课时测评2 微生物的基本培养技术-【金版新学案】2025-2026学年高中生物选择性必修3 生物技术与工程同步课堂高效讲义配套练习word（人教版，单选）

课时测评2　微生物的基本培养技术 (时间：40分钟　满分：60分) (本栏目内容，在学生用书中以独立形式分册装订！) (1－8题，每小题2分，共16分) 知识点一　培养基的配制 1.(2024·江西南昌高三开学考试)培养基是人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。下列关于培养基的叙述错误的是(　　) A.制作固体培养基时可加入琼脂作为凝固剂 B.培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素 C.培养霉菌时需要将培养基调至碱性 D.对培养基进行灭菌可以采用湿热灭菌 答案：C 解析：向液体培养基中加入琼脂可以制作成固体培养基，A正确；维生素是细菌生长的必需营养物质，培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素，B正确；培养霉菌时需要将培养基调至酸性，C错误；对培养基进行灭菌可以利用高压蒸汽灭菌，属于湿热灭菌，D正确。 2.(2025·山东临沂高二月考)下列关于微生物培养的叙述，正确的是(　　) A.微生物在培养液中培养一段时间后用显微镜观察，可见到形成的菌落 B.NH3可以作为硝化细菌的氮源和能源物质 C.固体培养基中加入的琼脂能提供额外的碳源和氮源 D.某些细菌生长过程中需要额外补充营养物质，比如培养酵母菌时，要添加维生素 答案：B 解析：微生物在固体培养基表面或内部生长，可以形成肉眼可见的菌落，A错误；硝化细菌可利用氧化NH3释放的能量合成有机物，B正确；固体培养基中加入的琼脂作为凝固剂，不能被微生物分解利用，故琼脂不能提供额外的碳源和氮源，C错误；酵母菌不属于细菌，D错误。 知识点二　无菌技术 3.(2024·河北保定高三期末)在生产、生活和科研实践中，经常通过消毒和灭菌来避免杂菌的污染。下列相关叙述错误的是(　　) A.玻璃器皿和金属用具可利用干热灭菌箱进行干热灭菌 B.巴氏消毒法处理牛奶，能减少牛奶中营养物质的损失 C.无水酒精能加速蛋白质脱水，常用酒精对病毒进行灭菌 D.由于紫外线能破坏DNA结构，病房中常采用紫外线进行消毒 答案：C 解析：玻璃器皿和金属用具常用干热灭菌法灭菌，A正确；巴氏消毒法既能杀死牛奶中绝大多数的微生物，又不破坏牛奶中的营养物质，B正确；体积分数为70％～75％的酒精能加速蛋白质的脱水，从而达到消毒的目的，C错误；紫外线通过破坏蛋白质和DNA结构来杀死微生物，常用于密闭空间内空气的消毒，D正确。 4.(2024·海南高三期末)无菌技术主要包括消毒和灭菌，是微生物学实验成功的关键。下列有关叙述错误的是(　　) A.获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染 B.倒平板和接种操作都需要在酒精灯的火焰附近进行 C.平板划线时，若划线区域有五个，则接种环至少需要灼烧五次 D.与紫外线照射相比，高压蒸汽灭菌防止杂菌污染的效果更好 答案：C 解析：要获得纯净的微生物培养物必须要保证没有杂菌污染，A正确；为了防止杂菌污染，倒平板和接种操作都需要在酒精灯的火焰附近进行，B正确；第一次划线前灼烧一次，每次划线后灼烧一次，因此若划线区域有五个，则接种环至少需要灼烧六次，C错误；与紫外线照射相比，高压蒸汽灭菌法灭菌更彻底，防止杂菌污染的效果更好，D正确。 知识点三　酵母菌的纯培养 5.(2024·广东深圳一模)在“酵母菌纯培养”的实验课中，学生进行平板划线的实践操作。下列叙述错误的是(　　) A.开始接种前和划线完毕后都要将接种环进行灼烧 B.棉塞拔出后和塞上前装有培养液的试管口都要通过火焰 C.在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液 D.将皿盖完全打开后用接种环在培养基表面连续划线 答案：D 解析：接种前将接种环放在酒精灯火焰上灼烧灭菌，并需要在酒精灯火焰旁冷却才能接种，划线完毕后要将接种环进行灼烧，以防止污染环境和感染操作者，A正确；接种环蘸取菌液前，需将试管口通过火焰，蘸取菌液后，需将试管口通过火焰并塞上棉塞，通过灼烧防止杂菌污染，B正确；酒精灯火焰旁存在无菌区域，在酒精灯火焰附近用接种环蘸取一环菌液，C正确；划线操作时，为了防止杂菌污染，培养皿盖不能完全打开，操作时需要在酒精灯火焰旁进行，D错误。 6.(2025·肇庆模拟)幽门螺杆菌(含有脲酶)感染是急慢性胃炎和消化性溃疡的主要致病因素。在患者体内采集样本并制成菌液后，进行分离培养。实验基本步骤如图所示，图中X表示(　　) 配制培养基→灭菌、倒平板→X→培养→观察 A.调节pH B.接种 C.加入酚红指示剂 D.将培养基倒置 答案：B 解析：培养基配制好后，经过高压蒸汽灭菌，然后在无菌条件下进行接种，再进行培养、观察，故X是接种，B正确。 7.(2025·江苏卷)从种植草莓的土壤中分离致病菌，简易流程如下：制备土壤悬液、分离、纯化、鉴定。下列相关叙述正确的是(　　) A.制备的培养基可用紫外线照射进行灭菌 B.将土样加入无菌水混匀，依次等比稀释后取悬液加入平板并涂布 C.连续划线时，接上次划线的起始端开始划线 D.鉴定后的致病菌，可接种在斜面培养基上，并在室温下长期保存 答案：B 解析：制备的培养基需用高压蒸汽灭菌法灭菌，紫外线仅用于表面或空气消毒，无法灭菌，A错误； 将土样加入无菌水制成悬液，经依次等比稀释后，取各稀释度菌液涂布于培养基表面，分离并计数，B正确； 连续划线时，每次应从上次划线的末端开始，以逐步稀释菌体，若从起始端开始无法有效分离单菌落，C错误；斜面培养基保存菌种需置于4 ℃短期保存，长期保存应使用甘油管藏法(－20 ℃)，室温下无法长期保存，D错误。 8.(2025·辽宁营口模拟)下列关于实验室培养和纯化酵母菌过程中的部分操作的说法，正确的是(　　) A.培养酵母菌的试剂和器具都要进行湿热灭菌 B.称量、溶化和倒平板都需要在酒精灯火焰旁进行 C.倒好的平板要立即使用，以免表面干燥，影响酵母菌生长 D.将平板倒置放入适宜温度的恒温培养箱中培养 答案：D 解析：接种环等常用灼烧灭菌法处理，吸管、培养皿等常用干热灭菌法处理，培养基及多种器材用湿热灭菌法处理，A错误；倒平板、接种需要在酒精灯火焰旁进行，而称量、溶化不需要在酒精灯火焰旁进行，B错误；倒好的平板需要冷却后使用，C错误；为防止冷凝水污染培养基，平板需倒置放入恒温箱中培养，D正确。 (9－13题，每小题4分，共20分) 9.(2025·中山高二期末)为了研究抗生素X对四种不同细菌(1、2、3、4)的作用效果，有人做了如图的抗菌实验，四天后菌落形态如图所示，则下列相关分析正确的是(　　) A.抗生素X对细菌3的抑制效果最好 B.抗生素X对细菌4的抑制效果最差 C.抗生素X对细菌2的抑制比对细菌3的抑制效果好 D.可以用抗生素X去治疗由细菌1引起的疾病 答案：C 解析：四天后细菌2的灰色区域最短，说明抗生素X对细菌2的抑制效果最好，A错误；四天后细菌1可在浸透抗生素X的纸条处生长，说明抗生素X对细菌1的抑制效果最差，B错误；根据图中结果可知，抗生素X对细菌2的抑制效果比对细菌3的抑制效果好，C正确；由图可知，抗生素X对细菌1不起作用，因此不能用抗生素X去治疗由细菌1引起的疾病，D错误。 10.(2025·江苏苏州模拟)纸片扩散法是药敏试验中一种常用的方法。取少量大肠杆菌的培养液，均匀涂在培养皿内的培养基上，再放上4片含有链霉素(抗生素的一种)的圆形滤纸，然后在无菌适宜条件培养12～16 h，滤纸片周围出现抑制大肠杆菌生长的环圈(简称抑菌圈，见图)。下列相关叙述错误的是(　　) A.图1中的培养基需冷却至50 ℃左右时再倒平板，该操作需要在酒精灯旁完成 B.图2所示培养基的放置方式，能防止水分过快蒸发和冷凝水珠冲散菌落 C.图3培养皿上大肠杆菌的接种方式为稀释涂布平板法，Ⅳ号纸片上抗生素浓度最高 D.图3所示的抑菌圈内出现大肠杆菌菌落的原因是链霉素使其发生了基因突变 答案：D 解析：Ⅳ的抑菌圈中出现了少数几个菌落说明这几个菌落出现了抗药性，抗药性的获得是由于这些大肠杆菌发生了基因突变，抗生素只是将具有抗药性突变的大肠杆菌从中筛选出来，D错误。 11.(2024·山东日照模拟)某种除草剂(一种含氮有机物，在水中溶解度低，含一定量该除草剂的培养基不透明)在土壤中不易降解，长期使用会污染土壤。为修复被该除草剂污染的土壤，按下图过程选育能降解该除草剂的细菌。下列叙述正确的是(　　) A.图中培养基分装前需进行灭菌 B.图中接种方法为平板划线法，该方法可用于细菌计数 C.实验过程中需要将培养皿中培养基调至中性或弱碱性 D.培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源相同 答案：C 解析：培养基分装到锥形瓶后再进行灭菌，A错误；平板划线法用于分离菌种，不能用于细菌记数，B错误；一般培养细菌时需要将培养基调至中性或弱碱性，C正确；培养基上形成的两种菌落中的细菌所利用的氮源不同，有透明圈的，是能够利用除草剂中的氮源，没有透明圈的，不能利用除草剂中的氮源，D错误。 12.(2025·无锡模拟)生长图形法是一种测定微生物营养需求的简便方法。为探究某嗜热菌所需生长因子的种类，某研究小组把该菌的悬浮液与不含任何特殊营养物质但含有其他必需营养物质的培养基混合后倒平板，然后在平板上划分数区，将甲、乙、丙三种生长因子分别添加到不同区域，培养结果如图所示。下列说法不正确的是(　　) A.倒平板后直接培养可判断有无污染 B.将所有平板放置在适宜的37 ℃下倒置培养并观察 C.图示结果表明该菌需要特殊营养物质乙和丙 D.生长图形法还可用于某些菌种的筛选 答案：B 解析：倒平板后不接种任何菌种直接进行培养观察有无菌落的出现，可以判断培养基有无污染，A正确；该菌为嗜热菌，应放置在其适宜的高温条件下培养，而不是37 ℃，B错误；图中嗜热菌在添加了乙、丙特殊营养物质的区域生长，故该菌需要的特殊营养物质是乙和丙，C正确；不同的菌种所需的特殊营养物质不同，利用生长图形法可用于某些菌种的筛选，菌种只会在提供其需要的生长因子的区域生长，D正确。 13.(2024·山东淄博高三期末)生物指示剂常用于对医疗器械高压蒸汽灭菌的质量监测。将某批次的多支生物指示剂(如图)与医疗器械一并放入压力锅中，待灭菌完成后，挤破安瓿瓶，让含芽孢的菌片(嗜热脂肪芽孢杆菌)与培养液接触，培养并检测结果。下列说法错误的是(　　) A.安瓿瓶内培养液的成分应适于嗜热脂肪芽孢杆菌的生长 B.制备生物指示剂时，安瓿瓶内的培养液需要进行灭菌处理 C.嗜热脂肪芽孢杆菌的热耐受性大于已知污染菌的热耐受性 D.当压力锅中的生物指示剂培养结果为阴性时说明医疗器械灭菌合格 答案：D 解析：生物指示剂待灭菌完成后，挤破安瓿瓶，让嗜热脂肪芽孢杆菌与培养液接触，培养并检测结果，则安瓿瓶内培养液的成分应适于嗜热脂肪芽孢杆菌的生长，A正确。制备生物指示剂时，为了防止污染，安瓿瓶内的培养液需要进行灭菌处理，B正确。芽孢是细菌的休眠体，芽孢壁厚，含水量极低，代谢缓慢，抗逆性强，能经受高温紫外线、电离辐射以及多种化学物质灭杀，可以帮助细菌度过不良环境。因此菌片中芽孢的耐热性大于器械上的已知污染菌，C正确。若灭菌与未灭菌的生物指示剂均不出现阳性变化，则说明灭菌前无有活性芽孢，也就无法说明灭菌效果，D错误。 14.(10分)(2025·河北石家庄期末)扩展青霉是腐烂苹果中常见的微生物之一，其次级代谢物棒曲霉素(Pat)是一种具有致突变作用的毒素。为研究腐烂苹果中Pat的分布，研究人员进行了如图所示的实验，其中“病健交界处”为腐烂部位与未腐烂部位的交界处，取样分离的5个部位分别为①号、②号、③号、④号、⑤号。请回答下列问题： (1)苹果腐烂部位的微生物除扩展青霉外，还有枯草杆菌。两种微生物在结构上的主要区别是　　　　　　　　　　　　　。 (2)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分如下表，根据物理性质划分该培养基属于　　 　　培养基，其中能为扩展青霉的生长繁殖提供能源的是　　　　；NaNO3的作用是 　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　(答两点)。 蔗糖 NaNO3 MgSO4 KCl FeSO4 KH2PO4 蒸馏水 30 g 2 g 0.5 g 0.5 g 0.01 g 1 g 1 000 mL (3)用平板划线法分离扩展青霉时，划线的某个平板培养后，第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落。操作失误的原因可能是　　　　 　　　　　　　　　。 (4)接种扩展青霉前，应对苹果进行　　　　(填“消毒”或“灭菌”)。研究人员测定了病斑直径为1 cm、2 cm、3 cm的苹果中①～⑤号部位的Pat含量，请推测最可能的结果：　　　　　　　　　　　　　；　　　　　　　。 答案：(1)扩展青霉有以核膜为界限的细胞核，枯草杆菌无以核膜为界限的细胞核　(2)液体　蔗糖　为扩展青霉的生长提供氮源和无机盐、维持培养液一定的渗透压　(3)第一区域划线结束，接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始　(4)消毒　相同病斑情况下，离病斑越远的部位，Pat含量越低；相同部位病斑越大，Pat含量越高 解析：(2)活化扩展青霉菌种使用的培养基成分中没有凝固剂，故根据物理性质划分该培养基属于液体培养基。(3)每次从上一次划线的末端开始，能使扩展青霉的数目随着划线次数的增加而逐步减少，最终能得到由单个细胞繁殖而来的菌落。若划线的某个平板培养后第一划线区域的划线上都不间断地长满了菌落，其他区域的划线上却均无菌落，可能是因为第一区域划线结束，接种环灼烧后未冷却或划线未从第一区域末端开始。(4)接种扩展青霉前，为了避免苹果上其他杂菌、病原微生物的污染，应对苹果进行消毒处理。由图可知，①号为腐烂部位，②③④⑤依次距离腐烂部位越来越远，推测相同病斑情况下，①号部位的Pat含量最高，离腐烂部位越远的果肉中Pat含量越低；相同部位病斑越大，Pat含量越高。 15.(14分)(2024·广东广州期中)ε-聚赖氨酸(ε-PL)能抑制多种微生物的活性，且人体可将其分解为赖氨酸，是一种优良的天然食品防腐剂。科研人员欲从土壤中分离能分泌ε-PL的微生物，做了如图所示的实验(Ⅰ～Ⅴ表示过程，①～③表示菌落)，已知ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈。 (1)图中第Ⅰ步最常用的接种方法是　　　　　　　　。若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，则应在第Ⅰ步之前　　　　，再进行接种。 (2)第Ⅲ步接种，应挑选　　　　(填“①”“②”或“③”)号菌落。一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物表现出的稳定的　　　　　　　　来判断微生物种类。 (3)本实验中用到了4种培养基，其中乙、丁培养基的作用分别是　　　　　　 　　　　　　　。 (4)为检测上述收集到的ε-PL对不同种类微生物的抑制能力，研究人员将大肠杆菌等菌种分别涂布于某培养基表面，再将浸有不同浓度ε-PL的滤纸圆片置于平板培养基表面，培养后测量清晰区(单位：mm)的宽度，得到了下表所示的结果。 ε-PL浓度/(mg·L－1) 微生物 20 30 40 50 60 70 大肠杆菌 ＋ ＋ 7.2 10.8 11.6 13.3 沙门氏菌 ＋ ＋ 6.5 9.2 10.9 13.0 酿酒酵母 7.2 9.1 12.6 13.4 14.8 － 红曲霉 ＋ ＋ ＋ ＋ 5.1 6.3 注：“＋”表示无清晰区，“－”表示未进行实验。 ①下列关于上述抑菌实验的叙述，正确的是　　　　。 A.结果显示ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强 B.ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关 C.用于实验的培养基应该用液体的选择培养基 D.接种需在超净工作台上酒精灯火焰周围进行 ②该实验在设置ε-PL浓度梯度方面还有不完善之处，请提出2条修改建议：　　　　　　 　　　　　　　。 答案：(1)稀释涂布平板法　稀释　(2)①　菌落特征(菌落的形状、大小和颜色等)　(3)选择产ε-PL的菌种、增加目的菌数量和生产ε-PL　(4)①ABD　②增加空白对照组；增加ε-PL浓度大于70 mg·L－1的实验组；增加ε-PL浓度小于20 mg·L－1的实验组 解析：(1)据图可知，步骤Ⅰ为接种，结合培养Ⅱ后的平板上菌落呈现均匀分布可知，所用接种方法是稀释涂布平板法；若经第Ⅱ步培养后发现菌落铺满了整个培养基、无法分辨出单菌落，说明密度过大，故应在第Ⅰ步之前先稀释，再进行接种。(2)培养过程中由于ε-PL可使亚甲基蓝褪色，形成透明圈，因此应挑选透明圈直径大的菌落继续培养，故选①。不同微生物在固体培养基表面形成的菌落特征不同，一般来说，在相同培养条件下，用不同微生物表现出的稳定的菌落特征(菌落的形状、大小和颜色等)来判断微生物种类。(3)本实验中用到了4种培养基，甲培养基是液体培养基，能提供目的菌所需的全部营养，以保证目的菌的正常生长；乙培养基是固体培养基，用于选择产生ε-PL的菌种，通常需要添加琼脂等凝固剂；丙培养基是固体培养基，用于分离、纯化产生ε-PL的菌种；丁培养基是液体培养基，用于富集培养目的菌，即可对目的菌进行扩大培养，让目的菌增殖、生产ε-PL。(4)表中结果显示：不同浓度的ε-PL处理下，酿酒酵母清晰区的宽度最大，说明ε-PL对酿酒酵母的抑制作用最强，A正确；表中数据显示随浓度增加，清晰区域宽度越大，即ε-PL对四种微生物的抑制效果与浓度正相关，B正确；用于实验的培养基应该用固体的选择培养基，C错误；为了避免周围环境中微生物的污染，接种应在超净工作台上并在酒精灯火焰附近进行，D正确。故选ABD。该实验缺乏空白对照组，应增加空白对照组；同时增加ε-PL浓度大于70 mg·L－1的实验组、增加ε-PL浓度小于20 mg·L－1的实验组，这样结果更具有说服力。 学科网（北京）股份有限公司 $