河北省承德市2025-2026学年高二下学期4月阶段检测生物试题

生物参考答案与解析 1.B【解析】发酵是人们利用微生物，在适宜的条件下，将原料通过微生物的代谢转化为人类所需要的产 物的过程，必须有微生物的代谢活动，但不是所有生物产生酒精或乳酸等代谢产物的过程都是发酵，例 如人体无氧呼吸产乳酸不属于发酵，A错误；传统发酵不人为接种纯种菌种，利用的是原料、器具、环 境或前一次发酵物中天然存在的微生物，B正确；有氧呼吸产物也可以是发酵产物，例如醋酸菌有氧发酵 产生醋酸，C错误；传统发酵没有严格无菌操作，容易被杂菌污染，食品品质不稳定，D错误。 2.B【解析】先清洗去除表面灰尘和部分杂菌，再除梗可避免梗上附着的污染物在清洗时难以去除，减少杂 菌污染，A正确；葡萄糖浓度过高，会使外界溶液渗透压过大，导致酵母菌失水、代谢受抑制甚至死亡， 反而不利于发酵，B错误；发酵会产生大量C02,发酵罐中应留有部分空间，可防止发酵液膨胀溢出，C 正确；低度甜型山葡萄酒发酵时间过长，糖会被大量消耗，酒精度升高，甜味变淡、口感变差，D正确。 3.C【解析】培养基要先灭菌，再在酒精灯火焰旁倒平板，避免冷却凝固前被环境杂菌污染，A正确；接 种前倒置主要防止冷凝水滴落污染培养基，接种后倒置利于菌落生长、防止冷凝水污染，方便操作和观 察，目的不同，B正确；图中可看出共四次划线，平板划线法中，接种环灼烧次数一般是：接种前灼烧、 每次划线之间灼烧和划线结束灼烧，因此5灼烧接种环，第2次灼烧的目的是杀死上一次划线残留菌种， 使菌液浓度逐步降低，而不是防止杂菌污染，C错误；酵母菌纯培养应长出形态、颜色一致的单菌落；若 不一致，说明有杂菌污染或菌种不纯，D正确。 4.B【解析】植物的细胞壁阻碍着细胞间的杂交，用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得原生质体，便于 细胞融合，A正确；用α射线处理的目的是使野生甜瓜细胞原生质的体核失活，以便在融合后保留黄瓜 的核基因组，从而获得具有目标性状的黄瓜植株，而非主要为了诱发基因突变，B错误；诱导原生质体融 合的物理方法包括电融合法、离心法；化学方法常用聚乙二醇(PEG)融合法、高C2+一高pH融合法 等，C正确；Nd基因位于线粒体内，属于细胞质基因，融合后抗旱黄瓜获得了野生甜瓜的细胞质基因， 表现出抗旱性，D正确。 5.D【解析】青蒿素是次生代谢物，次生代谢物并非植物基本生命活动所必需的产物。植物基本生命活动 (如生长、发育、繁殖)依赖于初级代谢物（如糖类、氨基酸、核苷酸等)，缺乏青蒿素的黄花蒿仍能完 成生命周期，只是可能降低抗虫或抗病能力，A错误；青蒿素在黄花蒿高度分化的腺毛细胞中合成，愈 伤组织是未分化的细胞，因此一般不直接从愈伤组织中提取，B错误；用C2+处理大肠杆菌等原核生物 使其处于感受态，酵母菌的转化不用C2+处理，C错误；途径三利用转基因酵母发酵生产，相比途径一 (植物提取)，具有生产周期短、不受地域和季节限制等优点，D正确。 6.C【解析】动物细胞培养时，常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织，使细胞间的蛋白质水解，让细胞分 散成单个，A正确；AB段细胞增殖速率下降，原因是动物细胞贴壁生长、相互接触后出现接触抑制，增 殖减慢，B正确；细胞培养过程中，无论是否快速增殖，都必须定期更换培养液，以清除代谢废物、补充 营养物质，否则细胞会因中毒、营养缺乏而死亡，C错误；B点之后进行分瓶培养，属于传代培养，D点 后细胞可能会因发生基因突变而无限增殖，D正确。 7.C【解析】为单克隆抗体，能特异性识别并结合肿瘤细胞表面抗原，A正确；b是细胞毒性药物，本 身不具备识别肿瘤细胞的特异性，依靠抗体靶向运输，B正确；溶酶体裂解的是ADC中的连接键，释放 出药物发挥作用，抗体也会被降解，不会进入细胞质基质杀伤细胞，C错误；图中抗癌药最终作用于细胞 核，说明其可能通过激活凋亡相关基因，诱导癌细胞凋亡，D正确。 8.A【解析】卵裂在透明带内进行，细胞数量不断增加，但总体积基本不变甚至略小，每个细胞体积逐渐 变小，A正确；内细胞团出现在囊胚，不是桑葚胚；桑葚胚还未分化出内细胞团，B错误；孵化是囊胚从 破裂的透明带中伸展出来，不是桑葚胚，C错误；对桑葚胚的胚胎分割属于无性生殖（克隆），没有经过 两性生殖细胞结合，D错误。 【生物答案第1页（共5页）】 9.D【解析】限制酶（限制性核酸内切酶）主要是从原核生物中分离纯化得到的，A正确；限制酶能特 异性识别特定的脱氧核苷酸序列；DNA连接酶只催化磷酸二酯键形成，不能识别特定DNA序列，B正 确；限制酶切割磷酸二酯键，DNA连接酶恢复磷酸二酯键，C正确；在实际基因工程中天然质粒不能直 接用作载体，必须经过人工改造，但标记基因不一定是抗性基因，D错误。 10.D【解析】洋葱细胞有细胞壁，充分研磨才能充分破碎细胞，释放DNA,之后再过滤或离心，A正 确；鸡血细胞加蒸馏水吸水涨破即可；植物细胞需加洗涤剂和食盐研磨，方法不同，B正确；DNA不溶 于酒精，加入预冷酒精后会形成白色絮状物沉淀，离心后出现在沉淀物中，C正确；沸水浴后蓝色越深， 说明DNA含量越多，不能代表纯度越高，D错误。 I1.B【解析】PCR每次循环都包括变性、复性、延伸三个步骤，A正确；无论由该DNA片段扩增n基因 还是扩增M基因，都需要确保模板DNA(整个分子)完全变性成单链，因此变性温度是相同的，B错 误；由DNA右侧的羟基和磷酸基团可知，引物1和引物2均使子链由右向左延伸，而引物3和引物4均 使子链由左向右延伸，因此用引物2和引物3才能扩增出中间的基因，C正确；由于M基因在DNA 分子的一端，PCR第一次循环产物为半短的单链(M基因的单链)，第二次循环中才会出现两条链长度 均等于目的基因片段的双链DNA,D正确。 12.B【解析】干扰素是白细胞（如淋巴细胞）产生的细胞因子，具有抗病毒、抗肿瘤等作用，可用于治 疗病毒感染性疾病，A正确；乳腺生物反应器将干扰素基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元 件重组，使目的基因在乳腺中表达；膀胱生物反应器将干扰素基因与膀胱中特异表达的基因的启动子等 调控元件重组，使目的基因在膀胱上皮细胞中表达，从而在尿液中分泌，B错误；培育转基因动物时， 受体细胞都是受精卵，全能性最高，易发育成完整个体，C正确；乳腺生物反应器需要转基因动物为雌 性，且需要在泌乳期才能获得产物，因此受性别和年龄限制；而膀胱生物反应器不受性别限制，且可在 动物成熟后随时收集尿液，D正确。 13.C【解析】分解纤维素的菌株用刚果红培养基筛选；酚红培养基用于鉴别尿素分解菌，A错误；乳酸 杆菌自身不能合成维生素，必须在含维生素的培养基才能生长，不含维生素的培养基无法存活，B错误； 细胞融合后有多种融合类型，需要用选择培养基筛选出所需的杂种细胞或杂交细胞，C正确；筛选杂交 瘤细胞先用选择培养基筛选融合细胞，再用抗原一抗体杂交筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，不是 直接用抗体筛选融合细胞，D错误。 14.AC【解析】高压蒸汽灭菌和灼烧都属于灭菌方法，能杀死芽孢，煮沸属于消毒，一般不能杀死芽孢， A错误；细菌（包括芽孢萌发后的菌体）培养时，培养基通常调为中性或弱碱性，B正确；高压蒸汽灭 菌的标准条件是：121℃、100kPa维持15~30min,100℃，温度不够，达不到灭菌效果，C错误；未 灭菌对照组中芽孢存活萌发，产酸使H下降导致指示剂变黄，灭菌实验组的芽孢被杀死后无菌生长， 指示剂保持紫色，这一结果说明灭菌成功，D正确。 15.ACD【解析】传统组培中添加蔗糖，既作为碳源提供营养，又能调节培养基渗透压，维持细胞形态， A正确；广谱抑菌剂只能抑制部分杂菌，不能完全替代外植体消毒，外植体仍需严格消毒，否则易导致 培养失败，B错误；无糖培养以CO2为碳源，外植体需要能进行光合作用自养，因此应选用含叶绿素的 材料，培养过程中需要适宜的温度和光照等条件，C正确；无糖培养以C02为碳源，不含蔗糖，而蔗糖 是多数微生物的优质碳源，因此能在一定程度上减少杂菌污染，D正确。 16.ABC【解析】PSC诱导形成肾脏类器官（只是器官组织，不是完整个体），不能体现全能性，A错 误；培养动物细胞时，CO2的作用是维持培养液的pH,不是维持细胞呼吸，B错误；PSC是存在于内 细胞团的多能干细胞，类似胚胎干细胞，不具有组织特异性（组织特异性是已分化细胞的特点），C错 误；采用自体猪肾移植可避免宿主对肾脏本身的免疫排斥，离体灌注环境减少了免疫细胞接触与攻击， 因此在观察期内显著抑制了明显的免疫排斥反应，D正确。 【生物答案第2页（共5页）】 17.ACD【解析】卵细胞是已高度分化的生殖细胞，转化为孤雌胚胎千细胞的过程，涉及基因表达的改 变，使之回到早期未分化状态，可以类比脱分化，A正确；图1中孤雌小鼠由两个卵子结合发育而来， 性染色体为XX,发育成雌性，图2中孤雄小鼠由两个精子（父本）和去核卵细胞结合形成胚胎，精子 提供X或Y。若两个精子都是X,则孤雄小鼠为雌性；若两个精子分别是X和Y,则孤雄小鼠为雄性； 若都是Y则YY不能存活（因缺乏X染色体上的必需基因），图3中卵细胞和第二极体中均只存在X染 色体，产生的孤雌小鼠染色体组成为XX,为雌性，B错误；培养卵母细胞、精子和胚胎干细胞均利用 动物细胞培养技术，三个过程均需将囊胚移植到受体子宫内，均涉及到胚胎移植技术，C正确；胚胎分 割属于无性繁殖，可获得多只遗传物质相同的孤雄小鼠，D正确。 I8.BD【解析】DNA分子越小，移动速度越快，距离加样孔越远，可知加样孔在A端，电泳结果是将凝 胶在紫外灯下观察获得的，而不是在紫光灯下观察，A错误；引物甲和乙分别位于目的基因的下游和插 入质粒片段的下游，若目的基因正确插入质粒，则不能利用引物甲和乙扩增出产物，进而电泳会出现样 5的结果。只有目的基因反向插入质粒时，用引物甲和乙才能扩增出长700+200=900pb的产物，电泳 会得到样1的结果，B正确；引物丙和乙分别位于质粒上目的基因插入位置的上游和目的基因的下游， PCR扩增时，若目的基因正确插入，将扩增出100+700=800bp的产物，对应样2，若目的基因反向插 入或未插入，均不能扩增出产物，电泳后得到样5，C错误；样3的电泳结果显示扩增产物长700pb, 对应目的基因的长度，但不能证明目的基因的插入方向，样4的电泳结果显示扩增产物长1000pb,对 应目的基因与插入质粒片段的长度之和，能证明有目的基因插入质粒，但不能证明目的基因的插入方 向，D正确。 19.(除特殊标注外，每空1分，共11分) 【答案】(1)烟草根际土壤中解钾菌的数量更多，容易筛选得到目的菌 (2)4.5mL琼脂 (3)104该稀释度下平板上的菌落数在30~300之间，计数结果准确1.8×10'(2分)大当两个 或多个细胞连在一起时，平板上只形成一个菌落 (4)透明圈直径与菌落直径比值大(2分) 【解析】(1)根际土壤是植物根系周围的微环境，根系分泌的有机物可为微生物提供营养，且烟草生长 需要钾元素，根际环境更适合解钾菌生存繁殖，因此该区域解钾菌丰度更高，筛选成功率更高。 (2)图中试管中梯度稀释倍数为10倍，即取0.5mL加入4.5mL无菌水，制成10倍稀释液。分离计数 需用固体培养基，甲为液体培养基，需加入琼脂作为凝固剂。 (3)菌落计数标准为30~300个的平板才有效，过高难以计数、过低误差大。图中104倍的三个平板菌 落数均在标准范围内，而10倍的三个平板菌落数均不在标准范围内，因此应对用10倍的三个平板菌 落数作为最后结果。每克土样活菌数=（平板菌落数÷涂布体积）×稀释倍数，平板中菌落的平均数为 (175+168+197)÷3=180,1g土样活菌数=180÷0.1×104=1.8×10个。实际值>计数值，因为当 两个或多个细胞连在一起时，平板上只形成一个菌落，导致统计值偏低。 (4)钾长石粉不溶于水使平板不透明，解钾菌分解钾长石后，菌落周围会出现透明圈，以此作为解钾菌 的筛选标志。透明圈越大，说明菌株分解钾长石、释放可溶性钾的能力越强，即难溶性钾转化率越高， 因此选择透明圈/菌落直径比值大的菌落。 20.（除特殊标注外，每空1分，共12分) 【答案】(1)外植体已分化 (2)促进脱分化 (3)全能性保持亲本优良性状、生产周期短、便于运输和贮藏、不受季节气候限制、可大量快速繁殖 (写出两点即可，每点1分，共2分) (4)生长素和细胞分裂素生长素用量与细胞分裂素用量的比值高（生长素>细胞分裂素，2分） 【生物答案第3页（共5页）】 (5)提供氧气，保证胚状体进行有氧呼吸；防止水分过度蒸发，有利于种子存活；一定封闭性可减少营 养物质流失、防止微生物污染（写出两点即可，每点1分，共2分） 【解析】(1)植物组织培养中，离体的植物器官、组织或细胞统称为外植体，原表皮细胞属于此类。原 表皮细胞由顶端分生组织分裂产生，是器官表皮的初始细胞，分化程度低，属于已分化的细胞。 (2)从题图调控路径可判断：LEC2和SPCH结合后促进TAA1和YUCs表达，TAA1和YUCs表达产生的 酶协同催化内源生长素合成，进而启动后续重编程。已分化或低度分化细胞恢复分裂能力、形成愈伤组 织的过程属于脱分化，此处对拟分生组织母细胞重编程，属于脱分化。 (3)体细胞（原表皮细胞）能发育成完整胚结构，胚状体本身不是完整的植株，但它具有分化成完整植 株的能力，因此由原表皮细胞产生体细胞胚的现象能体现细胞的全能性。人工种子的培育属于无性生 殖，因此具有不发生性状分离，保持优良性状、快速大量繁殖的优点；另外，人工种子培育利用植物组 织培养技术不受季节地域限制；人工种子还有便于克服育性不良且难以有性繁殖、储存运输等优点。 (4)植物组织培养关键激素为生长素和细胞分裂素。生长素/细胞分裂素比值高时促进生根，比值低时 促进生芽，比例适中时促进愈伤组织形成，需要促进生根，因此生长素用量与细胞分裂素用量的比值高 (生长素>细胞分裂素)。 (5)胚状体细胞进行有氧呼吸需要02，透气才能保证呼吸正常进行。封闭性可减少水分散失、营养流 失，同时阻挡病菌、杂菌污染，保证胚状体正常发育。 21.(除特殊标注外，每空1分，共12分)》 【答案】(1)促性腺激素获能 (2)显微操作细胞B梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理（写出1种即可得分，2分） 纺锤体一染色体复合物 (3)动物细胞培养、早期胚胎培养、胚胎移植技术（写出其中2个，2分）牛1生产牛1的过程属 于有性生殖，集合了双亲的遗传物质(2分) 【解析】(1)对供体母牛注射促性腺激素可促使其超数排卵，获得更多卵母细胞。精子在受精前必须进 行获能处理，才能具备受精能力。 (2)核移植时，对卵母细胞（细胞A)进行去核，常用显微操作法，还可以用梯度离心法、紫外光短时 间照射、化学物质处理等方法去核。去核实际上去除的是次级卵母细胞的纺锤体一染色体复合物。 (3)通过体外受精获得牛1，通过核移植技术获得牛2，两者都用到动物细胞培养、早期胚胎培养和胚 胎移植技术。牛1由精子和卵细胞受精发育而来，属于有性生殖，遗传物质来自双亲，基因组合更多 样。牛2是体细胞核移植克隆而来，核基因几乎完全来自供体母牛，属于无性生殖，遗传多样性低。 22.(除特殊标注外，每空1分，共12分) 【答案】(1)PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法（写出其中两个，每个1分，共2分）未融合 的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞 (2)克隆化培养和抗体检测既能无限增殖又能产生特异性抗体准确识别抗原细微差异，与特定抗原 发生特异性识别，并可大量制备（特异性强、灵敏度高、可大量制备，2分） (3)2细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏(2分) (4)动物细胞培养、动物细胞融合 (5)双特异性单克隆抗体能携带长春碱与癌细胞特异性结合，不会对健康细胞造成伤害 【解析】(1)动物细胞融合常用方法由聚乙二醇(PG)融合法、电融合法、灭活病毒诱导法。①过程 为第一次筛选，使用选择培养基，淘汰未融合的亲本细胞（未融合的B细胞、未融合的骨髓瘤细胞）、 融合的具有同种核的细胞(B细胞与B细胞融合的细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合的细胞)，只保 留杂交瘤细胞。 【生物答案第4页（共5页）】 (2)过程②为第二次筛选，通过克隆化培养和抗体检测，获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞丙。杂交瘤 细胞特点是既能迅速大量增殖，又能产生专一的抗体。单克隆抗体优点是准确识别抗原细微差异，与特 定抗原发生特异性识别，并可大量制备（特异性强、灵敏度高、可大量制备）。 (3)制备双特异性抗体需再将丙细胞与已免疫的B细胞融合，筛选出杂交瘤细胞，再对杂交瘤细胞进行 克隆化培养和抗体检查，筛选出能产生双特异性单克隆杂交一杂交瘤细胞。动物细胞培养到一定时期， 会因细胞密度过大、有害代谢物的积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 (4)制备过程涉及：B细胞与骨髓瘤细胞融合、杂交瘤细胞培养、杂交杂交瘤细胞培养，核心技术为动 物细胞融合和动物细胞培养。 (5)长春碱无特异性，直接使用会杀伤正常细胞；双特异性抗体可靶向识别癌细胞，使药物富集在肿瘤 部位，减少对正常细胞的损伤，副作用更小。 23.(除特殊标注外，每空1分，共12分)》 【答案】(1)引物2和引物3存在部分互补配对序列(2分) (2)RNA聚合酶识别和结合的部位，驱动基因转录出mRNA可转移至受体细胞，并且整合到受体细胞 的染色体DNA上(2分) (3)引物1和引物4（引物4和引物1）XmaI和KpnI(KnI和XmaI,2分) (4)农杆菌转化卡那霉素潮霉素呈现甜菜红素红色（或变红） 【解析】(1)利用PCR构建融合基因，需要在Bt基因下游引物（引物2）和RUBY上游引物（引物3） 上设计互补重叠序列，使两个基因通过PCR重叠延伸拼接在一起。 (2)RNA聚合酶能识别和结合的位，点，驱动基因转录出mRNA。Ti质粒的T-DNA是可转移DNA,能携 带目的基因整合到植物细胞染色体DNA上。 (3)切割位，点位于Ti质粒启动子和终止子之间的限制酶有KpnI、XmaI、BamH I、SacI和EcoR V, 但由于其他片段有EcoR V的切割位点，目的基因Bt-RUBY上有BamH I和SalI(SalI与SacI的识别 序列相同，只是酶切位点不同)的识别序列，因此不能用限制酶EcoR V、BamH I和SacI切割Ti质粒。 应选用双酶切割，因此用KpnI、XmaI切割Ti质粒，形成不同的黏性末端能防止Ti质粒的自身环化， 为使Ti质粒和目的基因B-RUBY正确连接，需要在目的基因B-RUBY的两端的引物1和引物4的5'端添 加限制酶XmaI和nI的识别序列（由Ti质粒中启动子和终止子的位置关系可知限制酶XmaI的识别 序列应在插入的目的基因的上游，限制酶KpI的识别序列应在插入的目的基因的下游)。 (4)将目的基因B-RUBY导入植物细胞最常用的方法是农杆菌转化法。从图2可知，Ti质粒上的卡那霉 素抗性基因位于T-DNA区外，是农杆菌的筛选标记。因此，用含卡那霉素的培养基可筛选出成功导入重 组质粒的农杆菌（未导入质粒的农杆菌无法存活）。潮霉素抗性基因位于T-DNA区内，会随目的基因一 起整合到棉花细胞的染色体上。因此，用含潮霉素的培养基可筛选出成功转化的棉花愈伤组织。同时， RUBY是甜菜红素报告基因，成功表达的愈伤组织会呈现红色，可直接通过肉眼可视化筛选，无需抗生 素筛选，提高了筛选效率。 【生物答案第5页（共5页）】绝密★启用前其养营向，不京米效 ,G床班木部正、 生物 一好 本试卷共8页，满分100分，考试用时75分钟 睡 注意事项： 1.答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2.回答选择题时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如 需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其它答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写 在本试卷上无效。 3.考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 器类0智29 一、单项选择题：本题共13小题，每小题2分，共26分。在每小题给出的四个选项中，只有一 项是符合题目要求的。 1.关于传统发酵，下列说法正确的是 A.发酵就是生物产生酒精或乳酸等代谢产物的过程 鼠界地具2阴 B.传统发酵的菌种可来自原料或前一次发酵物中的微生物闲气别显 暗C.微生物有氧呼吸的产物不可以作为发酵产物 因诉脉工形写京学国终下可 D.传统发酵技术制作的食品不含杂菌，品质优良 个两 2.东北流行的低度甜型山葡萄酒的生产过程如下图所示，下列有关说法错误的是 原料挑选、清洗、除梗一→调糖→接种酵母→主发酵一→分离压榨→后发酵→澄清过滤一→灌装 A.挑选的山葡萄先清洗后除梗是为了减少杂菌污染 B.“调糖”步骤中加入的葡萄糖越多越有利于发酵 C.发酵罐中应留一部分空间，防止发酵液溢出 D.低度甜型山葡萄酒的发酵时间不宜过长，否则影响口感 3.右图为对酵母菌进行纯培养的实验结果，下列说法错误的是 A.配制好的培养基应先灭菌，然后在酒精灯火焰附近倒平板 B.制备的培养基在接种前后都处于倒置状态，但目的不同 C.接种环需灼烧5次，第2次灼烧的目的是防止杂菌污染 D.若得到的单菌落颜色、性状不一致，可能出现了杂菌污染 4.野生甜瓜具有极强的抗旱能力，这与其线粒体内的Nad基因密切相关，而栽培黄瓜的抗旱能 力极弱。下图表示制备抗旱黄瓜的过程，下列说法错误的是 α射线处理 野生甜瓜细胞 (MM) 术 中图 事那中c阅，出式民出的府小抗旱黄瓜N床1图日 载培黄瓜N) 注：M和N均表示染色体组 ,班识储部用出态恢中S图d 【生物第1页（共8页）】 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描APP A.过程①用纤维素酶和果胶酶处理可解除细胞壁对细胞间杂交的阻碍 中 B.用α射线处理的主要目的是诱发a原生质体发生基因突变或染色体变异 C.过程②可用离心法或高Ca2+一高pH融合法进行诱导 D.融合后的抗旱黄瓜获得了野生甜瓜的细胞质基因 5.青蒿素是一种在黄花蒿叶片表面的腺毛细胞（高度分化的细胞）中合成的小分子有机物，具 有抗虫、抗逆等作用。青蒿素可通过下图中三条途径生产，下列有关说法正确的是 途径一：黄花蒿的腺毛细胞 途径二：黄花蒿组织培养 青蒿素奇0合 乌城夏的A0限新茶结心新自肤t水张 司A 途径三：转基因酵母菌 A.青蒿素属于次生代谢物，是黄花蒿基本生命活动所必需的物质 B.途径二需要在液体培养基中培养愈伤组织，从愈伤组织中提取青蒿素 C.途径三需要用Ca2+处理酵母菌，使其能吸收周围环境中的DNA D.途径三与途径一相比，优点是生产周期短且不受地域和季节限制 6.某课题组取猪输卵管组织后对其上皮细胞进行培养，右图为上皮细胞 ↑细胞增殖代数 培养过程中细胞增殖情况的变化曲线，下列相关叙述错误的是 A.通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理输卵管组织使细胞分散 B.AB段细胞增殖减缓的原因可能是贴壁生长时发生接触抑制 C.OA段和BC段细胞在快速增殖，期间不需要定期更换培养液 ◆B D.B点之后为传代培养，D点后细胞中遗传物质可能会发生改变 培养过程 7.抗体一药物偶联物(ADC)对肿瘤细胞的选择性杀伤机理如下图所示，下列有关说法错误 的是 同问的相案 民诉器道生流原通 细胞核 药物释方 识别并 吞 39 结合 、接头 溶 ADC 乳腺癌细胞 A.图中a是单克隆抗体，a能识别并结合肿瘤抗原 醒小壁，蟹小共本：醒彩数煎途 B.b是对癌细胞有杀伤作用的药物，本身无特异性 暗金来爱日题合部益土对个所调 C.溶酶体将ADC裂解向细胞质基质释放出抗体和药物 D.药物的作用可能是激活凋亡基因，促进癌细胞凋亡 者司离灭，中品降黄 8.下列关于哺乳动物早期胚胎发育及其应用的叙述，正确的是 景的第制声好校不，黄实 A.卵裂发生在透明带内，产生的细胞体积逐渐变小 B.桑葚胚的内细胞团将来发育成胎儿的各种组织 C.孵化是透明带破裂、桑葚胚从透明带中伸展出来的过程 00品天3 D.桑葚胚均等分割并移植获得多个后代的过程属于有性生殖不题菌买束 【生物第2页（共8页）】 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描APP 9.基因工程中通常会用到限制酶、DNA连接酶等。下列有关说法错误的是甲① A.限制酶最可能是从原核生物中分离纯化出来的。武表的目要手肛良。用 B.限制酶能识别DNA序列，而DNA连接酶不能Ha高一O高與离口@ C.限制酶和DNA连接酶均作用于磷酸二酯键的从话中积黄早t司合① 具D,天然质粒不能直接用作载体，必须添加抗性基因朝怕面卖甘和燕黄一显泰游司 10.关于“DNA粗提取与鉴定”实验，下列有关叙述错误的是零善青甲计害，型量自 A.用洋葱做实验材料时，经过充分研磨后才进行过滤或离心 B.用鸡血和洋葱作为实验材料，提取DNA的方法可能不同 C.含DNA的上清液中加入预冷的酒精并离心后，DNA会出现在沉淀物中 D.将提取的DNA溶解后加入二苯胺试剂，沸水加热后蓝色越深说明DNA纯度越高 11. 现在常利用PCR获取和扩增DNA片段上的基因，某DNA片段上部分基因如下图所示(n 基因的CG含量高于M基因)，下列有关说法错误的是黄景，升尘大泰临 青贵中对从引物1 康养：中引物2 本班要需 -OH M基因 n基因 ® 引物3 引物4 A.扩增M基因和n基因时，每次循环的步骤是完全相同的 弱青嵌普的胜中蜜养 B.由该DNA片段分别扩增n基因和M基因时，变性温度不同 效如函白量翅甲常配 C.预扩增基因，微量离心管中加入的引物是引物2和引物3 的安或因园 D.第二次循环产物中才会出现两条链等长的M基因 12.科学家在乳腺生物反应器的基础上研究了膀胱生物反应器，可以从转基因动物尿液中获取 干扰素等基因工程药物，下列有关说法错误的是 富议(O上)快寒周萨一本利 A.白细胞产生的干扰素可用于治疗病毒感染性疾病 B.用膀胱生物反应器和乳腺生物反应器生产干扰素使用的启动子相同 C.用膀胱生物反应器和乳腺生物反应器生产干扰素的受体细胞都是受精卵 D.与膀胱生物反应器相比，乳腺生物反应器受到受体性别和年龄限制 13.“筛选”是生物技术与工程中常用的技术手段，下列有关说法正确的是 A.用含酚红的培养基筛选出能分解纤维素的菌株 B.用不含维生素的培养基中可以筛选出乳酸杆菌 C.通常需要利用选择培养基筛选出杂种细胞或杂交细胞 D.应利用抗体来筛选B细胞与骨髓瘤细胞融合产生的杂交瘤细胞 二、多项选择题：本题共6小题，每小题3分，共18分。在每小题给出的四个选项中，有两个 或两个以上选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 14.嗜热脂肪杆菌芽孢耐热性极强，常作高压蒸汽灭菌的指示菌。使用时将其芽孢菌片放入待 灭菌物品中，灭菌后接种至含酸碱指示剂的培养液，芽孢萌发后会降低pH,使指示剂由紫 变黄，下列说法错误的是 .8 A.高压蒸汽灭菌能杀死芽孢，而煮沸和灼烧不能杀死芽孢 气，内带阳感尘式紧响 B.培养该芽孢时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性 C.待灭菌的物品在100℃、121KPa条件下维持30min可达到灭菌目的u数1 D.未灭菌的对照组指示剂变黄而实验组呈紫色，说明达到灭菌效果 信代停t读桑.日 【生物8第3页（共8页）】 五] CS扫描全能王 經3亿人都在用的扫描Ap 15.植物无糖组织培养技术是利用C02代替蔗糖，在开放培养环境下，向培养基中加入广谱抑 菌剂的培养技术。其流程如下图所示，下列说法正确的是 外植体处理→接种于无糖培养基→C02+光照+恒温培养→生根→炼苗→移栽→成苗 A.传统植物组织培养时，培养基添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压 :愈事意型 B.由于培养基中加入广谱抑菌剂，外植体不需要进行消毒处理 C,外植体中应含叶绿体，培养过程中需要适宜的温度和光照等条件 花尘送，前卷容 ,胡腿鞋答回 D,培养基用CO2作为碳源，在一定程度上减少了杂菌污染 16.某研究团队利用人类多能干细胞(hPSC,存在于内细胞团)诱导生成人类肾脏类器官 (hPSC-肾脏类器官)，将这些hPSC-肾脏类器官灌注到离体猪肾脏后移植回同一只猪体内， 在移植24小时和48小时后，移植的猪肾脏继续正常运作，没有出现损伤或毒性的迹象。下 列有关说法错误的是坐强小避庄。代S共，合S醒心磨，硬小8共醒本：醒鞋：单 A.利用hPSC诱导为肾脏类器官，体现了细胞的全能性 。:要目暖合醉景厕 B.培养PSC时，需提供适量CO2以维持细胞正常呼吸前重不，武能干 C.PSC具有组织特异性，能够分化形成肾脏类器官通爽坐尘县院箱式 D.该方法显著降低了机体对移植肾脏的免疫排斥反应矩自来恒菌的箱 17.我国科学家运用动物细胞工程和基因编辑技术成功培育出具有“两个母亲”的孤雌小鼠和 具有“两个父亲”的孤雄小鼠，实验流程如图1和图2所示；另一种培育孤雌小鼠的实验 流程如图3所示，下列说法正确的是 陆牌 ③ 4 激活、培养、转化 基因编辑 之 ⊙ ① 卵细胞 孤雌胚胎干细胞 ②具精子细胞核 孤雌小鼠 (phESC) 特点的phESC 图1 国前雪储藏山话办回 平阅 卵细胞去核 激活、培养、转化 基因编辑 C等孤雄小鼠 6 精子 ⑤ 孤雄胚胎干细胞 具卵细胞细胞核 (ahESC) 特点的ahESC 输早弛增因黄味面，实卧因密 11 图2 代骑早的距恐食具括尘理 县的 的机黄早品陆不责图可原邓 第二极体 卵母细胞 H19和G12基因 注人丫 完成减数 o。o 的甲基化 分裂Ⅱ → lg2r、Snrpn等多 并融合 个基因去甲基化 次级卵 囊胚。 代孕母鼠孤雌小鼠 母细胞 图3 A.图1中相当于植物组织培养中脱分化过程的是① B.图1和图3中孤雌小鼠的性别为雌性，图2中孤雄小鼠的性别为是雄性 C.图1~图3中涉及的生物工程相关技术都有动物细胞培养和胚胎移植 D.图2中对乙进行胚胎分割处理，最后可得到多只孤雄小鼠 【生物8第4页（共8页）】 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描Ap 18.为鉴定转基因细菌中是否含有正确插入目的基因(700bp)的重组质粒，某小组设计引物 因进行PCR扩增并进行电泳鉴定。图1中甲~丙为3种引物在正确重组质粒中的相应位置， 图2为不同成员独立进行PCR扩增并进行电泳的结果，下列叙述正确的是 pb A端 (碱基对) 时 1000 900 100bp amp 800 700 500 700bp 200 100 1 标样样1 样2样3样4样5 B端 200bp 图2 图1 A.图2是凝胶在紫光灯下观察的结果，凝胶的加样孔在A端 B.样1是用引物甲和乙PC后的电泳结果，表明目的基因反向插入质粒 C.用引物乙和丙PCR后电泳可得到样2，不能证明目的基因的插人方向 D.样3和样4的结果均不能证明目的基因已经正确插入质粒 三、非选择题：本题共5题，共59分。 诗面门 19.(11分)解钾菌是一类可分解土壤中硅铝酸盐等矿物的微生物，广泛分布于各类土壤，使土 壤矿物中的难溶性钾转化为可被植物吸收的可溶性钾。下图是研究人员从土壤中分离解钾 菌并计数的过程，下表是某科研团队所用的部分培养基的配方。已知钾长石粉不溶于水、 不溶于琼脂，均匀分散在固体培养基中，使平板呈不透明状态。请回答下列问题： 月0.5mL0.5mL 0.5mL 成分 用量 用的G四 磷酸氢二钠 2.0g 南付用 硫酸镁 0.2g 氯化铁眼 0.05g :家鲨旋 99 mL 蔗糖 5.0g 心1g土样无菌水 75 18 碳酸钙 0.1g 幸必西成高最显清司 , 168 22 钾长石粉 1.0g输回 蒸馏水 1L (1)科研人员从烟草根系周围环境土壤中筛选解钾菌的原因是 (2)已知每个试管中稀释倍数均为10倍，图中每个试管中应该加入 无菌水， 甲培养基中加入 后可作为图中对解钾菌进行分离和计数所用的平板。 【生物第5页（共8页）】 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描App (3)应选用稀释倍数为 倍的平板上的菌落进行计数，原因是( 可计算出1g土样中含有的解钾菌数量为 个。实际值往 往比计算结果偏 ,原因是外工部女 (4)若需获得大量难溶性钾转化率高的解钾菌，应选择平板上 的菌落进 行扩大培养。 20.(12分)山东农业大学的一项研究揭示了原表皮细胞（在成体植物的叶、茎等器官发育过 程中，原表皮细胞由顶端分生组织持续分裂产生，是器官表皮的初始细胞)在不同调控机 制下的不同发育情况。调控机制及发育状况如下图所示，请回答下列问题： 故州向，议限搭洁望式出 货 保卫细胞 气孔系基细胞 分化 油中 人种子 重编程 原表皮细胞 气孔谱系拟 ARFS 体细胞胚 分生母细胞 起始细胞 体细胞胚京单 德馄斯同游产 :思问收不容回青 错早#欢的（酵连密碎一）路 试管苗 注：LEC2为植物胚胎发育关键转录因子；SPCH为是调控气孔发育和细胞重编程的关键 转录因子；TA41和YCs表达产生的酶协同催化内源生长素合成；ARFs为生长素响应因子。 (1)原表皮细胞在植物组织培养过程中通常被称为 其属于 (填“已分化”或“未分化”)的细胞。 (2)由图可知，LEC2和SPCH结合后 能（填“促进”或“抑制”）生长素的合 成，进而对拟分生组织母细胞进行重编程。该重编程相当于植物组织培养中的 过程。 (3)体细胞胚是与合子胚（受精卵胚）形态结构相似的胚状结构，由原表皮细胞产生体细 胞胚的现象说明原表皮细胞具有。人工种子和传统种子相比，具有的优点有 (至少答出两点) (4)由体细胞胚产生试管苗的培养基中需要加入的两种关键植物激素是可，若需促 进胚状体生根，这两种植物激素的用量关系是 (5)人工种皮应该具备一定封闭性和良好的透气性，原因是卧春用 景因（答出两点）。 【牛物第6页（共8页）】 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描APF 21.(12分)荷斯坦高产奶牛原产于荷兰北部及德国北部，经长期选育成为全球广泛养殖的高产 乳用牛品种。科学家利用进口的优质荷斯坦高产奶牛冻精、良种荷斯坦高产奶牛和健康黄 牛（主要用于耕作、肉用等)，通过胚胎工程技术研究生产荷斯坦高产奶牛的途径如下图所 :示，请回答下列问题： 解冻的精液 ⊙ 胚胎移植 女育处首器彩 受精卵 →胚胎 生1 供体1 路高同不 裴 中 ⊙ 胚胎移植 供体2 →胚胎 7 →细胞B 重构胚 受体2 g 牛2 (1)在获得牛1的过程中，首先需对供体1注射 进行超数排卵处理，同时对 解冻的精液离心后进行 处理，再将两者在体外合适的环境下共同培养一段时 间后，完成受精作用。 (2)通常采用 法对图中的 (填“细胞A”或“细胞B”)进行去 核处理，也可以采用 至少答出一种方法)对其进行去核处理。去除 的“核”实际上是 (3)获得牛1与牛2的培育过程中均用到的工程技术有 (答出 两个)。牛1和牛2中，遗传多样性更高的是 理由是 22.(12分)双特异性单克隆抗体是指可同时与癌细胞和药物结合的特异性抗体。下图是科研人 员通过杂交一杂交瘤细胞技术（免疫的B细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌 胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体的部分过程。请回答下列问题： 长春碱注射 小鼠 德胚抗原注射小鼠一B淋智 细胞 B淋巴细胞 融合甲①乙②丙 能产生双特异性单克隆抗 体的杂交-杂交瘤细胞 骨髓瘤细胞 (1)图中“融合”常用的方法有 (至少答出两个)， 图中①过程会淘汰甲中 (填细胞类型)，得到乙。 (2)过程②是通过多次 对乙进行筛选，丙的特点是 与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是 (3)图中方框内需要经过 次筛选，才能获取能产生双特异性单克隆杂交一杂交瘤 细胞。体外培养到一定时期的单克隆杂交一杂交瘤细胞会因为 (至少答出两点)等因素而分裂受阻，需进行传代培养。 (4)制备双特异性单克隆抗体的过程中用到的生物技术有 由 (答出两点)。 (5)与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作 用更小，原因是 【生物第7页（共8页）】 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描AP 23.(12分)某科研团队以优化后的甜菜红素基因(RUBY,其表达产物使细胞中积累红色的甜 菜红素)作为报告基因与B:基因形成融合基因B-RUBY后，构建了一种可视化筛选转基因 表达载体，提高了抗虫棉遗传转化效率。图1为融合基因的构建过程，图2为某T质粒的 结构和部分限制酶的识别序列，请回答下列问题： BamH I SalI 引物2 RUBY 引物4 5 引物1 PCR 1 引物3 PCR2 PCR 3 Bt-RUBY 转录方向 图1 Kpn I Xma I EcoR V Sac I 限制酶 识别序列 潮霉素抗性 -BamH I 基因 SacI 5'-GAGCT I C-3' 终止子 EcoR V 启动子 BamH I 5'-G GATCC-3' I-DNA左边界 T-DNA右边界。 Kpn I 5'-GGTAC↓C-31 卡那霉素抗 Ti质粒 Xma I 共5'-G↓CCCCC-3' 性基因 中 Sal I 5'-G↓AGCTC-3' 衣景图才 面 EcoR V 5'-GAT ATC-3' EcoR V 图2不对平明 中 (I)从引物角度分析，利用RUBY与Bt构建融合基因Bm-RUBY的前提条件是 (2)基因表达载体上启动子的作用是 T-DNA的作用 是 (3)为了能使B-RUBY与T雪质粒正确连接应该分别在引物 的5'端添加限制酶 的识别序列。 (4)通常利用 法将B-RUBY导入棉花细胞中，过程中需要多次进行筛选或鉴定： 先用含 的培养基筛选出阳性菌落，然后利用筛选出的细菌与棉花的愈伤组织 混合，再利用 (填“卡那霉素”、“潮霉素”或“卡那霉素和潮霉素”)进行 辅助筛选，或选择 的愈伤组织直接进行分化培养，后者显著提高了筛选效率。 四层饰的所豫前中堂士量不厨周床功草从员人阳料( 天 人效型中营为个中四，前0比位安治为希中常冠个5(C 谢面讯装路公方出药明以中图式西司 人瓜中基并部耳 【生物第8页（共8页）】 CS扫描全能王 3亿人都在用的扫描App