江苏省徐州市第七中学2025-2026学年下学期高二3月学情调研生物试题

徐州七中高二年级3月学情调研生物试卷 试卷总分：100分考试时间：75分钟 一、单项选择题：共15题，每题2分，共30分。每题只有一个选项最符合题意。 1.下列有关基因工程的说法，不正确的是( A.基因工程是在生物化学、分子生物学和微生物学等学科的基础上发展起来的 B.工具酶和载体的发现使基因工程的实施成为可能 C.遗传密码的破译为基因工程的诞生提供了理论依据 D.“自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌后，其DNA整合到细菌DNA上”，这符合基 因工程的概念。 2.透明质酸是一种应用广泛的黏多糖，透明质酸合成酶在透明质酸的合成中发挥重要作用。 透明质酸合成酶基因H上的一段核苷酸序列为“一ATCTCGAGCGGG-一”，某限制酶可对该段序 列进行识别和切割，则该限制酶识别的核苷酸序列最可能为() A.-TCTCGA- B.—CTCGAG-- C.-CGAGCG D.-TCGAGC- 3.一种双链DNA分子被三种不同的限制酶切割，切割产物通过电泳分离，用长度已知的DNA 片段的电泳结果作为分子量标记（图中左边第一列）。关于该双链DNA,下列说法错误的是 () 分子量 标记EcoR I Not I Not I+EcoR I A.呈环状结构 10F B.长度为10kb 18 C.有一个限制酶otI和两个限制酶 饼 EcoR I切割位点 5 4 D.其限制酶otI切割位点与限制酶 3.5 EcoR I切割位点的最短距离为2kb 5-GAATTC-3' 3-CTTAAG-5' 4.限制性内切酶EcoR I识别并切割 双链DNA,用EcoR I完全酶切果蝇基 因组DNA,理论上得到DNA片段的平均长度（碱基对）约为() A.6 B.250 C.4000 D.24000 5.DNA连接酶是基因工程的必需工具，下列有关DNA连接酶的叙述，正确的是() A.DNA连接酶可以将任意的两个DNA片段连接成一个重组DNA分子 B.DNA连接酶发挥作用时需要识别特定的脱氧核苷酸序列 C.DNA连接酶可以催化两个DNA片段的连接 D.T4DNA连接酶连接具有平末端的DNA片段的效率要远远低于E.coli DNA连接酶 1 6.基因工程中将外源基因送入细胞需要一定的载体，下列关于载体的叙述，错误的是() A.具有1个至多个限制酶切割位点以供目的基因插入其中 B.具有特殊的标记基因以便于目的基因能准确定位并与之结合 C.能在受体细胞中稳定存在并复制以利于目的基因的存在和复制 D.基因工程中所用的载体除质粒外，还有λ噬菌体的衍生物、动植物病毒等 7.构建基因表达载体时，可利用碱性磷酸单酯酶催化载体的5'一P变成5′一0，如图所 示。将经过该酶处理的载体与外源DNA连接时，由于5'一OH与3'一OH不能连接而形成切 口(nick)。下列说法错误的是() 3 5 HO 2 5'3外源DNA HO nick T4DNA nic HO HO HO HO 目载体 连接酶 DNA 碱性磷酸 载体目 单酯酶 A.经碱性磷酸单酯酶处理的载体不会发生自身环化 B.外源DNA也必须用碱性磷酸单酯酶处理 C.T4DNA连接酶可连接黏性末端和平末端 D.重组DNA经过2次复制可得到不含nick的子代DNA 8.PCR是一项在生物体外复制特定DNA片段的核酸合成技术，与人体细胞内DNA分子复制相 比，下列有关叙述错误的是 A.都遵循碱基互补配对原则 B.DNA聚合酶作用的最适温度不同 C.都是边解旋边复制的过程 D.复制方式都是半保留复制 9.基因工程是在DNA分子水平上进行设计施工的。在基因工程操作的基本步骤中，无需进行 碱基互补配对的步骤是(） A.人工合成目的基因 B.基因表达载体的构建 C.将目的基因导入受体细胞 D.目的基因的检测与鉴定 IO.基因工程中，目的基因的获取方法有多种，如从基因文库中获取、PC扩增、人工合成 等。下列关于目的基因获取方法的叙述，错误的是() A.从基因组文库中获取的目的基因可能含内含子，而cDNA文库中的目的基因不含内含子 B.PCR扩增目的基因时，需要已知目的基因的一段核苷酸序列来设计引物 C.人工合成目的基因适用于目的基因序列较短、已知核苷酸序列的情况 D.从cDNA文库中获取目的基因时，需先提取受体细胞的mRNA,再反转录合成cDNA 11.甲醇酵母菌是基因工程中常用的受体菌，它可以高效表达外源蛋白，但自身蛋白分泌到 培养基的较少。研究人员将人的胶原蛋白基因导入甲醇酵母中并成功表达。下列有关叙述错 误的是() A.用两种酶切割目的基因和质粒，可防止目的基因反向连接和质粒的自身环化 B.常用显微注射法将胶原蛋白基因导入甲醇酵母中 C.与大肠杆菌相比，甲醇酵母作受体菌所表达出的胶原蛋白与人体产生的胶原蛋白结构更 相近 D.与其它酵母菌相比，甲醇酵母作受体菌便于表达出的胶原蛋白的分离与纯化 12.筛选是生物技术中的一个重要环节。下列叙述正确的是() A.基因工程中，利用目的基因对受体细胞进行筛选 B.通过在培养基中添加抗生素，可以初步筛选出含有质粒或重组质粒的受体细胞 C.检测目的基因能否稳定遗传的关键是看目的基因是否成功构建为基因表达载体 D.只要检测到目的基因成功表达出蛋白质，就证明基因工程取得成功 13.下列有关基因工程的成果及应用的叙述，错误的是() A.基因工程可实现基因在不同物种之间的转移 B.将人的胰岛素基因导入大肠杆菌后，表达出的胰岛素与人的胰岛素结构完全相同 C.基因工程在给人类生产和生活带来益处的同时，也使人们产生关于其安全性方面的担忧 D.基因工程在农业上的应用主要是培育高产、稳产、品质优良和具有抗逆性的农作物 14.应用基因工程诊断疾病的过程需要使用基因探针。这里的基因探针是指() A.能够指导合成免疫球蛋白的DNA分子 B.细胞工程生产的单克隆抗体 C.用放射性同位素或荧光分子等标记的蛋白质分子 D.用放射性同位素或荧光分子等标记的DNA分子 15.基因治疗是治疗遗传病的有效手段，分为体外基因治疗和体内基因治疗。复合型免疫缺 陷症是由于腺苷酸脱氨酶(ADA)基因缺失导致的遗传病，患者免疫系统功能异常，目前常 采用体外基因治疗方案：抽取患者淋巴细胞，导入正常ADA基因，培养后回输患者体内。下 列关于该体外基因治疗的叙述，正确的是( A.该治疗方案可彻底改变患者所有体细胞的基因组成 B.导入正常ADA基因的淋巴细胞可在患者体内无限增殖 C.治疗的核心是将正常基因导入受体细胞以替代缺陷基因 D.该方法操作复杂，但效果比体内基因治疗更可靠 二、多项选择题：共4小题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每 题全选对得3分，选对但不全对得1分，错选或不答得0分。 16.下列关于基因工程基本工具的叙述，错误的是( ) A.限制性内切核酸酶能够识别新冠病毒特定的核苷酸序列并在特定位点切开磷酸二酯键 B.EcoRI识别序列和切割位点为G↓AATTC,则形成的黏性末端为AATTC 3 C.与DNA聚合酶不同，DNA连接酶发挥作用时不需要DNA模板 D.用限制酶切割DNA分子中部，获得一个目的基因时被水解的磷酸二酯键有2个 I7.热启动PCR可提高扩增效率，其基本方法是：进行反应之前将TaqDNA聚合酶、dNTP和 引物等先不要加入样品管内，而是将样品加热，待温度升到70度以上时，再将上述试剂加 入，开始PCR反应，下列叙述正确的有() A.Taq酶最适催化温度范围为50一60℃ B.与常规PCR相比，热启动PCR可减少反应起始时引物错配形成的产物 C.两条子链合成一定都是从5'端向3'端延伸 D.PCR产物DNA碱基序列的特异性体现了TaqDNA聚合酶的特异性 I8.荧光定量PCR技术可定量检测样本中某种DNA含量，其原理是在PCR反应体系中每加入 一对引物的同时加入一个与某条模板链互补的 荧光探针 荧光探针，当Tag酶催化子链延伸至探针处，会 引物1 3 水解探针，使荧光监测系统接收到荧光信号，即 3 引物2 每扩增一次，就有一个荧光分子生成。相关叙述 荧光 错误的是( A.引物与探针均具特异性，与模板结合时遵循 碱基互补配对原则 B.Tag酶催化子链从3'端向5'端延伸，需dNTP作为原料 C.若某次PCR反应共产生52个等长DNA,则需加入6个荧光探针 D.反应最终的荧光强度与起始状态模板DNA含量呈正相关 19.基因组编辑技术是研究基因生物功能的重要手段，下图是对某生物B基因进行定点编辑 的过程，该过程中用sgRNA可指引内切核酸酶Cs9结合到特定的切割位点，相关说法正确 的是( Cas9 sgRNA2 水解 被剪下的NA片段 血 编辑前的B基因 编辑后的B基因 A.靶基因部分序列与sgRNA通过碱基互补配对原则进行配对 B.内切核酸酶Cas9可断裂脱氧核糖核苷酸之间的磷酸二酯键 C.被编辑后的B基因与编辑前的B基因互称为非等位基因 D.通过破坏B基因后生物体的功能变化可推测B基因的功能 4 三、非选择题：共5题，共58分。除特殊说明外，每空1分。 20.(10分)某小组进行了“DNA的粗提取与鉴定”实验，部分实验步骤如图所示，其中B 为可能会加入的某试剂。请回答下列问题： 实验 材料A 洗净 切成小块 研磨研磨液 滤液C (1)该实验利用酒精初步分离DNA与蛋白质的原理是 (2分)。 (2)若实验材料A为菜花等硬度较高的植物，则B可能是 酶等，上述酶可以破 坏植物细胞的细胞壁，加强研磨效果。 (3)该小组向滤液C中加入了适量的嫩肉粉（含有木瓜蛋白酶）并将其置于55~60℃下5~ 10分钟，推测嫩肉粉的作用是 (4)将上述滤液C加入 溶液，静置几分钟后得到的白色丝状物就是 粗提取的DNA。将丝状物处理后溶于适量 mol·L的NaCl溶液中进行鉴定。鉴定 时所用的是 试剂，DNA遇该试剂会呈现 色，该试剂在使用时应注意 的事项有 (2分)。 21.(11分)水稻基因组中的B基因仅在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。 为研究B基因表达对卵细胞的影响，科研人员设计了下图1所示实验。请回答下列问题： 水稻B基因 荧光素酶 编码蛋白的序列Luc基因(460bp) T-DNA ☑ 27777722 1 B-Luc融合基因 ② 农杆菌 水稻 鉴定 启动子* 愈伤组织 水稻幼苗 筛选 潮霉素 -DN 终止子 鉴定 筛选 抗性基因 表状 卡那霉素 载体 *可在水稻卵细胞中启动转录的启动子 转基因 抗性基因 植株 图1 (1)为获取图1中水稻B基因编码蛋白的序列(740bp),通常采用从 中提取 总RNA,经 技术从而获得大量的B基因编码序列。 (2)检测转基因水稻是否含有融合基因，可通过PCR技术对融合基因进行扩增并通过 电泳进行鉴定，需注意观察当 前沿接近凝胶边缘时，停止电泳，取出 凝胶置于 下观察和照相。对于电泳结果符合预期的基因片段，通常还需进一步 通过基因测序确认，原因是 (3)检测转基因水稻是否成功表达，可从转基因水稻的 中提取蛋白质，并在其中加 观察是否发出荧光。 5 (4)已知蛋白质中氨基酸残基的平均相对分子质量约为 M A C D kDa 0.11kDa,将融合基因表达的蛋白先进行凝胶电泳，然后用 100 B蛋白抗体进行杂交，显示的条带应是 (从图2的 70 55 “AD”中选填)。 40 (5)从转基因植株未成熟种子中分离出胚，观察到细胞内 35 仅含一个染色体组，判定该胚是由未受精的卵细胞发育形 25 成的，而一般情况下水稻卵细胞在未受精时不进行发育， 由此表明 。(2分) 15 图2 22.(12分)科学家从某细菌中提取抗盐基因，转入烟草并培育成转基因抗盐烟草，培育过 程如下图所示，图1中SalI、HindIII、BaI代表相关限制酶切割位点，同时还含有抗 四环素基因和抗氨苄青霉素基因。请回答下列问题。 Hind M BamHI SalI 含抗盐基 农杆菌 5 因的DNA 3 Sal I 抗盐基因 ④愈伤组织 SalI 重组 一抗四环素基因 抗氨苄青 质粒 质粒 BamHI 烟草细胞 转基因抗盐 霉素基因 HindⅢ 烟草幼苗 图1 (1)复制原点是复制起始序列，是 酶的作用位点，该序列富含」 碱基对。启动 子是 酶的作用位点，转录沿DNA模板链的 方向进行。 (2)过程①构建重组质粒应选用 酶切割，酶切后通过DNA连接酶作用后获得重 组质粒，以保证重组DNA序列的唯一性，过程②将其转入处于 态的农杆菌。 (3)将转入抗盐基因的烟草细胞培育成完整的植株需要用 技术，愈伤组织经过程 ⑤ 形成完整植株。 12 3 。质粒 菌落 培养基B 3 5 ●4 56 1? 3 土壤农杆菌 培养基A ●4 培养基A 6 图2 (4)基因工程中的检测筛选是一个重要的步骤。为筛选出导入了重组质粒的农杆菌，图2 表示运用影印培养法（使一系列培养皿的相同位置上能出现相同菌落的一种接种培养方法） 检测基因表达载体是否导入了农杆菌。培养基除了含有细菌生长繁殖必需的成分外，培养基 A和培养基B分别还含有 。从检测筛选的结果分析，含有 目的基因的是 (填图中数字)菌落中的细菌。为了确定抗盐烟草是否培育成功， 需使用 方法从个体水平鉴定烟草植株的耐盐性。 6 23.(14分)基因工程在生产中有很多应用。为给转基因生物安全的监管提供依据，采用PCR 方法进行目的基因监测，反应程序如图所示。请回答下列问题： 预变性 变性 94'℃，1min 94℃，30s 延伸 后延伸 复性 72℃，30s72℃，1min 58℃，30s 35次循环 (I)PCR反应体系中通常含有模板DNA、引物（引物A和引物B)、4种dNTP、 缓冲液（含Mg2+)等。其中dNTP的作用是 。 根据目的基因 序列设计引物时，下列说法不正确的是 。(2分) A.每种引物自身不能折叠后发生碱基互补配对 B.两种引物中G+C的含量相差不宜过大，否则复性温度难于统一 C.引物的长度不宜过短，防止与模板链难以结合 D.两种引物之间不能发生碱基互补配对 (2)PC一般要经历三十多次循环，在循环之前，常要进行一次预变性，其目的是 。 PCR过程中断开或形成的化学键有 (2分)。 (3)若PCR循环5次，共消耗引物 (2分)个，含引物B的DNA占全部DNA 的比例为 (2分)。 (4)某基因一条链的两端序列如下图所示，采用PCR技术扩增该基因时，应选用的引物组 合为 。(2分) ® OH HO AGACAACTTA TAGTAGGTTC A.5-CTTGGATGAT-3'5-TCTGTTGAAT-3' B.5'-CTTGGATGAT-3'5'-TAAGTTGTCT-3 C.5'-ATTCAACAGA-3'5'-ATCATCCAAG-3' D.5'-ATTCAACAGA-3'5'-GAACCTACTA-3' (⑤)经PCR得到的目的基因进入受体细胞后是否表达出相应的蛋白质还需要进一步检测，所 用的方法是 24.(11分)基因测序技术在基因工程中被广泛运用，SOLID测序是基于DNA连接酶法， 利用四色荧光标记寡核苷酸探针进行测序的技术。其一般流程如下图所示。请回答下列问题。 流程1：PCR扩增 流程2：设计荧光探针 b 目的基因 已知序列 AT 荧光蛋白 流程3：SOLD测序 第一轮反应： 蓝 AA 4 HO 切除并记录荧光 其他探针等 引物n AT TA 待测序列 第二轮反应： CA 绿 HO- 切除并记录荧光 其他探针等 AA 引物十十十王刻 待测序列 4年年年年● (1)流程1利用PCR技术扩增目的基因时，反应体系中需加入引物，引物结合的位置为 (填字母)，其作用是 0 (2)流程2构建8碱基单链荧光探针时，其第1位和第2位碱基是确定的，探针的 端分别添加了红蓝绿黄4种颜色的荧光蛋白。DNA连接酶催化形成 键连接两个 DNA片段。 (3)流程3测序时，荧光探针与待测序列通过 原则配对，之后通过化学方法在 第 位碱基之间进行切割并发出代表探针第1、2位碱基的荧光信号被计算机记录， 每次测序的位置间隔 个碱基。在测序完成后，要将新连接的DNA单链变性并洗脱。 接着用引物n一1进行第二轮测序。引物n一1与引物n的区别是，二者在与接头配对的位置 上相差一个碱基。以此类推，直至第轮测序结束可以完成所有位置的碱基测序。 (4)下图为某次测序结果，结合碱基组合和荧光颜色对应表，待测序列前6位碱基依次为 (2分)。该测序法的最大优点在于每个测量位点进行了次测序，大大提高了 准确率。 引物ns 第2位碱基 引物n-1 第 ACGT A蓝绿黄红 位C 绿蓝红黄 碱G 黄红蓝绿 基T红黄绿蓝 123456 待测序列 碱基组合与荧光颜色对应表 8