第3章 基因工程 测试卷-【新课程能力培养】2025-2026学年高中生物选择必修3 生物技术与工程练习手册（人教版）

16.ACD【解析】植物细胞壁的主要成分是纤维素 和果胶，所以过程①需使用纤维素酶和果胶酶处理，A 正确；②过程为植物细胞融合过程，灭活病毒是用于诱 导动物细胞融合的，B错误；过程③需应用植物组培技 术将杂种细胞培养形成个体，C正确；三倍体植株含有 三个染色体组，减数分裂时联会紊乱，可产生无子柑 橘，该变异可遗传，D正确。 17.(1)HCG(或人绒毛膜促性腺激素)无限增 殖灭活病毒(2)杂交瘤细胞具有S途径可以进行 DNA合成，瘤细胞的DNA合成被阻断，B淋巴细胞不 能连续增殖(3)克隆化培养、抗体检测既能大量 增殖又能分泌所需抗体（或HCG抗体） 【解析】(1)在抗HCG单克隆抗体制备过程中 注射物质X的目的是获得能产生抗HCG抗体的B淋巴 细胞，因此物质X是HCG(或人绒毛膜促性腺激素)。 Y细胞是骨髓瘤细胞，该技术主要利用了Y细胞无限增 殖的特点。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原 理相同，诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法 电融合法和灭活病毒诱导法等，其中，不同于植物体细 胞杂交的融合方法是灭活病毒诱导法。(2)氨基嘌呤 能阻断D途径，在HAT培养基中加人氨基嘌呤后，B 细胞只存在S途径，但不能连续增殖，因此B淋巴细胞 和B淋巴细胞的融合细胞在培养基存活一段时间后死 亡；骨髓瘤细胞的DNA合成途径被阻断，骨髓瘤细胞 和骨髓瘤细胞的融合细胞因无法合成DNA,也不能存 活。而杂交瘤细胞既有B淋巴细胞的S途径进行DNA 合成，又有骨髓瘤细胞无限增殖的能力，因此可以在培 养基中存活下来。(3)在单克隆抗体制备过程中，有 两次筛选：第一次筛选是利用选择培养基筛选出杂交瘤 细胞，第二次培养是通过克隆化培养和抗体检测，筛选 出既能无限增殖又能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 18.(1)接触胰蛋白酶（或胶原蛋白）传代 (2)减数分裂Ⅱ中(MⅡ)细胞核(3)相同B淋 巴细胞3定期更换培养液(4)抗原与抗体高度特 异性结合 【解析】(1)动物细胞培养中，在细胞贴壁生长过 程中会出现接触抑制。贴满瓶壁的细胞一般用胰蛋白酶 处理后分瓶继续培养，这种培养过程称为传代培养。 (2)在细胞核移植中用到的卵母细胞，通常情况下是将 采集到的卵母细胞在体外培养到减数分裂Ⅱ中期。在 细胞核移植之前，应去除卵母细胞的细胞核。(3)在 多次注射的相同抗原的刺激下，小鼠体内会发生更强烈 的相应的体液免疫反应，生成能产生特定抗体的B淋巴 细胞。诱导动物细胞融合，如果细胞发生两两融合， 则可形成B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、骨髓瘤细胞与 骨髓瘤细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的3种 不同的融合细胞。动物细胞培养的过程中，为避免细 胞代谢产物积累对细胞自身造成危害，应定时更换培 养基，以便清除代谢产物。(4)单克隆抗体在人体内 可以自动追踪抗原，利用的是抗体与抗原的特异性 参考答案与解析。 结合。 >"第3章章末测试卷 1.D【解析】生物反应器是利用生物体所具有的生 物功能，在体外或体内通过生化反应或生物自身的代谢 获得目标产物的装置系统、细胞、组织器官等。科学家 利用转基因山羊生产血清蛋白，既可以大量生产，又方 便了蛋白的提取。人体成熟的红细胞细胞核退化消失， 细胞中无DNA,无基因，A错误；由于膀胱上皮细胞没 有全能性，应选用受精卵作为目的基因的受体细胞，以 培育得到转基因羊，B错误；由于体细胞都是由有丝分 裂而来，遗传物质没有改变，因此人体所有体细胞均含 有血清白蛋白基因（红细胞在成熟前也有），C错误；转 基因山羊将人的血清白蛋白分泌到尿液中，只要收集尿 液即可收集该蛋白，D正确。 2.D【解析】限制酶能识别DNA分子特定核苷酸序 列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷 酸二酯键断裂，A正确；载体是基因的运输工具，作用 是携带目的基因导入受体细胞中，使之稳定存在并表达， B正确：存在于运载体上的标记基因，作用是鉴别筛选 目的基因是否导人受体细胞，C正确；钙离子不能提高 植物细胞的通透性，用CaC2处理细菌的目的是增加细 菌细胞壁的通透性，有利于目的基因的导人，D错误。 3.D【解析】PCR技术是生物体外复制特定DNA 的核酸合成技术。DNA复制为原理，模板DNA、四种 脱氧核苷酸、一对引物、热稳定DNA聚合酶(Tag酶) 为基本条件。PCR仪中需要含Mg2+缓冲溶液，A正确： 需要知道目的基因上下游的序列才能设计引物，B正 确；95℃时DNA的氢键断开，两条链解开螺旋，C正 确：两引物分别与DNA的两条互补单链结合，是子链 延伸的起点，其引物间碱基序列不能互补配对，否则会 形成引物二聚体，不能有效扩增目的基因，D错误。 4.A【解析】可以根据某毒蛋白中的氨基酸序列推 断mRNA中的核糖核苷酸序列，进而推测出毒蛋白基 因的核苷酸序列，但由于密码子的简并性，这个核苷酸 序列并不唯一，A正确；运载体质粒通常采用抗生素抗 性基因作为标记基因，以便筛选含有目的基因的受体细 胞，B错误；动物取食转基因作物后，要经过消化吸收 才进人身体，目的基因不可能直接进入动物体细胞中， C错误；基因工程是按照人们的意愿，对生物进行的定 向改造，而自然界中天然存在的噬菌体自行感染细菌 后，其DNA整合到细菌DNA上不符合基因工程的概 念，D错误。 5.B【解析】DNA连接酶是将目的基因的黏性末端 与载体的黏性末端之间黏合形成磷酸二酯键，碱基之间 的氢键自动形成，A错误：用限制酶从质粒上切下一个 目的基因需打开2个切口，破坏4个磷酸二酯键，消耗 4个水分子，B正确；Tag酶是PCR仪扩增DNA分子时 常用的一种耐高温DNA聚合酶，C错误；在解离根尖 分生区细胞时加入盐酸使植物细胞相互分散开，D 63 高中生物学选择性必修3（人教版） 错误。 6.D【解析】乳腺生物反应器生产药用蛋白属于动 物基因工程成果，A不符合题意：培育抗除草剂的作物 新品种属于植物基因工程成果，B不符合题意；利用微 生物生产重组人干扰素属于基因工程成果，C不符合题 意：用高产青霉菌生产青霉素属于诱变育种，不属于基 因工程成果，D符合题意。 7.D【解析】通过PCR技术扩增目的基因时，需要 用耐高温的DNA聚合酶催化单个脱氧核苷酸聚合形成 DNA长链，A正确；在复制时，引物与DNA母链通过 碱基配对结合后，DNA聚合酶从引物的3'端开始延伸 DNA链，因此DNA合成方向总是从子链的5端向3'端 延伸，B正确；PCR技术的原理是DNA复制，DNA复 制时两条链均作为复制的模板，C正确：PCR扩增中双 链DNA解开不需要解旋酶，高温条件下氢键可自动解 开，D错误。 8.D【解析】酶a与酶b都切开特定部位的磷酸二 酯键，切断的化学键相同，但酶a的识别序列为 AGATCT,酶b的识别序列为GGATCC,两种酶的识别 序列不相同，因此这两种酶具有专一性，A错误；酶a 与酶b切出的黏性末端相同，均为GATC,能用DNA 连接酶连接，B错误；由酶切产物可知，酶a单独切割 后会形成4个片段，说明含有3个酶a的酶切位点，酶 b再次酶切后，又新形成4种片段，说明有2个酶b的 酶切位点，C错误；质粒为环状DNA分子，用酶b完 全切割与该DNA序列相同的质粒，质粒上有2个酶b 的酶切位点，用酶b得到的切割产物有2种，D正确。 9.A【解析】基因工程的基本操作步骤主要包括四 步：目的基因的获取，即④获取目的基因：基因表达载 体的构建，即①构建基因表达载体；将目的基因导入受 体细胞，即②；目的基因的检测与表达，即③检测目的 基因的表达是否符合特定性状要求，故A符合题意。 1O.A【解析】反应体系中需加入耐高温的DNA聚 合酶，该酶的作用是催化合成DNA子链，在C过程中 起作用，A错误：引物是一小段能与DNA母链的一段 碱基序列互补配对的短单链核酸，用于PCR的引物长 度通常为20~30个核苷酸，B正确；根据图示可知， PCR扩增遵循DNA半保留复制原则，C正确；A过程 为DNA变性过程，该过程通过高温破坏DNA分子中的 氢键，双链DNA解聚为单链，D正确。 11.D【解析】洋葱研磨液用两层纱布过滤，以保证 提取的DNA量，A错误；DNA在冷酒精中的溶解度很 低，蛋白质在冷酒精中的溶解度较高，故可以利用 DNA不溶于冷酒精的原理，提纯DNA,但提取量不变， B错误；鸡是鸟类，红细胞含DNA,可以作为提取 DNA的实验材料，C错误；在沸水浴条件下，DNA遇 二苯胺会被染成蓝色，用二苯胺试剂鉴定DNA时，需 沸水浴加热冷却后再观察颜色变化，D正确。 12.B【解析】质粒主要分布于原核生物中，在真核 生物酵母菌细胞内也有分布，限制酶主要来源于原核生 64 物，A错误；构建基因表达载体时，常用相同的限制酶 (或者是同尾酶)处理目的基因和质粒，这样才能产生 相同的黏性末端，便于二者的连接，B正确；T4DNA 连接酶既可以连接双链DNA互补黏性末端，也可以用 于连接平末端，C错误；细菌内的限制酶能限制异源 DNA的侵入并使之失活，即能将外源DNA切断，从而 保护自身的遗传特性，D错误。 13.(1)编码蛋白质的结构基因，也可能是一些具 有调控作用的因子(2)黏性平磷酸二酯(3) PCR扩增技术目的基因表达载体的构建 【解析】(1)目的基因主要是指编码蛋白质的结构 基因，也可能是一些具有调控作用的因子。(2)限制 酶能够识别双链DNA分子的某种特定核苷酸序列，并 且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯 键断裂，形成黏性末端和平末端两种，若要在限制酶切 割目的基因和质粒后使其直接进行连接，则应选择能使 二者产生相同黏性末端的限制酶。(3)在短时间内获 取大量目的基因，常用的技术是PCR扩增。用该技术 获得目的基因后，为了保证目的基因在受体细胞中正常 表达，需要构建目的基因表达载体，这是基因工程的核 心步骤。 14.(1)RNA CDNA(或DNA)(2)抗体抗 原抗体特异性结合（或抗原一抗体杂交）(3)寄生 辅助性T(4)逆转录抑制剂抑制了逆转录酶的活 性，抑制HV的逆转录过程，进而抑制了HⅡV的增殖 【解析】艾滋病是因为感染人类免疫缺陷病毒，HV 主要感染和破坏了患者的辅助性T细胞，降低患者免疫 系统的防卫功能。艾滋病的传播途径有性传播、血液传 播和母婴传播等。(1)HIV的遗传物质是RNA,因此 用基因工程方法制备V的某蛋白（目的蛋白）时，可 先提取HIV中的RNA,以其作为模板，在逆转录酶的 作用下合成cDNA(或DNA),获取该目的蛋白的基因， 然后构建基因表达载体，最后导入受体细胞中。(2)》 将抗原注入机体后，会刺激机体产生可与该抗原结合的 相应抗体，抗体属于分泌蛋白之一。用抗体检测受试者 血清中的V的原理是抗原一抗体特异性结合。(3) 病毒必须寄生在活细胞中，才能进行生命活动，故HV 营寄生生活；HV主要感染和破坏了患者的辅助性T细 胞，降低了患者免疫系统的防卫功能。(4)目前常用 逆转录酶抑制剂治疗艾滋病，其治疗机理是逆转录抑制 剂抑制了逆转录酶的活性，抑制HV的逆转录过程，进 而抑制了HⅡV的增殖。 15.(1)逆（反）转录酶(2)温度（或温度、 pH)(3)2-1(4)抗原和抗体发生特异性结合 病毒进入人体后，刺激人体免疫系统产生相应的抗体需 要一段时间 【解析】过程I是由mRNA形成cDNA的过程，表 示逆转录；过程Ⅱ先使mRNA-cDNA杂合双链解开， 再以单链的DNA合成双链的DNA,最后利用PCR技术 进行DNA复制（扩增）。PCR技术的原理是模拟生物体 内DNA分子复制的过程，利用DNA分子热变性原理 通过控制温度控制DNA分子的解聚和结合；DNA分子 体内复制过程中DNA的解旋是在解旋酶的作用下实现 的；PCR扩增DNA片段过程经过n次扩增，形成的 DNA分子数是2n个。(1)过程I是由mRNA形成 cDNA的过程，表示逆转录过程，需要加入逆（反）转 录酶。(2)RT-PCR过程通过对温度（或温度、pH) 的控制影响酶的活性和DNA分子结构（高温解旋、降 温恢复双螺旋结构)，从而使得整个反应过程有序地进 行。(3)据图分析，过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次 循环的扩增，形成的DNA分子数是2-1个，每个 DNA分子带一个引物B,根据DNA半保留复制特点， 因此该过程理论上至少需要2n-1个引物B。(4)乙肝 病毒的检测方法还可采用病毒抗原一抗体检测，其原理 是抗原和抗体发生特异性结合；病毒进人人体后，刺激 人体免疫系统产生相应的抗体需要一段时间，故检测到 乙肝病毒感染者抗体滞后于病毒核酸和抗原，因此病毒 抗体检测对传染性极高的乙肝病毒疑似患者早期确诊意 义不大。 一"期中测试卷 1.A【解析】酵母菌在无氧条件下能进行酒精发酵 酿酒酵母的最适生长温度约为28℃，A错误；制作传 统泡菜是利用植物体表面天然的乳酸菌来进行发酵的， 发酵期间，乳酸会不断积累，当它的质量百分比为0.4% ~0.8%时，泡菜的口味、品质最佳，B正确；制作腐乳 时，起主要作用的微生物是毛霉，毛霉产生的蛋白酶将 豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，C正确； 醋酸菌是好氧菌，当O,、糖源都充足时能通过复杂的化 学反应将糖分解成醋酸，D正确。 2.B【解析】冷却的目的是防止温度过高导致酵母 菌死亡，进而导致制作过程失败，A正确；在酿酒过程 中会产生水，是酵母菌进行有氧呼吸的产物，B错误： 酵母菌呼吸作用产生的CO2可在酿酒过程中形成气泡 因此发酵时需要留有一定的空间，可适时放气，C正 确；根据酿酒的原理可知，加盖密封是为了形成无氧环 境，让酵母菌进行无氧呼吸，产生酒精，D正确。 3.C【解析】由题干信息可知，PHA是由嗜盐细菌 合成的一种胞内聚酯，为寻找到产生PHA菌种，步骤 ②可用稀释涂布平板法接种到含盐量较高的选择培养基 上，A错误；并不是步骤③的培养基浓度越高对嗜盐细 菌的生长越有利，若盐浓度过高，会导致菌体失水死 亡，不利于嗜盐细菌的生长，B错误；为获得高产的 PHA菌种，挑取菌落时，应挑取多个单菌落并分别测定 嗜盐细菌的PHA含量，以确定高产菌株，C正确；稀 释涂布平板法接种容易形成单菌落，所以常用来进行微 生物的计数，平板划线法常用来筛选分离微生物，因 此，步骤⑤检测细菌数目时，可使用稀释涂布平板法得 到单菌落进行计数，D错误。 4.B【解析】根据题意，脲酶被去除镍后失去活性， 参考答案与解析。 说明镍是组成脲酶的重要元素，A正确；脲酶催化尿素 水解的机理为降低化学反应所需的活化能，镍作为脲酶 的重要组成元素，应该与降低尿素水解反应的活化能有 关，B错误；产脲酶细菌可利用NHC1中的氮源进行代 谢活动，因此产脲酶细菌可在以NH,C1为唯一氮源的培 养基生长繁殖，C正确：产脲酶细菌能利用脲酶催化尿 素分解产生NH,NH可作为细菌生长的氮源，不能产 脲酶的细菌则无法分解尿素获得氮源，因此以尿素为唯 一氮源的培养基可用于筛选产脲酶细菌，D正确。 5.A【解析】葡萄皮上有野生酵母菌，故可以不另 外接种发酵菌，A正确；未密封的果酒的表面形成一层 菌膜是醋酸菌增殖形成的，B错误；泡菜坛一般装至八 分满，C错误；乳酸菌发酵的过程中泡菜坛坛盖的水槽 中的水会蒸发，需要及时补充水，D错误。 6.D【解析】牛肉膏虽然营养丰富，但也不是在培 养基中含量越高越利于细菌的生长，浓度太高也可能会 导致细菌失水过多死亡，A错误：该实验结果是先将三 种细菌制成悬液，再分别接种到加入了不同浓度的乳酸 链球菌素新鲜豆浆中培养，一段时间后统计豆浆中腐败 细菌数量得出来的，B错误；由实验结果可知，经过一 段时间的培养，S3的细菌数量相对值最低，说明乳酸链 球菌素抑制S3生长效果最好，由于乳酸链球菌素的添 加量达到250mgkg后细菌的数量就不再发生变化， 因此乳酸链球菌素的最适添加量为250mgkg,C错 误；乳酸链球菌素是一种多肽，食用后会被人体消化， 不会改变人体肠道内正常菌群，D正确。 7.C【解析】外植体是指离体培养的植物器官、组 织或细胞，可利用外植体进行植物组织培养，A正确： 已分化的细胞经过脱分化，会失去其特有的结构和功能， 转变为未分化的细胞，变成愈伤组织，B正确；细胞分 化的本质为基因的选择性表达，脱分化的过程使细胞转 变为未分化的细胞，基因的表达情况发生了改变，但是 遗传物质没有发生改变，C错误；植物组织培养的主要 步骤是脱分化与再分化，脱分化形成愈伤组织，愈伤组 织重新分化成芽、根等器官的过程称为再分化，D正确。 8.C【解析】组织培养所用培养基中生长素与细胞 分裂素的比值较高时利于根的分化，A正确；植物的分 生区病毒极少甚至无病毒，因此可将植物茎尖接种在培 养基中，经过人工培养可获得脱毒苗，B正确；植物组 织培养过程中，脱分化不需要光照，再分化需要光照， C错误：植物组织培养过程中，蔗糖可作为碳源并有助 于维持渗透压，蔗糖并非唯一碳源，后期长出叶片，二 氧化碳也可以作为碳源，D正确。 9.C【解析】过程①是获得原生质体，需去掉植物 的细胞壁（主要由纤维素和果胶组成），因此需使用纤 维素酶和果胶酶处理细胞，A正确；过程②中常用PEG 诱导原生质体融合，是一种化学诱导法，B正确；“黄 金大米”植株是两种植株的融合体，染色体数目为44， C错误；该技术将杂种细胞培育成“黄金大米”植株， 体现了植物细胞具有全能性，D正确。N 高中生物学选择性必修3（人教版） 第3章 一、单项选择题 1.科学家培育出一种转基因山羊，其膀胱上 皮细胞可以合成人的血清白蛋白并分泌到 尿液中。这种转基因山羊被称为“膀胱生 物反应器”。下列叙述正确的是(） A.可从人体成熟的红细胞中获取血清白 蛋白基因 B.应选用膀胱上皮细胞作为目的基因的 受体细胞 C.人的血清白蛋白基因只存在于转基因 山羊的膀胱上皮细胞中 D.转基因山羊将人的血清白蛋白分泌到 尿液中有利于该蛋白的收集 2.下列关于基因工程中所用物质与其发挥的 作用不能对应的是() A.限制酶一识别DNA分子特定核苷酸 序列并断开磷酸二酯键 B.载体—携带目的基因导入受体细胞 C.标记基因—鉴别筛选目的基因是否 导入受体细胞 D.钙离子一提高植物细胞的通透性 3.实验室常用PCR技术对DNA进行体外扩 增，下列相关叙述错误的是（) A.需要在PCR仪中加入含Mg2+缓冲溶液 B.需要已知目的基因的部分碱基序列 C.需要加热至95℃使DNA变性 D.一对引物间的碱基序列应互补配对 4.下列各项叙述正确的是() A.可以根据某毒蛋白中的氨基酸序列先 推测mRNA中的核苷酸序列，进而推 10 章末测试卷 测出毒蛋白基因的核苷酸序列 B.载体质粒通常采用抗生素合成基因作 为筛选标记基因 C.转基因作物被动物食用后，目的基因 会转入动物体细胞中 D.自然界中天然存在的噬菌体自行感染 细菌后，其DNA整合到细菌DNA上 属于基因工程 5.下列关于生物学中常见的几种酶的叙述， 正确的是（) A.DNA连接酶将目的基因与载体通过形 成氢键黏合在一起 B.用限制酶从质粒上切下一个目的基因 需消耗4个水分子 C.Tag酶是PCR仪扩增DNA分子时常用 的一种耐高温的DNA连接酶 D.在解离根尖分生区细胞时加入纤维素 酶，有利于提高解离的效果 6.下列不属于基因工程成果的是() A.乳腺生物反应器生产药用蛋白 B.培育抗除草剂的作物新品种 C.利用微生物生产重组人干扰素 D.用高产青霉菌生产青霉素 7.下列关于PCR反应体系中所加物质作用 的描述，错误的是() A.耐高温的DNA聚合酶用于催化DNA 子链的合成 B.引物使Tag酶能从引物的3'端延伸 DNA链 C.目标DNA母链作为合成DNA复制的 模板 D.解旋酶用于打开DNA双链 8.某线性DNA分子含有5000个碱基对 (bp),先用限制酶a切割，再把得到的产 物用限制酶b切割，得到的DNA片段大 小如表所示。限制酶a、b的识别序列和 切割位点如图表所示。下列有关说法正确 的是( a酶 b酶 -AGATCT- -GGATCC- -TCTAGA- -CCTAGG- 酶a切割产物 酶b再次切割产物 长度(bp) 长度(bp) 2100；1400；1000: 1900；200;800; 500 600:1000:500 A.酶a与酶b识别的序列不同，产生的 黏性末端相同，因此无序列的特异性 B.酶a与酶b切出的黏性末端不能用 DNA连接酶连接 C.该DNA分子中酶a与酶b的识别序列 各有2个 D.若酶b完全切割与该DNA序列相同的 质粒，得到的切割产物有2种 9.基因工程的正确操作步骤是() ①构建基因表达载体②将目的基因导入 受体细胞③检测目的基因的表达是否符 合特定性状要求④获取目的基因 A.④①②③ B.②④①③ C.③④①② D.④③②① 1O.下图表示PCR的过程，下列相关叙述错 误的是（) 第3章章末测试卷。 引物a B DNA样品 引奶两个DNA分子 A.耐高温的DNA聚合酶在B过程起作用 B.引物a和引物b的长度不宜太短 C.PCR遵循DNA半保留复制原则 D.A过程DNA分子中的氢键断裂 11.下列有关以洋葱为实验材料进行“DNA 的粗提取与鉴定实验”的叙述，正确的 是() A.洋葱研磨液需要用滤纸过滤，以保证 提取的DNA量 B.滤液中加入冷酒精后，用玻璃棒搅拌 会使DNA的提取量增加 C.本实验不能用鸡的红细胞替代洋葱为 实验材料 D.用二苯胺试剂鉴定DNA时，需沸水 浴加热冷却后再观察颜色变化 12.下列关于基因工程操作工具的说法，正 确的是（) A.质粒只分布于原核细胞中，限制酶也 都来自原核生物 B.可以用同种限制酶或者同尾酶处理目 的基因和质粒 C.T4DNA连接酶只能连接互补的双链 DNA黏性末端 D.细菌内含有的限制酶能对自身的DNA 进行剪切 二、非选择题 13.回答下列有关基因工程的问题： (1)目的基因主要是指 11 高中生物学选择性必修3（人教版） (2)获取目的基因时用不同类型的限制 酶切割DNA分子后，可能产生 末端，也可能产生 末 端。限制酶可作用于DNA分子的 键。 (3)在短时间内获取大量目的基因，常 用的技术是 。 目的基因获 取后，需要进行 ，此步骤 是基因工程的核心。 14.艾滋病病毒(HV)属于逆转录病毒， 是艾滋病的病原体。回答下列问题： (1)用基因工程方法制备HV的某蛋白 (目的蛋白)时，可先提取HV中 的 ，以其作为模板，在逆 转录酶的作用下合成 ，获 取该目的蛋白的基因，然后构建基 因表达载体，最后导入受体细胞。 (2)从受体细胞中分离纯化出目的蛋白， 该蛋白作为抗原注入机体后，刺激 机体产生的可与此蛋白结合的相应 分泌蛋白是 该分泌蛋白 可用于检测受试者血清中的HV, 检测的原理是 (3)HV营 生活，主要侵入并破 坏人体的 细胞，降低患者 免疫系统的防卫功能。 (4)目前常用逆转录酶抑制剂治疗艾滋 病，其治疗机理是 (12 15.乙肝病毒相关的实验室检测技术，对乙 肝病毒的诊断与防控尤为重要。乙肝病 毒的检测最常见的方法是荧光定量RT PCR(逆转录聚合酶链式反应)，RT- PCR的具体过程如图。回答下列问题： 5 mRNA 5 3 DNA 3 5:B 3 (1)过程I和Ⅱ都需要加入缓冲液、原 料、酶和引物等，其中过程I加入 的酶是 (2)RT-PCR过程通过对 的控 制影响酶的活性和DNA分子结构， 从而使得整个反应过程有序地进行。 (3)过程Ⅱ拟对单链cDNA进行n次循 环的扩增，理论上需要 个 引物B。 (4)乙肝病毒的检测方法还可采用病毒 抗原检测、病毒抗体检测，这些检 测方法的原理是 检测到乙肝病毒感染者抗体 滞后于病毒核酸和抗原的理由是 因此，病毒 抗体检测对传染性极高的乙肝病毒 疑似患者早期确诊意义不大。