2026届高三一轮复习生物：高考生物实验突破——现代生物科技类实验探究综合

高考生物实验突破——现代生物科技类实验探究综合

一、选择题（1--12每题 2分.13--16每题4分，共40分）

1.（2024・全国卷 Ⅰ）下列关于基因工程工具酶的叙述，错误的是（ ）

A. 限制酶识别特定核苷酸序列并切割磷酸二酯键

B.DNA 连接酶可连接平末端或黏性末端，需 ATP 供能

C. 逆转录酶可从 RNA 模板合成 cDNA，用于获取目的基因

D. 限制性核酸内切酶切割后产生的 DNA 片段末端一定是黏性末端

2.（2025・山东济南模拟）植物组织培养过程中，下列操作对愈伤组织诱导效率影响最小的是（ ）

A. 外植体选择（叶片 vs 根尖） B. 培养基中生长素与细胞分裂素比例

C. 培养环境的昼夜温差 D. 消毒时酒精与次氯酸钠的处理时间

3.（2024・江苏高考）为构建含绿色荧光蛋白（GFP）基因的载体，需用限制酶切割质粒和 GFP 基因。若质粒上的酶切位点为 EcoRⅠ（识别序列 - GAATTC-）和 BamHⅠ（识别序列 - GGATCC-），GFP 基因两端的酶切位点为 EcoRⅠ 和 BamHⅠ，则切割后连接时（ ）

A. 可形成 2 种不同的重组质粒 B. 目的基因与质粒的连接方向唯一

C. 需用 T4 DNA 连接酶连接平末端 D. 重组质粒仍含 EcoRⅠ 和 BamHⅠ 酶切位点

4.（2025・浙江温州模拟）动物细胞培养中，下列关于原代培养与传代培养的叙述，正确的是（ ）

A. 原代培养的细胞可无限增殖，传代培养的细胞增殖能力下降

B. 原代培养需用胰蛋白酶分散细胞，传代培养无需处理

C. 两者均需在含 5% CO₂的恒温培养箱中维持 pH 稳定

D. 原代培养的细胞多为二倍体，传代培养的细胞均发生癌变

5.（2024・海南高考）利用农杆菌转化法将抗虫基因导入棉花细胞，下列叙述错误的是（ ）

A. 需先将抗虫基因插入 Ti 质粒的 T-DNA 区域

B. 农杆菌的 Ti 质粒上的 vir 基因与 T-DNA 转移有关

C. 转化后的棉花细胞需经脱分化形成愈伤组织，再分化获得植株

D. 可通过 PCR 技术检测抗虫基因是否整合到棉花基因组中

6.（2025・湖北黄冈模拟）单克隆抗体制备过程中，筛选杂交瘤细胞的两步筛选原理不同，下列叙述正确的是（ ）

A. 第一步筛选利用选择培养基，淘汰未融合的 B 细胞和骨髓瘤细胞

B. 第二步筛选通过抗原 - 抗体杂交，筛选能分泌目标抗体的杂交瘤细胞

C. 两步筛选均需在固体培养基上进行，观察单克隆菌落

D. 杂交瘤细胞经克隆化培养后，无需再筛选即可大规模培养

7.（2024・北京高考）基因编辑技术（CRISPR-Cas9）中，Cas9 蛋白的功能是（ ）

A. 识别并切割特定 DNA 序列 B. 将编辑后的基因导入受体细胞

C. 修复被切割的 DNA 双链缺口 D. 扩增目标基因片段

8.（2025・四川绵阳模拟）植物体细胞杂交中，需用 PEG（聚乙二醇）处理原生质体，其目的是（ ）

A. 去除细胞壁，获得原生质体 B. 诱导原生质体融合

C. 促进原生质体再生细胞壁 D. 筛选杂种细胞

9.（2024・重庆高考）下列关于基因工程中载体的叙述，错误的是（ ）

A. 质粒作为载体需具备复制原点、启动子、终止子和标记基因

B.λ 噬菌体衍生物可作为载体，容纳的目的基因片段比质粒大

C. 动植物病毒可作为载体，需去除其致病基因以保证安全性

D. 载体上的标记基因（如抗生素抗性基因）仅用于筛选含载体的细胞

10.（2025・河南洛阳模拟）动物体细胞核移植中，将供体细胞核注入去核卵母细胞后，需激活受体细胞，常用的激活方法是（ ）

A. 电刺激 B. 加入钙离子载体 C. 乙醇处理 D. 以上均是

11.（2024・湖南高考）为检测目的基因是否在受体细胞中表达，下列方法不合理的是（ ）

A. 检测受体细胞中目的基因的 mRNA（RT-PCR）

B. 检测受体细胞中目的基因的蛋白质产物（Western blot）

C. 检测受体细胞中目的基因的 DNA 序列（Southern blot）

D. 检测受体细胞是否表现出目的基因控制的性状

12.（2025・山东青岛模拟）植物组织培养中，若外植体为花药，经培养可获得单倍体植株，下列叙述错误的是（ ）

A. 花药培养需先将花粉发育至单核期，提高诱导成功率

B. 培养基中需添加蔗糖，提供能量和调节渗透压

C. 单倍体植株高度不育，需用秋水仙素处理使其染色体加倍

D. 花药培养过程中，脱分化和再分化的培养基成分完全相同

13.（2024・全国卷 Ⅱ）利用 PCR 技术扩增目的基因，下列叙述错误的是（ ）

A. 需根据目的基因两端的核苷酸序列设计引物

B. 反应过程包括变性（90-95℃）、复性（55-60℃）、延伸（70-75℃）

C. 需加入 Taq DNA 聚合酶，因其耐高温

D. 扩增产物的量随循环次数呈线性增长

14.（2025・江苏苏州模拟）单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，下列关于其应用的叙述，错误的是（ ）

A. 可用于诊断疾病（如新冠病毒抗体检测试剂盒）

B. 可用于治疗疾病（如利妥昔单抗治疗淋巴瘤）

C. 可作为靶向药物载体，将药物定向运至病灶细胞

D. 可替代传统抗体用于免疫接种，激发机体免疫反应

15.（2024・浙江高考）下列关于细胞工程操作的叙述，正确的是（ ）

A. 植物组织培养中，外植体消毒时需先用酒精浸泡，再用次氯酸钠溶液处理

B. 动物细胞培养中，培养皿需经高压蒸汽灭菌，培养基需经过滤灭菌

C. 植物体细胞杂交中，原生质体融合后需立即筛选，避免杂合细胞凋亡

D. 动物核移植中，供体细胞需培养至 G₁期，以提高核移植成功率

16.（2025・湖北武汉模拟）基因工程中，将目的基因导入微生物细胞（如大肠杆菌）常用的方法是（ ）

A. 农杆菌转化法 B. 显微注射法 C. 感受态细胞法 D. 花粉管通道法

二、综合填空题（共 5 题，每题 12 分）

17.（2024・江苏高考改编）为构建产人胰岛素的工程菌，研究人员进行如下实验：

①从胰岛 B 细胞中提取 mRNA，逆转录获得 cDNA，PCR 扩增胰岛素基因（含 EcoRⅠ 和 HindⅢ 酶切位点）。

②用 EcoRⅠ 和 HindⅢ 双酶切质粒（含氨苄青霉素抗性基因和 lacZ 基因，lacZ 基因内有 EcoRⅠ 和 HindⅢ 酶切位点）和胰岛素基因，连接后转化大肠杆菌。

③将转化后的大肠杆菌接种到含氨苄青霉素和 X-gal 的培养基上，培养后观察菌落颜色。