内容正文:
实践•探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
酵母菌是单细胞真核生物
新陈代谢类型:
异养兼性厌氧型
出芽生殖
酵母菌的繁殖方式:
酿酒和做面包都要用到酵母菌,这些酵母菌可以用液体培养基(培养液)来培养,培养液中酵母菌的数量是怎样随时间变化的?
实验原理
提出问题
作出假设
在理想条件下,种群的增长呈“J”形曲线;在各种资源有限或者存在环境阻力的情况下,种群增长呈“S”形曲线。通过细胞计数可以测定封闭容器内的酵母菌种群随时间而发生的数量变化。
培养液中酵母菌的数量是怎样随时间变化的?
培养液中的酵母菌数量一开始呈“J”形增长;随着时间的推移, 酵母菌数量呈“ ”形增长。
S
实践•探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
实验设计
酵母菌菌种
培养液
血细胞计数板
实践•探究:培养液中酵母菌种数量的变化
提出问题
作出假设
配制酵母菌培养液
接种酵母菌到培养液中
培养
计数
统计分析
得出结论
1.材料用具:酵母菌菌种,无菌马铃薯培养液或者肉汤培养液,血细胞计数板,显微镜等
或者肉汤培养液,每天取样计数酵母菌的数量,连续观察7天并记录这7天的数值。
3
2、血细胞计数板的构造(视频)
实践•探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
血细胞计数板是一种专门用于计算较大单细胞微生物的一种仪器。
4
①工具:血细胞计数板
②方法:抽样检测法
3、酵母菌计数
计数板正面
方格网
计数室
每块计数板由H形凹槽分为2个同样的计数区。每个计数区分为9个大方格。
实验设计
提出问题
作出假设
5
规格一:25×16型
A1
A2
A3
A4
A5
规格二:16×25型
A1
A3
A2
A4
每个计数室共有400小格,总容积为0.1mm3。
用无菌水稀释至每小格细胞数目为5~10 个
6
计数公式:
1mL样品中酵母菌数
A1+A2+A3+A4+A5
80
×400÷0.1mm3×稀释倍数
A1、A2、A3、A4、A5分别为四个中方格中的酵母菌数。
1mm3=10-3mL
规格一:25×16型
A1
A2
A3
A4
A5
1个计数室内有400个小方格
实践•探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
实验设计
提出问题
作出假设
=
×104 mL
计数公式:
A1+A2+A3+A4
4
×16÷0.1mm3×稀释倍数
A1、A2、A3、A4、分别为五个中方格中的酵母菌数。
1mm3=10-3mL
规格二:16×25型
A1
A2
A4
A3
实践•探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
实验设计
提出问题
作出假设
1mL样品中酵母菌数
=
×104 mL
1、检测员将1 mL水样稀释10倍后,用抽样检测的方法检测每毫升蓝藻的数量;将盖玻片放在计数室上,用吸管吸取少许培养液使其自行渗入计数室,并用滤纸吸去多余液体。已知每个计数室由25×16=400个小格组成,容纳液体的总体积为0.1 mm3。
现观察到图中该计数室所示a、b、c、d、e 5个中格80个小格内共有蓝藻n个,则上述水样中约有蓝藻 个/mL。
5n×105
拓展训练:
2、将样液稀释100倍,采用血球计数板(规格为1 mm×1 mm×0.1 mm)计数,观察到的计数室中细胞分布见图3,则培养液中藻细胞的密度是________个/ mL。
1×108
5
4
3
4
4
1 mL培养液中细胞个数=(20/5)×25×104×100=1×108
拓展训练:
压线的菌体,计上不计下,计左不计右。离开母体的芽体,无论大小均算一个。如果正在出芽,芽体大小达到或超过母细胞一半时,芽体可算1 个。
实验步骤
实验设计
提出问题
作出假设
将盖玻片放在计数室上
用吸管吸取培养液,滴于盖玻片边缘,让培养液自行渗入到计数室内。
静置数分钟,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在在载物台中央,计数一个小方格内酵母菌数量。
盖片
加酵母菌培养液
镜检计数
避免因菌液过多顶起盖玻片而使计数室体积改变,另外,也可防止气泡产生。
保证各部位酵母菌的密度相等,此外,酵母菌常出现抱团现象。
如果酵母菌未能全部沉降到计数室底部,会看不清酵母菌或看不清格线。
若没有摇匀,从底部吸取,计数结果会偏大,从上部吸取,计数结果会偏小。
时间/天 1 2 3 4 5 6 7
数量/个
结果用记录表记录,如下:单位(109 个/ mL)
0.12
0.89
3.47
5.23
6.13
6.79
7.02
据实验结果绘制的曲线图接近哪种增长模型。
实验结果
绘图曲线图
实践•探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
实验步骤
实验设计
提出问题
作出假设
得出结论
酵母菌在开始一段时间呈“J”型增长,但随着时间的推移,由于资源和空间有限,将呈“S”型增长,并最终将全部死亡。
实验结果会存在误差吗?
计数时可以滴加台盼蓝染液(或亚甲基蓝),活的酵母菌呈无色,死的酵母菌呈蓝色,然后分别计数
数量/个
0 1 2 3 4 5 6 7 0 0.12 0.89 3.47 5.23 6.13 6.79 7.02
开始时培养液的营养充足,空间充裕,条件适宜,因此酵母菌大量繁殖,种群数量剧增,随着酵母菌数量的不断增多,营养物质消耗,pH变化等,使生存条件恶化,酵母菌死亡率高于出生率,种群数量下降。
(1)酵母菌种群数量变化的原因:
(2)影响酵母菌种群数量的因素:
可能有养料、温度、pH 空间及有害代谢废物等。
(3)本探究需要设置对照吗?
不需要,本实验旨在探究培养液中酵母菌在一定条件下的种群数量变化,在连续培养并定时计数过程中形成自身对照。
(4)本探究需要做重复实验吗?
每个样品一般计数三次,取其平均值。(遵循平行重复原则)
讨论与交流
计数时可以滴加台盼蓝染液(或亚甲基蓝),活的酵母菌呈无色,死的酵母菌呈蓝色,然后分别计数,算出两者比例,从而进一步换算出菌体中的活菌数。需要注意的是,加入台盼蓝的体积应折算在稀释倍数中。
完整视频
实践•探究:培养液中酵母菌种群数量的变化
EV录屏3.9.7软件录制
Lavf56.38.102
本视频由湖南一唯信息科技开发的EV录屏软件录制,www.ieway.cn
Lavf58.51.100
$