学易金卷：高二生物下学期期中模拟卷（广东专用）

2025-2026学年高二生物下学期期中考卷 生物·答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 1.答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填： 缺考标记 ▣ 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 违纪标记 ▣ 2.选择题必须用2B铅笔填涂：非选择题必须用0.5m黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效：在草稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂■ 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 错误填涂[×]【1【/] 、 选择题：本题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分。在 每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 11A][BJIC]ID] 6IA]IB]IC]ID] 11[A][B][C][D] 16.[A]IB]IC]ID] 2A][B][C][D] 7A]IB]ICJ[D] 12[AJ[B][C][D] 3.[A][B][C][D] 8[A][B][C][D] 13A][B][C][D] 4[A][B][C][D] 9[A][B][C][D] 14[AJ[B][C][D] 5[A][B][C][D] 10.[AJIBI[C][D] 15[AJ[B][C]ID] 二、本题共5小题，共60分。 17.（每空2分，共12分) (1) (2) (3) (4) 18. (12分，除标注外，每空1分) (1) (2) (2分) (3) 4 (5) (2分) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 19. (12分) (1) (2) (3) 组别 12345 荧光素标记P4+++++ 未标记P4 5×50×250× ARF3 ++++ 方向 游离P4→■ 注：“+-”分别表示“添加/不添加” 图2 (4) (5) 抑制 雄蕊发育 花发育极早期 乙烯含量 形成雌花 启动/促进 雌蕊发育 20. (11分) (1) (2) (3) (4) 21. (13分) (1) (2) (3) (4)2025-2026学年高二生物下学期期中考卷 生物答题卡 姓 名： 准考证号： 贴条形码区 注意事项 一==-■==。。==-一=-■-。===。=●一一=▣- 1.答题前，考生先将自己的姓名，准考证号填写清楚，并认真核准 考生禁填： 缺考标记 ▣ 条形码上的姓名、准考证号，在规定位置贴好条形码。 违纪标记 2.选择题必须用2B铅笔填涂；非选择题必须用0.5mm黑色签字笔 以上标志由监考人员用2B铅笔填涂 答题，不得用铅笔或圆珠笔答题；字体工整、笔迹清晰。 3.请按题号顺序在各题目的答题区域内作答，超出区域书写的答案 选择题填涂样例： 无效；在草稿纸、试题卷上答题无效。 正确填涂 4. 保持卡面清洁，不要折叠、不要弄破。 错误填涂X1【W1【/ 一、选择题：本题共16小题，共40分。第112小题，每小题2分：第1316小题，每小题4分。在 每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 1[A][B][C][D] 6.[A][B][C][D] 11.A][B][CI[D] 16.A1[BJ【C]IDj 2[A][B][C][D] 7.[A][B][C][D] 12.[AJ[B1[C1[D] 3.[A][B][C][D] 8.[AJ[B][C][D] 13.[A][B][C][D] 4[A][B][C][D] 9.[A][B][C][D] 14.[A][B1IC1[D] 5.[A][B][C][D] 10.[A][B][C][D] 15[A][B][C][D] 二、本题共5小题，共60分。 17.（每空2分，共12分) (1) (2) (3) (4) 18. (12分，除标注外，每空1分) (1) (2) (2分) (3) (4) (5) (2分) 请在各题目的答题区域内作答，超出黑色矩形边框限定区域的答案无效！ 19. (12分) (1) (2) (3) 组别 12345 荧光素标记P4+++++ 未标记P4 --5×50×250× ARF3 -++++ ■ 向 游离P4→■ 注：“+-”分别表示“添加/不添加” 图2 (4) (5) 抑制 雄蕊发育 花发育极早期 乙烯含量增多 形成雌花 启动/促进 雌蕊发育 20. (11分) (1) (2) (3) (4) 21. (13分) (1) (2) (3) (4) 2025-2026学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修3 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本大题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分。在每小题列出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1．某地土壤有机物A污染严重，某生物兴趣小组同学欲分离并计数土壤中分解有机物A的微生物。下列有关叙述错误的是（    ） A．取土样时用的铁铲和取样袋在使用前均需要进行灭菌处理 B．培养基甲和培养基乙均需以有机物A为唯一碳源 C．③过程使用的平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上 D．用图示③的接种方法计数得到的菌落数往往比实际的活菌数少 2．关于传统发酵技术及其应用，下列叙述正确的是（　　） A．制作腐乳时，豆腐坯上长出的白毛主要是根霉的菌丝 B．制作泡菜时，加入陈泡菜水可以缩短泡菜制作的时间 C．制作果酒时，通过检测是否产生CO2来判断发酵进程 D．制作果醋时，在发酵液的表面会形成醋酸菌的单菌落 3．流感嗜血杆菌（Hi）在基本培养基中无法生长，将其与金黄色葡萄球菌在基本培养基上共培养时，金黄色葡萄球菌周围的Hi菌落较大，越远则菌落越小，称为卫星现象。为探究动物血细胞中是否含有Hi所需生长因子，把其菌悬液与基本培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分成四个区域，将从绵羊血细胞中提取的V、X两种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示（黑点代表Hi菌落）。下列叙述错误的是（　　） A．在基本培养基中缺乏Hi生长所需的生长因子，故无法生长 B．卫星现象表明金黄色葡萄球菌能合成Hi所需的生长因子 C．由图可知Hi生长所需的生长因子为V或X D．加入绵羊血的基本培养基可用于Hi的扩大培养 4．发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（　） A．在发酵之前需要利用固体培养基对菌种进行扩大培养 B．通过发酵获得大量的微生物蛋白质即单细胞蛋白 C．菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可以从自然界筛选 D．发酵过程中环境条件会影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成 5．胚胎工程是对动物早期胚胎或配子进行一系列显微操作和技术处理，以实现在分子水平和细胞水平上改良遗传特性的技术。下列相关叙述正确的是（    ） A．哺乳动物受精过程发生在子宫内 B．采集到的精子可直接用于体外受精 C．精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精子进入卵内 D．卵子形成过程中，减数分裂Ⅰ和减数分裂Ⅱ均在卵巢内完成 6．猪细小病毒（PPV）会导致猪患繁殖障碍性传染病。VP2蛋白是PPV的主要结构蛋白，可诱导机体产生特异性中和抗体。某科研小组为开发基于VP2蛋白的PPV免疫学检测产品，设计实验流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①过程取小鼠脾脏组织剪碎加入培养液即可制成单细胞悬液 B．②过程可通过聚乙二醇诱导细胞融合，得到3种以上杂交细胞 C．③过程需进行克隆化培养，传代培养过程中会发生贴壁和接触抑制 D．④过程可将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养 7．（原创题）引物是PCR反应体系的重要的组分，下图为某目的基因的两端的部分碱基序列，下列选项中的短单链核酸，哪个为扩增该目的基因的最佳的引物（ ） 目的基因的两端的部分序列： a链：5’—ATG CCC AAG ATC CGT CA ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙GAA CAC—3’ b链：3’—TAC GGG TTC TAG GCA GT ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙CTT GTG—5’ A.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAG ATC ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙GAA CAC—3’ B.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAG ATC—3’ C.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAT CTT GGG—3’ D.3’—TAC GGG TTC TAG GCA GTC TTA—5’ 8．科研人员探究不同处理方式（M和N）对体外受精胚胎发育的影响，得到如图所示结果。下列关于该实验的分析错误的是（    ） A．对照组的主要目的是排除培养液等基础条件对胚胎发育的影响 B．卵裂过程中细胞数量不断增加，胚胎总体积也不断增大 C．实验结果表明M和N均能提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率，且M的效果大于N D．若要进一步探究M处理的最适浓度，应设置包含当前浓度在内的一系列浓度梯度实验 9．基因工程、发酵工程等现代生物技术广泛应用于农牧业、医药卫生和食品工业等方面。下列相关叙述，错误的是（　　） A．利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的化学防治 B．采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白 C．通过转入乙肝病毒抗原基因的酵母菌发酵生产乙肝疫苗 D．通过导入肠乳糖酶基因的奶牛分泌出乳糖含量低的乳汁 10．胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（　　） A．获得原生质体时通常需用纤维素酶和果胶酶的低渗溶液处理 B．过程中使用的培养基需要先灭菌、分装，再调整到适宜的pH C．“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中 D．应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 11． 人类的cGAS蛋白会抑制DNA断裂后的修复，导致DNA损伤积累。但裸鼹鼠的cGAS蛋白却能促进DNA修复。研究发现两者的cGAS蛋白有4个氨基酸不同。下列叙述错误的是（　　） A．DNA损伤积累可能会诱发细胞衰老和癌变 B．氨基酸不同会引起cGAS蛋白空间结构不同 C．裸鼹鼠与人类的cGAS基因上的密码子不同 D．通过基因工程可以改造人类的cGAS蛋白 12． 2025年3月，窦科峰院士团队在《自然》发文，报告了世界首例转基因技术猪肝到人体（脑死亡）肝移植的成功案例。下列关于转基因克隆猪肝的叙述，错误的是（　　） A．选用猪做克隆器官供体是因为其内脏构造、大小与血管分布和人的类似 B．该操作的核心步骤是基因表达载体的构建，需用到限制酶、DNA连接酶 C．对该提供肝源的猪进行基因工程技术改造时，可直接对其体细胞进行操作 D．该技术成功的关键可能是敲除了猪基因中某些会引发免疫排斥反应的关键基因 13．研究者筛选西北高原乳酸菌株，通过深层液态发酵中药，提升药效。下列叙述错误的是（　　） A．筛选菌株活性优于野生菌，更适配中药成分环境 B．发酵降解大分子为小分子，可提升药物吸收效率 C．液态发酵较固体发酵，更易规模化与连续化生产 D．液态发酵需通氧并搅拌，利于菌株大量快速增殖 14．猪的生理特征、器官大小以及胚胎发育方面与人类具有很高的相似性，成为“种植”人类器官的热门动物。下图为我国科学家利用猪培育可用于移植的人源肾脏的相关过程。下列叙述正确的是（ ） A．推测SIX1/SALL1两种基因是人源肾脏发育所必需的基因 B．可用载体、聚乙二醇等化学方法激活重构胚 C．注入人源干细胞的作用是使人源干细胞分化产生人的组织和器官 D．这种肾脏中虽然有部分猪细胞，但移植给人不会引起免疫排斥 15． LMNA基因编码的蛋白可维持细胞核的结构稳定。研究者利用CRISPR/Cas9技术获得LMNA突变基因被修复的iPSC细胞系。该细胞系作为对照在研究中的价值是（　　） A．验证CRISPR/Cas9系统对LMNA基因的编辑效率 B．排除遗传背景差异以确定LMNA基因突变与表型关系 C．制备可供异体移植的通用型干细胞治疗产品 D．比较LMNA基因不同突变类型对细胞功能的影响 16． 叶绿体发育与BG基因、GK基因的表达有关、GK功能缺失突变体的叶绿素含量会显著降低。研究者将一定浓度的GK蛋白与系列浓度BG蛋白混合后，再加入GK蛋白靶基因CAO的启动子DNA片段，反应一段时间后，经琼脂糖凝胶电泳检测结果如下图。以下分析正确的是（　　） A．BG蛋白通过抑制GK蛋白的功能影响叶绿体发育 B．GK蛋白结合靶基因CAO导致叶绿素的含量下降 C．条带中的“游离DNA片段”来自BG基因 D．随BG蛋白浓度增加CAO的启动子功能增强 第Ⅱ卷 二、非选择题：本大题共5小题，共60分。考生根据要求作答。 17. ( 每空2分，共12分）市场上饮用醋种类繁多，口感不一。某学习小组学习了发酵工程知识后，利用葡萄和糯米酿造果粮复合饮用醋，并设计了如下加工工艺流程： (1)对糯米进行蒸煮糊化的目的是_____________________________________________（写出1点）。 (2)A、B接种的菌种一般要先活化和____________后，再接种于发酵液中。从细胞结构上看，两菌种的主要区别为_________________________________________________________。 (3)酒精发酵的质量决定了醋的品质。为了解酒精发酵进程，可在发酵过程中定期取样，用_________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。选择高产醋杆菌时，可将醋杆菌涂布培养在白色的培养基上，并挑选______________________________的菌落作为发酵菌种，发酵菌种经扩大培养后再接种至酒醪中进行发酵。 (4)由酒精发酵转变为醋酸发酵，需要改变的环境条件是_______________________________。 18． （12分，除标注外，每空1分）“不对称体细胞杂交”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株。疣粒野生稻（2n=24）对白叶枯病有较高抗性，由于不同类型间的有性杂交后代高度不育，限制了野生稻的有利基因向栽培稻（2n=24）的转移，为此研究人员利用“不对称体细胞杂交”技术，将疣粒野生稻的抗白叶枯病特性转移到栽培稻中，过程如下图。请回答下列问题。 注：X射线能随机破坏细胞核中染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 (1) 利用“不对称体细胞杂交”技术育种的理论基础有细胞膜的流动性、________________________， 染色体的_______________。 (2) 根据物理性质，实验所用的培养基为______________________，培养基中添加蔗糖的目的是_______ __________________________________________________________（2分）。 (3)与过程①相比，过程④需在______（有光/无光）条件下进行，过程④中若诱导未分化的细胞分化成根，需要提高 ______________（激素）的比例。 (4)（信息筛选）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选择______ 原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用____________计数，以确定原生质体密度。过程③常用物理法促进细胞融合，如______________（答出一点）。 (5)研究人员利用致病性强的两种水稻白叶枯病菌株对72株再生杂种植株进行试验，结果发现共有40株表现出抗性，其中17株对两种菌株均具抗性。综合染色体数目及抗性检测，应优先选择_________________________________________的杂种植株进行繁育。 19.（12分）野生型黄瓜为雌雄同株异花植物，植株上存在单性雄花（只有雄蕊）和单性雌花（只有雌蕊），雌花直接影响果实产量。乙烯和生长素在调控雄花和雌花发育中起重要作用，某科研团队对此开展了系列实验。 (1)黄瓜开花是由激素调节、________________和环境因素调节共同构成的网络调控的。黄瓜花芽最初都存在雌蕊原基和雄蕊原基。在发育特定阶段，雌蕊或雄蕊原基选择性败育分别产生雄花或雌花。 (2)施加适宜浓度的外源生长素，可诱导野生型黄瓜开雌花，检测生长素响应因子ARF3在雌、雄花中的表达量，结果如图1．图1结果显示_______________________________________________________。 (3)已知STM与WIP1是影响雌蕊发育的关键因子。在研究中，有以下相关发现：第一，花发育早期，雌蕊原基中特异性表达的STM基因缺失会导致雌蕊原基完全败育。研究显示ARF3能直接结合STM基因启动子中的P4元件，调控基因表达。为验证这种相互作用，将不同组分混合保温后，电泳检测荧光素标记条带，结果见图2，请补充3～5组的电泳条带结果____________________________。 第二，ARF3还可结合WIP1基因启动子元件。wip1突变体的表型与arf3突变体不同。 (4)在花发育极早期，雌蕊原基中的S1酶（一种乙烯合成酶）催化乙烯大量合成，乙烯通过生长素调控雌蕊发育。研究揭示，雌蕊发育时，生长素调控S2酶（另一种乙烯合成酶）合成，该酶还可激活雄蕊抑制因子。请推测，施加生长素可诱导S1酶合成缺失突变体开_______花。可见，乙烯与生长素在调控黄瓜雌花发育中存在_______关系。 (5)请根据上述研究，完善黄瓜雌花发育的调控模型_______。 20．（11分）吉林省是东北亚重要的陆路口岸，近几年出现了输入性疟疾病例。疟原虫感染人体后，疟原虫的pfcrt基因编码的蛋白第76位氨基酸（赖氨酸→苏氨酸）的突变会使疟原虫获得对氯喹的抗药性。为快速筛查氯喹抗性疟原虫，研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了F1、F2、R1、R2四种备选引物（见图甲），用于扩增目的片段。以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图乙所示，再将获得的产物用限制酶Dra Ⅰ（识别序列为5＇-AAATTT-3＇）处理。回答下列问题： (1)PCR扩增pfcrt基因时，因参与合成反应，不断消耗而浓度下降的组分有________________________。 (2)根据图甲和图乙信息，若要特异性扩增出包含完整Dra Ⅰ酶切位点区域的目的片段，应选择的引物组合是________。据图可以判断泳道2（F1-R2组合）的条带长度________（填“长于”或“短于”）泳道1（F1-R1组合）。导致两条带在电泳中迁移速率不同的直接原因是_______。 (3)已知敏感型pfcrt基因序列中Dra Ⅰ酶识别位点处编码赖氨酸的密码子为AAA，而抗性型突变后此处变为ACA（编码苏氨酸）。据此判断，Dra Ⅰ酶能切割________（填“敏感型”或“抗性型”）基因的PCR产物，原因是__________。 (4)在进行电泳鉴定实验时，将配制的琼脂糖溶液在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化。稍冷却后加入适量的________混匀。 21．（13分）开展深海微生物研究对于开发海洋资源具有重要意义。我国研究人员采集了深海冷泉附近的沉积物样品，采用新型分离策略，纯化、鉴定得到了全新的拟杆菌菌株，并进一步研究了其生物学特性。 回答下列问题： (1)研究者先制备培养基，然后采用________________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。为了减少灭菌后培养皿与周围的物品接触被污染，灭菌前的操作是_____________________________________________________。 (2)图甲是新菌株拟杆菌X在不同的培养基上的生长情况，可推测拟杆菌X在以______为碳源时生长状况最好；要检测培养基是否灭菌合格，对照组的操作是______________________________________。 (3)某同学对拟杆菌X进行纯培养，结果如图乙。其中①采用的纯培养技术是______法，第二至第五划线区域均无菌落，此过程出现的失误操作很可能是________________________________________。③不适于进行微生物数量测定，理由是__________________________________________________。 (4)研究人员常采用刚果红染色法鉴别纤维素分解菌，其原理是刚果红能与纤维素结合形成红色复合物，但不能与纤维素的水解产物结合成红色物质。将深海微生物接种到以纤维素为唯一碳源的刚果红固体培养基上，培养一段时间，挑选出纤维素分解能力强的菌株，其特点是观察到菌落周围__________________________________________。 / 学科网（北京）股份有限公司 $………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… 此卷只装订不密封 ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校：______________姓名：_____________班级：_______________考号：______________________ 2025-2026学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修3 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本大题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分。在每小题列出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1．某地土壤有机物A污染严重，某生物兴趣小组同学欲分离并计数土壤中分解有机物A的微生物。下列有关叙述错误的是（    ） A．取土样时用的铁铲和取样袋在使用前均需要进行灭菌处理 B．培养基甲和培养基乙均需以有机物A为唯一碳源 C．③过程使用的平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上 D．用图示③的接种方法计数得到的菌落数往往比实际的活菌数少 2．关于传统发酵技术及其应用，下列叙述正确的是（　　） A．制作腐乳时，豆腐坯上长出的白毛主要是根霉的菌丝 B．制作泡菜时，加入陈泡菜水可以缩短泡菜制作的时间 C．制作果酒时，通过检测是否产生CO2来判断发酵进程 D．制作果醋时，在发酵液的表面会形成醋酸菌的单菌落 3．流感嗜血杆菌（Hi）在基本培养基中无法生长，将其与金黄色葡萄球菌在基本培养基上共培养时，金黄色葡萄球菌周围的Hi菌落较大，越远则菌落越小，称为卫星现象。为探究动物血细胞中是否含有Hi所需生长因子，把其菌悬液与基本培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分成四个区域，将从绵羊血细胞中提取的V、X两种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示（黑点代表Hi菌落）。下列叙述错误的是（　　） A．在基本培养基中缺乏Hi生长所需的生长因子，故无法生长 B．卫星现象表明金黄色葡萄球菌能合成Hi所需的生长因子 C．由图可知Hi生长所需的生长因子为V或X D．加入绵羊血的基本培养基可用于Hi的扩大培养 4．发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（　） A．在发酵之前需要利用固体培养基对菌种进行扩大培养 B．通过发酵获得大量的微生物蛋白质即单细胞蛋白 C．菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可以从自然界筛选 D．发酵过程中环境条件会影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成 5．胚胎工程是对动物早期胚胎或配子进行一系列显微操作和技术处理，以实现在分子水平和细胞水平上改良遗传特性的技术。下列相关叙述正确的是（    ） A．哺乳动物受精过程发生在子宫内 B．采集到的精子可直接用于体外受精 C．精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精子进入卵内 D．卵子形成过程中，减数分裂Ⅰ和减数分裂Ⅱ均在卵巢内完成 6．猪细小病毒（PPV）会导致猪患繁殖障碍性传染病。VP2蛋白是PPV的主要结构蛋白，可诱导机体产生特异性中和抗体。某科研小组为开发基于VP2蛋白的PPV免疫学检测产品，设计实验流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①过程取小鼠脾脏组织剪碎加入培养液即可制成单细胞悬液 B．②过程可通过聚乙二醇诱导细胞融合，得到3种以上杂交细胞 C．③过程需进行克隆化培养，传代培养过程中会发生贴壁和接触抑制 D．④过程可将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养 7．（原创题）引物是PCR反应体系的重要的组分，下图为某目的基因的两端的部分碱基序列，下列选项中的短单链核酸，哪个为扩增该目的基因的最佳的引物（ ） 目的基因的两端的部分序列： a链：5’—ATG CCC AAG ATC CGT CA ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙GAA CAC—3’ b链：3’—TAC GGG TTC TAG GCA GT ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙CTT GTG—5’ A.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAG ATC ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙GAA CAC—3’ B.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAG ATC—3’ C.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAT CTT GGG—3’ D.3’—TAC GGG TTC TAG GCA GTC TTA—5’ 8．科研人员探究不同处理方式（M和N）对体外受精胚胎发育的影响，得到如图所示结果。下列关于该实验的分析错误的是（    ） A．对照组的主要目的是排除培养液等基础条件对胚胎发育的影响 B．卵裂过程中细胞数量不断增加，胚胎总体积也不断增大 C．实验结果表明M和N均能提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率，且M的效果大于N D．若要进一步探究M处理的最适浓度，应设置包含当前浓度在内的一系列浓度梯度实验 9．基因工程、发酵工程等现代生物技术广泛应用于农牧业、医药卫生和食品工业等方面。下列相关叙述，错误的是（　　） A．利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的化学防治 B．采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白 C．通过转入乙肝病毒抗原基因的酵母菌发酵生产乙肝疫苗 D．通过导入肠乳糖酶基因的奶牛分泌出乳糖含量低的乳汁 10．胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（　　） A．获得原生质体时通常需用纤维素酶和果胶酶的低渗溶液处理 B．过程中使用的培养基需要先灭菌、分装，再调整到适宜的pH C．“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中 D．应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 11． 人类的cGAS蛋白会抑制DNA断裂后的修复，导致DNA损伤积累。但裸鼹鼠的cGAS蛋白却能促进DNA修复。研究发现两者的cGAS蛋白有4个氨基酸不同。下列叙述错误的是（　　） A．DNA损伤积累可能会诱发细胞衰老和癌变 B．氨基酸不同会引起cGAS蛋白空间结构不同 C．裸鼹鼠与人类的cGAS基因上的密码子不同 D．通过基因工程可以改造人类的cGAS蛋白 12． 2025年3月，窦科峰院士团队在《自然》发文，报告了世界首例转基因技术猪肝到人体（脑死亡）肝移植的成功案例。下列关于转基因克隆猪肝的叙述，错误的是（　　） A．选用猪做克隆器官供体是因为其内脏构造、大小与血管分布和人的类似 B．该操作的核心步骤是基因表达载体的构建，需用到限制酶、DNA连接酶 C．对该提供肝源的猪进行基因工程技术改造时，可直接对其体细胞进行操作 D．该技术成功的关键可能是敲除了猪基因中某些会引发免疫排斥反应的关键基因 13．研究者筛选西北高原乳酸菌株，通过深层液态发酵中药，提升药效。下列叙述错误的是（　　） A．筛选菌株活性优于野生菌，更适配中药成分环境 B．发酵降解大分子为小分子，可提升药物吸收效率 C．液态发酵较固体发酵，更易规模化与连续化生产 D．液态发酵需通氧并搅拌，利于菌株大量快速增殖 14．猪的生理特征、器官大小以及胚胎发育方面与人类具有很高的相似性，成为“种植”人类器官的热门动物。下图为我国科学家利用猪培育可用于移植的人源肾脏的相关过程。下列叙述正确的是（ ） A．推测SIX1/SALL1两种基因是人源肾脏发育所必需的基因 B．可用载体、聚乙二醇等化学方法激活重构胚 C．注入人源干细胞的作用是使人源干细胞分化产生人的组织和器官 D．这种肾脏中虽然有部分猪细胞，但移植给人不会引起免疫排斥 15． LMNA基因编码的蛋白可维持细胞核的结构稳定。研究者利用CRISPR/Cas9技术获得LMNA突变基因被修复的iPSC细胞系。该细胞系作为对照在研究中的价值是（　　） A．验证CRISPR/Cas9系统对LMNA基因的编辑效率 B．排除遗传背景差异以确定LMNA基因突变与表型关系 C．制备可供异体移植的通用型干细胞治疗产品 D．比较LMNA基因不同突变类型对细胞功能的影响 16． 叶绿体发育与BG基因、GK基因的表达有关、GK功能缺失突变体的叶绿素含量会显著降低。研究者将一定浓度的GK蛋白与系列浓度BG蛋白混合后，再加入GK蛋白靶基因CAO的启动子DNA片段，反应一段时间后，经琼脂糖凝胶电泳检测结果如下图。以下分析正确的是（　　） A．BG蛋白通过抑制GK蛋白的功能影响叶绿体发育 B．GK蛋白结合靶基因CAO导致叶绿素的含量下降 C．条带中的“游离DNA片段”来自BG基因 D．随BG蛋白浓度增加CAO的启动子功能增强 第Ⅱ卷 二、非选择题：本大题共5小题，共60分。考生根据要求作答。 17. ( 每空2分，共12分）市场上饮用醋种类繁多，口感不一。某学习小组学习了发酵工程知识后，利用葡萄和糯米酿造果粮复合饮用醋，并设计了如下加工工艺流程： (1)对糯米进行蒸煮糊化的目的是_____________________________________________（写出1点）。 (2)A、B接种的菌种一般要先活化和____________后，再接种于发酵液中。从细胞结构上看，两菌种的主要区别为_________________________________________________________。 (3)酒精发酵的质量决定了醋的品质。为了解酒精发酵进程，可在发酵过程中定期取样，用_________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。选择高产醋杆菌时，可将醋杆菌涂布培养在白色的培养基上，并挑选______________________________的菌落作为发酵菌种，发酵菌种经扩大培养后再接种至酒醪中进行发酵。 (4)由酒精发酵转变为醋酸发酵，需要改变的环境条件是_______________________________。 18． （12分，除标注外，每空1分）“不对称体细胞杂交”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株。疣粒野生稻（2n=24）对白叶枯病有较高抗性，由于不同类型间的有性杂交后代高度不育，限制了野生稻的有利基因向栽培稻（2n=24）的转移，为此研究人员利用“不对称体细胞杂交”技术，将疣粒野生稻的抗白叶枯病特性转移到栽培稻中，过程如下图。请回答下列问题。 注：X射线能随机破坏细胞核中染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 (1) 利用“不对称体细胞杂交”技术育种的理论基础有细胞膜的流动性、________________________， 染色体的_______________。 (2) 根据物理性质，实验所用的培养基为______________________，培养基中添加蔗糖的目的是_______ __________________________________________________________（2分）。 (3)与过程①相比，过程④需在______（有光/无光）条件下进行，过程④中若诱导未分化的细胞分化成根，需要提高 ______________（激素）的比例。 (4)（信息筛选）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选择______ 原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用____________计数，以确定原生质体密度。过程③常用物理法促进细胞融合，如______________（答出一点）。 (5)研究人员利用致病性强的两种水稻白叶枯病菌株对72株再生杂种植株进行试验，结果发现共有40株表现出抗性，其中17株对两种菌株均具抗性。综合染色体数目及抗性检测，应优先选择_________________________________________的杂种植株进行繁育。 19.（12分）野生型黄瓜为雌雄同株异花植物，植株上存在单性雄花（只有雄蕊）和单性雌花（只有雌蕊），雌花直接影响果实产量。乙烯和生长素在调控雄花和雌花发育中起重要作用，某科研团队对此开展了系列实验。 (1)黄瓜开花是由激素调节、________________和环境因素调节共同构成的网络调控的。黄瓜花芽最初都存在雌蕊原基和雄蕊原基。在发育特定阶段，雌蕊或雄蕊原基选择性败育分别产生雄花或雌花。 (2)施加适宜浓度的外源生长素，可诱导野生型黄瓜开雌花，检测生长素响应因子ARF3在雌、雄花中的表达量，结果如图1．图1结果显示_______________________________________________________。 (3)已知STM与WIP1是影响雌蕊发育的关键因子。在研究中，有以下相关发现：第一，花发育早期，雌蕊原基中特异性表达的STM基因缺失会导致雌蕊原基完全败育。研究显示ARF3能直接结合STM基因启动子中的P4元件，调控基因表达。为验证这种相互作用，将不同组分混合保温后，电泳检测荧光素标记条带，结果见图2，请补充3～5组的电泳条带结果____________________________。 第二，ARF3还可结合WIP1基因启动子元件。wip1突变体的表型与arf3突变体不同。 (4)在花发育极早期，雌蕊原基中的S1酶（一种乙烯合成酶）催化乙烯大量合成，乙烯通过生长素调控雌蕊发育。研究揭示，雌蕊发育时，生长素调控S2酶（另一种乙烯合成酶）合成，该酶还可激活雄蕊抑制因子。请推测，施加生长素可诱导S1酶合成缺失突变体开_______花。可见，乙烯与生长素在调控黄瓜雌花发育中存在_______关系。 (5)请根据上述研究，完善黄瓜雌花发育的调控模型_______。 20．（11分）吉林省是东北亚重要的陆路口岸，近几年出现了输入性疟疾病例。疟原虫感染人体后，疟原虫的pfcrt基因编码的蛋白第76位氨基酸（赖氨酸→苏氨酸）的突变会使疟原虫获得对氯喹的抗药性。为快速筛查氯喹抗性疟原虫，研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了F1、F2、R1、R2四种备选引物（见图甲），用于扩增目的片段。以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图乙所示，再将获得的产物用限制酶Dra Ⅰ（识别序列为5＇-AAATTT-3＇）处理。回答下列问题： (1)PCR扩增pfcrt基因时，因参与合成反应，不断消耗而浓度下降的组分有________________________。 (2)根据图甲和图乙信息，若要特异性扩增出包含完整Dra Ⅰ酶切位点区域的目的片段，应选择的引物组合是________。据图可以判断泳道2（F1-R2组合）的条带长度________（填“长于”或“短于”）泳道1（F1-R1组合）。导致两条带在电泳中迁移速率不同的直接原因是_______。 (3)已知敏感型pfcrt基因序列中Dra Ⅰ酶识别位点处编码赖氨酸的密码子为AAA，而抗性型突变后此处变为ACA（编码苏氨酸）。据此判断，Dra Ⅰ酶能切割________（填“敏感型”或“抗性型”）基因的PCR产物，原因是__________。 (4)在进行电泳鉴定实验时，将配制的琼脂糖溶液在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化。稍冷却后加入适量的________混匀。 21．（13分）开展深海微生物研究对于开发海洋资源具有重要意义。我国研究人员采集了深海冷泉附近的沉积物样品，采用新型分离策略，纯化、鉴定得到了全新的拟杆菌菌株，并进一步研究了其生物学特性。 回答下列问题： (1)研究者先制备培养基，然后采用________________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。为了减少灭菌后培养皿与周围的物品接触被污染，灭菌前的操作是_____________________________________________________。 (2)图甲是新菌株拟杆菌X在不同的培养基上的生长情况，可推测拟杆菌X在以______为碳源时生长状况最好；要检测培养基是否灭菌合格，对照组的操作是______________________________________。 (3)某同学对拟杆菌X进行纯培养，结果如图乙。其中①采用的纯培养技术是______法，第二至第五划线区域均无菌落，此过程出现的失误操作很可能是________________________________________。③不适于进行微生物数量测定，理由是__________________________________________________。 (4)研究人员常采用刚果红染色法鉴别纤维素分解菌，其原理是刚果红能与纤维素结合形成红色复合物，但不能与纤维素的水解产物结合成红色物质。将深海微生物接种到以纤维素为唯一碳源的刚果红固体培养基上，培养一段时间，挑选出纤维素分解能力强的菌株，其特点是观察到菌落周围__________________________________________。 试题 第7页（共8页） 试题 第8页（共8页） 试题 第1页（共8页） 试题 第2页（共8页） 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二生物下学期期中模拟卷 （考试时间：75分钟 试卷满分：100分） 注意事项： 1．本试卷分第Ⅰ卷（选择题）和第Ⅱ卷（非选择题）两部分。答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号填写在答题卡上。 2．回答第Ⅰ卷时，选出每小题答案后，用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。写在本试卷上无效。 3．回答第Ⅱ卷时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。 4．测试范围：人教版选择性必修3 5．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回。 第Ⅰ卷 一、选择题：本大题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分。在每小题列出的四个选项中，只有一项符合题目要求。 1．某地土壤有机物A污染严重，某生物兴趣小组同学欲分离并计数土壤中分解有机物A的微生物。下列有关叙述错误的是（    ） A．取土样时用的铁铲和取样袋在使用前均需要进行灭菌处理 B．培养基甲和培养基乙均需以有机物A为唯一碳源 C．③过程使用的平板划线法能将单个微生物分散在固体培养基上 D．用图示③的接种方法计数得到的菌落数往往比实际的活菌数少 【答案】C 【分析】选择培养基是用来将某种或某类微生物从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。 【详解】A、为了减少杂菌的污染，取土样用的小铁铲和盛土样的信封在使用前都要灭菌，A正确； B、实验目的是分离并计数土壤中分解有机物A的微生物，所以培养基甲和培养基乙均需以有机物A为唯一碳源，B正确； C、③过程使用的稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上，以达到计数的目的，平板划线法不能计数，C错误； D、由于当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的是一个菌落，所以用图示③的接种方法（稀释涂布平板法）计数得到的菌落数往往比实际的活菌数少，D正确。 故选C。 2．关于传统发酵技术及其应用，下列叙述正确的是（　　） A．制作腐乳时，豆腐坯上长出的白毛主要是根霉的菌丝 B．制作泡菜时，加入陈泡菜水可以缩短泡菜制作的时间 C．制作果酒时，通过检测是否产生CO2来判断发酵进程 D．制作果醋时，在发酵液的表面会形成醋酸菌的单菌落 【答案】B 【详解】A、制作腐乳的主要发酵菌种为毛霉，豆腐坯上长出的白毛主要是毛霉的直立菌丝，A错误； B、陈泡菜水中含有大量活化的乳酸菌，加入陈泡菜水相当于提高了发酵体系中乳酸菌的初始接种量，可加快发酵速率，缩短泡菜制作时间，B正确； C、酵母菌有氧呼吸和无氧呼吸过程均会产生CO2，因此无法仅通过检测是否产生CO2判断果酒的发酵进程，C错误； D、单菌落是由单个微生物繁殖形成的子细胞群体，制作果醋时发酵液表面形成的是大量醋酸菌聚集形成的菌膜，不属于单菌落，D错误。 3．流感嗜血杆菌（Hi）在基本培养基中无法生长，将其与金黄色葡萄球菌在基本培养基上共培养时，金黄色葡萄球菌周围的Hi菌落较大，越远则菌落越小，称为卫星现象。为探究动物血细胞中是否含有Hi所需生长因子，把其菌悬液与基本培养基混合后倒成平板，然后在平板上划分成四个区域，将从绵羊血细胞中提取的V、X两种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示（黑点代表Hi菌落）。下列叙述错误的是（　　） A．在基本培养基中缺乏Hi生长所需的生长因子，故无法生长 B．卫星现象表明金黄色葡萄球菌能合成Hi所需的生长因子 C．由图可知Hi生长所需的生长因子为V或X D．加入绵羊血的基本培养基可用于Hi的扩大培养 【答案】C 【详解】A、题干明确说明流感嗜血杆菌（Hi）在基本培养基中无法生长，因此可推知基本培养基缺乏Hi生长所需的生长因子，A正确； B、卫星现象中，金黄色葡萄球菌周围的Hi菌落更大，距离越远菌落越小，说明金黄色葡萄球菌可以合成Hi生长所需的生长因子，且生长因子浓度随距离增加而降低，B正确； C、由图示可知，只有同时存在V和X两种生长因子的交界区域才有Hi菌落生长，单独添加V或X的区域均无Hi生长，说明Hi生长同时需要V和X两种生长因子，并非只需要其中一种，C错误； D、绵羊血细胞中含有Hi生长所需的V、X两种生长因子，因此加入绵羊血的基本培养基可用于Hi的扩大培养，D正确。 4．发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品或直接把微生物应用于工业生产过程的一种新技术。发酵工程的基本环节如图所示。下列说法正确的是（　） A．在发酵之前需要利用固体培养基对菌种进行扩大培养 B．通过发酵获得大量的微生物蛋白质即单细胞蛋白 C．菌种的选育是发酵工程的中心环节，优良菌种可以从自然界筛选 D．发酵过程中环境条件会影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成 【答案】D 【详解】A、在发酵之前需要利用液体培养基对菌种进行扩大培养，而不是固体培养基，因为液体培养基能使菌种与营养物质充分接触，更有利于菌种的快速繁殖，A错误； B、单细胞蛋白是指通过发酵获得的大量的微生物菌体，而不是微生物蛋白质，B错误； C、发酵罐内发酵是发酵工程的中心环节，而不是菌种的选育，优良菌种可以从自然界筛选，C错误； D、发酵过程中环境条件（如温度、pH、溶解氧等）会影响微生物的生长繁殖和代谢产物的形成，D正确。 5．胚胎工程是对动物早期胚胎或配子进行一系列显微操作和技术处理，以实现在分子水平和细胞水平上改良遗传特性的技术。下列相关叙述正确的是（    ） A．哺乳动物受精过程发生在子宫内 B．采集到的精子可直接用于体外受精 C．精子入卵后，卵细胞膜会立即发生生理反应，拒绝其他精子进入卵内 D．卵子形成过程中，减数分裂Ⅰ和减数分裂Ⅱ均在卵巢内完成 【答案】C 【详解】A、哺乳动物受精过程发生在输卵管中，子宫是胚胎后期发育的主要场所，A错误； B、采集到的精子必须经过获能处理，获得受精能力后才能用于体外受精，不可直接使用，B错误； C、精子入卵后，卵细胞膜会立即发生卵细胞膜反应（卵黄膜封闭作用），这是防止多精入卵的第二道屏障，C正确； D、卵子形成过程中，减数分裂Ⅰ在卵巢内完成，减数分裂Ⅱ在输卵管内完成，D错误。 6．猪细小病毒（PPV）会导致猪患繁殖障碍性传染病。VP2蛋白是PPV的主要结构蛋白，可诱导机体产生特异性中和抗体。某科研小组为开发基于VP2蛋白的PPV免疫学检测产品，设计实验流程如图所示。下列叙述正确的是（    ） A．①过程取小鼠脾脏组织剪碎加入培养液即可制成单细胞悬液 B．②过程可通过聚乙二醇诱导细胞融合，得到3种以上杂交细胞 C．③过程需进行克隆化培养，传代培养过程中会发生贴壁和接触抑制 D．④过程可将抗体检测呈阴性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养 【答案】B 【分析】单克隆抗体的制备过程：（1）制备产生抗体的B淋巴细胞：向免疫小鼠体内注射特定的抗原，然后从小鼠脾内获得相应的B淋巴细胞；（2）获得杂交瘤细胞：①将鼠的骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合；②用特定的选择培养基筛选出杂交瘤细胞，该杂种细胞既能够增殖又能产生抗体；（3）克隆化培养和抗体检测；（4）将杂交瘤细胞在体外培养或注射到小鼠腹腔内增殖；（5）提取单克隆抗体：从细胞培养液或小鼠的腹水中提取。 【详解】A、①过程取小鼠脾脏组织剪碎用胰蛋白酶处理，使细胞分散开来，然后加入培养液可制成单细胞悬液，A错误； B、②过程可通过聚乙二醇诱导细胞融合，得到3种以上杂交细胞，脾细胞自身融合细胞、骨髓瘤细胞自身融合细胞、脾细胞和骨髓瘤细胞融合细胞以及多细胞融合的细胞，B正确； C、③筛选得到的杂交瘤细胞需进行克隆化培养，杂交瘤细胞在传代培养过程中不会发生接触抑制和贴壁，C错误； D、④过程利用的是抗原—抗体杂交原理，可将抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔进行培养，D错误。 故选B。 7．（原创题）引物是PCR反应体系的重要的组分，下图为某目的基因的两端的部分碱基序列，下列选项中的短单链核酸，哪个为扩增该目的基因的最佳的引物（ ） 目的基因的两端的部分序列： a链：5’—ATG CCC AAG ATC CGT CA ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙GAA CAC—3’ b链：3’—TAC GGG TTC TAG GCA GT ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙CTT GTG—5’ A.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAG ATC ∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙∙GAA CAC—3’ B.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAG ATC—3’ C.5’—ATG CCC AAG ATC CGT CAT CTT GGG—3’ D.3’—TAC GGG TTC TAG GCA GTC TTA—5’ 【答案】B 【分析】引物是一小段能与DNA母链的一段序列互补配对的短单链核酸，用于PCR的引物长度通常为20-30个核苷酸。 【详解】A.过长不易与DNA母链配对结合，A错误 B.引物长度为24个核苷酸，且与DNA的a链的碱基序列相同，则与另一条链b链互补配对，该引物的方向为与DNA的b链的3’端互补配对，B正确 C.左起第4到第11个碱基CCC AAG AT与后面的碱基AT CTT GGG互补，该引物可发生自身环化，C错误 D.该引物与目的基因的b链的碱基序列相同，与a链的5’端互补，方向不对，新合成的子链应该由引物的5’端向3’端延伸,引物应与DNA的母链的3’端互补配对。 8．科研人员探究不同处理方式（M和N）对体外受精胚胎发育的影响，得到如图所示结果。下列关于该实验的分析错误的是（    ） A．对照组的主要目的是排除培养液等基础条件对胚胎发育的影响 B．卵裂过程中细胞数量不断增加，胚胎总体积也不断增大 C．实验结果表明M和N均能提高胚胎的卵裂率和囊胚发育率，且M的效果大于N D．若要进一步探究M处理的最适浓度，应设置包含当前浓度在内的一系列浓度梯度实验 【答案】B 【详解】A、对照组的主要目的是排除培养液等基础条件对胚胎发育的影响，以突出处理方式M和N的作用，A正确； B、卵裂过程中细胞数量不断增加，但胚胎的总体积基本不变，甚至略有减小，B错误； C、从实验结果柱状图可以看出，M和N处理组的卵裂率和囊胚发育率均高于对照组，且M组的效果优于N组，C正确； D、若要进一步探究M处理的最适浓度，应设置包含当前浓度在内的一系列浓度梯度实验，以找到效果最佳的浓度，D正确。 9．基因工程、发酵工程等现代生物技术广泛应用于农牧业、医药卫生和食品工业等方面。下列相关叙述，错误的是（　　） A．利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的化学防治 B．采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白 C．通过转入乙肝病毒抗原基因的酵母菌发酵生产乙肝疫苗 D．通过导入肠乳糖酶基因的奶牛分泌出乳糖含量低的乳汁 【答案】A 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配置、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A 、利用发酵工程生产的微生物农药，可用于病虫害的生物防治，而不是化学防治，A 错误； B 、单细胞蛋白是通过发酵获得的微生物菌体，例如细菌、酵母菌等。这些微生物含有丰富的蛋白质，可以作为食品或饲料的蛋白质来源。采用过滤、沉淀等方法将菌体分离和干燥，得到单细胞蛋白，B 正确； C 、通过转入乙肝病毒抗原基因的酵母菌，会合成病毒的抗原，可生产乙肝疫苗，C 正确； D 、通过导入肠乳糖酶基因的奶牛，可以合成肠乳糖酶，分泌出乳糖含量低的乳汁，D 正确。 故选A。 10．胞质杂种是指两个原生质体融合产生的杂种细胞，其中一个细胞的细胞核消失后，两个原生质体的细胞质杂交得到的个体。科研人员利用雄性不育的品种A与可育的品种B通过植物体细胞杂交技术获得了雄性不育的胞质杂种“华柚2号”，制备过程如下图所示，其中GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中。经检测，“华柚2号”的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，下列说法正确的是（　　） A．获得原生质体时通常需用纤维素酶和果胶酶的低渗溶液处理 B．过程中使用的培养基需要先灭菌、分装，再调整到适宜的pH C．“华柚2号”的获得说明控制雄性不育的基因可能位于线粒体中 D．应筛选发绿色荧光的杂种细胞C经植物组织培养技术获得“华柚2号” 【答案】C 【详解】A、植物去除细胞壁必须用纤维素酶和果胶酶，且溶液通常等渗，防止原生质体破裂，A错误； B、配制培养基时，操作先后顺序为：分装、调整pH、灭菌，B错误； C、雄性不育的胞质杂种华柚2号的细胞核和叶绿体基因来自品种B，线粒体基因来自品种A，融合后品种A的细胞核消失，控制雄性不育的基因可能位于线粒体中，C正确； D、GFP（绿色荧光蛋白）基因转入了品种A的细胞核基因组中，而融合后的华柚2号不含品种A的细胞核，因此发绿色荧光的杂种细胞应被淘汰，D错误。 11． 人类的cGAS蛋白会抑制DNA断裂后的修复，导致DNA损伤积累。但裸鼹鼠的cGAS蛋白却能促进DNA修复。研究发现两者的cGAS蛋白有4个氨基酸不同。下列叙述错误的是（　　） A．DNA损伤积累可能会诱发细胞衰老和癌变 B．氨基酸不同会引起cGAS蛋白空间结构不同 C．裸鼹鼠与人类的cGAS基因上的密码子不同 D．通过基因工程可以改造人类的cGAS蛋白 【答案】C 【详解】A、细胞衰老的诱因包括DNA损伤长期积累，同时DNA损伤积累可能导致原癌基因、抑癌基因发生突变，进而诱发细胞癌变，因此DNA损伤积累可能会诱发细胞衰老和癌变，A正确； B、蛋白质的空间结构由氨基酸的种类、数目、排列顺序以及肽链的盘曲折叠方式共同决定，两种生物的cGAS蛋白存在氨基酸差异，会引起其空间结构不同，B正确； C、密码子是mRNA上决定一个氨基酸的三个相邻碱基，基因是有遗传效应的DNA片段，基因上不存在密码子，C错误； D、基因工程可定向改造目的基因，进而改造其表达的蛋白质，因此可通过基因工程改造人类的cGAS蛋白，D正确。 12． 2025年3月，窦科峰院士团队在《自然》发文，报告了世界首例转基因技术猪肝到人体（脑死亡）肝移植的成功案例。下列关于转基因克隆猪肝的叙述，错误的是（　　） A．选用猪做克隆器官供体是因为其内脏构造、大小与血管分布和人的类似 B．该操作的核心步骤是基因表达载体的构建，需用到限制酶、DNA连接酶 C．对该提供肝源的猪进行基因工程技术改造时，可直接对其体细胞进行操作 D．该技术成功的关键可能是敲除了猪基因中某些会引发免疫排斥反应的关键基因 【答案】C 【详解】A、猪的内脏构造、器官大小、血管分布都与人类高度相近，是异种器官移植的首选供体生物，A正确； B、转基因技术的本质是基因工程，基因工程的核心步骤是基因表达载体的构建，该过程需要限制酶切割目的基因和载体、DNA连接酶连接二者形成重组载体，B正确； C、要获得所有细胞均携带改造后基因的转基因供体猪，需要将目的基因导入受精卵，再培育为完整个体；直接对体细胞操作无法让猪全身细胞都携带改造基因，不能得到符合要求的供体猪，C错误； D、异种器官移植的最大障碍是免疫排斥反应，敲除猪基因组中会引发免疫排斥的关键基因，可降低移植后的排斥反应，是该技术成功的关键，D正确。 故选C。 13．研究者筛选西北高原乳酸菌株，通过深层液态发酵中药，提升药效。下列叙述错误的是（　　） A．筛选菌株活性优于野生菌，更适配中药成分环境 B．发酵降解大分子为小分子，可提升药物吸收效率 C．液态发酵较固体发酵，更易规模化与连续化生产 D．液态发酵需通氧并搅拌，利于菌株大量快速增殖 【答案】D 【详解】A、筛选菌株的目的就是获得比野生菌活性更优、对中药成分环境适配性更强的菌株，以满足发酵需求，A正确； B、发酵过程中微生物产生的相关酶可将中药中的大分子物质降解为小分子，小分子物质更易被机体吸收，因此可提升药物吸收效率，B正确； C、液态发酵的发酵基质混合均匀，发酵条件更易精准调控，相比固体发酵更易实现规模化和连续化生产，C正确； D、乳酸菌属于厌氧型微生物，无氧条件下才能正常生长繁殖和进行乳酸发酵，液态发酵过程不能通氧，通氧会抑制乳酸菌的代谢和增殖，D错误。 14．猪的生理特征、器官大小以及胚胎发育方面与人类具有很高的相似性，成为“种植”人类器官的热门动物。下图为我国科学家利用猪培育可用于移植的人源肾脏的相关过程。下列叙述正确的是（ ） A．推测SIX1/SALL1两种基因是人源肾脏发育所必需的基因 B．可用载体、聚乙二醇等化学方法激活重构胚 C．注入人源干细胞的作用是使人源干细胞分化产生人的组织和器官 D．这种肾脏中虽然有部分猪细胞，但移植给人不会引起免疫排斥 【答案】C 【详解】A、根据SIX1/SALL1缺陷的早期胚胎发育成肾脏缺陷胚胎可知，这两个基因是猪肾脏发育必需的基因，A错误； B、用物理或化学方法（如电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等）激活重构胚，使其完成细胞分裂和发育进程，B错误； C、注入人源干细胞的作用是为了让注入的人源干细胞分化为人源肾脏，C正确； D、这种肾脏中含有部分猪细胞，属于外来异物，依然会引起免疫排斥，D错误。 15． LMNA基因编码的蛋白可维持细胞核的结构稳定。研究者利用CRISPR/Cas9技术获得LMNA突变基因被修复的iPSC细胞系。该细胞系作为对照在研究中的价值是（　　） A．验证CRISPR/Cas9系统对LMNA基因的编辑效率 B．排除遗传背景差异以确定LMNA基因突变与表型关系 C．制备可供异体移植的通用型干细胞治疗产品 D．比较LMNA基因不同突变类型对细胞功能的影响 【答案】B 【详解】A、验证CRISPR/Cas9系统的基因编辑效率，需要统计处理后成功发生基因编辑的细胞占总处理细胞的比例，题中仅仅指出已经获得的修复成功的细胞系，A错误； B、修复后的细胞系与原突变细胞系的遗传背景几乎完全相同，唯一变量为LMNA基因是否发生突变，作为对照可以排除其他遗传背景差异的干扰，准确确定LMNA基因突变与表型的对应关系，B正确； C、通用型异体移植干细胞需要进行基因修饰以消除免疫排斥相关的抗原，本题仅修复了LMNA突变，C错误； D、该细胞系仅将突变的LMNA基因修复为正常类型，没有多种不同突变类型的LMNA基因，无法比较不同突变类型对细胞功能的影响，D错误。 16． 叶绿体发育与BG基因、GK基因的表达有关、GK功能缺失突变体的叶绿素含量会显著降低。研究者将一定浓度的GK蛋白与系列浓度BG蛋白混合后，再加入GK蛋白靶基因CAO的启动子DNA片段，反应一段时间后，经琼脂糖凝胶电泳检测结果如下图。以下分析正确的是（　　） A．BG蛋白通过抑制GK蛋白的功能影响叶绿体发育 B．GK蛋白结合靶基因CAO导致叶绿素的含量下降 C．条带中的“游离DNA片段”来自BG基因 D．随BG蛋白浓度增加CAO的启动子功能增强 【答案】A 【详解】A、结合题意及题图可知，BG蛋白浓度越高，GK结合靶启动子的能力越弱，说明BG通过抑制GK的功能，影响叶绿体发育，A正确； B、分析题意可知，GK可结合其靶基因CAO的启动子DNA，GK功能缺失会导致叶绿素含量显著降低，说明正常功能的GK可维持叶绿素正常合成，与叶绿体发育相关GK功能缺失才会导致叶绿素含量下降，说明GK结合靶基因CAO会促进叶绿素合成，而非导致含量下降，B错误； C、本实验中加入的DNA是CAO的启动子片段，游离DNA是未结合GK的CAO启动子片段，不是BG基因，C错误； D、电泳结果显示：随着BG蛋白浓度升高，与GK结合的CAO启动子DNA逐渐减少，游离的CAO启动子DNA逐渐增多，说明BG会抑制GK与CAO启动子的结合，CAO启动子无法正常发挥启动转录的功能，功能逐渐减弱，D错误。 第Ⅱ卷 二、非选择题：本大题共5小题，共60分。考生根据要求作答。 17. ( 每空2分，共12分）市场上饮用醋种类繁多，口感不一。某学习小组学习了发酵工程知识后，利用葡萄和糯米酿造果粮复合饮用醋，并设计了如下加工工艺流程： (1)对糯米进行蒸煮糊化的目的是_____________________________________________（写出1点）。 (2)A、B接种的菌种一般要先活化和____________后，再接种于发酵液中。从细胞结构上看，两菌种的主要区别为_________________________________________________________。 (3)酒精发酵的质量决定了醋的品质。为了解酒精发酵进程，可在发酵过程中定期取样，用_________的方法进行菌落计数，评估菌株增殖状况。选择高产醋杆菌时，可将醋杆菌涂布培养在白色的培养基上，并挑选______________________________的菌落作为发酵菌种，发酵菌种经扩大培养后再接种至酒醪中进行发酵。 (4)由酒精发酵转变为醋酸发酵，需要改变的环境条件是_______________________________。 【答案】(1)使淀粉更容易被酶解（或杀灭杂菌、使糯米软化） (2) 扩大培养； 酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌没有（或有无核膜包被的细胞核） (3) 稀释涂布平板法 透明圈直径与菌落直径比值（或透明圈） (4)通入无菌空气（或有氧环境）、提高发酵温度 【详解】（1）对糯米进行蒸煮糊化的目的：破坏淀粉颗粒结构，使淀粉更容易被微生物酶解（糖化）；杀灭糯米中的杂菌，防止发酵过程被污染；使糯米质地变软，便于后续的混合调配与发酵。 （2）①菌种接种到发酵液前，通常需要先活化和扩大培养，以增加菌种数量，保证发酵快速启动； ②A 为酒精发酵菌种（酵母菌，真核生物），B为醋酸发酵菌种（醋杆菌 / 醋酸菌，原核生物）。二者在细胞结构上的主要区别是：酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌没有。 （3）①对发酵液中的菌进行计数，常用的方法是稀释涂布平板法（该方法能通过菌落数计算活菌数量，适合评估菌株增殖状况）；②醋杆菌能产生醋酸分解培养基中的CaCO₃，使菌落周围出现透明圈。挑选透明圈直径与菌落直径比值大的菌落，说明该菌株产酸能力强，为高产醋杆菌。 （4）酒精发酵由酵母菌完成，条件为无氧、18-25℃；醋酸发酵由醋酸菌完成，醋酸菌是好氧菌，最适温度为30-35℃。因此由酒精发酵转变为醋酸发酵，需要改变的环境条件是：通入无菌空气（或保证有氧环境）、提高发酵温度。 18． （12分，除标注外，每空1分）“不对称体细胞杂交”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株。疣粒野生稻（2n=24）对白叶枯病有较高抗性，由于不同类型间的有性杂交后代高度不育，限制了野生稻的有利基因向栽培稻（2n=24）的转移，为此研究人员利用“不对称体细胞杂交”技术，将疣粒野生稻的抗白叶枯病特性转移到栽培稻中，过程如下图。请回答下列问题。 注：X射线能随机破坏细胞核中染色体结构，使其发生断裂、易位、染色体消除等，使细胞不再持续分裂；碘乙酰胺使细胞质中的某些酶失活，抑制细胞分裂。 (1) 利用“不对称体细胞杂交”技术育种的理论基础有细胞膜的流动性、________________________， 染色体的_______________。 (2) 根据物理性质，实验所用的培养基为______________________，培养基中添加蔗糖的目的是_______ __________________________________________________________（2分）。 (3)与过程①相比，过程④需在______（有光/无光）条件下进行，过程④中若诱导未分化的细胞分化成根，需要提高 ______________（激素）的比例。 (4)（信息筛选）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质，该荧光物质不能透过活细胞质膜，会留在细胞内发出荧光。据此分析应选择______ 原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用____________计数，以确定原生质体密度。过程③常用物理法促进细胞融合，如______________（答出一点）。 (5)研究人员利用致病性强的两种水稻白叶枯病菌株对72株再生杂种植株进行试验，结果发现共有40株表现出抗性，其中17株对两种菌株均具抗性。综合染色体数目及抗性检测，应优先选择_________________________________________的杂种植株进行繁育。 【答案】(1)植物细胞的全能性 、 染色体（结构）变异 (2) 固体培养基 维持渗透压，提供能量（2分） (3) 有光 生长素 (4) 发出荧光 血细胞计数板 电融合法 (5)染色体数目和栽培稻相同且对两种菌株均表现出抗性（2分） 【详解】（1）“不对称体细胞杂交”可将一个亲本的部分染色体或染色体上某些片段转移到另一个亲本体细胞内，获得不对称杂种植株，发生的可遗传变异类型是染色体变异；利用“不对称体细胞杂交”技术育种的理论基础有细胞膜的流动性、植物细胞的全能性和染色体结构变异。 （2）植物组织培养需要使用MS培养基，其中含有凝固剂琼脂，从物理性质上看，研究过程中所用的培养基为固体培养基；培养基中应添加一定浓度的蔗糖，其目的是维持渗透压，提供能量。 （3） 与过程①脱分化相比，过程④再分化需在有光条件下进行，过程④中若诱导未分化的细胞分化成根，需要提高生长素的比例，因为生长素能诱导生根； （4）采用二乙酸荧光素（FDA）法可测定原生质体活力。FDA本身无荧光，当其进入细胞后可被酯酶分解为无毒、具有荧光的物质会留在细胞内发出荧光，故应选择发出荧光的原生质体用于融合。融合前对原生质体在显微镜下用血细胞计数板计数，以确定原生质体密度。过程③常用物理法促进细胞融合，如电融合法，诱导原生质体融合常使用化学试剂是聚乙二醇（PEG）。 （5）研究人员利用致病性强的两种水稻白叶枯病菌株对72株再生杂种植株进行试验，结果发现共有40株表现出抗性，其中17株对两种菌株均具抗性。故应优先选择染色体数目和栽培稻相同且对两种菌株均表现出抗性的杂种植株进行繁育。 19.（12分）野生型黄瓜为雌雄同株异花植物，植株上存在单性雄花（只有雄蕊）和单性雌花（只有雌蕊），雌花直接影响果实产量。乙烯和生长素在调控雄花和雌花发育中起重要作用，某科研团队对此开展了系列实验。 (1)黄瓜开花是由激素调节、________________和环境因素调节共同构成的网络调控的。黄瓜花芽最初都存在雌蕊原基和雄蕊原基。在发育特定阶段，雌蕊或雄蕊原基选择性败育分别产生雄花或雌花。 (2)施加适宜浓度的外源生长素，可诱导野生型黄瓜开雌花，检测生长素响应因子ARF3在雌、雄花中的表达量，结果如图1．图1结果显示_______________________________________________________。 (3)已知STM与WIP1是影响雌蕊发育的关键因子。在研究中，有以下相关发现：第一，花发育早期，雌蕊原基中特异性表达的STM基因缺失会导致雌蕊原基完全败育。研究显示ARF3能直接结合STM基因启动子中的P4元件，调控基因表达。为验证这种相互作用，将不同组分混合保温后，电泳检测荧光素标记条带，结果见图2，请补充3～5组的电泳条带结果____________________________。 第二，ARF3还可结合WIP1基因启动子元件。wip1突变体的表型与arf3突变体不同。 (4)在花发育极早期，雌蕊原基中的S1酶（一种乙烯合成酶）催化乙烯大量合成，乙烯通过生长素调控雌蕊发育。研究揭示，雌蕊发育时，生长素调控S2酶（另一种乙烯合成酶）合成，该酶还可激活雄蕊抑制因子。请推测，施加生长素可诱导S1酶合成缺失突变体开_______花。可见，乙烯与生长素在调控黄瓜雌花发育中存在_______关系。 (5)请根据上述研究，完善黄瓜雌花发育的调控模型_______。 【答案】(1)基因表达调控 (2)花发育早期ARF3在雌花中表达量高，雄花中几乎不表达，且这种差异在阶段1更明显 (3) (4) 雌 协同作用 (5) 【详解】（1）植物的生长发育是由激素调节、基因表达调控和环境因素调节共同构成的网络调控的，黄瓜花芽的性别分化也遵循这一规律。 （2）由图1可知，阶段1（花早期发育关键阶段）雌花的ARF3相对表达量远高于雄花，雄花中几乎不表达；阶段2（花发育后期阶段）雌花中ARF3表达量也高于雄花，但差异不显著，因此核心结论为花发育早期ARF3在雌花中表达量高，雄花中几乎不表达，且这种差异在阶段1更明显。 （3）该实验原理是ARF3与荧光标记P4结合后，电泳迁移速率减慢，出现滞后条带；加入未标记P4会竞争性结合ARF3，导致标记P4的结合量减少，滞后条带亮度降低，游离P4条带亮度升高。1组仅加标记P4，仅出现游离P4条带；2组加标记P4+ARF3，出现滞后条带；3~5组加入不同浓度未标记P4，竞争性抑制作用随浓度升高增强，因此滞后条带逐渐变暗，游离条带逐渐变亮。 （4）S1酶是乙烯合成酶，其合成缺失突变体无法合成大量乙烯，但施加生长素可诱导开雌花，说明生长素可独立于S1酶调控雌花发育；乙烯通过生长素调控雌蕊发育，生长素又调控S2酶合成，二者共同促进雌花发育，因此乙烯与生长素在调控黄瓜雌花发育中存在协同作用关系，施加生长素可诱导S1酶缺失突变体开雌花。 （5）花发育极早期，雌蕊原基中的S1 酶催化乙烯大量合成使乙烯含量增多，乙烯激活生长素信号通路，生长素一方面促进ARF3 基因表达，ARF3通过直接结合STM基因启动子激活STM 基因表达以启动和促进雌蕊发育，同时抑制WIP1基因表达以解除其对雌蕊发育的抑制，另一方面调控S2酶合成增多，S2酶激活雄蕊抑制因子以抑制雄蕊发育，最终通过促进雌蕊发育、抑制雄蕊发育的双重调控，使花芽选择性败育雄蕊原基，形成雌花，具体调控模型见答案。 20．（11分）吉林省是东北亚重要的陆路口岸，近几年出现了输入性疟疾病例。疟原虫感染人体后，疟原虫的pfcrt基因编码的蛋白第76位氨基酸（赖氨酸→苏氨酸）的突变会使疟原虫获得对氯喹的抗药性。为快速筛查氯喹抗性疟原虫，研究人员根据pfcrt基因的序列，设计了F1、F2、R1、R2四种备选引物（见图甲），用于扩增目的片段。以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR，产物的电泳结果如图乙所示，再将获得的产物用限制酶Dra Ⅰ（识别序列为5＇-AAATTT-3＇）处理。回答下列问题： (1)PCR扩增pfcrt基因时，因参与合成反应，不断消耗而浓度下降的组分有________________________。 (2)根据图甲和图乙信息，若要特异性扩增出包含完整Dra Ⅰ酶切位点区域的目的片段，应选择的引物组合是________。据图可以判断泳道2（F1-R2组合）的条带长度________（填“长于”或“短于”）泳道1（F1-R1组合）。导致两条带在电泳中迁移速率不同的直接原因是_______。 (3)已知敏感型pfcrt基因序列中Dra Ⅰ酶识别位点处编码赖氨酸的密码子为AAA，而抗性型突变后此处变为ACA（编码苏氨酸）。据此判断，Dra Ⅰ酶能切割________（填“敏感型”或“抗性型”）基因的PCR产物，原因是__________。 (4)在进行电泳鉴定实验时，将配制的琼脂糖溶液在沸水浴或微波炉内加热至琼脂糖熔化。稍冷却后加入适量的________混匀。 【答案】(1)引物、dNTP (2) F1和R1 长于 DNA片段长度 (3) 敏感型 敏感型pfcrt基因的PCR产物含有DraI酶的识别序列(5’-AAATTT-3’)，而抗性型基因突变导致该识别序列被破坏，无法被DraI酶识别切割 (4)核酸染料 【详解】（1）PCR 扩增时，需要引物、dNTP、Taq酶、模板DNA， 模板DNA数量相对固定，Taq酶起催化作用，含量不会改变，引物、dNTP均会被消耗而浓度下降。 （2）由图乙可知，引物F1和R2扩增出两个条带，引物特异性不强，引物F2和R1无法扩增出条带，引物F1和R1可扩增出一个条带，且扩增的条带包含完整Dra Ⅰ 酶切位点（5'-AAATTT-3'）的区域。R1位于R2的下游（R2更靠近 3' 端），F1-R1扩增的片段更短，迁移速率更快；F1-R2扩增片段更长，迁移更慢。 电泳中，DNA分子的迁移速率主要由片段长度决定（长度越短，迁移越快）。 （3）Dra Ⅰ的识别序列为5'-AAATTT-3'。 敏感型pfcrt基因的PCR产物含有DraI酶的识别序列(5’-AAATTT-3’)，而抗性型基因突变导致该识别序列被破坏，无法被DraI酶识别切割。 （4）琼脂糖熔化稍冷后，加入适量的核酸染料混匀，以便后续观察条带。。 21．（13分）开展深海微生物研究对于开发海洋资源具有重要意义。我国研究人员采集了深海冷泉附近的沉积物样品，采用新型分离策略，纯化、鉴定得到了全新的拟杆菌菌株，并进一步研究了其生物学特性。 回答下列问题： (1)研究者先制备培养基，然后采用________________________法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。为了减少灭菌后培养皿与周围的物品接触被污染，灭菌前的操作是_____________________________________________________。 (2)图甲是新菌株拟杆菌X在不同的培养基上的生长情况，可推测拟杆菌X在以______为碳源时生长状况最好；要检测培养基是否灭菌合格，对照组的操作是______________________________________。 (3)某同学对拟杆菌X进行纯培养，结果如图乙。其中①采用的纯培养技术是______法，第二至第五划线区域均无菌落，此过程出现的失误操作很可能是________________________________________。③不适于进行微生物数量测定，理由是__________________________________________________。 (4)研究人员常采用刚果红染色法鉴别纤维素分解菌，其原理是刚果红能与纤维素结合形成红色复合物，但不能与纤维素的水解产物结合成红色物质。将深海微生物接种到以纤维素为唯一碳源的刚果红固体培养基上，培养一段时间，挑选出纤维素分解能力强的菌株，其特点是观察到菌落周围__________________________________________。 【答案】(1) 高压蒸汽灭菌 用牛皮纸（报纸）包扎培养皿 (2) 纤维素 将未接种的培养基置于相同条件下培养一段时间，观察是否有菌落产生 (3) 平板划线 第一区域划线结束后，接种环灼烧后未充分冷却 平板③的菌落数不在30~300之间，不适于微生物数目测定的计数 (4)出现透明圈，且透明圈的直径较大 【详解】（1）研究者先制备培养基，然后采用高压蒸汽灭菌法灭菌，冷却后再接入沉积物样品，28℃厌氧培养一段时间后，获得了含拟杆菌的混合培养物。为了减少灭菌后培养皿与周围的物品接触被污染，灭菌前的操作是用牛皮纸（报纸）包扎培养皿，以便保证灭菌后培养皿周围无菌环境。 （2）图甲是新菌株拟杆菌X在不同的培养基上的生长情况，根据结果可以看出拟杆菌X在以纤维素为碳源时生长状况最好；要检测培养基是否灭菌合格，可将未接种的培养基置于相同条件下培养一段时间，观察是否有菌落产生，若没有菌落产生说明培养基制备合格。 （3）某同学对拟杆菌X进行纯培养，结果如图乙。根据菌落的分布可以看出①采用的纯培养技术是平板划线法，第二至第五划线区域均无菌落，此过程出现的失误操作很可能是第一区域划线结束后，接种环灼烧后未充分冷却。平板③的菌落数不在30~300之间，不适于微生物数目测定的计数，因此③不适于进行微生物数量测定。 （4）研究人员常采用刚果红染色法鉴别纤维素分解菌，其原理是刚果红能与纤维素结合形成红色复合物，但不能与纤维素的水解产物结合成红色物质。将深海微生物接种到以纤维素为唯一碳源的刚果红固体培养基上，培养一段时间，出现透明圈，且透明圈的直径较大的为纤维素分解能力强的菌株，挑取进行纯培养即可。 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二生物下学期期中考卷 参考答案 一、选择题：本题共16小题，共40分。第1~12小题，每小题2分；第13~16小题，每小题4分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 答案 C B C D C B B B A 题号 10 11 12 13 14 15 16 答案 C C C D C B A 二、非选择题：本题共5小题，共60分。 17．( 每空2分，共12分） (1)使淀粉更容易被酶解（或杀灭杂菌、使糯米软化） (2) 扩大培养； 酵母菌有以核膜为界限的细胞核，醋酸菌没有（或有无核膜包被的细胞核） (3) 稀释涂布平板法 透明圈直径与菌落直径比值（或透明圈） (4)通入无菌空气（或有氧环境）、提高发酵温度 18．（12分，除标注外，每空1分） (1)植物细胞的全能性 、 染色体（结构）变异 (2) 固体培养基 维持渗透压，提供能量（2分） (3) 有光 生长素 (4) 发出荧光 血细胞计数板 电融合法 (5)染色体数目和栽培稻相同且对两种菌株均表现出抗性（2分） 19．（12分。每空2分） （1）基因表达调控 (2)花发育早期ARF3在雌花中表达量高，雄花中几乎不表达，且这种差异在阶段1更明显 (3) (4) 雌 协同作用 (5) 20．（11分） (1)引物、dNTP (2) F1和R1 长于 DNA片段长度 (3) 敏感型 敏感型pfcrt基因的PCR产物含有DraI酶的识别序列(5’-AAATTT-3’)，而抗性型基因突变导致该识别序列被破坏，无法被DraI酶识别切割 (4)核酸染料 21．（13分） (1) 高压蒸汽灭菌 用牛皮纸（报纸）包扎培养皿 (2) 纤维素 将未接种的培养基置于相同条件下培养一段时间，观察是否有菌落产生 (3) 平板划线 第一区域划线结束后，接种环灼烧后未充分冷却 平板③的菌落数不在30~300之间，不适于微生物数目测定的计数 (4)出现透明圈，且透明圈的直径较大 答案第1页，共2页 / 学科网（北京）股份有限公司 $