卷15 生物技术与工程(一)-【三新金卷·先享题】2026年安徽省高考生物真题分类优化卷(分项3A)

最新5年高考真题分类优化卷·生物学（十五） 卷15生物技术与工程（一）》 姓名 班级 考号 得分 本卷共20小题，满分100分，考试时间75分钟 一、选择题：本题共15小题，每小题3分，共45分。在每小题给出的四个 选项中，只有一项符合题目要求。 1.(2025·黑吉辽蒙卷)研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能 成功发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发 育。下列叙述错误的是 () A.体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚 B.移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的 功能状态 C.胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养 层内孵化 D.为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植 2.(2025·河北卷)隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻。多在海水中腐烂 的植物叶片上生长繁殖，是工业生产DHA(一种功能性脂肪酸)的藻类 之一、从海洋中筛选获得的高产油脂隐甲藻，可用于DHA的发酵生产。 下列叙述错误的是 () A.隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源 B.采集海水中腐烂的叶片，湿热灭菌后接种到固体培养基，以获得隐 甲藻 C.选择培养基中可加入抑制细菌生长的抗生素，以减少杂菌生长 D.适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA 产量 3.(2024·山东)酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z,rpX、rpY 和rpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3 种酶均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时 可分泌到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培 养基上，生长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为 trpZ A.X>Y→Z B.Z>Y→X C.Y→X→Z D.Z>X→Y 4.(2024·浙江)脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被 去除镍后失去活性。下列叙述错误的是 () A.镍是组成脲酶的重要元素 B.镍能提高尿素水解反应的活化能 C.产脲酶细菌可在以NH,CI为唯一氮源的培养基生长繁殖 D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 5.(2024·湖南)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正 【最新5年高考真题分类优化卷·生物学（十五）15-1】3A 确的是 A完全握住棉塞 握住棉塞上部 ①灼烧接种环②冷却接种环，拔出试管棉塞③试管口通过火焰④接种环蘸取菌液 ⑤试管口通过火焰⑥接种环划线操作 ⑦接种环划线方法⑧平板正置培养 井暴上福基 A.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦ C.①②⑦⑧ D.①③④⑤ 6.(2025·四川卷)研究人员用花椰菜(BB,2n=18)根与黑芥(CC,2n 16)叶片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培 养获得再生植株，其中的植株N经鉴定有33条染色体。下列叙述正确 的是 () A.两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B.再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C.花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D.植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 7.（2023·北京)高中生物学实验中，下列实验操作能达成所述目标的是 A.用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离 B.向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境 C.在目标个体集中分布的区域划定样方调查种群密度 D.对外植体进行消毒以杜绝接种过程中的微生物污染 8.(2025·四川卷)微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态 环境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相 同的X、Y、X+Y(X:Y=1:1)分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体 培养基中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加 量×100%)，结果如下图。下列叙述正确的是 () 00 50 95 0 未接菌 X+Y A.用平板划线法能测定X菌组中的活菌数 B.Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高 C.混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种 D.能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料 9.(2023·河北)为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，下列相关 实验设计错误的是 () A.从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌 B.平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境 C.对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定 D.检测目的菌株对消化道环境的耐受力 10.(2023·辽宁)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌 形成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检 测细菌气溶胶的浓度（菌落数/m3)。下列叙述错误的是 () 【15-2】3A A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 11.(2023·江苏)下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是 () A.通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比 B.通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大 C.通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌 法除菌 D.血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量 测定 12.(2023·山东)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是 ( A.不含氮源的平板不能用于微生物培养 B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 13.（2023·广东)研究者拟从堆肥中取样并筛选能高效降解羽毛、蹄角等 废弃物中角蛋白的嗜热菌。根据堆肥温度变化曲线（如图）和选择培养 基筛选原理来判断，下列最可能筛选到目标菌的条件组合是() 100 F80 60 % b 0 0123456 堆肥时间（天） A.a点时取样、尿素氮源培养基 B.b点时取样、角蛋白氮源培养基 C.b点时取样、蛋白胨氮源培养基 D.c点时取样、角蛋白氮源培养基 14.(2023·浙江)某同学想从泡菜汁中筛选耐高盐乳酸菌，进行了如下实 验：取泡菜汁样品，划线接种于一定NaCl浓度梯度的培养基，经培养得 到了单菌落。下列叙述正确的是 () A.培养基pH需偏碱性 B.泡菜汁需多次稀释后才能划线接种 C.需在无氧条件下培养 D.分离得到的微生物均为乳酸菌 15.(2025云南卷)黄酒是我国古老的发酵酒之一，传统酿制中，先用蒸煮 过的小麦或麸皮为原料，对之前发酵留存的少量酒曲（曲种）进行扩大 制曲；再将酒曲和蒸煮后的糯米、大米混合处理一段时间后，添加足量 酒母（含酵母菌）完成发酵，压榨成品。下列说法错误的是 () A.小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等 营养物质 B.为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的 酒曲灭菌 C.糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其 催化效率 D.将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底 【15-3】3A 物葡萄糖 二、非选择题：本题共5小题，共55分。 16.（2024·北京)(9分)啤酒经酵母菌发酵酿制而成。生产中，需从密闭 的发酵罐中采集酵母菌用于再发酵，而直接开罐采集的传统方式会损 失一些占比很低的独特菌种。研究者探究了不同氧气含量下酵母菌的 生长繁殖及相关调控，以优化采集条件。 (1)酵母菌是兼性厌氧微生物，在密闭发酵罐中会产生 和 CO2。有氧培养时，酵母菌增殖速度明显快于无氧培养，原因是酵母菌 进行有氧呼吸，产生大量 (2)本实验中，采集是指取样并培养4天。在不同的气体条件下从发酵 罐中采集酵母菌，统计菌落数（图甲）。由结果可知，有利于保留占比很 低菌种的采集条件是 7001 有氧：18%02 目500 低氧：6%02 5300 3 有氧/有氧有氧/低氧无氧/低氧无氧/无氧 气体条件（取样培养） 甲 (3)根据上述实验结果可知，采集酵母菌时O2浓度的陡然变化会导致 部分菌体死亡。研究者推测，酵母菌接触O,的最初阶段，细胞产生的 过氧化氢(H,O,)浓度会持续上升，使酵母菌受损。已知H,O,能扩散 进出细胞。研究者在无氧条件下从发酵罐中取出酵母菌，分别接种至 含不同浓度H,O2的培养基上，无氧培养后得到如图乙所示结果。请 判断该实验能否完全证实上述推测，并说明理由。 0mmol·L 3.75mmol·L 5.00mmol·L1H202浓度 (4)上述推测经证实后，研究者在有氧条件下从发酵罐中取样并分为两 组，A组菌液直接滴加到H,O,溶液中，无气泡产生；B组菌液有氧培 养4天后，取与A组活菌数相同的菌液，滴加到H2O2溶液中，出现明 显气泡。结果说明，酵母菌可通过产生 以抵抗H2O2 的伤害。 17.(2024·江西)(10分)聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是一种聚酯塑料， 会造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微 生物，研究人员试验了2种方法。回答下列问题： (1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰 乙醇酯（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备 培养基，可提高该 方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有 等营养物质。 (2)方法2采用 技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶 的微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要 等“分子工具”。 【15-4】3A (3)除了上述2种方法之外，还可以通过 技术非定向改造现有 微生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 (4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白胨液体培养 基中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂)平板上培养，可以通过观察 卵黄磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水 解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角 度分析，其原因可能是 18.(2024·全国)(10分)合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某 同学比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。回答 下列问题。 0 处理时间 (1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的 细菌数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是 (2)该同学从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀 释菌液，再从稀释菌液中取200uL涂布平板，菌落计数的结果为100， 据此推算细菌原液中细菌浓度为 个/mL. (3)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼 烧的目的是 冷却的目的是 (4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是 ,判断依据是 (答出两点即可)。 (5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在 伊红美蓝培养基上生长的菌落呈 色。 19.(2023·北京)(12分)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作 用。有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物 释出。科学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。 培养 薄层 (1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分， 其中蛋白胨主要为细菌提供 和维生素等。 (2)A菌通常被用作溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培 养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变 浑浊（如图），表明 (3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含 菌量较高的湖泊水样 后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。 培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现 。采用这种 方法，研究者分离、培养并鉴定出P菌。 (4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以 下材料和设备加以验证（主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆 形滤纸小片、离心机和细菌培养箱) 【15-5】3A 20.(2023·湖南)(14分)某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和 抑制病原菌等作用。回答下列问题： (1)若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养 物质包括水和 (2)现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽孢杆菌H,其产生的抗菌 肽抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽对 的抑制效果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需在 g·mL1浓度区间进一步实验。 抗菌肽浓度/(ug·mL1) 测试菌 55.2027.6013.80 6.90 3.45 1.73 0.86 金黄色葡萄球菌 枯草芽孢杆菌 禾谷镰孢菌 假丝酵母 注：“十”表示长菌，“一”表示未长菌。 (3)研究人员利用解淀粉芽孢杆菌H的淀粉酶编码基因M构建高效表 达质粒载体，转入大肠杆菌成功构建基因工程菌A。在利用A菌株发 酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不 再产生淀粉酶M。分析可能的原因是 (答出两点即可)。 (4)研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟 细胞组装成肺类装配体，如图所示。肺类装配体培养需要满足适宜的 营养、温度、渗透压、DH以及 (答出两点)等基本条件。肺类装配体形成过程中是否运用了 动物细胞融合技术 (填“是”或“否”)。 88 88 肺上皮干细胞 体细胞 筛选 增殖分化 的 出 肺类器官A 肺类器官B 共培养 共培养 帝 邳 肺类装配体1 肺类装配体2 (5)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是一种耐药菌，严重危害人类 健康。科研人员拟用MRSA感染肺类装配体建立感染模型，来探究解 淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。以下 实验材料中必备的是 ①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体②MRSA感染的肺类装配体 ③解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽④生理盐水⑤青霉素（抗金黄色葡 萄球菌的药物)⑥万古霉素（抗MRSA的药物） 【15-6】3A卷15生物技术与工程（一） 1.C动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。 因此动物体细胞核移植的难度明显高于胚胎细胞核 移植。胚胎移植是指将通过体外受精及其他方式得 到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物 体内，使之继续发育为新个体的技术。其中提供胚胎 的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫“受体”。通过 任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得 的胚胎，都必须移植给受体才能获得后代。A、由于M Ⅱ期卵母细胞的细胞更大，便于进行技术操作，细胞 质中含有激发细胞核全能性的物质，因此体细胞核移 植到去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A正确：B 移植前胚胎发育率低，细胞核来自于已分化的体细 胞，全能性容易受到影响，因此可能是植入的体细胞 核不能完全恢复分化前的功能状态，B正确；C、根据 题干，早期胚胎大多都不能发育至囊胚期，必然不是 孵化的原因，着床在孵化之后发生，孵化是胚胎从透 明带中伸展出来（不是滋养层），C错误：D、胚胎细胞 核全能性高于体细胞，因此为提高胚胎成活率，可用 胚胎细胞核移植代替体细胞核移植，D正确。 2.B本题考查微生物的培养与应用综合、无菌技术、发 酵工程的应用。消毒是指使用较为温和的物理、化学 或生物等方法杀死物体表面或内部一部分微生物：灭 菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的 微生物，包括芽孢和孢子。A、根据题目信息“隐甲藻 是一种好氧的异养真核微藻，多在海水中腐烂的植物 叶片上生长繁殖”可知，隐甲藻可从腐烂的叶片获得 生长必需的碳源，A正确：B、采集海水中腐烂的叶片 进行湿热灭菌后，会杀死所有的微生物，此时接种到 固体培养基上无法获得隐甲藻，B错误；C、根据题目 信息可知，隐甲藻为真核生物，抗生素可通过抑制细 菌细胞壁合成或影响代谢过程来抑制细菌生长，不会 影响真核生物的生命活动，因此在筛选或培养隐甲藻 时，加入抗生素可有效抑制细菌杂菌，提高隐甲藻的 纯度和生长效率，C正确；D、根据题目信息可知，隐甲 藻为好氧生物，因此利用隐甲藻进行DHA发酵生产 时，适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶 氧量，以提高DHA产量，D正确。 3.A添加少量色氨酸，突变体菌株可以生长，色氨酸合 【57】 成途径的中间产物积累后可排出胞外，进入培养基 后，通过扩散，从而给其他突变型提供代谢原料，帮助 其长出明显的菌落。trpX、trpY和trpZ分别为相应 酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体，据图可 知，trpX不能为trpY和trpZ提供原料，trpY不能为 trpZ提供原料，trpZ可以为trpX,trpY的生长提供 原料，推测3种酶在该合成途径中的作用顺序为X→ Y→Z。故选A。 4.B根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是组 成脲酶的重要元素，A正确；脲酶催化尿素水解的机 理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶的重要 组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B 错误；产脲酶细菌可利用NH,CI里的氯源进行代谢 活动，因此产脲酶细菌可在以NH,C1为唯一氨源的 培养基生长繁殖，C正确；产脲酶细菌能利用脲酶催 化尿素分解产生NH,NH可作为细菌生长的氨源， 不能产脲酶的细菌则无法分解尿素获得氨源，因此以 尿素为唯一氨源的培养基可用于筛选产脲酶细 菌，D正确。故选B。 5.D由图可知，②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中 划线时不能将培养皿的皿盖完全拿开，应只打开一条 缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1次的划线 相连；⑧中平板应倒置培养。①③④⑤正确，故选D。 6.B植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞在一 定条件下融合成为杂种细胞，并把杂种细胞培育成新 的植物体的方法。其原理是细胞膜的流动性和细胞 的全能性，去除细胞壁后诱导原生质体融合的方法有 离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导，其典型优势是克 服远缘杂交不亲和的障碍。A、两个原生质体融合形 成的细胞不一定是杂种细胞，有可能是两个花椰莱原 生质体融合或两个黑芥原生质体融合等，A错误；B、 全能性是指已经分化的细胞仍然具有发育成完整个 体的潜能，杂种细胞经过培养形成再生植株N,这证 明了杂种细胞仍具有全能性，B正确；C、花椰莱和黑 芥是不同物种，它们之间存在生殖隔离。原生质体能 融合并不能证明不存在生殖隔离，因为生殖隔离是指 不同物种之间一般是不能相互交配的，即使交配成 功，也不能产生可育的后代，C错误；D、植株N是花椰 菜(BB,2n=18)和黑芥(CC,2n=16),二者原生质体 经PEG诱导融合形成杂种细胞后，染色体组成是 -3A BBCC,存在同源染色体，在减数分裂时能正常联会配 对，能产生可育配子，D错误。 7.A成熟的植物细胞有中央大液泡，用高浓度蔗糖溶 液处理，细胞会失水，成熟植物细胞能发生质壁分离， 因此用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁 分离，A正确；向泡莱坛盖边沿的水槽中注满水形成 内部无氧环境，不能创造无菌环境，B错误；在用样方 法调查种群密度时，应该做到随机取样，而不是在目 标个体集中分布的区域划定样方调查种群密度，C错 误：对外植体进行消毒可以减少外植体携带的微生 物，但不能杜绝接种过程中的微生物污染，D错误。 故选A。 8.C接种最常用的方法：(1)平板划线分离法：由接种 环以菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面 进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微 生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步 分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经 培养后，可在平板表面得到单菌落。(2)稀释平板法： 首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品 中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一 个菌落就不只是代表一个细胞)，再取一定稀释度、一 定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中 的培养基内。A、平板划线法主要用于微生物的分离 和纯化，不能用于测定活菌数，测定活菌数常用稀释 涂布平板法，A错误；B、Y菌组微塑料残留率较高，说 明Y菌对微塑料的降解能力相对较弱，而不是菌浓度 高，微塑料残留率与菌对微塑料的降解能力有关，而 非直接与菌浓度相关，B错误；C、由图可知，X十Y混 合菌种组的微塑料残留率低于X菌组和Y菌组，说明 混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种，C正 确；D、该培养基中含有蛋白胨，能在该培养基中生长 繁殖的微生物可能利用蛋白胨作为碳源和氨源等，但 不一定都能降解微塑料，D错误。 9.B筛选目的菌时应从富含目的菌的环境中去取样， 酸奶和泡莱中富含乳酸菌，可以从中采样进行分离纯 化，A正确；平板倒置培养是为了防止培养皿皿盖上 的水珠落入培养基造成污染，不是创造无氧环境，B错 误；筛选的是能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸 菌，所以，初步筛选后，还需要进一步进行目的菌胆固 醇降解能力的测定，以获得符合要求的乳酸菌，C正 【58】 确：因筛选出的目的菌是在肠道发挥作用，所以，还需 要检测目的菌株对消化道环境的耐受力，D正确。故 选B。 10.D为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、 微生物采样器进行灭菌，对实验操作者的双手进行 消毒，A正确；纯化培养时，为防止污染培养基和水 分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正 确；微生物计数时在同一稀释度下，应至少需要对3 个菌落数目在30一300的平板进行计数，以确保实 验的准确性，C正确：使用稀释涂布平板法对微生物 计数，数值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一 起时，在平板上只能观察到一个菌落，D错误。故 选D。 11.A细菌是原核生物，酵母菌是真核生物，不同微生 物对营养物质的需求是不一样，通常酵母菌培养基 比细菌培养基有更高的碳氨比，A正确；通常细菌的 生长速度比酵母菌快，但形成的菌落，不一定细菌的 大于酵母菌的，与细菌的种类有关，部分细菌的菌落 小于酵母菌，B错误；通常细菌和酵母菌的培养基都 可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；血细胞计数板 适用于真菌的计数，细菌计数板用于细菌的数量测 定等，D错误。故选A。 12.D不含氨源的平板可用于固氨菌的培养，A错误； 平板涂布时涂布器使用前必须浸在酒精中，然后在 火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于消毒，B 错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃 前进行灭菌处理，不能直接丢弃，以免污染环境，C 错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿素为唯一氯源 的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得 氯源而进行生长繁殖，但是不能合成脲酶的微生物 因缺乏氨源而无法生长，因此以尿素为唯一氨源的 平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。故选D。 13.D研究目的是筛选能高效降解羽毛、蹄角等废弃物 中角蛋白的嗜热菌，因此既要耐高温，又要能够高效 降解角蛋白，所以在℃，点取样，并且用角蛋白氨源培 养基进行选择培养，所以D正确，A、B、C错误。故 选D。 14.C因为乳酸菌经过无氧呼吸产生乳酸，故其生活的 环境是酸性，培养基pH需偏酸性，A错误；平板划线 接种时不需要稀释，B错误：乳酸菌是厌氧型微生物， -3A 所以需在无氧条件下培养，C正确；参与泡莱发酵的 微生物有乳杆菌、短乳杆菌和明串珠菌等，所以分离 得到的微生物除了乳酸菌，还会有其他耐高盐的微 生物，D错误。故选C。 15.B酵母菌是兼性厌氧菌，有氧呼吸产生二氧化碳和 水，无氧呼吸产生酒精和二氧化碳；酿酒利用的是酵 母菌进行无氧呼吸，从而产生酒精。A、小麦、麸皮等 原料含有蛋白质、糖类等多种营养成分，蛋白质可以 为微生物提供氨源，糖类等可以为微生物提供碳源， 所以能为酒曲中微生物的生长繁殖提供碳源和氨源 等营养物质，A正确；B、扩大制曲前对留存的酒曲不 能灭菌，因为酒曲本身含有发酵所需的菌种，若灭菌 会杀死这些菌种，导致无法进行正常的发酵过程，B 错误；C、糯米、大米蒸煮后温度较高，立即与酒曲混 合，高温会使酶的空间结构改变，导致酶活性降低， 从而降低其催化效率，C正确；D、酒曲中含有淀粉酶 等酶类，将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，淀粉 酶可将糯米、大米中的淀粉分解为葡萄糖，从而为后 续酒母（含酵母菌）发酵提供底物葡萄糖，D正确。 16.解析：(1)酵母菌在密闭发酵罐中进行无氧呼吸，会 产生酒精(C,HOH)和CO2。有氧培养时，酵母菌 进行有氧呼吸，有机物被彻底氧化分解，产生大量能 量，而无氧呼吸中有机物不能彻底分解，只产生少量 能量，故有氧培养时酵母菌增殖速度明显快于无氧 培养。 (2)由图甲结果可知，无氧/无氧条件下，菌落数最 多，因此有利于保留占比很低菌种的采集条件是无 氧/无氧。 (3)依据图乙结果可知，随着HO2浓度的持续上 升，酵母菌存活率下降（酵母菌受损程度加深），但不 能证明酵母菌接触O,的最初阶段，细胞产生的 HO2浓度会持续上升；由题意可知，该实验在无氧 条件下从发酵罐中取出酵母菌，接种到含不同浓度 H,O,的培养基上进行无氧培养，并没有创造O,浓 度陡然变化的条件，所以不能完全证实上述推测。 (4)过氧化氢酶能催化H,O,分解出现明显气泡，因 此实验结果说明，酵母菌可通过产生过氧化氢酶以 抵抗H,O。的伤害。 答案：(1)酒精/C,HOH能量 (2)无氧/无氧 【59】 (3)不能。该实验只能证明随着H,O,浓度的持续上 升，酵母菌存活率下降（酵母菌受损程度加深），但不 能证明酵母菌接触O,的最初阶段，细胞产生的 HO,浓度会持续上升；该实验在无氧条件下从发酵 罐中取出酵母菌，接种到培养基上无氧培养，并没有 创造O,浓度陡然变化的条件 (4)过氧化氢酶/H,O,酶 17.解析：(1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂 酶的微生物。以磷脂酰乙醇酯为唯一碳源制备选择 培养基，在该培养基中只有能利用磷脂酰乙醇酯的 微生物能生长，其他微生物的生长被抑制，进而获得 筛选出所需要的微生物，为了提高该方法的筛选效 率。除碳源外，该培养基中至少还应该有水分、无机 盐和氨源等营养物质，同时还需要提供微生物生长 所需要的外界环境条件。 (2)方法2采用基因工程技术定向改造现有微生物， 以获得高产磷脂酶的微生物。除了编码磷脂酶的基 因，即目的基因外，该技术还需要限制酶、DNA连接 酶和载体（或质粒）等“分子工具”，进而可以实现目 的基因表达载体的构建。 (3)除了上述2种方法之外，还可以通过诱变育种技 术非定向改造现有微生物，筛选获得能够高产磷脂 酶的微生物，该技术的原理是基因突变，由于基因突 变具有不定向性，因而该技术具有盲目性。 (4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉 膏蛋白胨液体培养基中添加2%的琼脂粉和适量的 卵黄磷脂)平板上培养，可以通过观察卵黄磷脂水解 圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能 以水解圈大小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一 依据。从平板制作的角度分析，即倒平板过程中没 有经过定量检测，且平板倒置的实际可能也会影响 平板中培养基厚度的不同，因此不同平板中培养基 量的差异以及平板内培养基厚度不均匀以及平板间 后代不均匀都会影响实验结果的判断，因此可采用 降解圈的直径和菌落直径的比值作为判断依据。 答案：(1)选择水无机盐氨源 (2)基因工程（或转基因）限制酶DNA连接酶 载体（或质粒） (3)诱变育种 (4)不同平板中培养基量的差异以及平板内和平板 -3A 间培养基厚度不均匀 18.解析：(1)显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计 数。菌落计数法计数只计活菌数，还可能存在多个 活菌形成一个菌落的情况，故前者的数量多于后者。 (2)从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得 到10mL稀释菌液，即稀释了10倍，1mL细菌原液 中细菌浓度=（菌落数÷菌液体积）×稀释倍数= (100÷200uL)×10个=5000个。 (3)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧， 冷却后再涂布。灼烧的目的是杀死涂布器上可能存 在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污染， 冷却的目的是防止温度过高杀死菌种。 (4)A消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短， 效率最高，因此A消毒液杀菌效果最好。 (5)大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈 黑色 答案：(1)前者微生物分散的活菌和死菌一起计数， 后者存在多个活菌形成一个菌落的情况且只计数 活菌 (2)5000 (3)杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上 可能存在的微生物污染防止温度过高杀死菌种 (4)AA消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较 短，效率最高 (5)黑 19.解析：(1)蛋白胨主要为细菌提供氯源、碳源和雏生 素等。 (2)将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体 培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层 变浑浊，表明A菌能在培养平板中生长繁殖。 (3)将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布 于不同的浑浊薄层上。培养一段时间后，能溶解A 菌的菌落周围会出现溶菌圈。 (4)根据实验的实验材料和设备，圆形滤纸小片可用 于吸收某种物质，离心机可用于分离菌体和细菌分 物，为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假设P菌 通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。 答案：(1)氨源、碳源 (2)A菌能在培养平板中生长繁殖 (3)稀释溶菌圈 【60】 (4)假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解 破裂 20.解析：(1)由题意可知，根际促生菌具有固氯作用，可 利用空气中的氨气作为氨源，因此用于筛选根际促 生菌的培养基的主要营养物质包括水、无机盐和 淀粉。 (2)由题表可知，在抗菌肽浓度为3.45 ~55.20g·mL1范围内，金黄色葡萄球菌和枯草 芽孢杆菌均不能生长，表明该抗菌肽对它们的柳菌效果 较好；因为抗菌肽的浓度为1,73g·mL1时，它们均 能生长，所以要确定抗菌肽抑菌效果的最低浓度，应 在1.73~3.45g·mL1的浓度区间进一步实验。 (3)在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代 多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产生淀粉 酶M,可能的原因是淀粉酶编码基因M发生突变； 或者是重组质粒在大肠杆菌分裂过程中丢失。 (4)肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗 透压、DH以及无菌、无毒环境，含95%空气和5% CO,的气体环境等基本条件；由图示可知，肺类装配 体形成的过程中没有运用动物细胞融合技术，只涉 及了细胞的分裂和分化等内容。 (5)科研人员拟用MRSA感染肺类装配体建立感染 模型，来探究解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽是否对 MRSA引起的肺炎有治疗潜力，必备实验材料为：② MRSA感染的肺类装配体、③解淀粉芽孢杆菌H抗 菌肽、④生理盐水（设置对照实验使用）、⑥万古霉素 (抗MRSA的药物，比较解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽的疗 效)，故选②③④⑥。 答案：(1)无机盐、淀粉 (2)金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌1.733.45 (3)淀粉酶编码基因M发生突变；重组质粒在大肠杆 菌分裂过程中丢失 (4)无菌、无毒环境，含95%空气和5%C02的气体 环境否 (5)②③④⑥ -3A