内容正文:
模拟构建重组DNA分子
吴璐娜 湄池中学
1997年,我国政府首次批准商业化种植转基因抗虫棉。到2015年,我国已育成转基因抗虫棉新品种100多个,减少农药用量40万吨,增收节支社会经济效益450亿元。培育转基因抗虫棉一般需要哪些步骤?
抗虫棉的培育过程
2.构建重组DNA分子
1.获取目的基因
3.将重组DNA分子导入受体细胞
4.检测目的基因的及其表达产物
Bt基因
Ti质粒
重组DNA分子
将目的基因插入染色体DNA中
温故知新
1.在基因工程中,科学家所用的“剪刀”、“针线”和常用的“载体”分别是指( )
A.大肠杆菌病毒、质粒、DNA连接酶
B.噬菌体、质粒、DNA连接酶
C.限制酶、RNA连接酶、质粒
D.限制酶、DNA连接酶、质粒
D
2.下图为DNA分子的某一片段,其中①②③分别表示某种酶的作用部位,则相应的酶依次是( )
A.DNA连接酶、限制酶、解旋酶
B.限制酶、解旋酶、DNA连接酶
C.解旋酶、限制酶、DNA连接酶
D.限制酶、DNA连接酶、解旋酶
C
氢键
磷酸二酯键
断裂的磷酸二酯键
基因表达载体的构建
2
①用限制酶切割载体,使它出现一个缺口;
②用同种限制酶切割含有目的基因的DNA片段,获取目的基因;
③用DNA连接酶将目的基因片段拼接到载体缺口处,形成重组DNA分子。
目的基因
重组DNA分子
目的基因
材料用具:
剪刀
胶带
不同种颜色的A4打印纸若干
填一填:
术语 生物实验室模型
含有目的基因的DNA分子
质粒
限制性核酸内切酶
DNA连接酶
剪刀+眼睛
胶带
红色纸条
绿色纸条+胶带
探究活动1:用一种限制酶切割目的基因和质粒
1.每个人将一套模型材料按照表1给出的限制酶种类及其识别切割的序列在红色和绿色纸条上找出相应的切割位点,并用铅笔将剪切的地方划下来。
限制酶 EcoR1
识别序列和切割位点 -G A A T T C-
-C T T A A G-
表1 EcoR1识别序列和切割位点
2.对目的基因和质粒正确“切割”,从而获得目的基因和质粒片段。
想一想:
切断的磷酸二酯键数 切口数 片段数
含目的基因的DNA
质粒
用某种限制酶完全酶切质粒