内容正文:
细胞工程
爱心献给学生,诚心留给家长,信心留给自己
考情分析
2025年山东卷第14题
2024年山东卷第20题
2023年山东卷第14题
2022年山东卷第15题
2021年山东卷第15题
题型涵盖选择与简答题,分值3-9分。常结合科研实例,注重知识运用与分析能力 。
复习目标
比较植物组织培养与植物体细胞杂交技术的原理、流程;
01
能够说出动物细胞培养和核移植的过程;
02
系统梳理单克隆抗体制备流程,构建技术流程-原理支撑-应用场景的认知流程。
03
重难点
植物细胞工程
PART 02
移栽成活
核心考点1:植物组织培养
外植体
生根
生芽
愈伤组织
易错点
3、一般情况下,愈伤组织吸水是否会涨破?
2、外植体是消毒还是灭菌,具体方法为?
4、生长素和细胞分裂素的使用比例分别是?对于细胞分裂的作用分别为?
1、植物组织培养的原理是什么?为什么有的细胞未表现出全能性?
植物细胞具有全能性;基因的选择性表达
消毒;流水冲洗、酒精消毒30s、无菌水清洗2-3次、次氯酸钠30min、无菌水冲洗2-3次
不定形的薄壁组织团块
生长素促进细胞核的分裂;
细胞分裂素促进细胞质的分裂
典型例题
例1.(2025·江苏,4)如图表示一种植物组织培养周期,①~③表示相应过程。下列相关叙述
错误的是( )
A.过程①发生了细胞的脱分化和有丝分裂
B.过程②经细胞的再分化形成不同种类的细胞
C.过程②③所用培养基的成分、浓度相同
D.培养基中糖类既能作为碳源,又与维持渗透压有关
C
植物组织培养与植物细胞培养的主要区别:
外植体
目标1
植物体
愈伤组织
脱分化
根、芽
再分化
目标2
细胞产物的工厂化生产
(1)植物组织培养一般获得完整植物,而植物细胞培养技术是工厂化生产相关代谢产物的一条有效途径,在生产中通常要培养到愈伤组织阶段。因为此时细胞分裂能力旺盛,代谢快,有利于产物生成。
(2)植物组织培养的原理是植物细胞的全能性,植物细胞培养的原理是细胞增殖。
深度思考:
1.(2025·山东烟台·三模)芦笋是雌雄异株植物,雄株性染色体为XY,雌株为XX;其幼茎可食用,雄株产量高。以下为两种培育雄株的技术路线,有关说法错误的是( )
A.提高生长素与细胞分裂素的比例可促进根的分化
B.经脱分化和再分化形成幼苗甲、乙和丙过程均有基因的选择性表达
C.雄株丁亲本的性染色体组成分别为XX、XX
D.植株乙、丙和丁的培育过程中均发生了基因重组
变式训练
C
花粉是经过减数分裂产生的,其配子含有X染色体或Y染色体,经过花药离体培养,得到单倍体,再经过染色体加倍处理后得到的植株乙与丙的性染色体组成为XX或YY,因此雄株丁的亲本的性染色体组成分别为XX、YY
8
移栽成活
核心考点2:植物体细胞杂交技术
生根
生芽
愈伤组织
易错点
A
B
C
1.纤维素酶和果胶酶适用于细菌去壁吗?
3.诱导原生质体融合的结果有哪些?
2.植物体细胞杂交技术的步骤和原理是?
4.两个标志分别是什么?
不适用于
原生质体融合(细胞膜的流动性)、
植物组织培养(植物细胞的全能性)
未融合、两两融合、多细胞融合
细胞壁、杂种植株
深度思考:
1.植物体细胞杂交的培养基中要添加蔗糖溶液且浓度略大于原生质体内的浓度,原因是:
____________________________________________________
2.植物体细胞杂交和有性杂交的辨析:A:2x B:2y
类型 生殖方式 变异类型 孟德尔遗传定律 细胞中染色体数目
植物体细胞杂交 无性生殖 染色体变异 不遵循 2x+2y
植物有性杂交 有性生殖 基因重组 遵循 x+y
添加蔗糖溶液且浓度略大于原生质体内的浓度,这样不仅能为原生质体提供营养,还能维持一定的渗透压,使原生质体保持正常的形态。
典型例题
例2.(2024·山东·高考真题 不定项)下列关于植物愈伤组织的说法正确的是( )
A.用果胶酶和胶原蛋白酶去除愈伤组织的细胞壁获得原生质体
B.融合的原生质体需再生出细胞壁后才能形成愈伤组织
C.体细胞杂交获得的杂种植株细胞中具有来自亲本的2个细胞核
D.通过愈伤组织再生出多个完整植株的过程属于无性繁殖
BD
(2024·山东青岛·二模)植物体细胞杂交可分为对称性和非对称性细胞杂交两类。前者是直接将两个亲本原生质体诱导融合,形成重组细胞。后者指利用紫外线照射等方法使供体亲本染色质片段化,再与未处理的受体亲本融合。研究人员尝试培育产紫杉醇的柴胡,将红豆杉愈伤组织(2n=24)和柴胡愈伤组织(2n=12)进行了非对称性细胞杂交。下列说法正确的是( )
A.该实验中需要用紫外线照射柴胡细胞,使其染色体片段化
B.在诱导愈伤组织的培养基中加入聚乙二醇可诱导细胞融合
C.将染色体数目多于12条的杂种细胞经植物组织培养即可得到产紫杉醇的柴胡
D.对称性细胞杂交技术中不同物种间基因表达的干扰程度高于非对称性细胞杂交技术
变式训练
D
12
动物细胞工程
PART 03
动物细胞培养过程
用机械的方法,或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶处理
分散成单个细胞
加培养液
制成细胞悬液
原代培养(10代以内)
在培养皿或培养瓶中
传代培养(10代以后)
离心法收集
取动物组织(动物胚胎或幼龄动物)
问题
细胞分裂受阻
悬浮生长
贴壁生长
细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等
接触抑制
胰蛋白酶等处理
分瓶
核心考点3:动物细胞培养
1.(2025·河南开封·二模)马丁达比犬肾脏细胞(简称MDCK细胞)是流感病毒感染研究使用最多的细胞系,也是分离、扩增和纯化的流感病毒较理想的细胞系。有关MDCK细胞培养的叙述正确的是( )
A.在培养MDCK细胞过程中会出现细胞贴壁和接触抑制的现象
B.流感病毒侵染MDCK细胞后利用自身遗传物质和原料合成子代
C.培养MDCK细胞,需要为其创造95%O2和5%CO2的气体环境
D.培养MDCK细胞时需要定期更换培养液,目的是减少杂菌污染
A
利用MDCK细胞的物质和能量,以自身遗传物质为模板合成子代病毒
95%空气和5%CO2的气体环境
目的是为细胞提供充足的营养物质,同时去除细胞代谢产生的废物
基础自测
典型例题
例3.(2025·日照阶段检测)部分1型糖尿病(T1DM)是由于免疫系统攻击并破坏胰岛B细胞,胰岛素分泌不足导致的。研究人员将化学重编程多能干细胞(CiPSCs)分化而来的胰岛细胞自体移植到一名T1DM 患者体内,实现了临床功能性治愈,流程如图。下列叙述正确的是( )
A.图中各阶段培养液均含有蔗糖、氨基酸、无机盐、维生素等营养成分
B.上述培养过程均需在 CO₂培养箱中进行,气体中含有5%CO₂以维持pH
C.由脂肪干细胞经 CiPSCs分化成胰岛细胞的过程体现了细胞的全能性
D.上述自体移植过程可完全避免免疫排斥反应,病人无需使用免疫抑制剂
B
核心考点4:单克隆抗体的制备
易错点
1、为什么要给小鼠注射特定的抗原?
得到能产生特定抗体的B淋巴细胞
2、能一次性给小鼠注射大量特定的抗原吗?
应少量多次注射
3、为什么不直接使用浆细胞进行细胞融合?
浆细胞是高度分化的细胞,虽能高效分泌抗体,但失去增殖能力,体外培养中会迅速凋亡,无法长期存活
4、开始获取的B淋巴细胞种类单一吗,为什么?
不单一,存在多种B淋巴细胞,同一抗原可能存在多种抗原决定簇。
5、为什么选择骨髓瘤细胞而不是其他癌细胞?
骨髓瘤细胞是浆细胞的恶性增殖形式,与B细胞具有同源性
6、诱导动物细胞融合特有的方法?
灭活病毒诱导法
核心考点4:单克隆抗体的制备
易错点
血清、组织液、外分泌液(如乳汁)
动物细胞核融合
8、细胞融合结果可能出现几种可能?
未融合;两两融合(3种);多细胞融合
9、克隆化培养的培养基从物理性质分属于什么培养基?会有接触抑制吗?
液体培养基、不会
10、抗体的化学本质是什么?抗体分布在哪里?
11、单克隆抗体的特点?
7、动物细胞融合完成的标志是什么?
能准确识别抗原的细微差异;
与特定抗原发生特异性结合;
可以大量制备
1、单克隆抗体制备过程中两次筛选的方法及目的
项目 第一次筛选 第二次筛选
筛选原因 诱导融合后会得到多种杂交细胞,另外还有未融合的细胞 由于小鼠在生活中还受到其他抗原的刺激,所以经选择性培养获得的杂交瘤细胞中有能产生其他抗体的细胞
筛选方法 用特定的选择培养基筛选:未融合的细胞和同种细胞融合后形成的细胞(BB细胞、瘤瘤细胞)都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞(B瘤细胞)才能生长 用多孔培养皿培养,在每个孔只有一个杂交瘤细胞的情况下开始克隆化培养和抗体检测,经多次筛选得到能产生特异性抗体的细胞群
筛选目的 得到杂交瘤细胞 得到能分泌所需抗体的杂交瘤细胞
深度思考:
典型例题
例4(2022年山东卷15题)如图所示,将由2种不同的抗原分别制备的单克隆抗体分子,在体外解偶联后重新偶联可制备双特异性抗体,简称双抗。下列说法错误的是( )
A.双抗可同时与2种抗原结合
B.利用双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞
C.筛选双抗时需使用制备单克隆抗体时所使用的2种抗原
D.同时注射2种抗原可刺激B细胞分化为产双抗的浆细胞
D
VS
植物体细胞杂交
动物细胞融合
深度思考:
原理
细胞膜的流动性
融合前的处理
除去细胞壁
使细胞分散成单个细胞
相关的酶
纤维素酶和果胶酶
胰蛋白酶和胶原蛋白酶
结果
杂种植株
杂种细胞
细胞膜的流动性、
植物细胞的全能性
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研究者以黑色素瘤模型小鼠为材料,观察了化疗、免疫疗法、化疗+免疫疗法的治疗效果,结果如图所示。其中免疫疗法是指使用单克隆抗体阻断黑色素瘤细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞表面的PD-1的结合,激活细胞毒性T细胞对黑色素瘤细胞的杀伤力。下列叙述正确的是( )
A.据图可知免疫疗法比化疗治疗黑色素瘤效果好,且二者具有协同作用
B.在免疫疗法中,黑色素瘤细胞只会刺激机体产生一种细胞毒性T细胞
C.细胞毒性T细胞起源于骨髓中的造血干细胞,位于血液、淋巴液和淋巴结中
D.利用抗体-药物偶联物进行联合治疗时,应将化疗药物与PD-1单克隆抗体偶联
变式训练
2、单克隆抗体的应用:抗体-药物偶联物
C
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核心考点5:动物细胞核移植技术和克隆动物
易错点
原理是?
去核中“核”指的是?去核方式有哪些?
诱导融合方法和激活重构胚的方法区分?
深度思考:1、体细胞核移植获得的克隆动物与提供细胞核的亲本性状不同的原因:
①克隆动物遗传物质来自两个亲本;
②发育过程中可能发生基因突变或染色体变异;③外界环境可能引起不可遗传的变异
2、克隆动物与试管婴儿生殖方式是否一样?
克隆:无性生殖; 试管婴儿:有性生殖
动物细胞核的全能性
纺锤体-染色体复合物;显微操作、梯度离心、紫外线短时间照射
电融合法;电刺激,乙醇,钙离子载体等
(2024·山东德州·二模 不定项)科研人员成功培育了能分泌含卵泡刺激素(FSH)乳汁的转基因山羊,其基本流程为:含FSH基因表达载体→导入山羊成纤维细胞→核移植→重构胚→检测并获得转基因山羊。下列说法错误的是( )
A.需将转基因成纤维细胞的细胞核移入到MⅡ期的去核卵母细胞中
B.采用电融合法激活重构胚后才能将其移入代孕母羊体内
C.悬浮培养成纤维细胞及重构胚时因无接触抑制现象细胞会持续增殖
D.需根据山羊胚胎的早期发育特点确定重构胚的胚胎移植时期
变式训练
BC
悬浮生长会因细胞密度过大,有害代谢物质积累和营养物质缺乏而分裂受阻
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用户可以在投影仪或者计算机上进行演示也可以将演示文稿打印出来制作成胶片以便应用到更广泛的领域中
用户可以在投影仪或者计算机上进行演示也可以将演示文稿打印出来制作成胶片以便应用到更广泛的领域中
解题思路
课堂小结
知识梳理
1.植物组织培养
2.植物体细胞杂交
3.动物细胞培养
4.单克隆抗体的制备
5.动物细胞和移植技术和克隆动物
1.思维导图理框架;
2.回扣课本打基础;
3.认真析题找得分;
4.做好比较明目的;
5.题型总结拿高分。
1.(2025·广西·高考真题)切取虎尾兰的叶插入土壤,置于适宜条件下培养。一段时间后,切口处会长出新植株。下列有关该过程的说法错误的是( )
A.体现了细胞的全能性
B.受到植物激素的调节
C.属于有性生殖的范畴
D.包含脱分化及再分化
题型攻坚
叶插未经过两性生殖细胞结合,属于无性生殖
C
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2.(2025·贵州·高考真题)下图为PML蛋白单克隆抗体的制备过程。下列叙述正确的是( )
A.应使用总蛋白进行多次免疫且每次免疫间隔适宜时间
B.W细胞是先提取B淋巴细胞再用PML蛋白免疫而获得
C.步骤2的目的是去除不能产生特异性抗体的细胞
D.应选择孔2中的细胞进行后续处理以制备单克隆抗体
题型攻坚
D
应用PML蛋白作为抗原间隔多次免疫小鼠
W细胞是先用PML蛋白免疫而获得相应的B淋巴细胞,后通过筛选提取能产生单一抗体的B淋巴细胞,
步骤2是利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞
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谢谢观看
THANK . YOU
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