精品解析：2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课后作业（提升）

2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课后作业（提升） 1. HPV16型和HPV18型是诱发宫颈癌的高危类型，均可编码E6、E7蛋白。利用相关技术制备出抗HPV16型和HPV18型E6、E7蛋白的混合单克隆抗体，制备流程如下图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 用不同的E6、E7对新西兰兔进行免疫后，过程①需筛选出相应的浆细胞a B. 过程②和过程③分别用灭活病毒处理和选择培养基培养后可筛选出四种c C. 过程④利用上述不同的E6、E7进行检测，可以筛选出目标杂交瘤细胞 D. 该技术获得的混合单克隆抗体可检测患者是否同时感染两种高危类型HPV 【答案】C 【解析】 【详解】A、用HPV16型E6、E7和HPV18型E6、E7四种抗原免疫新西兰兔后，过程①是从免疫兔的脾脏中分离出已免疫的B淋巴细胞，不需要在过程①筛选，筛选是在细胞融合之后进行的，A错误； B、过程②是细胞融合，可用灭活病毒诱导； 过程③是用选择培养基筛选杂交瘤细胞，此时筛选出的是所有融合的杂交瘤细胞，无法直接得到4种能产生对应抗体的杂交瘤细胞，还需要后续的抗体检测，B错误； C、过程④是抗体阳性检测：利用HPV16型E6、E7和HPV18型E6、E7四种抗原，分别检测杂交瘤细胞的培养液，筛选出能产生对应4种抗体的目标杂交瘤细胞，C正确； D、该混合单克隆抗体包含抗HPV16型E6/E7、HPV18型E6/E7的抗体，只要患者感染其中任意一种HPV，就会出现阳性反应，无法区分是仅感染一种还是同时感染两种，D错误。 2. 黑色素瘤细胞可通过细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞表面的PD-1结合抑制其免疫活性，实现免疫逃逸。免疫检查点疗法治疗肿瘤的机理是利用单克隆抗体阻断PD-L1与PD-1的结合，恢复细胞毒性T细胞的活性，下列有关该原理的分析错误的是（　　） A. PD-L1与PD-1的结合体现细胞间的信息交流 B. 肿瘤细胞免疫逃逸表明患者的免疫监视功能减弱 C. 单克隆抗体的制备过程至少需进行两次筛选 D. 化疗药物与PD-1的单克隆抗体结合可实现精准治疗 【答案】D 【解析】 【详解】A、PD-L1是黑色素瘤细胞膜表面的蛋白质，PD-1是细胞毒性T细胞膜表面的蛋白质，二者通过细胞膜直接接触实现信息传递，体现了细胞间的信息交流，A正确； B、免疫系统的免疫监视功能可识别并清除突变的肿瘤细胞，肿瘤细胞能够实现免疫逃逸，说明患者免疫监视功能减弱，无法正常清除肿瘤细胞，B正确； C、单克隆抗体制备过程中，第一次需用选择培养基筛选出杂交瘤细胞，第二次需通过克隆化培养和抗体检测，筛选出能分泌所需特异性抗体的杂交瘤细胞，因此至少需要进行两次筛选，C正确； D、PD-1是细胞毒性T细胞表面的蛋白，PD-1的单克隆抗体作用靶点是T细胞而非肿瘤细胞，将化疗药物与该抗体结合无法将药物精准导向肿瘤细胞，不能实现精准治疗，D错误。 3. 一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一种抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗（单克隆抗体），也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（　　） A. 注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度影响大 B. 单抗制备过程中通常将筛选出的特定浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C. 利用该小鼠只能制备出一种抗p72的单抗 D. p72部分结构改变后可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 【答案】D 【解析】 【详解】A、单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越高，产生的多抗纯度越高，因此原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度的影响小，A错误； B、单抗制备过程中通常将经过免疫的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，B错误； C、非洲猪瘟病毒衣壳蛋白 p72上有多种抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠体内注入p72后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误； D、p72部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激机体产生的抗体，所以多抗仍有效，D正确。 4. 抗原表位是位于抗原表面决定抗原特异性的特殊化学基团，一种抗原表位只能与T细胞或B细胞表面一种受体结合，刺激机体产生一种抗体。如图为利用具有三种抗原表位的抗原制备单抗的过程，下列说法正确的是（ ） A. 培养分离出的B细胞时，需定期更换培养液以保证无菌环境 B. 经选择培养基筛选所得的杂交瘤细胞能够产生的抗体有3种 C. 对杂交瘤细胞克隆化培养的原理是细胞的全能性 D. 抗体检测后，选出的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体 【答案】D 【解析】 【详解】A、培养分离出的B细胞时，由于培养过程中代谢废物的积累以及营养物质的消耗，因此需要定期更换培养液，即培养分离出的B细胞时，需定期更换培养液以保证无毒环境，A错误； B、由于B细胞有多种，经选择培养基筛选后，杂交瘤细胞能够产生的抗体有多种，因此不一定是3种，B错误； C、细胞全能性指的是单个细胞可以形成一个完整的个体或者各种组织细胞，对杂交瘤细胞进行克隆化培养不能体现细胞的全能性，其原理是细胞增殖（有丝分裂），C错误； D、利用抗原-抗体特异性反应后，选出的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体，D正确。 故选D。 5. 表皮生长因子受体（EGFR）在肿瘤发生中起重要作用，其过表达常见于多种恶性肿瘤。研究人员利用杂交瘤技术制备抗EGFR单克隆抗体。下列叙述错误的是（　　） A. 用被其他抗原污染的EGFR免疫小鼠后，所得的每个B细胞也只能产生一种抗体 B. 经过多次克隆化培养和抗体检测，能获得足够数量特定杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞在小鼠腹腔内能快速增殖，与腹腔内具有充足的营养物质等适宜条件有关 D. 细胞毒素与抗EGFR单克隆抗体偶联可使抗体更好地杀死肿瘤细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、一个已免疫的B细胞（浆细胞）的基因只能编码产生一种特异性抗体，与免疫所用抗原是否被其他抗原污染无关，A正确； B、单克隆抗体制备过程中，第一次筛选获得杂交瘤细胞后，还需经过多次克隆化培养和特异性抗体检测，才能筛选出足够数量的能分泌抗EGFR抗体的特定杂交瘤细胞，B正确； C．小鼠腹腔内温度、pH适宜，且含有充足的营养物质，可为杂交瘤细胞增殖提供适宜的环境，因此杂交瘤细胞在小鼠腹腔内能快速增殖，C正确； D．抗EGFR单克隆抗体的作用是靶向识别肿瘤细胞表面的EGFR，本身不具备杀伤肿瘤细胞的能力，偶联的细胞毒素才是杀死肿瘤细胞的有效成分，D错误。 6. 某新型禽类病毒AIV主要侵害免疫器官，导致接种疫苗失效，对养殖业危害极大。该病毒的某种衣壳蛋白（CP蛋白）在其生命周期中含量丰富且高度保守。研究者拟以CP蛋白为抗原免疫小鼠，制备特异性单克隆抗体，以期快速检测该病毒，主要实验流程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 本实验中，小鼠注射的特定抗原应为该病毒的CP蛋白 B. 图中筛选1中，融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 C. 图中筛选2所依据的基本原理是抗原与抗体的反应具有特异性 D. 制备单细胞悬液时需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理 【答案】B 【解析】 【详解】A、抗体与抗原的结合具有特异性，本实验目的是制备针对该病毒CP蛋白的特异性单克隆抗体，因此给小鼠注射的特定抗原就是该病毒的CP蛋白，A正确； B、图中筛选1是第一次筛选，目的是获得杂交瘤细胞，在该选择培养基中，未融合的细胞、同种细胞融合的细胞（如B淋巴细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合的细胞）都不能正常增殖，只有杂交瘤细胞能正常存活增殖，B错误； C、筛选2是筛选能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，原理是抗原与抗体的特异性结合，C正确； D、制备动物单细胞悬液时，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理组织，分解细胞间的蛋白质使细胞分散，D正确。 7. 人正常乳腺细胞与人乳腺癌细胞表面有部分相同的膜蛋白。科研人员设计如图所示流程，生产针对人乳腺癌细胞的单克隆抗体。下列叙述错误的是（　　） A. 图中多次免疫小鼠产生抗体的过程属于体液免疫 B. 该实验也可用于检测人乳腺癌活细胞表面的特殊抗原 C. 过程①从小鼠体内能分离得到多种针对人正常乳腺细胞的抗体 D. 过程②需对杂交瘤细胞逐步稀释，使多孔培养板每个孔中均只有一个杂交瘤细胞 【答案】D 【解析】 【详解】A、体液免疫的核心是B细胞增殖分化为浆细胞，浆细胞产生抗体；多次免疫小鼠诱导其产生抗体的过程，属于体液免疫，A正确； B、该实验获得的单克隆抗体经过了人乳腺癌细胞表面抗原的诱导，因而也可用于检测人乳腺癌活细胞表面的特殊抗原，B正确； C、人正常乳腺细胞表面存在多种不同的膜蛋白（多种抗原），因此刺激小鼠后过程①可以产生多种针对人正常乳腺细胞的抗体，C正确； D、过程②是筛选特定杂交瘤细胞，采用逐步稀释时，目的是让培养板中绝大多数孔至多只有一个杂交瘤细胞，可能存在一个孔中没有杂交瘤细胞的情况，还需经过筛选，D错误。 8. 细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程，下图为科研人员研发出针对肺癌的抗体—药物偶联物(ADC)，基本流程。下列细胞工程相关叙述错误的是（　　） A. 过程③需对杂交瘤细胞逐步稀释，使多孔培养板每个孔尽量只接种一个细胞 B. 与诱导原生质体融合相比，①过程特有的方法是灭活病毒诱导法 C. ADC对肺癌细胞有选择性杀伤是因为细胞毒素特异性结合并杀伤肺癌细胞 D. 愈伤组织和小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达 【答案】C 【解析】 【详解】A、过程③是克隆化培养和抗体检测，需要对杂交瘤细胞进行逐步稀释，使多孔培养板的每个孔尽量只接种一个细胞，这样才能获得单克隆的杂交瘤细胞，A正确； B、过程①是动物细胞融合，与诱导植物原生质体融合相比，动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法，B正确； C、抗体-肺癌药物偶联物中b代表细胞毒素，a代表抗体，针对肺癌ADC通过将细胞毒素与能特异性识别肿瘤抗原的单克隆抗体结合，使细胞毒素实现对肿瘤细胞杀伤，C错误； D、愈伤组织是植物细胞脱分化形成的，小鼠 iPS 细胞是体细胞重编程形成的，这两个过程都涉及基因的选择性表达，D正确。 故选C。 9. 研究发现三特异性抗体可实现对小鼠多发性骨髓瘤细胞（MM）的选择性杀伤，作用机理如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 用单克隆抗体技术制备的3种抗体融合可得到三特异性抗体 B. 筛选该三特异性抗体时需使用制备三特异性抗体时所使用的3种抗原蛋白 C. 三特异性抗体通过促进T细胞的活化并释放细胞因子，提高机体对MM的杀伤力 D. 三特异性抗体与TCR和CD28结合可保持较高的T细胞数量和活性 【答案】A 【解析】 【详解】A、用单克隆技术制备的3种杂交瘤细胞融合可得到三特异性抗体，A错误； B、筛选该三特异性抗体，利用抗原-抗体特异性杂交原理，由于三特异性抗体含有三种抗体，故制备该抗体时，需要使用3种抗原蛋白，B正确； C、从图中看出，三特异性抗体能促进T细胞活化并释放细胞因子，细胞因子会促进T淋巴细胞的活化，从而提高机体对MM细胞的杀伤力，C正确； D、从图中看出，一方面三特异性抗体与T细胞膜上CD28结合，抑制T细胞死亡，另一方面三特异性抗体与T细胞膜上的TCR结合，促进T细胞活化，所以三特异性抗体与TCR和CD28结合可保持较高的T细胞数量和活性，D正确。 10. 精准治疗已经成为肿瘤治疗的重要思路，根据患者的基因特征和分子分型来筛选相应的靶向药物，给予患者个体化精准治疗。如图表示抗人体胃癌单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（ ） A. 只考虑两两融合，乙中融合的细胞种类应该有三种 B. 丙中只有产生特定抗体的杂交瘤细胞才能生长 C. 丁细胞均能分泌抗胃癌单克隆抗体 D. 抗人体胃癌的单克隆抗体可以用来诊断人体是否患胃癌 【答案】B 【解析】 【详解】A、细胞融合时，会出现三种融合细胞，B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合，A正确； B、选择培养（丙阶段）的目的是筛选出杂交瘤细胞，但此时筛选出的杂交瘤细胞还未经过专一抗体检测，不一定能产生特定抗体。只有经过专一抗体检测后，才能筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞，B错误； C、丁细胞是经过专一抗体检测后的杂交瘤细胞，均能分泌抗胃癌单克隆抗体，C正确； D、抗人体胃癌的单克隆抗体可以与胃癌细胞特异性结合，因此可以用来诊断人体是否患胃癌，D正确。 故选B。 11. 科研人员为高效检测食品中的有毒物质苏丹红Ⅰ，构建了抗苏丹红Ⅰ和吖啶酯的双特异性抗体，其中吖啶酯是一种能在特定条件下发光的物质。检测时，先将适量双特异性抗体、待测样品、吖啶酯加入固定了苏丹红Ⅰ的96孔板中，一段时间后洗去游离的物质，提供发光条件并检测发光强度。下图表示制备双特异性抗体的部分流程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①可采用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等处理 B. 抗苏丹红Ⅰ杂交瘤细胞在②过程的选择培养基上可以正常生长 C. 通过③可筛选出能分泌双特异性抗体的杂交瘤细胞 D. 待测样品中苏丹红Ⅰ含量越高，最终检测到的发光强度越低 【答案】CD 【解析】 【详解】A、 ①是动物细胞融合过程，诱导动物细胞融合常用方法为物理法（电刺激）、化学法（聚乙二醇）、生物法（灭活病毒）。Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂适用于激活重构胚，不是诱导动物细胞融合的试剂，A错误； B、 ②是选择培养基筛选阶段，该选择培养基的作用是淘汰未融合的亲本细胞、同种细胞融合的细胞，仅允许异种融合的杂交瘤生长，因此单独的抗苏丹红Ⅰ杂交瘤细胞无法在该培养基上正常生长，B错误； C、单克隆抗体制备需要两次筛选：②是第一次筛选，获得杂交瘤细胞；③是第二次筛选，通过专一抗体阳性检测，筛选出能分泌所需双特异性抗体的杂交瘤细胞，筛选后再注射到小鼠腹腔进行体内扩大培养，C正确； D、双特异性抗体可同时结合苏丹红Ⅰ和吖啶酯，孔板固定了苏丹红Ⅰ；若待测样品中苏丹红Ⅰ含量越高，会结合越多的双特异性抗体的苏丹红结合位点，导致能结合到孔板固定苏丹红上的双特异性抗体越少，最终结合在孔板上的吖啶酯越少，检测到的发光强度越低，D正确。 12. 多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，研究人员按如下流程制备了抗CD47的单克隆抗体。相关叙述错误的是（ ） A. 过程①可一次性注射较大剂量的CD47，以提高小鼠的免疫效果 B. 过程②和过程③筛选出的杂交瘤细胞，染色体数目和产生的抗体可能不同 C. 过程④可将杂交瘤细胞注射到小鼠脾脏中，一段时间后提取单克隆抗体 D. 将单克隆抗体加入巨噬细胞培养液中，能解除CD47对巨噬细胞的抑制作用 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、过程①为给小鼠注射抗原CD47，不能一次性注射较大剂量，通常需多次、小剂量注射以增强免疫效果，诱导产生更多能分泌抗CD47抗体的B淋巴细胞，A错误； B、过程②是筛选杂交瘤细胞，过程③是筛选能产生特异性抗体（抗CD47抗体）的杂交瘤细胞。杂交瘤细胞是脾细胞与骨髓瘤细胞融合形成的，可能处于细胞分裂的不同时期，染色体数目可能不同；由于取自脾脏的B细胞不只一种，③筛选出的杂交瘤细胞产生的抗体可能不同，B正确； C、过程④为获取单克隆抗体，正确操作是将杂交瘤细胞注射到小鼠腹腔中（而非脾脏，脾脏是免疫器官，并非生产单克隆抗体的部位），一段时间后从腹水中提取单克隆抗体，C错误； D、抗CD47的单克隆抗体可与肿瘤细胞表面的CD47特异性结合，阻断CD47对巨噬细胞的抑制信号，从而解除其抑制作用，将单克隆抗体加入巨噬细胞的培养液中，不能解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，D错误。 13. HER2（人表皮生长因子受体）参与调控细胞正常的分裂和生长。若HER2基因发生突变而过量表达，会导致细胞疯狂增殖，从而导致HER2阳性乳腺癌。通过如图所示方法生产的单克隆抗体可以阻断HER2与生长因子结合，并诱导吞噬细胞裂解癌细胞。下列叙述正确的是（　　） A. HER2基因可能属于原癌基因 B. 给小鼠注射的抗原A可以是HER2 C. 第一次筛选出的细胞既能产生特定抗体，又能无限增殖 D. 此方法获得的抗体A直接用于人体可能引起特异性免疫反应 【答案】ABD 【解析】 【详解】A、原癌基因表达的蛋白质是细胞正常的生长和增殖所必需的，这类基因一旦突变或过量表达导致相应蛋白质活性过强，就可能引发细胞癌变，因此HER2基因可能属于原癌基因，A正确； B、在单克隆抗体制备过程中，为获得抗HER2的抗体，通常会将‌HER2作为抗原注射到小鼠体内‌，激发免疫反应，使其脾脏中的B淋巴细胞产生特异性抗体，B正确；  C、融合后的细胞群体中包含多种类型，需通过HAT培养基进行第一次筛选，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，因此，第一次筛选出的细胞是能无限增殖的杂交瘤细胞，第二次筛选出的是能产生特定抗体的杂交瘤细胞，C错误； D、由小鼠细胞产生的单克隆抗体属于‌异源蛋白‌，若直接用于人体，可能被免疫系统识别为“外来物”，从而引发‌特异性免疫反应，D正确。 14. 单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： （1）图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有__________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。 （2）仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有____种类型。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_______________，筛选出的细胞具有的特点是_____________________，筛选②的目的是筛选出____________________ （4）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是_______________。 【答案】（1）Ab1、Ab2、Ab3、Ab4 （2）3##三 （3） ①. 杂交瘤细胞 ②. 既能无限增殖，又能产生特异性抗体 ③. 能产生所需（特定）抗体的杂交瘤细胞 （4）95%空气和5%CO2 【解析】 【小问1详解】 据图可知，向小鼠注射包含多种抗原决定簇的抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有Ab1、Ab2、Ab3、Ab4的混合物。 【小问2详解】 用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有B细胞自身融合、骨髓瘤细胞自身融合、杂交瘤细胞3种类型。 【小问3详解】 图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的方法是用特定的选择培养基，去除同种核融合的细胞以及未融合的单核细胞，筛选出杂交瘤细胞，该细胞具有的特点是既能无限增殖，又能产生特异性抗体。筛选②是对杂交瘤细胞进行克隆化培养和抗体检测，筛选出能产生所需特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问4详解】 动物细胞培养时需要提供95％空气和5％的CO2条件，以保证细胞的有氧呼吸和维持培养液的pH。 15. 单克隆抗体免疫疗法能够抑制恶性肿瘤的发展。卡妥索单抗是一种双特异性单克隆抗体，主要用于治疗由胃癌、卵巢癌等引起的恶性腹水，它通过靶向结合肿瘤细胞表面的EpCAM抗原和T细胞表面CD3受体，激活免疫系统杀伤肿瘤细胞，从而减少积液生成。如图是卡妥索单抗的制备过程及结构。 （1）在体外培养杂交瘤细胞时，培养基中除必要的营养物质外，通常需要加入________等天然成分，将含目的细胞的培养液置于气体环境为________培养箱中进行培养。 （2）科学家曾在患天花病人的病理组织中观察到多核细胞，这些多核细胞的来源可能是________。 （3）结合图中信息分析，第二次筛选时，向培养基中加入________（物质）筛选能产生卡妥索单克隆抗体的杂交瘤细胞AB． （4）单克隆抗体具有的优点是________（答2点）。利用卡妥索单抗对无胸腺患肿瘤的小鼠进行治疗，发现效果很差，可能的原因是________。 【答案】（1） ①. 血清 ②. 95%空气和5%的CO2 （2）患者体内的病毒直接诱导多个体细胞融合形成多核细胞 （3）EpCAM和CD3 （4） ①. 特异性强、灵敏度高 ②. 无胸腺的小鼠，细胞免疫和体液免疫均较差 【解析】 【分析】单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原的抗体，通常采用杂交瘤技术来制备；单克隆抗体的作用，作为诊断试剂、用于治疗疾病和运载药物。 【小问1详解】 为了提高动物细胞培养的成功率，在体外培养杂交瘤细胞时，培养基中除必要的营养物质外，通常需要加入血清等天然成分；将含目的细胞的培养液置于气体环境为95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（维持培养液的pH值）培养箱中进行培养。 【小问2详解】 患者体内的病毒表面含有的糖蛋白和一些酶能够与细胞膜上的糖蛋白发生作用，使得细胞相互凝集，细胞膜上的脂质分子和蛋白质分子重新排布，细胞膜打开，细胞发生融合，形成多核细胞。 【小问3详解】 制备卡妥索单抗时，获得产生特定抗体杂交瘤细胞A需要进行两步筛选，第一步筛选的方法是用特定的选择培养基筛选，其目的是获得杂交瘤细胞。卡妥索单抗是一种双特异性抗体，可与EpCAM和CD3蛋白特异性结合，杂交瘤细胞A和B融合后，可向培养液添加EpCAM和CD3用于筛选产生卡妥索单抗的杂交瘤细胞AB。 【小问4详解】 单克隆抗体是人工制备的杂交瘤细胞生产的，特异性强，灵敏度高；胸腺是T淋巴细胞成熟的场所，无论细胞免疫还是体液免疫，均需要T细胞的参与，因此利用卡妥索单抗对无胸腺患肿瘤的小鼠进行治疗，效果很差。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 2.2.2动物细胞融合技术与单克隆抗体课后作业（提升） 1. HPV16型和HPV18型是诱发宫颈癌的高危类型，均可编码E6、E7蛋白。利用相关技术制备出抗HPV16型和HPV18型E6、E7蛋白的混合单克隆抗体，制备流程如下图。下列相关叙述正确的是（　　） A. 用不同的E6、E7对新西兰兔进行免疫后，过程①需筛选出相应的浆细胞a B. 过程②和过程③分别用灭活病毒处理和选择培养基培养后可筛选出四种c C. 过程④利用上述不同的E6、E7进行检测，可以筛选出目标杂交瘤细胞 D. 该技术获得的混合单克隆抗体可检测患者是否同时感染两种高危类型HPV 2. 黑色素瘤细胞可通过细胞表面的PD-L1与细胞毒性T细胞表面的PD-1结合抑制其免疫活性，实现免疫逃逸。免疫检查点疗法治疗肿瘤的机理是利用单克隆抗体阻断PD-L1与PD-1的结合，恢复细胞毒性T细胞的活性，下列有关该原理的分析错误的是（　　） A. PD-L1与PD-1的结合体现细胞间的信息交流 B. 肿瘤细胞免疫逃逸表明患者的免疫监视功能减弱 C. 单克隆抗体的制备过程至少需进行两次筛选 D. 化疗药物与PD-1的单克隆抗体结合可实现精准治疗 3. 一个抗原往往有多个不同的抗原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，由同一种抗原刺激产生的不同抗体统称为多抗。将非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72注入小鼠体内，可利用该小鼠的免疫细胞制备抗p72的单抗（单克隆抗体），也可以从该小鼠的血清中直接分离出多抗。下列说法正确的是（　　） A. 注入小鼠体内的抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗纯度影响大 B. 单抗制备过程中通常将筛选出的特定浆细胞与骨髓瘤细胞融合 C. 利用该小鼠只能制备出一种抗p72单抗 D. p72部分结构改变后可能会出现原单抗失效而多抗仍有效的情况 4. 抗原表位是位于抗原表面决定抗原特异性的特殊化学基团，一种抗原表位只能与T细胞或B细胞表面一种受体结合，刺激机体产生一种抗体。如图为利用具有三种抗原表位的抗原制备单抗的过程，下列说法正确的是（ ） A. 培养分离出的B细胞时，需定期更换培养液以保证无菌环境 B. 经选择培养基筛选所得杂交瘤细胞能够产生的抗体有3种 C. 对杂交瘤细胞克隆化培养的原理是细胞的全能性 D. 抗体检测后，选出的每个杂交瘤细胞只能产生1种抗体 5. 表皮生长因子受体（EGFR）在肿瘤发生中起重要作用，其过表达常见于多种恶性肿瘤。研究人员利用杂交瘤技术制备抗EGFR单克隆抗体。下列叙述错误的是（　　） A. 用被其他抗原污染的EGFR免疫小鼠后，所得的每个B细胞也只能产生一种抗体 B. 经过多次克隆化培养和抗体检测，能获得足够数量的特定杂交瘤细胞 C. 杂交瘤细胞在小鼠腹腔内能快速增殖，与腹腔内具有充足营养物质等适宜条件有关 D. 细胞毒素与抗EGFR单克隆抗体偶联可使抗体更好地杀死肿瘤细胞 6. 某新型禽类病毒AIV主要侵害免疫器官，导致接种疫苗失效，对养殖业危害极大。该病毒的某种衣壳蛋白（CP蛋白）在其生命周期中含量丰富且高度保守。研究者拟以CP蛋白为抗原免疫小鼠，制备特异性单克隆抗体，以期快速检测该病毒，主要实验流程如图所示。下列有关叙述错误的是（　　） A. 本实验中，小鼠注射的特定抗原应为该病毒的CP蛋白 B. 图中筛选1中，融合的细胞都可以在选择培养基上正常增殖 C. 图中筛选2所依据的基本原理是抗原与抗体的反应具有特异性 D. 制备单细胞悬液时需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理 7. 人正常乳腺细胞与人乳腺癌细胞表面有部分相同的膜蛋白。科研人员设计如图所示流程，生产针对人乳腺癌细胞的单克隆抗体。下列叙述错误的是（　　） A. 图中多次免疫小鼠产生抗体的过程属于体液免疫 B. 该实验也可用于检测人乳腺癌活细胞表面的特殊抗原 C. 过程①从小鼠体内能分离得到多种针对人正常乳腺细胞的抗体 D. 过程②需对杂交瘤细胞逐步稀释，使多孔培养板每个孔中均只有一个杂交瘤细胞 8. 细胞工程包括动物细胞工程和植物细胞工程，下图为科研人员研发出针对肺癌的抗体—药物偶联物(ADC)，基本流程。下列细胞工程相关叙述错误的是（　　） A. 过程③需对杂交瘤细胞逐步稀释，使多孔培养板每个孔尽量只接种一个细胞 B. 与诱导原生质体融合相比，①过程特有的方法是灭活病毒诱导法 C. ADC对肺癌细胞有选择性杀伤是因为细胞毒素特异性结合并杀伤肺癌细胞 D. 愈伤组织和小鼠iPS细胞的诱导形成均发生了基因的选择性表达 9. 研究发现三特异性抗体可实现对小鼠多发性骨髓瘤细胞（MM）选择性杀伤，作用机理如图所示。下列叙述错误的是（ ） A. 用单克隆抗体技术制备的3种抗体融合可得到三特异性抗体 B. 筛选该三特异性抗体时需使用制备三特异性抗体时所使用的3种抗原蛋白 C. 三特异性抗体通过促进T细胞的活化并释放细胞因子，提高机体对MM的杀伤力 D. 三特异性抗体与TCR和CD28结合可保持较高的T细胞数量和活性 10. 精准治疗已经成为肿瘤治疗的重要思路，根据患者的基因特征和分子分型来筛选相应的靶向药物，给予患者个体化精准治疗。如图表示抗人体胃癌单克隆抗体的制备过程，有关叙述不正确的是（ ） A. 只考虑两两融合，乙中融合的细胞种类应该有三种 B. 丙中只有产生特定抗体的杂交瘤细胞才能生长 C. 丁细胞均能分泌抗胃癌单克隆抗体 D. 抗人体胃癌的单克隆抗体可以用来诊断人体是否患胃癌 11. 科研人员为高效检测食品中的有毒物质苏丹红Ⅰ，构建了抗苏丹红Ⅰ和吖啶酯的双特异性抗体，其中吖啶酯是一种能在特定条件下发光的物质。检测时，先将适量双特异性抗体、待测样品、吖啶酯加入固定了苏丹红Ⅰ的96孔板中，一段时间后洗去游离的物质，提供发光条件并检测发光强度。下图表示制备双特异性抗体的部分流程。下列叙述正确的是（　　） A. 过程①可采用电刺激、Ca2+载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等处理 B. 抗苏丹红Ⅰ杂交瘤细胞在②过程选择培养基上可以正常生长 C. 通过③可筛选出能分泌双特异性抗体的杂交瘤细胞 D. 待测样品中苏丹红Ⅰ含量越高，最终检测到的发光强度越低 12. 多种肿瘤细胞表面的CD47含量比正常细胞高1.6～5倍，导致巨噬细胞对肿瘤细胞的清除效果减弱。为解除CD47对巨噬细胞的抑制作用，研究人员按如下流程制备了抗CD47的单克隆抗体。相关叙述错误的是（ ） A. 过程①可一次性注射较大剂量的CD47，以提高小鼠的免疫效果 B. 过程②和过程③筛选出的杂交瘤细胞，染色体数目和产生的抗体可能不同 C. 过程④可将杂交瘤细胞注射到小鼠脾脏中，一段时间后提取单克隆抗体 D. 将单克隆抗体加入巨噬细胞的培养液中，能解除CD47对巨噬细胞的抑制作用 13. HER2（人表皮生长因子受体）参与调控细胞正常的分裂和生长。若HER2基因发生突变而过量表达，会导致细胞疯狂增殖，从而导致HER2阳性乳腺癌。通过如图所示方法生产的单克隆抗体可以阻断HER2与生长因子结合，并诱导吞噬细胞裂解癌细胞。下列叙述正确的是（　　） A. HER2基因可能属于原癌基因 B. 给小鼠注射的抗原A可以是HER2 C. 第一次筛选出的细胞既能产生特定抗体，又能无限增殖 D. 此方法获得的抗体A直接用于人体可能引起特异性免疫反应 14. 单克隆抗体是B淋巴细胞与骨髓瘤细胞通过融合的方式获得的，而多克隆抗体通常是从动物血清中获得，由于可以受到多种抗原刺激而可与多种抗原表位进行结合，所以称为多克隆抗体。如图为制备单克隆抗体和多克隆抗体的示意图。据图回答下列问题： （1）图中向小鼠注射抗原后，所获得的免疫抗血清实际上是含有__________（填写抗体的名称）的混合物，这种方法制备的抗体不仅产量低，而且纯度低。 （2）仅以Ab1单克隆抗体制备为例，图中选用B细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交细胞，如果仅考虑细胞的两两融合，其融合细胞有____种类型。 （3）图中两次筛选的目的不同，其中筛选①的目的是筛选出_______________，筛选出的细胞具有的特点是_____________________，筛选②的目的是筛选出____________________ （4）在体外进行动物细胞培养时需要在合成培养基的基础上添加血清等天然成分。同时为了维持培养液的pH，需要提供的气体环境是_______________。 15. 单克隆抗体免疫疗法能够抑制恶性肿瘤的发展。卡妥索单抗是一种双特异性单克隆抗体，主要用于治疗由胃癌、卵巢癌等引起的恶性腹水，它通过靶向结合肿瘤细胞表面的EpCAM抗原和T细胞表面CD3受体，激活免疫系统杀伤肿瘤细胞，从而减少积液生成。如图是卡妥索单抗的制备过程及结构。 （1）在体外培养杂交瘤细胞时，培养基中除必要的营养物质外，通常需要加入________等天然成分，将含目的细胞的培养液置于气体环境为________培养箱中进行培养。 （2）科学家曾在患天花病人的病理组织中观察到多核细胞，这些多核细胞的来源可能是________。 （3）结合图中信息分析，第二次筛选时，向培养基中加入________（物质）筛选能产生卡妥索单克隆抗体的杂交瘤细胞AB． （4）单克隆抗体具有的优点是________（答2点）。利用卡妥索单抗对无胸腺患肿瘤的小鼠进行治疗，发现效果很差，可能的原因是________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $