内容正文:
第1章 发酵工程
Chapter 1 fermentation engineering
自然发酵或曲种传代的固体发酵法生产其他食品,但不明其原理
战国中山酒
1850年
约9000年前
法国巴斯德证明酒精发酵是由活的酵母菌引起的,从而将酵母菌与发酵联系起来
1897年
20世纪40年代
科学家发现酶在酵母菌发酵中的作用,了解了发酵的本质。发酵向工业化生产方向发展
抗生素发酵工业兴起
科技探索之路
科学家用微生物生产谷氨酸,开始人工诱变特定微生物。酶、多糖、维生素工业兴起
20世纪70年代
1957年
发酵工程进入定向育种的新阶段
20世纪80年代
对发酵过程进行综合研究,能够自动记录和发酵过程的全部参数
重组胰岛素生产
科技探索之路
第1章 发酵工程
第1节 传统发酵技术的应用
01
02
03
掌握制作泡菜、果酒和果醋的原理及操作时应注意的问题,体验制作泡菜、果酒和果醋的过程;说出传统发酵技术的优点与不足。(重、难点)
掌握传统发酵技术的概念和特点,说出常见的传统发酵食品。(重点)
关注食品安全和健康的生活方式。
(社会责任)
学习目标
5
诗中提及的葡萄酒是人类利用微生物发酵制作而来的。通过微生物的发酵作用还可以制作葡萄醋,葡萄酒和葡萄醋都是以葡萄为原料发酵而来的饮品。
问题1:为什么一个是醇厚浓郁、耐人寻味的酒,一个却是酸味柔和、口感绵长的醋呢?
葡萄酒和葡萄醋都是由葡萄发酵而来,但是一个经酵母菌无氧呼吸产生了酒精,另一个经醋酸菌有氧呼吸产生了醋酸,因此口感不同。
问题2:它们的制作方法有什么不同?
从社会中来
01
发酵与传统发酵技术
一、发酵与传统发酵技术
(一)古代酿酒的方法:
图1-1 汉代砖刻上的酿酒图
图1-2 展示我国古代酿酒作坊的绘画作品
利用附着在谷物、水果等表面的微生物自然发酵。
图1-3 酒仙---李白
一、发酵与传统发酵技术
(二) 发酵:
1.概念:
指人们利用 ,在适宜条件下,将原料通过
转化为人类所需要的产物的过程。
微生物
微生物的代谢
3.类型
有氧发酵
[醋酸发酵、谷氨酸发酵]
厌氧发酵
[酒精、乳酸(泡菜、酸奶)发酵]
2.原理:
不同的微生物具有产生不同代谢产物的能力,因此利用它们既可以生产出人们所需要的多种产物
一、发酵与传统发酵技术
(三) 传统发酵:
1.概念:
直接利用原材料中天然存在的微生物,或利用前一次发酵保留下来的面团、卤汁等发酵物中微生物进行发酵,制作食品的技术。
2.类型:
固体发酵
半固体发酵
泡菜、粮食白酒、腐乳等
豆豉、酱、酱油等
混合菌种
一、发酵与传统发酵技术
(三) 传统发酵:
3.实例:
腐乳制作
(1)原理:
蛋白质
脂肪
小肽
氨基酸
甘油
脂肪酸
酵母、曲霉和毛霉等多种微生物
+
+
蛋白酶
脂肪酶
(毛霉起主要作用)
毛霉是一种丝状真菌,其生殖方式为孢子生殖,
代谢类型是异养需氧型。
一、发酵与传统发酵技术
(三) 传统发酵:
3.实例:
腐乳制作
一、发酵与传统发酵技术
(三) 传统发酵:
3.实例:
腐乳制作
让豆腐长出毛霉
直接利用空气中的毛霉孢子或者直接接种毛霉(15-18℃,一定湿度)
目的:让毛霉等产生蛋白酶和脂肪酶
加盐腌制
目的:析出豆腐中的水分、抑制不需要的微生物生长
加卤汤装瓶
卤汤包括酒和香辛料
酒(12%):抑制微生物生长,并使腐乳具有独特香味;
香辛料:调味,防腐杀菌。
密封腌制
卤汤中酒的含量在12%左右的原因:过高会延长腐乳成熟的时间,过低不足以抑制微生物生长,可能导致豆腐腐败。
方法:随豆腐层数加高增加盐用量,接近瓶口表面,铺厚一点
一、发酵与传统发酵技术
(三) 传统发酵:
3.实例:
腐乳制作
制作简单且成本低
优点
天然菌种品质各异,而且纯度不高
缺点一
生产条件不易控制,易受杂菌污染
缺点二
问题3:每年进行同样的操作,但是每年制作的腐乳或豆瓣酱的口感都不完全相同,有些年份甚至制作不成功,你知道这是为什么吗?分析传统发酵技术的优点和缺点。
一、发酵与传统发酵技术
(三) 传统发酵:
3.实例:
腐乳制作
使用前一次发酵保存下来的面团进行的才算。
例如:直接利用空气中毛霉孢子制作腐乳属于传统发酵技术,
若直接接种毛霉,则不属于。
问题4:使用酵母制作馒头属于传统发酵技术吗?
02
尝试制作传统发酵食品
二、尝试制作传统发酵食品
合作探究二:请同学们自主阅读教材P6~7,小组合作思考讨论完成问题。
1.在泡菜制作过程中盐水煮沸的目的是什么?冷却的目的是什么?
2.为什么泡菜坛只能装八成满?
3.用水密封泡菜坛的目的是什么?这说明泡菜制作需要什么条件?
4.发酵初期会有气泡冒出,但气泡的产生逐渐停止,试分析原因?
5.泡菜发酵过程中,乳酸菌、乳酸和亚硝酸盐的含量变化。
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
1.材料用具:
亚硝酸盐的含量低
食盐、清水、新鲜蔬菜、蒜瓣、生姜及其他香辛料、泡菜坛或其他密封性良好的罐子等。
问题6:为什么要选择新鲜蔬菜?
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
2.菌种:
乳酸菌
①菌种来源:
植物体表面天然的乳酸菌
②代谢类型:
异养厌氧型
③种类:
乳酸链球菌、乳酸杆菌
(原核生物)
3.原理:
在无氧的情况下能将葡萄糖分解成乳酸
C6H12O6 2C3H6O3(乳酸)+能量
酶
发酵期间,乳酸会___________,当它的质量百分比为____________时,泡菜的口味、品质最佳
不断积累
0.4%-0.8%
乳酸链球菌(球状)
乳酸杆菌(杆状)
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
舌尖上的中国——四川泡菜(视频)
21
配制
盐水
蔬菜处理装坛
加盐水
封坛
发酵
过高:乳酸发酵受抑制,泡菜风味差;
过低:杂菌易繁殖,导致泡菜变质。
杀菌、除氧
泡菜发酵初期,大肠杆菌、酵母菌等较为活跃,产生较多的CO2,防止发酵液溢出坛外;
防止因太满使盐水未完全淹没菜料而导致菜料变质腐烂;
留有一定空间,方便拿取泡菜。
将新鲜蔬菜洗净,切成块状或条状,混合均匀,晾干后装入泡菜坛内;装至半坛时,加入蒜瓣、生姜及其他香辛料,继续装至八成满;
创造无氧环境
将冷却好的盐水缓缓倒入坛中,使盐水没过菜料,盖好坛盖;
向坛盖边缘的水槽中注满水,在发酵过程中注意向水槽中补充水;根据室内温度控制发酵时间;
不影响乳酸菌的生命活动
用清水和食盐配制质量百分比为5%-20%的盐水,并将盐水煮沸,冷却待用;
4.泡菜制作步骤:
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
5.泡菜制作的注意事项:
(1)泡菜坛的选择:
坛沿深、盖子吻合好;无裂纹、无砂眼
检查方法:
坛口向上,压入水中,看坛内壁有无渗水现象。
不合格的泡菜坛为什么会引起蔬菜的腐烂?
泡菜坛漏气,会使需氧型微生物大量繁殖,引起蔬菜腐烂。
(2)腌制的条件:
①要注意控制时间、温度和食盐的用量。
②温度过高、食盐用量过低、腌制时间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
结果分析和评价:
1.泡菜质量可以根据泡菜的色泽和风味进行初步的评定;
2.可以通过在显微镜下观察乳酸菌的形态;
4.根据亚硝酸盐的含量来评定。
3.根据不同时期泡菜坛中乳酸菌的数量来评定。
一般来说,腌制成功的泡菜汤清亮,无霉花浮膜,菜质脆嫩度适口,酸甜咸味适宜,具有一定的香气,咀嚼后无渣等。
问题7:如何判断腌制的泡菜是否成功?
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
6.进一步探究:
亚硝酸盐
① 亚硝酸盐为强氧化剂,能够把血液中的低铁血红蛋白转变为高铁血红蛋白,从而导致缺氧性中毒症状。
硝酸盐
硝酸盐还原菌
亚硝酸盐
适宜的pH、温度和一定的微生物作用
亚硝胺
维生素C、E和酚类物质
亚硝胺具有致癌作用,对动物具有致畸和致突变作用。
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
6.进一步探究:
2. 某同学在制作泡菜前,査阅资料得知,可以向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”;在用质量百分比为5%的食盐水制作泡菜时,他在不同时间测定了泡菜中亚硝酸盐的含量,结果见右栏曲线图。
3
5
7
9
11
13
0
4
8
12
16
20
24
发酵时间/d
亚硝酸盐含量/(mg/kg)
在发酵11天后食用比较合适,因为此时亚硝酸盐含量已经降到较低的水平。
可能是食盐浓度过高,抑制乳酸菌生长,产生乳酸较少,导致泡菜未能正常发酵(也可能是由于温度较低)。
问题8:据图分析,从亚硝酸盐含量来看,你认为该泡菜在什么时间食用比较合适?为什么?
问题9:他第一次制作出的泡菜“咸而不酸”,造成这个结果最可能的原因是什么?
“陈泡菜水”中含有纯度较高的乳酸菌,加入“陈泡菜水”相当于接种乳酸菌。
二、尝试制作传统发酵食品
(一)制作泡菜:
6.进一步探究:
泡菜发酵过程中,不是乳酸菌单独发酵的结果:
注
乳酸积累,pH过低;乳酸菌的生长也受到抑制,乳酸菌数量减少。
发酵初期
多种微生物(如大肠杆菌、酵母菌)进行有氧呼吸,产生较多的CO2,坛沿水槽内有气泡放出。此阶段是形成无氧环境的过程。
发酵中期
发酵后期
主要是乳酸菌的发酵过程,其他微生物的生长受到抑制。
二、尝试制作传统发酵食品
泡菜制作过程中,乳酸菌、乳酸及亚硝酸盐的含量变化
发酵时期 乳酸菌 乳酸 亚硝酸盐
发酵初期
发酵中期
发酵后期
曲线模型
少
(有氧气,乳酸菌
的活动受到抑制)
少
增加
(硝酸盐还原菌的作用)
最多
(乳酸抑制
其他菌活动)
积累增多
(PH下降)
下降
(硝酸盐还原菌受抑制,
部分亚硝酸盐被分解)
减少
(乳酸积累,
PH下降,抑制其活动)
继续增多
(PH继续下降)
下降至相对稳定
(硝酸盐还原菌被完全抑制)
与生活的联系
1.为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?
有些蔬菜,如小白菜和萝卜等含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。
2.为什么含有抗生素的牛奶不能发酵为酸奶?
牛奶发酵为酸奶主要依靠 的发酵作用,
乳酸菌
而抗生素能够杀死或抑制乳酸菌。
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
一、尝试制作传统发酵食品
(一)酒精发酵:
1.菌种:
酵母菌
(单细胞真核)
有氧呼吸
无氧呼吸
馒头、面包在有氧条件下的膨胀
无氧条件下酵母菌的酒精发酵
代谢类型
酵母菌
兼性厌氧型
一、尝试制作传统发酵食品
(一)酒精发酵:
1.菌种:
酵母菌
(单细胞真核)
酵母菌(视频)
a.生殖方式:
无性生殖
b.代谢类型:
异养兼性厌氧型
c.最适生长温度:
酿酒酵母:28℃;
野生酵母:18~30℃
2.原理:
在有氧条件下
酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖。
C6H12O6+6O2+6H2O 6CO2+12H2O+能量
酶
在无氧条件下
酵母菌能进行酒精发酵
C6H12O6 2C2H5OH(酒精)+2CO2+能量
酶
(二)醋酸发酵:
一、尝试制作传统发酵食品
1.菌种:
醋酸菌
30~35℃
各种风味的醋
②代谢类型
③适宜温度
④应用
异养需氧型
2.原理:
当氧气、糖源充足时
能将糖分解成乙酸
当缺少糖源时
能将乙醇转化成乙醛,再将乙醛变成乙酸
糖制醋
酒制醋
C6H12O6+2O2 2CH3COOH(乙酸)+2CO2+2H2O+能量
酶
酶
C2H5OH +O2
CH3COOH (乙酸)+ H2O+能量
(原核生物)
新鲜水果(如葡萄)的果皮表面附着有大量的不同种类的野生酵母菌。在这些酵母菌的作用下,水果可以发酵成果酒。在有氧条件下,果酒经醋酸菌的作用还可以进一步发酵成果醋。
+
C6H12O6
酶
2C2H5OH (酒精) + 2CO2+ 能量
2O2
2CH3COOH (醋酸) + 2H2O+ 能量
酶
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
1.实验原理:
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
2.材料用具:
新鲜的水果(如葡萄、苹果、山楂和龙眼等)
洗洁精
体积分数为70%的酒精
发酵瓶
纱布
榨汁机
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
3.果酒制作实验步骤:
器具消毒
将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精 ,并用
消毒, 备用。
清洗干净
体积分数为70%的酒精
晾干
冲洗葡萄
取新鲜葡萄,用 1-2次,再 和腐烂的籽粒,沥干。
清水冲洗
去除枝梗
问题2:清水冲洗的目的是什么?能不能反复冲洗?
冲洗的目的是洗去浮尘,但不能反复冲洗,因为果皮表面附着大量的野生菌种,反复冲洗会减少菌种的数量,延长发酵时间。
问题3:先冲洗葡萄还是先去除枝梗?
应先冲洗,再去除枝梗和腐烂的籽粒,以避免去除枝梗和腐烂的籽粒时引起葡萄破损,增加被杂菌污染的机会。
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
器具消毒
将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精 ,并用
消毒, 备用。
清洗干净
体积分数为70%的酒精
晾干
冲洗葡萄
取新鲜葡萄,用 1-2次,再 和腐烂的籽粒,沥干。
清水冲洗
去除枝梗
榨汁装瓶
用榨汁机榨取葡萄汁,将葡萄汁装入发酵瓶(注意:要留有大约 的空间),盖好瓶盖。
1/3
问题4:发酵瓶要留有大约1/3的空间的目的是什么?
①给酵母菌提供氧气,有利于酵母菌进行有氧呼吸,大量繁殖;
②防止发酵旺盛时产生大量的CO2造成发酵液溢出。
3.果酒制作实验步骤:
一、尝试制作传统发酵食品
器具消毒
将发酵瓶、榨汁机等器具用洗洁精 ,并用
消毒, 备用。
清洗干净
体积分数为70%的酒精
晾干
冲洗葡萄
取新鲜葡萄,用 1-2次,再 和腐烂的籽粒,沥干。
清水冲洗
去除枝梗
榨汁装瓶
用榨汁机榨取葡萄汁,将葡萄汁装入发酵瓶(注意:要留有大约 的空间),盖好瓶盖。
1/3
酒精发酵
将温度控制在 进行发酵,在发酵过程中,每隔12h左右将瓶盖 一点,(注意: )
此后再拧紧瓶盖。发酵时间为 。
18~30℃
拧松
10~12d
不是打开瓶盖
问题5:为什么要将温度控制在18~30℃进行发酵?
果皮表面附着的野生酵母菌可能有很多种,所以提供了适合多种酵母菌生长的温度范围。
3.果酒制作实验步骤:
一、尝试制作传统发酵食品
问题6:为什么每隔12h左右要将瓶盖拧松一次?为什么不能打开瓶盖?
(1)拧松瓶盖是为了排出发酵产生的CO2,防止瓶内气压过大,引起发酵装置爆裂。
(2)不能打开瓶盖,以防止空气中的杂菌进入而污染发酵液。
3.果酒制作实验步骤:
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
4.在果酒发酵的基础上制作果醋:
果酒发酵
醋酸发酵
打开
纱布
当葡萄酒制作完成后, 瓶盖,盖上一层 ,进行葡萄醋的发酵。发酵温度为 ,时间为 。
30~35℃
7~8d
醋酸菌是好氧菌,在将乙醇变为乙酸时需要氧气的参与,因此要打开瓶盖;
盖上纱布,即是为了 ;也是为了 。
通气
防止外来杂菌和灰尘的污染
问题7:为什么要打开瓶盖,盖上纱布?
问题8:怎样判断果酒、果醋的制作是否成功呢?
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
问题8:怎样判断果酒、果醋的制作是否成功呢?
果酒:
果醋:
a.闻
b.品尝
c.用酸性条件下的重铬酸钾溶液检测
(橙色→灰绿色)
a.闻
b.品尝
c.使用pH试纸检测和比较发酵前后的pH值
d.观察醋酸菌膜是否形成
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
5.结果分析和评价:
问题9:在制作果酒的过程中,除了酵母菌,是否还有其他微生物生长?
它们会对果酒发酵产生影响吗?如果有,如何避免这种影响?
在制作果酒的过程中,除了酵母菌外,果酒中还有乳酸菌、醋酸菌等微生物。乳酸菌可能分解果酒中的糖等,从而使果酒变质。可以通过改变 、 等控制乳酸菌的含量。醋酸菌可以将糖或乙醇转化为乙酸,由于醋酸菌在_______的条件下才能进行旺盛的代谢活动,因此在制作果酒的过程中_____________________,可以抑制醋酸菌的生长繁殖。此外,通过改变________ 、 等同样可以控制醋酸菌的含量。
发酵的温度
果酒的pH
有氧
尽量减少氧气含量
发酵的温度
果酒的pH
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
5.结果分析和评价:
问题11:在制作果醋的过程中,酵母菌是否还会继续发酵?醋酸菌从何而来?采用什么措施可以加快果醋的制作?
随着醋酸发酵的进行,发酵液的PH、发酵温度等均不利于酵母菌的生长繁殖,因此酵母菌活性很低。
打开瓶盖后,空气中的醋酸菌会进入发酵液中大量繁殖,其他的菌种因不适应环境条件而不能繁殖。我们制作果醋时,可以先买一瓶醋,将其打开暴露于空气中,一段时间后在醋的表面会有一层薄膜,用这层薄膜进行接种可以明显缩短制作果醋的时间。
一、尝试制作传统发酵食品
(三)果酒和果醋的制作:
出料口
充气口
排气口
拓展延伸
结构 作用 酒精发酵时状态 醋酸发酵时状态
充气口
排气口
出料口
胶管长而弯的目的:
通入空气
关闭
打开,并接入气泵
排出CO2
打开
打开
便于取样监测
关闭
关闭
防止空气中杂菌感染
问题12:该装置有不足之处吗?我们该如何改进呢?
项目 泡菜制作 果酒制作 果醋制作
发酵菌种
菌种来源
菌种代谢类型
菌种细胞类型
发酵原理 在有氧条件下:
在无氧条件下:
氧气、糖源都充足时:
氧气充足、缺少糖源时:
发酵
条件 温度
时间
氧气
酵母菌(孢子生殖、出芽生殖)
传统的葡萄酒酿造采用自然发酵,主要是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌
异养兼性厌氧型
真核细胞
C6H12O6+6H2O+6O2
6CO2+12H2O+能量
酶
C6H12O6 2C2H5OH+2CO2+少量能量
酶
一般控制在18-30℃,最适合温度28℃左右。
10-12d
初期需氧,后期不需氧
醋酸菌(二分裂)
异养需氧型
原核细胞
空气中的野生型醋酸菌或购买醋酸菌的菌种或从食醋中分离醋酸菌
C6H12O6+2O2 2CH3COOH+2H2O+2CO2+能量
酶
C2H5OH+O2 CH3COOH+H2O+能量
酶
7-8d
需要氧气
乳酸菌(二分裂)
植物体表面天然的乳酸菌
异养厌氧型
原核细胞
C6H12O6 2C3H6O3(乳酸)+能量
酶
在无氧的情况下:
18—20℃
不需要氧气
8-10d
30-35℃
课堂小结
Lavf58.33.100
Content Adaptive Encoding 3.0
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