河北省秦皇岛市第三中学2025-2026学年高二下学期6月阶段检测生物试题

**基本信息** 以传统发酵技术与现代生物工程为情境，覆盖微生物培养、细胞工程等核心知识，通过实验分析与技术应用考查生命观念、科学思维及探究实践能力。 **题型特征** |题型|题量/分值|知识覆盖|命题特色| |----|-----------|----------|----------| |单选题|30题/60分|传统发酵技术、微生物分离纯化、植物组织培养、动物细胞培养|结合葡萄酒酿制等传统工艺（第1题）、益生菌研发等科研情境（第6题），考查操作规范与原理理解| |解答题|3题/40分|尿素分解菌培养、番茄-马铃薯体细胞杂交、抗EV71单克隆抗体制备|综合实验设计（第31题培养基灭菌与计数）、技术流程分析（第32题原生质体融合），突出科学探究与创新应用|

秦皇岛市第三中学2025-2026学年度第二学期 第二次月考 高二生物 参考答案 一、单选题（每题 2 分，共 60 分） 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 A D D A A B A A B C 题号 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 答案 C D C B B D D A A 题号 21 22 23 24 25 26 27 28 29 30 答案 D D D A C D C B A A 二、解答题（除标记外，每空 2 分，共 40 分） 31. （10 分） （1）高压蒸汽灭菌法 （1分） （2）固体 （1分）； 否 （1分）； 培养基中含有蛋白胨（氮源）和葡萄糖（碳源），不能分解尿素的细菌也能利用这些营养物质生长繁殖（或尿素不是唯一氮源/碳源） （3）稀释涂布平板法 （1分）； 小； 当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 32. （15 分） （1）纤维素酶和果胶 （1分）； 聚乙二醇（PEG）融合法 （1分）； 电融合法（或离心法） （1分）； 杂种细胞再生出细胞壁 （2）植物组织培养； 植物细胞的全能性； ④； 诱导叶绿素的形成（或诱导分化出叶/促进叶绿素合成） （3）72 33. （15 分） （1）EV71病毒核衣壳蛋白（或 EV71 核衣壳蛋白）； 灭活病毒 （1分）； 选择培养基 （2）抗体检测（或 专一抗体检测）； 既能无限增殖，又能产生特异性抗体（或 产生抗 EV71 抗体） （3）接触抑制； 胰蛋白酶（或 胶原蛋白酶） （4）特异性强、灵敏度高、可大量制备 学科网（北京）股份有限公司 $ 秦皇岛市第三中学2025-2026学年度第二学期 第二次月考 高二生物 考试时间：75分钟；命题人：王燕飞 一、单选题（每题2分，共60分） 1. 某同学利用传统发酵技术酿制葡萄酒，下列操作错误的是（     ） 　A. 为了减少杂菌污染，对葡萄进行消毒处理 　B. 为防止杂菌污染，排气时没有完全打开罐口 　C. 为提高酒精发酵效率，控制发酵温度在18～30℃ 　D. 若观察到发酵液表面形成一层菌膜，则应停止发酵 2. 腐乳、泡菜、果酒、果醋等发酵食品深受消费者青睐，这些美食的制作都离不开传统发酵技术。下列有关叙述错误的是（     ） 　A. 传统发酵缺乏对菌种的选育，以混合菌种的固体或半固体发酵为主 　B. 毛霉将豆腐中的蛋白质分解为小分子肽和氨基酸，使腐乳味道鲜美 　C. 制作泡菜时，发酵液表面的白膜可能是产膜酵母大量繁殖引起的 　D. 葡萄酒制作完成后，只需要打开瓶盖通入空气即可进行葡萄醋的发酵 3. 下列关于传统发酵食品制作的叙述，正确的是（     ） 　A. 制作葡萄酒时，需对葡萄汁和发酵装置进行高压蒸汽灭菌，以防止杂菌污染 　B. 制作果醋时，先接种醋酸菌再接种酵母菌，可提高果醋的发酵效率 　C. 制作泡菜时，泡菜坛口的水封结构可营造有氧环境，满足乳酸菌的代谢需求 　D. 制作腐乳时，发酵过程中有多种微生物参与，其中起主要作用的是毛霉 4. 下列关于传统发酵技术的叙述，错误的是（     ） 　A. 传统发酵利用的微生物一般为天然存在的单一菌种 　B. 传统发酵常常是固体发酵或者半固体发酵 　C. 传统饮食中的酱油、醋、泡菜等可通过传统发酵获得 　D. 传统发酵存在杂菌情况不明、过程控制缺乏标准等问题 5. 下列关于酵母菌纯培养的叙述，正确的是（     ） 　A. 为避免周围环境中微生物的污染，实验操作应在酒精灯火焰附近进行 B．除了第一次划线需将接种环灼烧灭菌外，后续不用灼烧即可划线 C．最后一次划线末端与第一次划线首端相连，有利于酵母菌的分离 D．吸管、培养皿、培养基、金属用具等可以采用干热灭菌法进行灭菌 6．中科院微生物研究所益生菌研发团队对植物乳杆菌进行纯培养研究，为国产益生菌制剂研发提供核心菌种，配制培养基是培养微生物的第一步，下列有关微生物纯培养的叙述错误的是（     ） A．培养基中一般都含有碳源和氮源等 B．配制固体培养基时一般不加入水分 C．培养基配制好后再进行灭菌、接种等步骤 D．倒入培养基的培养皿应冷却凝固后倒置 7．下列关于微生物培养的叙述，正确的是（     ） A．不同培养基的具体配方不同，但一般都有水、碳源、氮源和无机盐 B．制备固体培养基的操作程序为配制培养基、灭菌、调pH、倒平板 C．倒平板后应立即将培养皿倒置 D．用不含有机碳源的培养基可筛选培养固氮微生物 8．在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。相关叙述正确的是（     ） A．巴氏消毒法可以杀死牛奶中绝大多数的微生物，并且不会破坏牛奶中的蛋白质 B．消毒是用强烈的理化方法杀死物体内外的所有微生物 C．配制好培养基后，先高压蒸汽灭菌，后定容 D．采用紫外线照射消毒前，适量喷洒石炭酸，可强化消毒效果 9．平板划线法和稀释涂布平板法是实验室中进行微生物分离和纯化的常用方法。下列相关叙述正 确的是（） A．用平板划线法接种时，每次划线之前都需蘸取菌液 B．平板划线法划线过程中，不能将最后一次的划线与第一次的划线相连 C．利用稀释涂布平板法统计菌落数目时，统计的菌落数就是活菌的实际数 D．统计菌落数目时为保证结果准确，一般选择菌落数目最多的平板进行统计 10．尿素分解菌能产生脲酶，将尿素分解成和，溶于水后菌落周围的pH升高，使溴甲酚紫显紫色。将土壤样液稀释涂在平板上培养，以筛选尿素分解菌，培养基成分见下表。下列叙述错误的是（     ） 成分 KH₂PO₄ Na₂HPO₄ MgSO₄ 葡萄糖 尿素 琼脂 水 含量/g 1.4 2.1 0.2 10.0 1.0 15.0 定容至1L A. 在培养基灭菌前需要将pH调至中性或弱碱性 B.KH₂PO₄、Na₂HPO₄能维持培养基pH稳定 C.CO₂是尿素分解菌生长繁殖的主要碳源 D. 在尿素分解菌菌落的周围会出现紫色圈 11. 微生物计数时，若一个平板上菌落数为300，稀释倍数为10⁶，则每克样品中的活菌数约为（     ） A. B. C. D. 12. 某科研小组欲从农田土壤中分离筛选能高效降解纤维素的菌株，配制了含纤维素的选择培养基，该培养基中不应加入的物质是（     ） A. 琼脂 B. 刚果红 C. 葡萄糖 D. 无机盐 13. 产脂肪酶酵母可用于含油废水处理。科研人员开展了相关研究，试图从土壤中分离出产脂肪酶酵母，相关流程如图所示。下列叙述正确的是（     ） A. 若稀释倍数都为10，则x应为8 B. 接种后应将培养皿倒置，并在皿盖上标好接种日期等 C. 将涂布器放在火焰上燃烧后立即进行涂布 D. 应至少涂布三个平板，求菌落数的平均值 14. 酸笋是竹笋通过发酵产生的传统食品，具有独特的酸味和脆爽口感。下图为酸笋自然发酵的过程，下列说法错误的是（     ） A. 沸水漂烫的目的是杀死原料表面的杂菌 B. 盐水需煮沸冷却后使用，加入罐中没过全部菜料 C. 酸笋的酸味主要是醋酸菌发酵产生的醋酸导致 D. 若加入上一批次的发酵液可加快发酵进程 15. 我国葡萄酒酿造历史悠久、传统发酵技术延续至今。下列叙述错误的是（     ） A. 传统发酵时，葡萄酒的发酵过程中存在的菌种有葡萄果皮上的多种微生物 B. 工业化生产时，酵母菌需在无氧条件下进行扩大培养和酒精发酵 C. 通过诱变育种或基因工程育种能够改良葡萄酒发酵菌种的性状 D. 大规模发酵时，需要监测发酵温度、pH值、罐压及溶解氧等参数 16. 北京天安门广场大型立体花坛中的花卉是通过植物组织培养获得的，呈现出高度一致的颜色和形态，下列叙述错误的是（     ） A. 进行植物组织培养时必须选取离体的植物器官、组织或细胞等 B. 花卉组织培养时，脱分化形成愈伤组织的过程需要充足光照 C. 调控植物激素的比例，能诱导愈伤组织分化成根、芽等不同器官 D. 植物组织培养技术的理论基础是植物细胞的全能性 17. 马铃薯叶片细胞的细胞壁被酶解后，可获得原生质体。以下对原生质体的叙述错误的是（     ） A. 制备时需用纤维素酶和果胶酶 B. 膜具有选择透过性 C. 可再生出细胞壁 D. 在高渗溶液中培养 18. 为应对气候变化带来的盐碱地扩张问题，我国科研团队利用植物体细胞杂交技术，将耐盐性强的野生二倍体偃麦草（2n=14）的原生质体与高产但不耐盐的普通小麦（6n=42）的原生质体进行融合，经筛选与培养获得耐盐小麦新品种“山融3号”。下列说法错误的是（     ） A. 融合前需用纤维素酶和果胶酶处理两种植物细胞以获得原生质体 B. 可使用聚乙二醇（PEG）法或电融合法诱导原生质体融合 C. 杂种细胞发育成植株的理论基础是植物细胞的全能性 D. 偃麦草和普通小麦的原生质体融合，使“山融3号”具有两个物种的所有性状 19. 科研人员利用植物体细胞杂交技术，培育出白菜-甘蓝杂种植株，下列相关叙述正确的是（     ） A. 需用纤维素酶和果胶酶去除细胞壁，获得具有活力的原生质体 B．可通过电融合法、PEG诱导法、灭活病毒诱导法诱导原生质体融合，融合成功的标志是杂种细胞再生细胞壁 C．该技术并未克服了白菜和甘蓝远缘杂交不亲和的障碍，培育出新型作物 D．杂种细胞不需经过脱分化和再分化过程，就能培育成完整的杂种植株 20．下列育种方法中，能产生新基因的是（     ） A．诱变育种 B．杂交育种 C．单倍体育种 D．多倍体育种 21．为缩短育种年限，研究人员常采用花药离体培养得到单倍体幼苗，再用秋水仙素处理，使其染色体数目加倍，进而筛选出可育的纯合品系，这种育种新技术称为（     ） A．诱变育种 B．杂交育种 C．多倍体育种 D．单倍体育种 22．动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（     ） A．培养过程中需定期更换培养液，目的是清除代谢废物和补充营养物质 B．添加95%的空气和5%的CO₂可以为细胞提供呼吸条件的同时维持培养液的pH C．进行动物细胞培养时需将培养液的pH调至7.2~7.4 D．动物细胞培养时，可以用胃蛋白酶将组织分散成单个细胞 23．航天员叶光富和王亚平在天宫课堂上展示了培养的心肌细胞跳动的视频；下列叙述错误的是（     ） A．培养心肌细胞时需要为其提供充足的营养和稳定的环境 B．培养心肌细胞时，应定期更换培养液，以便清除代谢废物 C．传代培养时，悬浮培养的心肌细胞可直接用离心法收集 D．心肌细胞在培养容器中通过有丝分裂的方式无限增殖 24．动物细胞培养是动物细胞工程的基础，下列叙述错误的是（     ） A．动物细胞培养的结果是获得大量的细胞或完整的动物个体 B．培养基中应含有糖类、氨基酸、无机盐和血清等营养物质 C．培养瓶中贴壁生长的细胞可定期用胰蛋白酶处理，分瓶后进行传代培养 D．细胞需置于含有95%空气和5%CO₂混合气体的培养箱中进行培养 25．科学家制备抗HPV（人乳头瘤病毒）单克隆抗体用于开发诊断试剂。下列叙述错误的是（     ） A．可用灭活的病毒诱导细胞融合 B．用选择培养基筛选杂交瘤细胞 C．杂交瘤细胞均能产生抗HPV抗体 D．该单克隆抗体识别HPV特定抗原 26．抗体-药物偶联物（ADC）通过将药物（如细胞毒素）与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，实现对肿瘤细胞的选择性杀伤。ADC作用机制如图所示，下列叙述错误的是（     ） A．ADC的抗体具有靶向运输作用，可以将药物输送到靶细胞 B．制备单克隆抗体时，获得的杂交瘤细胞需进行克隆化培养和抗体检测 C．用荧光标记抗肿瘤表面抗原的单克隆抗体，可以确定肿瘤的复发与转移 D．与使用细胞毒素类药物进行化疗相比，使用ADC的副作用更大 27．下列关于体细胞核移植技术的叙述错误的是（     ） A．体细胞核移植难度大于胚胎细胞核移植的原因是细胞分化程度高 B．在动物体细胞核移植中，非人灵长类动物的体细胞核移植非常困难 C．体细胞核移植技术的理论已经非常完善，绝大多数克隆动物不存在健康问题 D．通过电融合法使两细胞融合，供体核进入卵母细胞形成重构胚 28．下列对动物细胞核移植技术的描述中，错误的是（     ） A．动物细胞核移植包括胚胎细胞核移植和体细胞核移植 B．体细胞核移植过程中通常采用受精卵作为受体细胞 C．重构胚具有发育成完整个体的能力 D．经体细胞核移植生产的克隆动物不是对供核动物的100%复制 29．科学家将黑鼠卵丘细胞（卵巢内卵细胞周围的体细胞）的核物质注入去核的棕鼠卵细胞内，激活以后，移入白鼠的子宫，白鼠最终产下一只克隆鼠，这只克隆鼠的体色和性别是（     ） A. 体色为黑色，性别为雌性 B. 体色为棕色，性别为雄性 C. 体色为白色，性别为雌性 D. 体色为灰色，性别为雄性 30. 我国科学家利用重编程技术成功建立了大熊猫成纤维细胞来源的诱导多能干细胞系iPSCs，这些大熊猫iPSCs不仅能在体外培养条件下稳定增殖传代，还能在体内和体外分化条件下，分化为特定的功能性细胞。下列相关叙述错误的（ ） A. 成纤维细胞是高度分化的细胞，细胞核不再具有全能性 B. 体外培养成纤维细胞使用的是添加了血清的液体合成培养基 C. 可以通过导入DNA或蛋白质的方式来诱导成纤维细胞转化 D. 将iPSCs用于大熊猫的疾病治疗可能存在导致肿瘤发生的风险 二、解答题（除标记外，每空2分，共40分） 31.（10分）尿素是一种重要的农业氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某微生物的培养基配方如下： 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4g 2.1g 0.2g 1.0g 10.0g 1.0g 5.0g （1）配制上述培养基的过程中，培养基常用的灭菌方法是             （1分）。 （2）根据培养基的成分分析，其从物理性质上看属于             （1分）培养基。该培养基上生长的细菌是否都能分解尿素             （1分）（填“是”或“否”），原因是             。 （3）若要统计土壤中分解尿素的细菌的活菌数，需采用的接种方法是             （1分），这种方法统计的数目往往比实际结果偏             ，原因是             。 32.（15分）科学家利用植物体细胞杂交技术成功获得了番茄——马铃薯杂种植株，为了便于杂种细胞的筛选和鉴定，科学家利用红色荧光和绿色荧光分别标记番茄和马铃薯的原生质体膜上的蛋白质，其培育过程如图所示。据图回答下列问题： （1）为获得原生质体，过程①需要利用            （1分）酶处理两种植物细胞，促进原生质体融合的方法有            （1分）、            （1分）（写出两个），两种植物细胞的原生质体融合成功的依据是            。 （2）过程③和④利用的植物细胞工程技术是            。该技术依据的生物学原理是            。该技术需要光照的是过程            。（填“③”或“④”），光照的作用            。 （3）已知番茄细胞内有24条染色体，马铃薯细胞内共48条染色体，则在“番茄—马铃薯”杂种细胞中有            条染色体。 33.（15分）手足口病是由肠道病毒引起的传染病，其中以肠道病毒71型（EV71）最为常见。科研人员用小鼠进行实验，以该病毒核衣壳蛋白为抗原来制备能够中和EV71感染的单克隆抗体，制备流程如图所示。 回答下列问题： （1）在制备抗EV71单克隆抗体的过程中，给小鼠注射的抗原是            ，之后用动物细胞融合时特有的            （1分）法诱导小鼠脾中分离出的B淋巴细胞与小鼠骨髓瘤细胞发生融合。接着用            进行筛选，一段时间后培养基中只有杂交瘤细胞才能生长。 （2）将上述杂交瘤细胞进行克隆化培养和            ，培养时常用96孔培养板进行杂交瘤细胞的培养和筛选，最终筛选出的杂交瘤细胞的主要特点是            。 （3）杂交瘤细胞与大多数普通动物体细胞在培养瓶中生长特点的区别为后者具有贴壁生长和            的特点，因此后者进一步培养时，需要定期用            等消化处理。 （4）最终获得的抗EV71单克隆抗体的主要特点是            。 学科网（北京）股份有限公司 $