第4章 第1节 课时1 基因工程的基本工具-【学霸黑白题】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程（浙科版）

第三章真题集训 黑题高考真题练 1.C解析：精子需要经过获能处理才具有受精能力，A正确：受精卵经 体外培养可获得早期胚胎，B正确：胚胎分割可以获得多个胚胎，分 割次数越多，分割后胚胎成活的概率越小，C错误：胚胎移植前，需选 择健康体质和正常繁殖能力的受体且进行同期发情处理，D正确。 故选C。 2.D解析：由于猴的成纤维细胞和胚胎干细胞是由猴胚胎干细胞分 裂、分化而来，虽然功能不同，但基因组相同，A错误：囊胚细胞②③ 都由细胞①分裂、分化形成，表达的基因有部分不同，但有部分基因 所有细胞都表达（如呼吸酶基因），B错误：动物细胞培养和早期胚胎 培养需要在95%空气和5%C0,的环境中，C错误：胚胎移植后胚胎 的发育受母体激素影响，也影响母体激素分泌，D正确。 3.A解析：内细胞团是由已经分化的细胞组成的，获得Mc的生物技 术并不属于核移植，A错误：接受注射的囊胚发有为黑白相间的小 鼠，说明Mc表皮中有两种基因型的细胞，B正确；内细胞团能发育成 胎儿的各种组织，注射入的细胞来自黑色小鼠的内细胞团，会分化成 Mc的多种组织，C正确：利用胚胎分割技术将接受注射的囊胚均分 为二，可发育成两只幼鼠，D正确。故选A。 4.D解析：根据抗原和抗体发生特异性结合的原理推测，双抗可同时 与2种抗原结合，A正确；根据抗原与抗体特异性结合的特性，利用 双抗可以将蛋白类药物运送至靶细胞，从而使药物发挥相应的作用， B正确：在两种不同的抗原刺激下，B细胞增殖、分化产生不同的效 应B细胞（浆细胞）分泌形成2种抗体，因此，筛选双抗时需使用制备 单克隆抗体时所使用的2种抗原来进行抗原-抗体检测，C正确；同 时注射2种抗原可刺激B细胞分化形成不同的效应B细胞（浆细 胞)，每种效应B细胞只能产生一种抗体，D错误。故选D。 5.B解析：动物细胞融合过程中，可以利用灭活的仙台病毒或聚乙二 醇作诱导剂促进细胞融合，A正确；细胞Ⅲ中保留了人的X、11、17号 染色体，故不会是鼠-鼠融合细胞，B错误：根据分析可知，芳烃羟化 酶基因位于2号染色体上，乳酸脱氢酶基因位于11号染色体上，胸 苷激酶基因位于17号染色体上，磷酸甘油酸激酶基因位于X染色体 上，C、D正确。 四名师点睛 分析题千信息：I保留X、11号染色体，Ⅱ保留2、11号染色体且 具有芳烃羟化酶活性，Ⅲ保留X、11、17号染色体且具有胸苷激酶 活性，I、Ⅲ都有磷酸甘油酸激酶活性，I、Ⅱ、Ⅲ均有乳酸脱氢酶 活性，所以支配芳烃羟化酶合成的基因位于2号染色体上，支配 胸苷激酶合成的基因位于17号染色体上，支配磷酸甘油酸激酶 合成的基因位于X染色体上，支配乳酸脱氢酶合成的基因位于 11号染色体上。 第四章 第一节基因工程赋予生物新的遗传特性 课时1基因工程的基本工具 白题基础过关练 1.B解析：基因工程是在分子水平上对基因进行的遗传改造，A正确； 基因工程的发展离不开生命科学基础理论的支持，B错误：基因工程 的应用非常广泛，已经用于医学、农业、工业、环境保护等领域，C正 确；基因工程是在分子水平开展生命科学研究，通过定向改造生物的 遗传物质，创造出更符合人们需要的新的生物类型和产品，D正确。 正本参考答案 6.D解析：根据题干信息可知，非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72上有多个 抗原决定簇，单抗的制作需要筛选，而多抗不需要筛选，抗原纯度越 高，产生的多抗纯度越高，因此抗原纯度对单抗纯度的影响比对多抗 纯度的影响小，A错误：单抗制备过程中通常将分离出的B淋巴细胞 与骨髓瘤细胞融合，B错误：非洲猪瘟病毒衣壳蛋白p72上有多种抗 原决定簇，一个抗原决定簇只能刺激机体产生一种抗体，所以向小鼠 体内注入p72后，可以刺激小鼠产生多种抗p72的单抗，C错误；P72 部分结构改变只改变了部分抗原决定簇，因此由这部分抗原决定簇 刺激产生的抗体失效，但由于还存在由其他抗原决定簇刺激产生的 抗体，所以多抗仍有效，D正确。故选D。 7.B解析：动物细胞经过多次分裂后，细胞质的成分已经发生改变，原 本能激发细胞全能性的物质消失，故肠细胞不能表达全能性是受到 了细胞内物质的限制，A正确：“合子”第一次分裂、第二次分裂后形 成的细胞仍具有全能性，B错误：“合子”发育成正常蝌蚪个体的过程 中，需要通过细胞分裂增加细胞的数量，通过细胞分化增加细胞的种 类，C正确：虽然细胞经过多次分裂失去了激发全能性的物质，但细 胞核仍含有该物种的全套基因，故动物细胞核具有全能性，D正确。 故选B。 8.C解析：动物细胞培养过程需要无菌操作，故步骤①的操作需要在 无菌环境中进行，A错误：动物细胞培养过程需要用胰蛋白酶或胶原 蛋白酶处理动物组织，分散成单个细胞，制成细胞悬液，B错误：传代 培养时需要用胰蛋白酶处理贴壁生长的细胞，使之分散成单个细胞， 再分瓶培养，C正确：步骤④为传代培养过程，该过程中部分细胞可 能发生细胞转化，核型改变，D错误。故选C。 9.A解析：用促性腺激素对良种奶牛进行注射，可促使其超数排卵， A正确；进行移植的胚胎是桑葚胚或囊胚，B错误；受体对移植的胚 胎几乎不发生排斥反应，因此无需使用免疫抑制剂，C错误；利用胚 胎分割技术，同卵双胎较同卵多胎成功率更高，D错误。 10.(1)冷冻保存刚排出的精子必须在雌性生殖道内发生相应生理变 化后才能获得受精能力肝素或Ca+载体溶液MⅡ期(2)维生 素、氨基酸、核苷酸(3)对受体母羊进行同期发情处理，合适的时 间，将保存的囊胚移植入受体母羊的子宫 解析：(1)精液可以冷冻保存，使用前再将精液解冻离心分离。刚排 出的精子必须在雌性生殖道内发生相应生理变化后才能获得受精 能力，故在体外受精前要对精子进行获能处理。通常采用的体外获 能方法有培养法和化学诱导法，化学诱导法是将精子放在一定浓度 的肝素或Ca+载体溶液中，用化学药物诱导精子获能。卵母细胞需 要培养到MⅡ期才能具备与精子受精的能力。(2)进行早期胚胎培 养的培养液中，除了无机盐、激素、血清外，还含有维生素、激素、氨 基酸、核苷酸等。(3)要利用保存的囊胚和相应数量的非繁殖期受 体母羊为材料，获得具有该公羊优良性状的后代，主要是利用胚胎 移植技术，即对受体母羊进行同期发情处理，将保存的囊胚进行胚 胎移植，对受体母羊是否妊娠进行检查，一段时间后受体母羊产下 具有该公羊优良性状的后代。 基因工程 故选B。 2.B解析：基因工程是将外源基因导人生物体内进行DNA重组，赋予 生物新的遗传特性，A不符合题意；用紫外线照射青霉菌，使其DNA 发生改变，通过筛选获得青霉素高产菌株属于诱变育种，C不符合题 意；噬菌体自行感染细菌不是人为操作的，不属于基因工程的范畴， D不符合题意。 3,D解析：萤火虫与烟草的DNA能连接在一起，说明萤火虫与烟草植 物的DNA结构基本相同，都是双螺旋结构①正确：荧光素基因转入 烟草植物细胞后能成功表达，说明萤火虫与烟草植物共用一套遗传 黑白题19 密码，②正确：长成的植物通体光亮，说明烟草植物体内合成了荧光 素，③正确。故选D。 4.B解析：在DNA分子的中部，用酶切法获得一个目的基因，需要切 开两个切口，水解4个磷酸二酯键，A错误；限制酶能识别双链 DNA分子的特定核苷酸序列，并使特定部位的磷酸二酯键断开，B正 确；用不同的限制性内切核酸酶处理含目的基因的DNA片段和质 粒，若产生的黏性末端相同，也能形成重组质粒，C错误；-CAAG- 和-GAATTC-序列被限制酶切出的黏性末端不同，分别为-CAAG 和-AATT-,但黏性末端碱基数相同，D错误。故选B。 5.B解析：DNA连接酶连接的是两个DNA片段，A项错误：限制酶只 能切割双链DNA片段而不能切割RNA,烟草花叶病毒的核酸为 RNA,B项正确；E.coli DNA连接酶只能连接黏性末端，不能连接平末 端，C项错误；限制酶主要从原核生物中分离纯化而来，但是因为原 核生物DNA分子中不存在该酶的识别序列或识别序列已经被修饰， 所以不能剪切自身的DNA,D项错误。 6.B解析：限制酶识别序列的中心轴线两侧的双链DNA上的碱基是 反向对称重复排列的，若切割形成的是黏性末端，则黏性末端碱基应 该互补配对。分析题图中片段可知，③④中的片段可能由同一种限 制酶切割所得，B正确。 7.C解析：限制酶主要是从原核细胞中分离纯化出来的，作用的化学 键为磷酸二酯键，A错误；切割产生①片段的限制酶，识别的碱基序 列为-CTGCAG-,由6个碱基对构成，B错误；①④片段属于黏性末 端，可被T4DNA连接酶或E.coli DNA连接酶催化连接，形成重组 DNA,C正确；两个③片段属于平末端，只能被T4DNA连接酶催化连 接形成重组DNA,D错误。故选C。 8.A解析：载体必须能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量复制， 以便提供大量的目的基因，A正确；载体必须具有一个或多个限制酶 识别位点，以便于目的基因的插入，而不是表达，B错误：载体必须具 有标记基因，以便于重组DNA的筛选，C错误：载体必须是安全的， 对受体细胞无害，以便宿主细胞能进行正常的生命活动，D错误。 9.A解析：质粒上的抗性基因常作为标记基因供重组DNA的鉴定选 择，A正确；天然质粒往往不能直接作为载体，要根据不同的目的和 需求进行人工改造后再使用，B错误；质粒是广泛存在于细菌细胞溶 胶中能自主复制的小型环状双链DNA分子，在酵母菌细胞中也含有 质粒，C错误：携带目的基因的重组质粒可以整合到宿主细胞的染色 体DNA上，并随染色体DNA的复制而复制；也可以不整合到染色体 DNA上，进行自主复制，D错误。故选A。 10.D解析：猪的成熟红细胞无细胞核，不能作为提取DNA的材料， A错误：DNA鉴定时，加入二苯胺试剂后需水浴加热才可观察到颜 色反应，B错误：0.14mol/L的NaCl溶液中DNA溶解度较小，一般 用2mo/L的NaCl溶液溶解DNA,C错误；DNA粗提取实验中，可 根据DNA不溶于酒精但某些蛋白质溶于酒精的原理初步分离DNA 与蛋白质，D正确。故选D。 11.C解析：将香蕉果肉放人研钵中，倒入研磨液进行充分研磨，A错 误：在漏斗中垫上尼龙纱布，将研磨液过滤入离心管中，B错误：经 离心，取上清液倒入装有体积是上清液两倍的冷酒精的小烧杯中， C正确：在含有絮状物的试管中加人二苯胺，用水浴锅加热显蓝色， D错误。故选C。 重难聚焦 12.C解析：限制酶能识别双链DNA分子中特定的核苷酸序列，并且 使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断裂，A正 确；BglⅡ和Mb0oI两种限制酶剪切后可形成相同的黏性末端，均 为-GATC-,B正确：SmaI剪切DNA后的末端为平末端，而E.coli 选择性必修三·ZK DNA连接酶只能连接黏性末端，C错误；Hind I限制酶的识别序列 为GTY RAC,其中Y=C或T,R=A或G,说明其识别序列不只一 种，则一种限制酶可能识别多种核苷酸序列，D正确。故选C。 黑题应用提优练 1.D解析：限制酶只能在双链DNA的特定位点上进行剪切，A错误； 剪切质粒的限制酶具有特异性，不是都能特异性地识别6个核苷酸 序列，B错误：限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中出现的概率 就越大，C错误：载体上一般有复制原点和标记基因，载体的作用是 将目的基因导入受体细胞使之稳定存在并表达，D正确。故选D。 2.C解析：通过基因工程可以赋予生物新的遗传特性，在基因工程中 生物所发生的变异类型和杂交育种所涉及的变异类型一致，都属于 基因重组，A正确：限制酶主要存在于原核细胞中，是原核细胞长期 进化出的一种自我保护机制，类似于人类的免疫系统，当外源DNA 入侵时，原核生物就会利用限制酶将外源DNA剪切，使之失效，以保 证自身的安全，B正确：T4DNA连接酶可以将不同限制酶切割后形 成的平末端进行连接，E.co肱DNA连接酶能连接同一种限制酶切割 形成的黏性末端，也可以连接不同的限制酶切割但是形成的黏性末 端一样的DNA,C错误：某质粒上的氨苄青霉素抗性基因既可以作为 本质粒载体的标记基因，便于重组DNA分子的筛选，也可以作为 一基因工程的目的基因，赋予受体细胞性状或获得预期表达产物， D正确。故选C。 3.D解析：据题意可知，该DNA分子为环状DNA,用限制酶I切割得 到长度为120kb的片段，用限制酶Ⅱ切割得到40kb和80kb两个片 段，则说明该DNA上限制酶I有1个酶切位点，限制酶Ⅱ有两个酶 切位点：同时用限制酶I和限制酶Ⅱ切割时，得到10kb、80kb和 30kb共3个片段，则说明限制酶I的酶切位点位于限制酶Ⅱ切割后 的40kb片段中，D正确，A、B、C错误。故选D。 4.A解析：分析题表可知，a酶可以把原有DNA切成3段，说明a酶的 识别序列有2段；b酶把大小是1600bp的DNA切成大小分别为 800bp和800bp的两个片段，b酶把大小是1100bp的DNA切成大 小分别为800bp和300bp的两个片段，且a酶和b酶的识别位点不 同，说明b酶的识别序列有2段，A错误；据题图可知，a酶与b酶切 出的黏性末端相同，用DNA连接酶可以将它们连接起来，B正确； a酶和b酶属于限制酶，限制酶切割的化学键都是磷酸二酯键，C正 确；a酶与b酶切割后产生的黏性末端相同，但是两者识别切割的脱 氧核苷酸序列不同，说明两种酶的底物不同，体现了酶的专一性， D正确。故选A。 四解题指导 分析题图：a酶和b酶识别的DNA核苷酸序列不同，但切割后 产生的黏性末端相同。分析题表格：a酶可以把原有DNA切 成3段，说明该DNA分子上有2个识别位，点，即a酶的识别序 列有2段：b酶把大小是1600bp的DNA切成大小分别为 800bp和800bp的两个片段，b酶把大小是1100bp的DNA 切成大小分别为800bp和300bp的两个片段，且a酶和b酶 的识别位，点不同，说明b酶的识别序列有2段。 5.B解析：如果用EcoR I对外源DNA和质粒进行酶切，将多个含有 目的基因的DNA片段与多个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连 接后，两两连接所形成的产物有目的基因和载体连接物、载体和载体 连接物、目的基因和目的基因连接物三种，A正确：如果将一个外源 DNA分子和一个质粒分别用EcoR I酶切后，再用DNA连接酶连接， 形成一个含有目的基因的重组DNA分子，目的基因两端应各含1个 EcoR I酶切位点，即重组DNA中EcoR I酶切位点有2个，B错误：为 黑白题20 了防止质粒和含目的基因的外源DNA片段自身环化，酶切时应使用 BamH I和HindⅢ两种限制酶同时处理，C正确；从题图1可以看出， 质粒上只含有一个EcoR I的酶切位点，因此被该酶切割后，质粒变 为线性双链DNA分子，因每条单链上含有一个游离的磷酸基团，因 此题图1所示的质粒分子切割后含有两个游离的磷酸基团，D正确。 故选B。 6.D解析：等位基因是指同源染色体相同位置控制相对性状的基因， 题图质粒无染色体结构，且amp'和tet'在同一个DNA分子上，不是 等位基因，A错误：质粒指细菌细胞中或酵母菌细胞中能自我复制的 小型环状的DNA,病毒的DNA不属于质粒，B错误：限制酶的作用部 位是DNA分子中特定的两个核苷酸之间的磷酸二酯键，C错误；重 组质粒4中，氨苄青霉素抗性基因完好，四环素抗性基因被破坏，因 此用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌不能在含四环素的培养 基上生长，D正确。故选D。 7.B解析：多个片段乙和多个片段丁混合在一起，用DNA连接酶拼接 得到环状DNA,其中只由两个DNA片段连接成的环状DNA分子有 3种，即片段乙自身连接、片段丁自身连接，片段乙和片段丁连接， A正确，B错误：切割DNA的工具是限制酶，限制酶是基因工程必需 的工具酶，其特性是一种限制酶只能识别DNA上特定的核苷酸序 列，C正确；根据题图中黏性末端可知，酶M和酶N识别的片段可能 是AGCGCT成crccAc TCGCGA CACGTG,由题干已知酶M特异性剪切的DNM片段是 AGCGCT TCGCCA ,所以酶N特异性剪切的DNA片段是CC,D正确。 压轴挑战 8.(1)磷酸二酯键黏性末端、平末端(2)②②(3)E.coli DNA 连接酶T4DNA连接酶(4)限制酶DNA连接酶DNA解旋 酶DNA聚合酶 解析：(1)限制性内切核酸酶作用的化学键是磷酸二酯键，限制酶切 割DNA分子后形成平末端或黏性末端。(2)题图1中显示，限制酶 ②的识别序列和切点是-GATC-,目的基因两端均有限制酶②的识 别序列，因此用限制酶②切割目的基因所在的DNA:限制酶②切割质 粒会把两个标记基因都破坏，不能选择限制酶②切割质粒。(3)常见 的DNA连接酶有E.coli DNA连接酶和T4DNA连接酶。(4)根据题 图2可知，①是对DNA的切割，使用的酶为限制酶：②是对DNA片段 的连接，使用的酶为DNA连接酶：③是对DNA双链的解旋，使用的 酶为DNA解旋酶：④是DNA链的复制，使用的酶是DNA聚合酶。 课时2基因工程的基本操作 白题基础过关练 1,D解析：用甲图所示方法获取的是该细菌的全部DNA分子，因此用 限制酶切割后可用于构建基因组文库，A错误；乙图表示用逆转录法 获得的DNA分子，只包含该细菌的部分基因，因此可建立该细菌 的©DNA文库，B错误；甲图所示方法中，只要利用限制性内切核酸酶 将细菌原有的DNA切断即可，不需要以脱氧核苷三磷酸为原料合成 DNA,C错误；乙图所示方法中c为逆转录过程，需要逆转录酶参与 D正确。 2.B解析：通过PCR技术扩增目的基因时，需要用耐高温的Tag DNA 聚合酶催化单个脱氧核苷酸聚合形成DNA子链，A正确；在复制时， 引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶从引物的3' 端开始延伸DNA链，因此DNA合成方向总是从子链的5'端向3'端 延伸，B错误：PCR技术的原理是DNA双链复制，DNA复制时两条链 均作为复制的模板，C正确：DNA合成的原料是四种脱氧核苷三磷 正本参考答案 酸，同时两个核苷酸连接时可释放能量，D正确。 3.C解析：若该DNA分子为线性DNA分子，经限制性内切核酸酶 (EcoR I)完全酶切后得到4.0kb、1.5kb、1.0kb和0.5kb四种长度 的DNA片段，只能说明至少有3个限制酶(EcoR I)酶切位点，A错 误：DNA条带在凝胶中的位置与DNA相对分子质量有关，在凝胶中 长度4kb和1.5kb的DNA片段相邻，并不代表在这个DNA中两个 片段相邻，B错误：相对分子质量小的DNA移动速度快，故A端为加 样口，样品带负电荷，在电场中将向正极泳动，所以B端接正极，C正 确；电泳后一般加人EB溶液中进行染色，D错误。故选C。 4,B解析：基因表达载体的构建是基因工程的核心内容，基因表达载 体是载体的一种，除了目的基因外，它还有启动子、终止子和标记基 因等，①错误；启动子是RNA聚合酶的结合位点，有了启动子才能驱 动基因转录出mRNA,②正确；终止子控制着转录的结束，③正确；由 于受体细胞有植物、动物以及微生物之分，以及目的基因导入受体细 胞的方法不同，因此基因表达载体的构建不是完全相同的，④错误； 基因表达载体的构建一般在细胞外进行，⑤错误。②③正确，①④⑤ 错误。故选B。 5.C解析：胰岛素基因只在胰岛β细胞中才表达，因此胰岛素基因不 可通过胰岛a细胞的mRNA反转录获得，A错误：表达载体的复制启 动于复制原点，而胰岛素基因的表达启动于启动子，B错误：抗生素 抗性基因常作为基因工程的标记基因，借助标记基因可将含胰岛素 基因的受体细胞筛选出来，C正确：启动子启动转录过程，其在转录 中起作用，而终止密码子终止翻译过程，其在翻译过程中起作用， D错误。故选C。 6.B解析：由于受体细胞有植物、动物和微生物之分，以及目的基因导 入受体细胞的方式不同，所以基因表达载体的构建也会有所差别，不 可能千篇一律。 7.(1)不同的限制酶识别并剪切不同的碱基序列T4DNA连接酶 (2)编码所需蛋白质的基因启动子RNA聚合酶(3)Ca2+(或 CaCl2溶液)用于鉴定和筛选导入了基因表达载体的农杆菌 (4)PCR 解析：(1)T质粒具多种限制酶切割位点，不同的限制酶识别并切割 不同的碱基序列。连接平末端应选用T4DNA连接酶。(2)目的基 因主要是指编码所需蛋白质的基因。目的基因的上游具有启动子， 以便于RNA聚合酶识别和结合。(3)过程③常采用Ca2+(或CaCl2溶 液)处理农杆菌，使其处于易于吸收外源DNA分子的状态。抗生素 抗性基因T用于检测受体细胞中是否含有基因表达载体。(4)检测 农杆菌和愈伤组织细胞中是否有目的基因常采用PCR技术。 8.C解析：检测到受体细胞含有目的基因的表达产物才标志着基因工 程操作的成功，A错误；目的基因是否转录和翻译成功的检测方法依 次是分子杂交技术、抗原-抗体杂交技术，B错误：可从转基因生物中 提取蛋白质来检测目的基因是否翻译成相应蛋白质，C正确：抗虫 抗病鉴定可用于确定转基因生物是否具备相关性状，属于个体水平 的检测，D错误。故选C。 重难聚焦 9.(1)限制性内切核酸（或限制）核苷酸序列(2)磷酸二酯键 DNA单链以DNA为模板的DNA链的延伸(3)②④(4)B 解析：(1)根据题图可知，步骤I获取目的DNA片段，所用的EcoR I是 一种限制酶，能识别特定的核苷酸序列，并使每一条链中特定部位的 两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开。(2)步骤Ⅱ是将目的DNA片段 连接成环状，其中DNA连接酶的作用是催化相邻核苷酸之间的3'羟基 和5'磷酸间形成磷酸二酯键。PCR循环中，升高温度到95℃是为了 打开氢键使双链解旋，获得DNA单链，Tag DNA聚合酶的作用是催化 游离的脱氧核苷酸连接到引物3'端，合成DNA子链。(3)引物的作用 黑白题21第一节 基因工程赋 课时1基因了 白题基础过关练 题型1基因工程的基础理论及概念 1.下列关于基因工程的叙述，错误的是（) A.基因工程是在分子水平上对生物进行遗传 改造 B.基因工程的发展独立于生命科学基础理论 的发展 C.基因工程已经广泛应用于医学、农业、工 业、环境保护等领域 D.基因工程可创造出更符合人们需要的新的 生物类型和产品 2.下列叙述符合基因工程概念的是 A.在细胞内直接将目的基因与受体细胞的遗 传物质进行重组，赋予生物新的遗传特性 B.将人的干扰素基因重组到质粒上后导入大 肠杆菌，获得能产生人干扰素的菌株 C.用紫外线照射青霉菌，使其DNA发生改变， 通过筛选获得青霉素高产菌株 D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌 后其DNA整合到细菌DNA上 3.科学家将萤火虫的荧光素基因转入烟草植物细 胞，获得高水平的表达。长成的植物通体光亮， 堪称自然界的奇迹。这一研究成果表明() ①萤火虫与烟草植物的DNA结构基本相同 ②萤火虫与烟草植物共用一套密码子 ③烟草植物体内合成了荧光素 A.①③ B.②③ c.①② D.①②③ 题型2限制酶和DNA连接酶的作用 4.下列关于限制酶的叙述，正确的是 A.在DNA分子的中部，用酶切法获得一个目 的基因，需要水解2个磷酸二酯键 第四章 第四章 基因工程 予生物新的遗传特性 程的基本工具 限时：25min B.限制酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸 序列，并在特定位点切开 C.只有用同种限制酶处理含目的基因的DNA 片段和质粒，才能形成重组质粒 D.用酶切位点为-CAAG'-和-GAATTC-的不 同限制酶切割DNA片段，得到的黏性末端 碱基数不同 5.限制酶和DNA连接酶是基因工程的工具酶， 以下说法正确的是 () A.DNA连接酶能将单个核苷酸加到已有的核 苷酸片段上形成磷酸二酯键 B.限制酶只能切割双链DNA片段，不能切割 烟草花叶病毒的核酸 C.E.coli DNA连接酶既能连接黏性末端，也能 连接平末端 D.限制酶主要从原核生物中分离纯化而来， 所以也能剪切自身的DNA 6.某DNA分子中含有某限制酶的一个识别序 列，用该限制酶切割该DNA分子，可能形成的 两个DNA片段是 ( 序号 片段1 片段2 ① A-G-C-T-T-T1 11C-C-T-A-G ② TTT-G-G A一TTTT T-A-1L ③ TTTA-G C-T-TTT G-A-L A-A-T-T-C-TTT ④ 111C-T-T-A-A G-11 A.①② B.③④ C.①③ D.②④ 黑白题51 7.以下是几种不同限制性内切核酸酶（限制酶） 切割DNA分子后形成的部分片段。下列叙述 正确的是 ①-CTGCA②-G ③-TG④ -G -CTTAA -AC -TGCA A.限制酶只存在于原核细胞，作用的化学键 为磷酸二酯键和氢键 B.切割产生①片段的限制酶，识别的碱基序 列由5个碱基对构成 C.①④片段可被T4DNA连接酶催化连接，形 成重组DNA D.两个③片段只能被E.coli DNA连接酶催化 连接形成重组DNA 题型3载体的功能和特点 8.作为基因的运输工具一载体，必须具备的条 件之一及理由是 A.能够在宿主细胞中稳定地保存下来并大量 复制，以便提供大量的目的基因 B.具有多个限制酶识别位点，以便于目的基 因的表达 C.具有某些标记基因，以使目的基因能够与 其结合 D.对宿主细胞无伤害，以便于重组DNA的鉴 定和选择 9.质粒是基因工程中常用的目的基因运载工具。 下列有关叙述正确的是 A.质粒上的抗性基因常作为标记基因供重组 DNA的筛选 B.天然质粒均可以直接作为载体将目的基因 导入受体细胞 C.质粒是只存在于细菌细胞溶胶中能自我复 制的小型环状双链DNA分子 D.携带目的基因的重组质粒只有整合到宿主 细胞的染色体DNA上才会随后者的复制 而复制 题型4DNA的粗提取和鉴定 10.(2023·山西朔州月考)下列有关DNA粗提 选择性必修三·ZK舞 取与鉴定实验的叙述，正确的是 () A.酵母菌、菜花和猪的成熟红细胞都可作为 提取DNA的材料 B.向溶有DNA的NaCI溶液中加入二苯胺试 剂后，在常温下颜色变蓝 C.一般用0.14mol/L的NaCl溶液溶解DNA D.粗提取DNA实验中利用了DNA不溶于酒 精的特点 1.（2023·山西晋城月考)下列关于DNA的粗 提取和鉴定活动的叙述，正确的是() A.将香蕉果肉放入研钵中，倒入95%的酒精 进行充分研磨 B.在漏斗中垫上滤纸，将研磨液过滤人离心 管中 C.经离心，取上清液倒入装有冷酒精的小烧 杯中 D.在含有絮状物的试管中加入亚甲基蓝，用 水浴锅加热显蓝色 重难聚焦 12.下表所示为常用的限制性内切核酸酶（限 制酶)及其识别序列和切割位点。下列说 法错误的是 ( 限制 识别序 限制 识别序 酶名 列和切 酶名 列和切 注： 称 割位点 称 割位点 Y=C 或T, BglⅡ AGATCT Kpn I CCTAC'C R=A EcoR I G'AATTC Mboo GATC 或C Hind I GTYRAC Sma I CCCGGG A.限制酶的作用底物都是双链DNA,都能 切开磷酸二酯键 B.BglⅡ和Mboo I两种限制酶切割后可形 成相同的黏性末端 C.SmaI切割DNA后形成的末端可用 E.coli DNA连接酶连接 D.一种限制酶可能识别多种核苷酸 白题52 黑题应用提优练 1.(2023·山西朔州期末)以下关于基因工程的 操作工具，说法正确的是 () A.DNA和RNA均可使用限制酶进行切割 B.切割质粒的限制酶均能特异性地识别6个 核苷酸序列 C.限制酶识别序列越短，则该序列在DNA中 出现的概率就越小 D.载体的作用是将目的基因导入受体细胞使 之稳定存在并表达 2.(2023·湖北安陆第一高中月考)自1973年正 式问世以来，基因工程在短时期内得到了蓬勃 发展。下列关于基因工程及其常用基本工具 的说法，不正确的是 () A.通过基因工程可以赋予生物新的遗传特 性，基因工程中生物所发生的变异类型和 杂交育种中的变异类型一致 B.限制酶主要存在于原核细胞中，是原核细 胞长期进化出的一种自我保护机制，类似 于人类的免疫系统 C.T4DNA连接酶可以将不同限制酶切割后 形成的平末端进行连接，E.coli DNA连接酶 只能连接同一种限制酶切割形成的黏性 末端 D.某质粒上的氨苄青霉素抗性基因既可以作 为本质粒载体的标记基因，也可以作为另 一基因工程的目的基因 3.(2023·浙江台州期中)已知一双链DNA分 子，用限制性内切核酸酶I切割得到长度为 120kb(kb:千碱基对)的片段；用限制性内切 核酸酶Ⅱ切割得到40kb和80kb两个片段； 同时用限制性内切核酸酶I和限制性内切核 酸酶Ⅱ切割时，得到10kb、80kb和30kb3个 片段。据此分析该双链DNA分子结构及酶切 位点情况为 第四章 限时：35min ⅡI I、 10 40 80 30 C D 4.(2023·黑龙江佳木斯期中)某线性DNA分子 含有3000个碱基对(bp),先用限制酶a对其 进行切割，再把得到的产物用限制酶b切割， 得到的DNA片段大小如表。限制酶a和b的 识别序列和切割位点如图所示。下列有关说 法错误的是 ( a酶 b酶 -AGATCT- —GGATCC TCTAGA- CCTAGG a酶切割产物(bp) b酶再次切割产物(bp) 1600;1100;300 800;300 A.在该DNA分子中，a酶与b酶的识别序 列分别有3段和2段 B.两条分别含有a酶、b酶切出的黏性末端的 DNA片段可相互连接 C.a酶与b酶切断的化学键均为磷酸二酯键 D.a酶与b酶识别切割的序列不同体现了酶 的专一性 5.如图，图1为某种质粒简图，图2表示某外源 DNA上的目的基因，小箭头所指分别为限制 性内切核酸酶EcoR I、BamH I、HindⅢ的酶 切位点。下列有关叙述错误的是 BamH I HindⅢ EcoR I EcoR I 质粒 -EcoR I 入 专外源DNA BamH I HindⅢ 图1 图2 A.如果用EcoR I对外源DNA和质粒进行酶 切，将多个含有目的基因的DNA片段与多 个质粒的酶切产物用DNA连接酶进行连 黑白题53 接后，两两连接所形成的产物有三种 B.如果将一个外源DNA分子和一个质粒分别 用EcoR I酶切后，再用DNA连接酶连接， 形成一个含有目的基因的重组DNA,此重 组DNA中EcoR I酶切位点有1个 C.为了防止质粒和含目的基因的外源DNA片 段自身环化，酶切时应使用BamH I 和HimdⅢ两种限制酶同时处理 D.一个图1所示的质粒分子经EcoR I切割 后，含有2个游离的磷酸基团 6.(2023·陕西咸阳月考)下图是4种不同质粒 的示意图，其中ori为复制必需的序列，amp 为氨苄青霉素抗性基因，tet'为四环素抗性基 因，箭头表示同一种限制酶的酶切位点。下列 有关叙述正确的是 A.基因amp'和tet是一对等位基因，常作为 基因工程中的标记基因 B.质粒包括细菌细胞中能自我复制的小型环 状DNA和病毒中的DNA C.限制酶的作用部位是DNA分子中特定的两 个核苷酸之间的氢键 D.用质粒4将目的基因导入大肠杆菌，该菌 不能在含四环素的培养基上生长 7.(2023·吉林白城月考)下图所示的酶M和 酶N是两种限制酶，图中DNA片段只注明了 黏性末端处的碱基种类，其他碱基的种类未作 注明。下列叙述中不正确的是 ( ) 同时用酶 某DNAM和酶N G 和GT 分 处理 CACGT GTCGC 片段甲 片段乙 片段丙 同时用酶 质粒和酶CCC…G 处理 和ICCAC A…CACGT G…TCGCG 片段丁 片段戊 A.多个片段乙与丁混合在一起，可用DNA连 接酶拼接得到环状DNA 选择性必修三·ZK B.多个片段乙与丁混合，只由两个DNA片段 连接成的DNA共有4种 C.一种限制酶只能识别双链DNA中某种特定 的核苷酸序列 AGCGCT D.若酶M特异性剪切的DNA片段是 TCCCCA GTGCAC 侧酶N特异性剪切片段是 ACGTG 压轴挑战 8.(2023·吉林延边期中)下列是基因工程的 有关问题，请分析回答问题： (1)限制性内切核酸酶可以识别双链 DNA分子中的特定核苷酸序列，并可以 使每条链中特定部位的两个核苷酸之 间的 (填化学键名称)断裂， 形成的末端总体可分为两种类型，分 别是 0 (2)图1表示的是构建表达载体时的某种质 粒与目的基因。已知限制酶①的识别序 列和切点是-G'GATCC-,限制酶②的识 别序列和切点是-'GATC-。 GGATCC GGATCC目的基因GATC m CCTAGG CCTAGG CTAG GATC GeneⅢ注：Gene I和GeneⅡ表示两 CTAG 种标记基因，○的内容表示 Gene I 限制酶识别序列放大。 图1 分析可知，最好选择限制酶 （填 “①”或“②”)切割目的基因所在的 DNA,不能用限制酶 （填“①”或 “②”)切割质粒。 (3)DNA连接酶是将两个DNA片段连接起来 的酶，常见的有 和 (4)图2为DNA分子在不同酶的作用下发生 的变化，图中①②③④依次表示 的作用。 ①三 ②— ④ 一< 图2 进阶突破拔高练P10 黑白题54