第4章 [阶段验收评价(3)] (第三、4章)A卷——巩固落实练-【新课程学案】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程配套课件PPT（苏教版）

该高中生物学课件聚焦基因工程、克隆技术及蛋白质工程核心知识，从工具酶、载体构建到转基因应用，再到伦理讨论，形成连贯知识链条，为学生搭建从基础到应用的学习支架。 其亮点在于结合高考及月考真题，通过实验设计题（如PCR扩增、酶切分析）培养科学思维与探究实践能力，伦理议题（如克隆技术伦理）强化态度责任。助力学生巩固知识、提升解决实际问题能力，为教师提供系统评价工具，提高教学效率。

阶段验收评价（三） (第三、四章)A卷——巩固落实练 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 一、单项选择题：共15小题，每小题2分，共30分。 1.下列有关重组DNA技术基本工具的叙述，正确的是(　　) A.DNA聚合酶是构建重组DNA分子必需的工具酶 B.不同的限制酶切割产生的黏性末端可能相同 C.相同黏性末端连接形成的DNA片段，一定会被原限制酶识别 D.质粒常采用抗生素合成基因作为筛选的标记基因 √ 24 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：构建重组DNA分子时不需要使用DNA聚合酶，A错误；不同的限制酶可能产生相同的黏性末端，B正确；假设限制酶甲识别GAATTC碱基序列，并在G和A之间切割，限制酶乙识别CAATTG碱基序列，在C与A之间切割，则限制酶甲和乙切割形成的黏性末端是相同的，连接后DNA双链中的一条链碱基序列为CAATTC，另一条链为GTTAAG，不能被限制酶甲和乙识别，C错误；质粒通常采用抗生素抗性基因作为筛选的标记基因，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 2.(2025·徐州月考)几丁质是许多真菌细胞壁的重要成分，几丁质酶可催化其水解。将几丁质酶基因转入菊花体内，可增强其抗真菌病的能力。下列有关叙述错误的是 (　　) A.将几丁质酶基因插入Ti质粒的T-DNA上构建表达载体 B.可通过显微注射法将几丁质酶基因导入菊花受体细胞 C.可用PCR等技术检测目的基因是否成功导入 D.可用真菌接种实验检测转基因菊花对真菌的抗性程度 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：Ti质粒的T-DNA可以转移到受体细胞中，并且整合到受体细胞染色体DNA上，根据这一特点，构建表达载体时，应该将目的基因即几丁质酶基因插入Ti质粒的T-DNA上，A正确；可通过农杆菌转化法将几丁质酶基因导入菊花受体细胞，显微注射法常用于将目的基因导入动物受精卵中，B错误；可用PCR等技术检测目的基因是否成功导入受体细胞，C正确；根据题干信息“几丁质酶基因转入菊花体内，可增强其抗真菌病的能力”，故可用真菌接种实验检测转基因菊花对真菌的抗性程度，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 3.(2024·湖南高考)某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时，发现DNA完全没有被酶切，分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是 (　　) A.限制酶失活，更换新的限制酶 B.酶切条件不合适，调整反应条件如温度和酶的用量等 C.质粒DNA突变导致酶识别位点缺失，更换正常质粒DNA D.酶切位点被甲基化修饰，换用对DNA甲基化不敏感的限制酶 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：限制酶失活会使DNA完全不被酶切，此时应更换新的限制酶，A正确；酶具有微量、高效、作用条件较温和等特性，酶切条件不合适(如高温下酶失活)可导致DNA完全不被酶切，但酶的用量不会，B错误；质粒DNA突变会导致限制酶识别位点缺失，进而造成限制酶无法进行切割，此时应更换正常质粒DNA，C正确；质粒DNA上酶切位点被甲基化修饰，会导致对DNA甲基化敏感的限制酶无法进行酶切，此时应换用对DNA甲基化不敏感的限制酶，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 4.(2025·盐城月考)科研人员利用农杆菌转化法将抗病基因C导入番木瓜，培育出转基因抗病番木瓜，Ti质粒结构模式图如图所示。下列叙述正确的是 (　　) A.农杆菌的T-DNA与番木瓜基因发生重组 B.质粒上的抗性基因有利于筛选含目的 基因的细胞和促进目的基因的表达 C.含重组Ti质粒的农杆菌具有四环素抗性 D.培育转基因抗病番木瓜的核心工作是将目的基因导入变体细胞 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：农杆菌Ti质粒的T-DNA可转移到被侵染细胞的染色体DNA上，从而与番木瓜基因发生重组，A正确；质粒上的抗性基因便于重组DNA分子的筛选，但不会促进目的基因的表达，B错误；抗病基因C的插入位点位于四环素抗性基因内部，插入抗病基因C后，重组Ti质粒的四环素抗性基因被破坏，含重组Ti质粒的农杆菌不具有四环素抗性，C错误；培育转基因抗病番木瓜的核心工作是基因表达载体的构建，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 5.基因工程蓬勃发展，下列有关基因工程的说法正确的是 (　　) A.动物基因工程应用的主要目的是培养体型巨大、品质优良的动物 B.用基因工程方法培育的抗虫植物也能抗病毒 C.转基因绵羊操作过程中生长激素基因的受体细胞最好采用乳腺细胞 D.基因工程和人类健康的关系密切，主要表现在基因工程药物和基因治疗等方面 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：动物基因工程的主要目的是提高动物的生长速度、改善畜产品品质，而不是为了产生体型巨大的个体，A错误；用基因工程方法培育的抗虫植物只能抗虫，不能抗病毒，B错误；转基因绵羊操作过程中生长激素基因的受体细胞最好采用受精卵细胞，因为受精卵能发育成完整的个体，C错误；基因工程和人类健康的关系密切，主要表现在基因工程药物和基因治疗等方面，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 6.下列有关“DNA的粗提取与鉴定”实验的相关说法，正确的是 (　　) A.新鲜的猪血和鸡血都可以作为提取DNA的材料 B.加入适量体积分数为70%的冷乙醇溶液，DNA会从溶液中析出 C.使用玻璃棒应沿同一方向缓慢搅拌，可以防止DNA分子断裂 D.在沸水浴中，DNA遇二苯胺试剂会被染成蓝色 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：猪属于哺乳动物，哺乳动物成熟的红细胞没有细胞核，因此新鲜猪血不能作为提取DNA的材料，A错误；加入适量体积分数为95%的冷乙醇溶液，DNA会从溶液中析出，B错误；为了防止DNA分子断裂，使用玻璃棒时应沿同一方向缓慢搅拌，C正确；二苯胺不是染色剂，在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺试剂会变蓝色，而不是被染成蓝色，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 7.随着科学技术的发展，获取目的基因的方法越来越多。下列有关目的基因的获取，正确的是 (　　) A.构建基因文库不需要限制酶和DNA连接酶 B.胰岛A细胞和胰岛B细胞的基因组文库和cDNA均相同 C.PCR过程中需要引物，是为了使DNA双链分开 D.核苷酸序列已知的基因可以用化学方法直接人工合成 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：构建基因文库需要限制酶和DNA连接酶，A错误；cDNA文库中只含有细胞已转录(或已表达)的基因，而基因组文库中含有这个人的全部基因，由于基因的选择性表达，因此胰岛A细胞和胰岛B细胞的cDNA文库不完全相同，B错误；PCR过程中需要引物，是为了从引物的3'端连接脱氧核苷酸，从而延伸子链，C错误；若目的基因比较小，核苷酸序列已知，可以通过DNA合成仪用化学方法直接人工合成，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 8.下列有关基因组文库与cDNA文库的比较，不正确的是 (　　) A.cDNA文库基因中具有启动子 B.构建时都要导入受体菌群体中储存 C.基因组文库含有某种生物的全部基因 D.构建时都要让DNA与载体连接 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：cDNA文库中的基因都没有启动子，只包含基因中的外显子，A错误；构建基因组文库和cDNA文库时，都要导入受体菌群体中储存，B正确；基因组文库中含有某种生物的全部基因，而cDNA文库只包含某种生物的部分基因，C正确；构建基因组文库和cDNA文库时都要让DNA与载体连接，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 9.生殖性克隆与治疗性克隆的最大区别是目的不同。下列叙述错误的是 (　　) A.生殖性克隆是为了获得能独立生存的个体，而治疗性克隆只是为了获得特定的细胞、组织或器官 B.我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验 C.生殖性克隆人冲击了现有的一些有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念 D.生殖性克隆技术目前已经非常成熟，不会面临流产、死胎和畸形儿等严重问题 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：生殖性克隆的目的是产生一个完整的人，治疗性克隆只是为了获得特定的细胞、组织或器官，从而达到治疗疾病的目的，A正确；由于生殖性克隆会对人类现有的有关婚姻、家庭和两性关系的伦理道德观念产生冲击，克隆技术的不成熟会导致生理缺陷或心理缺陷，因此我国政府不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验，B、C正确，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 10.(2025·苏州期中)某病毒的检测可以采用实时荧光RT-PCR(逆转录聚合酶链式反应)的方法，RT-PCR的具体过程如图。下列有关叙述错误的是 (　　) 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 A.过程①以mRNA为模板合成单链DNA B.过程②③拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，理论上需要n个引物B C.该技术用于对某些微量RNA病毒的检测，可提高检测的灵敏度 D.游离的脱氧核苷酸只能从引物的3'端开始连接 24 √ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：过程①是由mRNA为模板形成cDNA的过程，表示逆转录，A正确；过程②③拟对单链cDNA进行n次循环的扩增，根据DNA分子半保留复制的特点可知，该过程理论上至少需要2n-1个引物B，B错误；利用实时荧光RT-PCR技术对某些微量RNA病毒进行检测时可提高检测的灵敏度，是因为增加了待测RNA逆转录产生的cDNA的数量(或浓度)，便于检测，C正确；游离的脱氧核苷酸只能从引物的3'端开始连接，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 11.(2025·连云港期中)当面对日常生活中与转基因技术有关的话题时，我们需要理性地表明观点和参与讨论。下列叙述错误的是 (　　) A.在清晰地了解转基因技术的原理和操作规程的基础上来讨论转基因技术的相关问题 B.转基因食品风险评估时需要考虑目的基因和标记基因的安全性问题 C.商家不应该利用公众对转基因食品“恐惧”的心理，把“非转基因”作为推销的噱头 D.转基因技术将不同生物的DNA进行转移和重组之后，就会创造出新物种 24 √ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：在清晰地了解转基因技术的原理和操作规程的基础上来讨论转基因技术的相关问题，A正确；转基因食品风险评估时需考虑目的基因和标记基因的安全性问题，B正确；商家不应该利用公众对转基因食品“恐惧”的心理，把“非转基因”作为推销的噱头，C正确；将不同生物的DNA进行转移和重组一般只会引起某些性状发生改变，不会引起生殖隔离，故转基因过程可以创造出新品种，但一般不能产生新物种，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 12.下列关于基因工程的应用，叙述正确的是 (　　) A.λ噬菌体的衍生物作为载体可以将重组DNA导入动物细胞以获得转基因动物 B.反义基因产生的mRNA可与病变基因的mRNA互补，从而阻止其转录 C.向植物体细胞内转入Bt毒蛋白基因可培育抗虫转基因植物 D.利用乳腺生物反应器可以使哺乳动物的产奶量增加 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：λ噬菌体的衍生物侵染的是细菌，不能作为载体将重组DNA导入动物细胞，A错误；反义基因产生的mRNA与病变基因产生的mRNA互补，使两种mRNA结合成双链，使其不能正常翻译，从而阻止异常蛋白质的产生，B错误；Bt毒蛋白基因为目的基因，是从苏云金杆菌中分离得到的，向植物体细胞内转入Bt毒蛋白基因可培育抗虫转基因植物，C正确；利用乳腺生物反应器可使哺乳动物的乳汁中含有目的基因产物等，而不是提高产奶量，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 13.培育动物生物反应器可把人体相关基因导入到哺乳动物的卵细胞中，使生出的转基因动物长大后产生的乳汁中含有人类所需要的不同蛋白质。培育作为“生物反应器”的动物涉及的现代生物技术有 (　　) ①基因工程　②体外受精　③胚胎移植　④早期胚胎培养 A.①②③④ B.②③④ C.①③④ D.②③ √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：依题意可知，利用动物生物反应器获得人类所需要的不同蛋白质，需要根据人们的意愿定向改造生物的性状，因而需要用到基因工程技术；在基因工程技术中，获得的重组DNA需要用显微注射技术导入到哺乳动物的卵细胞中，再形成受精卵，而受精卵的获得离不开体外受精；当胚胎发育到一定阶段，需进行胚胎移植才能获得具有“生物反应器”的动物；含有目的基因的受精卵，需用动物早期胚胎培养技术进行培养，使之发育为早期胚胎。综上分析，A符合题意。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 14.通过胚胎工程建立的转基因动物模型，常用于基因表达调控的研究、良种动物的筛选以及基因药物的生产等。制备转基因鼠的流程如图所示，下列相关叙述正确的是 (　　) 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 A.过程①从卵巢中采集的卵母细胞都可直接与获能的精子进行体外受精 B.过程②常采用显微注射技术，过程③中细胞数目和胚胎总体积都增加 C.过程④分离出的胚胎干细胞能分化为小鼠体内的任何一种类型的细胞 D.以体细胞为供体进行过程⑤的成功率高于以胚胎干细胞为供体的成功率 24 √ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：过程①表示受精作用，从卵巢中获得的卵母细胞是不成熟的卵母细胞，需培养成熟后才能与获能精子结合，A错误；过程②表示利用显微注射法导入目的基因，过程③表示早期胚胎培养，受精卵早期分裂时，胚胎中细胞数目不断增加，但胚胎的总体积并不增加，甚至略微缩小，B错误；过程④从囊胚中获取的胚胎干细胞能分化为小鼠体内的任何一种类型的细胞，C正确；以胚胎干细胞为供体进行过程⑤细胞核移植的成功率高于以体细胞为供体的成功率，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 15.下面是蛋白质工程的基本途径，据图分析下列叙述错误的是 (　　) A.a过程所需原料是核糖核苷酸，过程b所需原料是氨基酸 B.参与c过程的细胞器有核糖体、内质网、高尔基体、线粒体等 C.d过程的主要依据是每种氨基酸都有其对应的密码子 D.通过蛋白质工程可以获得人类需要的蛋白质 √ 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14 2 3 4 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：a过程为转录，是合成mRNA的过程，所需的原料是核糖核苷酸，b过程为翻译，所需的原料为氨基酸，A正确；c过程为多肽的加工与折叠，参与c过程的细胞器有内质网、高尔基体、线粒体等，核糖体是合成多肽的场所，B错误；d过程为DNA合成，主要依据是每种氨基酸都有其对应的密码子，C正确；通过蛋白质工程可以获得人类需要的蛋白质，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 二、多项选择题：共4小题，每小题3分，共12分。 16.科研人员利用相关技术改变了胰岛素B链的某区域氨基酸的组成，从而避免了胰岛素结合成无活性的二聚体形式。下列相关叙述，正确的是(　　) A.该过程的直接操作对象是胰岛素分子 B.可通过测定控制胰岛素B链形成的DNA序列确定改造是否成功 C.对胰岛素结构的改造属于蛋白质工程 D.胰岛素的本质是蛋白质不宜口服使用 √ 24 √ √ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：由题意可知，该过程为蛋白质工程，蛋白质工程的直接操作对象是基因，而不是蛋白质，A不正确；可通过测定控制胰岛素B链形成的DNA序列确定改造是否成功，B正确；胰岛素是蛋白质，对蛋白质结构的改造属于蛋白质工程，C正确；胰岛素为蛋白质，若口服会被消化液中蛋白酶分解，因此胰岛素不宜口服使用，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 17.解偶联蛋白1(UCP1)具有消除线粒体内膜两侧的H+浓度差、减少ATP合成和增加产热的功能。我国科学家应用CRISPR/Cas9技术将猪的UCP1基因置换成小鼠的UCP1基因，并使小鼠UCP1基因在猪的白色脂肪组织中特异性表达，获得脂肪沉积少的“瘦肉猪”。下图是“瘦肉猪”的主要培育过程，相关叙述正确的是 (　　) 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 A.应用CRISPR/Cas9技术育种的主要原理是基因重组 B.过程b进行有限稀释培养的目的是获得阳性单克隆细胞系 C.过程d的受体细胞最好是去核的猪卵母细胞 D.过程e要对代孕猪进行同期发情处理，并选择发育正常的原肠胚植入代孕猪输卵管 24 √ √ √ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：应用CRISPR/Cas9技术育种的主要原理是基因重组，使得小鼠的UCP1基因在猪的体细胞中正常表达，A正确；过程b进行有限稀释培养，保证加到每个培养孔内的细胞数不超过1个，该操作的目的是获得阳性单克隆细胞系，B正确；卵母细胞含有激发细胞核全能性的物质，还可为细胞的早期分裂提供营养物质，故过程d的受体细胞最好是去核的猪卵母细胞，C正确；过程e要对代孕猪进行同期发情处理，使之处于相同生理状态，并选择发育正常的桑椹胚或囊胚植入代孕猪输卵管，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 18.目前已知的蛋白质约两亿种，但只有一小部分蛋白质的结构被破解，破解的过程极其艰难，因此“蛋白质折叠问题”成为困扰科学家的生物学难题。某人工智能公司宣布，其研发的AI系统成功解开了这一个难题。这一惊人成果立刻引发了极大的关注，科学家们表示这将对生物学研究产生重大的影响。下列叙述正确的是 (　　) A.“蛋白质折叠问题”是一个研究蛋白质空间构象的问题 B.每一种生物的生命活动都与蛋白质的空间结构有密切关系 C.该系统是根据蛋白质的空间结构模拟出其氨基酸的序列 D.这项成果可极大推进医学研究，如癌症等的防治 √ 24 √ √ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析： “蛋白质折叠问题”是一个研究蛋白质空间构象的问题，A正确；蛋白质是生命活动的主要承担者，每一种生物的生命活动都与蛋白质的空间结构有密切关系，B正确；可根据特定的生物功能，设计蛋白质的氨基酸序列，但不能根据蛋白质的空间结构模拟出其氨基酸的序列，C错误；AI系统成功解开了“蛋白质折叠问题”，这项成果可极大推进医学研究，如癌症等的防治，D正确。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 19.(2025·连云港高二联考)亚洲棉的突变型光籽和野生型毛籽是一对相对性状。研究发现，亚洲棉某突变体的光籽表型与8号染色体的~880 kb至~903 kb区间相关。研究人员根据野生型毛籽棉的该区间设计连续的重叠引物进行PCR，扩增后电泳结果如图所示。下列有关说法正确的是(　　) 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 A.提取该突变体和野生型亚洲棉的8号染色体上的DNA进行PCR扩增 B.图中PCR产物的鉴定是通过琼脂糖凝胶电泳来进行的 C.据图分析可知，相对分子质量较大的扩增产物与点样处的距离较近 D.该突变体出现的根本原因是引物6对应区间发生了碱基对的替换 24 √ √ √ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：由于8号染色体的~880 kb至~903 kb区间与突变体的光籽表型相关，故提取突变体和野生型的8号染色体上的DNA进行PCR扩增，A正确；题图中PCR产物的鉴定是通过琼脂糖凝胶电泳来进行的，相对分子质量较大的扩增产物迁移速率较慢，与点样处的距离较近，B、C正确；根据题图所示，野生型和突变体经引物6扩增的产物不同，其中突变体的相应扩增产物较大，故可推知8号染色体上的引物6对应的区间发生碱基对的增添是该突变体光籽性状出现的根本原因，D错误。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 三、非选择题：共5题，共58分。 20.(10分)下表是几种限制酶识别序列及切割位点，图甲为某质粒的示意图，图乙是一段含有目的基因的DNA片段。请回答下列问题： 24 限制酶 BamHⅠ BclⅠ Sau3AⅠ HindⅢ 识别序列 及切割位点 ↓ GGATCC CCTAGG 　　　↑ ↓ TGATCA ACTAGT 　　　↑  ↓ 　GATC 　CTAG　 　　　 ↑ AAGCTT TTCGAA 　　　↑  ↓ 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (1)基因工程中“分子缝合针”是指____________。  (2)利用_____技术可以实现目的基因在体外大量扩增。  24 DNA连接酶 PCR 解析：基因工程中“分子缝合针”是指DNA连接酶，可将两个黏性末端相同的DNA片段连接起来。 解析：利用PCR技术可以实现目的基因在体外大量扩增。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (3)基因工程中载体应具备的条件有：__________________________ ___________________________________________________________________________________ (答出两点即可)。  24 能自我复制；有一个至多个限制酶切割位点；具有标记基因；能在受体细胞中稳定存在；不影响宿主细胞的生命活动 解析：基因工程中载体应具备的条件有：能自我复制；有一个至多个限制酶切割位点；具有标记基因；能在受体细胞中稳定存在；不影响宿主细胞的生命活动。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (4)用图中质粒和目的基因构建重组质粒，应选用______________两种限制酶切割，含有重组质粒的大肠杆菌不能在含___________的培养基上生存。  24 氨苄青霉素 BclⅠ和HindⅢ　 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：选择的限制酶应在目的基因两端存在识别位点，但BamHⅠ会破坏质粒中的两种抗性基因，BclⅠ和HindⅢ都只会破坏氨苄青霉素抗性基因，四环素抗性基因完好，且BclⅠ和Sau3AⅠ切割后的黏性末端相同，因此只能选BclⅠ和HindⅢ两种限制酶切割，既能保证目的基因和载体的正确连接，还可以防止质粒和目的基因的自连。含有重组质粒的大肠杆菌因为氨苄青霉素抗性基因被破坏，因此不能在含氨苄青霉素的培养基上生存。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (5)若要检测目的基因是否成功导入大肠杆菌，采用的检测方法是_________________。  (6)若用BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，对于该连接部位，用这两种酶_______ (填“都能”“都不能”或“只有一种能”)切开。  24 DNA分子杂交技术 都不能 解析：若要检测目的基因是否成功导入大肠杆菌，采用的检测方法是DNA分子杂交技术。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：根据BamHⅠ和BclⅠ的酶切位点可知，若BamHⅠ酶切的DNA末端与BclⅠ酶切的DNA末端连接，则连接部位的6个碱基对序列为GGATCA//CCTAGT或TGATCC//ACTAGG，对于该部位，由于与两种酶的识别序列和酶切位点均不同，故这两种酶都不能切开。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 21.(11分)(2025·扬州月考)自从克隆羊“多莉”问世以来，关于治疗性克隆的问题也成为人们关注的焦点。下图所示为人类治疗性克隆的大概过程，请据图回答下列问题： (1)图示过程应用的主要技术有 ___________________________ _____________________(至少 回答两点)。  24 细胞核移植、早期胚胎培养、胚胎干细胞诱导分化等 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (2)相同的胚胎干细胞，“克隆”的结果各种各样，如有的是胰岛细胞，有的是血细胞，有的是心肌细胞，究其本质原因是_______________的结果。  (3)若将上述技术用于克隆人，则需要进行_________过程，目前世界上绝大多数国家反对进行克隆人实验的原因是________________________ _______________________________________________________________________________________________________________________________________________________________(答出一点)。  (4)按上述方法克隆的器官在移植方面的主要优点是________________ _____。  24 基因选择性表达 　 生殖性克隆人“有违人类尊严”；生殖性克隆人是在人为地制造在心理上和社会地位上都不健全的人，严重地违反了人类伦理道德，是克隆技术的滥用；克隆技术还不成熟，可能面临流产、死胎和畸形儿等 胚胎移植 不会发生免疫排斥反应 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 22.(10分)丙肝病毒(HCV)是一种RNA病毒，对HCV感染的诊断步骤是首先进行抗HCV抗体检测，若检测结果呈阳性，则还需要进行HCV核酸检测。HCV 融合抗原可用于制作第三代HCV抗体检测试剂。 (1)将得到的HCV的多个抗原基因首尾相连，在同一启动子、终止子等的调控之下，构成融合基因，进而构建融合抗原重组质粒。构建融合抗原重组质粒的过程中，需要用到__________________酶。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动_____________________。  24 　融合基因转录出mRNA 限制酶和DNA连接 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：构建融合抗原重组质粒的过程中，首先需要用同种限制酶切割质粒和融合基因，其次用DNA连接酶将融合基因与质粒连接形成重组质粒。启动子是RNA聚合酶识别和结合的部位，能驱动融合基因转录出mRNA。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (2)用重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞，用含硫酸卡那霉素的培养基筛选出能生长的菌落，从而得到能产生HCV融合抗原的工程菌。用_________________处理大肠杆菌可得到感受态细胞，受体大肠杆菌细胞________ (填“含有”或“不含有”)硫酸卡那霉素抗性基因。  24 　不含有 Ca2+(或CaCl2溶液) 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：将目的基因导入微生物细胞时，需要用Ca2+(或CaCl2) 处理微生物细胞以获得感受态细胞；用重组质粒转化大肠杆菌感受态细胞，用含硫酸卡那霉素的培养基筛选出能生长的菌落，从而得到能产生HCV融合抗原的工程菌，这说明硫酸卡那霉素抗性基因是标记基因，受体大肠杆菌细胞不能含有该抗性基因，否则无法利用该抗性基因进行重组质粒的筛选。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (3)进行HCV核酸检测时，需要用到一对HCV特异性引物和一种HCV特异性荧光探针，需要的酶有_________和热稳定的DNA聚合酶，需要的原料是_______________________________；检测过程是先将RNA合成cDNA，再通过PCR法扩增DNA，实时监测扩增全过程，从而检测出HCV-RNA。  24 　4种dNTP(或4种脱氧核苷三磷酸) 逆转录酶 解析：根据“检测过程是先将RNA合成cDNA，再通过PCR法扩增DNA”可知，将RNA合成cDNA的逆转录过程需要用到逆转录酶，利用PCR法扩增DNA的过程需要用到热稳定的DNA聚合酶，这两个过程所需的原料都是脱氧核苷酸。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (4)某人体内HCV抗体检测结果呈阳性，但进行HCV核酸检测时结果呈阴性，原因是______________________________________________ _________________。  24 其感染HCV后通过免疫反应已将HCV清除，但体内存在抗HCV的抗体 解析：某人体内HCV抗体检测结果呈阳性，但进行HCV核酸检测时结果呈阴性，原因是其感染HCV后通过免疫反应已将HCV清除，但体内存在抗HCV的抗体。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 23.(12分)基因X的表达产物可保护损伤的神经细胞。科学家构建了含X的基因表达载体(图1)，并导入到大鼠神经干细胞中，用于干细胞基因治疗的研究。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (1)构建含X的基因表达载体时，应选择图1中的________限制酶。  24 BamHⅠ 解析：根据题意和图示分析可知：由于基因X两边都有BamHⅠ限制酶识别序列，所以构建含基因X的表达载体时，需选择图1中的BamHⅠ限制酶进行酶切。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (2)酶切后的载体和基因X进行连接，可产生3种连接产物：单个载体自连，基因X与载体正向连接、基因X与载体反向连接(如图1所示)。为鉴定这3种产物，选择EcoRⅠ 酶和Hind Ⅲ酶对筛选得到的载 体进行双酶切，并对酶切后的 DNA片段进行电泳分析，结果 如图2所示。图中1、2、3泳道 分别对应的载体的连接方式是__________、_________、_________。  24 　　正向连接 载体自连 反向连接 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：由分析可知，图中1、2、3泳道分别对应的载体的连接方式是载体自连、反向连接、正向连接。 24 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 (3)在培养大鼠神经干细胞的过程中，可使用__________酶将细胞分散开。  (4)将正向连接的重组载体导入神经干细胞后，为了检测基因X是否转录出mRNA，可用_____技术。当培养的神经干细胞达到一定密度时，需进行______培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。  24 胰蛋白酶 　传代 PCR 解析：进行动物细胞培养时，需要用胰蛋白酶将从动物体内取出的组织块分散成单个细胞。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 解析：为了检测基因X是否转录出mRNA，可用PCR技术。当培养的神经干细胞达到一定密度时产生接触抑制，换瓶后进行传代培养以得到更多数量的细胞，用于神经干细胞移植治疗实验。 24 24.(15分)蜘蛛丝是自然界中机械性能较好的天然蛋白纤维，其强度高于制作防弹衣的凯夫拉纤维，有广泛的应用前景。但如何大量获取蜘蛛丝的问题一直难以解决。某研究中心利用基因工程技术成功在家蚕丝腺和蚕茧中大量表达出了蜘蛛丝蛋白。回答下列问题： 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 (1)PCR是获取大量目的基因的一种方法，PCR反应体系的成分中有两种引物，在退火时引物会结合到互补DNA链，对两种引物的设计要求之一是：两种引物之间不能碱基互补配对，试分析原因：________ ____________________________________________________；从引物设计的角度考虑，如果目的基因两侧没有酶切位点，用PCR技术_____ (填“可以”或“不可以”)为目的基因设置酶切位点。  1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 防止引物之间结合形成双链，降低引物与DNA模板链结合的效率　 可以 解析：DNA合成需要引物与模板链结合，若引物之间能碱基互补配对，则引物之间会结合形成双链，降低了引物与DNA模板链结合的效率；PCR是体外扩增DNA的技术，在引物中添加酶切位点，可以在几次循环后得到含有酶切位点的DNA片段。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 (2)如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有 _____ (填序号：①升高退火温度；②降低退火温度；③重新设计 引物)。  1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 ②③ 解析： PCR反应得不到任何扩增产物，可能是由于引物不合适，或者退火温度过高，引物无法与模板链结合，则可以采取的改进措施有降低退火温度和重新设计引物，故选②③。 (3)构建基因表达载体时(如图所示，箭头所指的位置是限制酶识别和切割的位置)，需要在目的基因前后两端分别引入_____________的酶切位点，该方法比用同一种酶进行酶切的优势是__________________ ____________________________ (答出一点即可)。  1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 　 防止目的基因自身环化；防止目的基因反向连接等 XbaⅠ和SacⅠ 解析：图中一共有3个酶切位点，而HindⅢ的酶切位点在标记基因内，若进行酶切会破坏标记基因，因此选用XbaⅠ和SacⅠ；使用两种不同的酶分别对目的基因和质粒进行酶切，会形成不同的黏性末端，目的基因和质粒自身不能环化也不会反接，提高构建重组表达载体的成功率。 (4)研究人员发现若将蛛丝蛋白31号位的色氨酸替换为酪氨酸，蛛丝韧性可提高50%，因而设计了与蛛丝蛋白基因结合的两对引物(引物B和C中都替换了一个碱基)，并按如图方式依次进行4次PCR扩增，以得到新的蛛丝蛋白基因。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 ①改良蛛丝蛋白的技术属于________工程。  ②图中所示的4次PCR都涉及到引物的选择，其中PCR1选择的引物是_____，PCR4选择的引物是_______。(均从A、B、C、D中选填)  1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 　A、D 蛋白质 　A、B 解析：蛋白质工程是指以蛋白质分子的结构规律及其与生物功能的关系为基础，通过基因修饰或基因合成，对现有蛋白质进行基因改造，或制造一种新的蛋白质，以满足人类的生产和生活的需要，其核心是基因工程，改良蛛丝蛋白的技术属于蛋白质工程。DNA新链合成的方向为5'→3'，即引物的方向为5'→3'，结合图示PCR1的产物可知，使用的引物为A、B；PCR4结束后得到的是完整的长段DNA，结合引物的方向为5'→3'，因此选用的是A、D两种引物。 1 5 6 7 8 9 10 11 12 13 2 3 4 14 15 16 17 18 19 20 21 22 23 24 本课结束 更多精彩内容请登录：www.zghkt.cn $