精品解析：浙江省绍兴市柯桥区钱清中学2025-2026学年高二下学期3月阶段检测生物试题

钱清中学2025学年第二学期生物学科3月练习卷 一、选择题(本大题共25小题，每小题2分，共50分，每题只有一个最佳答案) 1. 下列关于无菌操作的叙述正确的是（　　） A. 接种时超净工作台内同时打开紫外灯和过滤风 B. 用平板划线法接种时，如果有四个划线区域，则接种环一共要灼烧五次 C. 用脱脂棉制成的棉塞塞住试管口，用牛皮纸包扎，放入灭菌锅内灭菌 D. 利用微生物发酵生产青霉素时不需要无菌操作 2. 养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中，下列说法正确的是（　　） A. 需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌 B. 应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行 C. 采用平板划线法进行分离和计数时，还需与未接种的空白培养基同时培养 D. 若空白对照组上长出了菌落，需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数 3. 某同学在稀释倍数为1×103倍的培养液中对酵母菌进行血细胞计数板计数(规格为1mm×1mm×0.1mm)，如图是通过显微镜观察到的酵母菌培养液的结果图像。相关叙述正确的是（　　） A. 血细胞计数板常用于细菌、酵母菌等微生物的计数 B. 10mL该培养液中酵母菌总数约为6.5×107个 C. 滴入样液后轻轻振荡计数板，使酵母菌均匀分布 D. 在血细胞计数板上滴上菌液后盖上盖玻片 4. 采用涂布法从土壤中分离得到农杆菌，下列有关叙述错误的是（ ） A. 将土样加到经G6玻璃砂漏斗过滤的蒸馏水中制成土壤样液 B. 倍数稀释土壤样液时，可使用移液管并尽量只取悬液 C. 制备平面培养基时先高压蒸汽灭菌，后倒入培养皿形成平面 D. 保存菌种的做法是将单菌落接种在空白斜面后立刻置于4℃冰箱中 5. 酒和泡菜是人们喜爱的传统发酵食品，下列相关叙述错误的是（ ） A. 在发酵初期都要向发酵装置通入氧气用于增加菌种数量加快发酵速度 B. 在发酵过程中随着发酵产物的增加都会逐渐抑制发酵菌的活性 C. 随着发酵的进行，发酵液的pH都会逐渐下降，最终呈酸性 D. 酒和泡菜的制作过程中主要利用的微生物分别是酵母菌和乳酸菌 6. 甲、乙、丙、丁四个生物兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动： 甲：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒 乙：植物组织→形成愈伤组织→长芽→生根→试管苗 丙：各种菜洗净并切成小块→加盐、糖及调味品→装入泡菜坛→发酵→成品 丁：剪碎动物组织→胰蛋白酶处理→细胞悬液→原代培养→传代培养 据此分析错误是（ ） A. 甲组在发酵时打开排气口的间隔时间可逐渐延长 B. 乙组常用的培养基是LB半固体培养基 C. 丙组泡菜坛中可以加入陈泡菜水，其作用是提供经扩大培养的发酵菌种 D. 丁组由原代培养转到传代培养需用胰蛋白酶处理 7. 豆粕是大豆提取豆油后的一种副产品。为提高其利用价值，研究人员拟从发酵的豆粕中，筛选出能高效地将豆粕蛋白质转化为有机酸的乳酸菌菌株，乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，过程如下： 步骤1：乳酸菌的富集 将发酵豆粕接种于添加了放线菌酮液体培养基。 步骤2：纯化与鉴定 取一定量的富集菌液，进行梯度稀释，接种于添加了碳酸钙的培养基，挑选单菌落纯化培养并鉴定菌种。 步骤3：探究不同添加物对菌种发酵效果的影响 下列分析正确的是（ ） A. 步骤1添加放线菌酮的目的是抑制细菌生长 B. 步骤1适用划线接种，步骤2适用涂布接种 C. 步骤2通过观察溶钙圈的大小挑选目标菌落 D. 步骤3培养基中的碳源和氮源全部来自豆粕 阅读下列材料完成下面两小题： 2023年9月，某咖啡和某白酒联合推出的“酱香拿铁”火爆出圈。经检测，这款咖啡的酒精含量约为0.02%。近年来，以大面积砍伐森林用于种植咖啡树为代价，换取了全球咖啡产量的持续上升。芬兰国家技术研究中心近期利用“细胞农业”技术(即通过细胞扩大培养形成产物)，成功培育出第一杯“人造咖啡”。 8. 据了解，该白酒酿造过程中使用60℃以上高温制曲，检测发现酿造环境中有1946种微生物，其中细菌1063种、酵母菌与丝状真菌883种。下列叙述正确的是（　　） A. 过度饮酒有害健康，主要原因是酿酒环境中的微生物大多数对人体有害 B. 用60℃以上高温制曲，主要目的是对发酵原料进行灭菌处理 C. 该酿造的产物白酒可以用溴麝香草酚蓝水溶液进行检测 D. 该白酒具有的独特香味与发酵微生物的代谢特点和种间关系密切相关 9. 已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列关于利用“细胞农业”技术培育出“人造咖啡”的叙述，错误的是（　　） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”，可减少对森林的大面积砍伐 C. “人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 10. 病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量和品质退化。通过植物组织培养技术，利用茎尖可以快速培育出脱毒苗。下列有关叙述正确的是（　　） A. 配制MS固体培养基时，经高压蒸汽灭菌后再调pH B. 植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达 C. 切取的植株茎尖用75%的酒精消毒后，需放在清水中反复清洗 D. 脱毒苗培育是否成功，最终还需要通过接种病毒进行个体水平的检测 11. 植物组织培养在植物生产领域有着广泛的应用。下列叙述错误的是（ ） A. 初代培养物培养至一定时间可进行继代培养 B. 从植物生长点取外植体进行组培可获得脱毒植株 C. 生产人工种子的体细胞胚一定是由愈伤组织分化而来 D. 利用发酵罐大规模培养植物细胞可用于细胞代谢产物的生产 12. 不同抑菌剂在铁皮石斛开放组培中抑菌效果如表所示。其中培养基X的主要成分为：MS+2.5mg/L6-BA+0.25mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂。下列叙述正确的是（ ） 编号 培养基成分 是否灭菌 成活率% 增殖系数 甲 培养基X+植培灵 否 100 2.32 乙 培养基X+清菌易 否 70 0.92 丙 培养基X+植培灵+链霉素 否 92 1.96 丁 培养基X+清菌易+链霉素 否 22 0.40 戊 培养基X 是 100 1.30 注：成活率=（成活苗数/外植体数）×100%；增殖系数=不定芽数/外植体数。 A. 培养基X为铁皮石斛的生根诱导培养基 B. 单独添加植培灵会提高铁皮石斛的成活率 C. 植培灵和链霉素组合会促进铁皮石斛的生根 D. 清菌易和链霉素的组合会抑制铁皮石斛的增殖 13. 植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体，为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是（　　） A. 两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长 B. 诱导两种突变体进行植物体细胞杂交时应先用胶原蛋白酶酶解得到原生质体 C. 细胞膜融合是细胞融合完成的标志 D. 若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点相同 14. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（　　） A. 用自然生长的茎进行组培消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性 B. 培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C. 诱导形成试管苗后，打开封口膜或瓶盖后，直接将试管苗移栽入土 D. 不带叶片的菊花幼茎切段通过体细胞胚发生的途径形成完整的菊花植株 15. 科研人员利用天山雪莲的叶肉细胞进行植物组织培养，获得了大量的优质组培苗（如图）。下列叙述正确的是（ ） A. 该技术的原理是基因的选择性表达 B. 用酒精或次氯酸钠对外植体进行灭菌 C. 过程①一般不需要进行光照处理 D. 过程②③所用激素的种类和比例相同 16. 下列有关高等植物原生质体制备和培养的叙述，正确的是（　　） A. 对原生质体活力检查可观察其能否发生质壁分离 B. 加入0.5~0.6mol/L甘露醇目的是保护纤维素酶和果胶酶 C. 从不同植物组织分离得到的原生质体大小、形状相同 D. 纤维素酶和果胶酶混合液可用于制备悬浮培养细胞的原生质体 17. 我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名1型糖尿病（T1DM）患者体内，具体流程如图所示。下列分析错误的是（ ） A. 从患者体内抽取脂肪组织可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理成单个细胞 B. 在诱导形成CiPSCs的过程中，需精确控制培养基的成分 C. CiPSCs能够被诱导成胰岛细胞依赖于细胞的全能性 D. 该技术的成功有利于患者摆脱对外源胰岛素的依赖 18. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ） A. 液体培养基中的动物血清需过滤灭菌 B. 定期更换培养液可以防止细胞代谢产生有毒物质危害细胞 C. 在二氧化碳培养箱中进行原代培养和传代培养 D. 动物细胞培养体现了动物细胞核的全能性 19. 将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞(图标号①)注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠(Mc)。部分过程的示意图如图，图中标号表示结构或过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①经分裂、分化后能形成Mc的多种组织 B. ③进行体外胚胎干细胞培养可直接获得Mc C. ④将发育成绒毛膜和胎盘的一部分 D. ⑤过程需对代孕小鼠进行同期发情处理 20. 中科院动物所和大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核的兔子的卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。下列叙述错误的是（　　） A. 若选用胚胎细胞核移植，成功率将明显高于体细胞核移植 B. 上述事例说明异种生物的细胞质也能调控细胞核基因的表达 C. 可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D. 选用兔子的卵母细胞是因为比大熊猫的卵母细胞实验成功率高 21. 如图为细胞融合的简略过程，下列说法正确的是（　　） A. 若细胞a、b分别取自优良奶牛，则受精形成的受精卵需培养至原肠胚后移植 B. 若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞，则获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C. 若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择性培养基中筛选后即可大规模培养生产单抗 D. 动物细胞融合过程常用物理诱导因素电脉冲融合、激光融合等技术进行促融处理 22. 某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（ ） A. 营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 B. 获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C. XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D. 若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 23. 研究者在哺乳动物胚胎的2细胞期对细胞进行标记，追踪到囊胚阶段，发现大多数内细胞团细胞主要来源于2细胞阶段中的一个细胞，即在胚胎发育的早期阶段，细胞的命运已经开始表现出显著的不均衡性。相关叙述正确的是（　　） A. 遗传物质的差异影响了2个细胞的命运 B. 滋养层的细胞可用于胚胎的性别鉴定 C. 内细胞团发育为胚胎的大部分和胎盘的一部分 D. 此研究说明胚胎分割在受精卵时进行效果最好 24. 下列有关质粒的叙述，正确的是（　　） A. 质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 B. 质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 C. 质粒的受体细胞都是细菌 D. 在进行基因工程操作中，被用作载体质粒都是天然质粒 25. 2个来源不同的DNA片段A、B、A片段用限制酶SpeⅠ进行切割，B片段用限制酶XbaI进行切割，两种限制酶的识别序列和切割位点如图所示，产生的片段相连接形成重组DNA。若用限制酶SpeⅠ、限制酶XbaⅠ分别对重组DNA进行切割，结果是（　　） A. 两种限制酶都能识别重组DNA并将其切割成片段 B. 只有限制酶SpeI能识别重组DNA并将其切割成片段 C. 只有限制酶XbaI能识别重组DNA并将其切割成片段 D. 两种限制酶都不能识别重组DNA，故不能将其切割成片段 二、非选择题(本题共5小题，共50分) 26. 多环芳烃（PAHs）是一种不溶于水的有机物，在培养基中以微小的颗粒状存在，PAHs在土壤中的降解速率很慢，并具有致癌和致畸作用。科研人员欲从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图所示的实验（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题： （1）从培养功能角度分析，培养基甲属于_____；培养基通常需要提前在121℃下进行_____。 （2）将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是_____，该方法不仅适用于筛选某种菌株，还可用于_____。 （3）筛选PAHs降解菌实验时，过程③所需要的实验工具有_____（答出两种）。过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值_____（填“最小”或“最大”）的。 （4）在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液样品中细菌数为_____个。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，所统计的细菌数通常会比上述方法统计数目偏_____（填“大”或“小”），原因是_____。 27. 人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。如图是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答： （1）图中向小鼠注射的A是_____。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是_____。 （2）图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，该细胞有_______的特点。筛选②需要进行________和________。 （3）从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞工程中的_________和_________两大技术。对应的原理分别是________、_________。 （4）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而且绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这体现了单克隆抗体的优点是________。 28. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用___________(填数字)。 （2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射___________，使用___________技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为___________。 （3）供体1完成体内受精的场所在___________。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其___________，胚胎移植前需要对受体进行___________处理。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过___________技术获得二分胚①和②，操作时需要注意___________，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 29. 三叶青是我国珍稀的药用植物，主要以球形块根入药，块根中的活性药用成分为黄酮等次生代谢产物。在自然环境下，三叶青块根生长缓慢且形成的年限较长，难以满足药材市场的需求。回答下列问题： （1）为快速生产三叶青黄酮，取三叶青腋芽作为___________接种到MS固体培养基，腋芽含有分生组织可不经___________过程，直接萌发成无菌苗。取无菌苗叶片置于MS培养基中诱导形成愈伤组织。与野生植株组织相比，选择无菌苗组织作为愈伤组织的诱导材料，可以减少___________过程对诱导成功率的影响。对愈伤组织进行液体悬浮培养，获得产黄酮的___________。培养过程中发现，使用通气性差的封口膜可以提升黄酮的产量，可能是___________胁迫诱导细胞产生次生代谢产物。为进一步促进黄酮的合成并积累，也可改变培养基中___________诱导愈伤组织分化成___________进行器官培养。 （2）三叶青组织内存在植物内生菌，内生菌能影响植物的生长发育。为分离促进三叶青生长的内生菌，取三叶青块根经消毒后切割成小块置于马铃薯葡萄糖培养皿中。待菌丝体从三叶青块根切面长出后，对内生真菌进行鉴定。选取不同菌落菌丝接种到新的培养基倒置培养，通过观察___________等特征对内生真菌进行初步鉴定；也可进行振荡培养，获得大量菌液再进行分子鉴定。初步鉴定和获得菌液依次使用___________、___________(填物理状态)培养基。为确定分离获得的内生真菌对三叶青生长和黄酮生产的影响，将三叶青无菌幼苗接种至添加有___________的MS培养基进行培养，以三叶青植物___________(答出两点)作为参照对内生菌进行筛选用于后续研究。 30. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其______（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用_______（填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 （2）过程①通过酶解法去除_______获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带_______的杂种原生质体。 （3）科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在_______种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为_______。 （4）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整_____。 ②若实验结果为______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 钱清中学2025学年第二学期生物学科3月练习卷 一、选择题(本大题共25小题，每小题2分，共50分，每题只有一个最佳答案) 1. 下列关于无菌操作的叙述正确的是（　　） A. 接种时超净工作台内同时打开紫外灯和过滤风 B 用平板划线法接种时，如果有四个划线区域，则接种环一共要灼烧五次 C. 用脱脂棉制成的棉塞塞住试管口，用牛皮纸包扎，放入灭菌锅内灭菌 D. 利用微生物发酵生产青霉素时不需要无菌操作 【答案】B 【解析】 【详解】A、紫外线对人体有害，超净工作台仅在接种前打开紫外灯消毒，接种时需要关闭紫外灯，只打开过滤风，不能同时开启紫外灯，A错误； B、平板划线法中，接种前需要灼烧1次接种环杀灭杂菌；每次划线结束后都需要灼烧接种环，防止残留菌种污染，4个划线区域划线后共需要灼烧4次，总计灼烧1+4=5次，B正确； C、制作试管棉塞不能使用脱脂棉，脱脂棉吸水性强，灭菌后易受潮引发杂菌污染，需使用普通棉花制作棉塞，C错误； D、微生物发酵生产青霉素时必须进行无菌操作，避免杂菌竞争营养、产生杂质，影响产物的产量和纯度，D错误。 2. 养殖池中存在的有毒物质主要是氨及亚硝酸，这两种物质可由硝化细菌吸收利用。在“养殖池底泥中硝化细菌的分离和计数”实验中，下列说法正确的是（　　） A. 需要配制添加一定浓度氨盐的牛肉膏蛋白胨培养基，以筛选硝化细菌 B. 应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在酒精灯火焰旁进行 C. 采用平板划线法进行分离和计数时，还需与未接种的空白培养基同时培养 D. 若空白对照组上长出了菌落，需要在实验组数据的基础上减去空白对照组的菌落数 【答案】B 【解析】 【分析】1、微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养．在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 2、培养过程应该先将空白培养基培养观察是否长出菌落，若可以长出菌落，则培养基被污染，该培养基不能使用。 【详解】A、要分离硝化细菌，应该用以铵盐为唯一氮源的培养基，培养基中不能加入牛肉膏蛋白胨，A错误； B、获得纯净培养物的关键是防止外来杂菌污染，因此，应对采集底泥使用的工具进行灭菌，全部接种过程均需在火焰旁进行，B正确； C、对微生物进行计数时应该采用的接种方法是稀释涂布平板法，C错误； D、若空白对照组长出了菌落，说明培养基受到污染，该培养基不能再使用，所得数据也应舍弃，D错误。 故选B。 3. 某同学在稀释倍数为1×103倍培养液中对酵母菌进行血细胞计数板计数(规格为1mm×1mm×0.1mm)，如图是通过显微镜观察到的酵母菌培养液的结果图像。相关叙述正确的是（　　） A. 血细胞计数板常用于细菌、酵母菌等微生物的计数 B. 10mL该培养液中酵母菌总数约为6.5×107个 C. 滴入样液后轻轻振荡计数板，使酵母菌均匀分布 D. 在血细胞计数板上滴上菌液后盖上盖玻片 【答案】B 【解析】 【详解】A、血细胞计数板确实可用于酵母菌等较大微生物的计数，但细菌个体较小，通常用细菌计数板进行观察和计数，A错误； B、根据计数原则可知图中1个中方格内共26个酵母菌，计数室共25个中格，且题中并未对培养液再稀释，故计算时不再乘以稀释倍数，故10mL该培养液中酵母菌总数=26×25÷(0.1×10 −3)×10=6.5×107个，B正确； C、正确操作是取样前需要振荡摇匀，滴加时先将盖玻片盖在计数室上，再将培养液从边缘滴入，让其自行渗入，避免振荡导致液体溢出或分布不均，C错误； D、应先盖盖玻片，再滴加样液，避免产生气泡或液体过多，D错误。 4. 采用涂布法从土壤中分离得到农杆菌，下列有关叙述错误的是（ ） A. 将土样加到经G6玻璃砂漏斗过滤的蒸馏水中制成土壤样液 B. 倍数稀释土壤样液时，可使用移液管并尽量只取悬液 C. 制备平面培养基时先高压蒸汽灭菌，后倒入培养皿形成平面 D. 保存菌种的做法是将单菌落接种在空白斜面后立刻置于4℃冰箱中 【答案】D 【解析】 【分析】 采用涂布法从土壤中分离得到农杆菌，培养过程中应尽量避免杂菌污染，避免杂菌污染的手段包括培养基灭菌、接种环或涂布器灼烧、在酒精灯火焰旁接种等。 【详解】A、细菌不能通过G6玻璃砂漏斗，据此可得到无菌溶液，将土样加到经G6玻璃砂漏斗过滤的蒸馏水中制成土壤样液，不会受到杂菌污染，A正确； B、倍数稀释土壤样液时，可使用移液管并尽量只取悬液，避免土壤颗粒的影响，B正确； C、制备平面培养基时先高压蒸汽灭菌，避免杂菌污染，后倒入培养皿，冷却后形成平面，C正确； D、保存菌种的做法是将单菌落接种在空白斜面后，37℃培养24h后，再置于4℃冰箱中，D错误。 故选D。 【点睛】 5. 酒和泡菜是人们喜爱的传统发酵食品，下列相关叙述错误的是（ ） A. 在发酵初期都要向发酵装置通入氧气用于增加菌种数量加快发酵速度 B. 在发酵过程中随着发酵产物的增加都会逐渐抑制发酵菌的活性 C. 随着发酵的进行，发酵液的pH都会逐渐下降，最终呈酸性 D. 酒和泡菜的制作过程中主要利用的微生物分别是酵母菌和乳酸菌 【答案】A 【解析】 【分析】1、泡菜制作的原理是乳酸菌发酵，制作的流程是原料的休整、洗涤、晾晒、切分等加工过程+泡菜盐水→加入调味料装坛→发酵→成品。 2、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。 【详解】A、泡菜发酵所需的菌种是乳酸菌，乳酸菌是厌氧生物，不能通入氧气，A错误； BCD、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵产生酒精和二氧化碳，泡菜发酵所需菌种是乳酸菌，其产物乳酸，酒精和乳酸增加都会逐渐抑制发酵菌的活性，且随着发酵的进行，发酵液的pH都会逐渐下降，最终呈酸性，BCD正确。 故选A。 6. 甲、乙、丙、丁四个生物兴趣小组分别按如下流程进行科学探究活动： 甲：挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒 乙：植物组织→形成愈伤组织→长芽→生根→试管苗 丙：各种菜洗净并切成小块→加盐、糖及调味品→装入泡菜坛→发酵→成品 丁：剪碎动物组织→胰蛋白酶处理→细胞悬液→原代培养→传代培养 据此分析错误的是（ ） A. 甲组在发酵时打开排气口的间隔时间可逐渐延长 B. 乙组常用的培养基是LB半固体培养基 C. 丙组泡菜坛中可以加入陈泡菜水，其作用是提供经扩大培养的发酵菌种 D. 丁组由原代培养转到传代培养需用胰蛋白酶处理 【答案】B 【解析】 【分析】1、动物细胞培养的流程：取动物组织块（动物胚胎或幼龄动物的器官或组织）→剪碎→用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养瓶中进行原代培养→贴满瓶壁的细胞重新用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理分散成单个细胞继续传代培养。 2、植物组织培养的过程：离体的植物组织，器官或细胞（外植体）脱分化形成愈伤组织，愈伤组织再分化形成胚状体，进一步发育植株。 【详解】A、果酒发酵后期，由于营养物质减少等原因导致酵母菌数目下降，产生的二氧化碳减少，因此甲组在发酵时打开排气口的间隔时间可逐渐延长，A正确； B、植物组织培养常用的MS培养基属于固体培养基，B错误； C、加入“陈泡菜水”的作用是提供经扩大培养的发酵菌种，以加快发酵速度，C正确； D、原代培养转到传代培养需用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，以获得单个细胞扩大培养，D正确。 故选B。 7. 豆粕是大豆提取豆油后的一种副产品。为提高其利用价值，研究人员拟从发酵的豆粕中，筛选出能高效地将豆粕蛋白质转化为有机酸的乳酸菌菌株，乳酸菌产生的乳酸能溶解碳酸钙，过程如下： 步骤1：乳酸菌的富集 将发酵豆粕接种于添加了放线菌酮的液体培养基。 步骤2：纯化与鉴定 取一定量的富集菌液，进行梯度稀释，接种于添加了碳酸钙的培养基，挑选单菌落纯化培养并鉴定菌种。 步骤3：探究不同添加物对菌种发酵效果的影响 下列分析正确的是（ ） A. 步骤1添加放线菌酮的目的是抑制细菌生长 B. 步骤1适用划线接种，步骤2适用涂布接种 C. 步骤2通过观察溶钙圈的大小挑选目标菌落 D. 步骤3培养基中的碳源和氮源全部来自豆粕 【答案】C 【解析】 【分析】1、培养基的基本成分包括水、无机盐、碳源和氮源，此外还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 2、选择培养基是在培养基中加入相应的特殊营养物质或化学物质，抑制不需要的微生物的生长，有利于所需微生物的生长。 【详解】A、乳酸菌也是细菌，所以添加放线菌酮的目的肯定不是抑制细菌生长，而是促进乳酸菌的生长，A错误； B、步骤1中培养基是液体培养基，不能用划线接种，步骤2适用涂布接种，B错误； C、碳酸钙圈越大，说明产生的乳酸越多，步骤2可以根据碳酸钙圈的大小来选择目标菌落，C正确； D、步骤3用不同的添加物来发酵，所以碳源和氮源可以来自不同的添加物，当然主要来自于豆粕，但是不能说全部，D错误。 故选C。 阅读下列材料完成下面两小题： 2023年9月，某咖啡和某白酒联合推出的“酱香拿铁”火爆出圈。经检测，这款咖啡的酒精含量约为0.02%。近年来，以大面积砍伐森林用于种植咖啡树为代价，换取了全球咖啡产量的持续上升。芬兰国家技术研究中心近期利用“细胞农业”技术(即通过细胞扩大培养形成产物)，成功培育出第一杯“人造咖啡”。 8. 据了解，该白酒酿造过程中使用60℃以上高温制曲，检测发现酿造环境中有1946种微生物，其中细菌1063种、酵母菌与丝状真菌883种。下列叙述正确的是（　　） A. 过度饮酒有害健康，主要原因是酿酒环境中的微生物大多数对人体有害 B. 用60℃以上高温制曲，主要目的是对发酵原料进行灭菌处理 C. 该酿造的产物白酒可以用溴麝香草酚蓝水溶液进行检测 D. 该白酒具有的独特香味与发酵微生物的代谢特点和种间关系密切相关 9. 已知“人造咖啡”中含有咖啡因、单宁酸等植物基本生命活动的非必需物质，与普通咖啡几乎没有区别。下列关于利用“细胞农业”技术培育出“人造咖啡”的叙述，错误的是（　　） A. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”的原理是植物细胞具有全能性 B. 利用“细胞农业”技术培育“人造咖啡”，可减少对森林的大面积砍伐 C. “人造咖啡”的生产过程中可采用液体悬浮培养，以增加其产量 D. “人造咖啡”中的咖啡因与单宁酸属于植物细胞的次生代谢产物 【答案】8. D 9. A 【解析】 【8题详解】 A、过度饮酒有害健康的核心原因是酒精本身对人体肝脏、中枢神经等具有毒害作用，A错误； B、60℃以上高温制曲的目的是杀死不耐热的杂菌，保留酿酒所需的功能微生物，若彻底灭菌会杀死所有微生物，无法进行发酵，B错误； C、溴麝香草酚蓝水溶液是用来检测CO2​的，酒精需要用酸性重铬酸钾溶液检测，C错误； D、白酒的独特香味来源于多种微生物的代谢产物，不同微生物的代谢特点、种间相互作用都会影响香味物质的种类和含量，因此与二者密切相关，D正确。 【9题详解】 A、植物细胞全能性是指已分化细胞能发育为完整个体或分化成其他各种细胞的特性，该技术仅需要扩增咖啡细胞获得代谢产物，不需要发育为完整植株，原理不是植物细胞全能性，A错误； B、传统咖啡种植需要砍伐森林种植咖啡树，该技术不需要大规模种植植株，可减少森林砍伐，B正确； C、植物细胞液体悬浮培养可以大规模扩增细胞，提高产物产量，适合工业化生产，C正确； D、咖啡因、单宁酸是植物生命活动非必需的代谢产物，属于植物次生代谢产物，D正确。 10. 病毒感染果蔬后，会借助胞间连丝等结构扩散，导致果蔬产量和品质退化。通过植物组织培养技术，利用茎尖可以快速培育出脱毒苗。下列有关叙述正确的是（　　） A. 配制MS固体培养基时，经高压蒸汽灭菌后再调pH B. 植株茎尖细胞中不含病毒的原因可能是该组织胞间连丝不发达 C. 切取的植株茎尖用75%的酒精消毒后，需放在清水中反复清洗 D. 脱毒苗培育是否成功，最终还需要通过接种病毒进行个体水平的检测 【答案】B 【解析】 【详解】A、配制MS固体培养基时，需要先调节pH，再进行高压蒸汽灭菌，若灭菌后调pH会引入杂菌污染，A错误； B、题干说明病毒需要借助胞间连丝在植物体内扩散，茎尖分生组织分裂旺盛，胞间连丝不发达，病毒难以扩散至此，因此茎尖细胞一般不含病毒，表述合理，B正确； C、植物组织培养需要保证无菌环境，茎尖经70%酒精消毒30s后，然后立即用无菌水清洗2到3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2到3次，C错误； D、通过植物组织培养技术培育脱毒苗，是用茎尖等没有被病毒感染的组织培养植株，可以提高产量，其基因并没有改变，所以不可能有抗病毒的性状，脱毒苗培育是否成功，不需要通过接种病毒进行个体水平的检测，D错误。 11. 植物组织培养在植物生产领域有着广泛的应用。下列叙述错误的是（ ） A. 初代培养物培养至一定时间可进行继代培养 B. 从植物生长点取外植体进行组培可获得脱毒植株 C. 生产人工种子的体细胞胚一定是由愈伤组织分化而来 D. 利用发酵罐大规模培养植物细胞可用于细胞代谢产物的生产 【答案】C 【解析】 【分析】植物的组织培养是利用植物细胞具有全能性原理，使植物组织在离体培养的条件下，通过细胞的脱分化和再分化，快速发育成一株完整的植物的高新技术手段。 【详解】A、试管苗在初代培养一段时间后营养物质消耗殆尽，代谢废物积累，因而需要继代培养，A正确； B、植物生长点不易感染病毒，从植物生长点取外植体进行组培可获得脱毒植株，B正确； C、生产人工种子体细胞胚不一定都是由愈伤组织分化而来，如外植体上直接分化出胚状体，C错误； D、利用发酵罐大规模培养植物细胞可在愈伤组织中获取细胞产物，D正确。 故选C。 12. 不同抑菌剂在铁皮石斛开放组培中抑菌效果如表所示。其中培养基X的主要成分为：MS+2.5mg/L6-BA+0.25mg/L NAA+30g/L蔗糖+7g/L琼脂。下列叙述正确的是（ ） 编号 培养基成分 是否灭菌 成活率% 增殖系数 甲 培养基X+植培灵 否 100 2.32 乙 培养基X+清菌易 否 70 0.92 丙 培养基X+植培灵+链霉素 否 92 1.96 丁 培养基X+清菌易+链霉素 否 22 0.40 戊 培养基X 是 100 1.30 注：成活率=（成活苗数/外植体数）×100%；增殖系数=不定芽数/外植体数。 A. 培养基X为铁皮石斛的生根诱导培养基 B. 单独添加植培灵会提高铁皮石斛的成活率 C. 植培灵和链霉素的组合会促进铁皮石斛的生根 D. 清菌易和链霉素的组合会抑制铁皮石斛的增殖 【答案】D 【解析】 【分析】可通过成活率抑菌效果，其中经过灭菌组作为对照。 【详解】A、培养基X中NAA较低，6-BA较高，该培养基为铁皮石斛的出芽诱导培养基，A错误； B、因为没有培养基X且不灭菌的对照组，故不能判断单独添加植培灵会提高铁皮石斛的成活率，B错误； C、植培灵和链霉素的组合，其基础培养基中NAA较低，6-BA较高，会促进铁皮石斛的出芽，不能判断生根情况，C错误； D、清菌易和链霉素的组合增殖系数为0.4，其会抑制铁皮石斛的增殖，D正确。 故选D。 13. 植物利用硝酸盐需要硝酸还原酶，现有两种烟草硝酸还原酶缺失突变体，为探究两种突变体的突变是否在同一基因位点上，研究人员将两种突变体进行植物体细胞杂交。下列分析正确的是（　　） A. 两种突变体均不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长 B. 诱导两种突变体进行植物体细胞杂交时应先用胶原蛋白酶酶解得到原生质体 C. 细胞膜融合是细胞融合完成的标志 D. 若杂种细胞能在硝酸盐培养基上正常生长，说明两种突变体的突变位点相同 【答案】A 【解析】 【详解】A、两种突变体均为硝酸还原酶缺失突变体，无法利用硝酸盐，因此都不能在以硝酸盐作为唯一氮源的培养基上生长，A正确； B、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，获取原生质体需要用纤维素酶和果胶酶降解细胞壁，B错误； C、植物体细胞杂交中，杂种细胞再生出细胞壁才是细胞融合完成的标志，C错误； D、若两种突变体突变位点不同，两种突变体的正常功能基因可互补，杂种细胞能合成有活性的硝酸还原酶，可在硝酸盐培养基上生长；若突变位点相同，杂种细胞仍无正常功能基因，不能生长。因此杂种细胞能正常生长说明两种突变体的突变位点不同，D错误。 14. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（　　） A. 用自然生长的茎进行组培消毒时，要兼顾消毒效果和植物的耐受性 B. 培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外气体交换 C. 诱导形成试管苗后，打开封口膜或瓶盖后，直接将试管苗移栽入土 D. 不带叶片的菊花幼茎切段通过体细胞胚发生的途径形成完整的菊花植株 【答案】A 【解析】 【详解】A、对自然生长的外植体消毒时，消毒剂既会杀灭杂菌也会对植物细胞产生毒害，因此需要控制消毒剂的浓度和处理时间，兼顾消毒效果和植物的耐受能力，A正确； B、培养瓶封口膜的作用是阻挡杂菌侵入，同时允许瓶内外进行气体交换，满足植物细胞呼吸对氧气的需求，不会阻止气体交换，B错误； C、诱导得到试管苗后，不能直接移栽入土，需要先打开封口膜炼苗，让试管苗适应外界环境，洗净根部残留的培养基后再移栽，C错误； D、菊花茎段组织培养一般通过器官发生途径（脱分化形成愈伤组织，再分化出根、芽形成完整植株）获得完整植株，不是体细胞胚发生途径，D错误。 15. 科研人员利用天山雪莲的叶肉细胞进行植物组织培养，获得了大量的优质组培苗（如图）。下列叙述正确的是（ ） A. 该技术的原理是基因的选择性表达 B. 用酒精或次氯酸钠对外植体进行灭菌 C. 过程①一般不需要进行光照处理 D. 过程②③所用激素的种类和比例相同 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养是一种无性繁殖技术，通过从植物体分离出所需的组织、器官或细胞，在无菌条件下接种在含有营养物质及植物激素的培养基上进行培养，获得再生的完整植株或生产具有经济价值的其他产品。该技术主要包括脱分化产生愈伤组织，再分化形成再生植物。 【详解】A、植物组织培养技术的原理是细胞的全能性，A错误； B、用酒精或次氯酸钠对外植体进行消毒，B错误； C、为防止遇光形成维管组织，因此①脱分化一般要避光处理，C正确； D、由于生长素促进生根，细胞分裂素促进生芽，因此过程②③所用激素的比例不相同，D错误。 故选C。 16. 下列有关高等植物原生质体制备和培养的叙述，正确的是（　　） A. 对原生质体活力检查可观察其能否发生质壁分离 B. 加入0.5~0.6mol/L甘露醇的目的是保护纤维素酶和果胶酶 C. 从不同植物组织分离得到的原生质体大小、形状相同 D. 纤维素酶和果胶酶混合液可用于制备悬浮培养细胞的原生质体 【答案】D 【解析】 【详解】A、原生质体是去除植物细胞壁后获得的结构，没有细胞壁无法发生质壁分离，因此不能用质壁分离检验原生质体活力，A错误； B、制备原生质体时加入该浓度甘露醇的目的是维持外界渗透压，防止原生质体吸水涨破，B错误； C、不同植物组织的细胞本身大小、形态存在差异，因此分离得到的原生质体大小、形状并不相同，C错误； D、高等植物细胞壁的主要成分为纤维素和果胶，根据酶的专一性，纤维素酶和果胶酶混合液可水解细胞壁，获得原生质体，D正确。 17. 我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名1型糖尿病（T1DM）患者体内，具体流程如图所示。下列分析错误的是（ ） A. 从患者体内抽取脂肪组织可用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理成单个细胞 B. 在诱导形成CiPSCs的过程中，需精确控制培养基的成分 C. CiPSCs能够被诱导成胰岛细胞依赖于细胞的全能性 D. 该技术的成功有利于患者摆脱对外源胰岛素的依赖 【答案】C 【解析】 【分析】在正常情况下，胰岛B细胞对血糖水平的变化非常敏感，能够根据血糖水平的高低调节胰岛素的分泌。当血糖水平升高时，胰岛B细胞会增加胰岛素的分泌，帮助降低血糖水平；反之，当血糖水平降低时，则减少胰岛素的分泌，以避免低血糖。细胞凋亡指为维持内环境稳定，由基因控制的细胞自主的有序的死亡。 【详解】A、脂肪组织要经过胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分散成单个细胞，A正确； B、在诱导形成CiPSCs的过程中，需精确控制培养基的成分，B正确； C、CiPSCs能够被诱导成胰岛细胞属于细胞分化，依赖于基因的选择性表达，C错误； D、因为该技术将分化产生的胰岛细胞移植回患者体内，使其能正常分泌胰岛素，因此有利于患者摆脱对外源胰岛素的依赖，D正确。 故选C。 18. 动物细胞培养是动物细胞工程的基础。下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ） A. 液体培养基中的动物血清需过滤灭菌 B. 定期更换培养液可以防止细胞代谢产生有毒物质危害细胞 C. 在二氧化碳培养箱中进行原代培养和传代培养 D. 动物细胞培养体现了动物细胞核的全能性 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞培养过程：取动物胚胎或幼龄动物组织→剪碎组织→蛋白酶处理分散成单个细胞→制成细胞悬液→转入培养液中（原代培养）→放入二氧化碳培养箱培养→贴满瓶壁的细胞用酶分散为单个细胞，制成细胞悬液→转入培养液（传代培养）→放入二氧化碳培养箱培养（95%空气和5%的CO2）。 【详解】A、动物血清可为动物细胞提供生长因子等物质，培养过程中需要经过过滤灭菌，以保持无菌环境，A正确； B、定期更换培养液可以防止代谢产物的积累对细胞造成危害，B正确； C、在二氧化碳培养箱中进行原代培养和传代培养，两者的主要区别在于是否分瓶培养，C正确； D、动物细胞培养得到的是多个动物细胞，该过程没有得到完整的动物个体，不能体现动物细胞核的全能性，D错误。 故选D。 19. 将黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞(图标号①)注射到白色小鼠囊胚腔中，接受注射的囊胚发育为黑白相间的小鼠(Mc)。部分过程的示意图如图，图中标号表示结构或过程。下列叙述错误的是（　　） A. ①经分裂、分化后能形成Mc的多种组织 B. ③进行体外胚胎干细胞培养可直接获得Mc C. ④将发育成绒毛膜和胎盘的一部分 D. ⑤过程需对代孕小鼠进行同期发情处理 【答案】B 【解析】 【详解】A、①为黑色小鼠囊胚的内细胞团部分细胞，内细胞团细胞经分裂分化后能形成Mc的多种组织，A正确； B、③为内细胞团，在体外可培养获得胚胎干细胞，但要培养成黑白相间的小鼠（Mc），需要进行胚胎移植才能发育成Mc，B错误； C、④为滋养层细胞，将来发育成胎膜（主要由绒毛膜和羊膜组成）和胎盘，C正确； D、⑤过程为胚胎移植，进行胚胎移植前需对代孕小鼠进行同期发情处理，让供体、受体处于相同的生理状态，D正确。 20. 中科院动物所和大熊猫研究中心合作，通过将大熊猫的细胞核植入去核的兔子的卵细胞中，在世界上最早克隆出一批大熊猫早期胚胎，表明我国大熊猫繁殖研究再次走在世界前列。下列叙述错误的是（　　） A. 若选用胚胎细胞核移植，成功率将明显高于体细胞核移植 B. 上述事例说明异种生物的细胞质也能调控细胞核基因的表达 C. 可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合 D. 选用兔子的卵母细胞是因为比大熊猫的卵母细胞实验成功率高 【答案】D 【解析】 【分析】动物细胞核移植技术是将动物一个细胞的细胞核移入去核的卵母细胞中，使这个重新组合的细胞发育成新胚胎，继而发育成动物个体的技术。由于动物胚胎细胞分化程度低，表现全能性相对容易，而动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难，因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核移植。 【详解】A、胚胎细胞的分化程度低，表现全能性相对容易，故用胚胎细胞核移植的成功率要远高于体细胞核移植，A正确； B、用大熊猫的细胞核植入去核的兔子卵母细胞中，在世界上最早克隆出大熊猫的早期胚胎，说明异种生物的细胞质也能调控细胞核基因的表达，B正确； C、可采用电融合法使供体细胞和去核卵母细胞融合，形成重构胚，C正确； D、将大熊猫的细胞核植入去核的兔子卵母细胞中，而不是大熊猫的卵母细胞中，是因为兔子的卵母细胞更容易大量获得，D错误。 故选D。 21. 如图为细胞融合的简略过程，下列说法正确的是（　　） A. 若细胞a、b分别取自优良奶牛，则受精形成的受精卵需培养至原肠胚后移植 B. 若细胞a、b分别代表白菜、甘蓝细胞，则获得的杂种植株都能表现双亲的优良性状 C. 若细胞d是杂交瘤细胞，则在选择性培养基中筛选后即可大规模培养生产单抗 D. 动物细胞融合过程常用物理诱导因素电脉冲融合、激光融合等技术进行促融处理 【答案】D 【解析】 【详解】A、胚胎移植的时期是囊胚或桑葚胚，A错误； B、由于基因的选择性表达和基因间的互作效应，获得的杂种植株不一定能够表现亲本的优良性状，B错误； C、单克隆抗体的制备过程中需要进行两次筛选，第一次选择性培养基筛选得到的是杂交瘤细胞，第二次抗原抗体杂交筛选得到的杂交瘤细胞才能大规模培养生产单抗，C错误； D、动物细胞融合的诱导方法包括物理法、化学法、生物法，其中物理诱导法包括电脉冲、激光融合等，D正确。 22. 某团队通过多代细胞培养，将小鼠胚胎干细胞的Y染色体去除，获得XO胚胎干细胞，再经过一系列处理，使之转变为有功能的卵母细胞。下列有关叙述错误的是（ ） A. 营养供应充足时，传代培养的胚胎干细胞不会发生接触抑制 B. 获得XO胚胎干细胞的过程发生了染色体数目变异 C. XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化 D. 若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法获得有功能的卵母细胞用于繁育 【答案】A 【解析】 【分析】动物细胞培养需要满足以下条件： （1）充足的营养供给—微量元素、无机盐、糖类、氨基酸、促生长因子、血清等。 （2）适宜的温度：36.5℃±0.5℃；适宜的pH：7.2～7.4。 （3）无菌、无毒的环境：培养液应进行无菌处理。通常还要在培养液中添加一定量的抗生素，以防培养过程中的污染。此外，应定期更换培养液，防止代谢产物积累对细胞自身造成危害。 （4）气体环境：95%空气+5%CO2．O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH。 【详解】A、营养供应充足时，传代培养胚胎干细胞也会发生接触抑制，A错误； B、XO胚胎干细胞中丢失了Y染色体，因而该细胞的获得过程发生了染色体数目变异，B正确； C、XO胚胎干细胞转变为有功能的卵母细胞的过程发生了细胞分化，即细胞的功能发生了特化，因而发生了细胞分化，C正确； D、若某濒危哺乳动物仅存雄性个体，可用该法，即获得有功能的卵母细胞，进而用于繁育，实现濒危物种的保护，D正确。 故选A。 23. 研究者在哺乳动物胚胎的2细胞期对细胞进行标记，追踪到囊胚阶段，发现大多数内细胞团细胞主要来源于2细胞阶段中的一个细胞，即在胚胎发育的早期阶段，细胞的命运已经开始表现出显著的不均衡性。相关叙述正确的是（　　） A. 遗传物质的差异影响了2个细胞的命运 B. 滋养层的细胞可用于胚胎的性别鉴定 C. 内细胞团发育为胚胎的大部分和胎盘的一部分 D. 此研究说明胚胎分割在受精卵时进行效果最好 【答案】B 【解析】 【分析】内细胞团的细胞是胚胎干细胞，是一种未分化的细胞，具有发育全能性，将来发育成胎儿的各种组织。滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘。所以做基因诊断时，通常取少量滋养层细胞诊断是否患有遗传病，这样不会影响胎儿发育。 【详解】A、哺乳动物胚胎的2细胞是由一个受精卵分裂形成的，因此这2个细胞的遗传物质是相同的，A错误； B、滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，滋养层的细胞可用于胚胎的性别鉴定，这样不会影响胎儿发育，B正确； C、内细胞团将来发育成胎儿的各种组织，滋养层细胞将来发育成胎膜和胎盘，C错误； D、此研究主要说明了在胚胎发育的早期阶段，细胞的命运已经开始表现出显著的不均衡性，并不能直接说明胚胎分割在受精卵时进行效果最好，胚胎分割的最佳时期通常是在囊胚期，此时细胞已经开始分化但尚未形成明显的组织和器官，分割后容易恢复和发育，D错误。 故选B。 24. 下列有关质粒的叙述，正确的是（　　） A. 质粒是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子 B. 质粒是广泛存在于细菌细胞中的一种颗粒状细胞器 C. 质粒的受体细胞都是细菌 D. 在进行基因工程操作中，被用作载体的质粒都是天然质粒 【答案】A 【解析】 【分析】1、常用的运载体：质粒、噬菌体的衍生物、动植物病毒。（质粒是一种裸露的、结构简单、独立于细菌拟核DNA之外并具有自我复制能力的双链环状DNA分子。） 2、作为运载体必须具备的条件：①能在受体细胞中复制并稳定保存； ②具有一至多个限制酶切点，供外源DNA片段插入；③具有标记基因，供重组DNA的鉴定和选择；④是安全的，对受体细胞无害，而且要易从供体细胞分离出来。 3、天然的质粒不能直接作为载体，基因工程中用到的质粒都是在天然质粒的基础上进行过人工改造的。 【详解】A、质粒的化学本质是DNA，是细菌细胞质中能自主复制的小型环状DNA分子，A正确； B、质粒是存在于细菌中的一种环状DNA分子，不是细胞器，B错误； C、质粒的受体细胞可以是细菌，也可以是动物细胞和植物细胞，C错误； D、天然的质粒需要经过改造后才可作为基因工程的运载体，D错误。 故选A。 25. 2个来源不同的DNA片段A、B、A片段用限制酶SpeⅠ进行切割，B片段用限制酶XbaI进行切割，两种限制酶的识别序列和切割位点如图所示，产生的片段相连接形成重组DNA。若用限制酶SpeⅠ、限制酶XbaⅠ分别对重组DNA进行切割，结果是（　　） A. 两种限制酶都能识别重组DNA并将其切割成片段 B. 只有限制酶SpeI能识别重组DNA并将其切割成片段 C. 只有限制酶XbaI能识别重组DNA并将其切割成片段 D. 两种限制酶都不能识别重组DNA，故不能将其切割成片段 【答案】D 【解析】 【分析】1、限制酶：能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂。 2、DNA连接酶：连接的是两个核苷酸之间的磷酸二酯键。 【详解】限制酶的识别序列有4个、6个或8个核苷酸组成，大多数限制酶识别的序列是由6个，根据题意可知，A片段用限制酶SpeⅠ进行切割，B片段用限制酶XbaI进行切割，由图可知，经Spe I和Xba I切割出的DNA片段，具有相同的黏性末端，所以可形成重组DNA分子，重组后的DNA分子没有这两种酶的酶切识别位点，所以两种限制酶都不能识别重组DNA，故不能将其切割成片段，ABC错误，D正确。 故选D。 二、非选择题(本题共5小题，共50分) 26. 多环芳烃（PAHs）是一种不溶于水的有机物，在培养基中以微小的颗粒状存在，PAHs在土壤中的降解速率很慢，并具有致癌和致畸作用。科研人员欲从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，进行如图所示的实验（培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈）。回答下列问题： （1）从培养功能角度分析，培养基甲属于_____；培养基通常需要提前在121℃下进行_____。 （2）将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是_____，该方法不仅适用于筛选某种菌株，还可用于_____。 （3）筛选PAHs降解菌实验时，过程③所需要的实验工具有_____（答出两种）。过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值_____（填“最小”或“最大”）的。 （4）在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液样品中细菌数为_____个。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，所统计的细菌数通常会比上述方法统计数目偏_____（填“大”或“小”），原因是_____。 【答案】（1） ①. 选择培养基 ②. 高压蒸汽灭菌 （2） ①. 稀释涂布平板法 ②. 微生物的计数 （3） ①. 微量移液器、涂布器 ②. 最大 （4） ①. 5.2×108 ②. 大 ③. 统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和 【解析】 【分析】图示表示科研人员从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株的主要步骤，培养基中加入多环芳烃（PAHs）作为唯一碳源，目的是筛选出高效降解PAHs的菌株。 【小问1详解】 该实验的目的是从被PAHs污染的土壤中分离出高效降解PAHs的菌株，所以从培养功能角度分析，培养基甲属于选择培养基；培养基通常需要提前在121℃下进行高压蒸汽灭菌。 【小问2详解】 从培养基乙呈现的效果图可知：将培养基甲中的目的菌接种到培养基乙中的方法是稀释涂布平板法，该方法还可用于微生物的计数。 【小问3详解】 筛选PAHs降解菌实验时，过程③采用稀释涂布平板法对目的菌进行接种，需要用微量移液器取0.1mL菌液，滴加到培养基表面，然后用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。培养基乙中PAHs被降解后会形成透明圈，透明圈直径与菌落直径比值越大，降解PAHs的效果越好，因此过程④挑选的单菌落应该是透明圈直径与菌落直径比值最大的。 【小问4详解】 在5个平板上各接种稀释倍数为103的菌液样品0.1 mL，培养一段时间后，平板上的菌落数分别为48、50、54、56、52，则每升原菌液样品中细菌数为（48＋50＋54＋56＋52）÷5×103÷0.1 ×103＝5.2×108个。由于两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以稀释涂布平板法统计的细菌数通常会比实际数目偏小。如果用显微镜直接计数法对细菌进行计数，由于统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和，所以统计的细菌数通常会比上述方法统计数目偏大。 27. 人乳头状瘤病毒（HPV）与宫颈癌的发生密切相关，抗HPV的单克隆抗体可以准确检测出HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。如图是以HPV衣壳蛋白为抗原制备出单克隆抗体的过程，请据图回答： （1）图中向小鼠注射的A是_____。与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是_____。 （2）图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，该细胞有_______的特点。筛选②需要进行________和________。 （3）从图中可以看出，单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞工程中的_________和_________两大技术。对应的原理分别是________、_________。 （4）单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而且绝不攻击任何正常细胞，故称为“生物导弹”，这体现了单克隆抗体的优点是________。 【答案】（1） ①. HPV衣壳蛋白 ②. 灭活病毒诱导法 （2） ①. 既能迅速大量增殖，又能产生抗体  ②. 克隆化培养 ③. 抗体检测  （3） ①. 动物细胞培养 ②. 动物细胞融合 ③. 细胞增殖 ④. 细胞膜的流动性 （4）能准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合（特异性强、灵敏度高）  【解析】 【分析】单克隆抗体制备流程：对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应，从脾脏中获得相应的B淋巴细胞；将小鼠骨髓瘤细胞与已免疫的B淋巴细胞诱导融合；（筛选①）再用特定的选择性培养基进行筛选，只有融合的杂种细胞才能生长；（筛选②）对上述杂种细胞进行克隆化培养和抗体检测，获得能产生专一抗体的杂交瘤细胞；将杂交瘤细胞在体外大规模培养或注射到小鼠腹腔内增殖，最终获得单克隆抗体。 【小问1详解】 为了使小鼠产生分泌抗HPV抗体的B淋巴细胞，图中向小鼠注射的A是HPV衣壳蛋白，诱导植物原生质体融合的方法有物理法（离心、振动、电激等）和化学法（聚乙二醇等）；诱导动物细胞融合的方法有物理法、化学法和生物法（灭活的病毒）。所以与诱导植物原生质体融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活的病毒诱导。 【小问2详解】 图中选用B淋巴细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，杂交瘤细胞既有瘤细胞的特征又有B淋巴细胞的特征，即既能迅速大量增殖，又能产生抗体。筛选②需要进行克隆化培养和抗体检测，从而筛选出足够数量的能分泌抗HPV抗体的杂交瘤细胞。 【小问3详解】 单克隆抗体的制备过程运用了动物细胞培养和动物细胞融合两大技术。动物细胞融合的原理是细胞膜的流动性，因为在融合过程中，细胞的膜结构发生了融合等变化；动物细胞培养的原理是细胞增殖，通过细胞的不断分裂来实现细胞数量的增加和细胞的培养。 【小问4详解】 单克隆抗体注入体内后可以自动追踪抗原（病原体或癌变细胞等）并与之结合，而且绝不攻击任何正常细胞，这体现了单克隆抗体特异性强的优点，即它能够准确地识别抗原的细微差异，与特定抗原发生特异性结合（特异性强、灵敏度高）。 28. 随着生物科学技术的发展，动物的生殖方式变得越来越多样化。如图是胚胎工程技术研究及应用的相关情况，供体1是良种荷斯坦高产奶牛，供体2是健康的黄牛，请据图分析并回答下列问题。 （1）图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的有应用___________(填数字)。 （2）应用1中，为了大量获取细胞B，需对供体2注射___________，使用___________技术获得重组细胞，最终获得的良种小牛性别为___________。 （3）供体1完成体内受精的场所在___________。在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行处理，使其___________，胚胎移植前需要对受体进行___________处理。 （4）应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过___________技术获得二分胚①和②，操作时需要注意___________，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育。 【答案】（1）1、3 （2） ①. 促性腺激素 ②. 体细胞核移植 ③. 雌性 （3） ①. 输卵管 ②. 获能 ③. 同期发情 （4） ①. 胚胎分割 ②. 将内细胞团进行均等分割 【解析】 【小问1详解】 应用1采用了核移植技术，形成克隆动物，属于无性生殖；应用2采用体外受精、早期胚胎培养和胚胎移植技术，形成的是试管动物，属于有性生殖；应用4表示从早期胚胎或原始性腺中提取胚胎干细胞；应用3采用了胚胎分割技术，属于无性生殖，故图中产生小牛的几个途径中，属于无性繁殖途径的为应用1、3。 【小问2详解】 应用1中，为了大量获取细胞B，即卵母细胞，需要对供体2注射促性腺激素，使其超数排卵，使用动物体细胞核移植技术获得重组细胞，由于供体1是良种荷斯坦高产奶牛，其提供细胞核，所以最终获得的良种小牛为雌性。 【小问3详解】 供体1完成体内受精的场所发生在输卵管内，在应用2、3、4中，若要使精子和卵母细胞在体外成功结合，需要对精子进行获能处理，因为获能后的精子才具备与卵细胞受精的能力，应用2过程中得到的胚胎应该移植到和供体同种的、生理状态相同的雌性动物体内，因此受体雌性动物需要经过同期发情处理。 【小问4详解】 应用3可解决良种动物快速大量繁殖的问题：对囊胚阶段的胚胎通过胚胎分割技术获得二分胚①和②，对囊胚阶段的胚胎进行分割时需要将内细胞团进行均等分割，否则会影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，若要进行性别鉴定，取滋养层细胞进行。 29. 三叶青是我国珍稀的药用植物，主要以球形块根入药，块根中的活性药用成分为黄酮等次生代谢产物。在自然环境下，三叶青块根生长缓慢且形成的年限较长，难以满足药材市场的需求。回答下列问题： （1）为快速生产三叶青黄酮，取三叶青腋芽作为___________接种到MS固体培养基，腋芽含有分生组织可不经___________过程，直接萌发成无菌苗。取无菌苗叶片置于MS培养基中诱导形成愈伤组织。与野生植株组织相比，选择无菌苗组织作为愈伤组织的诱导材料，可以减少___________过程对诱导成功率的影响。对愈伤组织进行液体悬浮培养，获得产黄酮的___________。培养过程中发现，使用通气性差的封口膜可以提升黄酮的产量，可能是___________胁迫诱导细胞产生次生代谢产物。为进一步促进黄酮的合成并积累，也可改变培养基中___________诱导愈伤组织分化成___________进行器官培养。 （2）三叶青组织内存在植物内生菌，内生菌能影响植物的生长发育。为分离促进三叶青生长的内生菌，取三叶青块根经消毒后切割成小块置于马铃薯葡萄糖培养皿中。待菌丝体从三叶青块根切面长出后，对内生真菌进行鉴定。选取不同菌落菌丝接种到新的培养基倒置培养，通过观察___________等特征对内生真菌进行初步鉴定；也可进行振荡培养，获得大量菌液再进行分子鉴定。初步鉴定和获得菌液依次使用___________、___________(填物理状态)培养基。为确定分离获得的内生真菌对三叶青生长和黄酮生产的影响，将三叶青无菌幼苗接种至添加有___________的MS培养基进行培养，以三叶青植物___________(答出两点)作为参照对内生菌进行筛选用于后续研究。 【答案】（1） ①. 外植体    ②. 脱分化 ③. 消毒  ④. 细胞系 ⑤. 低氧 ⑥. 植物激素的（种类和）配比  ⑦. 块根    （2） ①. 菌落的形状、大小、颜色、边缘形态 ②. 固体 ③. 液体 ④. 内生菌发酵液  ⑤. 生长情况良好、黄酮产量高 【解析】 【小问1详解】 植物体的器官和组织、细胞都可以作为外植体，为快速生产三叶青黄酮，取三叶青腋芽作为外植体接种到MS固体培养基，由于腋芽中存在分生组织，故也可采用带腋芽茎段不通过脱分化为愈伤组织，而直接萌发成无菌苗。取无菌苗叶片置于MS培养基中诱导形成愈伤组织。与野生植株组织相比，选择无菌苗组织作为愈伤组织的诱导材料，可以减少消毒过程对诱导成功率的影响。对愈伤组织进行液体悬浮培养，获得产黄酮的细胞系。黄酮是细胞的次生代谢产物，故培养过程中发现，使用通气性差的封口膜可以提升黄酮的产量，可能是低氧胁迫诱导细胞产生次生代谢产物。植物组织培养过程中改变植物激素的（种类和）配比可以诱导愈伤组织出现不同的分化，故为进一步促进黄酮的合成并积累，也可改变培养基中植物激素的（种类和）配比诱导愈伤组织分化成块根进行器官培养。 【小问2详解】 鉴定不同种类的微生物可以观察不同微生物形成的菌落的形状、大小、颜色、边缘形态等特征对内生真菌进行初步鉴定；初步鉴定需要观察菌落形态等，需要固体培养基；获得菌液需要用液体培养基。为确定分离获得的内生真菌对三叶青生长和黄酮生产的影响，将三叶青无菌幼苗接种至添加有内生菌发酵液的MS培养基进行培养，以三叶青植物生长情况良好、黄酮产量高作为参照对内生菌进行筛选用于后续研究。 30. 中医治疗疾病多用复方，三白草和鱼腥草是同科不同属的两种常见药用植物，二者因疗效相近且具有叠加效应常被用作“药对”，在我国全年可采收两次。研究者欲利用原生质体融合技术将复方的配伍（两种或两种以上药物配合使用）提前到个体生长或生产过程，并实现有效成分的工厂化生产，具体操作如图1。 （1）取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其______（填“消毒”或“灭菌”），每次处理后用_______（填“蒸馏水”或“无菌水”）冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂，处理后的叶片撕去表皮，切成1mm薄片备用。 （2）过程①通过酶解法去除_______获取原生质体，并向三白草和鱼腥草细胞酶解液中分别加入红、绿荧光色素（带荧光色素的原生质体仍能融合和再生）。过程②利用化学诱导剂______诱导融合，随后在荧光显微镜下选择带_______的杂种原生质体。 （3）科研人员研究不同的原生质体密度对三白草和鱼腥草原生质体融合率的影响，结果如图2。 注：双核异核融合体指具有两个不同来源细胞核的细胞 由图2可知，双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在_______种类型的双核融合体，促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为_______。 （4）通常情况下，能增加免疫器官的重量表明该物质具有一定的增强免疫力的作用。为判断融合体对动物免疫力的影响，科研人员取同种小鼠30只，雌雄各半，随机均分为三组，实验处理如下表。 组别 A组 B组 C组（空白对照组） 实验处理 三白草和鱼腥草杂种愈伤组织的蒸馏水提取物 三白草和鱼腥草直接混合后的蒸馏水提取物 每天一次等量灌胃，连续一周，检测各组小鼠的胸腺重量 ①将表格中C组的实验处理补充完整_____。 ②若实验结果为______，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 【答案】（1） ①. 消毒 ②. 无菌水 （2） ①. 细胞壁 ②. PEG ③. 红、绿荧光色素 （3） ①. 2 ②. 1×106个·mL-1 （4） ①. 等量的蒸馏水 ②. A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组 【解析】 【分析】分析图可知，图1表示三白草和鱼腥草体细胞杂交过程，其中①为去除细胞壁，②为原生质体融合，③为脱分化形成愈伤组织，④为提取代谢产物。图2柱形图中，随着原生质体密度增大，双核异核融合体比例先升高后降低，其中在1×106个/mL-1时， 比例最高。 【小问1详解】 为防止微生物污染，应取鱼腥草和三白草充分展开的嫩叶片，用70%乙醇和2%的次氯酸钠对其消毒；为防止杂菌污染，每次处理后用无菌水冲洗叶片5次，去除残留于叶片上的药剂。 【小问2详解】 据图示可知，过程①通过酶解法去除细胞壁获取原生质体，需要用纤维素酶、果胶酶处理破坏细胞壁；过程②诱导植物细胞融合的方法有利用化学诱导剂PEG（聚乙二醇）诱导融合；由于三百草细胞酶解液中加入了红荧光色素，鱼腥草细胞酶解液中加入了绿荧光色素，所以杂种原生质体应该带红、绿荧光色素。 【小问3详解】 双核异核融合体的融合率不能达到100%，可推知该培养液中还存在2种类型的双核融合体（即三白草-三白草、鱼腥草-鱼腥草）；由图2柱形图可知，在密度为1×106个/mL时， 双核异核融合体比例最高，说明促进三白草和鱼腥草原生质体融合的最适密度为1×106个/mL。 【小问4详解】 ①本实验目的是判断融合体对动物免疫力的影响，因为C组为对照组，因此根据对A、B两组的处理，C组应用等量的蒸馏水每天一次等量灌胃，连续一周。 ②若实验结果为A、B两组的胸腺重量相同且都大于C组，则支持利用原生质体融合技术将复方的配伍提前并实现有效成分的工厂化生产。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $