第1章 发酵工程 综合拔高练（同步练习）-【学而思·PPT课件分层练习】2025-2026学年高二生物选择性必修3 生物技术与工程（人教版）

综合拔高练 高考真题练 考点1　传统发酵技术的应用 1.(2025河南,6)食醋和黄酒是我国传统的日常调味品,均通过发酵技术生产。下列叙述错误的是(　　) A.醋酸的发酵是好氧发酵,而酒精的发酵是厌氧发酵 B.以谷物为原料酿造食醋和黄酒时,伴有pH下降和气体产生 C.食醋和黄酒发酵①过程中,微生物繁殖越快发酵产物产率越高 D.使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一 ①辅助设问　黄酒发酵所需微生物的繁殖条件和发酵产酒精的条件分别是怎样的? 2.(2025云南,15)黄酒是我国古老的发酵酒之一,传统酿制中,先用蒸煮过的小麦或麸皮为原料,对之前发酵留存的少量酒曲(曲种)进行扩大制曲①;再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米②混合处理一段时间后,添加足量酒母(含酵母菌)完成发酵,压榨成品。下列说法错误的是(　　) A.小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质 B.为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质,扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌 C.糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率 D.将酒曲混合糯米、大米处理一段时间,是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖 ①关键点拨　扩大制曲类比于扩大培养,说明酒曲中含有发酵所需的微生物。 ②辅助设问　糯米、大米中主要储存的营养物质是什么?酵母菌主要利用的营养物质是什么? 考点2　微生物的培养技术及应用 3.(2025北京,14)动物细胞培养基一般呈淡红色。某次实验时,调控pH的CO2耗尽,培养基转为黄色。由此推断使培养基呈淡红色的是　(　　) A.必需氨基酸 B.抗生素 C.酸碱指示剂 D.血清 4.(2025江苏,11)从种植草莓的土壤中分离致病菌,简易流程如下:制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是(　　) A.制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B.将土样加入无菌水混匀,梯度稀释后取悬液加入平板并涂布 C.连续划线时,接上次划线的起始端开始划线 D.鉴定后的致病菌,可接种在斜面培养基上,并在室温下长期保存 5.(2025黑吉辽蒙,4)科研人员通过稀释涂布平板法筛选出高耐受且降解金霉素(C22H23ClN2O8)能力强的菌株,旨在解决金霉素过量使用所导致的环境污染问题。下列叙述错误的是(　　) A.以金霉素为唯一碳源可制备选择培养基 B.逐步提高培养基中金霉素的浓度有助于获得高耐受的菌株 C.配制选择培养基时,需确保pH满足实验要求 D.用接种环将菌液均匀地涂布在培养基表面 6.(2025山东,15)深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下,该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况①。其他条件相同且适宜,实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是(　　) 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注:“+”表示有;“-”表示无 A.可用平板划线法对该菌计数 B.制备培养基的过程中,应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C.由②④组可知,在以纤维素为唯一碳源的培养基上,该菌可在常压下生长 D.由③④组可知,高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 ①关键点拨　根据选项锁定组别,对照分析实验现象得出结论。 7.(多选题)(2025河北,18)隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻,多在海水中腐烂的植物叶片上生长繁殖,是工业生产DHA(一种功能性脂肪酸)的藻类之一。从海洋中筛选获得的高产油脂隐甲藻,可用于DHA的发酵生产。下列叙述正确的是(　　) A.隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源 B.采集海水中腐烂的叶片,湿热灭菌后接种到固体培养基,以获得隐甲藻 C.选择培养基中可加入抑制细菌生长的抗生素,以减少杂菌生长 D.适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量,以提高DHA产量 8.(2024全国甲,37)合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果,结果如图所示。回答下列问题。 (1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌数量,发现测得的细菌数量前者大于后者,其原因是  　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  (2)该同学从100 mL细菌原液中取1 mL加入无菌水中得到10 mL稀释菌液,再从稀释菌液中取200 μL涂布平板,菌落计数的结果为100,据此推算细菌原液中细菌浓度为　　　个/mL。  (3)菌落计数过程中,涂布器应先在酒精灯上灼烧,冷却后再涂布。灼烧的目的是　　　　　　　　　　　　　,冷却的目的是　　　　　　　　　　　　　　　　　。  (4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是　　　　　,判断依据是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答出2点即可)。  (5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈　　　色。  考点3　发酵工程及其应用 9.(不定项)(2025山东,20)酿造某大曲白酒的过程中,微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物,制曲过程需经堆积培养,培养时温度可达60 ℃左右;将大曲和酿酒原料混合,初步发酵后放入窖池;窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是(　　) A.堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母 B.大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物 C.窖池发酵过程中,酵母菌以无氧呼吸为主 D.窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 10.(2025陕晋青宁,3)我国是世界上最大的柠檬酸生产国。利用黑曲霉通过深层通气①液体发酵技术生产柠檬酸,流程如图。下列叙述错误的是(　　) A.淀粉水解糖为发酵提供碳源和能源 B.扩大培养可提供足量的黑曲霉菌种 C.培养基、发酵罐和空气的灭菌方法相同 D.通气、搅拌有利于溶解氧增加和柠檬酸积累 ①关键点拨　发酵生产柠檬酸是在有氧条件下进行的。 11.(2024山东,14)在发酵过程中,多个黑曲霉菌体常聚集成团形成菌球体,菌球体大小仅由菌体数量决定。黑曲霉利用糖类发酵产生柠檬酸时需要充足的氧。菌体内铵离子浓度升高时,可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制。下列说法错误的是(　　) A.相同菌体密度下,菌球体越大柠檬酸产生速率越慢 B.发酵中期添加一定量的硫酸铵可提高柠檬酸产量 C.发酵过程中pH下降可抑制大部分细菌的生长 D.发酵结束后,将过滤所得的固体物质进行干燥即可获得柠檬酸产品 12.(2024江西,11)井冈霉素是我国科学家发现的一种氨基寡糖类抗生素,它由吸水链霉菌井冈变种(JGs,一种放线菌,菌体呈丝状生长)发酵而来,在水稻病害防治等领域中得到广泛应用。下列关于JGs发酵生产井冈霉素的叙述,正确的是(　　) A.JGs可发酵生产井冈霉素,因为它含有能够编码井冈霉素的基因 B.JGs接入发酵罐前需要扩大培养,该过程不影响井冈霉素的产量 C.提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,会提高井冈霉素的产量 D.稀释涂布平板法不宜用于监控JGs发酵过程中活细胞数量的变化 高考模拟练 应用实践 1.(2025江苏连云港月考)黑茶是一种后发酵茶,通常用采摘的鲜茶经过数道工序制成,富含多肽、氨基酸、维生素等营养物质。黑茶刚制成时有酒香气,滑润甘甜,保存时间越久的老茶,茶香味越浓厚。下列叙述错误的是(　　) A.黑茶制作过程主要利用酵母菌等多种微生物进行发酵 B.发酵过程中发酵条件变化会影响微生物的生长繁殖和代谢途径 C.黑茶发酵可以将蛋白质等大分子转化成小分子有机物 D.新茶发酵完成后要进行灭菌并密封,有利于茶的长期保存 2.(2025湖北十堰月考)垃圾分类有利于变废为宝,减少环境污染。如图为分类后餐厨垃圾资源化处理的流程设计。下列叙述错误的是(　　) A.压榨出的油水混合物可再加工,生产出多种产品 B.添加的木屑有利于堆肥体通气,还可作为某些微生物的碳源 C.X中需要添加合适的菌种,才能产生沼气 D.为保证堆肥体中微生物的活性,不宜对堆肥体进行翻动 3.(2025江西宜春期中)双层平板法是对噬菌体进行计数的常用方法。具体做法是:在无菌培养皿中倒入琼脂含量为2%的培养基凝固成底层平板后,将琼脂含量为1%的培养基熔化并冷却至45~48 ℃,然后加入敏感指示菌和待测噬菌体稀释悬液的混合液,充分混匀后立即倒入底层平板上形成双层平板(见下图)。培养一段时间后,在双层培养基的上层会出现透亮的无菌圆形空斑——噬菌斑,下列有关说法正确的是(　　) A.配制好的培养基灭菌后还需要添加缓冲液调节pH B.若利用双层平板法对T2噬菌体进行计数,可选用农杆菌作敏感指示菌 C.上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是噬菌体单独在培养基上繁殖形成的噬菌斑 D.与底层平板相比,上层培养基中琼脂浓度较低的好处是形成的噬菌斑较大,有利于计数 4.(2025湖南衡阳月考)某研究小组从黄色短杆菌(能合成L-亮氨酸)中筛选L-亮氨酸缺陷型(不能合成L-亮氨酸)突变菌株,培养皿A和培养皿B的培养基中含有L-亮氨酸,培养皿C的培养基中不含有L-亮氨酸,实验流程如图所示。下列相关叙述不正确的是(　　) A.进行②过程的顺序是先接种至培养皿C,再接种至培养皿B B.②接种时,要使培养皿B和培养皿C的菌种接种位置相同,便于将来比较培养皿B和培养皿C中菌落差异 C.培养皿A、B、C中的培养基都要使用固体培养基的原因是便于观察菌落特征和分离目的菌株 D.研究人员应该从培养皿C中选取目的菌落,选取目的菌落位置的依据是培养皿C中有菌落,而在培养皿B中的对应位置没有菌落 5.(2025福建泉州月考)细菌X合成的tcel蛋白和tcil蛋白使其在与其他细菌的竞争中占优势,其中tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白。研究人员利用野生型细菌X及其不同突变体进行了如下实验:在固体培养基表面放置一张能隔离细菌的滤膜,将一种菌(下层菌)滴加在滤膜上后再放置第二张滤膜,滴加等量的另一种菌(上层菌),共同培养后,对上、下层菌计数得到的结果如图所示。下列叙述正确的是(　　) A.实验中的培养皿、固体培养基和滤膜均需要进行消毒处理 B.对上、下层菌计数可以将滤膜菌体稀释后采用血球计数板计数 C.由甲、乙、丙三组结果可推测tcil蛋白能够中和tcel蛋白的毒性 D.野生型细菌X在与tcel-tcil双突变体和tcel突变体的竞争中均占优势 6.(高考新发现)(2025江西赣州月考)某野生型细菌能通过图1途径合成色氨酸,从而在不含色氨酸的培养基上正常生长繁殖,而其突变株则不能。将突变株TrpB、TrpC、TrpE(仅图1中的某一步受阻)分别划线接种在图2培养基的Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ区域,培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖,继续培养后发现Ⅰ区域的两端和Ⅱ区域的一端的菌株继续生长增殖,而Ⅲ区域菌株不再生长。下列叙述错误的是　(　　) A.TrpC菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅰ区域的一端 B.3种突变菌株均能将积累的中间产物分泌到细胞外 C.该培养基中含有少量色氨酸,酸碱度为中性或弱碱性 D.TrpE菌株不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶 迁移创新 7.(2025北京育才中学月考)我国是全球第一柑橘种植和消费国,然而白地霉侵染引起的酸腐病导致柑橘在储运过程中腐烂,造成经济损失。研究者对酸腐病进行系列研究。 (1)白地霉从柑橘果实伤口处获得其生长繁殖所必需的无机盐、水以及　　　　　　等营养物质,二者之间的种间关系是　　　　。  (2)将桔梅奇酵母与白地霉菌种用　　　　　　法分别接种到不同的平板上进行培养,再用无菌水分别制备菌种悬液,利用　　　　　　　　　　在显微镜下计数,并稀释至实验所需浓度。  (3)探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作用。 ①在柑橘果实中部等距离刺两个孔,其中一孔接种白地霉和桔梅奇酵母菌悬液。一段时间后统计果实发病率并测量白地霉菌丝生长情况如图1、图2: 另一个孔作为对照组的处理是　　　　　　　　　　。综合图1、图2结果,推测　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  ②铁是真菌生长的必需元素,是胞内重要酶活性中心的组成部分。普切明酸是桔梅奇酵母产生的一种水溶性铁螯合剂,能快速在培养基中扩散并与其中的Fe3+形成稳定红色复合物。研究者配制含有不同浓度FeCl3(单位:mg/L)的培养基,实验处理及结果如图3所示。 桔梅奇酵母菌落周围出现红色抑菌圈的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　;随培养基中FeCl3浓度的增加,红色抑菌圈颜色加深但变窄的原因是　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　。  ③研究者利用普切明酸合成基因敲除的酵母突变体,参照②的方法进行实验,观察到　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　,从而证明普切明酸的产生是桔梅奇酵母具有生物防治效力的重要原因。  (4)基于上述研究,你是否支持桔梅奇酵母推广应用于柑橘防腐保鲜,并说明理由:  　 。  答案与分层梯度式解析 综合拔高练 高考真题练 1.C 2.B 3.C 4.B 5.D 6.D 7.ACD 9.BC 10.C 11.D 12.D 1.C　真题降维 　　黄酒发酵主要利用了酵母菌,酵母菌是兼性厌氧菌,可以进行有氧呼吸产生较多能量,利于其繁殖;也可以进行无氧呼吸,产生酒精和CO2。 醋酸发酵的微生物是醋酸菌(需氧型),故醋酸的发酵是好氧发酵;而酒精发酵的微生物是酵母菌(兼性厌氧型),通过无氧呼吸产生酒精,A正确。以谷物为原料酿造食醋和黄酒时,产物中的醋酸、CO2等会使pH下降,B正确。酵母菌主要在有氧条件下繁殖,在无氧条件下产酒精,一般繁殖越快,酒精产率越低,C错误。 2.B　小麦、麸皮等原料含有蛋白质、糖类等多种营养成分,可以为微生物提供氮源、碳源等营养物质,A正确;酒曲本身含有发酵所需的菌种,扩大制曲前不能对酒曲灭菌,B错误。 归纳总结 　　利用谷物、秸秆等为原料进行酒精发酵,要注意需要有“糖化”的过程。原因是酒精发酵时微生物的呼吸底物一般是葡萄糖,故需要将谷物中的淀粉通过淀粉酶分解形成葡萄糖(2025年山东卷第20题B),或将秸秆中的纤维素通过纤维素酶分解形成葡萄糖[2023年全国乙卷第37题(1)]。 3.C　分析题意,CO2可用于调控培养基的pH,pH改变导致培养基颜色发生变化。必需氨基酸是细胞生长的营养成分,血清提供生长因子等,抗生素可用于抑制微生物污染,它们不导致培养基颜色发生变化,酸碱指示剂在培养基中可用于显示pH变化,故选C。 4.B　紫外线照射只能起到消毒作用,不能起到灭菌效果,制备的培养基通常采用高压蒸汽灭菌(湿热灭菌),A错误;稀释涂布平板法是分离菌种的常用方法,从土壤中分离致病菌,可将土样加入无菌水混匀,梯度稀释后取悬液接种于平板上并涂布,B正确;平板划线时,除首次划线外,每次划线应从上一次划线的末端开始,而不是从上一次划线的起始端开始,C错误;将目的菌接种到斜面培养基上,并在4 ℃左右的环境下保存,而非常温下保存,D错误。 5.D　以金霉素为唯一碳源的选择培养基,仅允许能利用金霉素的微生物生长(其他无法利用金霉素的微生物的生长被抑制),符合选择培养基的设计原理,A正确;逐步提高金霉素浓度可模拟环境胁迫,筛选出耐受性更强的菌株,B正确;培养基的pH需根据目标微生物的生长需求调整,是配制培养基的基本要求,C正确;稀释涂布平板法需用涂布器将菌液均匀涂布在培养基表面,用接种环涂布无法保证菌液均匀分布在培养基表面,D错误。 6.D　真题降维 　　由①③组可知,无论是常压条件还是高压条件,该菌都不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长;由②④组可知,高压条件下,该菌能在以纤维素为唯一碳源的培养基上生长,而常压条件下不能。 平板划线法不能用于计数,可用来分离和纯化微生物,A错误;制备固体培养基(琼脂平板)应先高压蒸汽灭菌,待培养基冷却至50 ℃左右时,再分装倒入无菌的培养皿中(即“倒平板”),B错误;由上述分析可知,该菌不能在常压下在以纤维素为唯一碳源的培养基上生长,也不能在高压下在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长,C错误,D正确。 7.ACD 关键信息 选项判断 隐甲藻是一种异养微藻,多在海水中腐烂的植物叶片上生长繁殖 隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源,A正确; 对腐烂叶片进行湿热灭菌会杀死隐甲藻,B错误 隐甲藻是一种真核微藻 抗生素可抑制细菌生长,对隐甲藻无影响,C正确 隐甲藻是一种好氧微藻 增加溶氧量可促进隐甲藻生长繁殖,进而提高DHA产量,D正确 8.答案　(1)显微镜直接计数法统计的结果一般是活菌数和死菌数的总和;而菌落计数法中当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察到的只是一个菌落　(2)5×103　(3)杀灭涂布器上杂菌,防止杂菌污染　防止涂布器温度过高杀死平板上的目标菌　(4)A　①相同处理时间内,活菌减少量最多;②活菌减少量相同时,处理时间最短　(5)黑(或深紫) 解析　(2)1 mL细菌原液加入无菌水中得到10 mL稀释菌液,相当于稀释10倍,再取200 μL(0.2 mL)涂布平板,生长出100个菌落,故1 mL细菌原液中细菌数为100÷0.2×10=5×103(个)。(4)判断消毒液杀菌效果,从两个角度出发:一个是相同处理时间活细菌的减少量;一个是活细菌减少量相同时处理的时间。  9.BC　堆积培养过程中温度可达60 ℃左右,有利于筛选出糖化所需的微生物,而非筛选出酿酒酵母,A错误。大曲主要是提供糖化所需的微生物,即将原料中的淀粉转化为糖浆,因此大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物,B正确。窖池发酵过程主要是酵母菌无氧呼吸产生酒精的过程,需要密闭环境,C正确。若窖池密封不严导致O2进入窖池,醋酸菌可能大量繁殖,通过细胞代谢将酒精转化为乙酸,使酒变酸;而乳酸菌发酵产生乳酸需要严格无氧条件,O2存在时乳酸菌代谢受抑制,乳酸含量不会显著增加,因此窖池密封不严使酒变酸是由乙酸增加引起的,D错误。 10.C　培养基、发酵罐和空气的灭菌方法不同,空气一般用过滤除菌的方式,培养基一般用高压蒸汽灭菌的方式,发酵罐可以用高温灭菌的方式等,C错误;利用黑曲霉通过深层通气液体发酵技术生产柠檬酸,通气、搅拌有利于溶解氧增加,有利于发酵产物柠檬酸的积累,D正确。 11.D　相同菌体密度下,菌球体越大,单个黑曲霉菌体越不容易获得营养物质及氧气,柠檬酸产生速率越慢,A正确。 关键信息 选项判断 黑曲霉菌体内铵离子浓度升高时,可解除柠檬酸对其合成途径的反馈抑制 发酵中期可通过添加一定量的铵离子以维持较高的柠檬酸生产速率,B正确 发酵过程中会产生柠檬酸 柠檬酸会使发酵液pH下降,可抑制大部分细菌的生长,C正确 柠檬酸是菌体代谢物,需通过提取、分离和纯化等措施获得 发酵结束后,过滤得到的固体物质是菌体(单细胞蛋白),不是柠檬酸,D错误 12.D　 关键信息 选项判断 井冈霉素是氨基寡糖类物质,并非蛋白质,因而不是基因表达的直接产物 JGs体内没有编码井冈霉素的基因,井冈霉素是JGs内基因通过控制相关酶的合成来控制代谢过程,进而控制合成的,A错误 扩大培养可以增加菌种数量,条件适宜时,一定时间内菌种数多,代谢产物也会更多 JGs接入发酵罐前扩大培养可提高井冈霉素的产量,B错误 发酵培养基中营养物质的浓度过高,会导致培养基的渗透压升高,菌体细胞失水,不利于JGs的生长和代谢 提高JGs发酵培养基中营养物质的浓度,不一定会提高井冈霉素的产量,C错误 稀释涂布平板法可以用来对活菌进行计数,但长出菌落再统计需要一定的时间,不宜用于监控发酵过程中活细胞数量的变化,D正确。 高考模拟练 1.D 2.D 3.D 4.D 5.C 6.A 1.D 题干信息 选项判断 含多肽、氨基酸等 黑茶发酵可以将蛋白质等大分子转化成小分子有机物,C正确 保存时间越久,茶香味越浓厚 保存过程中仍在发酵,若新茶发酵完成后灭菌,则不利于后期发酵,D错误 发酵一般为微生物的无氧呼吸(部分为有氧呼吸),温度、pH、氧气含量等发酵条件都会影响到微生物的生长繁殖和代谢途径,B正确。 2.D　添加木屑(增加了沉渣的间隙)、翻动等利于通气,利于好养微生物生长繁殖,木屑中的纤维素等也可作为某些微生物的碳源,B正确,D错误;据图知,沉渣形成X需经过灭菌,X中需要添加合适的菌种,通过分解有机物才能产生沼气,C正确。 3.D　培养基配制时,要先调pH再进行灭菌,A错误。 必备知识 选项判断 T2噬菌体专门寄生在大肠杆菌体内 不可选用农杆菌作T2噬菌体的敏感指示菌,B错误 噬菌体无法单独在培养基上繁殖 上层平板上出现的透亮无菌圆形空斑是敏感指示菌裂解后形成的,C错误 上层培养基琼脂浓度低,噬菌体容易扩散,噬菌斑较大,形态更清晰,便于计数,D正确。 拓展延伸 　　双层平板法是一种常用的测量噬菌体数量或效价的方法,其原理如下: 　　(1)噬菌斑形成:将噬菌体样本与宿主细菌在上层琼脂混合均匀,铺在底层琼脂平板上。噬菌体在平板上扩散并感染宿主细菌,随着噬菌体在细菌细胞内增殖,会使细菌裂解死亡,形成肉眼可见的噬菌斑。每个噬菌斑是由一个噬菌体粒子感染并裂解周围细菌后形成的,所以可以通过计数噬菌斑的数量来确定噬菌体的数量。 　　(2)限制噬菌体扩散:上层琼脂的存在可以限制噬菌体的扩散范围,使噬菌体只能在局部区域感染细菌,从而形成清晰、独立的噬菌斑。如果没有上层琼脂,噬菌体可能会在平板上广泛扩散,导致噬菌斑相互重叠,难以准确计数。 4.D 5.C　为避免杂菌污染,实验中的滤膜、培养皿、固体培养基等均需灭菌处理,A错误。研究不同微生物的竞争优势,应对不同微生物的活菌进行计数(稀释涂布平板法计数),而显微镜直接计数不能区分死菌和活菌,且对细菌计数应用细菌计数板,B错误。 已知:甲组(上、下层菌均为野生型)竞争指数约为1(题图信息),tcel蛋白是一种有毒性的分泌蛋白(题干信息),分析如下,可知C正确,D错误。 对照 结果分析 推测 甲、 乙组 乙组竞争指数高于1→上层菌(野生型)数量多→野生型在与tcel-tcil双突变体的竞争中占优势 乙组中,野生型分泌的有毒性的tcel蛋白透过滤膜作用于tcel-tcil双突变体,而tcel-tcil双突变体无法产生tcil蛋白中和tcel蛋白的毒性,则野生型在竞争中占据优势 甲、 丙组 丙组竞争指数低于1→上层菌(野生型)数量少→野生型在与tcel突变体的竞争中占劣势 丙组中,野生型可产生tcel蛋白作用于tcel突变体,tcel突变体可以产生tcil蛋白中和tcel蛋白的毒性 6.A　审题指导 　　根据题干信息分析图2: 结合题干根据以上分析推知,TrpC将邻氨基苯甲酸转化为吲哚受阻,但能利用吲哚合成色氨酸;TrpE菌株能产生中间产物吲哚,故TrpC菌株继续生长增殖的一端为靠近Ⅲ区域的一端,A错误。TrpE菌株不再生长是由于缺乏催化吲哚合成色氨酸的酶,导致色氨酸缺乏,D正确。根据以上分析可知,培养基中3种突变菌株均能将积累的中间产物分泌到细胞外,使其他突变体得以生存,B正确。据题干信息“培养短时间内三个区域均有少量细菌生长增殖”可知,该培养基中含有少量色氨酸,培养细菌一般将培养基的pH调至中性或弱碱性,C正确。 7.答案　(1)碳源、氮源　寄生　(2)平板划线(或稀释涂布平板)　血细胞计数板　(3)①接种等量白地霉悬液　桔梅奇酵母通过抑制白地霉菌丝的生长来显著降低酸腐病害　②桔梅奇酵母产生的普切明酸固定培养基中的Fe3+生成红色复合物,白地霉不能利用这种形式的Fe3+,从而生长受抑制　普切明酸与高浓度的Fe3+结合形成的红色复合物增加(颜色加深),随着Fe3+的补足,对白地霉的抑制效果逐渐变弱(抑菌圈变窄)　③对照组出现抑菌圈,而实验组没有出现抑菌圈　(4)支持,桔梅奇酵母对柑橘酸腐病有明显的控制效果,且作为生防制剂,不易产生抗病性(或不支持,可能产生抗生素、影响人体健康、酵母菌可能影响果实品质、菌种生存条件可能较为严苛、对有益菌有抑制作用)(合理即可) 解析　(2)微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法;在显微镜下对相对较大的酵母菌细胞、霉菌孢子等的计数要利用血细胞计数板。 (3)①根据实验目的分析实验如下: 实验目的 探究桔梅奇酵母对酸腐病的生物防治作用 自变量 桔梅奇酵母的有无 因变量 酸腐病的发病情况 因变量的 观测指标 结合实验结果图可知,为菌丝长度和果实发病率 实验结果 (图1、2) 与对照组相比,接种桔梅奇酵母后果实的发病率显著降低,菌丝长度保持在较低水平且基本不变 实验结论 推测桔梅奇酵母通过抑制白地霉菌丝的生长来显著降低酸腐病害 ②根据题干信息和实验结果分析如下: ③根据实验结论演绎如下表: 组别 实验组 对照组 酵母类型 普切明酸合成基因敲除的酵母突变体 野生型酵母 原理及结 果分析 不产生普切明酸→加入Fe3+不能形成红色复合物,对白地霉无抑制作用→不出现抑菌圈 产生普切明酸→与Fe3+形成红色复合物,抑制白地霉生长→出现抑菌圈 7 学科网（北京）股份有限公司 $