第1章 第2节 第2课时 微生物的选择培养和计数(课时跟踪检测)(学用Word)-【优学精讲】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版）

第2课时　微生物的选择培养和计数 知识点一　选择培养基、微生物的选择培养和数量测定 1.（2025·河南商丘期中）随着工业的发展，土壤重金属污染日益严重，对动植物的生长有严重的危害作用。科研人员欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，部分实验流程如图。下列相关叙述错误的是（　　） A.选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌 B.若接种Ⅰ是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始 C.固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的 D.图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性和修复能力 2.（2025·江苏连云港期末）某兴趣小组在“探究培养液中酵母菌种群数量变化”的实验中，经等体积台盼蓝染液染色后，将酵母菌培养液稀释1 000倍，用血细胞计数板（规格为1 mm×1 mm×0.1 mm）进行计数，观察到一个中方格的菌体数如图。下列说法错误的是（　　） A.实验所用的血细胞计数板的规格是25×16 B.用滴管将培养液滴在盖玻片边缘，多余液体用滤纸吸去 C.可用抽样检测法对某一小方格内的酵母菌计数 D.该培养液中酵母菌的密度为4.5×109个·mL－1　 知识点二　土壤中分解尿素的细菌的分离与计数 3.（2025·吉林白山期末）尿素是现代农业中重要的氮肥，尿素分解菌可以分解利用尿素。关于土壤中分解尿素的细菌的分离与计数，下列叙述错误的是（　　） A.取土样时的铁铲和取样袋在使用前需要灭菌 B.尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们可以合成脲酶 C.在以尿素为唯一氮源的选择培养基上生长的细菌都是尿素分解菌 D.可以采用稀释涂布平板法对尿素分解菌进行计数 4.（2025·陕西西安期中）下列有关土壤中尿素分解菌的分离和培养的叙述，正确的是（　　） A.培养基中加入尿素作为唯一碳源，该培养基是鉴别培养基 B.测定土壤中分解尿素的细菌数量和测定土壤中放线菌的数量可采用相同的稀释度 C.细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高 D.利用稀释涂布平板法可以直接完成土壤中分解尿素的细菌的分离计数和纯化鉴定 5.（2025·山西吕梁期末）如图为研究人员对纤维素分解菌的分离操作（A组）和计数操作（B组）过程示意图。下列有关叙述错误的是（　　） A.④和⑤所用培养基从物理性质分析，区别是④培养基中没有添加琼脂 B.⑨计数得到的细菌数与用细菌计数板计数法得到的细菌数相比较多 C.④的培养基应以纤维素为唯一碳源，还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求 D.可以在培养基中加入刚果红来鉴别纤维素分解菌 6.（2025·广西玉林期末）秸秆还田可增加土壤肥力，缓解环境污染。为分离分解纤维素的微生物菌种，实现废物的资源化利用，以纤维素为唯一碳源并加入刚果红的培养基经接种后，若微生物菌种能分解纤维素，则会出现以菌落为中心的透明圈。科研人员从土壤中分离了五种能分解纤维素的细菌菌株，培养基中出现了因分解纤维素而产生的透明圈，操作过程如图所示。下列叙述错误的是（　　） A.分解纤维素能力最强的是E菌株，应对其扩大培养 B.配制培养基时，一般需要将培养基调至中性或弱碱性 C.实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触 D.若平板中平均菌落数为120个，则1 g土壤中含有能分解纤维素的细菌1.2×107个 7.（2025·江苏南通期中）科研人员拟从果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，主要流程如图。下列叙述正确的是（　　） A.步骤①土样应取自果园表层土壤，步骤③将土壤悬浮液稀释了10 000倍 B.步骤②充分振荡的目的是使土壤中的微生物充分释放到无菌水中 C.步骤④中待菌落长好后挑出菌落直径最大的菌落 D.④、⑤使用的接种工具不同，两种接种均可用于微生物的分离和计数 8.（2025·山东烟台开学考试）尿素是一种高浓度氮肥，通过土壤中某些细菌分解为氨后，被植物吸收利用。某同学要分离土壤中能分解尿素的细菌，并统计每克土壤样品中活菌数目，培养基配方如下： KH2PO4 Na2HPO4 MgSO4·7H2O 蛋白胨 葡萄糖 尿素 琼脂 1.4 g 2.1 g 0.2 g 1.0 g 10.0 g 1.0 g 15.0 g （1）根据培养基的成分分析，该同学能否分离出土壤中分解尿素的细菌？　　　　（填“能”或“不能”），原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。 （2）通常在实验室培养微生物时，需要对培养基、培养皿、接种环进行灭菌，灭菌方法依次是　　　　　　　　、　　　　　　　　、　　　　　　。培养细菌时，一般需要将培养基的pH调至　　　　。 （3）某同学取稀释倍数为106倍的菌液0.2 mL接种后，测得平板上菌落数为156、178和191，则每克样品中的菌落数为　　　　个。 （4）某同学在分离纯化土壤中分解尿素的细菌时，发现培养基上的菌落连成一片，最可能的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　，为避免此种现象发生，正确的操作方法是　　　　　　　　　　　。 （5）图1 和图 2 是培养某细菌的结果图，其对应的接种方法分别是　　　　　　　　和　　　　　　　　，这两种方法接种后培养基上都可以得到由单个细胞繁殖形成的　　　　，其中，　　　　（填“图 1”或“图2”）所用的接种方法可用来对活菌进行计数。 3 / 3 学科网（北京）股份有限公司 $ 第2课时　微生物的选择培养和计数 1.D　获取目的菌应从富含该菌的环境中进行，本操作欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，工厂的重金属较多，故选取工厂附近的菜田土更容易获得目的菌，A正确；若接种Ⅰ是平板划线法，则下一次划线需要从上一次划线的末端开始，保证下一次划线的菌落来自上一次的末端，这样随着划线次数增加，最终能得到单菌落，B正确；本操作欲筛选出对重金属铬（Cr）具有耐受性和修复能力的细菌，固体培养基中需要添加适量重金属铬，以达到筛选的目的，C正确；图中筛选得到的菌株对含重金属铬的土壤具有耐受性，但不一定具有修复能力，还需通过实验进一步验证，D错误。 2.C　图中一个中格是16个小格，实验所用的血细胞计数板的规格是25×16，A正确；将培养液滴在盖玻片边缘可以让培养液自行渗入计数室，多余的液体用滤纸吸去可以确保计数室内的培养液量适中，避免因液体过多而影响观察和计数，B正确；可用抽样检测法对某一中方格内的酵母菌计数，C错误；图中一个中格16小格中的酵母菌数总共有12个，其中3个被台盼蓝染色，说明为死细胞，不计数，则可计数酵母菌为9个，原1 mL培养液中的酵母菌数为每个小格中的平均酵母菌数×400个小格×2（等体积染色相当于稀释两倍）×酵母菌培养稀释倍数×10 000，则该1 mL样品中酵母菌的密度为9÷16×400×2×1 000× 10 000＝4.5×109个·mL－1，D正确。 3.C　取土样时的铁铲和取样袋在使用前都需要灭菌，这样可以保证获取的菌种来自土壤，A正确；尿素分解菌之所以能分解尿素，是因为它们含有相关基因，可以合成脲酶，B正确；在以尿素为唯一氮源的选择培养基上生长的不都是尿素分解菌，还有可能是自生固氮菌，需要对分离的菌种进行鉴定，C错误；可以采用稀释涂布平板法对尿素分解菌进行分离和计数，该方法统计的菌体数往往偏小，D正确。 4.C　培养基中加入尿素作为唯一氮源，在该培养基中只有分解尿素的细菌才能生长，因此该培养基是选择培养基，A错误；因为土壤中各类微生物的数量不同，故为获得不同类型的微生物，要按不同的稀释倍数进行分离，B错误；在细菌分解尿素的化学反应中，细菌合成的脲酶能将尿素分解成氨，氨会使培养基的碱性增强，pH升高，C正确；可以利用稀释涂布平板法对土壤中分解尿素的细菌进行分离计数，该方法计数的原理是：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个单菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌，因此可以通过统计平板上的菌落数，推测出样品中大约含有多少活菌。可见，稀释涂布平板法并不是对土壤中分解尿素的细菌直接进行分离计数，D错误。 5.B　④和⑤所用培养基从物理性质分析，④是液体培养基，⑤是固体培养基，加有琼脂，A正确；⑨计数方法为稀释涂布平板法，只能统计活菌数，而细菌计数板计数法无论活菌还是死菌都统计在内，因此稀释涂布平板法统计得到的细菌数与用细菌计数板计数法统计得到的细菌数相比较少，B错误；该实验是为了分离得到纤维素分解菌，培养液中以纤维素作为唯一碳源时，只有能利用纤维素的微生物才能生长繁殖，从而筛选出纤维素分解菌，此外还需满足微生物生长对pH、特殊营养物质等的需求，C正确；当纤维素被纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，可通过是否产生透明圈来筛选纤维素分解菌，D正确。 6.D　因为E菌落外围的透明圈和E菌落直径的比例最大，所以分解纤维素能力最强的是E菌株，应对其扩大培养，A正确；纤维素分解菌是细菌，在培养细菌时一般需要将培养基调至中性或弱碱性，B正确；周围物品可能会含有杂菌，为防止污染，实验操作时应避免已经灭菌处理的材料用具与周围物品相接触，C正确；若平板中平均菌落数为120个，图示实验所用的涂布菌液稀释了105倍，则1 g土壤中含有细菌120÷0.1×105＝1.2×108个，D错误。 7.B　科研人员想要从果园土中选出可以将难溶性或不溶性磷转化成可溶性磷的高效解磷菌，因此步骤①土样应取自果园表层的土壤，步骤③中的稀释梯度依次为10、100、1 000倍，所以土壤悬浮液稀释了1 000倍，A错误；步骤②需充分振荡20 min，主要目的是使土壤中的微生物与无菌水充分混匀，从而使土壤中的微生物充分释放到无菌水中，B正确；步骤④的目的是筛选出降解难溶性或不溶性磷的微生物，因此应筛选出溶磷圈直径与菌落直径比值较大的菌落，C错误；④所使用的是稀释涂布平板法，用的工具是涂布器，⑤所使用的是平板划线法，用的工具是接种环，两者使用的工具不同，平板划线法能用于微生物的分离，但不能用于微生物的计数，稀释涂布平板法可以用于微生物的分离和计数，D错误。 8.（1）不能　尿素不是唯一氮源　（2）高压蒸汽灭菌法　干热灭菌法　灼烧灭菌法　中性或弱碱性　（3）8.75×108　（4）菌液浓度过高　对菌液进行梯度稀释　（5）稀释涂布平板法　平板划线法　菌落　图1 解析：（1）分离土壤中能分解尿素的细菌，培养基应以尿素为唯一氮源，该培养基中有蛋白胨，蛋白胨含氮元素，其他杂菌可利用蛋白胨中的氮源生长，所以不能筛选出只分解尿素的细菌。（2）培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，培养皿常用干热灭菌法灭菌，接种环常用灼烧灭菌法灭菌；细菌生长需要适宜的pH，培养细菌时一般将培养基pH调至中性或弱碱性。（3）分析题意，平板上菌落数的平均值为（156＋178＋191）÷3＝175个，根据公式每克样品中的菌落数＝（平板上菌落数的平均值÷涂布的菌液体积）×稀释倍数，可得每克样品中的菌落数为（175÷0.2）×106＝8.75×108个。（4）稀释涂布平板法是将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落，菌落连成一片最可能是菌液浓度过高，细菌过于密集；避免方法是对菌液进行梯度稀释，降低菌液浓度后再涂布。（5）图1是稀释涂布平板法，将菌液进行一系列梯度稀释后涂布到培养基表面；图2是平板划线法，通过连续划线将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面；两种方法都能得到单个细胞繁殖形成的菌落，稀释涂布平板法可用于活菌计数。 3 / 3 学科网（北京）股份有限公司 $