专题九 课题研习(二) 细胞工程-【新高考方案】2026年高考生物二轮复习专题增分方略教师用书word

课题研习(二)　细胞工程 万丈高楼平地起，基础还得靠自己/以下必备基础知识，课下自主记准记牢 1.厘清植物细胞工程两大技术　　　　　　　　　　2.明确试管苗、细胞产物的培养流程 3.明确植物激素对植物组织培养的影响 4.理清动物细胞培养技术的原理和过程 5.理清制备单克隆抗体的原理和过程 6.理清动物体细胞核移植技术的原理和过程 7.熟记胚胎工程的操作流程(以牛为例) 任务(一)　植物细胞工程 1.(2025·江苏高考)图示一种植物组织培养周期，①~③表示相应过程。 下列相关叙述错误的是 (　　) A.过程①发生了细胞的脱分化和有丝分裂 B.过程②经细胞的再分化形成不同种类的细胞 C.过程②③所用培养基的成分、浓度相同 D.培养基中糖类既能作为碳源，又与维持渗透压有关 解析：选C　根据题图可知，过程①是脱分化，该过程中细胞会进行有丝分裂，A正确；过程②是再分化，愈伤组织细胞经再分化可以形成不同种类的细胞，B正确；过程②(再分化)和过程③(胚状体发育)中，诱导的方向不同，所用培养基的成分、浓度等不同，C错误；培养基中的糖类可作为植物细胞培养的碳源，为细胞提供能量，同时糖类能参与维持培养基的渗透压，保持细胞的正常形态和生理功能，D正确。 2.(2025·四川高考)研究人员用花椰菜(BB，2n=18)根与黑芥(CC，2n=16)叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是 (　　) A.两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B.再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C.花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D.植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 解析：选B　两个原生质体融合形成的细胞不一定是杂种细胞，也可能是两个花椰菜根细胞原生质体融合或两个黑芥叶片细胞原生质体融合形成的融合细胞，A错误；杂种细胞经过培养形成了再生植株N，这证明了杂种细胞仍具有全能性，B正确；花椰菜和黑芥是不同物种，它们之间存在生殖隔离，原生质体能融合依据的是细胞膜具有流动性，C错误；植株N是花椰菜(BB，2n=18)根细胞和黑芥(CC，2n=16)叶片细胞的原生质体经PEG诱导融合形成杂种细胞后发育而来，存在同源染色体，只是缺少了一条染色体，在减数分裂时可能产生可育配子，D错误。 3.(2025·湖北高考)水母雪莲是我国的一种名贵药材，主要活性成分为次生代谢产物黄酮。水母雪莲生长缓慢，长期的掠夺性采挖导致该药材资源严重匮乏。研究人员开展了悬浮培养水母雪莲细胞合成黄酮的工程技术研究，结果如表所示。下列叙述错误的是 (　　) 转速/(r/min) 55 65 75 85 相对生长速率 0.21 0.25 0.26 0.25 细胞干重/(g/L) 7.50 9.70 11.4 9.50 黄酮产量/(g/L) 0.20 0.27 0.32 0.25 A.黄酮产量与细胞干重呈正相关 B.黄酮是水母雪莲细胞生存和生长所必需的 C.氧气供给对于水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的 D.转速为75 r/min时既利于细胞分裂，又利于黄酮的积累 解析：选B　根据表格数据分析，随着细胞干重增加，黄酮产量也增加；随着细胞干重减少，黄酮产量也减少，说明黄酮产量与细胞干重呈正相关，A正确。黄酮属于次生代谢产物，次生代谢产物不是细胞生存和生长所必需的，B错误。氧气的供给有利于细胞呼吸为生命活动提供能量，对水母雪莲细胞生长、分裂和代谢是必需的，C正确。根据表格数据分析，转速为75 r/min时，细胞的相对生长速率(0.26)最大，黄酮产量(0.32 g/L)最高，D正确。 深化知能·发展素养：关注常考点的几个细节问题 (1)外植体：①优选分化程度较低的幼嫩组织(如茎尖、根尖、幼叶)，因为幼嫩组织细胞分裂能力强，脱分化与再分化效率高，成功率显著提升。②消毒而不是灭菌。先用流水充分冲洗，再用酒精消毒后立即用无菌水清洗2~3次；再用次氯酸钠溶液处理后，立即用无菌水清洗2~3次。 (2)培养基加蔗糖：植物组织培养中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压。植物体细胞杂交的培养基中要添加蔗糖溶液且浓度略大于原生质体内的浓度，以便去除细胞壁。 (3)光照：脱分化阶段不需要光，再分化阶段需要光。 (4)生长素与细胞分裂素的比值：比值高时，促进根的分化、抑制芽的形成；比值低时，促进芽的分化、抑制根的形成。 (5)标志：原生质体融合成功的标志是再生出细胞壁；植物体细胞杂交完成的标志是培育出杂种植株。 (6)植物细胞培养技术：该技术是工厂化生产相关代谢物的一条有效途径，其原理是细胞增殖。在生产中通常要将植物细胞培养到愈伤组织阶段，因为此时细胞分裂能力旺盛，代谢快，有利于产物生成。 任务(二)　动物细胞工程 　　　　　　　　　　　　　　　　 1.(2025·广东高考)将人眼睑成纤维细胞传代培养后，再培养形成支架，在该支架上接种人口腔黏膜上皮细胞，培养一段时间后分离获得上皮细胞片层，可用于人工角膜的研究。上述过程不涉及 (　　) A.制备细胞悬液　　　 B.置于5%CO2等适宜条件下培养 C.离心收集细胞 D.用胰蛋白酶消化支架后分离片层 解析：选D　动物细胞培养时，为增大细胞与培养液的接触面积，需要制备细胞悬液，A正确；应将动物细胞置于5%CO2等适宜条件下培养，其中5%的CO2可维持培养液的pH，B正确；在成纤维细胞传代培养过程中需要通过离心收集细胞，C正确；不能用胰蛋白酶消化支架，以避免将上皮细胞片层分离成单独细胞，D错误。 2.(2025·山东高考)利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是 (　　) A.对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B.卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C.培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D.可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 解析：选B　胚胎工程中，往往需要对雌性供体进行超数排卵处理，即注射外源促性腺激素促使其产生更多的卵母细胞，A正确；卵母细胞培养至MⅡ期(减数分裂Ⅱ中期)进行去核，B错误；动物细胞培养时，培养液需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害，C正确；PCR技术可以检测受体细胞中是否导入目的基因，则可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。 3.(2025·汕头模拟)双抗体夹心法是医学上常用的检测抗原含量的方法，流程如图所示。其中固相抗体是经由固相载体连接后的单克隆抗体，酶标抗体是一种具酶活性的抗体，二者可与抗原的不同部位特异性结合。下列有关分析错误的是 (　　) A.固相抗体的使用量应明显多于待测抗原的数量 B.酶标抗体作用是与待测抗原结合并催化其分解 C.制备相应单克隆抗体时需要使用动物细胞培养技术 D.若不洗去游离的酶标抗体会导致测量结果偏高 解析：选B　双抗体夹心法是医学上常用的检测抗原含量的方法，则其中与抗原结合并将其固定的固相抗体的使用量应明显多于待测抗原，否则导致结果偏小，A正确；由题图可知，酶标抗体可与抗原特异性结合，并催化指示底物分解，B错误；制备相应单克隆抗体时需要使用动物细胞培养技术，C正确；若不洗去游离的酶标抗体，游离的酶标抗体也可催化指示底物分解，会导致测量结果偏高，D正确。 4.(2025·黑吉辽蒙高考改编)下图是制备抗白细胞介素⁃6(IL⁃6)单克隆抗体的示意图。下列叙述正确的是 (　　) A.步骤①给小鼠注射IL⁃6后，应从脾中分离筛选T淋巴细胞 B.步骤②在脾组织中加入胃蛋白酶，制成单细胞悬液 C.步骤③加入灭活病毒或PEG诱导细胞融合，体现了细胞膜的流动性 D.步骤④经过克隆化培养和抗体检测筛选出了杂交瘤细胞 解析：选C　本实验的目的是制备抗IL⁃6单克隆抗体，步骤①用IL⁃6对小鼠进行免疫后，应从该小鼠的脾中分离筛选B淋巴细胞，A错误。步骤②在脾组织中加入胰蛋白酶或胶原蛋白酶，制成单细胞悬液，B错误。步骤③可以用灭活病毒或PEG诱导骨髓瘤细胞和B淋巴细胞融合，体现了细胞膜的流动性，C正确。步骤④的目的是筛选出杂交瘤细胞，应通过特定的选择培养基进行筛选；步骤⑤中经过克隆化培养和抗体检测筛选出能分泌特定抗体的杂交瘤细胞，D错误。 深化知能·发展素养 关注动物细胞工程中的3个“两次” (1)动物细胞培养中胰蛋白酶或胶原蛋白酶使用“两次” ①用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理动物的器官或组织，以制备单细胞悬液。 ②培养过程中发生接触抑制时，同样要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶使贴壁细胞分散开。 (2)动物细胞培养加入培养液“两次” ①组织分散成单个细胞后，加入培养液制成细胞悬液。 ②原代培养或传代培养的培养瓶或培养皿中加入培养液，培养细胞，促进细胞增殖。 (3)单克隆抗体的制备过程筛选“两次” ①利用选择培养基淘汰未融合或同种融合的细胞，获得杂交瘤细胞。 ②克隆化培养和抗体阳性检测获得能分泌所需抗体的杂交瘤细胞(利用多孔细胞培养板往往重复进行多次)。 任务(三)　胚胎工程 1.(2025·陕晋宁青高考)科研人员通过对绵羊受精卵进行基因编辑和胚胎移植等操作，获得了羊毛长度显著长于对照组的优良品系。下列叙述错误的是 (　　) A.为获取足够的卵子，需对供体绵羊注射促性腺激素进行超数排卵处理 B.为确保受体绵羊与供体绵羊生理状态一致，需进行同期发情处理 C.受精卵发育至桑葚胚阶段，细胞数量和胚胎总体积均增加 D.对照组绵羊的选择需考虑年龄、性别等无关变量的影响 解析：选C　为获取足够的卵子，可以对供体绵羊进行超数排卵处理，即注射促性腺激素以诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子，A正确；为提高胚胎移植的成功率，需要使受体绵羊与供体绵羊生理状态保持一致，因此需要对受体、供体进行同期发情处理，B正确；受精卵发育至桑葚胚的早期分裂阶段，细胞的数量不断增加，但胚胎的总体积并不增加，C错误；对照组绵羊的年龄、性别等属于无关变量，无关变量应保持适宜且相同，D正确。 2.(2025·江苏高考)梅花鹿和马鹿杂交后代生命力强、茸质好，但自然杂交很难完成，人工授精能解决此难题。胚胎工程技术的应用，可提高繁殖率，增加鹿场经济效益。下列相关叙述合理的是 (　　) A.采集的精液无需固定、稀释，即可用血细胞计数板检测精子密度 B.人工授精时，采集的精液经获能处理后才能输入雌性生殖道 C.超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂 D.母体子宫对胚胎的免疫耐受性低下是胚胎移植的生理学基础 解析：选C　采集的精液需要进行固定、稀释等处理后，才能用血细胞计数板检测精子密度，这样可以保证检测结果的准确性，A不合理。雌性动物的生殖道也可使精子获能，B不合理。超数排卵是指应用外源促性腺激素，诱发卵巢排出比自然情况下更多的成熟卵子，故可用含促性腺激素的促排卵剂进行超数排卵处理，C合理。母体子宫对胚胎的免疫耐受性高，一般不发生免疫排斥反应，D不合理。 3.(2025·黑吉辽蒙高考)研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列叙述错误的是 (　　) A.体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚 B.移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态 C.胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内孵化 D.为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植 解析：选C　在体细胞核移植技术中，将体细胞核注入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A正确；移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功能状态，B正确；早期胚胎是在透明带内进行孵化的，C错误；动物胚胎细胞分化程度低，胚胎细胞核全能性较体细胞核更高，为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D正确。 4.我国科研人员利用胚胎工程培育出两只优质纯种陶赛特羊，其具有生长发育快、耐热、适应干燥气候等特点，培育流程如下图所示。下列相关叙述错误的是 (　　) A.过程①可以使用促性腺激素对母羊A进行超数排卵处理 B.过程②的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 C.桑葚胚阶段进行胚胎分割时需要对内细胞团进行均等分割 D.陶赛特羊D的性状由A羊和B羊共同决定 解析：选C　过程①可用促性腺激素对陶赛特品种母羊A进行超数排卵处理，以获得更多的卵母细胞，A正确；过程②为胚胎移植，其实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移，B正确；桑葚胚阶段还未形成内细胞团，C错误；陶赛特羊D的性状由A羊和B羊共同决定，D正确。 深化知能·发展素养 胚胎工程中的4个“两” (1)受精的标志是观察到两个极体或者雌、雄原核。 (2)胚胎移植或分割的两个最佳时期：桑葚胚和囊胚期(要均等分割内细胞团)。 (3)胚胎移植过程中两次使用激素：第一次用于供体的超数排卵；第二次是对供、受体进行同期发情处理。 (4)人工操作的两种受精方式：①体外受精，经培养后的获能精子和成熟卵子结合，进而形成早期胚胎。 ②人工授精(也称人工体内受精)，采集的新鲜或解冻的精液，人工操作注入母体内，精子不经获能培养，在母体内完成受精作用。 [课时训练] 一、选择题 1.甘薯病毒造成了薯类品种保种难的问题，因此脱毒技术被广泛应用于薯类品种防退化。下列有关甘薯脱毒技术的说法，正确的是 (　　) A.一般选用甘薯茎的中段作为外植体进行组织培养 B.此外植体要依次用酒精和次氯酸钠消毒，每次消毒完还需用无菌水冲洗2~3次 C.打开试管苗封口几日后，应将其栽种于灭菌土壤中以防止真菌或细菌侵染 D.可通过接种病毒在个体水平检测是否成功获得脱毒苗 解析：选B　一般选用甘薯的顶端分生区附近(如茎尖)作为外植体进行组织培养来获得脱毒苗，因为这些部位病毒极少，甚至无病毒，A错误；外植体要依次用酒精和次氯酸钠消毒，每次消毒完需用无菌水冲洗2~3次，以除去消毒剂，防止影响后续的组织培养过程，B正确；打开试管苗封口几日后，应将其移栽到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境中进行炼苗，而不是直接栽种于灭菌土壤中，C错误；脱毒苗并不是不会感染病毒，检测是否成功获得脱毒苗应通过病毒的核酸检测等方法在分子水平检测，而不是通过接种病毒在个体水平检测，D错误。 2.(2025·黄冈模拟)我国航天员在太空中展示了动物细胞培养的相关实验，发现在太空微重力环境中组织细胞可以均匀悬浮，并在三维方向自由生长，不会因为密度的不同导致沉降速度不同，从而影响彼此间的接触与沟通，故细胞有望在空间生长出三维、立体的离体细胞或组织器官。下列有关叙述正确的是 (　　) A.在太空中进行动物细胞培养时，接触抑制现象会有所减弱 B.在太空中培养动物细胞无需将动物组织中的细胞分散成单个细胞 C.常规培养和太空培养的动物细胞进行传代培养时均可用离心法直接收集细胞 D.在太空中进行动物细胞培养时，需要对动物组织进行灭菌处理且需定期更换培养液 解析：选A　太空微重力环境中细胞可均匀悬浮，并在三维方向自由生长，接触抑制现象会有所减弱，A正确；动物细胞培养时，不管是在太空还是常规环境，都需要将动物组织中的细胞分散成单个细胞，这样才能保证细胞与培养液充分接触，利于细胞生长增殖，B错误；常规培养和太空培养的动物细胞进行传代培养时，细胞收集的方法可能会因微重力而有所不同，离心法并非在所有情况下都适用，C错误；动物组织不能进行灭菌处理，因为灭菌会杀死细胞，应该进行消毒处理，D错误。 3.(2025·银川模拟)单倍体胚胎干细胞是研究基因功能的理想细胞模型，它只含一个染色体组，但具有类似于胚胎干细胞的分裂、分化能力。研究人员利用小鼠细胞建立单倍体胚胎干细胞的操作流程如图所示。下列叙述正确的是 (　　) A.体外受精前，卵母细胞和精子都需要在获能液中培养使其获能 B.体外受精时，精子入卵后形成雄原核，同时卵子完成减数分裂Ⅰ C.培养得到的单倍体胚胎干细胞，遗传物质来自精子和卵母细胞 D.单倍体胚胎干细胞不含等位基因，常用于研究隐性基因的功能 解析：选D　体外受精前需要对精子进行获能处理，需要将卵母细胞培养至M Ⅱ期，A错误；精子入卵后形成雄原核，同时卵子完成减数分裂Ⅱ，B错误；由题图可知，单倍体胚胎干细胞的遗传物质仅来自卵母细胞，C错误；单倍体细胞仅含有一个染色体组，不存在同源染色体，因此不含等位基因，这使得隐性基因能够直接表现出来，因此单倍体胚胎干细胞是研究隐性基因功能的理想模型，D正确。 4.(2025·济南二模)某杂种植株的获取过程如图所示，下列叙述正确的是 (　　) A.叶片经消毒后需用流水多次冲洗，以避免消毒时间过长而产生毒害 B.图示①过程采用酶解法获取原生质体时，可用聚乙二醇调节渗透压 C.图示①过程通过抽真空处理使酶溶液渗入细胞间隙，提高酶解效率 D.图示④过程可用高Ca2+—低pH融合法获得杂种细胞 解析：选C　叶片经消毒后需用无菌水冲洗，A错误；聚乙二醇是诱导细胞融合的物质，不是调节渗透压的物质，通常加入甘露醇来调节渗透压，B错误；为了提高酶解效率，图示①过程可通过抽真空处理，利用负压使酶溶液快速渗入细胞间隙，通过处理，酶解效率会提高，C正确；图示④为诱导原生质体融合的过程，该过程可用高Ca2+—高pH融合法获得杂种细胞，D错误。 5.(2025·重庆三模)线粒体替代疗法(MRT)是一种细胞质替换技术，将目标细胞核转移到健康去核细胞中以预防细胞质基因遗传病，主要包括受精卵细胞核移植(PNT)和卵母细胞纺锤体—染色体复合物移植(ST)两种方法。已知在卵母细胞中，纺锤体区域的线粒体数量较少，而受精卵中线粒体均匀分布。下列说法正确的是 (　　) A.与ST相比，PNT的操作时间较早，细胞较为脆弱，因此成功率比ST低 B.与PNT相比，ST能够更好地避免线粒体DNA的遗传 C.只有通过PNT获得的胚胎才可能拥有三个个体的遗传物质 D.ST中的供体细胞已完成减数分裂Ⅱ 解析：选B　PNT是受精卵细胞核移植，与ST相比，操作时间较晚，A错误；因为卵母细胞中纺锤体区域线粒体数量较少，而受精卵中线粒体均匀分布，ST将卵母细胞纺锤体—染色体复合物移植到去核卵母细胞中，能更好地避免线粒体DNA的遗传，B正确；PNT是将受精卵的细胞核移植到去核的健康细胞中，ST是将卵母细胞的纺锤体—染色体复合物移植到去核的健康细胞中，这两种方法获得的胚胎都拥有三个个体的遗传物质，C错误；ST中的供体卵母细胞需受精后才能完成减数分裂Ⅱ，D错误。 6.(2025·哈尔滨模拟)生物3D打印技术打印心脏时采用的“生物墨水”是由干细胞与营养因子等材料组成的混合物。生物3D打印技术还包括植物细胞打印(如图)等，下列有关叙述错误的是 (　　) A.营养因子中应包含糖类、氨基酸、无机盐等物质 B.培养“生物墨水”中的动、植物细胞均应考虑温度、pH等条件 C.题中动、植物细胞打印成组织、器官等不能体现细胞的全能性 D.通常愈伤组织悬浮培养时需用胰蛋白酶将培养的组织或器官分散成单个细胞或细胞团 解析：选D　在细胞培养中，营养因子需要包含糖类(提供能量)、氨基酸(合成蛋白质的原料)、无机盐(维持细胞的渗透压和酸碱平衡等)等物质，对于“生物墨水”中细胞的培养也是如此，A正确；温度和pH会影响细胞内酶的活性等，所以培养“生物墨水”中的动、植物细胞均应考虑温度、pH等条件，以保证细胞的正常生命活动，B正确；动、植物细胞打印成组织、器官均没有发育成完整个体，没有体现细胞的全能性，C正确；在动物细胞悬浮培养时，通常需用胰蛋白酶等将培养的组织分散成单个细胞或细胞团，D错误。 7.(2025·岳阳三模)与自然受精胚胎相比，体细胞核移植(SCNT)囊胚发育率偏低。研究发现，SCNT胚胎中METTL3表达不足，导致相关mRNA降解，干扰了囊胚的正常发育。METTL3过表达可提高囊胚发育率，具体机制如下图所示。下列叙述正确的是 (　　) 注：m6A是细胞中常见的RNA甲基化修饰形式。 A.m6A修饰不会改变AURKB蛋白mRNA的核苷酸序列 B.m6A修饰可能提高了AURKB蛋白mRNA的稳定性，避免其被蛋白酶水解 C.体细胞核移植技术中的去核是去除卵母细胞中由核膜包被的细胞核 D.培养重构胚时，为减轻代谢物积累对细胞的伤害，可在培养液中加入抗生素 解析：选A　m6A修饰导致的AURKB蛋白mRNA的甲基化，不会改变自身核苷酸序列，但可能会影响翻译过程，从而改变生物的表型，A正确；据图可知，通过AURKB蛋白mRNA与m6A特异性结合，可维持AURKB蛋白mRNA的稳定性，防止RNA酶水解mRNA，B错误；体细胞核移植技术中的去核操作中选择的卵母细胞处于MⅡ期，此时的卵母细胞的核其实是纺锤体—染色体复合物，没有核膜，C错误；为了防止动物细胞培养过程中被细菌污染，可在培养液中加入一定量的抗生素，而为减轻代谢物积累对细胞的伤害，可以更换培养基，D错误。 二、非选择题 8.(2025·阳江三模)EV71是引发手足口病的一种人肠道病毒。为制备抗EV71的单克隆抗体，科研人员用小鼠进行实验。抗原的选择和制备过程：将EV71灭活病毒、EV71外壳蛋白VP1、EV71外壳蛋白VP2作为抗原分别注射到3组小鼠体内，引发小鼠机体的体液免疫产生相应的抗体。多次免疫后，取上述各组小鼠的血清和未免疫小鼠血清，测定抗体与抗原的结合强度。另外，为排除抗体与其他蛋白的非特异性结合对实验结果的影响，实验人员还测定了各组小鼠血清与非EV71蛋白的结合强度。结果如下图所示。 (1)EV71免疫的小鼠血清抗体　　　　(填“是”或“不是”)单一抗体，据图分析判断依据是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  (2)制备抗EV71单克隆抗体时，选用　　　　免疫的小鼠的B细胞效果最佳。单克隆抗体的制备流程图如下：  (3)与植物细胞融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是　　　　　　　。用选择培养基对融合后的细胞进行筛选的目的是获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行　　　　培养和　　　　，目的是获得　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  (4)图中体外的扩大培养，是从　　　　　　中获取大量的单克隆抗体。  解析：(1)由图分析可知，用EV71免疫的小鼠血清的抗体与VP1和VP2抗原的结合强度都较高，因此EV71免疫的小鼠血清抗体不是单一抗体。 (2)观察实验结果，第1、2组血清能结合EV71和VP1且强度接近，而第3组血清仅能结合VP2，对EV71结合强度很低。为了减轻单克隆杂交瘤细胞筛选的工作量，选用VP1免疫小鼠效果最佳。 (3)与植物细胞融合相比，诱导动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。用选择培养基对融合后的细胞进行筛选的目的是获得杂交瘤细胞，将其接种到96孔板，进行克隆化培养和抗体检测，目的是获得能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。 (4)图中体外的扩大培养，是从细胞培养液中获取大量的单克隆抗体。 答案：(1)不是　用EV71免疫的小鼠血清中的抗体与VP1和VP2抗原的结合强度都较高　(2)VP1　(3)灭活病毒诱导法　克隆化　抗体检测　能产生大量特异性抗体的杂交瘤细胞　(4)细胞培养液 学科网（北京）股份有限公司 $