周测评(三十)综合测试卷二-【衡水真题密卷】2026年高三生物学科素养周测评（鄂皖黔甘渝云晋豫陕川青宁新藏粤桂闽B版）

青春逐梦，物帆起航，勇往直前 2025一2026学年度学科素养周测评（三十） 4.水稻易被某种真菌感染导致生长不良，有研究发现花生铜胞的S基因在抗真落类病害中发挥着重要 班级 作用，这为水稻的改良提供了新的思路。以下叙述正确的是 卺题 生物学·综合测试卷二 A该种真菌只能发生基因突变和基因重组两种变异 姓名 本试卷总分100分，考试时间40分钟。 B.利用基因工程改良水稻可产生抗真菌的水稻新物种 C,该种真菌对花生的持续感染导致其产生了S基因 得分 一、选择题：本题共10小题，每小题6分，共60分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目 D.将S基因导入水稻使其获得抗病能力属于基因重组 要求的。 5.依托咪酯是一种快速催眠性静脉全身麻醉药，对中枢神经有较强排制作用。为研究其作用机理，科研 题号12345678910 人员以大息的离体神经组织为材料，检测依托咪酯对谷氨酸（兴奋性神经递质）和Y氨基丁酸（抑制性 答案 神经递质)释放速率的影响，结果如表。.其中甲组仅进行非钙依赖型神经递质释放，乙组同时进行钙 L.大肠杆菌和枯草芽孢杆菌中的复合体A均由RNA和蛋白质组成，具有催化活性。下列实验组合中， 依赖型和非钙依赖型神经递质释放（谷氨酸和Y氨基丁酸均存在钙依赖型和非钙依赖型两种释放途 能推出“大肠杆菌复合体A中的单独RNA组分有催化活性，但单独蛋白质组分无催化活性”这一结 径)。下列叙述正确的是 () 论的是 () 甲组 乙组 ①大肠杆菌复合体A经核糖核酸酶处理后，丧失催化活性②大肠杆菌复合体A经蛋白水解酶处理 组判 AI A2 A3 BI B2 B3 后，仍有催化活性③从大肠杆菌复合体A中分离的蛋白质组分，没有催化活性④通过体外转录 依托球靡浓度(mol/L) 00.4 4 0. 0.44 得到大肠杆菌复合体A中的RNA,其有催化活性⑤大肠杆黄复合体A的RNA与枯草芽孢杆菌复 神经遍质释故速率 谷氨酸0.260.280,291.311,221,12 合体A的蛋白质组装成的复合体，具有催化活性 (nmol/mg·min) Y氢张丁酸0.230.240.240.630.630.6 A①③ B.①⑤ C.②③ D.②④ AY氨基丁酸与突触后膜上受体结合后引起Na内流，并将化学信号转化为电信号 2.研究发现癌细胞即使在有氧条件下也以无氧呼吸为主，该现象称为“瓦氏效应”。下列关于癌细胞呼 B.依托咪酯能抑制非钙依赖型神经递质释放，对钙依赖型神经递质释放几乎无影响 吸作用的叙述，正确的是 () C.在钙依赖型的递质释放途径中，依托咪酯对谷氨酸释放的抑制强于对Y氨基丁酸 A,癌细胞产生CO:的场所在细胞质基质 B.“瓦氏效应”导致癌细胞需要利用大量葡萄糖 D.注射依托味酯起效后副交感神经的活动占优势，此时肠胃蠕动加快，支气管舒张 C无氧呼吸产生大量能量，因此癌细胞易转移扩散 6,人体受到病原体感染时，可能引起体液中多种细胞因子迅速增多，导致免疫系统过度激活，攻击宿主 D,呼吸底物中的能量大部分以热能形式散失 自身组织和器宜，使机体发生多器官衰竭基至死亡，此现象称为细胞因子风暴。下列叙述正确的是 3.或数分裂是一个复杂的过程，染色体端粒（富含碱基G的DNA一蛋白质复合体）在核膜上的准确错 () 定，并沿着内核膜进行移动是诚数分裂能正确进行的前提。在此过程中，DNA会被多种酶剪切为局 A.细胞免疫过程中细胞因子能促进B细胞增殖分化为浆细胞 部单链，并完成同源染色体的配对联会和同源重组（过程如图所示，其中a、b各表示一个DNA分 B.细胞因子风暴对机体的正常组织和器官造成损伤与过坡反应机理相似 子)，下列叙述错误的是 () C.细胞因子是由淋巴细胞产生的免疫活性物质，包括干扰素和溶菌酶等 ,酶切形成 0 D,临床上采用注射皮质辞抑制细胞因子风暴，皮质醇属于免疫抑制剂 局部单链 b ?,我国的二级保护动物红腹角雄主要以植物的嫩叶，果实以及昆虫为食。研究人员通过探究不同季节 的环境因素变化对红腹角雄在不同区城的占城率（目标物种占据或利用的湖查区域的比例）的影响， 接口位置进行陷机剪切连接.以 0 单链以指 味方式 及错配修复等后完成重组过程 b 生接 为自然保护区的管理提供理论依据。下列叙述正确的是 () Aa,b两个DNA分子上的基因相同或互为等位基因 A.红腹角雄在某区域的占域率增高有利于其种群繁衍 B.端粒DNA序列富含碱基G的特点，有利于维持端粒结构的稳定 B.调查红腹角雄的种群密度及占域率的最适方法是标记重糖法 C.减数分裂中同源染色体的片段互换需要DNA连接衡的参与 C.环境因素使群落在不同季节物种组成发生的变化属于次生演替 D.端粒准确错定在内核膜上发挥作用，发生于减数分裂Ⅱ的前期 D.植物的嫩叶，果实以及昆虫的数量属于红腹角雉种群的非密度制约因素 学科素养周测课（三十）生物学第1页（共4页） 真题密卷 学科素养周测评（三十）生物学第2页（共4页） 8.氟氯氰菊酯(CH1 CLFNO,)是应用广泛的菊酯类杀虫剂，科研人员筛选获取了能降解氟氯氰菊酯 组合一：红跟卷翅X白眼直团d组合二：白眼直摇×红限卷摇d 的降解菌，过程如图。下列叙述错误的是 () 杂交组合子代表现型 雌性 维性 雕性 推性 红眼卷翅 296 290 301 0 红眼直翅 0 0 0 298 含萨母膏的 选择 分离鉴定 (1)这两对性状中显性性状分别是 ·控制翅形的基因位于 (填“常”或“X")染 富集培养基 培养基 色体上，判断的依据是 A.富集培养基中的酵母膏可以为降解生长提供丰富的有机物 B.选择培养基应以氟氯氰菊酯为雌一碳源 (2)若这两对性状分别由两对等位基因A,和B.b控制，则杂交组合一F:中雌性红眼卷翅的基因 C,③所采用的接种方法只能用于分离微生物面不能用于菌落计数 型是 ,让杂交组合二F,雕、雄自由交配，在F,雄昆虫中白眼卷翅的比例为 D,获得的降解菌多次传代后其降解功能可能下降 (3)研究人员从野生型（灰体红眼）中诱变获得隐性纯合的黑体突变体，已知灰体对黑体为完全显性， 9,种间体细胞核移植(SCNT)为体细胞核移植中极具潜力的研究方向之一，该技术可实现死亡个体的 灰体（黑体）和红眼（白眼）分别由常染色体的一对等位基因控制。请从黑体突变体（黑体红眼）、白眼 突变体（灰体白眼）和野生型3种纯合品系昆虫中选择实验材料，设计杂交实验探究灰体（黑体）基因 “再生”。灰狼是一种犬科野生动物，研究人员采用SCNT技术培养克隆灰狼的基本流程如图所示， 和红眼（白眼）基因的遗传是否遵循自由组合定律，请完善实验设计 据图分析，下列叙述错误的是 () ①实验思路： 刚死亡灰狼的度部取 皮肤组凯进行培养 代 ②顶期结果和结论：若 ,则两对基因的遗传遵循 ②重，明鱼，孕产下3只峰性 克隆灰 自由组合定律：若 ,则两对基因的遗传不遵循自由组合定律 器的卫款棉超 胚 12,(20分)CRISPR/Cas9基因编辑技术可以改变目的基因序列。使用该技术，需要向细胞加入两种组 卵母细粗 分：向导RNA(用于和目的基因中待编辑的序列相结合)，核酸酶Cas9(用于识别并切割待编辑的序 A.过程①需将家犬的卵母细胞培养到MⅡ期，再通过显微操作去核 列，造成DNA双链断裂)。断裂后的DNA在细胞中发生修复，这就很容易造成目的基因序列发生 B.过程②需用C+载体诱导细胞融合，过程③需用电刺藏激活重构胚 改变，实现基因编辑，大薯D蛋白是大薯体内重要的贮鬟蛋白，在人体内表现出抗氧化、抗炎等生 C,过程④①实现了早期胚胎在相同生理环境条件下空间位置的转移 物活性。我国科研工作者设计并构建了基因编辑载体（载体关键组分如图所示），并利用此载体编辑 D.iSCNT对灭绝物种的“再生”和生物多样性的保护具有重要意义 大薯D蛋白基因以开展后续研究。回答下列问题： 10.尿黑酸尿症(AKU)是一种罕见的酪氨酸代谢障碍性疾病，是由HGD基因突变所致。研究人员调 引物D引物2 查了某AKU患者的家系患病情况，绘制的遗传系谱图如图1所示，然后对该家系中部分成员的相 U哈动于习向导RNA学列口 T启动子】Cas基因 关基因进行电泳，结果如图2所示。不考虑X,Y染色体同源区段，下列分析正确的是() 9 注“→”表示该引物5→3”的方向。 引物 引物④ 口正常男性 (1)构建基因编辑载体，需要将U启动子、向导RNA序列、T启动子，Cas9基因分别连接农杆菌的 ■H ○正常女性 个体编号124578 ,形成重组DNA分子。上述载体的设计，一定需要利用D蛋白基因序列信息的是 4 5 口非病男性 条带1 ☐○患病女性 =■■■ 条带2 (2)T启动子选用限制酶BlI切割、载体选用限制南BglⅡ切期以后，两者能顺利连接，原因最可 图1 图2 能是 A.HGD基因可能是位于常染色体或X染色体上的显性基因 (3)采用单酶切后进行连接反应，T启动子容易出现正向连接（图中箭头向右，目的基因正常转录）和 B.条带1为HGD突变基因，条带2为HGD基因 反向连接（图中箭头向左，目的基因无法转录）两种情况。选用引物（填序号）进行扩增可以 C,4号同时含有HGD基因和HGD突变基因的概率为2/3 鉴定出正向连接的情况，原因是 D.6号患病的原因可能是5号产生卵细胞时发生了基因突变 二、非选择题：本题共2小题，共40分。 (4)基因编辑载体成功构建并导人大薯细胞后，在分子水平如何检测D蛋白基因的编辑是否发生？ 试简要说出检测思路 11.(20分)某昆虫的性别决定方式为XY型，野生型个体的眼色和翅形分别为红眼和直翅。研究人员 通过诱变获得了白眼突变体和卷翅突变体昆虫。为研究该昆虫眼色和翅形的遗传方式，研究人员利 用纯种白眼突变体（白眼直翅）、纯种卷翅突变体（红眼卷翅）昆虫进行了杂交实验，结果如表所示 (注：基因所在位置不考虑X,Y染色体的同源区段，)： 学科素养周测课（三十）生物学第3页（共4页） 真题密卷 学科素养周测评（三十）生物学第4页（共4页）·生物学· 参考答案及解析 白色花植株的基因型为_--d,开蓝色花植株 独立遗传或连锁的情况下，组合一F,产生的配子基 的基因型为aabbD_。结合图1可知，杂交组合一 因型及比例均为ABD:ABd:AbD:Abd=1:1: 和杂交组合二F2的性状分离比均为9：3：4，是 1:1;组合二F1产生的配子基因型及比例均为 9:3:3:1的变式，则两个杂交组合对应的F1均为 ABD:ABd:aBD:aBd=1:1:1:1,则两者杂交 双杂合子，杂交组合一F2中紫红色花(ABD):靛 后代中白花(--_dd)占比为1/2×1/2=1/4。 蓝色花(AbbD):白色花(_--dd)=9:3：4, (4)图2中亲代植株为杂交组合二F2中一株红 基因B/b和D/d发生了分离和自由组合，可推 色花长粒形植株，结合题千信息可推知，这株红 测其F1的基因型为AABbDd;杂交组合二F2中 色花长粒形植株的基因型为aaBBD_Ee,其自交 紫红色花(ABD):红色花(aaBD_):白色花 产生的后代均含有a和B基因，结合图2可知， (--dd)=9:3:4,基因A/a和D/d发生了 所有子一代均含有①②基因片段，可知条带①为 分离和自由组合，可推测其F1的基因型为 基因a,条带③和④为基因D和d。由上述分析 AaBBDd,综上分析可知：甲的基因型为 可知，针对基因A/a和B/b,子一代的基因型均 AAbbDD、乙的基因型为AABBdd、丙的基因型 为aaBB,针对基因E/e与D/d,假设这两对基因 为aaBBDD。 不连锁，其遗传符合自由组合定律，则子一代会 (2)当植株是白花时候，其基因型为_--_dd,与 出现DE、ddE、Dee、ddee共9种基因型，因 只含隐性基因的植株与F2测交仍然是白花，无 此会出现9组不同的电泳条带，结合图2可知， 法鉴别它的具体的基因型，可见让只含隐性基因 子一代中只出现了3组不同的电泳条带，即只存 的植株与F,测交，不能确定F2中各植株控制花 在3种不同基因型的个体，故推测基因E/与基 色性状的基因型。甲X乙杂交组合中F2的紫红 因D/d连锁遗传，位于一对同源染色体上。 色植株基因型为AABbDd：AABBDd: (5)由杂交组合一（甲×乙），杂交组合二（乙× AABbDD:AABBDD=4:2:2:1。乙X丙杂 丙)的杂交结果都不能判断A/a,B/b两对基因 交组合中F2的紫红色植株基因型为AaBBDd: 的位置，故可让植株甲、丙杂交。应取植株甲与 AABBDd:AaBBDD:AABBDD=4:2:2:1 丙杂交所得的F1自交，统计F2的表型及比例。 其中DD:Dd=1:2所以白花植株在全体子代 若F2的表型及比例为紫红色：靛蓝色：红色： 中的比例为2/3×1/4=1/6。 蓝色=9：3：3：1，则基因A/a、B/b的遗传遵 (3)若某植株自交子代中白花植株占比为1/4，则该 循自由组合定律，位于两对同源染色体上；若F2 植株基因型为__一D,基因型最多有3X3=9种。 表型及比例为靛蓝色：紫红色：红色=1：2：1， 由(I)可知，杂交组合一F1的基因型为AABbDd、杂 则基因A/a、B/b连锁，位于同一对同源染色体上。 交组合二F1的基因型为AaBBDd,在基因A/a、B/b 2025一2026学年度学科素养周测评（三十） 生物学·综合测试卷二 一、选择题 明单独的蛋白质组分没有催化活性。④通过体外 1.C【解析】①大肠杆菌复合体A经核糖核酸酶处 转录得到大肠杆菌复合体A中的RNA,具有催化 理后，丧失催化活性。这个实验可以说明单独的 活性。证明单独的RNA组分具有催化活性。 蛋白质组分无催化活性，也可以说明RNA是复合 ⑤大肠杆菌复合体A的RNA与枯草芽孢杆菌复 体A催化活性所必需的，因为如果RNA被降解， 合体A的蛋白质组装成的复合体，具有催化活性。 复合体就失去了催化活性，但这并不能直接证明 这个实验表明，即使使用来自不同菌种的蛋白质 单独的RNA有催化活性，因为可能是RNA和蛋 和RNA,只要它们能够组装成复合体，就仍然具 白质共同作用的结果。②大肠杆菌复合体A经蛋 有催化活性。这进一步支持了复合物A中RNA 白水解酶处理后，仍有催化活性。这个实验说明 是催化活性的主要来源，这个实验并不能直接证 单独的RNA组分有催化活性。③从大肠杆菌复 明单独的RNA有催化活性，因为可能存在RNA 合体A中分离的蛋白质组分，没有催化活性。证 和蛋白质的某种相互作用。然而，在结合其他实 ·43· B 真题密卷 学科素养周测评 验证据时，它可以作为一个支持性的证据。综上 酸释放的速率下降明显，而Y氨基丁酸的释放速 所述，“大肠杆菌复合体A中的单独RNA组分有 率下降不明显，故依托咪酯对谷氨酸释放的抑制 催化活性”的是②和④，“但单独蛋白质组分无催 强于对Y氨基丁酸，C正确；注射依托咪酯起效后 化活性”这一结论的实验组合是①③，故能推出 副交感神经的活动占优势，此时肠胃蠕动加快，但 “大肠杆菌复合体A中的单独RNA组分有催化 支气管收缩，而不是舒张，D错误。 活性，但单独蛋白质组分无催化活性”这一结论的6，D【解析】体液免疫过程中细胞因子能促进B细 实验组合是①②、①④、②③、③④。 胞增殖分化为浆细胞和记忆B细胞，A错误；细胞 2.B【解析】癌细胞无氧呼吸产生乳酸不产生 因子风暴对机体的正常组织和器官造成损伤属于 CO2,少量有氧呼吸产生CO2的场所在线粒体，A 自身免疫病，与过敏反应机理不同，B错误；溶菌 错误；无氧呼吸产生的能量较少，因此，癌细胞需 酶属于免疫活性物质，不属于细胞因子，免疫活性 分解利用大量葡萄糖为其不断增殖等生命活动供 物质可以由免疫细胞或其他细胞产生，C错误；临 能，B正确；癌细胞易转移扩散是因为其表面糖蛋 床上采用注射皮质醇抑制细胞因子风暴，因此皮 白减少，C错误；癌细胞无氧呼吸时，葡萄糖中的 质醇属于免疫抑制剂，D正确。 能量大部分还储存在乳酸中没有释放出来，D7.A【解析】占域率是目标物种占据或利用的调查 错误。 区域的比例，红腹角雉在某区域的占域率增高可 3.D【解析】等位基因是位于同源染色体相同位置 增大其对环境的利用，有利于其种群繁衍，A正 控制相对性状的基因，相同基因是同源染色体相 确；红腹角雉是二级保护动物，而标记重捕法可能 同位置控制相同性状的基因，位于a、b两个DNA 对其造成伤害，可用红外相机自动拍摄照片或视 分子上的基因相同或互为等位基因，A正确；DNA 频进行调查，B错误；环境因素使群落在不同季节 分子中G与C之间有3个氢键，A与T之间有2 物种组成发生的变化属于季节性变化，而非演替， 个氢键，端粒DNA序列富含碱基G的特，点，稳定 C错误；密度制约因素是影响程度与种群密度有 性高，有利于维持端粒结构的稳定，B正确；减数 密切关系的因素，植物的嫩叶、果实以及昆虫的数 分裂中同源染色体的片段互换需要DNA连接酶 量属于红腹角雉种群的密度制约因素，D错误。 的参与，该酶作用的位点是磷酸二酯键，C正确； 8.C【解析】富集培养基中的酵母膏可以为降解菌 染色体端粒（富含碱基G的DNA一蛋白质复合 提供氨基酸、核苷酸等多种小分子有机物，获得大 体)在核膜上的准确锚定，而减数分裂Ⅱ的前期核 量含目的菌及其他杂菌的培养液，A正确；通过以 膜已经消失，D错误。 氟氯氛菊酯为唯一碳源的选择培养基的筛选，获 4,D【解析】真菌是真核细胞，可以发生基因突变、 得能降解氟氯氰菊酯的降解菌，B正确；③的接种 基因重组和染色体变异三种可遗传变异，A错误； 方法显示菌落分布均匀，为稀释涂布平板法，稀释 通过基因工程获得的抗真菌水稻与原水稻之间没 涂布平板法既可用于分离微生物，也可用于微生 有生殖隔离，不属于新物种，B错误；该种真菌对 物的计数，C错误；降解菌多次传代过程中可能会 花生的持续感染作为环境条件选择出了更适应该 发生基因突变，其降解功能可能下降，D正确。 种环境的S基因，C错误；将S基因导入水稻使其 9.B【解析】采集的家犬卵母细胞需要培养到MⅡ 获得抗病能力属于基因工程，是DNA重组技术， 期才具备受精的能力，动物细胞核移植技术中普 其原理是基因重组，D正确。 遍使用的去核方法是显微操作法，A正确；过程② 5.C【解析】Y氨基丁酸是抑制性递质，不会引起 用电融合法使皮肤组织细胞和去核的卵母细胞融 Na内流，A错误；钙依赖的神经递质释放速率 合，皮肤细胞的细胞核进入卵母细胞，形成重构 (B1-A1)>(B2-A2)或(B1-A1)>(B3-A3), 胚，过程③可用物理或化学方法（如电刺激、Ca+ 无钙组(A1、A2与A3)的神经递质释放速率无显 载体、乙醇、蛋白酶合成抑制剂等)激活重构胚，使 著差异，所以依托咪酯能抑制钙依赖的神经递质 其完成细胞分裂和发育进程，B错误；过程④为胚 释放，而对非钙依赖的神经递质释放几乎没有影 胎移植过程，胚胎移植实质上是早期胚胎在相同 响，B错误；在钙依赖型的递质释放途径中，谷氨 生理环境条件下空间位置的转移，C正确；SCNT B ·44· ·生物学· 参考答案及解析 可实现不同物种之间细胞核移植，利用保存的灭 雌性为AaXBX,表现型为红眼卷翅，雄性为 绝物种的体细胞，可使灭绝物种“再生”，有利于保 AaxbY,表现型为红眼直翅。让杂交组合二F1 护物种多样性，D正确。 雌、雄自由交配，即AaxBXb XAaxby,按照拆分 10.D【解析】1号和2号不患病，3号患病，推测 法，可求得：F2雌昆虫中白眼卷翅(aaXX-)的比 AKU是常染色体隐性遗传病，由于AKU是 例为1/4×1/2=1/8。 HGD基因突变所致，因此HGD基因是位于常 (3)依据题干信息，灰体对黑体完全显性，假设灰 染色体上的显性基因，A错误；5号不患病，且5 体由D基因控制，黑体由d基因控制，若要探究 号的电泳结果为只含有条带1，因此条带1是 灰体/黑体基因与红眼/白眼基因的遗传是否遵 HGD基因，条带2是HGD突变基因，B错误； 循自由组合定律，则应该找到双杂合子DdAa,利 根据电泳结果可知，4号是杂合子，同时含有 用这种基因型的雌雄个体相互交配，若后代表现 HGD基因和HGD突变基因的概率为1，C错 型比例符合9：3：3：1，则可说明这两对基因 误；4号是杂合子，5号是纯合子，6号患AKU,6 独立遗传，即符合自由组合定律。仅考虑体色和 号含有2个HGD突变基因，其中1个HGD突 眼色两对等位基因，已知野生型为灰体红眼（基 变基因的来源可能是5号产生卵细胞时发生了 因型为DDAA),根据其提供的3种纯合品系黑 基因突变，导致卵细胞中含有HGD突变基因，D 体突变体（基因型为ddAA)、白眼突变体（基因型 正确。 为DDaa)和野生型(DDAA),可以选择将黑体突 二、非选择题 变体ddAA和白眼突变体DDaa杂交获得F1,F 11.(20分，除标注外，每空2分) 即为双杂合子DdAa,F1随机交配得F2,若F2灰 (1)红眼、卷翅X杂交组合一、二是进行的正 体红眼：灰体白眼：黑体红眼：黑体白眼=9： 反交实验，正反交实验结果不一致（杂交组合二 3:3:1,则两对基因的遗传遵循自由组合定律； 中直翅雌昆虫与卷翅雄昆虫杂交，F,雌性全为卷 若不遵循自由组合定律，则意味着D与a基因在 翅，雄性全为直翅)(3分) 一条染色体上，d与A基因在一条染色体上，那 (2)AaXBXb 1/8 么F1产生的雌雄配子均为dA=1/2,Da=1/2 (3)①让黑体突变体（或黑体红眼）和白眼突变体 配子随机结合得到的F2中灰体红眼(DdAa): (或灰体白眼)杂交获得F1,F随机交配得F2,观 黑体红眼(ddAA):灰体白眼(DDaa)=2:1:1。 察F2的表型及比例(3分)②F2中灰体红眼： 12.(20分，除标注外，每空3分) 灰体白眼：黑体红眼：黑体白眼=9：3：3：1(3 (1)T-DNA向导RNA 分)F2灰体红眼：黑体红眼：灰体白眼=2： (2)两种酶切割形成的黏性末端相同 1:1(3分) (3)①和③（或②和④）正向连接时使用引物① 【解析】(1)依据杂交组合一，红眼卷翅♀×白眼 和引物③进行PCR可获得预期产物，反向连接 直翅。→F1:无论雌雄均表现为红眼卷翅可知，红 无法获得扩增产物（或正向连接时使用引物②和 眼对白眼为显性，卷翅对直翅为显性，组合一的反 引物④进行PCR可获得预期产物，反向连接无 交实验，即组合二，白眼直翅？X红眼卷翅。→F1:所 法获得扩增产物) 有的雌性均表现为卷翅，所有的雄性均表现为直 (4)首先提取大薯细胞的基因组DNA,然后利用 翅，有性别差异，可知，控制翅形的基因位于X染 D蛋白基因特异性的引物进行PCR扩增，得到D 色体上，无论雌雄均表现为红眼，与正交结果一 蛋白基因片段，对扩增得到的片段进行测序，将 致，说明控制眼色的基因位于常染色体上。 测序结果与未编辑的D蛋白基因序列进行比对， (2)结合(1)，若这两对性状分别由两对等位基因 如果序列发生了改变，则说明D蛋白基因的编辑 A、a和B、b控制，则杂交组合一的亲本组合为 已经发生（或采用DNA分子杂交技术，用标记的 AAXBXBXaaXbY→F1:雌性为AaXBX,表现型 D蛋白基因正常序列作为探针，与从大薯细胞中 为红眼卷翅，雄性为AaXBY,表现型为红眼卷翅； 提取的基因组DNA进行杂交，如果出现杂交信 杂交组合二的亲本组合为AAXX XaaxBY→F1: 号减弱或消失等情况，则可以说明D蛋白基因的 ·45· B 真题密卷 学科素养周测评 编辑可能已经发生)(5分) 物④)进行扩增可以鉴定出正向连接的情况，原 【解析】(1)构建基因编辑载体时，需要将U启动 因是正向连接时使用引物①和引物③进行PCR 子、向导RNA序列、T启动子、Cas9基因分别连 可获得预期产物，反向连接无法获得扩增产物 接农杆菌的T-DNA,形成重组DNA分子，因为 (或正向连接时使用引物②和引物④进行PCR 农杆菌的TDNA可以转移，携带目的基因进入 可获得预期产物，反向连接无法获得扩增产物)。 受体细胞并在其中进行表达。向导RNA用于和 (4)基因编辑载体成功构建并导入大薯细胞后， 目的基因(D蛋白基因)中待编辑的序列相结合， 在分子水平检测D蛋白基因的编辑是否发生。 所以向导RNA的设计一定需要利用D蛋白基 首先提取大薯细胞的基因组DNA,然后利用D 因序列信息。 蛋白基因特异性的引物进行PCR扩增，得到D (2)不同的限制酶可能切割出相同的黏性末端， 蛋白基因片段，对扩增得到的片段进行测序，将 这样就可以使不同来源的DNA片段进行连接。 测序结果与未编辑的D蛋白基因序列进行比对， 限制酶BclI切割T启动子，载体选用限制酶 如果序列发生了改变，则说明D蛋白基因的编辑 BgⅡ切割以后，两者能顺利连接，最可能的原因 已经发生（或者采用DNA分子杂交技术，用标记 是这两种限制酶切割后产生的黏性末端相同。 的D蛋白基因正常序列作为探针，与从大薯细胞 (3)由图可知，在T启动子上含有引物②和引物 中提取的基因组DNA进行杂交，如果出现杂交 ③对应的结合序列，T启动子如果正向连接，目 信号减弱或消失等情况，则可以说明D蛋白基因 的基因正常转录，如果反向连接，目的基因无法 的编辑可能已经发生)。 转录，所以选用引物①和引物③（或引物②和引 B ·46