卷15 生物技术与工程(一)-【三新金卷·先享题】2026年安徽省高考生物真题分类优化卷(分项3N)

最新5年高考真题分类优化卷·生物学（十五） 卷15生物技术与工程（一） 姓名 班级 考号 得分 本卷共25小题，满分100分。考试时间75分钟 一、选择题：本题共12小题，每小题2分，共24分。在每小题给出的四个选项 中，只有一项符合题目要求。 1.(2025·黑吉辽蒙卷)研究显示，约70%的小鼠体细胞核移植胚胎未能成功 发育至囊胚期，且仅有约2%的胚胎移植到代孕母鼠后可正常发育。下列 叙述错误的是 () A.体细胞核进入去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚 B.移植前胚胎发育率低，可能是植入的体细胞核不能完全恢复分化前的功 能状态 C.胚胎移植到代孕母鼠后成活率低，可能是早期胚胎未能及时从滋养层内 孵化 D.为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移植 2.(2025·河北卷)隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻。多在海水中腐烂的植 物叶片上生长繁殖，是工业生产DHA(一种功能性脂肪酸)的藻类之一、从 海洋中筛选获得的高产油脂隐甲藻，可用于DHA的发酵生产。下列叙述 错误的是 A.隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长必需的碳源 B.采集海水中腐烂的叶片，湿热灭菌后接种到固体培养基，以获得隐甲藻 C.选择培养基中可加人抑制细菌生长的抗生素，以减少杂菌生长 D.适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量，以提高DHA 产量 3.(2024·山东)酵母菌在合成色氨酸时需要3种酶X、Y和Z,trpX、trpY和 trpZ分别为相应酶的编码基因突变的色氨酸依赖型突变体。已知3种酶 均不能进出细胞，而色氨酸合成途径的中间产物积累到一定程度时可分泌 到胞外。将这3种突变体均匀划线接种到含有少量色氨酸的培养基上，生 长情况如图。据图分析，3种酶在该合成途径中的作用顺序为 trpZ A,X→Y→Z B.Z→Y→XC.Y→X→Z D.Z→X→Y 4.(2024·浙江)脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去 除镍后失去活性。下列叙述错误的是 A.镍是组成脲酶的重要元素 B.镍能提高尿素水解反应的活化能 C.产脲酶细菌可在以NH,CI为唯一氮源的培养基生长繁殖 D.以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 5.(2024·湖南)微生物平板划线和培养的具体操作如图所示，下列操作正确 【最新5年高考真题分类优化卷·生物学（十五）15一1】3N 的是 A握住棉塞上部 ①灼烧接种环②冷却接种环，拔出试管棉塞③试管口通过火焰④接种环蘸取菌液 ⑤试管口通过火焰⑥接种环划线操作 ⑦接种环划线方法⑧平板正置培养 并塞上棉塞 A.①②⑤⑥ B.③④⑥⑦C.①②⑦⑧D.①③④⑤ 6.(2025·四川卷)研究人员用花椰菜(BB,2n=18)根与黑芥(CC,2n=16)叶 片分别制备原生质体，经PEG诱导融合形成杂种细胞，进一步培养获得再 生植株，其中的植株经鉴定有33条染色体。下列叙述正确的是() A.两个原生质体融合形成的细胞即为杂种细胞 B.再生植株N的形成证明杂种细胞仍具有全能性 C,花椰菜和黑芥的原生质体能融合，证明两种植物间不存在生殖隔离 D.植株N的B组和C组染色体不能正常联会配对，无法产生可育配子 7.(2023·北京)高中生物学实验中，下列实验操作能达成所述目标的是( A.用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞观察质壁分离 B.向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无菌环境 C.在目标个体集中分布的区域划定样方调查种群密度 D.对外植体进行消毒以杜绝接种过程中的微生物污染 8.(2025·四川卷)微塑料由塑料废弃物风化形成，难以降解，会危害生态环 境和人体健康。有人分离到X和Y两种微塑料降解菌，将总菌量相同的 X、Y、X+Y(X:Y=1:1)分别接种于含有等量微塑料的蛋白胨液体培养基 中，培养一段时间后测定微塑料的残留率（残留率=剩余量/添加量× 100%),结果如下图。下列叙述正确的是 0[ 7 未接菌X Y X+Y A.用平板划线法能测定X菌组中的活菌数 B.Y菌组微塑料残留率较高，故菌浓度也高 C.混合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种 D.能在该培养基中生长繁殖的微生物都能降解微塑料 9.(2023·河北)为筛选能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，下列相关实 验设计错误的是 () A.从酸奶和泡菜中采样分离乳酸菌 B.平板倒置培养为筛选乳酸菌创造无氧环境 C.对目的菌株进行胆固醇降解能力的测定 D.检测目的菌株对消化道环境的耐受力 10.(2023·辽宁)细菌气溶胶是由悬浮于大气或附着于颗粒物表面的细菌形 成的。利用空气微生物采样器对某市人员密集型公共场所采样并检测细 菌气溶胶的浓度（菌落数/m)。下列叙述错误的是 A.采样前需对空气微生物采样器进行无菌处理 【15-2】3N B.细菌气溶胶样品恒温培养时需将平板倒置 C.同一稀释度下至少对3个平板计数并取平均值 D.稀释涂布平板法检测的细菌气溶胶浓度比实际值高 11.(2023·江苏)下列关于细菌和酵母菌实验的叙述正确的是 ( A.通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比 B.通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落大 C.通常细菌培养基用高压蒸汽灭菌法灭菌，酵母菌培养基用过滤除菌法 除菌 D.血细胞计数板既可用于酵母菌的数量测定，也可用于细菌的数量测定 12.(2023·山东)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是（) A.不含氮源的平板不能用于微生物培养 B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒 C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃 D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物 二、选择题：本题共4小题，每小题4分，共16分。在每小题给出的四个选项 中，有一项或多项符合题目要求。全部选对得4分，选对但不全得2分，有选 错的得0分。 13.(2024·河北)中国传统白酒多以泥窖为发酵基础，素有“千年老窖万年糟” “以窖养糟，以糟养泥”之说。多年反复利用的老窖池内壁窖泥中含有大量 与酿酒相关的微生物。下列叙述不正确的是 () A.传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完成的 B.窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，使酿造过程不易污染杂菌 C.从窖泥中分离的酿酒酵母扩大培养时，需在CO,或N,环境中进行 D.从谷物原料发酵形成的酒糟中，可分离出产淀粉酶的微生物 14.(2023·江苏)某醋厂和啤酒厂的工艺流程如图所示。酒曲含有霉菌、酵母 菌、乳酸菌；醋醅含有醋酸菌；糖化即淀粉水解过程。下列相关叙述正确的有 () 酒曲 酷留 桥米一翘一却+围一留酸发醇一一图 一一装坛→成品 固态发酵制醋工艺流程 大米一粉碎一蒸名酒花菌种选有扩大培剂 麦球一一一配一国一上扇留一@国一成品 啤酒酿造工艺流程 A.糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的是利于糖化和灭菌 B.发酵原理是利用真菌的无氧呼吸与细菌的有氧呼吸 C.醋酸发酵过程中经常翻动发酵物，可控制发酵温度和改善通气状况 D.啤酒酿造流程中适当增加溶解氧可缩短发酵时间 15.(2023·山东)果酒的家庭制作与啤酒的工业化生产相比，共同点有() A.都利用了酵母菌无氧呼吸产生酒精的原理 B.都需要一定的有氧环境供发酵菌种繁殖 C.发酵前都需要对原料进行灭菌 D.发酵结束后都必须进行消毒以延长保存期 16.(2022·江苏)在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下 列相关叙述错误的有 ) A.泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气 B.制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没 全部菜料 C.葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后，可直接通人无菌空气 【15-3】3N 制作葡萄醋 D.果酒发酵时温度宜控制在18一25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30一35℃ 三、非选择题：本题共5小题，共60分 17.(2024·北京)(9分)啤酒经酵母菌发酵酿制而成。生产中，需从密闭的发 酵罐中采集酵母菌用于再发酵，而直接开罐采集的传统方式会损失一些占 比很低的独特菌种。研究者探究了不同氧气含量下酵母菌的生长繁殖及 相关调控，以优化采集条件。 (1)酵母菌是兼性厌氧微生物，在密闭发酵罐中会产生 和CO2。 有氧培养时，酵母菌增殖速度明显快于无氧培养，原因是酵母菌进行有氧 呼吸，产生大量 (2)本实验中，采集是指取样并培养4天。在不同的气体条件下从发酵罐 中采集酵母菌，统计菌落数（图甲）。由结果可知，有利于保留占比很低菌 种的采集条件是 7001 有氧：18%02 500 低氧：6%02 有氧有氧有氧低氧无氧低氧无氧/无氧 气体条件（取样培养） 甲 (3)根据上述实验结果可知，采集酵母菌时O2浓度的陡然变化会导致部分 菌体死亡。研究者推测，酵母菌接触O2的最初阶段，细胞产生的过氧化氢 (H2O2)浓度会持续上升，使酵母菌受损。已知H2O2能扩散进出细胞。 研究者在无氧条件下从发酵罐中取出酵母菌，分别接种至含不同浓度 HO2的培养基上，无氧培养后得到如图乙所示结果。请判断该实验能否 完全证实上述推测，并说明理由。 0mmol·L-' 3.75mmol·L 5.00mmol·L1H202浓度 乙 (4)上述推测经证实后，研究者在有氧条件下从发酵罐中取样并分为两组， A组菌液直接滴加到H2O2溶液中，无气泡产生；B组菌液有氧培养4天 后，取与A组活菌数相同的菌液，滴加到H,O,溶液中，出现明显气泡。结 果说明，酵母菌可通过产生 以抵抗H,O2的伤害。 18.(2024·江西)(10分)聚对苯二甲酸乙二醇酯(PET)是一种聚酯塑料，会 造成环境污染。磷脂酶可催化PET降解。为获得高产磷脂酶的微生物， 研究人员试验了2种方法。回答下列问题： (1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂酰乙醇 酯（一种磷脂类物质）为唯一碳源制备 培养基，可提高该方法的筛 选效率。除碳源外，该培养基中至少还应该有 等营养物质。 (2)方法2采用 技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的 微生物。除了编码磷脂酶的基因外，该技术还需要 【15-4】3N 等“分子工具”。 (3)除了上述2种方法之外，还可以通过 技术非定向改造现有微 生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物。 (4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白胨液体培养基 中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂)平板上培养，可以通过观察卵黄 磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大 小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，其 原因可能是 19.(2024·全国)(10分)合理使用消毒液有助于减少传染病的传播。某同学 比较了3款消毒液A、B、C杀灭细菌的效果，结果如图所示。回答下列 问题。 处理时间 (1)该同学采用显微镜直接计数法和菌落计数法分别测定同一样品的细菌 数量，发现测得的细菌数量前者大于后者，其原因是 (2)该同学从100mL.细菌原液中取1mL.加入无菌水中得到10mL稀释 菌液，再从稀释菌液中取200L涂布平板，菌落计数的结果为100，据此推 算细菌原液中细菌浓度为 个/mL。 (3)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的 目的是 冷却的目的是 (4)据图可知杀菌效果最好的消毒液是 ,判断依据是 (答出两点即可)。 (5)鉴别培养基可用于反映消毒液杀灭大肠杆菌的效果。大肠杆菌在伊红 美蓝培养基上生长的菌落呈 色。 20.(2023·北京)(12分)自然界中不同微生物之间存在着复杂的相互作用。 有些细菌具有溶菌特性，能够破坏其他细菌的结构使细胞内容物释出。科 学家试图从某湖泊水样中分离出有溶菌特性的细菌。 (1)用于分离细菌的固体培养基包含水、葡萄糖、蛋白胨和琼脂等成分，其 中蛋白胨主要为细菌提供 和维生素等。 (2)A菌通常被用作溶菌对象。研究者将含有一定浓度A菌的少量培养 基倾倒在固体培养平板上，凝固形成薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊 (如图)，表明 培养 薄层 (3)为分离出具有溶菌作用的细菌，需要合适的菌落密度，因此应将含菌量 较高的湖泊水样 后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。培养一 段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现 。采用这种方法，研究 者分离、培养并鉴定出P菌。 (4)为探究P菌溶解破坏A菌的方式，请提出一个假设，该假设能用以下 【15-5】3N 材料和设备加以验证（主要实验材料和设备：P菌、A菌、培养基、圆形滤纸 小片、离心机和细菌培养箱) 21.(2023·湖南)(14分)某些植物根际促生菌具有生物固氮、分解淀粉和抑 制病原菌等作用。回答下列问题： (1)若从植物根际土壤中筛选分解淀粉的固氮细菌，培养基的主要营养物 质包括水和 (2)现从植物根际土壤中筛选出一株解淀粉芽孢杆菌H,其产生的抗菌肽 抑菌效果见表。据表推测该抗菌肽对 的抑 制效果较好，若要确定其有抑菌效果的最低浓度，需在 g·mL 浓度区间进一步实验。 测试菌 抗菌肽浓度/(g·mL,1) 55.2027.6013.806.903.451.730.86 金黄色葡萄球菌 十 枯草芽孢杆菌 禾谷镰孢菌 假丝酵母 注：“十”表示长菌，“一”表示未长菌。 (3)研究人员利用解淀粉芽孢杆菌H的淀粉酶编码基因M构建高效表达 质粒载体，转入大肠杆菌成功构建基因工程菌A。在利用A菌株发酵生 产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变，但某子代菌株不再产生 淀粉酶M。分析可能的原因是 (答出两点即可)。 (4)研究人员通过肺上皮干细胞诱导生成肺类器官，可自组装或与成熟细 胞组装成肺类装配体，如图所示。肺类装配体培养需要满足适宜的营养、 温度、渗透压、pH以及 (答出两点)等基本条件。肺类装配体形成过程中是否运用了动物细胞融 合技术 (填“是”或“否”)。 88 88 肺上皮干细胞 体细胞 筛选 增殖分化 的 出 肺类器官A 肺类器官B 共培养 共培养 球 肺类装配体1 肺类装配体2 (5)耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)是一种耐药菌，严重危害人类健 康。科研人员拟用MRSA感染肺类装配体建立感染模型，来探究解淀粉 芽孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力。以下实验材 料中必备的是 ①金黄色葡萄球菌感染的肺类装配体②MRSA感染的肺类装配体 ③解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽④生理盐水 ⑤青霉素（抗金黄色葡萄球 菌的药物)⑥万古霉素（抗MRSA的药物） 【15-6】3N力上升，土壤的水、肥条件得到很大改善，C正确；枸杞园植被增多，单位空 间内被生产者固定的太阳能明显增多，D正确。故选ACD。 17.解析：(1)①物质循环、信息传递和能量流动是生态系统的三大基本功能， 春天的来临，内蒙古草原绿意渐浓，久违的动物们纷纷现身，这种场景的出 现体现了生态系统的信息传递功能」 ②当两个物种的生态位有重叠时，往往通过自然选择作用使各自的生态位 发生变化，从而减少或排除竞争，使得它们共同生存下来，这种现象称为生 态位分化，因此可以用生态位分化来解释成群的牛、羊一起在草原上觅食， 他们之间虽然食性相似但是竞争不明显的现象。 ③草原群落的演替结果在几年内并不容易观察到，其原因是：植物每年的 生长季短，且常遭食草动物啃食，导致植物的生长发育不易。 ④能量传递的特点是逐级递减，由于狼所处的营养级高，则归属该营养级 的能量少，该营养级的个体数量相对较少，因此即使人们不再主动猎狼，但 狼也只是偶见于内蒙古草原地区。 ⑤从生态系统能量流动的功能解释，对牛羊取食之余牧草及时收割、打包， 可以使能量更多地流向对人类有意的方向。 (2)①据题千分析，实验的实验目的主要是探究在寒冷环境下，深色体表的 植物能吸收较多的太阳能，因此实验的自变量是两种生长状态类似且体表 颜色深浅有明显差异的灌木，实验的检测指标是温度的变化，可通过测定 培养两种植物的水的温度变化来判断，因此选择AC或BD。 ②实验的实验目的主要是探究在寒冷环境下，深色体表的植物能吸收较多 的太阳能，最简便的检测指标就是烧杯内水的温度的变化。 ③实验的自变量是植物的种类，水温的改变就取决于植物的种类，因此若 深色组植物体表的温度值高于浅色组，则说明在寒冷环境下，深色体表的 植物能吸收较多的太阳能，有利于维持细胞内酶的活性。 ④上述实验环节中，选定此监测指标的理由是：实验操作简便以及监测 便捷。 ⑤结合本实验的研究结果，植物吸收的太阳能可以用于光合作用。 ⑥植物吸收的太阳能又能用于维持植物体的温度，保证酶的活性。 ⑦基于本实验，为了让耐寒性较弱的行道树安全越冬，可采取的合理有效 措施有覆盖较深颜色的薄膜，可以提高植物对太阳能的吸收。 答案：(1)信息传递生态位分化植物的生长发育狼所处的营养级高， 归属该营养级的能量少，该营养级的个体数量相对较少使能量更多地流 向对人类有益的方向 (2)AC/BDBB实验操作简便光合作用植物体温度的维持 覆盖较深颜色的薄膜 18.解析：(1)氨元素是植物生长的必须元素，湖泊水体中含有超标的氨类物质 时，会使藻类等水生生物的生长过快，导致水体富营养化，从而引发水华等 环境问题，因此湖泊水体的氨浓度是评价水质的重要指标之一。 (2)在湖区生态系统中，红树植物参与碳循环的主要途径有光合作用、呼吸 作用，还有通过根系吸收土壤中的碳酸盐，在体内转变成有机碳；通过食物 链和食物网的形式，将制造的有机碳传入其他生物等。 (3)鸟类属于消费者，消费者通过自身的新陈代谢，能将有机物转化为无机 物(CO2、水、氨等)，这些无机物排出体外后又可以被生产者重新利用。因 此消费者的存在，能够加快生态系统的物质循环。此外，消费者对于植物 的传粉和种子的传播等具有重要作用。 (4)保护生物多样性的意义在于维持生态系统的稳定性，为人类的生存发 展提供物质条件等。 答案：(1)N元素是植物生长的必须元素，含量过多会使藻类等水生生物的 生长过快，导致水体富营养化，从而引发水华等环境问题 (2)通过根系吸收土壤中的碳酸盐，在体内转变成有机碳；通过食物链和食 物网的形式，将制造的有机碳传入其他生物 (3)加快生态系统中的能量流动和物质循环：帮助植物传粉和传播种子 (4)维持生态系统的稳定性，为人类的生存发展提供物质条件等 19.解析：(1)每条食物链的起，点总是生产者，食物链终，点是不能被其他生物所 捕食的动物，即最高营养级，某农田生态系统中有玉米、蛇、蝗虫、野兔、青 蛙和鹰等生物，具有5个营养级的食物链为玉米→蝗虫→青蛙→蛇→鹰。 (2)在森林中，当害虫数量增加时，食虫鸟也会增多，害虫种群的增长就受 到抑制，这属于负反馈调节，它是生态系统自我调节能力的基础。除了天 敌增加，还有食物减少、种内竞争加剧，均可以作为负反馈的条件。 (3)森林生态系统的生物种类多，食物网（营养结构）复杂，自我调节能力 强，故森林生态系统的抵抗力稳定性高于农田生态系统。 答案：(1)玉米→蝗虫→青蛙→蛇→鹰 (2)在森林中，当害虫数量增加时，食虫鸟增多，害虫种群的增长就受到 抑制 (3)森林生态系统的生物种类多，食物网（营养结构）复杂，自我调节能力强 20.解析：(1)群落中每种生物都占据着相对稳定的生态位，这有利于不同生物 之间充分利用环境资源，故为了保证资源充分利用，应尽量保证生态系统 内生物的生态位的不同。 (2)鸻鹬类候鸟的食谱内不包括鱼类，人工湿地中需要引入鱼类，可以减缓 鹆鹬类与其他水鸟的种间竞争，而且各种鱼类还有其自身的生态系统调节 功能。 (3)据图分析，在挺水植物和沉水植物→植食性鱼类→肉食性鱼类→水鸟、 浮游藻类→浮游动物→滤食性生物→肉食性鱼类→水鸟的食物链中，肉食 性鱼类分别位于第三和第四营养级：若投放过早，可能会造成低营养级生 物无法积累生物量，从而导致食物网崩溃。而在后期投放，可以加快湿地 生态系统的物质循环和能量流动，使之更趋于稳定和成熟。 答案：(1)生态位 (2)鱼类的引人可以减缓鸻鹬类与其他水鸟的种间竞争，而且各种鱼类还 有其自身的生态系统调节功能 【28】-3N (3)第三和第四无法积累生物量物质循环和能量流动 21.解析：(1)生态系统的组成成分包括非生物的物质和能量，生产者、消费者 和分解者，植物通常是生态系统中的生产者，供养着众多的消费者和分解 者。动物既从植物中获取物质和能量，也有利于植物繁殖体的传播。亚洲 象食草的食物链中，亚洲象属于初级消费者，位于第二营养级。 (2)亚洲象采食了部分玉米，最易改变的是群落的水平结构：生物多样性包 括三个层次：遗传多样性、物种多样性、生态系统多样性，其中部分玉米被 取食，降低了遗传多样性。退耕后仍保留原有土壤条件及繁殖体，这种群 落演替类型称为次生演替。 (3)与森林相比，玉米地的物种丰富度低，结构简单，功能薄弱，抵抗力稳定 性弱，即抗干扰能力弱、维护系统稳定的能力差，A、B、C正确；气候与生态 系统抵抗力稳定性无关，D错误。故选ABC。 (4)在雨林高温、高湿的环境条件下，分解者将有机物快速分解为无机物， 故土壤中有机质含量低。 答案：(1)消费者繁殖体二 (2)水平遗传次生 (3)ABC (4)分解者将有机物快速分解为无机物 卷15生物技术与工程（一） 1.C动物体细胞分化程度高，表现全能性十分困难。因此动物体细胞核移植 的难度明显高于胚胎细胞核移植。胚胎移植是指将通过体外受精及其他方 式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的雌性动物体内，使之继续发 育为新个体的技术。其中提供胚胎的个体称为“供体”，接受胚胎的个体叫 “受体”。通过任何一项技术（如转基因、核移植和体外受精等）获得的胚胎， 都必须移植给受体才能获得后代。A、由于MⅡ期卵母细胞的细胞更大，便 于进行技术操作，细胞质中含有激发细胞核全能性的物质，因此体细胞核移 植到去核的MⅡ期卵母细胞形成重构胚，A正确；B、移植前胚胎发育率低， 细胞核来自于已分化的体细胞，全能性容易受到影响，因此可能是植入的体 细胞核不能完全恢复分化前的功能状态，B正确；C、根据题干，早期胚胎大 多都不能发育至囊胚期，必然不是孵化的原因，着床在孵化之后发生，孵化 是胚胎从透明带中仲展出来（不是滋养层），C错误；D、胚胎细胞核全能性高 于体细胞，因此为提高胚胎成活率，可用胚胎细胞核移植代替体细胞核移 植，D正确。 2.B本题考查微生物的培养与应用综合、无菌技术、发酵工程的应用。消毒 是指使用较为温和的物理、化学或生物等方法杀死物体表面或内部一部分 微生物；灭菌则是指使用强烈的理化方法杀死物体内外所有的微生物，包括 芽孢和孢子。A、根据题目信息“隐甲藻是一种好氧的异养真核微藻，多在 海水中腐烂的植物叶片上生长繁殖”可知，隐甲藻可从腐烂的叶片获得生长 必需的碳源，A正确；B、采集海水中腐烂的叶片进行湿热灭菌后，会杀死所 有的微生物，此时接种到固体培养基上无法获得隐甲藻，B错误；C、根据题 目信息可知，隐甲藻为真核生物，抗生素可通过抑制细菌细胞壁合成或影响 代谢过程来抑制细菌生长，不会影响真核生物的生命活动，因此在筛选或培 养隐甲藻时，加入抗生素可有效抑制细菌杂菌，提高隐甲藻的纯度和生长效 率，C正确；D、根据题目信息可知，隐甲藻为好氧生物，因此利用隐甲藻进行 DHA发酵生产时，适当提高发酵时的通气量和搅拌速率均可增加溶氧量， 以提高DHA产量，D正确。 3.A添加少量色氨酸，突变体菌株可以生长，色氨酸合成途径的中间产物积 累后可排出胞外，进入培养基后，通过扩散，从而给其他突变型提供代谢原 料，帮助其长出明显的菌落。trpX、trpY和trpZ分别为相应酶的编码基因 突变的色氨酸依赖型突变体，据图可知，trpX不能为trpY和trpZ提供原 料，trpY不能为trpZ提供原料，trpZ可以为trpX,trpY的生长提供原料， 推测3种酶在该合成途径中的作用顺序为X→Y→Z。故选A。 4.B根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是组成脲酶的重要元 素，A正确；脲酶催化尿素水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作 为脲酶的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有关，B错误； 产脲酶细菌可利用NH,C1里的氮源进行代谢活动，因此产脲酶细菌可在以 NH,C1为唯一氨源的培养基生长繁殖，C正确；产脲酶细菌能利用脲酶催化 尿素分解产生NH3,NH?可作为细菌生长的氮源，不能产脲酶的细菌则无 法分解尿素获得氨源，因此以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶 细菌，D正确。故选B。 5.D由图可知，②中拔出棉塞后应握住棉塞上部；⑥中划线时不能将培养皿 的皿盖完全拿开，应只打开一条缝隙；⑦中划线时第5次的划线不能与第1 次的划线相连；⑧中平板应倒置培养。①③④⑤正确，故选D。 6.B植物体细胞杂交是指将不同种的植物体细胞在一定条件下融合成为杂 种细胞，并把杂种细胞培育成新的植物体的方法。其原理是细胞膜的流动 性和细胞的全能性，去除细胞壁后诱导原生质体融合的方法有离心、电刺 激、聚乙二醇等试剂诱导，其典型优势是克服远缘杂交不亲和的障碍。A、 两个原生质体融合形成的细胞不一定是杂种细胞，有可能是两个花椰菜原 生质体融合或两个黑芥原生质体融合等，A错误；B、全能性是指已经分化 的细胞仍然具有发育成完整个体的潜能，杂种细胞经过培养形成再生植株 N,这证明了杂种细胞仍具有全能性，B正确；C、花椰莱和黑芥是不同物种， 它们之间存在生殖隔离。原生质体能融合并不能证明不存在生殖隔离，因 为生殖隔离是指不同物种之间一般是不能相互交配的，即使交配成功，也不 能产生可育的后代，C错误；D、植株N是花椰菜(BB,2n=18)和黑芥(CC, 2n=16),二者原生质体经PEG诱导融合形成杂种细胞后，染色体组成是 BBCC,存在同源染色体，在减数分裂时能正常联会配对，能产生可育配子， D错误。 7.A成熟的植物细胞有中央大液泡，用高浓度蔗糖溶液处理，细胞会失水， 成熟植物细胞能发生质壁分离，因此用高浓度蔗糖溶液处理成熟植物细胞 观察质壁分离，A正确；向泡菜坛盖边沿的水槽中注满水形成内部无氧环 境，不能创造无菌环境，B错误；在用样方法调查种群密度时，应该做到随机 取样，而不是在目标个体集中分布的区域划定样方调查种群密度，C错误； 对外植体进行消毒可以减少外植体携带的微生物，但不能杜绝接种过程中 的微生物污染，D错误。故选A。 8.C接种最常用的方法：(1)平板划线分离法：由接种环以菌操作沾取少许待 分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划 线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果 划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。 (2)稀释平板法：首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的 微生物细胞分散开，使成单个细胞存在（否则一个菌落就不只是代表一个细 胞)，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板 中的培养基内。A、平板划线法主要用于微生物的分离和纯化，不能用于测 定活菌数，测定活菌数常用稀释涂布平板法，A错误；B、Y菌组微塑料残留 率较高，说明Y菌对微塑料的降解能力相对较弱，而不是菌浓度高，微塑料 残留率与菌对微塑料的降解能力有关，而非直接与菌浓度相关，B错误；C、 由图可知，X十Y混合菌种组的微塑料残留率低于X菌组和Y菌组，说明混 合菌种对微塑料的降解能力高于单一菌种，C正确；D、该培养基中含有蛋白 胨，能在该培养基中生长繁殖的微生物可能利用蛋白胨作为碳源和氨源等， 但不一定都能降解微塑料，D错误。 9.B筛选目的菌时应从富含目的菌的环境中去取样，酸奶和泡菜中富含乳酸 菌，可以从中采样进行分离纯化，A正确；平板倒置培养是为了防止培养皿 皿盖上的水珠落入培养基造成污染，不是创造无氧环境，B错误；筛选的是 能平衡肠道菌群和降解胆固醇的乳酸菌，所以，初步筛选后，还需要进一步 进行目的菌胆固醇降解能力的测定，以获得符合要求的乳酸菌，C正确；因 筛选出的目的菌是在肠道发挥作用，所以，还需要检测目的菌株对消化道环 境的耐受力，D正确。故选B。 10.D为防止杂菌感染，接种前需要对培养基、培养皿、微生物采样器进行灭 菌，对实验操作者的双手进行消毒，A正确；纯化培养时，为防止污染培养 基和水分蒸发，培养皿应倒置放在恒温培养箱内培养，B正确：微生物计数 时在同一稀释度下，应至少需要对3个菌落数目在30~300的平板进行计 数，以确保实验的准确性，C正确；使用稀释涂布平板法对微生物计数，数 值往往偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时，在平板上只能观察到一 个菌落，D错误。故选D。 11.A细菌是原核生物，酵母菌是真核生物，不同微生物对营养物质的需求 是不一样，通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氨比，A正确；通常 细菌的生长速度比酵母菌快，但形成的菌落，不一定细菌的大于酵母菌的， 与细菌的种类有关，部分细菌的菌落小于酵母菌，B错误；通常细菌和酵母 菌的培养基都可以用高压蒸汽灭菌法灭菌，C错误；血细胞计数板适用于 真菌的计数，细菌计数板用于细菌的数量测定等，D错误。故选A。 12.D不含氯源的平板可用于固氨菌的培养，A错误；平板涂布时涂布器使 【29】-3N 用前必须浸在酒精中，然后在火焰上灼烧灭菌，这种操作属于灭菌，不属于 消毒，B错误；使用后的培养基即使未长出菌落也要在丢弃前进行灭菌处 理，不能直接丢弃，以免污染环境，C错误；脲酶可以催化尿素分解，在以尿 素为唯一氨源的平板上，能合成脲酶的微生物可以分解尿素获得氮源而进 行生长繁殖，但是不能合成脲酶的微生物因缺乏氨源而无法生长，因此以 尿素为唯一氨源的平板能分离出合成脲酶的微生物，D正确。故选D。 13.C白酒的酿造主要依靠酿酒酵母，由于窖泥中含有大量与酿酒相关的微 生物，故传统白酒的酿造是在以酿酒酵母为主的多种微生物共同作用下完 成的，A正确；窖池内各种微生物形成了相对稳定的体系，且酿造过程产生 的酒精也会抑制杂菌的生长与繁殖，使酿造过程不易污染杂菌，B正确；酵 母菌是是兼性厌氧菌，与无氧呼吸相比，细胞有氧呼吸产生的能量更多，更 能满足酵母菌大量繁殖时的需求，因此，对分离的酿酒酵母扩大培养时需 要在有氧的条件下进行，C错误；谷物原料如高粱、玉米、大米等富含淀粉， 因此从谷物原料发酵形成的酒糟中可分离出产淀粉酶的微生物，D正确。 故选C。 14.ACD糯米“蒸熟”与大米“蒸煮”的目的均有利于灭菌和糖化过程，A正 确；图中制酒用到了酒曲，酒曲含有霉菌、酵母菌、乳酸菌，霉菌属于真菌， 其为需氧型，该过程霉菌产生的淀粉酶有利于将糯米中的淀粉分解，其中 的乳酸菌进行的是无氧呼吸，酵母菌主要进行无氧呼吸过程完成酿酒的过 程，醋酸发酵过程中主要利用了醋酸杆菌的有氧呼吸进行醋酸发酵，B错 误；醋酸发酵过程中利用了醋酸菌的有氧呼吸，在发酵过程中经常翻动发 酵物，有利于散热，可控制发酵温度和改善通气状况，C正确；啤酒酿造流 程中利用的原理是酵母菌的无氧呼吸产生酒精的过程，若适当增加溶解氧 有利于酵母菌有氧呼吸产生更多的能量满足酵母菌自身增殖的需要，因而 可缩短发酵时间，D正确。故选ACD。 15.AB二者均利用了酵母菌进行无氧呼吸产生酒精的原理，A正确；发酵前 期，均需要一定的有氧环境，使酵母菌大量繁殖，B正确；果酒的家庭制作 不需对原料进行灭菌，C错误；果酒的家庭制作不需要进行消毒，D错误。 故选AB。 16,ACD乳酸菌属于厌氧菌，开盖放气会影响乳酸菌发酵，因此不能开盖放 气，A错误；制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，是为了发酵初 期让酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，同时为了防止发酵过程中发酵液溢 出，制作泡菜的盐水要淹没全部莱料，以保证乳酸菌进行无氧呼吸，B正 确；醋酸菌为需氧菌，且发酵温度高于果酒的发酵温度，因此制作好葡萄酒 后，除通入无菌空气，还需要适当提高发酵装置的温度，C错误；果酒发酵 时温度宜控制在18~25℃，果醋发酵时温度宜控制在30~35℃，泡菜的 制作温度低于30~35℃，D错误。故选ACD。 17.解析：(1)酵母菌在密闭发酵罐中进行无氧呼吸，会产生酒精(C2HOH)和 CO2。有氧培养时，酵母菌进行有氧呼吸，有机物被彻底氧化分解，产生大 量能量，而无氧呼吸中有机物不能彻底分解，只产生少量能量，故有氧培养 时酵母菌增殖速度明显快于无氧培养」 (2)由图甲结果可知，无氧/无氧条件下，菌落数最多，因此有利于保留占比 很低菌种的采集条件是无氧/无氧。 (3)依据图乙结果可知，随着H2O2浓度的持续上升，酵母菌存活率下降 (酵母菌受损程度加深)，但不能证明酵母菌接触O2的最初阶段，细胞产生 的HO。浓度会持续上升；由题意可知，该实验在无氧条件下从发酵罐中 取出酵母菌，接种到含不同浓度H,O,的培养基上进行无氧培养，并没有 创造O2浓度陡然变化的条件，所以不能完全证实上述推测。 (4)过氧化氢酶能催化H2O,分解出现明显气泡，因此实验结果说明，酵母 菌可通过产生过氧化氢酶以抵抗H,O2的伤害。 答案：(1)酒精/C2HOH能量 (2)无氧/无氧 (3)不能。该实验只能证明随着H2O,浓度的持续上升，酵母菌存活率下 降（酵母菌受损程度加深），但不能证明酵母菌接触O,的最初阶段，细胞产 生的H,O,浓度会持续上升：该实验在无氧条件下从发酵罐中取出酵母 菌，接种到培养基上无氧培养，并没有创造O,浓度陡然变化的条件 (4)过氧化氢酶/H2O,酶 18.解析：(1)方法1从土壤等环境样品中筛选高产磷脂酶的微生物。以磷脂 酰乙醇酯为唯一碳源制备选择培养基，在该培养基中只有能利用磷脂酰乙 醇酯的微生物能生长，其他微生物的生长被抑制，进而获得筛选出所需要 的微生物，为了提高该方法的筛选效率。除碳源外，该培养基中至少还应 该有水分、无机盐和氮氯源等营养物质，同时还需要提供微生物生长所需要 的外界环境条件。 (2)方法2采用基因工程技术定向改造现有微生物，以获得高产磷脂酶的 微生物。除了编码磷脂酶的基因，即目的基因外，该技术还需要限制酶、 DNA连接酶和载体（或质粒）等“分子工具”，进而可以实现目的基因表达 载体的构建。 (3)除了上述2种方法之外，还可以通过诱变育种技术非定向改造现有微 生物，筛选获得能够高产磷脂酶的微生物，该技术的原理是基因突变，由于 基因突变具有不定向性，因而该技术具有盲目性。 (4)将以上获得的微生物接种到鉴别培养基（在牛肉膏蛋白胨液体培养基 中添加2%的琼脂粉和适量的卵黄磷脂)平板上培养，可以通过观察卵黄 磷脂水解圈的大小，初步判断微生物产磷脂酶的能力，但不能以水解圈大 小作为判断微生物产磷脂酶能力的唯一依据。从平板制作的角度分析，即 倒平板过程中没有经过定量检测，且平板倒置的实际可能也会影响平板中 培养基厚度的不同，因此不同平板中培养基量的差异以及平板内培养基厚 度不均匀以及平板间后代不均匀都会影响实验结果的判断，因此可采用降 解圈的直径和菌落直径的比值作为判断依据。 答案：(1)选择水无机盐氮源 (2)基因工程（或转基因）限制酶DNA连接酶载体（或质粒） (3)诱变育种 (4)不同平板中培养基量的差异以及平板内和平板间培养基厚度不均匀 19.解析：(1)显微镜直接计数法把死菌和活菌一起计数。菌落计数法计数只 计活菌数，还可能存在多个活菌形成一个菌落的情况，故前者的数量多于 后者。 (2)从100mL细菌原液中取1mL加入无菌水中得到10mL稀释菌液，即 稀释了10倍，1L细菌原液中细菌浓度=（菌落数÷菌液体积）×稀释倍 数=(100÷200μL)×10个=5000个。 (3)菌落计数过程中，涂布器应先在酒精灯上灼烧，冷却后再涂布。灼烧的 目的是杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物 污染，冷却的目的是防止温度过高杀死菌种。 (4)A消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短，效率最高，因此A消毒 液杀菌效果最好。 (5)大肠杆菌在伊红美蓝培养基上生长的菌落呈黑色。 答案：(1)前者微生物分散的活菌和死菌一起计数，后者存在多个活菌形成 一个菌落的情况且只计数活菌 (2)5000 (3)杀死涂布器上可能存在的微生物，防止涂布器上可能存在的微生物污 染防止温度过高杀死菌种 (4)AA消毒液活菌数减少量最多，且杀菌时间较短，效率最高 (5)黑 20.解析：(1)蛋白胨主要为细菌提供氨源、碳源和维生素等。 (2)将含有一定浓度A菌的少量培养基倾倒在固体培养平板上，凝固形成 薄层。培养一段时间后，薄层变浑浊，表明A菌能在培养平板中生长 繁殖。 (3)将含菌量较高的湖泊水样稀释后，依次分别涂布于不同的浑浊薄层上。 培养一段时间后，能溶解A菌的菌落周围会出现溶菌圈。 (4)根据实验的实验材料和设备，圆形滤纸小片可用于吸收某种物质，离心 机可用于分离菌体和细菌分泌物，为探究P菌溶解破坏A菌的方式，可假 设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂。 答案：(1)氮源、碳源 (2)A菌能在培养平板中生长繁殖 (3)稀释溶菌圈 (4)假设P菌通过分泌某种化学物质使A菌溶解破裂 21.解析：(1)由题意可知，根际促生菌具有固氨作用，可利用空气中的氮气作 【30】-3N 为氨源，因此用于筛选根际促生菌的培养基的主要营养物质包括水、无机 盐和淀粉。 (2)由题表可知，在抗菌肽浓度为3.45~55.204g·mL,1范围内，金黄色 葡萄球菌和枯草芽孢杆菌均不能生长，表明该抗菌肽对它们的抑菌效果较好； 因为抗菌肽的浓度为1.73g·L1时，它们均能生长，所以要确定抗菌肽 抑菌效果的最低浓度，应在1.73~3.45g·mL1的浓度区间进一步 实验」 (3)在利用A菌株发酵生产淀粉酶M过程中，传代多次后，生产条件未变， 但某子代菌株不再产生淀粉酶M,可能的原因是淀粉酶编码基因M发生 突变：或者是重组质粒在大肠杆菌分裂过程中丢失。 (4)肺类装配体培养需要满足适宜的营养、温度、渗透压、H以及无菌、无 毒环境，含95%空气和5%CO2的气体环境等基本条件；由图示可知，肺类 装配体形成的过程中没有运用动物细胞融合技术，只涉及了细胞的分裂和 分化等内容。 (⑤)科研人员拟用MRSA感染肺类装配体建立感染模型，来探究解淀粉芽 孢杆菌H抗菌肽是否对MRSA引起的肺炎有治疗潜力，必备实验材料 为：②MRSA感染的肺类装配体、③解淀粉芽孢杆菌H抗菌肽、④生理盐 水（设置对照实验使用），⑥万古霉素（抗MRSA的药物，比较解淀粉芽孢杆菌 H抗菌肽的疗效)，故选②③④⑥。 答案：(1)无机盐、淀粉 (2)金黄色葡萄球菌和枯草芽孢杆菌1.73~3.45 (3)淀粉酶编码基因M发生突变；重组质粒在大肠杆菌分裂过程中丢失 (4)无菌、无毒环境，含95%空气和5%C02的气体环境否 (5)②③④⑥ 卷16生物技术与工程（二） 1.C体外受精是指将卵子和精子在体外人工控制的环境中完成受精过程的 技术。A、该母牛孕酮量低于正常母牛，子宫内膜增生可能不足，不利于受 精卵着床，即使运用体外受精或人工授精技术，也难以提高妊娠率，A错误； B、使用外源促性腺激素处理该牛，可促使其超数排卵，获得更多卵子，但孕 酮量低于正常母牛，受精卵不能成功着床，不能获得成活胚胎，B错误；C、 该牛可正常排卵但孕酮量低于正常母牛，故可通过体外受精或人工授精后 形成受精卵移植到健康的受体内可提高存活率，C正确；D、使用该牛MⅡ 期卵母细胞的细胞核进行核移植，由于该牛本身孕酮分泌异常等问题，获得 的后代也可能存在发育等方面的问题，不一定可育，D错误。 2.D大豆叶片细胞是植物细胞，具有细胞壁，其细胞壁的成分是纤维素和果 胶，所以制备原生质体，需用纤维素酶和果胶酶进行处理，A正确；生物膜的 功能特点是具有选择透过性，所以膜具有选择透过性，B正确；原生质体可 以再生出新的细胞壁，C正确；分离出的原生质体具有全能性，可用于植物