第1章 第2节 第1课时 微生物的基本培养技术(课时跟踪检测)(学用Word)-【优学精讲】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版）

第1课时　微生物的基本培养技术 知识点一　培养基的配制和无菌技术 1.（2024·湖北武汉高二期中）关于培养基的配制的说法，错误的是（　　） A.配制培养基时要注意各种养分的浓度和比例 B.合适的培养基可实现分离、鉴定微生物等不同目的 C.在培养尿素分解菌的培养基中，尿素既是氮源也是碳源 D.不同培养基的配方不同，但一般含有碳源、氮源、水和无机盐 2.（2024·河北衡水中学高二检测）下表是某同学培养微生物时配制的培养基，关于此培养基的说法，错误的是（　　） 编号 ① ② ③ ④ ⑤ 成分 （NH4）2SO4 KH2PO4 FeSO4 CaCl2 H2O 含量 0.4 g 4.0 g 0.5 g 0.5 g 100 mL A.此培养基可用来培养自养型微生物 B.此表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源 C.表中各成分的质量按照所培养的微生物的营养需要来确定 D.若除去①，此培养基可用于培养大肠杆菌 3.（2025·陕西榆林期中）下列关于无菌技术的叙述，正确的是（　　） A.常用干热灭菌法对培养基进行灭菌 B.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染 C.牛奶、熟啤酒、葡萄酒都可用煮沸消毒法消毒 D.配制固体平板培养基的基本步骤是：计算→称量→溶化→倒平板→灭菌 4.（2025·山东菏泽开学考试）下列有关微生物的实验室培养的相关叙述正确的是（　　） A.灭菌和消毒均可以杀死环境中的一切微生物，包括芽孢和孢子 B.培养基可以用来培养、分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物 C.培养霉菌时，一般要将培养基调至中性或弱碱性 D.在培养基中加入青霉素可抑制真菌而促进细菌生长，向液体培养基中通入氧气能促进破伤风芽孢杆菌的生长 知识点二　微生物的纯培养 5.（2025·河南荥阳高级中学月考）微生物的纯培养既需要适宜的培养基，又需要防止杂菌污染。下列相关表述正确的是（　　） A.微生物的纯培养物就是不含有代谢废物的微生物培养物 B.培养基中的营养物质浓度越高，对微生物的生长越有利 C.消毒和灭菌的杀菌程度存在差异 D.为了防止污染，接种环经火焰灭菌后应趁热快速挑取菌落 6.（2025·山东潍坊开学考试）有关纯化酵母菌的实验操作，叙述错误的是（　　） A.第一步灼烧接种环是为了避免接种环上可能存在的微生物污染培养物 B.在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于菌液 C.每次划线结束，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种 D.划线结束后，灼烧接种环能及时杀死接种环上的菌种，避免细菌污染环境和感染操作者 7.（2025·浙江宁波期中）如图是微生物平板划线示意图，划线的顺序为1、2、3、4、5。下列操作方法正确的是（　　） A.在1～5区域中划线前后，都要对接种环灭菌 B.划线操作须在火焰上进行 C.在5区域中才可以得到所需菌落 D.每次接种前要将接种环放在火焰边灼烧灭菌 8.下列关于微生物纯培养的叙述，错误的是（　　） A.倒平板操作应等培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近进行 B.微生物的纯培养包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤 C.用平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落 D.在平板划线过程中，灼烧接种环之后，应马上划线，防止接种环被杂菌污染 9.（2025·山西大同大成双语学校月考）在微生物培养过程中，由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物。平板划线法和稀释涂布平板法是常用的获取纯培养物的方法。下列说法错误的是（　　） A.通常对接种室用紫外线照射30 min后，再适量喷洒消毒液来增强消毒效果 B.若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养 C.两种纯化方法的核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度 D.接种环在划线前后都需要灼烧，所以在平板上划线5次应灼烧接种环6次 10.（2025·湖北黄冈模拟）获得纯净微生物培养物的关键是防止杂菌污染，无菌技术围绕着如何避免杂菌的污染展开。下列相关叙述错误的是（　　） A.耐高温的、需要保持干燥的物品可用干热灭菌法进行灭菌 B.酒精能使细胞中的蛋白质变性，95％的酒精较75％的酒精消毒效果好 C.为了避免周围环境中微生物的污染，微生物接种应在酒精灯火焰旁进行 D.巴氏消毒可杀死绝大多数微生物同时不破坏物质的营养成分，可用于果酒消毒 11.（2025·江苏南通期中）某生物小组欲利用以下培养基从土壤中分离某种微生物，下列对该实验的后续操作及结果分析正确的是（　　） 成分 葡萄糖 KH2PO4 K2SO4 NaCl CaCO3 MgSO4·7H2O 蒸馏水 琼脂粉 含量 10 g 0.2 g 0.2 g 0.2 g 5 g 0.2 g 1 000 mL 20 g A.配制好的培养基先分装到锥形瓶后再进行高压蒸汽灭菌 B.该培养基灭菌后需冷却至40 ℃再进行倒平板操作 C.用无菌水将土样进行系列稀释后用接种环进行接种、计数 D.该无氮培养基可用于硝化细菌等固氮菌的分离与计数 12.（2025·山东日照国开中学月考）下列关于倒平板操作的叙述，错误的是（　　） A.将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞 B.右手拿锥形瓶，使瓶口迅速通过火焰 C.用左手将培养皿打开，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手缓慢盖上皿盖 D.待培养基冷却凝固后，将平板倒过来放置 13.（2025·安徽淮北期末）甲烷氧化菌在有氧条件下能够氧化甲烷，其产生的单细胞蛋白具有较高的经济价值。某研究小组欲从土壤中筛选并纯化甲烷氧化菌，以生产单细胞蛋白。已知可通过改变培养箱中的气体环境进行甲烷氧化菌的培养，回答下列问题。 （1）为了筛选出甲烷氧化菌，培养时应选择以　　　　为唯一碳源。 （2）配制培养基后，需用　　　　　　　　　　（填方法）对培养基进行灭菌，待培养基冷却到　　　　℃左右时倒平板，然后将土样稀释后涂布在培养基上，放在特殊气体环境中进行培养。 （3）在培养箱中培养一段时间后，若固体培养基上形成的菌落的　　　　　　　　　（答出2点）不同，则说明固体培养基上出现了多种微生物。 （4）研究发现，甲烷氧化菌还能利用甲醇作为碳源。已知所取土样中不含甲醇，为进一步纯化甲烷氧化菌，可将上述培养基中出现的多种微生物用　　　（填一种工具名称）挑出，分别在　　　（填“液体”或“固体”）培养基中扩大培养后，再分别接种到以　　　　为唯一碳源的　　　　（填“液体”或“固体”）培养基上，置于相同且适宜的环境中培养，一段时间后，若某培养基中出现　　　　，基本可说明筛选出了甲烷氧化菌。 2 / 3 学科网（北京）股份有限公司 $ 第2节　微生物的培养技术及应用 第1课时　微生物的基本培养技术 1.C　培养基有选择培养基、鉴别培养基等，可实现分离、鉴定微生物等不同目的，B正确；在培养尿素分解菌的培养基中，尿素是唯一的氮源，培养基中添加葡萄糖，葡萄糖作为碳源，C错误；微生物的营养物质主要包括碳源、氮源、水和无机盐等，D正确。 2.D　由表中成分可知，该培养基中未添加有机碳源，故此培养基可用来培养自养型微生物，A正确；分析表格可知，表中的营养成分共有三类，即水、无机盐、氮源，B正确；培养基中各成分的质量按照所培养的微生物的营养需要来确定，C正确；大肠杆菌是异养型生物，且自然状态下不能固氮、碳，因此培养大肠杆菌需要添加有机碳源和氮源，D错误。 3.B　培养基的灭菌方法是高压蒸汽灭菌，即湿热灭菌，不是干热灭菌，A错误；获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，保证无菌环境，B正确；牛奶、熟啤酒、葡萄酒都可用巴氏消毒法消毒，该方法可以减少牛奶和酒类中的营养流失，C错误；配制固体平板培养基的基本步骤是：计算→称量→溶化→灭菌→倒平板，D错误。 4.B　灭菌（如高压蒸汽灭菌）能杀死所有微生物，包括芽孢和孢子；而消毒（如煮沸或紫外线处理）仅能杀死部分微生物，无法彻底消灭芽孢和孢子。因此两者作用效果不同，A错误；培养基的核心功能是培养微生物。通过调整成分或设计（如选择培养基、鉴别培养基），可实现分离、鉴定、保存微生物或积累其代谢物（如抗生素），B正确；霉菌适宜在酸性环境（pH≈5）中生长，而中性或弱碱性培养基常用于培养细菌（如大肠杆菌）或放线菌，C错误；青霉素通过抑制细菌细胞壁合成发挥作用，主要针对革兰氏阳性菌（如某些细菌），但对真菌无效。若培养基中添加青霉素，会抑制细菌而允许真菌生长。此外，破伤风芽孢杆菌为严格厌氧菌，通入氧气会抑制其生长，D错误。 5.C　微生物的纯培养物是不含杂菌的微生物，而不是不含有代谢废物，A错误；培养基中的营养物质浓度并不是越高对微生物的生长越有利，当营养物质浓度过高时，可能会导致微生物细胞失水，这对微生物的生长是不利的，B错误；消毒是用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物，而灭菌则是指使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物，包括芽孢和孢子，消毒和灭菌的杀菌程度存在差异，C正确；接种环火焰上灼烧后，待冷却后才可以快速挑取菌落，避免温度太高烫死菌种，D错误。 6.B　为避免杂菌的污染，第一步操作时需要灼烧接种环，A正确；在第二区域内划线时，接种环上的菌种直接来源于第一区域的划线末端，B错误；每次划线前，灼烧接种环是为了杀死上次划线结束后接种环上残留的菌种，保证再次划线的菌种来自上一次划线的末端，C正确；划线结束后，由于接种环上还会残留菌种，因此需要灼烧接种环以杀死接种环上的菌种，从而避免细菌污染环境和感染操作者，D正确。 7.A　在1、2、3、4、5区域中划线前后都要对接种环进行灼烧灭菌，保证每次划线的菌种来自上一区域的末端，在1区域前灼烧是为了杀死杂菌，在5区域后灼烧灭菌，是防止接种环上的细菌污染环境，A正确；平板划线操作应在火焰旁进行，不能在火焰上进行，B错误；由题图可知，5区域是最后一个区域，有可能在5区域获得所需要的菌落，但在4区域也有可能得到所需要的菌落，C错误；进行平板划线操作之前，需将接种环在酒精灯火焰上进行灼烧灭菌，D错误。 8.D　倒平板操作应等培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近进行，该温度为刚不烫手的温度，并且在酒精灯火焰旁能保证无菌环境，A正确；微生物的纯培养的步骤包括配制培养基、灭菌、接种、分离和培养等步骤，其目的是获得纯培养物，B正确；用平板划线法通过连续划线操作可得到单菌落，稀释涂布平板法在稀释倍数足够高的情况下，可在培养基上获得单菌落，即平板划线法和稀释涂布平板法都能在固体培养基上得到单菌落，C正确；在平板划线过程中，灼烧接种环之后，应待接种环冷却后划线，否则会烫死菌种，D错误。 9.A　通常对接种室用紫外线照射30 min，照射前可适量喷洒苯酚等消毒液来增强消毒效果，A错误；若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养，如果出现了菌落，说明培养基被污染，B正确；平板划线法和稀释涂布平板法的关键是无菌操作，其核心都是要防止杂菌污染，保证培养物的纯度，C正确；接种环在划线前后都需要灼烧，所以在平板上划线5次应灼烧接种环6次，D正确。 10.B　乙醇能使蛋白质变性，70％～75％的酒精浓度是临床消毒浓度，过高浓度的酒精能够使细菌表面的蛋白质凝固，形成一层膜，阻碍酒精分子进一步渗入细菌内部，导致杀菌效果不佳，B错误；巴氏消毒最大的优点是能杀死绝大多数微生物的同时基本不会破坏物质的营养成分，果酒可用巴氏消毒法进行消毒，D正确。 11.A　配制好的培养基，分装到锥形瓶，塞好棉塞，用牛皮纸将瓶口包裹好，放入高压蒸汽灭菌锅灭菌，A正确；倒平板的温度一般在50 ℃左右，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固，B错误；用无菌水将土样进行系列稀释后用涂布器进行涂布接种，进而获得单菌落，这样可以保证获得的单菌落来自土样，C错误；若要分离土壤中的固氮菌，能够利用空气中的氮气作为氮源，为达到分离的目的，应选择无氮源的培养基，这样只有自身固氮菌能够生长，其他微生物无法生长，硝化细菌不属于固氮菌，D错误。 12.C　倒平板时，将灭过菌的培养皿放在火焰旁的桌面，右手拿装有培养基的锥形瓶，左手拔出棉塞，右手拿锥形瓶，将瓶口迅速通过火焰，A、B正确；用左手的拇指和食指将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙，右手将锥形瓶中的培养基倒入培养皿，左手立即盖上培养皿的皿盖，C错误；待平板冷却凝固后，将平板倒过来放置，防止皿盖上的水分滴到培养基上造成培养基的污染，D正确。 13.（1）甲烷　（2）高压蒸汽灭菌法　50　（3）形状、大小、颜色等　（4）接种环　液体　甲醇　固体　菌落 解析：（1）依题意，甲烷氧化菌在有氧条件下能够氧化甲烷，因此为了筛选出甲烷氧化菌，可选择以甲烷为唯一碳源。（2）获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染，配制培养基后，通常需要对培养基进行灭菌处理，对培养基进行灭菌时，常用的灭菌方法是高压蒸汽灭菌法。灭菌后的培养基进行倒平板操作时，培养基通常要冷却至50 ℃左右，在这个温度下操作，培养基不会凝固，也不至于烫手。（3）微生物在固体培养基上培养时，会得到菌落。不同微生物的菌落在形状、大小、颜色等方面有相对稳定的特征。因此，在培养箱中培养一段时间后，若固体培养基上形成的菌落在形状、大小、颜色等方面不同，则说明固体培养基上出现了多种微生物。（4）微生物培养过程进行接种操作时，常用的接种工具是接种环。微生物的扩大培养目的是富集微生物数量，由于液体培养基营养物质能得到更充分的利用，得到的微生物菌体数更多，通常扩大培养过程都是使用液体培养基。甲烷氧化菌还能利用甲醇作为碳源，可利用以甲醇为唯一碳源的培养基进行筛选。筛选得到的菌株是不是目的菌株，通常通过菌落特征进行初步判定，固体培养菌上培养微生物才能得到菌落。因此，筛选甲烷氧化菌可以用以甲醇为唯一碳源的固体培养基，若某培养基中出现菌落，基本可说明筛选出了甲烷氧化菌。 2 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