章末检测卷(1) 发酵工程（Word练习）-【金榜题名】2025-2026学年高二生物选择性必修3 生物技术与工程同步学案（人教版）

章末检测卷(一) (时间：90分钟　满分：100分) 一、选择题(本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一个选项符合题目要求) 1．含有抗生素的牛奶不能发酵成酸奶，原因是(　　) A．抗生素能够杀死乳酸菌或抑制乳酸菌的生长 B．抗生素呈碱性，会与乳酸发生中和反应 C．抗生素能够抑制酵母菌的生长 D．抗生素在酸性环境中会被分解破坏 解析：选A　乳酸菌属于细菌，抗生素能杀死或抑制乳酸菌的生长。 2．下列关于评价果酒和果醋制作是否成功的方法中，不合理的一项是(　　) A．对于果醋可通过品尝的方法进行鉴定 B．通过向果酒发酵液样品中加入酸性重铬酸钾溶液进行鉴定 C．通过检测果醋发酵前后发酵液的pH变化进行鉴定 D．通过检测果酒发酵前后杂菌的数量变化进行鉴定 解析：选D　对于果醋可通过品尝的方法和检测果醋发酵前后发酵液的pH变化进行鉴定；对于果酒可通过向果酒发酵液样品中加入酸性重铬酸钾溶液进行鉴定；通过检测果酒发酵前后杂菌的数量变化不能鉴定果酒制作是否成功。 3．高酒精度啤酒(酒精浓度≥7.5%vol)由于其高酒精度、高发酵度、低残糖等特点，受到越来越多消费者的青睐，其酿造工艺如图所示。下列叙述错误的是(　　 ) A．生产啤酒用的发酵罐和大麦汁等原料都需要经过灭菌消毒 B．多次分批补加葡萄糖可以减少发酵初期的高渗透压对酵母细胞代谢的影响 C．主发酵过程中还原糖主要用于有氧呼吸，其产生的CO2会使pH下降 D．发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期可以延长排气时间间隔 解析：选C　生产啤酒用的发酵罐和大麦汁等原料都需要经过灭菌消毒，防止原料自带的杂菌污染发酵，A正确；多次分批补加葡萄糖可以减少发酵初期的高渗透压对酵母细胞代谢的影响，B正确；主发酵过程中还原糖主要用于无氧呼吸产酒精，同时无氧呼吸也会产生CO 2会使pH下降，C错误；发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期由于糖类物质不充足，产生的气体变少，可以延长排气时间间隔，D正确。 4．用平板划线法或稀释涂布平板法纯化大肠杆菌时(　　) ①可以用相同的培养基　②都需要使用接种针进行接种　③都需要在酒精灯火焰旁进行接种　④都可以用来计数活菌 A．①②　　　　　　　　 B．③④ C．①③ D．②④ 解析：选C　平板划线法或稀释涂布平板法都使用固体培养基；平板划线法采用接种针或接种环进行操作，而稀释涂布平板法采用涂布器进行操作；进行接种操作时，要进行无菌操作，需要在酒精灯火焰旁接种，避免空气中的微生物污染培养基；平板划线法一般用于分离菌体而不能计数活菌。 5．平板划线法和稀释涂布平板法是纯化微生物的两种常用方法，下列描述正确的是(　　) A．都要将菌液进行一系列的梯度稀释 B．平板划线法是将不同稀释度的菌液通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作 C．稀释涂布平板法是将不同稀释度的菌液倒入液体培养基进行培养 D．都可在培养基表面形成单个的菌落 解析：选D　平板划线法不需要进行梯度稀释，稀释涂布平板法需要将不同稀释度的菌液涂布到固体培养基的表面。平板划线法和稀释涂布平板法都可在培养基表面形成单菌落。 6．某研究小组从有机废水中分离微生物用于废水处理，下列叙述正确的是(　　) A．培养基分装到培养皿后进行灭菌 B．转换划线角度后需灼烧接种环再进行划线 C．接种后的培养皿须放在光照培养箱中培养 D．培养过程中每隔一周观察一次 解析：选B　在配制培养基的过程中要先灭菌后倒平板；转换划线角度后要对接种环进行灼烧灭菌，杀灭接种环上残留的菌种，再进行划线；接种后的培养皿应放置在恒温培养箱中培养；微生物生长、繁殖较快，在培养过程中一般要隔天观察一次。 7．培养基、培养皿、接种环、实验操作者的双手、空气、牛奶所采用的灭菌或消毒方法依次是(　　) ①化学消毒　②灼烧灭菌　③干热灭菌　④紫外线消毒　⑤高压蒸汽灭菌　⑥巴氏消毒 A．⑤③②①④⑥ B．①②③④⑤⑥ C．⑥②③④①⑤ D．③④②①⑥⑤ 解析：选A　培养基用高压蒸汽灭菌；培养皿耐高温，需用干热灭菌；接种环可用灼烧灭菌达到迅速彻底地灭菌的效果；实验操作者的双手可用化学药剂进行消毒，如用酒精擦拭双手；空气可用紫外线消毒；为不破坏牛奶中的营养成分，可采用巴氏消毒。 8．某科研人员利用豆瓣酱为材料筛选高产蛋白酶的霉菌，下列利用平板划线法筛选该菌株的做法正确的是(　　) A．在每次划线前后都灼烧接种环的目的是防止杂菌污染 B．接种霉菌后的培养基必须采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌 C．筛选用的固体选择培养基中必须加入一定量的蛋白质 D．对筛选的菌株计数时选择菌落数为30～300的平板进行计数 解析：选C　初次划线灼烧的目的是防止杂菌污染，其后划线后灼烧的目的是杀死上次划线结束后残留在接种环上的菌种，使下一个区域的菌种只来自上一个区域的末尾，最后一次灼烧的目的是防止菌体污染环境，A错误；接种霉菌之前，培养基需要用高压蒸汽灭菌法灭菌，B错误；高产蛋白酶的霉菌利用的底物是蛋白质，因此，培养基中需加入一定量的蛋白质，C正确；平板划线法不能对菌落进行计数，D错误。 9．将接种有醋酸菌的葡萄汁100 mL 4份和接种有酵母菌的葡萄汁100 mL 4份分别装入100 mL、200 mL、300 mL和400 mL的烧瓶中，将口密封，置于适宜温度条件下培养，24 h后产生的醋酸和酒精最多的分别是(　　) A．100 mL、100 mL B．400 mL、400 mL C．100 mL、400 mL D．400 mL、100 mL 解析：选D　根据题意分析，4个装置加入100 mL葡萄汁后，100 mL的烧瓶中没有氧气，400 mL的装置中氧气最多；醋酸菌是好氧菌，所以产醋酸最多的条件是装置中氧气越多越好，所以400 mL的烧瓶中醋酸最多；酵母菌通过无氧呼吸产生酒精，所以产酒精最多的装置的要求是氧气越少越好，所以100 mL的烧瓶中酒精最多，故选D。 10．如图所示装置可用于生物技术实践的相关实验，下列有关叙述不正确的是(　　) A．两种装置都可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作 B．利用装置甲制作果酒时，瓶中的果汁不能装满 C．用装置乙制作果酒时温度应控制在30 ℃左右，制作果醋时应适当降温 D．装置乙的排气口通过一个长而弯曲的胶管，可防止空气中微生物的污染 解析：选C　两种装置都可先用于果酒的制作，后用于果醋的制作，先密封后通入空气，所以A正确；利用装置甲制作果酒时，瓶中应留1/3的空间，B正确；用装置乙制作果酒时温度应控制在18～30 ℃，制作果醋时温度为30～35 ℃，故C错误；装置乙的排气口通过一个长而弯曲的胶管，排出果酒制备时产生的二氧化碳，而且能防止空气中微生物的污染，所以D正确。 11．下列各曲线图表示在果酒的制作过程中，各种因素对酵母菌产生酒精速率(v)的影响，其中正确的是(　　) 解析：选C　酵母菌属于兼性厌氧型生物，既可以进行有氧呼吸也可进行无氧呼吸。果酒制作时利用酵母菌无氧呼吸时产生酒精的原理。如果溶氧量大，酵母菌进行有氧呼吸，只产生CO2和H2O，不产生C2H5OH，A错误；由于pH可以影响酶活性，每种酶有一个最适PH，高于或低于该PH，酶活性下降，所以B中曲线应该先上升，再下降，B错误；在一定范围内，温度对酶活性有提高作用，超过最适温度，酶活性下降，C正确；酵母菌酿酒初期，进行有氧呼吸，繁殖后代，然后进行无氧呼吸，发酵后期由于产物积累，影响酒精发酵，所以曲线是先从0点开始上升，再下降，D错误。 12．将如图中果酒发酵装置改装后用于探究酵母菌呼吸方式的实验，下列相关操作错误的是(　　) A．探究有氧条件下酵母菌呼吸方式时打开阀a B．经管口3取样检测酒精和CO2的产生情况 C．实验开始前对改装后整个装置进行气密性检查 D．改装时将盛有澄清石灰水的试剂瓶与管口2连通 解析：选B　题图中管口1为进气口，管口2为排气口，管口3为出料口，可以检查液体中的成分。打开阀a可保证O2的供应；经管口3取样只能检测酒精的产生情况；实验开始前整个装置需进行气密性检查，确保有氧、无氧条件只是通过管口1控制的；管口2连通装有澄清石灰水的试剂瓶，通过观察澄清石灰水的混浊程度来检测CO2的产生情况。 13．下图表示果酒和果醋生产过程中的物质变化情况，有关叙述错误的是(　　) A．需要O2参与的是过程③④⑤ B．导致过程④⑤差异的原因是糖源是否充足 C．过程②④所需要的最适温度相同 D．过程①②在酵母菌细胞中的场所相同 解析：选C　过程①为细胞呼吸的第一阶段，发生在细胞质基质中，过程②为无氧呼吸的第二阶段，发生在细胞质基质中；过程③为有氧呼吸的第二、第三阶段，发生在线粒体中；过程②④所需要的最适温度不同；过程④是醋酸菌在缺少糖源时，将酒精变成乙醛，再将乙醛变成醋酸，过程⑤是醋酸菌在O2、糖源充足时，将葡萄糖转变成醋酸的过程。 14．下列关于微生物接种的描述，正确的是(　　) A．平板划线法只用于固体培养基的接种，而稀释涂布平板法只用于液体培养基的接种 B．平板划线法不能用于微生物的计数，而稀释涂布平板法可用于微生物的计数 C．利用平板划线法不能得到单菌落，而利用稀释涂布平板法能得到单菌落 D．平板划线法所用的接种工具不需要灭菌，而稀释涂布平板法所用的接种工具需要灭菌 解析：选B　这两种接种方法都可用于固体培养基的接种，都能用于形成单菌落，接种工具都要进行严格灭菌处理。 15．微生物发酵已经广泛应用于人类生活的各个领域。下列叙述错误的是(　　) A．根据发酵条件要求，微生物发酵过程分为有氧发酵和厌氧发酵 B．谷氨酸棒状杆菌是好氧细菌，可用于发酵生产谷氨酸制取味精 C．当缺少糖源和氧气时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸 D．乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸，可用于制作酸奶和泡菜 解析：选C　根据发酵条件要求，微生物发酵过程分为有氧发酵和厌氧发酵，A正确；谷氨酸棒状杆菌是好氧细菌，可用于微生物发酵工程生产谷氨酸来制取谷氨酸钠(味精)，B正确；醋酸菌是一种好氧菌，当氧气充足、缺少糖源时，醋酸菌先将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，C错误；制作酸奶和泡菜使用的菌种为乳酸菌，乳酸菌在无氧条件下将葡萄糖分解成乳酸，D正确。 二、不定项选择题(本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分) 16．在细菌的连续培养过程中，要以一定速度不断添加新的培养基，同时以同样速度放出老的培养基。下图表示培养基的稀释率(培养基的更新速率)与培养容器中营养物质浓度、细菌代时(细菌数目增加一倍所需的时间)、细菌密度的关系。下列相关叙述正确的是(　　) A．为持续高效地获得发酵产品，应将稀释率控制在b点附近 B．稀释率从a到b的变化过程中，细菌生长速率不断提高 C．稀释率超过b点后，对培养基的利用率逐渐升高 D．稀释率超过b点后，营养物质浓度过高导致细菌死亡率增大，细菌密度降低 解析：选AB　b是一个临界点，b点后，细菌的密度减小，代谢产物也会减少，要持续高效获得发酵产品，应将稀释率控制在b点附近，A正确；稀释率从a到b的变化过程中，细菌的代时越来越小，所以细菌生长速度不断提高，B正确；从图像上看，稀释率超过b点后，随稀释率的增加，营养物质的浓度提高，对培养基的利用率降低，C错误；从图像上看，随稀释率的增加，营养物质的浓度提高，细菌代时缩短，数目减少，这是由于培养基更替太快，带走了大量的细菌，这样，营养充足，细菌繁殖快，代时缩短，并不是死亡率增大所致，D错误。 17．如图表示培养和分离某种细菌的部分操作步骤，有关叙述错误的是(　　) A．步骤②接种环在火焰上灼烧后迅速蘸取菌液后划线 B．步骤④恒温培养箱培养后可用来对大肠杆菌进行计数 C．步骤①倒平板操作时，倒好后应立即将其倒过来放置 D．步骤③通过多区划线使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落 解析：选ABC　灼烧后的接种环需在火焰旁冷却后再蘸取菌液进行平板划线，A错误；平板划线法接种的培养基上，由于起始段菌体密集，所以无法对其计数，B错误；步骤①倒平板操作时，倒好后待培养基冷却，然后将其倒过来放置，C错误；步骤③应按一定的方向顺序划线，使接种物逐渐稀释，培养后出现单个菌落，D正确。 18．“纸片扩散法”测定病原菌对抗生素敏感性的实验是在某病原菌均匀分布的平板上，铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养。图示为某测定实验的结果，其中抑菌圈是在纸片周围出现的透明区域。下列叙述正确的是(　　) A．在图示固体培养基上可用稀释涂布平板法接种病原菌 B．形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物较敏感 C．未出现抑菌圈可能是病原菌与抗生素接触后发生抗性变异 D．“纸片扩散法”实验中的自变量是不同种的抗生素 解析：选AD　根据题干“某病原菌均匀分布的平板上”可知，图示固体培养基上采用的接种方法是稀释涂布平板法，A正确；形成的抑菌圈较小的原因可能是微生物对药物敏感程度较低，B错误；未出现抑菌圈可能是病原菌对该抗生素不敏感，C错误；根据题干“铺设含有不同种抗生素的纸片后进行培养”判断，“纸片扩散法”实验中的自变量是不同种的抗生素，D正确。 19．桑葚果富含各种营养物质和药用活性物质。以桑葚为原料酿酒缓解了桑葚易腐烂、不耐贮存的问题。酿酒酵母不能以赖氨酸作为氮源，据此，科研人员从桑葚生存环境中分离得到一株发酵性能优良的桑葚酒专用酵母菌E44，对其性能进行相关测定，并和常用的葡萄酒酵母菌进行了对比，结果如图所示(CK为对照)。下列叙述正确的是(　　) A．配制的培养基灭菌前需要调节pH B．可以从以赖氨酸为唯一氮源的培养基中分离出酿酒酵母 C．第1天酒精度增长慢的原因可能是酵母菌正处于增殖阶段，以有氧呼吸为主 D．第2天开始糖度迅速下降，酒精度较快增长，此时酵母菌主要进行无氧呼吸 解析：选ACD　配制的培养基灭菌前需要调节pH，A正确；酿酒酵母不能以赖氨酸作为氮源，因此不能从以赖氨酸为唯一氮源的培养基中分离出酿酒酵母，B错误；第1天酒精度增长慢的原因可能是酵母正处于增殖阶段，以有氧呼吸为主，C正确；第2天开始糖度迅速下降，酒精度较快增长，此时酵母菌主要进行无氧呼吸产生酒精，D正确。 20．发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的配制、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。下列关于发酵工程的认识不科学的是(　　) A．发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点 B．发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身 C．通常所指的发酵条件包括温度、溶氧、pH和酶的控制 D．发酵工程与传统发酵技术最大的区别是前者可以用微生物进行发酵 解析：选CD　发酵工程具有条件温和、产物单一、污染小的特点，A正确；发酵工程的产品包括微生物的代谢产物、酶和菌体本身，B正确；通常所指的发酵条件包括温度控制、溶氧控制、pH控制，C错误；传统发酵技术和现代发酵工程最大的相同之处是利用各种微生物的代谢来实现相关产品的生产，D错误。 三、非选择题(本题共5小题，共55分) 21．(9分)回答下列问题： 某同学在通过发酵制作果酒时，发现在制作原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度，原因是____________________。在家庭以葡萄为原料制作葡萄酒时，可以不添加酵母菌，原因是____________________；在制作葡萄酒的过程中，如果密封不严混入空气，发酵液会变酸，可能的原因是____________________。 解析：糖类是主要的能源物质，可以为酵母菌的生长、繁殖提供能源物质，还可以作为酒精发酵的原料。故在通过发酵制作果酒时，在制作原料中添加一定量的糖，可以提高酒精度。在家庭以葡萄为原料制作葡萄酒时，由于葡萄皮上附着有野生的酵母菌，故可以不添加酵母菌菌种；在制作葡萄酒的过程中，如果密封不严混入空气，会造成醋酸菌大量增殖，进行醋酸发酵，发酵液会变酸。 答案：(9分，每空3分)糖类是主要的能源物质，可以为酵母菌的生长、繁殖提供能源物质，还可以作为酒精发酵的原料　葡萄皮上附着有野生的酵母菌　醋酸菌大量增殖，进行醋酸发酵 22．(12分)研究人员以猕猴桃鲜果为原料，在酒精发酵阶段通过带皮和去皮两种方法酿制果醋，并对其品质进行分析对比，以探究果醋酿造的新思路，实验流程如图所示： (1)果醋酿制一般是在酒精发酵的基础上再进行醋酸发酵，其中的原理是_______________________________________。 (2)进行酒精发酵的微生物主要是____________，代谢类型为________。发酵罐液面平静无气泡产生时，酒精发酵停止。再向发酵液中接种醋酸菌并在________条件下继续发酵，此阶段发酵液pH的变化趋势为____________。 (3)猕猴桃含有的多酚、黄酮具有减肥降脂、降血糖的功效，发酵后其含量直接关系果醋的品质。研究人员测定了带皮发酵和去皮发酵前后总酚和总黄酮的含量，结果如图所示： 上述实验结果说明________(填“带皮”或“去皮”)发酵可作为果醋发酵的新思路。请综合上述实验结果及你对发酵成本的考虑阐述理由_______________________。(至少写出两点) 解析：(1)酿醋用的醋酸菌可以将乙醇变为乙醛，再由乙醛变为乙酸，酒精发酵是利用酵母菌将葡萄糖转化为乙醇，故果醋酿制一般是在酒精发酵的基础上再进行醋酸发酵。(2)酒精发酵的微生物是酵母菌，酵母菌属于兼性厌氧型微生物，既可以进行有氧呼吸也可以进行无氧呼吸，醋酸菌是好氧细菌，只有当氧气充足时，才能进行旺盛的生理活动，因此接种醋酸菌时需要在有氧条件下进行，在酒精发酵液中接种醋酸菌继续发酵，产生醋酸使发酵液的pH持续下降。(3)由图可知：果醋中的多酚和黄酮含量均比鲜果多，且带皮果醋中的多酚和黄酮含量均比去皮果醋多，说明带皮发酵可作为果醋发酵的新思路，从发酵成本来看，猕猴桃成本较高，若去皮发酵，得到相同产量的果醋需要购买更多的猕猴桃；猕猴桃在发酵之前，若去皮发酵，还会使用人力或物力对猕猴桃进行去皮处理，多一笔费用。因此，选择带皮发酵不仅品质高，成本还低。 答案：(12分，除注明外每空1分)(1)酿醋用的醋酸菌可以将乙醇变为乙醛，再由乙醛变为乙酸，酒精发酵是用酵母菌将葡萄糖转化为乙醇(3分)　(2)酵母菌　兼性厌氧型　有氧　持续下降　(3)带皮　①猕猴桃成本较高，若去皮发酵，得到相同产量的果醋需要购买更多的猕猴桃；②猕猴桃在发酵之前，若去皮发酵，还会使用人力或物力对猕猴桃进行去皮处理，多一笔费用(4分) 23．(11分)有人认为，鲜榨果汁比盒装或瓶装的果汁更新鲜健康。食品监督人员发现鲜榨果汁若不能做到无菌生产，更容易滋生细菌。研究过程如下，请分析并回答下列问题： (1)纯化培养细菌的方法：平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离，但不能________；使用稀释涂布平板法，在稀释度足够高时，一个菌落代表________。 (2)对细菌计数时往往会产生实验误差，稀释涂布平板法计数的值比实际值______，原因是____________________；显微计数法计数的结果比实际值________，原因是_____________________________________________________________。 (3)接种结束后，将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养的目的是__________________，未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，说明___________________________________________________。 解析：(1)平板划线法可以观察菌落特征，对混合菌进行分离，但不能计数；使用稀释涂布平板法，在稀释度足够高时，聚集在一起的微生物将分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落，即一个菌落代表单个细胞。(2)用稀释涂布平板法对细菌进行计数时，当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，所以统计的菌落往往比活菌的实际数目偏小；用显微计数法计数时，由于显微镜下无法区分细胞的死活，计数结果包含死细胞，所以计数的结果会比实际值偏大。(3)接种结束后，将一个未接种的培养基和一个接种的培养基放在一起培养的目的是作对照，未接种的培养基表面是否有菌落生长很关键。如果有菌落生长，则说明培养基灭菌不彻底(或培养基被污染了或需要重新制备)。 答案：(11分，除注明外每空1分)(1)计数　单个细胞　(2)偏小　当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落(2分)　偏大　显微镜下无法区分细胞的死活，计数结果包含死细胞(2分)　(3)作对照　培养基灭菌不彻底(或培养基被污染了或需要重新制备)(2分) 24．(8分)酸奶是以牛奶为主要原料，经乳酸菌发酵制成的一种营养丰富的保健饮品，现对酸奶中的乳酸菌进行筛选、分离，步骤如下： 牛奶→酸奶→稀释10倍→涂布MRS琼脂培养基→36±1℃、厌氧条件下培养→挑取单个菌落→接种于MRS琼脂平板→菌种鉴定→接种于MRS液体培养基→菌种保藏。 请回答下列相关问题： (1)制作酸奶时一般要在牛奶中添加少量的蔗糖，除了可以调味外，还可以成为乳酸菌利用的____________________之一，搅匀后要对原料进行消毒，消毒方法宜选用________法。 (2)刚消毒完的牛奶必须冷却，然后按一定比例将市售优质酸奶加入并搅匀，根据乳酸菌的代谢特点，容器必须________，然后发酵。 (3)制备稀释液时，先将酸奶样品充分摇匀，以无菌吸管吸取样品________mL放入装有270 mL无菌水的锥形瓶中，充分振荡，制成1∶10的样品液。 (4)为了便于统计样品中活菌数目，应使用__________法将菌种接种于MRS琼脂平板，36±1℃、厌氧条件下倒置培养48h后，再挑取单个菌落，根据菌落的形状和____________________(请写出两点)等特征进行菌种鉴定。 (5)菌种鉴定后将其接种至MRS液体培养基的目的是__________________。将得到的纯种菌株进行长期保藏时，可采用________的方法。 解析：(1)蔗糖可以为微生物的培养提供碳源和能源，为了保证牛奶的有效成分不被高温分解，所以消毒方法是巴氏消毒法。(2)乳酸菌是厌氧型微生物，所以容器必须密封，保证无氧环境。(3)要制成1∶10的样品液，需要取30 mL酸奶样品装入270 mL无菌水的锥形瓶中。(4)统计活菌数目常用稀释涂布平板法；根据菌落的形状和大小、隆起程度、颜色进行菌种鉴定。 (5)将菌种接种在液体培养基的目的是扩大培养，增加菌种数目；菌种长期保藏的方法是甘油管藏法。 答案：(8分，每空1分)(1)碳源(碳源和能源物质)　巴氏消毒　(2)密封　(3)30　(4)稀释涂布平板　大小、隆起程度、颜色 (5)扩大培养，增加菌种数目　甘油管藏 25．(15分)为了培育高效利用木糖发酵产乳酸的菌株，科研人员将能利用木糖产乳酸的菌种搭载于中国“实践八号”育种卫星，卫星返回后进行筛选，其主要流程如图，其中乳酸能溶解培养基中的碳酸钙形成透明圈。请回答： (1)与步骤 ②相比，步骤③的培养基成分还含有__________、________。两培养基均以木糖作为唯一碳源的目的是_____________________________________________。 (2)步骤③中，应在____________附近倒平板，不采用涂布平板接种的原因是____________________________________。平板在适宜条件下培养一段时间后，筛选有透明圈的菌落作为候选菌，这里的准确筛选的主要依据是________________________。 (3)按功能分，步骤③中培养基属于________________培养基。 (4)科研人员从候选菌中初步筛选出产乳酸能力较强的四种菌株，再通过连续转接和液体发酵进行遗传稳定性检测，得到如表所示结果(单位：g/L)，最终确定卫10为最优菌株，依据是______________________________________________。 传代次数 菌　株 卫10 卫32 卫56 卫69 2 70.78 71.23 70.52 69.24 5 70.23 69.52 67.46 65.56 8 69.58 62.16 60.52 61.53 11 70.75 55.69 52.42 55.72 14 69.42 42.28 40.22 44.38 (5)若要进一步探究卫10发酵的最适木糖浓度，试写出实验思路_______________________________________________________________________________。 解析：(1)步骤②是在液体培养基中扩大培养，步骤③是在平板培养基中分离培养，故其培养基成分还需加琼脂和碳酸钙。两培养基均以木糖作为唯一碳源是为了筛选出高效利用木糖产乳酸的菌株。(2)为了防止杂菌污染，应在火焰附近倒平板。由于乳酸菌是厌氧微生物，不能在培养基表面生长繁殖，故不采用涂布接种，平板在适宜条件下培养一段时间后，由于透明圈直径与菌落直径的比值反应单个微生物降解木糖的能力，故筛选有透明圈的菌落作为候选菌。(3)步骤③是在平板培养基中分离培养，按功能分，步骤③中培养基属于选择培养基、鉴别培养基。 (4)根据实验结果可知，随传代次数的增加，卫10产生乳酸的量能保持稳定，最终确定卫10为最优菌株。(5)若要进一步探究卫10发酵的最适木糖浓度，可以配制不同木糖浓度的培养基进行发酵，测定，比较不同木糖浓度下的产乳酸能力，产乳酸能力最强的木糖浓度就是菌体发酵产乳酸的最佳木糖浓度。 答案：(15分，除注明外每空2分)(1)琼脂(1分)　碳酸钙(1分)　筛选出高效利用木糖产乳酸的菌株　(2)(酒精灯)火焰(1分)　乳酸菌是厌氧微生物，不能在培养基表面生长繁殖　透明圈直径与菌落直径的比值(反应单个微生物降解木糖的能力) (3)选择培养基、鉴别(1分)　(4)随传代次数的增加，产生乳酸的量能保持稳定　(5)配制不同木糖浓度的培养基进行发酵，其他相同且适宜，测定比较不同木糖浓度下的产乳酸能力，产乳酸能力最强的木糖浓度就是菌体发酵产乳酸的最佳木糖浓度(3分) 学科网（北京）股份有限公司 $