精品解析：江苏省扬州中学联培部2025—2026学年高二下学期期中考试生物试题（英才D）

江苏省扬州中学联培部四月期中考试 生物（英才D） 2026.4 第I卷（选择题，共42分） 一、单选题：本大题共15小题，每小题2分，共30分，在每题给出的四个选项中，只有一项是最符合题意的 1. 制醋、制酒是我国传统发酵技术。以下关于传统发酵技术与发酵工程的叙述正确的是（ ） A. 在葡萄酒酿制的整个过程中需要严格保证无氧环境 B. 乙醇既是果酒发酵的产物，也是果醋发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖 C. 通过酵母菌发酵获得大量菌体，从菌体细胞中提取单细胞蛋白作为动物饲料 D. 啤酒生产的后发酵阶段是在密闭和酵母菌生长的最适温度下获得澄清、成熟的啤酒 【答案】B 【解析】 【详解】A、葡萄酒酿制前期需要通入氧气，保证酵母菌进行有氧呼吸大量繁殖，仅后期酒精发酵阶段需要严格无氧环境，并非整个过程都保持无氧，A错误； B、果酒发酵的产物是酵母菌无氧呼吸产生的乙醇；果醋发酵时若糖源不足，醋酸菌可将乙醇转化为醋酸，此时乙醇是果醋发酵的底物；同时一定浓度的乙醇可以抑制杂菌繁殖，B正确； C、单细胞蛋白本身就是微生物菌体，不需要从菌体细胞中提取，可直接作为动物饲料，C错误； D、啤酒生产的后发酵阶段需要在低温、密闭条件下进行，酵母菌生长的最适温度约为28℃，后发酵温度远低于该最适温度，D错误。 2. 制作传统泡菜主要是利用天然乳酸菌进行发酵的。关于泡菜的制作，下列相关叙述正确的是（　　） A. 制作泡菜的过程中，应先通气使菌种繁殖，后进行密封发酵 B. 腌制时间过短或食盐用量不足，会导致亚硝酸盐含量升高 C. 制作泡菜的菜坛内会长出一层白膜，是乳酸菌繁殖的结果 D. 制作泡菜的盐水需要煮沸后立即倒入装有食材的泡菜坛中 【答案】B 【解析】 【详解】A、乳酸菌是严格厌氧型微生物，制作泡菜的过程全程需要密封，通气会抑制乳酸菌繁殖，甚至导致乳酸菌死亡，A错误； B、腌制时间过短、食盐用量不足或发酵温度过高，都会造成杂菌大量繁殖，进而导致亚硝酸盐含量升高，B正确； C、泡菜坛内的白膜是液面处的产膜酵母菌大量繁殖的结果，乳酸菌为厌氧生物，不会在有氧的液面大量繁殖形成白膜，C错误； D、制作泡菜的盐水煮沸是为了杀灭杂菌、除去溶解氧，需要冷却后再倒入泡菜坛，避免高温杀死蔬菜表面的天然乳酸菌，影响发酵进程，D错误。 3. 某同学尝试用糯米制作米酒和米醋，相应操作流程如下。下列叙述正确的是（　　） A. 糯米蒸熟的目的是利于糖化，杀灭所有微生物，避免杂菌污染 B. 待米酒发酵完成后向密封装置中通入无菌空气即可进行醋酸发酵 C. 密封至几乎无气泡产生是为了保证酵母菌在醋酸发酵前失去活性 D. 在米酒和米醋制作的过程中，发酵液pH均有下降的趋势 【答案】D 【解析】 【详解】A、糯米蒸熟的目的是利于糖化，杀灭大部分微生物，但不能 “杀灭所有微生物”，A错误； B、米酒发酵完成后，除了通入无菌空气，还需要加入醋酸菌菌种，并适当升温（30-35℃）才能进行醋酸发酵，B错误； C、密封至几乎无气泡产生，是为了让酵母菌在无氧条件下充分进行酒精发酵，将糖类转化为酒精，而不是为了让酵母菌失去活性，C错误； D、制作米酒时，酵母菌无氧呼吸产生二氧化碳，二氧化碳溶于水形成碳酸，导致发酵液 pH 下降。 制作米醋时，醋酸菌将酒精转化为醋酸，也会使发酵液 pH 下降，D正确。 故选D。 4. 如图是酱油的制作流程图，下列有关说法正确的是（　　） A. 制作酱油的主要原料是大豆，所含蛋白质在蛋白酶的作用下断裂所有肽键形成氨基酸 B. 制作酱油的主要微生物为米曲霉菌，是需氧型原核生物 C. 发酵池发酵是酱油制作的中心环节，乳酸菌和酵母菌的产物及食盐可调节酱油风味 D. 可采用过滤和沉淀等方法来提取酱油 【答案】C 【解析】 【详解】A、制作酱油的主要原料是大豆，所含蛋白质在蛋白酶的作用下形成短肽和氨基酸，不是所有肽键都断裂，A错误； B、制作酱油的主要微生物为米曲霉菌，是需氧型真核生物，B错误； C、发酵池发酵是酱油制作的中心环节，乳酸菌和酵母菌的产物及食盐可调节酱油风味，C正确； D、酱油主要是米曲霉菌的代谢产物，不能采用过滤和沉淀等方法来提取，D错误。 故选C。 5. 硝化细菌是化能自养菌，通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。关于硝化细菌的实验室培养，下列说法错误的是（ ） A. 培养硝化细菌的培养基中无需加入碳源 B. 培养基中需加入NH4+为硝化细菌提供氮源和能源 C. 培养基分装到培养皿时可能被污染，分装后需进行灭菌处理 D. 若培养皿皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基 【答案】C 【解析】 【分析】消毒和灭菌工作主要包括两个方面：对操作的空间、操作者的衣着和手进行清洁和消毒；将用于微生物培养的器皿、接种用具和培养基等进行灭菌。常用的消毒方法有煮沸消毒、巴氏消毒等；灭菌方法有湿热灭菌、干热灭菌和灼烧灭菌等。 【详解】A、硝化细菌是化能自养菌，可利用空气中的CO2合成有机物，因此培养基中无需加入碳源，A正确； B、由题干信息可知，硝化细菌通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，故培养基中需加入NH4+为硝化细菌提供氮源和能源，B正确； C、培养基先灭菌后分装，分装后无需灭菌，C错误； D、若培养皿皿盖和皿底之间溅有培养基，则可能会导致杂菌污染，不宜使用，D正确。 故选C。 6. 研究发现厌氧菌乙醇梭菌可用来生产乙醇，其代谢过程如图所示。某乙醇梭菌突变株接种在基础培养基（含有CO2的环境）中无法产生乙醇。为检测该突变株的酶缺陷类型，进行了相关实验，结果如表所示。据此分析，下列叙述错误的是（ ） CO或CO2中间产物1中间产物2乙醇 组别 培养条件 实验结果 甲 基础培养基 - 乙 基础培养基+中间产物1 - 丙 基础培养基+中间产物2 + 注：“-”表示无乙醇产生，“+”表示有乙醇产生 A. 该探究实验应在无氧环境中进行 B. 该实验的自变量为是否添加中间产物和添加的中间产物类型 C. 该突变株最可能是A酶缺陷型菌株 D. 配制基础培养基时需要添加氮源、水、无机盐等，但不添加碳源 【答案】C 【解析】 【详解】A、乙醇梭菌为厌氧菌，其代谢过程需在无氧条件下进行，否则无法正常产乙醇，A正确； B、实验中甲组未添加中间产物，乙、丙组分别添加中间产物1和2，自变量为中间产物的有无及类型，B正确； C、丙组添加中间产物2后能产乙醇，说明A酶功能正常；乙组添加中间产物1仍无法产乙醇，表明中间产物1→中间产物2的转化受阻，即C酶缺陷，因此突变株应为C酶缺陷型，C错误； D、基础培养基含CO₂作为碳源，无需额外添加碳源，但需氮源、水、无机盐等，D正确。 故选C。 7. 兴趣小组的同学用稀释涂布平板法分离、纯化金黄色葡萄球菌。下列实验结果及其可能的原因对应有误的是（ ） 选项 实验结果 可能的原因 A 菌落连接成片 稀释倍数不够 B 长出霉菌菌落 培养基灭菌不彻底 C 未长出菌落 涂布器未灼烧 D 菌落形成缓慢 培养温度过低 A. A B. B C. C D. D 【答案】C 【解析】 【分析】稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养基表面，经培养后可形成单个菌落。操作步骤主要包括：梯度稀释、涂布平板、培养与计数、计算浓度。 【详解】A、菌落连接成片是因稀释倍数不够，导致菌液浓度过高，多个细胞聚集形成菌膜，A正确； B、培养基灭菌不彻底可能残留霉菌孢子，导致长出霉菌菌落，B正确； C、未长出菌落可能是涂布器灼烧后未冷却，高温杀死菌种，或稀释度过高，而非“未灼烧涂布器”（未灼烧会导致杂菌污染，而非无菌落），C错误； D、培养温度过低会抑制微生物代谢，导致菌落形成缓慢，D正确。 故选C。 8. 选择培养基是指对培养基进行处理，使其能允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长，从而将目的菌株从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。下列不属于选择培养基的是（　　） A. 以纤维素为唯一碳源，用于筛选纤维素分解菌的培养基 B. 加入青霉素以分离酵母菌等真菌的培养基 C. 加入刚果红和纤维素的呈现红色的培养基 D. 不加氮源以分离固氮微生物的培养基 【答案】C 【解析】 【详解】A、以纤维素为唯一碳源的培养基中，仅能分解纤维素的微生物可利用纤维素获得碳源生长，其他微生物因缺乏碳源无法存活，属于选择培养基，A不符合题意； B、青霉素可抑制细菌细胞壁的合成，对酵母菌等真菌无抑制作用，加入青霉素的培养基中仅真菌可生长，细菌被抑制，属于选择培养基，B不符合题意； C、加入刚果红和纤维素的红色培养基是鉴别培养基，刚果红可与纤维素结合形成红色复合物，若存在纤维素分解菌，其分解纤维素后会在菌落周围形成透明圈，从而鉴别出纤维素分解菌，该培养基不会抑制其他微生物生长，不属于选择培养基，C符合题意； D、无氮源的培养基中，仅固氮微生物可利用空气中的氮气作为氮源生长，其他非固氮微生物因缺乏氮源无法存活，属于选择培养基，D不符合题意。 9. 地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C2H4）n。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示操作。下列叙述错误的是（ ） A. 富集培养过程中摇床振荡便于微生物获取营养和氧气 B. 富集培养后，利用平板划线法将微生物接种于X培养基 C. 应挑选降解地膜最高效的细菌⑤接种到Y培养基 D. 若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数 【答案】B 【解析】 【分析】在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称为选择培养基。 【详解】A、富集培养过程中摇床振荡便于微生物与营养物质充分接触，并增加溶氧量，所以摇床振荡便于微生物获取营养和氧气，A正确； B、富集培养后，利用稀释涂布平板法将微生物接种于X培养基，B错误； C、抑菌圈越大，说明降解地膜的效果越好，故可挑选⑤中的单菌落接种到Y培养基上，C正确； D、若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数，D正确。 故选B。 10. 辣椒素是存在于辣椒细胞中的一种活性成分，具有抗癌、提高免疫力等功能。研究人员利用植物细胞培养技术实现了天然辣椒素的工厂化生产，其主要流程为：外植体→消毒→愈伤组织→悬浮培养→分离提纯。下列相关说法正确的是（ ） A. 该过程体现了植物细胞的全能性 B. 外植体应先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒 C. 愈伤组织可合成辣椒素，因此辣椒素属于初生代谢产物 D. 该工厂化生产利用悬浮培养的条件，提高了单个细胞中辣椒素的含量 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养就是在无菌和人工控制的条件下，将离体的植物器官、组织、细胞，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其产生愈伤组织、丛芽，最终形成完整的植株。植物组织培养的条件：①细胞离体和适宜的外界条件（如适宜温度、适时的光照、pH和无菌环境等）；②一定的营养（无机、有机成分）和植物激素（生长素和细胞分裂素）。 【详解】A、研究人员利用植物细胞培养技术实现了天然辣椒素的工厂化生产，该过程中没有培养到辣椒植株，没有体现植物细胞的全能性，A错误； B、为防止微生物污染，外植体应先用酒精消毒30s，无菌水清洗后再用次氯酸钠溶液处理30min，B正确； C、利用辣椒细胞培养可工厂化生产次级生代谢产物辣椒素，C错误； D、该工厂化生产利用悬浮培养的条件培养出大量细胞，大量细胞产生的辣椒素增加，但没有提高单个细胞中辣椒素的含量，D错误。 故选B。 11. 下图表示水稻的花药在一定条件下形成试管苗的培育过程。下列相关叙述错误的是（　　） A. a、b、c、d中的植物细胞都有全能性，但全能性的表达程度有差异 B. 一般先诱导愈伤组织生芽，再诱导愈伤组织生根，最后形成试管苗 C. 降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生根 D. 该过程为单倍体育种，缩短了培育遗传性状稳定的纯合植株的年限 【答案】D 【解析】 【详解】A、a、b、c、d中的植物细胞都包含了该生物生长、发育、繁殖的全部遗传信息，具有全能性，但全能性的表达程度有差异，愈伤组织全能性比d试管苗强，A正确； B、一般将生长良好的愈伤组织转接到诱导生芽的培养基上，长出芽后，再将其转接到诱导生根的培养基上，进一步诱导形成试管苗，B正确； C、培养基中细胞分裂素/生长素比例高有利于生芽，因此降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生根，C正确； D、该过程为单倍体育种中的花药离体培养，培养的植株属于单倍体，还需要经过秋水仙素处理，使其染色体加倍才能形成遗传性状稳定的纯合植株，D错误。 12. 科研人员将Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通过逆转录病毒转入遗传物质缺陷型小鼠成纤维细胞中，获得iPS细胞，进一步获得克隆鼠，相关流程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 获得iPS细胞都是利用载体将特定基因导入动物成纤维细胞实现的 B. 可利用减法原理，依次去掉1个基因来判断每个基因作用的相对大小 C. X鼠的遗传物质来自于黑鼠和灰鼠，其体色为黑色 D. 克隆一批遗传背景相同的缺陷型小鼠，可通过对比来分析致病基因 【答案】A 【解析】 【详解】A、iPS细胞（诱导多能干细胞）不都是通过“将特定基因导入动物成纤维细胞”获得的：iPS可以由多种体细胞诱导获得，不一定只有成纤维细胞；同时诱导方法也不只有转基因导入基因这一种，A错误； B、减法原理是指在对照实验中，与常态比较，人为去除某种影响因素的条件下，观察该因素对实验结果的影响。在该实验中，可以依次去掉Oct3/4、Sox2、c−Myc和Klf4中的一个基因，然后观察细胞的变化情况，从而判断每个基因作用的相对大小，这符合减法原理的应用，B正确； C、X鼠的核遗传物质来自黑鼠的iPS细胞，细胞质遗传物质来自灰鼠的去核卵母细胞，所以X鼠的遗传物质来自于黑鼠和灰鼠，由于生物性状主要由核遗传物质决定，因此X鼠体色为黑色，C正确； D、克隆一批遗传背景相同的缺陷型小鼠，这些小鼠除了可能存在的致病基因不同外，其他遗传背景基本相同。通过对比这些小鼠的表现型，可以分析致病基因对生物性状的影响，D正确。 13. 图示以植物甲和乙制作植物丙的过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①酶解时间存在差异的原因是两种亲本的细胞膜结构存在差异 B. 步骤②前可通过台盼蓝染色法检测甲和乙的原生质体是否有活性 C. 步骤③形成的细胞壁在步骤④时彻底水解使愈伤组织液泡化 D. 步骤⑤更换培养基的主要目的是满足细胞的营养需求 【答案】B 【解析】 【详解】A、步骤①酶解的作用是去除植物细胞的细胞壁，酶解时间差异的原因是两种亲本的细胞壁结构或成分存在差异，和细胞膜结构无关，A错误； B、活细胞的细胞膜具有选择透过性，无法被台盼蓝染色，死细胞会被台盼蓝染为蓝色，因此步骤②原生质体融合前可通过台盼蓝染色法检测原生质体活性，B正确； C、步骤③是融合的原生质体再生细胞壁形成杂种细胞的过程，步骤④脱分化形成愈伤组织的过程，其细胞壁没有被水解，C错误； D、步骤⑤是愈伤组织再分化形成植株的过程，更换培养基的主要目的是调整生长素和细胞分裂素的比例，诱导愈伤组织再分化，并非仅满足细胞营养需求，D错误。 14. 微生物合成的油脂是制备生物柴油的新型原料。为筛选出产油脂的细菌，某小组进行了如图所示的实验。物质甲可将菌体内的油脂染成黑色。下列分析正确的是（ ） A. 应将土壤菌液系列稀释、灭菌后再涂布到培养基A上 B. 培养基A、B、C都应添加油脂以达到筛选的目的 C. 培养基B中的菌落2和菌落4是产油脂的目的菌 D. 挑选培养基B中的目的菌接种到固体培养基中扩大培养 【答案】C 【解析】 【分析】选择培养基：在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基。 【详解】A、灭菌会杀死土壤菌液中的目的菌，因此土壤菌液不能灭菌，A错误； B、该实验的目的是筛选能合成油脂的细菌，因此选择培养基中不能加入油脂，B错误； C、物质甲可将菌体内的油脂染成黑色。依据题图可知，菌落2和菌落4的细胞被染成黑色，说明这两个菌落的微生物都产生了油脂，C正确； D、一般微生物的扩大培养采用液体培养基，D错误。 故选C。 15. 真菌细胞壁富含多种多糖类物质，已被证实具有诱导活性，可通过介导植物的防御反应来促进红豆杉合成紫杉醇。研究者在最佳诱导条件下对红豆杉进行细胞悬浮培养，结果如图所示，下列叙述正确的是（　　） A. 悬浮培养的细胞通常来自红豆杉的愈伤组织，原因是愈伤组织细胞全能性高 B. 悬浮培养中常用的碳源是蔗糖，原因是其形成的渗透压高于葡萄糖，可防止细胞脱水 C. 真菌多糖处理后红豆杉细胞鲜质量、干质量、紫杉醇总产量均在培养约15天后达到最大值 D. 真菌多糖处理后红豆杉细胞鲜质量、干质量、紫杉醇总产量中增长幅度最高的是紫杉醇总产量 【答案】D 【解析】 【详解】A、悬浮培养的细胞通常来自愈伤组织，原因是愈伤组织细胞分裂能力强、增殖速度快，A错误； B、悬浮培养中常用蔗糖作为碳源，主要原因是蔗糖能维持适宜的渗透压，防止细胞脱水，蔗糖是二糖，其渗透压低于葡萄糖，可更缓慢地被细胞利用，使营养供应更持久，B错误； C、从图中曲线可以看出，处理组的鲜质量、干质量和紫杉醇总产量，都在培养约21天后达到峰值并趋于稳定，C错误； D、对比对照组和处理组的增长幅度，鲜质量和干质量的增长幅度相对平缓，紫杉醇总产量的增长幅度最大，说明真菌多糖对紫杉醇的诱导效果最显著，D正确。 二、多选题：本大题共4小题，每题3分，共计12分，每题有不止一个选项符合题意，每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分 16. 我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名糖尿病（T1DM）患者体内，患者在移植后75天开始不再需要外源胰岛素治疗。具体流程如图所示。下列分析正确的是（ ） A. 从患者体内抽取的脂肪组织，在制备成单个细胞时需用相关酶处理 B. 人的CiPSCs转化为胰岛细胞的过程，类似于植物组织培养中的脱分化 C. 该成果不仅治愈了患者的糖尿病，还解决了免疫排斥问题 D. 脂肪细胞和CiPSCs的培养都需要在CO2培养箱中进行 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、从患者体内取出的脂肪组织是由细胞外基质（如胶原蛋白）连接起来的细胞团，要制备成单个细胞悬液，需要用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理，分解细胞间的蛋白质，使细胞分散开，A正确； B、人的 CiPSCs（多能干细胞）转化为胰岛细胞，是多能干细胞分化为特定功能的体细胞，类似于植物组织培养中的再分化，B错误； C、题干中提到 “患者在移植后 75 天开始不再需要外源胰岛素治疗”，说明移植的胰岛细胞已经可以正常分泌胰岛素，治愈了患者的糖尿病，这些胰岛细胞是由患者自身的脂肪细胞重编程、分化而来的，细胞表面的主要组织相容性抗原（MHC）与患者自身一致，不会被患者的免疫系统识别为 “异己”，从而解决了免疫排斥问题，C正确； D、动物细胞培养（包括脂肪细胞和 CiPSCs 的培养）都需要在CO₂培养箱中进行，其中 CO₂的作用是维持培养液的 pH 稳定（通常为 5% 的 CO₂，可与培养液中的缓冲体系反应，保持 pH 在 7.2~7.4 之间），D正确。 17. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法正确的是（ ） A. 图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶 B. 若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍 C. 图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的 D. 若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个 【答案】BC 【解析】 【分析】用稀释涂布平板法测定同一土壤样品中的细菌数时，在每一个梯度浓度内，至少要涂布3个平板，选择菌落数在30~300的进行记数，求其平均值，再通过计算得出土壤中细菌总数。 【详解】A、本实验是探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，因此图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，但在此培养基上能生长的微生物不一定都能合成脲酶，如固氮菌也能生存，A错误； B、若每支试管稀释10倍，则将0.3mL与amL无菌水混合稀释10倍，需要a的数值为2.7，5g土壤溶于定溶剂形成50mL溶液被稀释了10倍，故5号试管共稀释了106倍，B正确； C、图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的，C正确； D、若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是（275+285+280）÷3÷0.2×105×5=7×108个，D错误。 故选BC。 18. 运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法正确的是（　　） A. 利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株 B. 细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 C. 单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，以得到能稳定遗传的优良品种 D. 利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料 【答案】CD 【解析】 【详解】A、紫草宁是从细胞中提取的一种药物和色素，利用植物细胞培养生产紫草宁时，不需要把外植体培养成完整的紫草植株，培育出能产生紫草宁的组织细胞即可，A错误； B、细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞分裂和生长的培养条件，使细胞大量增殖，从而获得大量的细胞，进而提高细胞产物的总量，并没有提高单个细胞中次生代谢物的含量，B错误； C、单倍体育种中，需经过花药离体培养（植物组织培养）后得到单倍体植株，后经秋水仙素诱导染色体加倍，得到能稳定遗传的优良品种，C正确； D、利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株，大多数单倍体植株的细胞中只含有一套染色体，染色体加倍后得到的植株隐性性状容易显现，因此可作为研究遗传突变的理想材料，D正确。 19. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（ ） A. 可选择鸡的成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料 B. 研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C. 在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂 D. 粗提取得到的白色丝状物中仍含有蛋白质等杂质 【答案】ACD 【解析】 【详解】A、鸡的成熟红细胞含有细胞核，可作为提取DNA的材料，A正确； B、研磨液在4℃下静置的主要目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被降解，同时促进杂质沉淀，并非降低DNA的溶解度，B错误； C、加入预冷酒精后轻缓搅拌，可减少对DNA分子的机械损伤，避免DNA分子断裂，便于收集完整的DNA丝状物，C正确； D、粗提取得到的白色丝状物主要是DNA，但由于实验过程中不能完全去除其他杂质，所以仍含有蛋白质等杂质，D正确。 第II卷 （非选择题，共58分） 三，本大题共五小题，除标明分值的空外，每空一分，共58分 20. “苹果酸/天冬氨酸穿梭”途径（MAS）广泛存在于动物细胞中，影响着细胞的能量代谢。MAS抑制剂抑制MAS途径进而抑制细胞增殖，为癌症的治疗提供了新思路。下表为研究MAS抑制剂对黑色素瘤细胞增殖影响的实验步骤和操作过程，请完成表格： 实验步骤 简要操作过程 配制动物细胞培养液 用蒸馏水、无机盐、葡萄糖、氨基酸及维生素等制备合成培养基，还需添加适量的（1）_____等天然成分，按配方经计算、称量、溶解等步骤配制动物细胞培养液 防止培养时杂菌污染 动物细胞培养液要添加适量的（2）_____ 配制不同浓度MAS抑制剂溶液 用（3）_____作溶剂，配制具有一定浓度梯度的MAS抑制剂溶液 （4）_____ 将黑色素瘤细胞接种到动物细胞培养液中，在适宜条件下培养，获取处于对数生长期的细胞 将细胞培养至分裂高峰 将培养瓶置于96孔培养板中培养24小时，水平晃动培养瓶，使（5）_____，再继续培养48小时 对照组处理 将黑色素瘤细胞适度稀释后接种到96孔培养板中，培养24h后观察到正常贴壁，弃去原培养液，加入新鲜培养液 实验组处理 （6）_____ 实验结果统计 在培养24、48和72h后，分别统计各组黑色素瘤细胞的增殖率 【答案】 ①. 动物血清 ②. 抗生素 ③. 动物细胞培养液 ④. 黑色素瘤细胞的培养 ⑤. 细胞与培养液充分接触 ⑥. 按照对照组方法处理，弃去原培养液后分别加入等量的不同浓度MAS抑制剂 【解析】 【详解】细胞在体外培养时，培养基中应含有细胞所需要的各种营养物质。将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基，称为合成培养基。由于人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚，因此在使用合成培养基时，通常需要加入血清等一些天然成分。 在体外培养细胞时，必须保证环境是无菌、无毒的，即需要对培养液和所有培养用具进行灭菌处理以及在无菌环境下进行操作。培养液还需要定期更换，以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。防止培养过程中杂菌污染，动物细胞培养液要添加适量的抗生素。 将细胞培养至分裂高峰：将培养瓶置于96孔培养板中培养24小时，以保持培养液pH相对稳定，水平晃动培养瓶，使细胞与培养液充分接触，再继续培养48小时。 为了保持无关变量的一致，需要用动物细胞培养液作溶剂，配制具有一定浓度梯度的MAS抑制剂溶液。实验步骤：黑色素瘤细胞的培养是将黑色素瘤细胞接种到动物细胞培养液中，在适宜条件下培养，获取处于对数生长期的细胞。为了探究MAS抑制剂对黑色素瘤细胞增殖影响，实验组的处理是按对照组方法处理，弃去原培养液后分别加入等量的不同浓度MAS抑制剂溶液。 21. 工业发酵生产维生素C常采用“两步发酵法”的工艺路径（如图所示）。路径1为“三菌两步法”，是一种利用三种微生物分两步进行发酵生产的生物技术，目前在维生素C生产中应用最广泛；路径2为未来技术优化方向。回答下列问题： （1）路径1中，为纯化和保存菌种，取适量第一步发酵液稀释后用_________法接种在含有碳酸钙粉的培养基上，以_________（填下列选项代号）为最佳指标，分离保存菌种。 A．菌落直径大小             B．溶钙圈大小             C．溶钙圈直径与菌落直径比值 （2）路径1中，第一步发酵结束后，在发酵液转移至第二步发酵前，需先进行_________处理，以防止因种间关系而干扰后续菌种生长。生酮基古龙酸菌和巨大芽孢杆菌发酵过程中发酵液pH的变化是__________，第二步发酵过程中两种菌的菌种数比例会影响产酸率，种液接入发酵罐前需对种液中的两种菌计数，计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加_____，在培养基上，可根据菌落的______________等特征（至少写两个）对两种菌分别计数。 （3）两种路径中，均有氧化葡萄糖酸杆菌参与，由图可知该种菌株存在_______（填“专一性”或“广谱性”）代谢能力。 （4）在发酵过程中要不断搅拌的目的是_____________。 （5）与从植物中提取维生素C相比，图示两种路径生产维生素C的优势有_________（答两点）。 【答案】（1） ①. 涂布法 ②. C （2） ①. 灭菌（除菌） ②. 逐渐下降，最后趋于稳定 ③. 琼脂 ④. 大小、颜色、形状或隆起程度 （3）广谱性 （4）使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率（或增加溶氧量，使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率） （5）生产周期短、产量高、成本低、产品纯度高、质量稳定，且不受季节和地域限制，适合大规模工业化生产） 【解析】 【小问1详解】 为了纯化和保存菌种，将发酵液稀释后接种到培养基上，常用的方法是稀释涂布平板法（也叫涂布法），该方法可以通过稀释得到单菌落，实现菌种的分离纯化。培养基中添加了碳酸钙，而氧化葡萄糖酸杆菌能产生酸，酸会溶解碳酸钙，在菌落周围形成透明的溶钙圈。 溶钙圈直径与菌落直径的比值，反映了菌株产酸能力的强弱，比值越大，说明菌株目标产物的生产能力越强，因此选C。 只看菌落直径或溶钙圈大小，无法直接反映菌株的生产性能，因此 A、B 不是最佳指标。 【小问2详解】 第一步发酵结束后，发酵液中仍有第一步的菌种，若直接转移到第二步，会与第二步的菌种竞争营养、空间，干扰后续菌种生长，因此需要先进行灭菌（除菌）处理，去除第一步的菌种。生酮基古龙酸菌和巨大芽孢杆菌发酵过程中，会不断产生酸性的中间产物，导致发酵液 pH逐渐下降；当发酵结束、产物生成量稳定后，pH 也会趋于稳定。要对菌种进行菌落计数，需要使用固体培养基，因此在含有发酵液成分的培养基中，还需要添加凝固剂琼脂。不同菌种形成的菌落具有不同的特征，比如菌落的大小、颜色、形状、隆起程度、边缘是否整齐、表面是否光滑等，可通过这些特征对两种菌分别计数。 【小问3详解】 从图中可以看到，氧化葡萄糖酸杆菌既可以利用山梨醇（路径 1）作为底物发酵，也可以利用葡萄糖（路径 2）作为底物发酵，说明该菌株可以利用多种不同的碳源进行代谢，因此具有广谱性的代谢能力，而非专一性（专一性只能利用单一底物）。 【小问4详解】 搅拌在发酵中的作用有两个核心点： 物质交换：让菌体均匀分布，与培养液中的营养物质充分接触，提高原料的利用率。 供氧：增加培养液中的溶氧量（氧气在液体中溶解度低，搅拌可以促进氧气溶解），满足好氧微生物的呼吸需求，保证菌体的正常代谢。 【小问5详解】 与从植物中提取相比，微生物发酵法的优势主要体现在： 不受植物生长的季节、地域限制，可全天候工业化生产，周期短、效率高； 发酵过程可控，产物纯度高、质量稳定； 原料来源广泛、成本低，适合大规模生产； 避免了植物提取中杂质多、分离提纯复杂的问题。 22. 2018年1月25日，我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示相关过程，请分析回答： （1）2001年，美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴，获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_____。 （2）进行如图过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_____；当细胞发生接触抑制时，需先用_____酶处理，再进行_____法收集，将收集的细胞制成细胞悬液分瓶培养。 （3）如图过程④获得的融合细胞需用_____、_____（两种）等方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程后，才能进行后续操作。 （4）如图过程⑤胚胎移植前需要对代孕母体进行_____处理，_____（填“需要”或“不需要”）注射免疫抑制剂，其实质是早期胚胎在_____条件下空间位置的转移。 【答案】（1）体细胞分化程度高，恢复细胞核全能性较难 （2） ①. 血清 ②. 胰蛋白酶/胶原蛋白酶 ③. 离心 （3） ①. 电刺激 ②. Ca2+载体 （4） ①. 同期发情 ②. 不需要 ③. 相同生理环境 【解析】 【小问1详解】 与胚胎细胞相比，动物体细胞分化程度更高，故动物体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，即动物体细胞核恢复其全能性较难。 【小问2详解】 图中过程①是培养成纤维细胞的过程，该过程采用的是动物细胞培养技术，在培养动物细胞时，培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有血清。体外培养的动物细胞往往具有贴壁生长和接触抑制等特点，当细胞发生接触抑制时，需先用胰蛋白酶/胶原蛋白酶处理，再通过离心法收集，将收集的细胞制成细胞悬液分瓶培养。 【小问3详解】 如图过程④获得的融合细胞需用电刺激、Ca2+载体等方法激活，重构胚被激活后可完成细胞分裂和发育，而后再进行后续操作。 【小问4详解】 过程⑤为胚胎移植，胚胎移植是指将雌性动物的早期胚胎或通过体外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同种的、生理状态相同的其他雌性动物的体内，使之继续发育为个体的技术。胚胎移植的实质是早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移。为了创设相同的生理环境，因此，胚胎移植前需要对代孕母体进行同期发情处理，但“不需要”注射免疫抑制剂，因为受体子宫对移入的胚胎不会发生免疫排斥。 23. 我国中科院的研究团队成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如下图所示，请分析回答： （1）体外培养动物细胞时，首先应保证其处于________________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是__________。 （2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应在体外培养到______期，在对卵母细胞进行去核时，常采用____________（答出1点即可）等方法处理。得到的重构胚通常需要发育到_________阶段才能进行胚胎移植。 （3）ahESC与精子和去核卵母细胞融合后，不考虑致死情况，得到的融合细胞的性染色体组成可能是_____________________。 （4）据图分析只依赖雄性小鼠______（填“能”或“不能”）得到孤雄小鼠，请写出两个理由支持你的判断。理由1：____________；理由2：______________。 【答案】（1） ①. 无菌无毒 ②. 95%的空气和5%的CO2 （2） ①. MⅡ ②. 显微操作/梯度离心/紫外线短时间照射/化学物质处理 ③. 囊胚或桑葚胚 （3）XX、XY、YY （4） ①. 不能 ②. 需要将ahESC和另一个精子一起注入到一个去核卵细胞中 ③. 重构胚必须移植到雌性小鼠的体内才能发育为个体 【解析】 【小问1详解】 体外培养动物细胞时，为了避免杂菌污染，首先应保证其处于无菌无毒的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是95%的空气和5%的CO2，其中二氧化碳的作用是维持培养液的pH。 【小问2详解】 核移植时，卵母细胞应在体外培养到MⅡ中期，可通过显微操作、梯度离心、紫外线短时间照射、化学物质处理以去除卵母细胞的细胞核（染色体纺锤体复合物）。重构胚通常需要发育到囊胚或桑葚胚阶段才能进行胚胎移植。 【小问3详解】 ahESC细胞中的性染色体组成为X或Y，而精子中的性染色体组成也是X或Y，精子与去核卵母细胞融合后再与ahESC细胞融合获得孤雄小鼠，则其性染色体可能是XX、XY或YY。 【小问4详解】 结合图示可知，只依赖雄性小鼠“不能”得到孤雄小鼠，这是因为要获得孤雄小鼠需要将ahESC和另一个精子一起注入到一个去核卵细胞中，而卵细胞来自雌性小鼠，另外获得的重构胚必须移植到雌性小鼠的体内才能发育为个体，可见离开雌性个体不能获得孤雄小鼠。 24. 利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可获得高品质、抗逆性强的杂种植株，流程如图。回答下列问题： （1）实验中常用_________酶去除细胞壁得到山金柑与早花柠檬原生质体，需要向原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____________。 （2）过程②利用化学试剂_______诱导融合，可通过观察__________进行杂种细胞的初步筛选，愈伤组织形成和生长、分化过程中，培养基中的碳源是_____（填“无机碳源”或“有机碳源”），在③、④过程中发生基因选择性表达的是_____。 （3）为探究6-BA和IAA对愈伤组织再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基，培养后统计愈伤组织再生丛芽的比例（m），以及愈伤组织上的再生丛芽的平均数（n），结果如表所示。 培养基编号 浓度/（mg·L-1） m/% n/个 6-BA IAA 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 该实验中，自变量是_____。分析实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是_____号培养基，当6-BA / IAA的值_____（填“低”或“高”）时，诱导生芽成功率较高。 【答案】（1） ①. 纤维素酶和果胶 ②. 保持原生质体的完整性 （2） ①. 聚乙二醇/PEG ②. 是否再生新细胞壁 ③. 有机碳源 ④. ③④ （3） ①. IAA 浓度 ②. 1 ③. 高 【解析】 【小问1详解】 植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，去除细胞壁需要用纤维素酶和果胶酶，获得无壁的原生质体。 原生质体没有细胞壁保护，易吸水胀破。培养液中加入甘露醇（维持渗透压的溶质），目的是维持原生质体内外的渗透压平衡，防止原生质体吸水破裂，保持其结构完整和活性。 【小问2详解】 过程②是原生质体融合，常用的化学诱导剂是聚乙二醇（PEG），它能促进原生质体膜融合。植物细胞完成融合的标志是再生出新的细胞壁，因此可以通过观察 “是否再生新细胞壁”，初步筛选出成功融合的杂种细胞。愈伤组织细胞无叶绿体，无法进行光合作用，必须依赖外界提供的有机碳源（如蔗糖）获取能量，因此培养基碳源为有机碳源。③是脱分化形成愈伤组织，④是再分化形成芽、根并发育为植株。 脱分化和再分化过程中，细胞的形态、结构和功能发生变化，是基因选择性表达的结果，因此③、④过程都发生了基因的选择性表达。 【小问3详解】 实验中 6-BA 浓度固定为 0.5 mg・L⁻¹，IAA 浓度分别为 0、0.1、0.2、0.5 mg・L⁻¹，因此自变量是IAA 浓度。表格中 “n” 表示每个愈伤组织上再生丛芽的平均数，1 号培养基的n值为 3.1，是四组中最低的，因此诱导丛芽总数最少的是1 号培养基。植物组织培养中，生长素（IAA）与细胞分裂素（6-BA）的比值会影响分化方向：比值高时，利于根的分化；比值低时，利于芽的分化。故当6-BA / IAA的值高时，诱导生芽成功率较高。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $ 江苏省扬州中学联培部四月期中考试 生物（英才D） 2026.4 第I卷（选择题，共42分） 一、单选题：本大题共15小题，每小题2分，共30分，在每题给出的四个选项中，只有一项是最符合题意的 1. 制醋、制酒是我国传统发酵技术。以下关于传统发酵技术与发酵工程的叙述正确的是（ ） A. 在葡萄酒酿制的整个过程中需要严格保证无氧环境 B. 乙醇既是果酒发酵的产物，也是果醋发酵的底物，又可以抑制杂菌繁殖 C. 通过酵母菌发酵获得大量菌体，从菌体细胞中提取单细胞蛋白作为动物饲料 D. 啤酒生产的后发酵阶段是在密闭和酵母菌生长的最适温度下获得澄清、成熟的啤酒 2. 制作传统泡菜主要是利用天然乳酸菌进行发酵的。关于泡菜的制作，下列相关叙述正确的是（　　） A. 制作泡菜的过程中，应先通气使菌种繁殖，后进行密封发酵 B. 腌制时间过短或食盐用量不足，会导致亚硝酸盐含量升高 C. 制作泡菜的菜坛内会长出一层白膜，是乳酸菌繁殖的结果 D. 制作泡菜的盐水需要煮沸后立即倒入装有食材的泡菜坛中 3. 某同学尝试用糯米制作米酒和米醋，相应操作流程如下。下列叙述正确的是（　　） A. 糯米蒸熟的目的是利于糖化，杀灭所有微生物，避免杂菌污染 B. 待米酒发酵完成后向密封装置中通入无菌空气即可进行醋酸发酵 C. 密封至几乎无气泡产生是为了保证酵母菌在醋酸发酵前失去活性 D. 在米酒和米醋制作的过程中，发酵液pH均有下降的趋势 4. 如图是酱油的制作流程图，下列有关说法正确的是（　　） A. 制作酱油的主要原料是大豆，所含蛋白质在蛋白酶的作用下断裂所有肽键形成氨基酸 B. 制作酱油的主要微生物为米曲霉菌，是需氧型原核生物 C. 发酵池发酵是酱油制作的中心环节，乳酸菌和酵母菌的产物及食盐可调节酱油风味 D. 可采用过滤和沉淀等方法来提取酱油 5. 硝化细菌是化能自养菌，通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。关于硝化细菌的实验室培养，下列说法错误的是（ ） A. 培养硝化细菌的培养基中无需加入碳源 B. 培养基中需加入NH4+为硝化细菌提供氮源和能源 C. 培养基分装到培养皿时可能被污染，分装后需进行灭菌处理 D. 若培养皿皿盖和皿底之间溅有培养基，则不宜用此培养基 6. 研究发现厌氧菌乙醇梭菌可用来生产乙醇，其代谢过程如图所示。某乙醇梭菌突变株接种在基础培养基（含有CO2的环境）中无法产生乙醇。为检测该突变株的酶缺陷类型，进行了相关实验，结果如表所示。据此分析，下列叙述错误的是（ ） CO或CO2中间产物1中间产物2乙醇 组别 培养条件 实验结果 甲 基础培养基 - 乙 基础培养基+中间产物1 - 丙 基础培养基+中间产物2 + 注：“-”表示无乙醇产生，“+”表示有乙醇产生 A. 该探究实验应在无氧环境中进行 B. 该实验的自变量为是否添加中间产物和添加的中间产物类型 C. 该突变株最可能是A酶缺陷型菌株 D. 配制基础培养基时需要添加氮源、水、无机盐等，但不添加碳源 7. 兴趣小组的同学用稀释涂布平板法分离、纯化金黄色葡萄球菌。下列实验结果及其可能的原因对应有误的是（ ） 选项 实验结果 可能的原因 A 菌落连接成片 稀释倍数不够 B 长出霉菌菌落 培养基灭菌不彻底 C 未长出菌落 涂布器未灼烧 D 菌落形成缓慢 培养温度过低 A. A B. B C. C D. D 8. 选择培养基是指对培养基进行处理，使其能允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长，从而将目的菌株从混杂的微生物群体中分离出来的培养基。下列不属于选择培养基的是（　　） A. 以纤维素为唯一碳源，用于筛选纤维素分解菌的培养基 B. 加入青霉素以分离酵母菌等真菌的培养基 C. 加入刚果红和纤维素的呈现红色的培养基 D. 不加氮源以分离固氮微生物的培养基 9. 地膜的主要成分是聚乙烯，化学式是（C2H4）n。残留在土壤中的地膜难以被降解，为筛选出高效降解地膜的细菌，研究人员进行了如图所示操作。下列叙述错误的是（ ） A. 富集培养过程中摇床振荡便于微生物获取营养和氧气 B. 富集培养后，利用平板划线法将微生物接种于X培养基 C. 应挑选降解地膜最高效的细菌⑤接种到Y培养基 D. 若要研究目的菌的生长规律，可用细菌计数板计数方法进行计数 10. 辣椒素是存在于辣椒细胞中的一种活性成分，具有抗癌、提高免疫力等功能。研究人员利用植物细胞培养技术实现了天然辣椒素的工厂化生产，其主要流程为：外植体→消毒→愈伤组织→悬浮培养→分离提纯。下列相关说法正确的是（ ） A. 该过程体现了植物细胞的全能性 B. 外植体应先后用酒精和次氯酸钠溶液进行消毒 C. 愈伤组织可合成辣椒素，因此辣椒素属于初生代谢产物 D. 该工厂化生产利用悬浮培养的条件，提高了单个细胞中辣椒素的含量 11. 下图表示水稻的花药在一定条件下形成试管苗的培育过程。下列相关叙述错误的是（　　） A. a、b、c、d中的植物细胞都有全能性，但全能性的表达程度有差异 B. 一般先诱导愈伤组织生芽，再诱导愈伤组织生根，最后形成试管苗 C. 降低培养基中细胞分裂素/生长素的比值，有利于诱导生根 D. 该过程为单倍体育种，缩短了培育遗传性状稳定的纯合植株的年限 12. 科研人员将Oct3/4、Sox2、c-Myc和Klf4基因通过逆转录病毒转入遗传物质缺陷型小鼠成纤维细胞中，获得iPS细胞，进一步获得克隆鼠，相关流程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 获得iPS细胞都是利用载体将特定基因导入动物成纤维细胞实现的 B. 可利用减法原理，依次去掉1个基因来判断每个基因作用的相对大小 C. X鼠的遗传物质来自于黑鼠和灰鼠，其体色为黑色 D. 克隆一批遗传背景相同的缺陷型小鼠，可通过对比来分析致病基因 13. 图示以植物甲和乙制作植物丙的过程。下列相关叙述正确的是（ ） A. 步骤①酶解时间存在差异的原因是两种亲本的细胞膜结构存在差异 B. 步骤②前可通过台盼蓝染色法检测甲和乙的原生质体是否有活性 C. 步骤③形成的细胞壁在步骤④时彻底水解使愈伤组织液泡化 D. 步骤⑤更换培养基的主要目的是满足细胞的营养需求 14. 微生物合成的油脂是制备生物柴油的新型原料。为筛选出产油脂的细菌，某小组进行了如图所示的实验。物质甲可将菌体内的油脂染成黑色。下列分析正确的是（ ） A. 应将土壤菌液系列稀释、灭菌后再涂布到培养基A上 B. 培养基A、B、C都应添加油脂以达到筛选的目的 C. 培养基B中的菌落2和菌落4是产油脂的目的菌 D. 挑选培养基B中的目的菌接种到固体培养基中扩大培养 15. 真菌细胞壁富含多种多糖类物质，已被证实具有诱导活性，可通过介导植物的防御反应来促进红豆杉合成紫杉醇。研究者在最佳诱导条件下对红豆杉进行细胞悬浮培养，结果如图所示，下列叙述正确的是（　　） A. 悬浮培养的细胞通常来自红豆杉的愈伤组织，原因是愈伤组织细胞全能性高 B. 悬浮培养中常用的碳源是蔗糖，原因是其形成的渗透压高于葡萄糖，可防止细胞脱水 C. 真菌多糖处理后红豆杉细胞鲜质量、干质量、紫杉醇总产量均在培养约15天后达到最大值 D. 真菌多糖处理后红豆杉细胞鲜质量、干质量、紫杉醇总产量中增长幅度最高的是紫杉醇总产量 二、多选题：本大题共4小题，每题3分，共计12分，每题有不止一个选项符合题意，每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分 16. 我国科学家首次利用化学重编程多能干细胞（CiPSCs）分化而来的胰岛细胞自体移植到一名糖尿病（T1DM）患者体内，患者在移植后75天开始不再需要外源胰岛素治疗。具体流程如图所示。下列分析正确的是（ ） A. 从患者体内抽取的脂肪组织，在制备成单个细胞时需用相关酶处理 B. 人的CiPSCs转化为胰岛细胞的过程，类似于植物组织培养中的脱分化 C. 该成果不仅治愈了患者的糖尿病，还解决了免疫排斥问题 D. 脂肪细胞和CiPSCs的培养都需要在CO2培养箱中进行 17. 某生物活动小组为探究当地农田土壤中分解尿素的细菌的数量，进行了取样、系列梯度稀释、涂布平板、培养、计数等步骤，实验操作过程如下，下列说法正确的是（ ） A. 图中接种的培养基是以尿素为唯一氮源的固体培养基，能生长的微生物都能合成脲酶 B. 若每支试管稀释10倍，则图中a的数值应为2.7，5号试管共稀释了106倍 C. 图中左上角培养基菌落连成一片，可能是涂布不均匀造成的 D. 若仅以4号试管接种培养基计数，5g该土壤中含分解尿素菌的估算数目是1.4×108个 18. 运用植物细胞工程技术，可以培育单倍体植株和进行细胞产物的工厂化生产，下列有关说法正确的是（　　） A. 利用植物细胞培养生产紫草宁时，需要把外植体培养成完整的紫草植株 B. 细胞产物的工厂化生产主要是利用促进细胞生长的培养条件，提高了单个细胞中次生代谢物的含量 C. 单倍体育种中，需经过植物组织培养和诱导染色体加倍，以得到能稳定遗传的优良品种 D. 利用花药通过植物组织培养获得的单倍体植株可作为研究遗传突变的理想材料 19. 下列关于“DNA的粗提取与鉴定”实验的分析，正确的是（ ） A. 可选择鸡的成熟的红细胞作为提取细胞中DNA的材料 B. 研磨液在4℃下静置，主要目的是降低DNA分子的溶解度 C. 在上清液中加入预冷酒精后轻缓搅拌，可避免DNA分子的断裂 D. 粗提取得到的白色丝状物中仍含有蛋白质等杂质 第II卷 （非选择题，共58分） 三，本大题共五小题，除标明分值的空外，每空一分，共58分 20. “苹果酸/天冬氨酸穿梭”途径（MAS）广泛存在于动物细胞中，影响着细胞的能量代谢。MAS抑制剂抑制MAS途径进而抑制细胞增殖，为癌症的治疗提供了新思路。下表为研究MAS抑制剂对黑色素瘤细胞增殖影响的实验步骤和操作过程，请完成表格： 实验步骤 简要操作过程 配制动物细胞培养液 用蒸馏水、无机盐、葡萄糖、氨基酸及维生素等制备合成培养基，还需添加适量的（1）_____等天然成分，按配方经计算、称量、溶解等步骤配制动物细胞培养液 防止培养时杂菌污染 动物细胞培养液要添加适量的（2）_____ 配制不同浓度MAS抑制剂溶液 用（3）_____作溶剂，配制具有一定浓度梯度的MAS抑制剂溶液 （4）_____ 将黑色素瘤细胞接种到动物细胞培养液中，在适宜条件下培养，获取处于对数生长期的细胞 将细胞培养至分裂高峰 将培养瓶置于96孔培养板中培养24小时，水平晃动培养瓶，使（5）_____，再继续培养48小时 对照组处理 将黑色素瘤细胞适度稀释后接种到96孔培养板中，培养24h后观察到正常贴壁，弃去原培养液，加入新鲜培养液 实验组处理 （6）_____ 实验结果统计 在培养24、48和72h后，分别统计各组黑色素瘤细胞的增殖率 21. 工业发酵生产维生素C常采用“两步发酵法”的工艺路径（如图所示）。路径1为“三菌两步法”，是一种利用三种微生物分两步进行发酵生产的生物技术，目前在维生素C生产中应用最广泛；路径2为未来技术优化方向。回答下列问题： （1）路径1中，为纯化和保存菌种，取适量第一步发酵液稀释后用_________法接种在含有碳酸钙粉的培养基上，以_________（填下列选项代号）为最佳指标，分离保存菌种。 A．菌落直径大小             B．溶钙圈大小             C．溶钙圈直径与菌落直径比值 （2）路径1中，第一步发酵结束后，在发酵液转移至第二步发酵前，需先进行_________处理，以防止因种间关系而干扰后续菌种生长。生酮基古龙酸菌和巨大芽孢杆菌发酵过程中发酵液pH的变化是__________，第二步发酵过程中两种菌的菌种数比例会影响产酸率，种液接入发酵罐前需对种液中的两种菌计数，计数所用的培养基除含有与发酵液相同的成分外，还需添加_____，在培养基上，可根据菌落的______________等特征（至少写两个）对两种菌分别计数。 （3）两种路径中，均有氧化葡萄糖酸杆菌参与，由图可知该种菌株存在_______（填“专一性”或“广谱性”）代谢能力。 （4）在发酵过程中要不断搅拌的目的是_____________。 （5）与从植物中提取维生素C相比，图示两种路径生产维生素C的优势有_________（答两点）。 22. 2018年1月25日，我国研究人员在世界上率先利用去甲基化酶（Kd4d）的mRNA，经体细胞核移植技术培育出第一批灵长类动物——食蟹猴，流程如图所示，①～⑥表示相关过程，请分析回答： （1）2001年，美国科学家已经培育出胚胎细胞核移植猴，获得食蟹猴的体细胞核移植技术难度明显高于胚胎细胞核移植，原因是_____。 （2）进行如图过程①时，细胞培养的培养液成分与植物组织培养基成分最主要的区别在于前者含有_____；当细胞发生接触抑制时，需先用_____酶处理，再进行_____法收集，将收集的细胞制成细胞悬液分瓶培养。 （3）如图过程④获得的融合细胞需用_____、_____（两种）等方法激活，使其完成细胞分裂和发育进程后，才能进行后续操作。 （4）如图过程⑤胚胎移植前需要对代孕母体进行_____处理，_____（填“需要”或“不需要”）注射免疫抑制剂，其实质是早期胚胎在_____条件下空间位置的转移。 23. 我国中科院的研究团队成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖。实验流程如下图所示，请分析回答： （1）体外培养动物细胞时，首先应保证其处于________________的环境，除了适宜的营养物质、温度等条件外，还需要控制的气体条件是__________。 （2）要培育孤雄小鼠需要将精子和具卵细胞细胞核特点的ahESC同时注入去核的卵母细胞形成重构胚，此卵母细胞应在体外培养到______期，在对卵母细胞进行去核时，常采用____________（答出1点即可）等方法处理。得到的重构胚通常需要发育到_________阶段才能进行胚胎移植。 （3）ahESC与精子和去核卵母细胞融合后，不考虑致死情况，得到的融合细胞的性染色体组成可能是_____________________。 （4）据图分析只依赖雄性小鼠______（填“能”或“不能”）得到孤雄小鼠，请写出两个理由支持你的判断。理由1：____________；理由2：______________。 24. 利用山金柑愈伤组织细胞（2n）和早花柠檬叶肉细胞（2n）进行体细胞杂交可获得高品质、抗逆性强的杂种植株，流程如图。回答下列问题： （1）实验中常用_________酶去除细胞壁得到山金柑与早花柠檬原生质体，需要向原生质体培养液中加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是_____________。 （2）过程②利用化学试剂_______诱导融合，可通过观察__________进行杂种细胞的初步筛选，愈伤组织形成和生长、分化过程中，培养基中的碳源是_____（填“无机碳源”或“有机碳源”），在③、④过程中发生基因选择性表达的是_____。 （3）为探究6-BA和IAA对愈伤组织再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6-BA和IAA，配制成四种培养基，培养后统计愈伤组织再生丛芽的比例（m），以及愈伤组织上的再生丛芽的平均数（n），结果如表所示。 培养基编号 浓度/（mg·L-1） m/% n/个 6-BA IAA 1 0.5 0 76.7 3.1 2 0.1 77.4 6.1 3 0.2 66.7 5.3 4 0.5 60.0 5.0 该实验中，自变量是_____。分析实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是_____号培养基，当6-BA / IAA的值_____（填“低”或“高”）时，诱导生芽成功率较高。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $