第一章 发酵工程（单元自测卷）生物苏教版选择性必修3

( ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ) ( ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ) ( 此卷只装订不密封 ) ( ………………○………………内………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… ………………○………………外………………○………………装………………○………………订………………○………………线………………○……………… … 学校： ______________ 姓名： _____________ 班级： _______________ 考号： ______________________ ) 2025-2026学年高二下学期生物单元自测 第一章 发酵工程 （建议用时：75分钟 满分：100分） 一、单项选择题：（本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个选项最符合题意。) 1.菌落特征常用来鉴定微生物的种类。下列关于菌落的叙述，错误的是（　　） A．菌落的特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面 B．不同种类的微生物所表现出来的菌落差异是个体细胞形态差异的反映 C．一个菌落就是单个微生物在液体培养基上迅速生长繁殖形成的子细胞集团 D．一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征 2.下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（　　） 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 琼脂 蒸馏水 含量 10g 10g 2g 适量 1000mL A．能在此培养基上生长的只有大肠杆菌 B．从物理性质看该培养基属于固体培养基 C．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 D．培养基中作为碳源的只有葡萄糖，作为氮源的只有牛肉膏 3.脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是（　　） A．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 B．脲酶能通过降低尿素水解反应的活化能来加快反应速率 C．产脲酶细菌在以NH4NO3为唯一氮源的培养基上不能生长繁殖 D．镍是维持脲酶结构和功能所必需的且是组成脲酶的重要元素 4.传统蚕豆酱酿制过程：蚕豆去壳后经高压蒸煮、冷却后通过人为接种曲霉的方式或在通风的自然环境下制曲，将成曲的蚕豆与一定浓度的盐水混合后进行晾晒发酵（如图）。下列叙述正确的是（　　） A．制作蚕豆酱与制作酸奶的主要菌种的代谢类型相同 B．发酵过程中蒸煮的目的是杀灭蚕豆表面的微生物 C．采用温度较低的巴氏消毒能更好保留蚕豆酱的营养成分和风味 D．可采用平板划线法或细菌计数板对蚕豆酱酿制的优势菌种进行计数 5. 关于土壤中分解尿素的细菌分离、计数的实验，下列叙述正确的是（　　） A．配制以尿素为唯一氮源的鉴别培养基分离细菌 B．灭菌后的培养基需冷却至室温后在超净台内倒平板 C．接种环经火焰灼烧灭菌冷却后，在平板上涂布菌液 D．显微镜计数法比稀释涂布平板法计数更快速、直观 6. 某同学进行下列实验时，相关操作不合理的是（　　） A．从试管中取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌 B．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理 C．观察黑藻的细胞质流动时，在低倍镜下应先调节粗准焦螺旋，再调节细准焦螺旋 D．鉴定脂肪时，花生子叶切片用苏丹Ⅲ染液染色后，再用体积分数为50%乙醇洗去浮色 7. 无菌操作是微生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A．配制培养基、倒平板、接种均需在酒精灯火焰旁进行 B．玻璃器皿、金属用具可采用干热灭菌法进行灭菌 C．倒平板后敞开皿盖用吹风机冷风加速培养基凝固 D．配制好的培养基先分装到培养皿中再进行灭菌 8. 为了提高乳糖酶的产量，科研人员从奶酪中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，操作过程如图所示。其中X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。下列相关叙述正确的是（　　） A．将菌液接种到培养基乙所采用的方法是平板划线法 B．含X-gal培养基从功能上划分，属于选择培养基 C．纯培养过程中，配制好培养基后须依次进行灭菌、调节酸碱度和倒平板操作 D．牛奶中添加适量乳糖酶获得无乳糖牛奶，一般不会破坏牛奶中的其他营养成分 9. 图示涂布在平板上的菌落，下列叙述正确的是（　　） A．该方法更适用于分离厌氧微生物 B．涂布时应控制菌浓度在30~300个/mL C．涂布的菌液量过少可导致菌落分布不均 D．使用图中方法进行计数得到的结果往往偏大 10．某种除草剂不易降解，长期使用会污染土壤。研究人员按下图流程，选育能降解该除草剂的细菌（含一定量该除草剂的培养基不透明）。相关叙述正确的是 A．进行I操作前，必须对土壤液进行等比稀释 B．由Ⅱ可推测，接种环共进行了5次灼烧灭菌 C．配制Ⅱ、Ⅲ的培养基时，先湿热灭菌再调节pH D．Ⅲ中透明圈直径/菌落直径的比值越大，说明其降解效果越好 11．筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。下列有关本实验的叙述中，错误的是（　　） 菌种 菌落直径：C（mm） 透明圈直径：H（mm） 细菌I 5.1 11.2 细菌II 8.1 13.0 A．培养基中除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C．以上两种细菌均可以将淀粉酶分泌至细胞外 D．由上表数据可知，细菌Ⅱ分解淀粉的能力更强 12．黄酒是我国古老的发酵酒之一，下图是传统酿制黄酒的主要流程，下列叙述错误的是（　　） A．小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质 B．为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌 C．糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率 D．将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖 13．食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均可通过发酵技术生产。下列叙述正确的是（　　） A．醋酸和酒精都是厌氧发酵产生的不彻底产物 B．食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 C．以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，都伴有pH下降和气体产生 D．使用天然混合菌种发酵比用单一菌种发酵得到的产品品质更稳定 14．下列关于传统发酵技术、发酵工程的叙述，错误的是（　　） A．发酵工程的中心环节是灭菌，特别是发酵罐必须进行严格灭菌 B．使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一 C．家庭制作泡菜和果醋过程中，形成发酵液表层白膜的微生物不同 D．啤酒的工业化生产过程中，糖化的目的是使淀粉分解，形成糖浆 15. 发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的有（　　） A．筛选出高产黑曲霉菌种可进行发酵生产柠檬酸、酱油等食品或食品添加剂 B．菌落的大小、数目、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 C．从微生物细胞中提取出的单细胞蛋白，可作为良好的微生物饲料用于生产 D．啤酒制作中，主发酵主要为了促进酵母繁殖，后发酵主要为了酒精发酵 二、多项选择题：(本题包括4小题，每小题3分，共12分。每小题给出的四个选项中，有不止一个选项符合题意。每小题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。) 16．下列关于果酒、果醋酿造实验的说法正确的是（　　） A．乙醇可以作为果醋发酵的底物 B．酵母菌和醋酸杆菌增殖方式相同 C．酵母菌和醋酸杆菌同化作用类型相同 D．果酒发酵产物中的乙醇可以抑制杂菌生长 17. 谷氨酸棒状杆菌发酵生成谷氨酸，经加工可制成味精(相关工艺流程如图)。发酵过程可通过控制生物素(催化脂肪酸合成关键酶的辅酶)的用量形成“渗漏型”细胞膜。下列叙述正确的是（　　） A．谷氨酸棒状杆菌与酸奶发酵的菌种具有不同的代谢类型 B．控制生物素的用量有利于谷氨酸从胞内释放到胞外 C．图示发酵罐内的发酵以及产物的分离与提纯属于发酵工程的中心环节 D．发酵后期溶解氧急剧上升的原因可能与菌种活力下降或大量死亡有关 18．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（　　） A．黑曲霉发酵生产柠檬酸和谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，培养液的pH都应调至酸性 B．将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C．若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 D．将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 19．抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程，叙述正确的是（　　） A．有些菌株无透明圈产生是因为其不能产生抗生素 B．接种测试菌 3 时，接种环可能在灼烧后未完全冷却 C．测试菌 2、5 对该筛选出的菌产生的抗生素具有抗性 D．菌株的透明圈越大，其产生的抗生素抑制S菌效果越好 三、非选择题：(本题共5小题，除特别标注外，每空1分，共58分。) 20.（12分）炭疽是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。回答下列有关问题： (1)皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板不可能是______。 A． B． C． D． (2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。 ①对照试管中应加入 ，在实验室培养微生物时，需要对所用的培养基和玻璃器皿进行灭菌，可采用的方法分别是 。 ②实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是 。液体培养基变浑浊的原因是 。 ③实验结果为实验组液体培养基的浑浊度比对照组 （填“高”或“低”或“相近”）时，表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。 (3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用104、105、106三个稀释倍数的菌液，各取0.2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。 稀释倍数 104 105 106 平板编号 A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3 菌落数 315 298 302 45 54 51 12 9 11 由表可知，最适合计数的稀释倍数为 ，该稀释度下，原菌液中炭疽芽孢杆菌的密度为 （2分）个/mL。计数的结果 （偏大/偏小）原因是 （2分）。 21.（13分）牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解纤维素。某科研团队按照如图1所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌，实验中需要甲、乙两种培养基。 (1)获得纯净的微生物培养物的关键是 ，无菌技术主要包括 。 (2)从①开始分离筛选纤维素分解菌，甲培养基中除含有水、无机盐、氮源外还应以 ，该培养基按功能来分应为 培养基。甲、乙两培养基的主要区别是 。 (3)过程②过程所使用的接种方法是 。可在培养基表面均加入一层无菌的石蜡，其作用是 。 (4)刚果红可以与纤维素形成 复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图2），图中降解纤维素能力最强的菌株是 （填图中序号），原因是 。 (5)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为104的胃部样液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179.则每毫升样品中含有细菌数量为 个。通过该方法所得细菌数量一般较实际结果 ，原因是 。 22.（11分）苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的，是限制苹果产量的重要因素之一，生产上主要以化学药剂防治该病，为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如下： (1)①中木糖和硝酸钾的作用是提供 、 和 。 (2)②→③中梯度稀释的目的是 。 (3)常用的两种接种方法有 、 ，两者在操作上的共同点是 （写出一点即可）。从④到⑤的接种方法是 。培养过程中，主要根据 特征鉴别出枯草芽孢杆菌。 (4)现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如右上图平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3～5天，通过观察 就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。 (5)在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。 23.（11分）青梅具有典型的高酸低糖特性，常用的醋酸发酵菌株不能适应青梅的特点，导致发酵时间长、乙醇转化率低等问题。下图是科研人员选育专用于生产青梅醋的醋酸菌的流程图，请回答下列问题： 基础培养基：葡萄糖10g/L，酵母提取物10g/L，乙醇30mL/L 分离培养基：葡萄糖10g/L，酵母提取物10g/L，无水碳酸钙20g/L，琼脂粉20g/L，乙醇30mL/L。 (1)过程①选择腐烂青梅的原因是 ，过程②的主要目的是 ，摇床培养的目的是 。 (2)过程⑤分离培养基成分中可作为碳源的有 。将涂布好的培养皿冷凝后，于 ℃倒置培养72h。 (3)培养结果如图2所示，图中出现降钙圈的原因是 ，A、B、C三个菌落中应优先选择 ，理由是 。 (4) 科研人员监测了过程⑦发酵过程中总酸、乙醇、还原糖的含量变化，结果如图3，其中曲线甲 是 的含量变化曲线。某同学认为该结果说明当葡萄糖和乙醇同时存在时，醋酸菌优先利用乙醇，你是否同意他的观点，据图说明理由 （2分）。 24.（11分）部分人因乳糖不耐受（消化系统中缺乏乳糖酶）而无法尽情享用乳制品。科研人员尝试将乳酸克鲁维酵母（一种产中性乳糖酶的酵母菌）添加在乳制品中以缓解乳糖不耐受症状。请回答下列问题。 (1)为从乳制品中获得乳酸克鲁维酵母，研究人员配制以 为唯一碳源的选择培养基，经 灭菌后，取乳制品原液 （填“充分稀释”或“无需稀释”）后涂布到平板上进行富集培养。 (2)图中“？”处一般为 ，滴加到培养基表面后应待菌液被 后再倒置培养。 (3)培养到一定时期，选取菌落 稳定时的记录作为结果。若数据如图示，则无法准确推算此时1mL菌液中的酵母菌数量，原因是数据 ，无法采信。为获得适合添加在乳制品中的乳酸克鲁维酵母，除对生长速率进行统计外，还需测定中性乳糖酶的 并对安全性作出评价。 (4)测定菌液浓度还可以使用OD600法进行：将光波长设定为600nm，测定菌液的光密度值来指示菌体细胞密度。该方法应事先调零：对 （填“无菌水”或“空白培养液”）进行测定并以此值为基准。相比于显微镜下直接观察计数，该种测定方法的优点是样本可 。与稀释涂布平板法相比，该种测定方法的主要不足是无法区分 。 试题 第3页（共8页） 试题 第4页（共8页） 试题 第1页（共8页） 试题 第2页（共8页） 学科网（北京）股份有限公司 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期生物单元自测 第一章 发酵工程·参考答案 一、单选题：本题共15个小题，每小题2分，共30分。 题号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 答案 C B C C D B B D C D 题号 11 12 13 14 15 答案 D B C A A 二、多项选择题：本题包括4小题，每小题3分，共12分。 题号 16 17 18 19 答案 ACD ABD ABC CD 三、非选择题：本题共5小题，除特别标注外，每空1分，共58分。 20．（除注明外，每空1分，共12分）　 (1)D (2)① 等量的生理盐水 高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌）和干热灭菌法 ②异养需氧型 炭疽芽孢杆菌大量繁殖 ③低 (3)105 2.5×107 （2分） 偏小 当两个或多个炭疽芽孢杆菌连在一起时，平板上只会形成一个菌落，导致统计的菌落数少于实际的活菌数，因此计数结果偏小。（2分） 21.（每空1分，13分）　 (1) 防止杂菌污染 消毒和灭菌 (2) 纤维素为唯一碳源 选择 甲中无琼脂 (3) 稀释涂布平板法 瘤胃中的纤维素分解菌属于厌氧微生物，石蜡密封创设无氧环境，有利于瘤胃中的纤维素分解菌生长发育 (4) 红色 菌落① 降解圈直径和菌落直径比值最大 (5) 1.81×107 偏低 当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落 22．（每空1分，11分） (1)碳源 氮源 无机盐 (2)将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落 (3) 稀释涂布平板法 平板划线法 在酒精灯火焰旁接种等 平板划线法 菌落 (4)观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离） (5) 30~300 23．（除注明外，每空1分，11分） (1)腐烂青梅更易获得天然存在的耐酸醋酸菌 对醋酸菌进行富集培养，增加醋酸菌的种群密度 提高培养基的溶氧量，加快醋酸菌的繁殖 (2) 葡萄糖和乙醇 30 (3)菌株生长产酸溶解了培养基中的碳酸钙 A A降钙圈大，说明产酸能力强，更适合制醋 (4) 总酸 同意，由题意，葡萄糖浓度低于乙醇浓度，结合图3可知，乙曲线为乙醇，丙曲线为葡萄糖，乙醇浓度在发酵初期迅速下降，而还原糖含量的降低相对滞后，说明醋酸菌更先消耗乙醇来产生醋酸（2分） 24.（每空1分，11分） (1) 乳糖 高压蒸汽（湿热） 无需稀释 (2) 0.1 （培养基）吸收 (3) 数目 差异过大 含量和活性 (4) 空白培养液 回收（利用） 死菌和活菌 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期生物单元自测 第一章 发酵工程 （建议用时：75分钟 满分：100分） 一、单项选择题：（本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个选项最符合题意。) 1.菌落特征常用来鉴定微生物的种类。下列关于菌落的叙述，错误的是（　　） A．菌落的特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面 B．不同种类的微生物所表现出来的菌落差异是个体细胞形态差异的反映 C．一个菌落就是单个微生物在液体培养基上迅速生长繁殖形成的子细胞集团 D．一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征 【答案】C 【解析】菌落的特征有菌落的形状、大小、隆起程度、和颜色等方面，同种微生物菌落特征相对稳定，A正确；单个微生物肉眼不可见，所以在一定程度上不同种类的微生物所表现出来的菌落差异是个体细胞形态差异的反映，B正确；菌落是指细菌或真菌在固体培养基上由一个细胞生长繁殖而形成的能被肉眼识别的子细胞群体，而不是液体培养基，C错误；一般来说，在相同的培养基、温度及培养时间等条件下，同种微生物表现出稳定的菌落特征，D正确。 故选C。 2.下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（　　） 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 琼脂 蒸馏水 含量 10g 10g 2g 适量 1000mL A．能在此培养基上生长的只有大肠杆菌 B．从物理性质看该培养基属于固体培养基 C．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 D．培养基中作为碳源的只有葡萄糖，作为氮源的只有牛肉膏 【答案】B 【解析】该培养基含有碳源、氮源等基本营养，但未添加选择剂，无法专一培养大肠杆菌，其他异养微生物也可能生长，A错误；培养基中含琼脂（凝固剂），物理性质为固体培养基，B正确；培养基配制需灭菌后才能使用，仅调节pH会导致杂菌污染，C错误；牛肉膏含碳源和氮源，葡萄糖仅为碳源，因此碳源包括两者，D错误。 故选B。 3.脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是（  ） A．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 B．脲酶能通过降低尿素水解反应的活化能来加快反应速率 C．产脲酶细菌在以NH4NO3为唯一氮源的培养基上不能生长繁殖 D．镍是维持脲酶结构和功能所必需的且是组成脲酶的重要元素 【答案】C 【解析】产脲酶细菌能利用脲酶催化尿素分解产生NH3，NH3可作为细菌生长的氮源，不能产脲酶的细菌则无法分解尿素获得氮源，因此以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌，A正确；脲酶作为催化剂，通过降低尿素水解反应的活化能来提高反应速率，B正确；产脲酶细菌可利用NH4NO3里的氮源进行代谢活动，因此产脲酶细菌可在以NH4NO3为唯一氮源的培养基生长繁殖，C错误；根据题意，脲酶被去除镍后失去活性，说明镍是维持其空间结构及催化功能所必需的，且镍作为金属离子是脲酶（结合蛋白质）的组成成分，D正确。 故选C。 4.传统蚕豆酱酿制过程：蚕豆去壳后经高压蒸煮、冷却后通过人为接种曲霉的方式或在通风的自然环境下制曲，将成曲的蚕豆与一定浓度的盐水混合后进行晾晒发酵（如图）。下列叙述正确的是（　　） A．制作蚕豆酱与制作酸奶的主要菌种的代谢类型相同 B．发酵过程中蒸煮的目的是杀灭蚕豆表面的微生物 C．采用温度较低的巴氏消毒能更好保留蚕豆酱的营养成分和风味 D．可采用平板划线法或细菌计数板对蚕豆酱酿制的优势菌种进行计数 【答案】C 【解析】制作蚕豆酱利用的曲霉为异养需氧型，制作酸奶利用的乳酸菌为异养厌氧型，二者代谢类型不同，A错误；因为发酵过程中蒸煮后还要人为接种曲霉的方式或在通风的自然环境下制曲并晾晒发酵，因此其目的不是杀灭蚕豆表面的微生物，而是将蚕豆蒸煮熟软化来保证后期的发酵，B错误；采用温度较低的巴氏消毒能更好保留蚕豆酱的营养成分和风味，C正确；平板划线法主要用于分离单菌落，不能用于计数；细菌计数板可用于计数，但对蚕豆酱酿制的优势菌种计数，常用稀释涂布平板法或显微镜直接计数法（细菌计数板 ）等，平板划线法不能计数，D错误。 故选C。 5.关于土壤中分解尿素的细菌分离、计数的实验，下列叙述正确的是（    ） A．配制以尿素为唯一氮源的鉴别培养基分离细菌 B．灭菌后的培养基需冷却至室温后在超净台内倒平板 C．接种环经火焰灼烧灭菌冷却后，在平板上涂布菌液 D．显微镜计数法比稀释涂布平板法计数更快速、直观 【答案】D 【解析】配制以尿素为唯一氮源的培养基属于选择培养基，用于筛选能分解尿素的细菌，而非鉴别培养基（鉴别培养基需添加酚红指示剂），A错误；灭菌后的培养基需冷却至约50℃时倒平板，若冷却至室温会导致琼脂凝固无法倾倒，B错误；涂布法使用无菌涂布器将菌液均匀涂布于培养基表面，而接种环用于平板划线的操作，C错误；显微镜计数法（如血细胞计数板）直接观察计数，无需培养，比稀释涂布平板法更快速直观，D正确。 故选D。 6. 某同学进行下列实验时，相关操作不合理的是（　　） A．从试管中取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌 B．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理 C．观察黑藻的细胞质流动时，在低倍镜下应先调节粗准焦螺旋，再调节细准焦螺旋 D．鉴定脂肪时，花生子叶切片用苏丹Ⅲ染液染色后，再用体积分数为50%乙醇洗去浮色 【答案】B 【解析】微生物接种时，需在火焰旁操作以减少杂菌污染：先拔棉塞避免燃烧，再快速通过火焰灭菌试管口，该操作符合无菌要求，A正确；探究温度对酶活性影响时，若先将酶与底物混合再控温，酶促反应已在混合瞬间发生，无法体现温度对活性的影响。正确操作应先将酶和底物分别在不同温度下保温，再混合反应，B错误；显微镜观察时，低倍镜下需先调节粗准焦螺旋找到物像，再调节细准焦螺旋使物像清晰，符合显微镜的正确操作流程，C正确；脂肪鉴定中，苏丹Ⅲ染液染色后需用50%乙醇洗去浮色，避免干扰观察，该操作符合实验规范，D正确。 故选B。 7. 无菌操作是微生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A．配制培养基、倒平板、接种均需在酒精灯火焰旁进行 B．玻璃器皿、金属用具可采用干热灭菌法进行灭菌 C．倒平板后敞开皿盖用吹风机冷风加速培养基凝固 D．配制好的培养基先分装到培养皿中再进行灭菌 【答案】B 【解析】配制好的培养基需要灭菌，故配制培养基不需要在酒精灯火焰旁进行，倒平板、接种均需要在酒精灯火焰旁进行，A错误；干热灭菌法适用于耐高温且需保持干燥的玻璃器皿、金属用具等，即玻璃器皿、金属用具可采用干热灭菌法进行灭菌，B正确；C、倒平板后若敞开皿盖并用吹风机冷风吹，会大幅增加杂菌污染的风险，正确操作应为倒平板后立即盖上皿盖，C错误；培养基配制后应先灭菌（高压蒸汽灭菌），再在无菌条件下趁热倒入已灭菌的培养皿中，若先分装再灭菌，可能导致灭菌不彻底或培养基受热不均，D错误。 故选B。 8. 为了提高乳糖酶的产量，科研人员从奶酪中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，操作过程如图所示。其中X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。下列相关叙述正确的是（　　） A．将菌液接种到培养基乙所采用的方法是平板划线法 B．含X-gal培养基从功能上划分，属于选择培养基 C．纯培养过程中，配制好培养基后须依次进行灭菌、调节酸碱度和倒平板操作 D．牛奶中添加适量乳糖酶获得无乳糖牛奶，一般不会破坏牛奶中的其他营养成分 【答案】D 【解析】将菌液接种到培养基乙所采用的方法是稀释涂布平板法，A错误；X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色，含X-gal培养基从功能上划分，属于鉴别培养基，B错误；纯培养过程中，培养基配制好后，需先进行酸碱度的调节，然后灭菌，最后进行倒平板操作。如果先灭菌再调节酸碱度，会引入杂菌，影响培养基的无菌性，C错误；牛奶中添加适量乳糖酶获得无乳糖牛奶，一般不会破坏牛奶中的其他营养成分，乳糖酶专一性地分解乳糖，D正确。 故选D。 9. 图示涂布在平板上的菌落，下列叙述正确的是（　　） A．该方法更适用于分离厌氧微生物 B．涂布时应控制菌浓度在30~300个/mL C．涂布的菌液量过少可导致菌落分布不均 D．使用图中方法进行计数得到的结果往往偏大 【答案】C 【解析】稀释涂布平板法更适用于分离好氧微生物，A错误；计数时应选择菌落数为30-300的平板进行计数，由于涂布的体积为0.1mL，因此涂布时应控制菌浓度在300~3000个/mL，B错误；涂布的菌液量过少可导致菌落分布不均，C正确；图示方法为稀释涂布平板法，使用稀释涂布平板法可能会存在菌落的重叠，因此计数得到的结果往往偏小，D错误。 故选C。 10．某种除草剂不易降解，长期使用会污染土壤。研究人员按下图流程，选育能降解该除草剂的细菌（含一定量该除草剂的培养基不透明）。相关叙述正确的是（    ） A．进行I操作前，必须对土壤液进行等比稀释 B．由Ⅱ可推测，接种环共进行了5次灼烧灭菌 C．配制Ⅱ、Ⅲ的培养基时，先湿热灭菌再调节pH D．Ⅲ中透明圈直径/菌落直径的比值越大，说明其降解效果越好 【答案】D 【解析】蘸取上清液前不需等比稀释土壤液，因为图Ⅱ中的接种方法是平板划线法，A错误；接种需在酒精灯火焰周围进行，每次接种前需对接种环进行灼烧灭菌，以去除接种环上残留的菌液，由Ⅱ可推测，接种环共进行了6次灼烧灭菌，B错误；配制Ⅱ、Ⅲ的培养基时，先调节pH，再湿热灭菌，C错误；由于含一定量该除草剂的培养基不透明，透明圈是降解该除草剂而形成的，故Ⅲ中透明圈/菌落面积比值越大说明其降解效果越好，D正确。 故选D。 11．筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。下列有关本实验的叙述中，错误的是（　　） 菌种 菌落直径：C（mm） 透明圈直径：H（mm） 细菌I 5.1 11.2 细菌II 8.1 13.0 A．培养基中除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C．以上两种细菌均可以将淀粉酶分泌至细胞外 D．由上表数据可知，细菌Ⅱ分解淀粉的能力更强 【答案】D 【解析】筛选淀粉分解菌的培养基中，除淀粉提供碳源外，还需要氮源、水、无机盐等营养物质，A正确；筛选分离淀粉分解菌时，需要将菌液进行一定程度的稀释才能涂布培养，B正确；据图分析可知，两个菌落均产生了透明圈，说明两种细菌均能将淀粉酶分泌至细胞外，C正确；据表分析可知，H/C值越大，分解淀粉能力越强，所以细菌Ⅱ分解淀粉能力比细菌Ⅰ弱，D错误。 故选D。 12．黄酒是我国古老的发酵酒之一，下图是传统酿制黄酒的主要流程，下列叙述错误的是（　　） A．小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质 B．为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌 C．糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率 D．将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖 【答案】B 【解析】小麦、麸皮等原料含有蛋白质、糖类等多种营养成分，蛋白质可以为微生物提供氮源，糖类等可以为微生物提供碳源，所以能为酒曲中微生物的生长繁殖提供碳源和氮源等营养物质，A正确；扩大制曲前对留存的酒曲不能灭菌，因为酒曲本身含有发酵所需的菌种，若灭菌会杀死这些菌种，导致无法进行正常的发酵过程，B错误；糯米、大米蒸煮后温度较高，立即与酒曲混合，高温会使酶的空间结构改变，导致酶活性降低，从而降低其催化效率，C正确；酒曲中含有淀粉酶等酶类，将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，淀粉酶可将糯米、大米中的淀粉分解为葡萄糖，从而为后续酒母（含酵母菌）发酵提供底物葡萄糖，D正确。 故选B。 13．食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均可通过发酵技术生产。下列叙述正确的是（    ） A．醋酸和酒精都是厌氧发酵产生的不彻底产物 B．食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 C．以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，都伴有pH下降和气体产生 D．使用天然混合菌种发酵比用单一菌种发酵得到的产品品质更稳定 【答案】C 【解析】醋酸发酵的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型，故醋酸发酵是好氧发酵，而酒精发酵，参与的微生物是酵母菌，需要无氧呼吸产生酒精，故是厌氧发酵，A错误；黄酒发酵过程中，酵母菌繁殖在有氧条件下，产酒精要在无氧条件下，繁殖越快则发酵产物酒精产率越低，B错误；以谷物为原料酿造黄酒时，酵母菌进行酒精发酵产生CO₂和酒精，导致pH下降；酿造食醋时，需先进行酒精发酵（产CO₂和pH下降），再进行醋酸发酵（产酸进一步降低pH，但无气体）。因此，两者均伴随pH下降和气体产生，C正确；传统发酵食品所用的是自然菌种，没有进行严格的灭菌，以混合菌种的固体发酵及半固体发酵为主，往往会造成传统发酵食品的品质不一，D错误。 故选C。 14．下列关于传统发酵技术、发酵工程的叙述，错误的是（    ） A．发酵工程的中心环节是灭菌，特别是发酵罐必须进行严格灭菌 B．使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一 C．家庭制作泡菜和果醋过程中，形成发酵液表层白膜的微生物不同 D．啤酒的工业化生产过程中，糖化的目的是使淀粉分解，形成糖浆 【答案】A 【解析】发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵过程，而不是灭菌，A错误；使用天然混合菌种发酵时，由于菌种组成不稳定，往往会造成传统发酵食品的品质不一，B正确；家庭制作泡菜时，发酵液表层白膜是由酵母菌形成的，制作果醋时，发酵液表层白膜是由醋酸菌形成的，两者微生物不同，C正确；啤酒的工业化生产过程中，糖化的目的是使淀粉分解，形成糖浆，以便后续酵母菌发酵产生酒精，D正确。 故选A。 15. 发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的有（　　） A．筛选出高产黑曲霉菌种可进行发酵生产柠檬酸、酱油等食品或食品添加剂 B．菌落的大小、数目、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 C．从微生物细胞中提取出的单细胞蛋白，可作为良好的微生物饲料用于生产 D．啤酒制作中，主发酵主要为了促进酵母繁殖，后发酵主要为了酒精发酵 【答案】A 【解析】黑曲霉可用于生产柠檬酸，且在酱油制作中可能参与分解原料，因此筛选高产黑曲霉菌种可用于生产这些产品，A正确；菌落特征（如大小、形状、颜色）可用于菌种鉴定，但“有无荚膜”需通过显微镜观察，无法肉眼判断，B错误；单细胞蛋白指微生物菌体本身，直接作为饲料或食品，而非从细胞中提取的蛋白质，C错误；啤酒主发酵阶段主要进行酒精生成，酵母繁殖多在前期有氧阶段完成，后发酵侧重沉淀和风味物质形成，D错误。 故选A。 2、 多项选择题：(本题包括4小题，每小题3分，共12分。每小题给出的四个选项中，有不止一个选项符合题意。每小题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。) 16．下列关于果酒、果醋酿造实验的说法正确的是（　　） A．乙醇可以作为果醋发酵的底物 B．酵母菌和醋酸杆菌增殖方式相同 C．酵母菌和醋酸杆菌同化作用类型相同 D．果酒发酵产物中的乙醇可以抑制杂菌生长 【答案】ACD 【解析】乙醇在有氧条件下可被醋酸杆菌氧化为醋酸，A正确；酵母菌的增殖方式为出芽生殖，而醋酸杆菌的增殖方式为二分裂，B错误；酵母菌和醋酸杆菌的同化作用类型都为异养型，C正确；果酒发酵产生的乙醇可以抑制其他微生物的生长，D正确。 故选ACD。 17. 谷氨酸棒状杆菌发酵生成谷氨酸，经加工可制成味精(相关工艺流程如图)。发酵过程可通过控制生物素(催化脂肪酸合成关键酶的辅酶)的用量形成“渗漏型”细胞膜。下列叙述正确的是（　　） A．谷氨酸棒状杆菌与酸奶发酵的菌种具有不同的代谢类型 B．控制生物素的用量有利于谷氨酸从胞内释放到胞外 C．图示发酵罐内的发酵以及产物的分离与提纯属于发酵工程的中心环节 D．发酵后期溶解氧急剧上升的原因可能与菌种活力下降或大量死亡有关 【答案】ABD 【解析】谷氨酸棒状杆菌是异养需氧型（发酵生产谷氨酸），酸奶发酵的菌种（乳酸菌）是异养厌氧型，二者代谢类型不同，A 正确；题干提到 “控制生物素（催化脂肪酸合成关键酶的辅酶）的用量形成‘渗漏型’细胞膜”，“渗漏型” 细胞膜可使谷氨酸从胞内释放到胞外，B正确；发酵工程的中心环节是发酵罐内的发酵，产物的分离与提纯属于发酵工程的后续步骤（不属于中心环节），C错误；发酵后期，若菌种活力下降或大量死亡，其耗氧量会减少，溶解氧（环境中的溶解氧）会急剧上升，D正确。 故选ABD。 18．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（　　） A．黑曲霉发酵生产柠檬酸和谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，培养液的pH都应调至酸性 B．将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C．若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 D．将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 【答案】ABC 【解析】谷氨酸棒状杆菌发酵时，需在中性或弱碱性条件下，才能积累谷氨酸，故生产谷氨酸需将pH调至中性或弱碱性，A错误；将菌种接种至A培养基时，应该将接种环使用前需在火焰上灼烧而不是涂布器，B错误；以大豆为主要原料，利用黑曲霉，将原料中的蛋白质水解成小分子的肽和氨基酸，然后经淋洗、调制可以制成酱油产品，C错误；将菌种转接至B培养基是将菌种转接至新的培养基，目的是进行扩大培养，从而增加菌种的数量，D正确； 故选ABC。 19．抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程，叙述正确的是（　　） A．有些菌株无透明圈产生是因为其不能产生抗生素 B．接种测试菌 3 时，接种环可能在灼烧后未完全冷却 C．测试菌 2、5 对该筛选出的菌产生的抗生素具有抗性 D．菌株的透明圈越大，其产生的抗生素抑制S菌效果越好 【答案】CD 【解析】有些菌株无透明圈产生，可能是其产生的抗生素不能抑制指示菌S的生长，而非不能产生抗生素，A错误；接种测试菌3时，若接种环灼烧后未完全冷却，会导致测试菌3生长受抑制甚至死亡，而图中测试菌3有生长，因此接种环不可能未完全冷却，B错误；测试菌2、5在含有该菌产生的抗生素的环境中能生长，说明它们对该抗生素具有抗性，C正确；透明圈的大小反映抗生素抑制指示菌S的效果，透明圈越大，抑制效果越好，D正确。 故选CD。 3、 非选择题：(本题共5小题，除特别标注外，每空1分，共58分。) 20.（12分）炭疽是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。回答下列有关问题： (1)皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板不可能是______。 A． B． C． D． (2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。 ①对照试管中应加入 ，在实验室培养微生物时，需要对所用的培养基和玻璃器皿进行灭菌，可采用的方法分别是 。 ②实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是 。液体培养基变浑浊的原因是 。 ③实验结果为实验组液体培养基的浑浊度比对照组 （填“高”或“低”或“相近”）时，表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。 (3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用104、105、106三个稀释倍数的菌液，各取0.2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。 稀释倍数 104 105 106 平板编号 A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3 菌落数 315 298 302 45 54 51 12 9 11 由表可知，最适合计数的稀释倍数为 ，该稀释度下，原菌液中炭疽芽孢杆菌的密度为 （2分）个/mL。计数的结果 （偏大/偏小）原因是 （2分）。 【答案】（12分） (1)D (2)① 等量的生理盐水 高压蒸汽灭菌法（湿热灭菌）和干热灭菌法 ②异养需氧型 炭疽芽孢杆菌大量繁殖 ③低 (3)105 2.5×107 （2分） 偏小 当两个或多个炭疽芽孢杆菌连在一起时，平板上只会形成一个菌落，导致统计的菌落数少于实际的活菌数，因此计数结果偏小。（2分） 【解析】 （1）A、B、C中的菌落分布较均匀，是通过稀释涂布平板法获得的，而D是通过平板划线法获得的，平板划线法是从上一次划线的末端开始划线，D符合题意，ABC不符合题意，故选D。 （2）①对照组中加入的液体不应含有噬菌体，因此应加入等量的生理盐水。培养基灭菌采用高压蒸汽灭菌（湿热灭菌）法，玻璃器皿采用干热灭菌法。 ②炭疽芽孢杆菌属于细菌，能寄生在人和动物体内，说明它是异养型生物，培养时需要借助摇床振荡培养，说明它是需氧型生物。培养液变浑浊的原因是菌体数量增多，即炭疽芽孢杆菌大量繁殖引起的。 ③若实验组液体培养基的浑浊度低于对照组，说明实验组中的炭疽芽孢杆菌被噬菌体侵染与破坏，即该疑似患者感染了炭疽芽孢杆菌。 （3）分析表中数据可知，只有稀释度为105时菌落数在30~300之间，适合用于计数。该稀释度下，原菌液中炭疽芽孢杆菌的密度为（45+54+51）÷3÷0.2×105=2.5×10⁷个/mL。该计数的结果会偏小，原因是当两个或多个炭疽芽孢杆菌连在一起时，平板上只会形成一个菌落，导致统计的菌落数少于实际的活菌数。 21.（13分）牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解纤维素。某科研团队按照如图1所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌，实验中需要甲、乙两种培养基。 (1)获得纯净的微生物培养物的关键是 ，无菌技术主要包括 。 (2)从①开始分离筛选纤维素分解菌，甲培养基中除含有水、无机盐、氮源外还应以 ，该培养基按功能来分应为 培养基。甲、乙两培养基的主要区别是 。 (3)过程②过程所使用的接种方法是 。可在培养基表面均加入一层无菌的石蜡，其作用是 。 (4)刚果红可以与纤维素形成 复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图2），图中降解纤维素能力最强的菌株是 （填图中序号），原因是 。 (5)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为104的胃部样液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179.则每毫升样品中含有细菌数量为 个。通过该方法所得细菌数量一般较实际结果 ，原因是 。 【答案】（13分） (1) 防止杂菌污染 消毒和灭菌 (2) 纤维素为唯一碳源 选择 甲中无琼脂 (3) 稀释涂布平板法 瘤胃中的纤维素分解菌属于厌氧微生物，石蜡密封创设无氧环境，有利于瘤胃中的纤维素分解菌生长发育 (4) 红色 菌落① 降解圈直径和菌落直径比值最大 (5) 1.81×107 偏低 当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落 【解析】 （1）获得纯净的微生物培养物的关键是防止杂菌污染。无菌技术主要包括消毒和灭菌。 （2）微生物的营养物质主要有碳源、氮源、水和无机盐等，筛选纤维素分解菌时，配置培养基时需要使用纤维素作为唯一的碳源的选择培养基，该培养基按功能来分应为选择培养基。由图可知，甲培养基为液体培养基，乙培养基为固态培养基，二者区别在于甲中无琼脂，而乙中有琼脂。 （3）乙培养基上形成的菌落分布均匀，因此②所使用的接种方法是稀释涂布平板法；瘤胃中的纤维素分解菌属于厌氧微生物，石蜡密封创设无氧环境，有利于瘤胃中的纤维素分解菌生长繁殖。 （4）在培养基中加入刚果红，可与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被分解后，红色复合物不能形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，从而可筛选纤维素分解菌。图中降解圈大小与纤维素酶的量与活性有关；图中降解纤维素能力最强的菌株是①，因为其周围的透明圈与菌落的直径之比最大。 （5）在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为104的胃部样液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179，一般取菌落数在30-300之间的平板，则平板的平均菌落数为（189+175+179）÷3=181，则每毫升土壤样液中的细菌数量约为181÷0.1×104=1.81×107个。由于当两个或多个菌落连在一起时，平板上观察到的只是单个菌落，所以通过该方法所得细菌数量一般较实际结果偏低。 22.（11分）苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的，是限制苹果产量的重要因素之一，生产上主要以化学药剂防治该病，为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如下： (1)①中木糖和硝酸钾的作用是提供 、 和 。 (2)②→③中梯度稀释的目的是 。 (3)常用的两种接种方法有 、 ，两者在操作上的共同点是 （写出一点即可）。从④到⑤的接种方法是 。培养过程中，主要根据 特征鉴别出枯草芽孢杆菌。 (4)现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如右上图平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3～5天，通过观察 就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。 (5)在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。 【答案】（11分） (1)碳源 氮源 无机盐 (2)将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落 (3) 稀释涂布平板法 平板划线法 在酒精灯火焰旁接种等 平板划线法 菌落 (4)观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离） (5) 30~300 【解析】 （1）微生物的生长需要碳源、氮源、水和无机盐，①中木糖含有C、H、O元素，故能提供碳源，硝酸钾中含有N元素，可以提供氮源和无机盐。 （2）分离筛选枯草芽孢杆菌需要得到单菌落，②→③中梯度稀释的目的是将聚集在一起的微生物分散成单个细胞，从而能在固体培养基表面形成单个菌落。 （3）常用的两种接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法，操作上为了防止杂菌污染，二者需要在酒精灯火焰旁接种等。从④到⑤的接种方法是平板划线法。不同菌种形成的菌落大小、形状等不同，故培养过程中，主要根据菌落特征鉴别出枯草芽孢杆菌。 （4）分析题意可知，A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1~B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3－5天，由于枯草芽孢杆菌能抑制黑腐皮壳菌生长，通过观测黑腐皮壳菌菌落的形状（黑腐皮壳菌菌落边缘与4个枯草芽孢杆菌菌落的距离），就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。 （5）在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在30~300的平板进行计数。当两个或多个细菌连在一起时平板上观察到的只是一个菌落，故该方法所得结果往往比实际细菌的数目要少。 23.（11分）青梅具有典型的高酸低糖特性，常用的醋酸发酵菌株不能适应青梅的特点，导致发酵时间长、乙醇转化率低等问题。下图是科研人员选育专用于生产青梅醋的醋酸菌的流程图，请回答下列问题： 基础培养基：葡萄糖10g/L，酵母提取物10g/L，乙醇30mL/L 分离培养基：葡萄糖10g/L，酵母提取物10g/L，无水碳酸钙20g/L，琼脂粉20g/L，乙醇30mL/L。 (1)过程①选择腐烂青梅的原因是 ，过程②的主要目的是 ，摇床培养的目的是 。 (2)过程⑤分离培养基成分中可作为碳源的有 。将涂布好的培养皿冷凝后，于 ℃倒置培养72h。 (3)培养结果如图2所示，图中出现降钙圈的原因是 ，A、B、C三个菌落中应优先选择 ，理由是 。 (4) 科研人员监测了过程⑦发酵过程中总酸、乙醇、还原糖的含量变化，结果如图3，其中曲线甲 是 的含量变化曲线。某同学认为该结果说明当葡萄糖和乙醇同时存在时，醋酸菌优先利用乙醇，你是否同意他的观点，据图说明理由 （2分）。 【答案】（11分） (1)腐烂青梅更易获得天然存在的耐酸醋酸菌 对醋酸菌进行富集培养，增加醋酸菌的种群密度 提高培养基的溶氧量，加快醋酸菌的繁殖 (2) 葡萄糖和乙醇 30 (3)菌株生长产酸溶解了培养基中的碳酸钙 A A降钙圈大，说明产酸能力强，更适合制醋 (4) 总酸 同意，由题意，葡萄糖浓度低于乙醇浓度，结合图3可知，乙曲线为乙醇，丙曲线为葡萄糖，乙醇浓度在发酵初期迅速下降，而还原糖含量的降低相对滞后，说明醋酸菌更先消耗乙醇来产生醋酸（2分） 【解析】 （1）腐烂青梅更易获得天然存在的耐酸醋酸菌，所以①过程选择腐烂青梅进行筛选相关醋酸菌，②过程是对醋酸菌进行富集培养，增加醋酸菌的种群密度，摇床培养可提高培养基的溶氧量，提供充足氧气，加快醋酸菌的繁殖。 （2）根据分离培养基的成分可知，其中的葡萄糖和乙醇可作为碳源。醋酸菌生长的最适温度是30℃左右，将涂布好的平板冷凝后，于30 ℃倒置培养72h。 （3）菌株生长产酸溶解了培养基中的碳酸钙，导致降钙圈的出现，由图可知，在A、B、C三菌落中应优先选择A，其“降钙圈”大，说明产酸能力强，更适合制醋。 （4）随着发酵的进行，总酸作为产物，含量增加，乙醇和还原糖作为底物，含量减少，图3中曲线甲是“总酸”含量的变化曲线。由题意，葡萄糖浓度低于乙醇浓度，结合图3可知，乙曲线为乙醇，丙曲线为葡萄糖，乙醇浓度在发酵初期迅速下降，而还原糖含量的降低相对滞后，说明醋酸菌更先消耗乙醇来产生醋酸，即当葡萄糖与乙醇同时存在时，醋酸菌优先利用乙醇，该同学观点正确。 24.（11分）部分人因乳糖不耐受（消化系统中缺乏乳糖酶）而无法尽情享用乳制品。科研人员尝试将乳酸克鲁维酵母（一种产中性乳糖酶的酵母菌）添加在乳制品中以缓解乳糖不耐受症状。请回答下列问题。 (1)为从乳制品中获得乳酸克鲁维酵母，研究人员配制以 为唯一碳源的选择培养基，经 灭菌后，取乳制品原液 （填“充分稀释”或“无需稀释”）后涂布到平板上进行富集培养。 (2)图中“？”处一般为 ，滴加到培养基表面后应待菌液被 后再倒置培养。 (3)培养到一定时期，选取菌落 稳定时的记录作为结果。若数据如图示，则无法准确推算此时1mL菌液中的酵母菌数量，原因是数据 ，无法采信。为获得适合添加在乳制品中的乳酸克鲁维酵母，除对生长速率进行统计外，还需测定中性乳糖酶的 并对安全性作出评价。 (4)测定菌液浓度还可以使用OD600法进行：将光波长设定为600nm，测定菌液的光密度值来指示菌体细胞密度。该方法应事先调零：对 （填“无菌水”或“空白培养液”）进行测定并以此值为基准。相比于显微镜下直接观察计数，该种测定方法的优点是样本可 。与稀释涂布平板法相比，该种测定方法的主要不足是无法区分 。 【答案】（11分） (1) 乳糖 高压蒸汽（湿热） 无需稀释 (2) 0.1 （培养基）吸收 (3) 数目 差异过大 含量和活性 (4) 空白培养液 回收（利用） 死菌和活菌 【解析】 （1）乳酸克鲁维酵母能通过产生的中性乳糖酶分解乳酸，从中获得碳源，因此可配置以乳酸为唯一碳源的选择培养基用于筛选乳酸克鲁维酵母。培养基一般用高压蒸汽灭菌法灭菌。富集培养前的菌体数量较少，因此接种前不需要稀释。 （2）稀释涂布平板法一般取0.1mL稀释液滴加在平板上，滴加到培养基表面后应待菌液被（培养基）吸收后再倒置培养。 （3）培养到一定时期，选取菌落数目稳定时的记录作为结果，防止培养时间不足而遗漏菌落。图示三个培养基上的菌体数量差异过大，说明实验操作中存在较大误差，无法据此准确推算此时1mL菌液中的酵母菌数量。中性乳糖酶的含量和活性会影响乳酸分解的速率，因此为获得适合添加在乳制品中的乳酸克鲁维酵母，除对生长速率进行统计外，还需测定中性乳糖酶的含量和活性并对安全性作出评价。 （4）该实验是测定菌液的光密度值来指示菌体细胞密度，因此用取空白培养液作为对照品将分光光度计调零，测定的结果作为基准。该种方法测定菌体数量结束后样本可以回收，而显微镜下直接观察法中计数室内的菌体不能回收。稀释涂布平板法可用于活菌的计数，而使用OD600法计算菌体密度时，不能区分死菌和活菌。 / 学科网（北京）股份有限公司 $ 2025-2026学年高二下学期生物单元自测 第一章 发酵工程 （建议用时：75分钟 满分：100分） 一、单项选择题：（本部分包括15题，每题2分，共计30分。每题只有一个选项最符合题意。) 1.菌落特征常用来鉴定微生物的种类。下列关于菌落的叙述，错误的是（　　） A．菌落的特征包括菌落的形状、大小、隆起程度和颜色等方面 B．不同种类的微生物所表现出来的菌落差异是个体细胞形态差异的反映 C．一个菌落就是单个微生物在液体培养基上迅速生长繁殖形成的子细胞集团 D．一般来说，在一定的培养条件下（相同的培养基、温度及培养时间），同种微生物表现出稳定的菌落特征 2.下表为某培养基的配方，有关叙述正确的是（　　） 成分 牛肉膏 葡萄糖 K2HPO4 琼脂 蒸馏水 含量 10g 10g 2g 适量 1000mL A．能在此培养基上生长的只有大肠杆菌 B．从物理性质看该培养基属于固体培养基 C．该培养基调节合适的pH后就可以接种使用 D．培养基中作为碳源的只有葡萄糖，作为氮源的只有牛肉膏 3.脲酶催化尿素水解，产生的氨可作为细菌的氮源。脲酶被去除镍后失去活性。下列叙述错误的是（　　） A．以尿素为唯一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌 B．脲酶能通过降低尿素水解反应的活化能来加快反应速率 C．产脲酶细菌在以NH4NO3为唯一氮源的培养基上不能生长繁殖 D．镍是维持脲酶结构和功能所必需的且是组成脲酶的重要元素 4.传统蚕豆酱酿制过程：蚕豆去壳后经高压蒸煮、冷却后通过人为接种曲霉的方式或在通风的自然环境下制曲，将成曲的蚕豆与一定浓度的盐水混合后进行晾晒发酵（如图）。下列叙述正确的是（　　） A．制作蚕豆酱与制作酸奶的主要菌种的代谢类型相同 B．发酵过程中蒸煮的目的是杀灭蚕豆表面的微生物 C．采用温度较低的巴氏消毒能更好保留蚕豆酱的营养成分和风味 D．可采用平板划线法或细菌计数板对蚕豆酱酿制的优势菌种进行计数 5.关于土壤中分解尿素的细菌分离、计数的实验，下列叙述正确的是（　　） A．配制以尿素为唯一氮源的鉴别培养基分离细菌 B．灭菌后的培养基需冷却至室温后在超净台内倒平板 C．接种环经火焰灼烧灭菌冷却后，在平板上涂布菌液 D．显微镜计数法比稀释涂布平板法计数更快速、直观 6. 某同学进行下列实验时，相关操作不合理的是（　　） A．从试管中取菌种前，先在火焰旁拔棉塞，再将试管口迅速通过火焰以灭菌 B．探究温度对酶活性的影响时，先将酶与底物混合，然后在不同温度下水浴处理 C．观察黑藻的细胞质流动时，在低倍镜下应先调节粗准焦螺旋，再调节细准焦螺旋 D．鉴定脂肪时，花生子叶切片用苏丹Ⅲ染液染色后，再用体积分数为50%乙醇洗去浮色 7. 无菌操作是微生物学实验中常见的操作。下列叙述正确的是（　　） A．配制培养基、倒平板、接种均需在酒精灯火焰旁进行 B．玻璃器皿、金属用具可采用干热灭菌法进行灭菌 C．倒平板后敞开皿盖用吹风机冷风加速培养基凝固 D．配制好的培养基先分装到培养皿中再进行灭菌 8. 为了提高乳糖酶的产量，科研人员从奶酪中分离纯化出了能高效生产乳糖酶的酵母菌，操作过程如图所示。其中X-gal是一种无色物质，能被乳糖酶分解为半乳糖和蓝色的溴靛蓝，使菌落呈蓝色。下列相关叙述正确的是（　　） A．将菌液接种到培养基乙所采用的方法是平板划线法 B．含X-gal培养基从功能上划分，属于选择培养基 C．纯培养过程中，配制好培养基后须依次进行灭菌、调节酸碱度和倒平板操作 D．牛奶中添加适量乳糖酶获得无乳糖牛奶，一般不会破坏牛奶中的其他营养成分 9. 图示涂布在平板上的菌落，下列叙述正确的是（　　） A．该方法更适用于分离厌氧微生物 B．涂布时应控制菌浓度在30~300个/mL C．涂布的菌液量过少可导致菌落分布不均 D．使用图中方法进行计数得到的结果往往偏大 10．某种除草剂不易降解，长期使用会污染土壤。研究人员按下图流程，选育能降解该除草剂的细菌（含一定量该除草剂的培养基不透明）。相关叙述正确的是 A．进行I操作前，必须对土壤液进行等比稀释 B．由Ⅱ可推测，接种环共进行了5次灼烧灭菌 C．配制Ⅱ、Ⅲ的培养基时，先湿热灭菌再调节pH D．Ⅲ中透明圈直径/菌落直径的比值越大，说明其降解效果越好 11．筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。下列有关本实验的叙述中，错误的是（　　） 菌种 菌落直径：C（mm） 透明圈直径：H（mm） 细菌I 5.1 11.2 细菌II 8.1 13.0 A．培养基中除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B．筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C．以上两种细菌均可以将淀粉酶分泌至细胞外 D．由上表数据可知，细菌Ⅱ分解淀粉的能力更强 12．黄酒是我国古老的发酵酒之一，下图是传统酿制黄酒的主要流程，下列叙述错误的是（　　） A．小麦、麸皮等原料为酒曲中微生物的生长繁殖提供了碳源和氮源等营养物质 B．为避免制曲过程被杂菌污染影响黄酒品质，扩大制曲前需对留存的酒曲灭菌 C．糯米、大米蒸煮后立即与酒曲混合会导致酶空间结构改变而降低其催化效率 D．将酒曲混合糯米、大米处理一段时间，是为了获得酒母发酵时的底物葡萄糖 13．食醋和黄酒是我国传统的日常调味品，均可通过发酵技术生产。下列叙述正确的是（　　） A．醋酸和酒精都是厌氧发酵产生的不彻底产物 B．食醋和黄酒发酵过程中，微生物繁殖越快发酵产物产率越高 C．以谷物为原料酿造食醋和黄酒时，都伴有pH下降和气体产生 D．使用天然混合菌种发酵比用单一菌种发酵得到的产品品质更稳定 14．下列关于传统发酵技术、发酵工程的叙述，错误的是（　　） A．发酵工程的中心环节是灭菌，特别是发酵罐必须进行严格灭菌 B．使用天然混合菌种发酵往往会造成传统发酵食品的品质不一 C．家庭制作泡菜和果醋过程中，形成发酵液表层白膜的微生物不同 D．啤酒的工业化生产过程中，糖化的目的是使淀粉分解，形成糖浆 15. 发酵广泛应用于农业、食品工业、医药工业等工业生产。下列叙述正确的有（　　） A．筛选出高产黑曲霉菌种可进行发酵生产柠檬酸、酱油等食品或食品添加剂 B．菌落的大小、数目、有无荚膜等肉眼可见的特征都可作为菌种鉴定的依据 C．从微生物细胞中提取出的单细胞蛋白，可作为良好的微生物饲料用于生产 D．啤酒制作中，主发酵主要为了促进酵母繁殖，后发酵主要为了酒精发酵 二、多项选择题：(本题包括4小题，每小题3分，共12分。每小题给出的四个选项中，有不止一个选项符合题意。每小题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。) 16．下列关于果酒、果醋酿造实验的说法正确的是（　　） A．乙醇可以作为果醋发酵的底物 B．酵母菌和醋酸杆菌增殖方式相同 C．酵母菌和醋酸杆菌同化作用类型相同 D．果酒发酵产物中的乙醇可以抑制杂菌生长 17. 谷氨酸棒状杆菌发酵生成谷氨酸，经加工可制成味精(相关工艺流程如图)。发酵过程可通过控制生物素(催化脂肪酸合成关键酶的辅酶)的用量形成“渗漏型”细胞膜。下列叙述正确的是（　　） A．谷氨酸棒状杆菌与酸奶发酵的菌种具有不同的代谢类型 B．控制生物素的用量有利于谷氨酸从胞内释放到胞外 C．图示发酵罐内的发酵以及产物的分离与提纯属于发酵工程的中心环节 D．发酵后期溶解氧急剧上升的原因可能与菌种活力下降或大量死亡有关 18．柠檬酸是一种广泛应用的食品酸度调节剂。如图为研究人员以红薯粉为原料经黑曲霉发酵生产柠檬酸的简要流程图。下列说法错误的是（　　） A．黑曲霉发酵生产柠檬酸和谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，培养液的pH都应调至酸性 B．将菌种接种至A培养基时，浸泡在酒精中的涂布器使用前需在火焰上灼烧 C．若发酵罐C中的原料为大豆粉，可利用黑曲霉水解大豆中的淀粉制成酱油 D．将菌种转接至B培养基的目的是增加黑曲霉菌种数量 19．抗生素是某些微生物产生的能杀死或抑制其他微生物生长的化学物质。下图表示从土壤中筛选某种抗生素产生菌的过程，叙述正确的是（　　） A．有些菌株无透明圈产生是因为其不能产生抗生素 B．接种测试菌 3 时，接种环可能在灼烧后未完全冷却 C．测试菌 2、5 对该筛选出的菌产生的抗生素具有抗性 D．菌株的透明圈越大，其产生的抗生素抑制S菌效果越好 三、非选择题：(本题共5小题，除特别标注外，每空1分，共58分。) 20.（12分）炭疽是一种由炭疽芽孢杆菌引起的人兽共患性传染病，皮肤炭疽病在人类炭疽病中最为常见，这类患者的皮肤渗出物中含有炭疽芽孢杆菌。回答下列有关问题： (1)皮肤炭疽病疑似患者就医时，医生先要取患者的皮肤渗出物稀释后涂布到固体培养基上，经过一段时间的培养获得的平板不可能是______。 A． B． C． D． (2)挑取上述培养基上的菌落进行如图所示实验（注：实验组中的噬菌体能特异性地侵染炭疽芽孢杆菌）。 ①对照试管中应加入 ，在实验室培养微生物时，需要对所用的培养基和玻璃器皿进行灭菌，可采用的方法分别是 。 ②实验过程中需将锥形瓶固定在摇床上，在35℃下振荡培养24h，直至液体培养基变浑浊。振荡培养说明炭疽芽孢杆菌的代谢类型是 。液体培养基变浑浊的原因是 。 ③实验结果为实验组液体培养基的浑浊度比对照组 （填“高”或“低”或“相近”）时，表明该疑似患者被炭疽芽孢杆菌感染。 (3)对炭疽芽孢杆菌进行计数时，选用104、105、106三个稀释倍数的菌液，各取0.2mL涂布，每个稀释度作三次重复，经24h恒温培养后结果如表。 稀释倍数 104 105 106 平板编号 A1 A2 A3 B1 B2 B3 C1 C2 C3 菌落数 315 298 302 45 54 51 12 9 11 由表可知，最适合计数的稀释倍数为 ，该稀释度下，原菌液中炭疽芽孢杆菌的密度为 （2分）个/mL。计数的结果 （偏大/偏小）原因是 （2分）。 21.（13分）牛、羊等反刍动物具有特殊的器官——瘤胃。在瘤胃中生活着多种微生物，其中许多微生物能分解纤维素。某科研团队按照如图1所示的流程分离瘤胃中的纤维素分解菌，实验中需要甲、乙两种培养基。 (1)获得纯净的微生物培养物的关键是 ，无菌技术主要包括 。 (2)从①开始分离筛选纤维素分解菌，甲培养基中除含有水、无机盐、氮源外还应以 ，该培养基按功能来分应为 培养基。甲、乙两培养基的主要区别是 。 (3)过程②过程所使用的接种方法是 。可在培养基表面均加入一层无菌的石蜡，其作用是 。 (4)刚果红可以与纤维素形成 复合物，但并不与纤维素降解产物纤维二糖和葡萄糖发生这种反应，研究人员在刚果红培养基平板上，筛到了几株有透明降解圈的菌落（见图2），图中降解纤维素能力最强的菌株是 （填图中序号），原因是 。 (5)在5个细菌培养基平板上，均接种稀释倍数为104的胃部样液0.1mL，培养一段时间后，平板上长出的细菌菌落数分别为189、25、417、175和179.则每毫升样品中含有细菌数量为 个。通过该方法所得细菌数量一般较实际结果 ，原因是 。 22.（11分）苹果树腐烂病是由黑腐皮壳菌引起的，是限制苹果产量的重要因素之一，生产上主要以化学药剂防治该病，为开发生物防治途径，科研人员拟从土壤中分离筛选出能抑制黑腐皮壳菌生长的枯草芽孢杆菌，实验流程图如下： (1)①中木糖和硝酸钾的作用是提供 、 和 。 (2)②→③中梯度稀释的目的是 。 (3)常用的两种接种方法有 、 ，两者在操作上的共同点是 （写出一点即可）。从④到⑤的接种方法是 。培养过程中，主要根据 特征鉴别出枯草芽孢杆菌。 (4)现有经纯化后获得的4个枯草芽孢杆菌品系，为探究哪个品系对黑腐皮壳菌的抑制效果更好，科研人员在如右上图平板中的A处接种黑腐皮壳菌，在距离A处等距离的B1～B4处分别接种等量的4个枯草芽孢杆菌品系，在适宜条件下培养3～5天，通过观察 就能筛选出抑菌更好的枯草芽孢杆菌菌株。 (5)在利用稀释涂布平板法统计土样中活菌的数目时，为了保证结果准确，一般选择菌落数在 的平板进行计数。 23.（11分）青梅具有典型的高酸低糖特性，常用的醋酸发酵菌株不能适应青梅的特点，导致发酵时间长、乙醇转化率低等问题。下图是科研人员选育专用于生产青梅醋的醋酸菌的流程图，请回答下列问题： 基础培养基：葡萄糖10g/L，酵母提取物10g/L，乙醇30mL/L 分离培养基：葡萄糖10g/L，酵母提取物10g/L，无水碳酸钙20g/L，琼脂粉20g/L，乙醇30mL/L。 (1)过程①选择腐烂青梅的原因是 ，过程②的主要目的是 ，摇床培养的目的是 。 (2)过程⑤分离培养基成分中可作为碳源的有 。将涂布好的培养皿冷凝后，于 ℃倒置培养72h。 (3)培养结果如图2所示，图中出现降钙圈的原因是 ，A、B、C三个菌落中应优先选择 ，理由是 。 (4) 科研人员监测了过程⑦发酵过程中总酸、乙醇、还原糖的含量变化，结果如图3，其中曲线甲 是 的含量变化曲线。某同学认为该结果说明当葡萄糖和乙醇同时存在时，醋酸菌优先利用乙醇，你是否同意他的观点，据图说明理由 （2分）。 24.（11分）部分人因乳糖不耐受（消化系统中缺乏乳糖酶）而无法尽情享用乳制品。科研人员尝试将乳酸克鲁维酵母（一种产中性乳糖酶的酵母菌）添加在乳制品中以缓解乳糖不耐受症状。请回答下列问题。 (1)为从乳制品中获得乳酸克鲁维酵母，研究人员配制以 为唯一碳源的选择培养基，经 灭菌后，取乳制品原液 （填“充分稀释”或“无需稀释”）后涂布到平板上进行富集培养。 (2)图中“？”处一般为 ，滴加到培养基表面后应待菌液被 后再倒置培养。 (3)培养到一定时期，选取菌落 稳定时的记录作为结果。若数据如图示，则无法准确推算此时1mL菌液中的酵母菌数量，原因是数据 ，无法采信。为获得适合添加在乳制品中的乳酸克鲁维酵母，除对生长速率进行统计外，还需测定中性乳糖酶的 并对安全性作出评价。 (4)测定菌液浓度还可以使用OD600法进行：将光波长设定为600nm，测定菌液的光密度值来指示菌体细胞密度。该方法应事先调零：对 （填“无菌水”或“空白培养液”）进行测定并以此值为基准。相比于显微镜下直接观察计数，该种测定方法的优点是样本可 。与稀释涂布平板法相比，该种测定方法的主要不足是无法区分 。 / 学科网（北京）股份有限公司 $