山西吕梁市贺昌中学2025--2026学年高二下学期生物周测试卷（五）

吕梁市贺昌中学高二生物周测（五）答题卡 ( 条 码 粘 贴 处 （正面朝上贴在此虚线框内） ) 姓名：______________班级：______________ 准考证号 ( 注意事项 1 、 答题前，考生先将自己的姓名、准考证号码填写清楚。 2 、 请将准考证条码粘贴在右侧的 [ 条码粘贴处 ] 的方框内 3 、 选择题必须使用 2B 铅笔填涂；非选择题必须用 0.5 毫米黑色字迹的签字笔填写，字体工整 4 、 请按题号顺序在各题的答题区内作答，超出范围的答案无效，在草纸、试卷上作答无效。 5 、 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破、弄皱，不准使用涂改液、刮纸刀。 6 、填涂样例 正确 [■] 错误 [--][√] [×] ) ( 缺考标记 考生禁止填涂 缺考 标记 ！ 只能 由监考老师负责用黑色字迹的签字笔填涂。 ) 选择题（请用2B铅笔填涂） １、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ２、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ３、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ４、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ５、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ６、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ７、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ８、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] ９、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 10、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 11、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 12、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 13、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 14、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 15、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 16、[ A ] [ B ] [ C ] [ D ] 非选择题（请在各试题的答题区内作答） 17题、 18题、 19题、 学科网（北京）股份有限公司 $ 吕梁市贺昌中学2025--2026学年高二下学期生物周测试卷（五） 学校:___________姓名：___________班级：___________考号：___________ 一、单选题 1．下列有关微生物的分离、培养及计数的叙述，正确的是（    ） A．用液体培养基培养目的菌比固体培养基更容易获得单菌落 B．液体培养基和固体培养基都能用干热灭菌法和湿热灭菌法灭菌 C．未接种的空白平板上长出菌落可能是培养基灭菌不彻底造成的 D．用稀释涂布平板法进行微生物计数时，结果往往比实际值偏高 2．某同学开展“土壤中分解尿素的细菌的分离与计数”实验，具体流程如下：土壤取样→制备培养基→土样稀释→涂布平板→微生物的培养、观察和计数。下列叙述错误的是（    ） A．土壤取样时用到的纸袋需要预先灭菌而铁铲不需要 B．本实验需要制备以尿素为唯一氮源的培养基和牛肉膏蛋白胨培养基 C．稀释土样时，每一次从试管中吸取稀释液前都要充分摇匀 D．本实验中，每个稀释倍数的稀释液至少要涂布三个平板 3．某种含氮有机物的除草剂，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明。其在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤破坏生态环境。为修复被破坏的生态环境，按下图选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是（    ）    A．有透明圈的菌落能够利用除草剂中的氮源，应扩大培养 B．图中培养基在各种成分溶化后先湿热灭菌再调节PH值 C．实验过程中需要将培养基调至中性或弱酸性 D．图中接种方法为平板划线法，可对细菌进行计数 4．下列高中生物学实验的部分操作，正确的是（　　） A．精子获能，可将精子培养在人工配制含有肝素和Ca2+等有效成分的获能液中 B．进行“植物组织培养”实验中先后使用酒精和次氯酸钠溶液对外植体进行消毒 C．土壤中分解尿素细菌的分离，稀释土壤样品时，无需每个梯度稀释都更换移液器枪头 D．DNA片段扩增及电泳鉴定，接通电源后，看到DNA条带迁移至凝胶边缘，停止电泳 5．在基因工程研究里，利用PCR技术扩增目的基因是常见操作。以下关于PCR技术扩增目的基因的相关叙述，错误的是（　　） A．在PCR反应体系中，除了加入模板DNA、引物、四种脱氧核苷三磷酸外，还需要加入耐高温的DNA聚合酶，如TaqDNA聚合酶 B．PCR扩增目的基因时，引物的设计非常关键，引物应能与目的基因的两条模板链分别互补配对，且引物自身不能形成稳定的二级结构 C．若对一个含目的基因的DNA片段进行PCR扩增，经过3次循环后，含目的基因的DNA片段占所有DNA片段总数的比例为1/2 D．PCR反应的变性阶段，温度通常设置为90-95℃，此过程是为了使DNA双链解开，形成单链模板，该过程破坏的是碱基对之间的氢键 6．下列有关基因工程的叙述中，不正确的是（    ） A．基因工程可以定向改变生物的性状 B．基因的“剪刀”识别特定的DNA序列并在特定的位点切割DNA分子 C．基因的“针线”能缝合由同种限制酶切割产生的黏性末端 D．限制性内切核酸酶一般不仅能切割外源DNA，也能切割自身的DNA分子 7．以洋葱为材料进行DNA的粗提取与鉴定实验，相关叙述正确的是（　　） A．用二苯胺试剂鉴定DNA时，进行沸水浴5分钟后立即观察颜色变化 B．向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数为95%的酒精溶液，有利于DNA析出 C．粗提取的DNA(白色丝状物)在2mol/L的NaCl溶液溶解度较低 D．可将洋葱换成哺乳动物家兔的血液进行该实验 8．W是一种具有特定功能的人体蛋白质。某研究小组拟仿照制备乳腺生物反应器的研究思路，制备一种膀胱生物反应器来获得W，基本过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A．步骤①是基因工程的核心步骤，需要使用的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体 B．与乳腺生物反应器相比，用膀胱生物反应器生产W所选的启动子不同 C．转基因动物的乳腺上皮细胞、膀胱上皮细胞都能表达W基因 D．鉴定W蛋白基因是否成功表达可以检测转基因动物的尿液是否存在W蛋白 9．下列与高中生物学实验相关的叙述中，不合理的是（　　） A．制作果酒先将葡萄用清水冲洗再去除枝梗和腐烂的籽粒 B．DNA粗提取时使用二苯胺溶解蛋白质使之与DNA分离 C．通过调整培养基中植物激素的比例诱导愈伤组织再分化 D．通过改变反应体系的温度来控制PCR反应的进程 10．2017年，某国批准了首例使用细胞核移植技术培育“三亲婴儿”的申请。其培育过程可选用如下技术路线，据图分析下列叙述错误的是（　　） A．对捐献者的卵母细胞去核时需穿透卵母细胞透明带 B．在核移植中受体应选用处于MⅡ期的卵母细胞 C．三亲婴儿的核DNA仅来自父亲和母亲 D．捐献者携带的红绿色盲基因不可能遗传给三亲婴儿 11．下列关于植物细胞工程应用的叙述错误的是（　　） A．利用植物细胞工程培育的白菜—甘蓝，其变异类型为基因重组 B．单倍体植株是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料 C．利用微型繁殖技术可实现铁皮石斛的大量繁殖 D．可通过细胞产物的工厂化生产，大批量获得次生代谢物 12．动物细胞的培养技术有着广泛的应用。下列关于动物细胞培养技术的叙述，错误的是（　　） A．常用CO2培养箱培养动物细胞 B．动物细胞培养基中常添加一定比例的血清 C．所有动物细胞培养到一定阶段后都会出现接触抑制现象 D．通过选择或纯化的方法，能从培养的细胞系中分离出具有特殊性质的细胞 13．为获得抗白叶枯病的水稻品种，研究人员构建了含有D基因（白叶枯病抗病基因）的重组Ti质粒（如图）。通过农杆菌转化法将D基因导入水稻的愈伤组织，最终获得抗病植株。下列叙述错误的是（　　） A．水稻愈伤组织细胞中的RNA聚合酶能够识别U6启动子 B．转基因水稻植株中D基因与卡那霉素抗性基因均会正常表达 C．愈伤组织再分化获得的含有D基因的幼苗不一定是抗病水稻植株 D．可用抗原-抗体杂交技术检测D基因在水稻中的表达量 14．下列有关质粒的叙述错误的是（　　） A．质粒可从原核细胞或真核细胞中分离，其上含有控制生物性状的基因 B．质粒上的限制酶切割位点可供外源DNA片段插入其中 C．质粒结构简单，由DNA和蛋白质构成，是可自我复制的小型细胞器 D．质粒上的复制原点可使外源基因在受体细胞中能稳定复制并遗传 15．研究人员制备了乳腺生物反应器，用其获得具有特殊功能的蛋白质M，基本过程如图所示，①～③表示操作过程，下列说法正确的是（    ） A．具有启动子、复制原点和限制酶切割位点的质粒即可作为运载体 B．①过程常用显微注射法，②过程形成早期胚胎时不经过细胞的分化 C．该过程须选择雌性胚胎，胚胎移植前须取滋养层细胞，检测其性别 D．③过程一般选择发育良好的原肠胚，须对代孕母牛进行同期发情处理 16．甘草是中医使用最多的药材之一，其提取物中的黄酮具有抗衰老、抗炎等作用。有同学提出利用现代生物技术生产黄酮的两条技术路径，如图所示。下列叙述正确的是（　　） A．外植体必须经过灭菌处理后才能进行接种培养 B．图中B代表愈伤组织，两条技术路径均证明了植物细胞具有全能性 C．黄酮属于植物体产生的次生代谢物，在整个生命过程中一直通过代谢产生 D．路径二添加果胶酶的目的是分散植物细胞，悬浮培养使用液体培养基 二、解答题 17．牛和羊的瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解尿素。某研究小组欲从瘤胃内筛选出能高效降解尿素的细菌，设计了如下实验。请分析并回答下列问题：实验步骤： I、取样：从刚宰杀的牛的瘤胃中取样，将样品装入事先灭过菌的锥形瓶中。 Ⅱ、培养基的配制和灭菌：全营养LB固体培养基的配方：水、蛋白胨、酵母提取物、NaCl、琼脂糖（一种凝固剂）。尿素固体培养基的配方：水、葡萄糖、NaCl、K2HPO4、尿素、琼脂糖。 Ⅲ、制备瘤胃稀释液并接种，如下图1所示。 IV、在无氧条件下进行微生物的培养、观察与计数。 (1)全营养LB固体培养基和尿素固体培养基都含有微生物生长所需的基本营养物质，除水外还有_____________。（至少答两点） (2)该小组采用_____法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。为检测该培养基灭菌是否彻底，应采用的方法是_____。本实验在_____（“18~25℃”或“25~30℃”或“30~37℃”）的恒温培养箱中需培养1-2d，每隔2-4h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果，其目的是____________________。 (3)若将最后一个试管中的稀释液分别涂布到3个尿素平板上培养，培养后平板上出现的菌落数如图1所示，则5mL瘤胃样品中含有目标活菌数约为____个。该方法统计获得的菌落数比实际的活菌数少的原因是________________________。 18．人干扰素是一种具有特定功能的蛋白质，可用于治疗病毒的感染和癌症。长期以来，人们利用相关病毒诱导白细胞产生干扰素再从血液中提取，但每升血只能提取0.05μg。1982年，我国科学家侯云德通过基因工程等技术研制出我国首个基因工程药物——重组人干扰素。图甲和图乙为质粒和人干扰素α-1b基因的结构图。 回答下列问题： (1)目的基因的获取和扩增。从_____细胞中提取_____，经逆转录获取目的基因，再通过PCR技术扩增目的基因。PCR在延伸最后阶段需要设置10min的原因是_____。 (2)表达载体的构建和筛选。应选取限制酶__________切割图甲中质粒与图乙中的目的基因，以防止目的基因与质粒_____、______。之后，用DNA连接酶连接并使用合适方法进行筛选。 (3)导入受体细胞。将大肠杆菌放于低温、低浓度的CaCl2溶液中，使之成为感受态细胞。再在低温条件下将感受态大肠杆菌与表达载体混合，然后进行短暂的_____处理，使外源DNA转入大肠杆菌。 (4)检测目的基因及表达产物。可用含有适宜浓度的______的培养基来筛选含有表达载体的大肠杆菌。若该物质浓度过低，可能会使检测结果出现假阴性。可采用_____方法来进一步检测目的基因的存在。为检测是否产生干扰素，分子水平上可采用_____的方法进行检测。 19．如图为利用生物技术生产单克隆抗体和经体外受精培育优质奶牛的过程。请回答下列问题： (1)细胞A的形成过程中常用的诱导因素有灭活的病毒、____________、电融合等。 (2)直接产生的A细胞可能有3种，经选择性培养的杂交瘤细胞，还需进行克隆化培养和____________，经多次筛选就可获得足够数量的能分泌所需抗体的细胞，可在____________或____________进行培养。 (3)上述途径所获得的抗体可广泛用作诊断试剂，还可用于____________等。（答出一点） (4)若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对图Ⅱ中囊胚进行____________，操作过程需要特别注意的问题是____________________________________。 试卷第6页，共7页 试卷第7页，共7页 学科网（北京）股份有限公司 《吕梁市贺昌中学高二生物周测（五）》参考答案 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C A A B C D B C B A 题号 11 12 13 14 15 16 答案 A C B C C D 1．C 【分析】液体培养基一般用湿热灭菌法，干热灭菌法因温度高可能破坏液体培养基；固体培养基可用干热和湿热灭菌法。 【详解】A、用液体培养基培养目的菌难以在培养基表面形成菌落，A错误； B、培养基通常用湿热灭菌法灭菌，不用干热灭菌法灭菌，B错误； C、未接种的空白平板上长出菌落可能是培养基灭菌不彻底造成的，C正确； D、用稀释涂布平板法进行微生物计数时，由于相邻的两个或多个活菌会共同形成一个菌落，结果往往比实际值低，D错误。 故选C。 2．A 【详解】A、土壤取样时，铁铲直接接触土壤样本，若未灭菌可能引入杂菌污染，破坏实验准确性；纸袋用于盛放样本，也需灭菌以保证无菌操作。A错误； B、本实验需制备以尿素为唯一氮源的选择培养基（筛选分解尿素细菌），同时需牛肉膏蛋白胨培养基作为对照（验证选择培养基的有效性），B正确； C、稀释土样时，每次吸取前充分摇匀可确保菌液分布均匀，使涂布后单菌落计数更准确，属于稀释涂布平板法的规范操作，C正确； D、为了保证计数结果的准确性，每个稀释倍数的稀释液至少要涂布三个平板，以减少实验误差，取平均值进行计算，D正确。 故选A。 3．A 【分析】该实验是从土壤中筛选分离能降解除草剂的微生物的过程。这样的实验要将土壤稀释处理，以除草剂为唯一的氮源进行处理筛选土壤微生物，以菌落计数法进行统计计数。 【详解】A、题目中提到，含除草剂的培养基是不透明的。如果某个菌落周围出现透明圈，说明该菌落能够降解除草剂，从而使培养基中的除草剂被分解，形成透明圈，这表明这些细菌能够利用除草剂中的氮源进行生长。因此，这些菌落是目标菌株，应该被扩大培养用于后续的降解实验或应用，A正确； B、在微生物实验中，培养基的灭菌通常是在调pH后进行的，调pH前灭菌可能导致培养基再次被污染，B错误； C、实验筛选的是细菌，需要将培养基调至中性或弱碱性，C错误； D、平板划线法的主要目的是分离单个菌落，而不是计数。细菌计数通常采用稀释涂布平板法。因此，平板划线法不能用于计数，D错误。 故选A。 4．B 【详解】A、精子获能的化学诱导法中，是将精子放在含肝素或Ca2+载体的获能液中诱导获能，二者为不同的获能处理，不是同时添加，A错误； B、植物组织培养实验中，外植体用酒精消毒30s，然后立即用无菌水清洗2~3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次，B正确； C、稀释土壤样品时，每个梯度都需要更换移液器枪头，避免高浓度菌液残留污染低浓度梯度，保证稀释倍数的准确性，C错误； D、DNA本身无颜色，电泳过程中无法直接观察到DNA条带，需观察上样缓冲液中指示剂的迁移位置，待指示剂接近凝胶边缘时停止电泳，D错误。 5．C 【详解】A、PCR反应体系的必需组分包含模板DNA、特异性引物、四种脱氧核苷三磷酸（dNTP）、耐高温的DNA聚合酶（常用Taq DNA聚合酶），此外还需要缓冲液等，A正确； B、引物需要分别与目的基因的两条模板链3'端互补配对，才能保证扩增的序列是目的基因；若引物自身形成稳定的二级结构（如发夹结构），会无法与模板正常结合，因此引物设计时需避免该情况，B正确； C、1个含目的基因的模板DNA经3次PCR循环后，共产生23=8个子代DNA片段，所有子代DNA均包含目的基因序列，占比为1，并非1/2，C错误； D、PCR变性阶段温度通常设置为90~95℃，高温会破坏DNA双链碱基对之间的氢键，使双链解开为单链，作为后续延伸的模板，D正确。 6．D 【详解】A、基因工程可按照人们的意愿定向导入目的基因，使生物获得预期性状，能定向改变生物的性状，A正确； B、基因的“剪刀”是限制性核酸内切酶，其具有特异性，可识别特定的DNA序列并在特定位点切割DNA分子的磷酸二酯键，B正确； C、基因的“针线”是DNA连接酶，能缝合由同种限制酶切割产生的黏性末端，作用部位是两个DNA片段间的磷酸二酯键，C正确； D、限制性内切核酸酶主要来源于原核生物，原核生物自身的DNA要么不含该限制酶的识别序列，要么识别序列被甲基化修饰，因此限制酶一般仅切割外源DNA，不切割自身的DNA分子，D错误。 7．B 【详解】A、用二苯胺试剂鉴定DNA时，沸水浴5分钟后需要待试管冷却后再观察，冷却后蓝色显色现象更清晰，A错误； B、DNA不溶于酒精，蛋白质等杂质可溶于酒精，因此，向含DNA的滤液中加入预冷的体积分数为95%的酒精溶液，有利于DNA析出，B正确； C、DNA在0.14mol/L的NaCl溶液中溶解度最低，在2mol/L的NaCl溶液中溶解度很高，C错误； D、家兔是哺乳动物，其成熟红细胞无细胞核和众多细胞器，几乎不含DNA，无法作为该实验的材料，D错误。 8．C 【详解】A、步骤①是基因表达载体的构建，是基因工程的核心步骤，需要使用的工具有限制性内切核酸酶、DNA连接酶和载体，A正确； B、乳腺生物反应器是将W基因在乳腺细胞中表达，应选用乳腺细胞中特异性表达的基因的启动子，而膀胱生物反应器是将W基因在膀胱上皮细胞中表达，应选用膀胱上皮细胞中特异性表达的基因的启动子，B正确； C、因为基因是选择性表达的，现需要制备一种膀胱生物反应器来获得W，所以W基因只在膀胱上皮细胞中表达，C错误； D、若W蛋白基因表达成功，说明膀胱生物反应器制备成功，就可以从转基因动物的尿液中检测到W蛋白，D正确。 9．B 【详解】A、制作果酒时先清水冲洗葡萄再去除枝梗，可避免去枝梗时葡萄破损引发杂菌污染，操作合理，A不符合题意； B、二苯胺是DNA的鉴定试剂，沸水浴条件下可与DNA反应呈现蓝色，不能用于溶解蛋白质分离DNA；DNA与蛋白质分离利用的是二者在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同等原理，B错误，符合题意； C、植物组织培养中，生长素与细胞分裂素的比例是调控愈伤组织再分化方向的关键因素，调整二者比例可诱导愈伤组织生根或生芽，表述合理，C不符合题意； D、PCR反应分为变性、复性、延伸三个阶段，三个阶段所需温度不同，可通过调整反应体系温度控制反应进程，表述合理，D不符合题意。 10．A 【详解】A、对捐献者卵母细胞进行显微去核操作时，采用密度梯度离心，紫外光短时间照射、化学物质处理等方法去核，都没有刺破透明带也能去核，A错误； B、核移植操作中，一般选择处于MⅡ期的卵母细胞作为核受体，该时期卵母细胞的细胞质中含有能促进细胞核全能性表达的物质，B正确； C、该技术中捐献者仅提供去核卵母细胞的细胞质，三亲婴儿的核DNA全部来自母亲的卵母细胞核和父亲的精子，C正确； D、红绿色盲基因是位于细胞核染色体上的核基因，捐献者仅提供细胞质，细胞核已经被去除，因此捐献者携带的红绿色盲基因不可能遗传给三亲婴儿，D正确。 11．A 【详解】A、白菜—甘蓝是植物体细胞杂交的产物，该技术将两个物种的体细胞融合后培育为完整植株，变异类型属于染色体数目变异，基因重组多发生在有性生殖的减数分裂过程中，A错误； B、单倍体植株细胞中染色体数目为本物种配子染色体数目，若发生基因突变，无论显隐性突变当代即可表现出相应性状，且细胞增殖速度快，是进行体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料，B正确； C、微型繁殖技术的原理是植物细胞的全能性，属于无性繁殖，可保持亲本优良性状，短时间内获得大量遗传特性相同的植株，可实现铁皮石斛的大量繁殖，C正确； D、可通过植物组织培养获得愈伤组织，对愈伤组织进行大规模培养，可大批量获得紫草素、紫杉醇等次生代谢物，属于细胞产物的工厂化生产的应用，D正确。 12．C 【详解】A、动物细胞培养常用CO2培养箱，其中5%左右的CO2的作用是维持培养液的pH相对稳定，A正确； B、当前人类尚未完全了解动物细胞生长所需的全部营养物质，因此培养基中常添加血清等天然成分，以补充细胞生长所需的未知营养，B正确； C、接触抑制是正常贴壁生长的动物细胞才会出现的现象，发生癌变的动物细胞细胞膜上糖蛋白减少，细胞间黏着性降低，培养时不会出现接触抑制，并非所有动物细胞培养都会出现该现象，C错误； D、细胞系是可连续传代培养的细胞群体，部分细胞遗传物质可能发生改变，通过选择或纯化的方法，可从细胞系中分离出具备特殊性质的细胞株，D正确。 13．B 【详解】A、将T-DNA整合到水稻愈伤组织的染色体DNA后，D基因表达并使水稻植株表现出抗病性状，说明D基因上游的U6启动子能够被水稻愈伤组织细胞中RNA聚合酶识别，并驱动D基因转录，A正确； B、重组Ti质粒中，卡那霉素抗性基因不在T-DNA上，不会整合到水稻基因组中，转基因水稻中卡那霉素抗性基因不会正常表达，B错误； C、即使幼苗含有D基因，也可能因为目的基因未成功转录、翻译，或表达产物无活性，无法表现抗病性状，C正确； D、D基因的表达产物是蛋白质，可用抗原-抗体杂交技术检测D基因的表达情况和表达量，D正确。 14．C 【详解】A、质粒可从原核细胞（如大肠杆菌）和部分真核细胞（如酵母菌）中分离获得，其上的基因可控制对应性状（如抗性基因控制抗药性），A正确； B、作为运载体的质粒需具备一个或多个限制酶切割位点，供外源DNA片段插入以构建重组质粒，B正确； C、质粒是独立于拟核或细胞核外的小型环状双链DNA分子，不含蛋白质，也不属于细胞器，C错误； D、质粒上的复制原点是DNA复制的起始位点，可使质粒及插入的外源基因在受体细胞中稳定复制并遗传给子代，D正确。 15．C 【详解】A、质粒作为运载体除了需要具备启动子、复制原点、限制酶切割位点，还有标记基因、终止子等，A错误； B、①过程导入动物细胞常用显微注射法，②过程形成早期胚胎时需经过细胞的分化，B错误； C、该过程须选择雌性胚胎， 胚胎移植前须取滋养层细胞（不会损伤内细胞团，不影响胚胎后续发育），检测其性别，以减少对胚胎的影响，C正确； D、步骤③表示胚胎移植，可选择发育良好的囊胚，且代孕母体需进行同期发情处理，这样可以为移入的胚胎提供相同的生理环境，D错误。 16．D 【详解】A、外植体必须经过消毒处理后才能进行接种培养，若进行灭菌处理，会将外植体杀死，无法进行接种培养，A错误； B、图中B代表愈伤组织。路径一通过植物组织培养技术获得脱毒苗，最终发育成完整植株，证明了植物细胞具有全能性；而路径二只是将外植体培养成愈伤组织并进行悬浮振荡培养与继代，没有发育成完整植株，不能证明植物细胞具有全能性，B错误； C、黄酮属于植物体产生的次生代谢物，次生代谢物是植物在特定生长发育阶段产生的，并非在整个生命过程中一直通过代谢产生，C错误； D、路径二添加果胶酶的目的是分散植物细胞，悬浮培养使用液体培养基，D正确。 17．(1)碳源、氮源、无机盐 (2) （稀释）涂布平板 将未接种的培养基放在恒温培养箱中培养，检验是否有菌落产生 30~37℃ 为了防止培养时间不足导致菌落遗漏 (3) 3.5×1010 当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 【分析】稀释涂布平板法：稀释涂布平板法除了可以用于分离微生物外，也常用来统计样品中活菌的数目。当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测样品大约含有多少活菌。 【详解】（1）虽然各种培养基的配方不同，但是一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等微生物生长所需的基本营养物质。 （2）据图可知，接种后平板上培养出了菌落，且菌落可用于计数，故接种方法为稀释涂布平板法，即该小组采用稀释涂布平板法对瘤胃中分解尿素的细菌进行分离和计数。稀释涂布平板法操作时需要在酒精灯火焰旁边操作，用涂布器将菌液均匀的涂布到培养基上，故需要用到①酒精灯、③培养皿、④涂布器。 将未接种的培养基（或空白培养基）放在恒温培养箱中保温1~2天，检验是否有菌落产生，用于检测该培养基灭菌是否彻底。若有菌落产生，说明灭菌不彻底，需要重新配制培养基。由于分离的菌是从牛的瘤胃中取样的，故培养箱的温度设定在30—37℃为宜。为了防止培养时间不足导致菌落遗漏，在恒温培养箱（30—37℃）中需培养1~2d，每隔24h统计一次菌落数目，选择菌落数目稳定时的记录作为结果。 （3）5号试管的稀释倍数为107，5mL瘤胃样品中含有目标活菌数=（68+75+67）÷3÷0.1×107×5=3.5×1010（个）。由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，故使用稀释涂布平板法统计获得的菌落数比实际的活菌数偏少。 18．(1) 被病毒诱导的白细胞（或免疫后的白细胞） mRNA 使所有DNA片段充分延伸，保证PCR扩增的完整性 (2) BamHⅠ和HindⅢ 自身环化 反向连接 (3)热刺激 (4) 氨苄青霉素 PCR技术/核酸分子杂交技术 抗原-抗体杂交 【详解】（1）据题干信息可知，干扰素的产生是在相关病毒诱导后的白细胞才能产生，没有病毒诱导一般是不会产生干扰素的，所以应从被相关病毒免疫的白细胞或者被相关病毒诱导后的白细胞中提取mRNA，通过逆转录后获得所需的目的基因。PCR在延伸最后阶段需要设置10min，使所有DNA片段充分延伸，确保PCR产物完整，提高扩增效率。 （2）为了防止目的基因与质粒自身环化以及目的基因与质粒反向连接，应选用限制酶 BamHⅠ和HindⅢ 切割图甲中质粒与图乙中的目的基因。因为使用两种不同的限制酶切割可以产生不同的黏性末端，避免上述情况发生。 （3）将大肠杆菌放在低温、低浓度的 CaCl2溶液中，使之成为感受态细胞。在低温条件下将感受态大肠杆菌与表达载体混合，然后进行短暂的热刺激处理，使外源DNA转入大肠杆菌。 （4）可用含有适宜浓度的氨苄青霉素的培养基来筛选含有表达载体的大肠杆菌，因为图甲质粒中含有氨苄青霉素抗性基因。若该物质浓度过低，可能会使检测结果出现假阴性。 可采用 PCR 技术（或核酸分子杂交技术）来进一步检测目的基因的存在。抗原 - 抗体杂交可以特异性地检测蛋白质是否存在， 为检测是否产生干扰素，分子水平上可采用抗原 - 抗体杂交的方法进行检测。 19．(1)聚乙二醇 (2) 抗体检测 体内（小鼠腹腔） 体外 （培养液） (3)治疗疾病（或治疗癌症、作为生物导弹、运载药物等，答出一点即可） (4) 胚胎分割 将内细胞团均等分割 【详解】（1）在动物细胞融合过程中，常采用灭活的病毒、聚乙二醇、电融合等方法诱导细胞融合。 （2）融合的杂交瘤细胞不一定能产生所需抗体，因此还需要经过克隆化培养和抗体检测等筛选过程，最终才能获得产生单克隆抗体的杂交瘤细胞。获得的杂交瘤细胞可用培养液培养和注入小鼠腹腔中培养。 （3）单克隆抗体除了用作诊断试剂，还可用于：  治疗疾病（如癌症的靶向治疗） 运载药物（生物导弹） 作为科研试剂等。 （4）若要同时获得多头与此优质奶牛相同的小牛，可对Ⅱ中囊胚进行胚胎分割，操作过程需要特别注意的是将囊胚的内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 答案第8页，共8页 答案第7页，共8页 学科网（北京）股份有限公司 $