内容正文:
真题大数据
考点 核心知识 考频 年份与卷别
微生物的培养与应用 培养基的成分与类型 18次 2025:山东卷、湖南卷、河北卷、黑吉辽蒙卷、安徽卷、北京卷、河南卷
2024:广东卷、江西卷、安徽卷、浙江第一次卷
2023:全国乙卷、山东卷、湖南卷、江苏卷、浙江第一次卷、浙江第二次卷、北京卷
无菌技术与接种方法 25次 2025:山东卷、湖南卷、河北卷、黑吉辽蒙卷、江苏卷、河南卷
2024:全国甲卷(2)、湖南卷、黑吉辽卷、重庆卷、江苏卷(4)、江西卷、贵州卷、浙江第一次卷、海南卷
2023:全国乙卷、山东卷、辽宁卷、重庆卷、江苏卷、浙江第一次卷
微生物的培养 21次 2025:山东卷、湖南卷、广东卷、河北卷、北京卷
2024:全国甲卷、山东卷、湖南卷(2)、河北卷、黑吉辽卷、重庆卷、江苏卷、江西卷、甘肃卷、浙江第二次卷、海南卷、北京卷、天津卷
2023:新课标卷、全国乙卷、山东卷、湖南卷、广东卷、河北卷
考点2 微生物的培养与应用
1.培养基的配制
划分标准 培养基种类 特点 用途
物理性质
不加凝固剂
加凝固剂,如琼脂
工业生产
观察微生物的运动、分类鉴定
微生物分离、鉴定、活菌计数、保藏菌种
液体培养基
半固体培养基
固体培养基
培养基的种类
培养基的营养构成
一般都含有水、碳源、氮源和无机盐等营养物质。此外还要满足微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求
培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素
培养霉菌时,需要将培养基调至酸性
培养细菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性
培养厌氧微生物时,需要提供无氧的条件
考点2 微生物的培养与应用
2.无菌技术
消毒
使用较为温和的化学或物理方法,杀死物体表面或内部一部分微生物的过程
煮沸消毒法:100 ℃煮沸5~6 min
巴氏消毒法:70~75 ℃下煮30 min或 80 ℃ 下煮15 min(不耐高温的液体)
化学药剂消毒法:用75%酒精皮肤消毒; 氯气消毒水源、消毒水
灭菌
使用强烈的理化因素杀死物体内外所有的微生物(包括芽孢和孢子),而达到完全无菌的过程
灼烧灭菌:接种环、接种针、试管口
干热灭菌:金属工具、玻璃器皿等160~170 ℃下加热1~2 h
高压蒸气灭菌:(培养基常用灭菌方法)100 kPa、121 ℃下维持15~30 min
考点2 微生物的培养与应用
3.微生物的纯培养
微生物
微生物
原核类
真核类
非细胞类
细菌、支原体、放线菌、蓝细菌
酵母菌、霉菌、食用菌
真 菌
原生生物
显微藻类、原生生物
病毒、类病毒、朊病毒
◆微生物的共同特点:个体微小、结构简单
考点2 微生物的培养与应用
菌落
单个或少数细菌在固体培养基上大量繁殖时,形成的一个肉眼可见的、具有一定形态结构的子细胞群体,叫作菌落
特征:大小、形状、光泽度、颜色、硬度、透明度等
功能:每种细菌在一定条件下所形成的菌落,可以作为菌种鉴定的重要依据
考点2 微生物的培养与应用
概念
培养物:在微生物学中,将接种于培养基内,在合适条件下形成的含特定种类微生物的群体称为培养物
纯培养:由单一个体繁殖所获得的微生物群体称为纯培养物,获得纯培养物的过程就是纯培养
酵母菌纯培养的操作步骤
制备培养基:配制培养基要目的明确、营养全面、pH适宜;培养基采用高压蒸汽灭菌法;倒平板需要待培养液冷却至50 ℃左右
接种和分离:采用平板划线法操作纯化、分离微生物
培养:将接种后的平板和一个未接种的平板倒置,放入28 ℃左右的恒温培养箱中培养24~48 h
考点2 微生物的培养与应用
4.微生物的选择培养
选择培养基
在微生物学中,将允许特定种类的微生物生长,同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基,称为选择培养基
人为提供有利于目的菌生长的条件(营养、温度和pH等),同时抑制或阻止其他微生物的生长
土壤微生物的选择培养过程
铲取土样→梯度稀释→涂布接种→选择培养
考点2 微生物的培养与应用
5.平板划线法和涂布平板法
平板划线法
通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面
操作的第一步及每次划线前、划线结束时都要灼烧接种环、冷却
在琼脂固体培养基表面连续划线,每次划线都从上一次划线的末端开始,最后区域的划线不要与第一区域相连
不能用于计数,平板划线法难以根据稀释体积计算每克样品中的细菌数
稀释涂布平板法
能培养成单个菌落
常用于计数,选择菌落数在30~300的平板进行计数
统计的菌落数往往比活菌数低,因为当两个或多个菌连在一起时,观察到的是一个菌落
考点2 微生物的培养与应用
考点2 微生物的培养与应用
6.微生物的数量测定
直接计数法
最常用显微镜直接计数法
先将待测样品制成悬液,然后取一定量的悬液放在显微镜下进行计数。根据在显微镜下观察到的微生物数目来计算出单位体积内的微生物总数
优点:设备简单、能观察微生物的形态特征。
缺点:一般用于纯培养悬浮液中各种单细胞菌体的计数;不能区分死菌和活菌;难以计数微小的细菌
间接计数法
最常用稀释平板计数法
原理:1个活菌→1个菌落;每克样品中的菌株数=(C÷V)×M
统计原则:①选30~300个菌落的平板统计;②每个稀释度取3个平板取其平均;统计结果一般用菌落数而不是活菌数来表示
C:某一稀释度下平板上生长的平均菌落数
V:涂布平板时所用的稀释液的体积(ml)
M:稀释倍数
考点2 微生物的培养与应用
7.发酵工程及其应用
概念
利用微生物的特定功能,通过现代工程技术,规模化生产对人类有用的产品
过程
应用
啤酒
青霉素
酱油
……
考点2 微生物的培养与应用
应考基础训练
1.下列关于微生物培养过程的说法正确的是( )
A.配制培养基时应先灭菌再调pH
B.在培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加维生素
C.在培养霉菌时,需要将培养基调至中性或弱碱性
D.倒平板时,应将打开的皿盖放在一边,以免培养基溅到皿盖上
2.微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒,以下理解不正确的是( )
A.灭菌是指杀灭物体内外所有的微生物,包括芽孢和孢子
B.常用灭菌方法有灼烧灭菌法、高压蒸汽灭菌法和酒精灭菌法
C.灼烧法灭菌主要对象是金属器具和玻璃器具
D.消毒一般不能彻底消灭微生物的孢子和芽孢
B
B
3.下列有关用平板划线法纯化微生物的叙述,正确的是( )
A.平板划线法可用于微生物的分离、 纯化和计数
B.划线过程可将接种针插入培养基内部进行连续划线
C.接种微生物前要对接种环灭菌, 划线过程中无须再灭菌
D.划线过程中不能将最后一区的划线和第一区的相连
D
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