黑龙江省五常市雅臣中学校2025—2026学年高二下学期第二次考试生物试题

**基本信息** 本试卷聚焦高二生物选修模块，以微生物发酵、细胞工程、基因工程为核心，融合"土坑酸菜"社会热点与胰岛素生产等科技情境，通过实验分析与流程设计题，考查科学思维与探究实践能力，适配月考阶段性检测需求。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单项选择|25题/50分|微生物发酵（题1）、无菌操作（题2）、基因工程工具酶（题12）|结合3.15曝光事件考泡菜制作（题6），强化社会责任| |不定项选择|5题/15分|降解菌筛选（题26）、细胞融合（题28）|数据表格分析（题26），考查科学思维与证据分析| |非选择题|4题/35分|基因工程生产胰岛素（题34）、核移植培育转基因猪（题32）|实验流程综合题（题34），涵盖PCR、质粒构建，体现探究实践|

五常市雅臣中学高二下学期第二次考试 生物 试题 满分100分 时间75分钟 2026.4.29 一、单项选择题（每题2分，共50分） 1．微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（　　） A．果酒发酵过程温度控制在30℃，果醋发酵过程温度控制在20℃ B．制作果醋需要醋酸菌，它是一种严格厌氧的微生物，可将葡萄中的糖分解为醋酸 C．多种微生物参与了腐乳的制作，如酵母菌、毛霉、曲霉等 D．制作泡菜利用的乳酸菌是一种厌氧微生物，可以通过无氧呼吸产生乳酸和二氧化碳 2.防止杂菌入侵，获得纯净培养物，是研究和应用微生物的前提｡下列叙述错误的是（ ） A.接种室、接种箱或超净工作台在使用前，可以用紫外线照射30min，以杀死物体表面或空气中的微生物，在照射前，适当喷洒石碳酸或煤酚皂液等消毒液，可以加强消毒效果 B.牛奶使用巴氏消毒法处理，在100℃煮30min，可以杀死牛奶中的微生物，且牛奶的营养成分不被破坏 C.在实验室中，不可吃东西、喝水，离开实验室一定要洗手，以防止被微生物感染 D.使用后的培养基丢弃前一定要进行灭菌处理，以免污染环境 3.微生物培养过程中，十分重视无菌操作，现代生物学实验中的许多方面也要进行无菌操作，防止杂菌污染，请分析下列操作，错误的是( ) ①煮沸消毒法可以杀死所有微生物，包括芽孢和孢子 ②接种操作要在酒精灯火焰附近进行 ③无菌繁殖脱毒苗时，应对植物的外植体进行消毒 ④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌 ⑤接种环要进行灼烧灭菌 ⑥植物组织培养、动物细胞培养、无土栽培都需要在无菌无毒环境中进行 A.①③④ B.②④⑥ C.①③⑤ D.①④⑥ 4．在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列相关叙述错误的是（　　） A．两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 B．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，所得数据往往比实际值偏小 C．获取纯培养物的过程中，应根据微生物的种类调整培养基的pH D．对10mL土样样液稀释106倍后，取0.1mL稀释液涂布，测得的菌落数分别为218、266、305，则该10mL土样中目的菌数为2.63×1010个 5. 下列关于发酵工程的叙述中，不正确的是（ ） A. 发酵工程中优良菌种可以从自然界中筛选 B. 对培养基灭菌是发酵工程的中心环节 C. 在发酵过程中，要严格控制温度、pH、溶解氧、通气量与转速等发酵条件 D. 如果发酵产品是微生物细胞本身，可在发酵结束后，采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到产品 6．央视3.15晚会曝光老坛酸菜包里的部分酸菜是从外面收购的“土坑酸菜”。泡菜古称葅，是指为了利于长时间存放而经过发酵的蔬菜。它是一种在低浓度食盐液中泡制的蔬菜乳酸发酵加工品。下列叙述正确的是（ ） A．泡菜主要是靠盐的渗透压来抑制腐败微生物的生长和繁殖 B．腌制时间过短和制作过程污染严重等会使土坑酸菜易腐烂变质 C．泡菜之盐水加热煮沸后应立即加入陈泡菜液以防止杂菌污染 D．制作泡菜时要选择新鲜的原料，且为创设无氧环境泡菜坛要装满 7.下面是有关啤酒的工业化生产的流程｡下列有关叙述错误的是（ ） 发芽→焙烤→研磨→糖化→蒸煮→发酵→消毒→终止 A.焙烤可以杀死大麦种子的胚，并使淀粉酶变性失活 B.发芽的过程中大麦会产生淀粉酶，便于将大麦中的淀粉分解为葡萄糖进行酒精发酵 C.发酵的过程是酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的过程 D.蒸煮可以杀死糖浆中的微生物，避免杂菌污染 8．植物细胞工程包括植物组织培养、植物体细胞杂交等技术，具有广泛的应用前景和实用价值。下列对这些操作或应用的描述错误的是（　　） A．可用PEG诱导植物原生质体融合，再生出细胞壁是融合成功的标志 B．获取植物原生质体时，体现了酶的专一性 C．植物体细胞杂交技术去壁前，需对两种植物细胞进行灭菌处理，以防止杂菌污染D．植物培养基中常用的植物生长调节剂，一般可以分为生长素类、细胞分裂素类 9．将诱导多能干细胞（简称iPS细胞）移植给急性心肌梗死小鼠，检测发现小鼠心肌电生理指标逐渐恢复正常。下列说法不合理的是（    ） A．该实验仅需要正常小鼠作为对照组 B．与成体干细胞相比，iPS细胞的分化潜能更强 C．因为诱导过程无需破坏胚胎，且选择病鼠自身细胞获得iPS细胞再移植可避免免疫排斥，所以应用前景优于胚胎干细胞 D．培养iPS细胞的培养液中含有动物血清等 10. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础，如图所示，a、b、c表示现代工程技术，①、②、③表示其结果，下列说法正确的是（ ） A. 若a是核移植技术，①反映了动物细胞也具有全能性 B. 若c表示动物细胞融合技术，③为获得的单克隆抗体 C. ①②③中作为受体的动物品种是珍稀的或存量少的雌性动物 D. 若b是体外受精技术，则②可提高动物繁殖能力 11. 中科院动物所和福州大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核后的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，这表明我国的大熊猫人工繁殖研究再次走在世界前列。下列有关叙述中错误的是（ ） A. 卵母细胞去核的方法是显微注射法，还可以用紫外光短时间照射等方法 B. 兔子卵母细胞质中有使大熊猫细胞核表达全能性的物质 C. 重组胚胎需要用物理或化学方法激活，使之完成细胞分裂和发育进程 D. 在大熊猫早期胚胎的形成过程中，囊胚期开始出现内细胞团和滋养层细胞 12．下列关于生物工程中常见的几种酶的叙述,正确的是 (　　) A.去除植物细胞壁时所用的纤维素酶溶液的渗透压不宜过低 B.用限制酶从质粒上切下一个目的基因需脱去4个水分子 C.用胰蛋白酶处理植物愈伤组织可得到单个的愈伤组织细胞 D.PCR仪扩增目的基因时加入解旋酶有利于提高解旋的效果 13．下列关于生物科学技术的有关叙述，错误的是（    ） A．植物组织培养的脱分化过程应该用固体培养基，并对外植体进行消毒处理 B．植物体细胞杂交中，可采用质壁分离实验检测制备原生质体的活性情况 C．胚胎移植时，受体对移入子宫内的外来胚胎基本不发生免疫排斥反应 D．胚胎工程的基础是哺乳动物受精和早期胚胎发育的规律 14、细胞工程中，选择合适的生物材料是成功的关键。下列叙述不正确的是( ) A.选择高度分化的动物体细胞进行培养有利于获得大量的细胞 B.选择去核的卵母细胞作为核受体进行核移植可提高克隆动物的成功率 C.选择植物的愈伤组织进行诱变处理可获得突变体 D.选择一定大小的植物茎尖进行组织培养可获得脱毒苗 15．下列关于基因工程的叙述，正确的是（　　） A．培育转基因动物时选择的受体细胞只能是动物的受精卵 B．构建重组质粒时必须选择相同的限制性核酸内切酶处理载体质粒与目的基因 C．经检测发现抗除草剂基因成功导入某抗盐植物，该植物一定具有抗除草剂及抗盐性状 D．用氯化钙处理大肠杆菌，可提高重组DNA分子的导入成功率 16．PCR技术是在体外合成特定DNA片段的一种方法，由高温变性、低温复性及适温延伸等几步反应组成一个周期，循环进行，使目的DNA得以迅速扩增。下列关于PCR技术的叙述，错误的是（    ） A．PCR技术中DNA的解旋方式与体内DNA复制不相同 B．复性时引物之间通过碱基互补配对结合 C．反应中新合成的DNA又可以作为下一轮反应的模板 D．经过5次循环后消耗引物62个 17．在基因表达载体的构建中，下列说法不正确的是（　　） ①一个基因表达载体的组成只包括目的基因、启动子、终止子 ②有了启动子才能驱动基因转录出mRNA     ③终止子的作用是使转录在所需要的地方停止      ④所有基因表达载体的构建是完全相同的         ⑤必须在细胞内进行 A．② ③ ⑤ B．① ④ ⑤ C．① ② ⑤ D．③ ④ 18．将小菜蛾细胞的羧酸酯酶基因（CarE）导入水稻细胞，培育抗农药水稻新品种，过程如图所示。下列叙述错误的是（    ）    A．必须将含CarE基因的质粒导入水稻的受精卵 B．构建重组质粒时，应选用PstI和SmaI分别切割质粒和含CarE基因的DNA C．Tetr的作用是鉴别和筛选含CarE基因的细胞 D．通过检测表达产物来判断CarE基因在水稻细胞中是否发挥功能 19．胰岛素用于治疗糖尿病，但胰岛素注射后易在皮下堆积，需较长时间才能进入血液，进入血液后又易被分解，因此治疗效果受到影响。如图是新的速效胰岛素的生产过程，有关叙述正确的是（   ）    A．新的胰岛素的产生是依据基因工程原理完成的 B．新的胰岛素生产过程中不涉及中心法则 C．新的胰岛素产生过程中最困难的一步是设计新的胰岛素分子的空间结构 D．若用大肠杆菌生产新的胰岛素，常用Mg2+处理大肠杆菌 20. 已知B基因存在于水稻基因组中，其仅在体细胞和精子中正常表达，在卵细胞中不转录。为研究B基因表达对卵细胞的影响，研究人员将B基因编码区与Luc基因（表达的荧光素酶能催化荧光素产生荧光）连接成融合基因，实验过程如下。下列说法正确的是（ ） A. 若想通过逆转录的方法获得B基因，则只能从水稻体细胞中提取全部RNA进行操作 B. B-Luc融合基因的形成需要DNA连接酶的催化 C. 转基因植株中含有卡那霉素抗性基因 D. 通过PCR技术检测发现水稻细胞的染色体DNA上插入了B-Luc，则说明已成功获得转基因植株 21．下列关于基因工程的叙述，错误的是(　　) A．目的基因和受体细胞均可来自动、植物或微生物 B．限制性内切核酸酶和DNA连接酶是两类常用的工具酶 C．人胰岛素原基因在大肠杆菌中表达的胰岛素原无生物活性 D．载体上的抗性基因有利于筛选含重组DNA的细胞和促进目的基因的表达 22．科学家已经在牛、山羊等动物乳腺生物反应器中,获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素等重要的医药产品,由此还发展了动物膀胱生物反应器等。下列说法错误的是( ) A.膀胱生物反应器优于乳腺生物反应器的方面包括不受性别、发育时期等限制 B.构建乳腺生物反应器时,需将目的基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起 C.将目的基因导入动物细胞常,采用显微注射技术操作 D.转基因动物中,目的基因只存在于乳腺或膀胱细胞中,而不存在于其他体细胞中 23.生物技术是一把双刃剑,既可以造福人类也可以给人带来危害,在社会上引起了广泛的争论。下列有关说法正确的是 (　　) A.转基因食品是不安全的,应该禁止食用 B.我国禁止生殖性克隆人,但是允许治疗性克隆 C.设计试管婴儿可以制造完美婴儿,应该推广此项技术 D.新冠病毒的传染性强,可用于制造生物武器 24．现代生物技术既可以造福人类，也可能在使用不当时给人类带来潜在的危害。下列关于生物技术的安全性与伦理问题的叙述，错误的是( ) A.转入叶绿体中的基因不会随花粉传递给子代，可避免基因污染 B.为了保护消费者知情权，我国对农业转基因生物实行了标识制度 C.生殖性克隆人能丰富人类基因多样性，但需对相关实验进行有效监控和严格审查 D.生物武器包括致病菌类、病毒类和生化毒剂类等，其致病能力强、攻击范围广 25．下列有关生物工程的叙述，错误的有（　　） ①基因工程的核心步骤是构建基因表达载体②蛋白质工程可通过直接改造蛋白质的结构从而改变其功能③利用核移植可以培养试管婴儿④PCR技术需要利用限制性内切核酸酶打开DNA双链⑤利用动物细胞培养技术和细胞融合技术可以制备单克隆抗体⑥利用植物茎尖培养脱毒苗时，全程都需要光照 A．一项  B．两项  C．三项  D．四项 二、不定项选择题（每题3分，共15分） 26．柴油是重要的燃料油之一，泄漏或不当排放会造成环境污染。研究者从被柴油污染的土壤中获取了3种柴油降解菌进行研究，结果见下表。下列叙述错误的是（ ） 柴油浓度（%） 菌株降解率（%） 1 2 4 5 Y1 90．9 60．8 53．5 41．0 Y2 92．8 - - - Y3 70．1 42．5 - - 注：“-”表示菌株不能生长 A．为获得降解菌，应用以柴油为唯一碳源的培养基 B．所用培养基和土壤样液均需进行严格灭菌 C．可采用稀释涂布平板法获得降解菌的单菌落 D．Y1对高浓度柴油的耐受性更强 27．运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法错误的是（    ） A．利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株 B．细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 C．单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，可以得到能稳定遗传的优良品种 D．利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料 28．以下为现代生物技术与工程操作常涉及的流程，下列说法正确的是（　　）    A．若为植物体细胞杂交过程，可用离心技术使处理①和②后获得的原生质体融合 B．若为试管牛生产流程，体外受精时，卵母细胞①和精子②要分别进行成熟培养和获能处理 C．若为动物细胞核移植过程，将供体细胞①注入卵母细胞②，两细胞融合后形成重构胚 D．若为动物细胞融合过程，可以用灭活的病毒诱导融合形成杂交细胞 29.人类疾病的转基因动物模型常用于致病机理的研究及药物的筛选。利用正常大鼠获得遗传性高血压转基因模型大鼠的流程如下图所示。下列分析错误的是(　 　) A.把早期胚胎植入大鼠子宫的最佳时期是原肠胚阶段 B.质粒是独立于细菌染色体外的能自主复制环状DNA分子 C.如果在子代大鼠体内检测到高血压相关的基因,说明高血压相关基因已成功表达 D.通过胚胎分割技术可以提高胚胎利用率 30．某科研团队用A和B两种限制酶同时和分别处理同一DNA片段，发现限制酶对应切点一定能切开。下图1为某DNA片段及两种酶的酶切位点，图2为酶切产物电泳分离结果。下列叙述正确的是（   ） A．图1中X代表的碱基对数为4500，Y是限制酶B的酶切位点 B．在凝胶中DNA分子的迁移速率与凝胶的浓度、DNA分子的大小和构象等有关 C．用A和B两种限制酶同时处理图中同一DNA片段得到8个游离的磷酸基团 D．利用PCR技术从图1的DNA中扩增出等长的X片段，至少需要2次循环 三、非选择题（共35分） 31.（9分）自古以来，人们就利用发酵技术来生产各种产品。回答问题： (1)果酒和果醋的制作依次利用了 和 两种微生物，若从自然菌样中筛选较理想的菌种进行纯化培养，通常采用 法接种。 (2)在果酒的基础上制作果醋时，打开瓶盖，盖上一层纱布，同时 (提供的条件)。 (3)谷氨酸棒状杆菌可用于微生物发酵工程生产谷氨酸，从而制取谷氨酸钠(味精)。如图为谷氨酸棒状杆菌合成谷氨酸的途径，通过发酵工程可以大量生产谷氨酸。回答下列问题： 由上图可知，谷氨酸棒状杆菌体内若积累了较多的谷氨酸，则会抑制谷氨酸脱氢酶的活性，所以发酵过程中随时检测培养液中__________、________等以了解发酵进程， 同时还要检测温度和pH，因为温度会影响酶活性，而PH会影响产物种类， 在 条件下发酵罐内会积累谷氨酸。 （4）发酵工程中有很多应用，其中在农牧业上的应用有生产微生物肥料、微生物农药还有生产 。 32．（9分）非洲猪瘟是由ASFV（一种双链DNA病毒）感染猪引起的烈性传染病。某研究小组将ASFV外壳蛋白基因导入猪体细胞中，利用核移植技术培育转基因克隆猪，从而得到自动产生ASFV抗体的个体，其过程如图所示。回答下列问题： (1)获得D猪的技术是 ，取B猪体细胞进行①过程相对于胚胎细胞难度大，原因在于 ，步骤③采用的技术手段是 。 (2)B猪体细胞在培养瓶中培养时，除必须保证环境是无菌、无毒外， 还必须 以防止细胞代谢物积累对细胞自身造成的伤害。还需要控制气体条件是__________的混合气体，二氧化碳的主要作用是 。 培养到一定程度后，需要分瓶再继续培养，分瓶后的培养过程称为 。 (3)由于目的基因不能直接导入受体细胞，因此需要构建 ，该过程采用双酶切法处理含目的基因的DNA片段和质粒，其优点是 （答出一点即可）。 33.（9分）紫花首蓿是全世界栽培历史最悠久、利用最广泛的豆科牧草，但易造成家畜鼓胀 病｡百脉根富含单宁，单宁可与植物蛋白质结合，不引起家畜采食后鼓胀｡为培育抗鼓胀病的新型牧草，科研人员利用野生型清水紫花首蓿和里奥百脉根为材料进行了实践研究｡研究主要流程如下图（注：IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，R-6G可阻止线粒体的功能）｡ （1）在制备两种植物原生质体时，先将两种细胞分别置于0.5~0.6mol/L的甘露醇溶液中，使细胞在较高渗透压环境下处于较稳定状态状态，从而有利于用 去除细胞壁，分别获得两种植物的原生质体｡ （2）步骤②为 ，从步骤②到步骤③需要更换新的培养基，经过步骤②、③到形成再生植株，体现的主要原理是 ｡ （3）利用图示技术进行育种的优点是 ｡ （4）谷蛋白是野生清水紫花荀蓿中含量较高的一种蛋白质，科研人员为比较植株不同部位谷蛋白的含量，想通过制备相应的单克隆抗体进行检测，部分流程如下图： 经过a步骤，细胞两两融合的产物有3种｡在步骤b的基础上经过步骤c 和抗体检测筛选得到符合要求的杂交瘤细胞，获得的杂交瘤细胞可采用体外培养的方式进行扩大培养，培养—段时间后可从 中提取单克隆抗体｡单克隆抗体的优点是 。 （5）百脉根花的提取液可用于生产护肤品，为研究百脉根花提取液对受损皮肤的修复效果，需要—批遗传性状基本一致的实验小鼠，研究人员从 （填“同一”或“不同”）小鼠个体中取出体细胞核进行体细胞核移植，形成重构胚，激活后完成细胞分裂和发育进程，最后移植到经过 处理的受体雌鼠中获得实验小鼠｡ 34.（9分）人胰岛素基因表达的最初产物是一条肽链构成的前胰岛素原，经加工后形成两条肽链（A链和B链）的有生物活性的胰岛素。此后科学家又提出了利用基因工程改造大肠杆菌生产人胰岛素的两种方法：“AB”法是根据胰岛素A、B两条肽链的氨基酸序列人工合成两种DNA片段，利用工程菌分别合成两条肽链后将其混合自然形成胰岛素;“BCA”法是利用人体某细胞中的mRNA得到胰岛素基因，表达出胰岛素原后再用特定酶切掉C肽段。这两种方法使用同一种质粒作为载体。请据下图分析并回答下列问题： （1）由于一种氨基酸可能对应多种密码子，“AB”法中人工合成的两种DNA片段均有多种可能的序列。“BCA”法是利用人体________细胞中的mRNA，再由mRNA经_________得到的胰岛素基因，“AB和BCA”法获取的目的基因中不含人胰岛素基因启动子。 （2）如图是利用基因工程生产人胰岛素过程中使用的质粒及目的基因的部分结构。为使目的基因与载体正确连接，在设计PCR引物时可添加限制酶_________的识别序列，PCR引物应该添加在识别序列的_________（填“3’或5’）端。 （3）PCR扩增的产物一般通过琼脂糖凝胶电泳来鉴定，下列叙述中正确的有______。 A. PCR反应体系中需加入耐高温的DNA聚合酶，该酶主要在复性过程起作用 B. 琼脂糖凝胶电泳主要用来分离DNA，进行电泳时DNA片段越大，迁移速率越大 C. 进行电泳时，带电分子会向着与其所带电荷相反的电极移动 D. 琼脂糖溶液中加入核酸染料利于DNA在紫外灯下被检测 （4）β-半乳糖苷酶可以分解无色的X-gal产生蓝色物质使菌落呈现蓝色，否则菌落为白色。经_________（处理方法）大肠杆菌后，与重组质粒混合培养一段时间，将大肠杆茵接种到添加了_________和X-gal的培养基上筛选出_________色的菌落即为工程菌种。 （5）科学家利用蛋白质工程技术，研制出了易吸收、起效快的赖脯胰岛素，获得赖脯胰岛素基因的途径是：从预期的蛋白质功能出发→_________→推测应有的氨基酸序列→找到相对应的脱氧核苷酸序列。 五常市雅臣中学高二下学期第二次考试 生物 试题答案 一、单项选择题（每题2分，共50分） 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 C B D D B B A C A D 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 A A B A D B B A C B 21 22 23 24 25 D D B C D 二、不定项选择题（每题3分，共15分） 26 27 28 29 30 B AB ABD ABC BC 三、非选择题（共35分） 31．（8分，每空1分） (1)酵母菌 醋酸菌 平板划线(或稀释涂布平板) (2)适当升高温度 (3)微生物数量 产物浓度 中性或弱碱性 (4)生产微生物饲料 32．（9分，每空1分） (1) 细胞核移植/细胞核移植技术 动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难 胚胎移植 (2)定期更换培养液 传代培养 95%的空气与5％二氧化碳 维持培养液的pH (3)基因表达载体 保证目的基因和载体定向连接（防止反向连接、防止自身环化） 33.（9分，每空1分） （1） 纤维素酶和果胶酶 （2）脱分化 植物细胞的全能性 （3）打破生殖隔离，实现远缘杂交育种，培养植物新品种等 （4） 克隆化培养 培养液 准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合，可以大量制备 （5）同一 同期发情 34．（9分，每空1分） （1）胰岛B 逆转录 （2） Xhol和Munl 3’ （3）CD （4）钙离子处理 氨苄青霉素 白 （5）设计预期的蛋白质结构 2 学科网（北京）股份有限公司 $