3'和5'-TAAGTTGTCT-3' C. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-ATCATCCAAG-3' D. 5'-ATTCAACAGA-3'和5'-GAACCTACTA-3' （5）经PCR得到的目的基因进入受体细胞后是否表达出相应的蛋白质还需要进一步检测，所用的方法是_______。 24. 基因测序技术在基因工程中被广泛运用，SOLID测序是基于DNA连接酶法，利用四色荧光标记寡核苷酸探针进行测序的技术。其一般流程如下图所示。请回答下列问题。 （1）流程1利用PCR技术扩增目的基因时，反应体系中需加入引物，引物结合的位置为_______（填字母），其作用是______。 （2）流程2构建8碱基单链荧光探针时，其第1位和第2位碱基是确定的，探针的_______端分别添加了红蓝绿黄4种颜色的荧光蛋白。DNA连接酶催化形成_______键连接两个DNA片段。 （3）流程3测序时，荧光探针与待测序列通过_______原则配对，之后通过化学方法在第_______位碱基之间进行切割并发出代表探针第1、2位碱基的荧光信号被计算机记录，每次测序的位置间隔_______个碱基。在测序完成后，要将新连接的DNA单链变性并洗脱。接着用引物n-1进行第二轮测序。引物n-1与引物n的区别是，二者在与接头配对的位置上相差一个碱基。以此类推，直至第_______轮测序结束可以完成所有位置的碱基测序。 （4）下图为某次测序结果，结合碱基组合和荧光颜色对应表，待测序列前6位碱基依次为_______。该测序法的最大优点在于每个测量位点进行了_______次测序，大大提高了准确率。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $