课时跟踪检测(2) 纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得-【新课程学案】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程配套练习word（浙科版）

课时跟踪检测(二)　纯净的目标微生物可通过分离和纯化获得 一、选择题 1.平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是 (　　) A.不含氮源的平板不能用于微生物培养 B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 2.(2025·湖南高考)采集果园土壤进行微生物分离或计数。下列叙述正确的是 (　　) A.稀释涂布平板法和平板划线法都能用于尿素分解菌的分离和计数 B.完成平板划线后，培养时需增加一个未接种的平板作为对照 C.土壤中分离得到的醋酸菌能在无氧条件下将葡萄糖分解成乙酸 D.用于筛选尿素分解菌的培养基含有蛋白胨、尿素和无机盐等营养物质 3.为探究结核杆菌的耐药性，研究人员提取患者体内病原菌进行培养，如图1，过程Ⅰ接种纯化结果如图2，下列说法错误的是 (　　) A.固体平板培养使用的培养基属于鉴别培养基 B.图2中划线的顺序依次是①③② C.两个固体平板培养基中均需加入抗生素 D.过程Ⅲ得到的结核杆菌均具有耐药性 4.(2025·温州新力联盟联考)如图为“能分解尿素的微生物的分离与计数”的实验结果，下列叙述正确的是 (　　) A.图中采用平板划线法接种 B.图中①和②表示尿素培养基长出的菌落 C.图中③④培养基中菌落生长代谢时，会释放CO2 D.实验结果表明，自然界中能合成脲酶的微生物比例较高 5.(2025·黑吉辽蒙高考)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株，旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是 (　　) A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C.配制选择培养基时，需确保pH满足实验要求 D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 6.金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，可引起人肠炎等疾病，在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色。某研究小组要测定某地自来水中金黄色葡萄球菌的浓度，将自来水依次稀释成10-1、10-2、10-3、10-4四种稀释液。下列说法错误的是 (　　) A.配制培养基时应先调pH到中性偏碱后灭菌 B.该培养基能起到鉴别金黄色葡萄球菌菌落的作用 C.培养基中加入高浓度NaCl有利于金黄色葡萄球菌的筛选 D.若在10-3稀释液的3个血平板上(每个接种0.1 mL)，金黄色葡萄球菌菌落数分别为35、36和37，则每升自来水中的活菌数约为3.6×105个 7.莠去津是一种含氮的有机化合物，是一种广泛使用的除草剂，且在土壤中不易降解。为修复被其污染的土壤，某研究小组按下图选育能降解莠去津的细菌(目的菌)。已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明。下列说法错误的是 (　　) A.图中A~C均为以莠去津为唯一氮源的选择培养基 B.A~C培养的目的是增加目的菌的数量 C.本实验用到的固体培养基在接种前是不透明的 D.周围无透明圈的菌落即为目的菌落 8.(2025·浙江超级全能生联考)如图为某同学取1 mL培养液稀释100倍后，用血细胞计数板(1 mm×1 mm×0.1 mm)通过显微镜观察到的培养液中的 酵母菌在血细胞计数板中的分布情况。下列相关叙述错误的是 (　　) A.该培养液中酵母菌的数量为6×108个/mL B.选择图示乙规格的计数室，含25个中方格、400个小方格 C.一个血细胞计数板中央仅含有一个计数室 D.取样时滴管从静置的培养液底部吸取，会导致数据偏大 二、非选择题 9.自然界中的微生物往往是混杂生长的。人们在研究微生物时一般要将它们分离提纯，然后进行数量的测定。下面是有关土壤中分解尿素的细菌分离和计数的实验过程，请回答有关问题。 (1)为分离出土壤中分解尿素的细菌，应该用　　　　　　　　　　的培养基进行分离，这种培养基属于　　　　　　培养基(按功能分类)。可在培养基中加入　　　指示剂对该类微生物鉴别。  (2)若取土样6 g，应加入　　mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101~107不同浓度的土壤溶液。将103~107倍的稀释液分别吸取0.2 mL加入到固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为　　　　　　　　　。将接种的培养皿放置在37 ℃恒温培养箱中培养24 h~48 h，观察并统计菌落数，结果如表，其中　　　倍的稀释倍数比较合适，由此计算出每克土壤中的细菌数为　　　　　　。这种方法测定的菌落数往往比活菌的实际数目　　　(填“低”或“高”)。  稀释倍数 103 104 105 106 107 菌落数 /个 1号平板 478 367 277 26 5 2号平板 496 354 261 20 8 3号平板 509 332 254 29 3 (3)若研究尿素分解菌的群体生长规律，可采用平板划线法分离土壤中的尿素分解菌。操作时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次的末端开始划线。这样做的目的是　 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行显微计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为　　　　　个/mL。  课时跟踪检测(二) 1.选D　不含氮源的平板可用于固氮微生物的培养，A错误；平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，B错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；只有能合成脲酶的微生物才能分解尿素，利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。 2.选B　平板划线法仅用于分离纯化菌种，无法计数，A错误；平板划线法操作后需设置未接种的平板作为空白对照，以验证是否有杂菌污染，B正确；醋酸菌为严格好氧菌，其代谢需氧气，无氧条件下无法将葡萄糖转化为乙酸，C错误；筛选尿素分解菌的培养基应以尿素为唯一氮源，若含蛋白胨(含其他氮源)，则无法筛选目标菌，D错误。 3.选A　分析题图可知，过程Ⅰ是接种纯化，使用的培养基应属于选择培养基，A错误；根据图2中菌落分布的特点，划线次数越多，细菌数量越少，可以推导出划线的顺序依次是①③②，B正确；为了防止杂菌污染，确保分离到耐药性的结核杆菌，两个固体平板培养基中均需加入抗生素，C正确；经选择培养基筛选，得到的结核杆菌均具有耐药性，D正确。 4.选C　根据实验结果可知，图中采用的接种方法为稀释涂布平板法，A错误；图中①和②(稀释度较大)的菌落数明显多于③(稀释度较小)的菌落数，说明①和②中的培养基很可能是LB固体培养基，B错误；③④已经分离出单个细菌繁殖而来的尿素分解菌的菌落，尿素分解菌分泌脲酶，能够催化尿素分解成氨、CO2和水，C正确；根据实验结果判断自然界中能合成脲酶的微生物比例较低，D错误。 5.选D　该研究的目的是筛选出高耐受且降解金霉素能力强的菌株，可以以金霉素为唯一碳源制备选择培养基进行筛选，且逐步提高培养基中金霉素的浓度，有助于获得高耐受的菌株，A、B正确；微生物培养需要适宜的pH等，C正确；稀释涂布平板法不需要接种环，而是需要涂布器，D错误。 6.选D　金黄色葡萄球菌(细菌)适宜pH为中性偏碱，配制培养基时应先调pH再灭菌，防止调pH时造成杂菌污染，A正确；金黄色葡萄球菌在血平板(培养基中添加适量血液)上生长时，可破坏菌落周围的红细胞，使其褪色，由此可见该培养基能起到鉴别金黄色葡萄球菌菌落的作用，B正确；由于金黄色葡萄球菌具有高度耐盐性，高浓度NaCl不影响金黄色葡萄球菌生长的同时能抑制其他菌的生长，因此，金黄色葡萄球菌的培养基中加入高浓度NaCl，有利于金黄色葡萄球菌的筛选，C正确；若在10-3稀释液的3个血平板上(每个接种0.1 mL)，金黄色葡萄球菌菌落数分别为35、36和37，则每升自来水中的活菌数约为(35+36+37)÷3÷0.1×103×1 000=3.6×108(个)，D错误。 7.选D　据题图分析可知，从A瓶到C瓶液体培养的过程称为选择培养，目的是初步选择能降解莠去津的细菌(目的菌)，并提高其密度，故为获取目的菌，图中A~C均为以莠去津为唯一氮源的选择培养基，A~C培养的目的是选择并扩大培养目的菌，A、B正确；据题干信息“已知莠去津在水中溶解度低，含过量莠去津的固体培养基不透明”可知，固体培养基在接种前是不透明的，原因是培养基中含过量莠去津，当莠去津被降解后，培养基会变透明，所以培养基中有透明圈的菌落即为目的菌落，C正确，D错误。 8.选C　由乙图可知，该血细胞计数板的规格为25个中方格×16个小方格，即一个大方格中含有400个小方格，乙中一个中方格含24个酵母菌，则一个大方格中含24×25=600(个)酵母菌，因大方格体积为0.1 mm3，又稀释了100倍，所以酵母菌为600÷0.1×100×1 000=6×108(个/mL)，A、B正确；一个血细胞计数板中央含有两个计数室，C错误；静置的培养液中酵母菌细胞沉到底部，直接从底部吸取会导致细胞数目偏多，数据偏大，D正确。 9.解析：(1)用尿素作为唯一氮源的培养基能够选择出分解尿素的微生物，这种培养基属于选择培养基。在以尿素为唯一氮源的培养基中加入酚红指示剂培养细菌，若指示剂变红，可确定该种细菌能够分解尿素。 (2)若取土样6 g，应加入54 mL的无菌水配制成稀释10倍土壤溶液。因土壤中细菌密度很大，需要不断加以稀释，配制成101~107不同浓度的土壤溶液。将103~107倍的稀释液分别吸取0.2 mL加入固体培养基上，用涂布器将菌液铺平，每个稀释度下至少涂布3个平板，这种接种方法称为稀释涂布平板法。在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30~300的进行计数，求其平均值，由题表可知，105倍的稀释倍数比较适合计数，再通过计算得出土壤中细菌总数。由此计算出每克土壤中的细菌数≈(277+261+254)÷3÷0.2×105=1.32×108。由于一个菌落可能是由一个或多个细菌繁殖而来，因此这种方法测定的细菌数往往比活菌的实际数目低。 (3)平板划线法分离土壤中的尿素分解菌时，接种环通过灼烧灭菌，在第二次及以后划线时，总是从上一次划线区域的末端开始划线，这样做是将聚集的菌体逐步稀释以便获得(不连续的)单个菌落。将分离纯化后的单个菌落进行液体培养，可采用定期取样的方法进行计数。若以一个大方格(体积为0.1 mm3)有25个中方格的计数板为例进行计算，设五个中方格中总菌数为45，菌液稀释倍数为102，那么原菌液的菌群密度为45÷5×25÷0.1×103×102=2.25×108(个/mL)。 答案：(1)尿素作为唯一的氮源　选择　酚红　(2)54　稀释涂布平板法　105　1.32×108　低　(3)将聚集的菌体逐步稀释以便获得(不连续的)单个菌落　2.25×108 1 / 3 学科网（北京）股份有限公司 $