单元检测(十五) 基因工程(含生物技术安全性和伦理问题)-【衡水真题密卷】2025年高考生物单元过关检测（河北专版）

衡水真题密卷 又能产生特定抗体。 (4)ADC能降低乳腺癌治疗药物的副作用，原因 是单克隆抗体能使药物精准地作用于乳腺癌 (靶)细胞，避免其他细胞受损。 2024一2025学年度单元过关检 (含生物技术安 一、单项选择题 L,D【解析】Cas9蛋白能与人工设计的sgRNA形 成复合体，复合体中的sgRNA与目的基因按照 碱基互补配对原则特异性结合，Cas9蛋白相当于 限制酶，Cas9蛋白结合到相应位置并剪切DNA, 最终实现对靶基因序列的编辑；复合体在sgRNA 引导下结合目的基因，Cs9蛋白切割目的基因造 成双链断裂，细胞在修复断裂的DNA时会随机 插入、删除或替换部分碱基对：通过基因编辑技 术引起的变异属于基因突变。 2.A【解析】PCR是一项体外扩增DNA分子的技 术，可用于目的基因的获取及扩增，故可通过 PCR的方法获取GM-CSF基因：构建GM-CSF 基因表达载体是基因工程的核心，该过程需要限 制酶和DNA连接酶：基因表达载体上的复制原 点可以启动复制过程，启动子和终止子可以调控 GM-CSF基因的表达；大肠杆菌属于原核生物， 将目的基因导入原核生物的方法是C+处理法 (感受态细胞法)，将日的基因导入动物细胞最有 效的方法是显微注射法。 3.A【解析】编码链中含有非编码区，转录后的 mRNA序列短于图中DNA序列：若目的蛋白中 只保留组氨酸标签，选择酶切位点时优先考虑 NdeI和XhoI(或AaI),以去除T7标签 的基因序列，同时保留NdeI识别序列中对应的 起始密码：标签下游TGA对应的密码子为 UGA,为终止密码子，不编码氨基酸：扩增导入成 功的目的基因时，以组氨酸标签的基因序列为模 板设计下游引物，由于组氨酸标签由6个连续的 组氨酸构成，引物可能和图中组氨酸标签左侧基 因序列结合，导致获得的序列可能比预期的序 列短。 4,B【解析】DNA粗提取与鉴定的实验中，应选择 富含DNA的材料，洋葱、莱花、香蕉、菠莱和猪肝 均可作为提取DNA的材料；离心研磨液的目的是 单元过关检测 (5)单克隆抗体是指由单一B淋巴（或杂交痛） 细胞克隆产生的、只识别某一特定抗原的特异 性抗体（或由一种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融 合得到的单一杂交瘤细胞产生的特异性抗体。 测（十五）生物学·基因工程 性和伦理问题) 加速沉淀，离心能够加速细胞膜、细胞器、一些较大 杂质的沉淀，离心法可以获得更高纯度的DNA:过 滤液沉淀过程在4℃冰箱中进行是为了防止DNA 降解：去杂质时离心转速为1500r/min析出时离 心转速为100000r/min,故析出时的离心转速明 显高于去杂质时。 5.B【解析】将重组DNA分子导入细菌B之前， 一般要先用氯化钙处理细胞，农杆菌转化法是将 重组DNA分子导入植物细胞时常用的方法；由 于重组质粒中的抗四环素基因被破坏，所以能在 含有四环素的培养基上生长的是导入普通质粒 A的细菌；质粒A中含有抗四环素基因和抗氨苄 青霉素基因，而重组质粒中含抗氨苄青霉素基 因，则含有氨苄青霉素的培养基上能生长的是导 入了质粒A或重组质粒的细菌，而其他的细菌则 不能生长；人的生长激素基因成功表达的标志是 受体细胞能产生出人的生长激素。 6.C【解析】相对分子质童大小会影响物质在电泳 时的迁移速率，DNA片段相对分子质量越大，迁 移就越慢，分子量越小，迁移速度越快；为了便于 对分离后的DNA片段进行检测，在凝胶制备中 加入核酸染料，能够与DNA分子结合；将电泳缓 冲液加入电泳槽中，电泳缓冲液没过凝胶1mm 为宜；琼脂梵凝胶电泳可根据DNA分子大小、电 荷等对DNA混合物进行分离、鉴定。 7.B【解析】LTB和ST1基因能够融合的关健是 P2和P3两种引物的部分区域能发生碱基互补 配对，碱基互补配对区域的碱基之间能够重合在 一起，从而将两个基因融合在一起；DNA的合成 方向是从子链的5'端自3'端延仲的，因此PCR 扩增时，完整的引物P2、P3应位于子链的5端才 能保证扩增顺利进行：②过程不需要加入引物， 两条母链的起始段位置的碱基序列即为引物，可 以作为子链合成的引物，为DNA聚合酶提供3' ·生物学· 端：电泳时DNA的迁移速率主要受核酸片段长 度影响，核酸片段长度越长迁移速率越慢， LTB一STI融合基因相对LTB、ST1基因核酸片 段长度大，故最可能是图2中的条带3。 8.B【解析】进行PCR扩增需要的酶是耐高温的 DNA聚合酶，不需要解旋酶；欲将某功能蛋白的 结构改变，应设计诱变引物，该过程属于蛋白质 工程；在PCR1中获得的大引物是指以诱变引物 延伸得到的DNA链为模板：PCR子链的延伸过 程都是从5开始的，引物与产物互补配对，因此 都从引物的3'端开始的。 9.A【解析】蛋白质工程的目的是根据人们对蛋 白质的功能需求改造或制造蛋白质，理论基础是 蛋白质的结构与功能相适应；比较半胱氨酸和丝 氨酸的密码子，若第二个碱基由G替换为C,就 可引起氯基酸的替换，所以基因上发生定点突变 (CG),可实现基因的改造；该蛋白质工程的技 术思路与中心法则相反：改造后的干扰素由于氨 基酸序列改变，导致结构改变，从而延长体外保 存时间，但其仍具有干扰病毒复制的功能，即改 造后的干扰素与天然干扰素的功能不是完全 不同。 10.C【解析】当温度超过90℃时，DNA分子发生 变性，双链DNA解聚为单链，PCR时，一般热 变性温度设置在94℃：在分子杂交时，形成杂 合双链区的部位越多，DNA碱基序列的一致性 越高，说明在生物进化过程中，DNA碱基序列 发生的变化越小，因此亲缘关系越近。所以两 个近缘物种生物的DNA分子之间进行杂交，形 成的杂合双链区较多：要扩增出目的基因，需要 根据DNA的两条链分别设计引物，所以设计两 种DNA引物分别与DNA的两条链结合，经 PCR技术可大量扩增目的基因：DNA分子杂交 后，杂合双链区（碱基互补配对）一条链的序列 是5'GCATCT-3',另一条链的序列是3' CGTAGA-5. I1.A【解析】利用PCR技术扩增目的基因需依 次经过高温变性、低温复性、中温延仲阶段；构 建重组质粒时用两种限制性核酸内切酶进行酶 切，可以防止目的基因的反向连接和质粒的自 身环化：常用农杆菌作为受体细胞，原因是繁殖 速度快、基因组结构简单；农杆菌中T质粒上 参考答案及解析 的TDNA能转移到植物细胞，并将目的基因整 合到宿主细胞染色体的DNA上，所以农杆菌中 的T质粒可作为基因工程的载体。 12.A【解析】蛋白质工程的基本途径是：从预期 的蛋白质功能出发*设计预期的蛋白质结构→ 推测应有的复基酸序列+找到相对应的脱氧核 苷酸序列（基因）；通过基因定点突变技术可对 LIMK1蛋白基因进行碱基的替换：设计蛋白质 LMK1利用的技术是蛋白质工程，其可制造新 的蛋白质：蛋白质的高级结构十分复杂，故蛋白 质工程是一项难度很大的工程。 13.D【解析】转基因产品是指利用基因工程技术 而获得的生物制品，故通过转基因有种，按照人 们的霄要，可增加或消除原有生物品种的某些 性状；在基因表达载体上，除了有目的基因、启 动子、终止子等外，还需要标记基因，故转基因 食品风险评估时还需考虑标记基因的安全性问 题：转基因作物所携带的外源基因在使得作物 高产的同时，也可能会向自然界扩散，从而打破 自然界原有的物种平衡，严格选择种植区域可 减少转基因作物发生外源基因扩散的可能性： 若有证据表明某种转基因食品是有害的，可以 禁止相关食品生产，但也可以利用该转基因食 品进行进一步的科学研究，而不是全面禁止。 二、多项选择题 14.ABC【解析】分析图中可知，启动子在编码区 的左侧，GFP基因整合Gata3基因的右侧，启动 子启动转录后，可以在Gata3基因转录后，使 GFP基因转录，Gata3基因的启动子也能控制 GFP基因的表达：据图可知，因启动子在左侧， 转录从左向右，而翻译方向从mRNA的5'→3'， Gata3蛋白在GFP蛋白的左侧，所以翻译时先 合成Gata3蛋白，再合成GFP蛋白：整合GFP 基因后，核酸片段变长，2号个体只有大片段，所 以是Gata3GFP基因纯合子，4号个体只有小 片段，是野生型；若用引物1和引物3进行 PCR,杂合子和Gata3GFP基因纯合子都能扩 增出相应的片段则不能区分杂合子和纯合子。 15.CD【解析】据图可知，最好选用XbaI、HimdⅢ 酶切割S基因的cDNA和Ti质粒，既能保证 的基因与载体产生相同的黏性末端，又不破坏 5 衡水真题密卷 目的基因：在用发杆菌侵染的方法进行植物转 基因过程中，既要让农杆菌的Tⅱ质粒上 的T-DNA整合到植物细胞的染色体中，又要避 免农杆菌的大量繁殖，因此培养基中通常加入 抗生素，既能抑制农杆菌生长，又能根据标记基 因筛选转化细胞；用于扩增S基因的引物需满 足的条件是两种引物分别与两条模板链3端的 碱基序列互补配对，以保证子链从5端向3端 延伸：若检测出目的基因所表达的性状，则说明 重组质粒已经成功导入西红柿细胞。 16.BD【解析】甲基化不会造成基因碱基序列的 改变；结合分析可知，MSP过程中根据亚硫酸钠 处理前后的碱基序列设计甲基化引物和非甲基 化引物，从而分别扩增甲基化片段和非甲基化 片段：甲基化程度低的基因MSP产物中的G-C 碱基对变成了U-A碱基对，因而其中氢键的数 目减少、热稳定性会较低，因此PCR过程中甲基 化组的退火温度比非甲基化组的高：PCR完成 后，由于两种MSP产物的碱基序列存在差异， 可采用琼脂糖凝胶电泳或紫外分光光度计对其 进行鉴定分析。 17,BC【解析】据图可知，引物和探针都能与模板 结合，但引物不能与探针结合，否则该PCR过程 无法完成；引物与模板的3'端结合，此后 TagDNA聚合酶催化DNA的合成方向是从子 链的5'端向3'端延伸；PCR扩增时，Taq酶 的5→3核酸外切酶活性将探针酶切降解，使R 和Q分离，R发射的荧光不被淬灭，切割的荧光 分子数与PCR产物的数量成正比，荧光的强度 能反映PCR产物的数量，通过对荧光信号强弱 的监测就可实现对产物的检测：报告荧光基团 和淬灭荧光基团都是蛋白质，其基本单位是氨 基酸。 18.BD【解析】日的基因表达产物不能影响受体 细胞的生存和活性，因此转入的IPG基因表达 产物不能影响酿酒酵母活性：由图可知，通过基 因工程技术实现酵母菌的PD基因被替换为L PG基因，基因工程的实质是基因重组；标记基 因Amp'可筛选含有目的基因的受体细胞，但 不能检测是否成功构建乳酸乙酯高产菌株： PCR技术是一项体外扩增基因的技术，依据碱 基互补配对原则，可以用于筛选含有L-PG基因 单元过关检测 的受体细胞。 三、非选择题 19.(1)引物EcoR I、HindⅢ (2)③④⑥ (3)RNA聚合IPTG (4)(1一实验组细胞数/对照组细胞数)×100% 不同乳腺癌细胞Her2基因的表达水平不同，进 入癌细胞的Dim-endo(m)融合蛋白的数量有差 异；Dim-endo(m)融合蛋白中的endo(m)对不 同乳腺癌细胞的杀伤力不同) (5)穿透力强，作用持久，免疫原性弱 【解析】(I)DNA聚合酶要延仲DNA链，必须 要有一个3'端的羟基，没有这个结构，DNA聚 合酶无法合成DNA。引物为DNA聚合酶提供 3'端羟基，使得PCR继续，因此必须选用不同的 引物，保证它们能够复制：要从含有endo(m)基 因的DNA分子中获得endo(m)基因并保留突 变位点，只能选用EcoRI、HindⅢ来切割，同 时将endo(m)基因插入质粒时需要保留KanR、 LacI等，所以选用EcoR I、HindⅢ这两种限 制酶来处理DNA分子和质粒； (2)根据引物的作用及特点，如果突变1F为引 物①，则突变1R、突变2F、突变2R的引物分别 为③、④、⑥⑤： (3)由题千可知，当调节基因LacI的表达产物 能和操纵基因Lac0结合抑制Dim-endo(m)的 转录，而转录过程需要RNA聚合酶来催化，因 此LacI的表达产物能和操纵基因Lac0结合， 阻止RNA聚合酶的移动而阻止转录过程；由题 千可知，IPTG能与LacI的表达产物结合，诱 导目的基因的表达，因此当菌株扩大培养到一 定数量后在培养基中加入PTG能促进Dm emdo(m)持续表达； (4)抑制率一（对照组平均细胞数一实验组平 均细胞数)/对照组平均细胞数×100%，即抑 制率一(1一实验组平均细胞数/对照组平均细 胞数)×100%： 由题意可知，不同乳腺癌细胞的Her2基因表达 有差异，因此用不同浓度的Dim-endo(m)融合 蛋白处理乳腺癌细胞后融合的细胞数量不相 同，从而对不同乳腺癌细胞的抑制率不同： (⑤)纳米抗体内部存在更多的二硫键，其结构更 稳定，作用的时间更长；纳米抗体是传统抗体的 重链可变区片段，意味着纳米抗体与传统抗体 ·生物学· 同源性比较近，它的免疫原性比较低：纳米抗体 只有传统抗体的1/10，分子更小，具有较强的穿 透力：纳米抗体可以在微生物系统（如细菌、酵 母菌、真菌)中大量表达，并且可以通过展示文 库中快速筛选，使得纳米抗体具备更低的生产 成本优势。 20.(1)SalI和NotI显微注射法 (2)维持pH值胰蛋白酶 (3)MⅡ/减数第二次分裂中细胞融合 (4)超数排卵同期发情 (5)①正常羊乳清②差/弱 (6)ABC 【解析】(1)对目的基因进行切割时，通常选用 两种不同的限制酶，分析题图所给的hLF乳腺 表达载体，从中获取目的基因并使之成功表达 生产hLF,使用的限制酶最佳是SalI和 NotI,XhoI和NheI这两种限制酶具有两处 可以作用的切割位点，不宜选用。将目的基因 导入成纤维细胞（动物细胞中一般应用的技术 是显微注射法。 (2)成纤维细胞培养液中添加H2PO、HPO 和HCO3的作用是雏持pH值。在导入目的基 因之前，成纤雏细胞需用胰蛋白酶（或胶原蛋白 酶)处理使之分散成单个细胞。 (3)在核移植过程中，先将采集到的卵母细胞体 外培养到MⅡ（减数第二次分裂中）期后去核， 再将成纤雏细胞从切口注射到卵周隙内，使用 电刺激或化学方法促进细胞融合，形成重构胚。 (4)在获取卵母细胞和胚胎移植前要注射促卵 泡生成激素或氯前列烯醇等性激素。对供卵母 羊注射促卵泡生成激素等激素，其目的是超数 排卵，获得更多的卵细胞；对受体母羊（代孕羊） 注射氯前列烯醇，其目的是同期发情，使得受供 体处于相同的生理状态。 (5)①为检脸乳腺生物反应器是否成功，组别4 滤纸上的物质是正常羊乳清（浓缩20倍）。 ②从表格数据可知，与人的hLF相比，转基因羊 乳清（浓编20倍）实验组的抑菌圈直径更小，说 明乳腺生物反应器生产的hLF抑菌效果差 (弱)。 (6)为确保转基因产品的安全性，该食品公司后 阶段应进行的工作是实施转基因产品标识、进 行食用安全性评估以及检测转基因羊乳成分， 参考答案及解析 由于羊乳为外分泌液，鉴定基因是否稳定遗传 不影响其产品，ABC正确，D错误。 21.(1)需要能量、需要载体 (2)①逆转录②47③SpeI、EcoR I XbaI、EcoR I (3)将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内 Na浓度的环境下，观察两种水稻的生长状况。 (4)过量表达SOS1基因使转运蛋白SOS1含量 增多，SOS1通过SOS信号通路将胞质内的 Na过多地排出细胞外，影响细胞本身对Na+ 的利用 【解析】(1)由题千信息“在高于胞内Na+浓度 的环境下，SOS1通过SOS信号通路与胞质内 Na结合并将其排出细胞外”可知，植物利用 SOS信号通路将Na排出细胞外是逆浓度梯度 的运输，因此运输方式为主动运输，特点是需要 转运蛋白，需要能量。 (2)①为获得编码SOS1蛋白的基因，可提取野 生型水稻总RNA,通过逆转录获得模板DNA, 再经PCR获得SOS1基因片段。 ②S0S1基因编码序列中A+T含量占53%，则 G十C含量为47%。 ③由图可知，荧光蛋白基因内部存在SpeI和 BamH I两种限制酶切序列，因此对载体酶切 时不能选择这两种酶，并且不能选择限制酶 SmaI,否则会导致载体中SOSl基因和绿色 荧光蛋白基因不能正确表达，故选择XbaI和 EcoR I两种限制酶对载体酶切，由于SOS1基 因内部有XbaI的识别序列，故不能选择限制 酶XbaI对目的基因酶切，但需要目的基因有 与栽体相同的黏性末端，故可在SOS1基因两 端分别添加SpeI和EcoR I两种限制酶的识 别序列。 (3)鉴定水稻抗盐能力是否增强，采取的操作是 将转基因水稻和普通水稻种植于高于胞内Na 浓度的环境下，观察两种水稻的生长状况。 (4)过量表达SOS1基因使转运蛋白SOS1含量 增多，SOS1通过SOS信号通路与胞质内的 Na过多地排出细胞外，影响细胞本身对Na+ 的利用。 22.(1)限制酶切割位点便于重组DNA分子的 筛选（重组质粒、重组载体、目的基因都对）能 将Ti质粒上的T-DNA转移到被侵染的细胞， 并且将其整合到该细胞的染色体DNA上 衡水真题密卷 (2)保证OsBIK1基因编码的蛋白和NLuC基因 片段编码的蛋白形成融合蛋白3端 (3)HA OsBIK1+HA+NLuc (4)OsBIK1蛋白和OsXL.G2蛋白有相互作用 【解析】(1)质粒载体有一至多个限制酶切割位 点，供外源DNA片段插入其中；表达载体1和2 上含有的卡那霉素抗性基因是标记基因，可便 于重组DNA分子的筛选。农杆菌侵染烟草后， 其Ti质粒上的T-DNA能转移到被侵染的细 胞，并且将其整合到该细胞的染色体DNA上， 使其随着染色体的复制而复制。 (2)构建表达载体1的目的是将OsBIK1-HA NLuc三个基因连在一起共同表达，因此需耍使 其共同受到相同的启动子和终止子的调控，所 以构建重组质粒1时，需要把OsBIK1基因的对 应终止密码子的3个碱基去除，以保证OsBIK1 基因编码的蛋白和NLuC基因片段编码的蛋白 形成融合蛋白。已知编码链为转录时所用模板 链的互补链，编码链和模板链反向螺旋在一起， 而转录时RNA聚合酶是从DNA模板链的3'端 向5端移动，因此图中HA编码序列插入到 OsBIK1基因编码链的3'瑞，才能使转录时 OsBIK1HA两个基因同时转录。 (3)根据图2可知，用抗LuC蛋白抗体分别检测 表达载体1和2融合蛋白表达情况，会出现条带 1和条带2，图2中最后一幅图出现的是条带1， 且已知图中HA为标签蛋白的编码序列，可用 于目的蛋白的检测、示踪等，因此可优先选用杭 HA蛋白抗体进一步区分条带1为OsBIK1十 HA十NLuc融合蛋白。 (4)将分别含有表达载体1和2的农杆菌菌液共 同注射到含有荧光素的烟草叶片后可检测到荧 光，说明OsBK1蛋白和OsXLG2白有相互 作用，使其组装形成了荧光素酶并分解荧光素 发出荧光。 5 ·20 单元过关检测 23.(1)b-C00H (2)①C②BamHI、NotI③引物2引物 1不含有Bam H I酶切位点、引物3方向错误 无法扩增、引物4后面6个碱基无法与模板 链配对15 (3)在光敏色素作用下A系植株选择启动子1 表达出蛋白质X① 【解析】(1)分析题图可知，X①和X②蛋白质b 末端的氨基酸序列是相同，由于肽链的合成方 向为氨基端到羧基端，故b末端对应的是蛋白 质的一COOH末端。 (2)①分析题图1可知，GFP基因片段应插入到 基因X内启动子②的下游，即字母C表示的特 定位置，从而经过转录、翻译得到目的产物。 ②限制酶能识别DNA分子中特定核苷酸序列， 并使每一条链中特定部位的磷酸二酯健断开， 分析题图2可知，应选择表中的BamH I和 NotI将GFP基因从染色体上切割下来。 ③引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序 列互补配对的短单链核酸。由于引物1不含有 BamHI酶切位点、引物3方向错误无法扩增、 引物4后面6个碱基无法与模板链配对，故应选 择引物2用于a侧进行PCR扩增；每次PCR循 环后，目的基因的量可以增加一倍，故在PCR仪 中完成4个循环后，含有该引物的DNA片段数 为15. (3)分析表中数据可知，与去除产生光敏色素的 基因后得到B系植株相比，A系植物能对红光 刺澈作出应答被激活，原因为在光敏色素作用 下A系植株选择启动子1表达出蛋白质X①。2024一2025学年度单元过关检测（十五）】 生物学·基因工程 (含生物技术安全性和伦理问题) (考试时间75分钟，感分100分) 一，单项选择题：本题共3小题，每小通2分，共26分。在每小愿给出的四个选项中，只有 一项是符合题日要求的。 题号12345678 9 10111213 答案 1,CR5PR/C9是一种基因编氧技术，C蛋白能与人工设计 一日的转丙 的s零RNA形成复合体（如图）。利用该技术可以对DNA进行 一量白 一系列的定向改迹。下判虚述铅灵的是 RNA AC9蛋白属于限制青，能切用日的基因 A想RNA具有能与目的基因发生碱基互补配对的结构 修 C基男编能技术能够定点铅人，制除或替换部分碱基对 D通过基因编判技术引起的变异属于基因重组 2.粮细围一巨荣细围集落料激因子(GMCS)可以增如白细腹的数量。某科研团队将人 的GM-CSF基因导人大斯杆菌可大量生产GM-CSF,并用于临床上化放疗之后的肿痛 治疗。下列叙述正确的是 A.可通过PCR的方法铁取人的GMCSP基因 我构建GM-CSF表达载体需要限封刷和DNA聚合衡 C基因表达载体上的复制原点可周控GM-CSF基因的表达 D.可通过望微注射的方法将GMC3F基因计人大新杆商 3,为方便纯化蛋白爱，构建表达截体时可将日的基因序列与标签基因序列连接，表达含有 标签的随合蛋白.如图为某质粒箭码硅（转录时的非模饭佳）的阁分序列。下列叙述情 误的是 NT7边作 组格8首修 于-T打cTTC配CC4o0OC在TT 0品函 度相标事行场十连峰蜗烟网同成的成，由标F离了，博十有的用乾 A.转录后的mRNA序列与图中DNA序列一数，仪T皆美为U 我若目的蛋白中只保留组氨酸标签，选择鳞切位点时优先考意NI和XoI〔或A网D C若目的蛋自中保留了组氨酸标签，翻译时标签下游的基因序不偏氢其酸 D.以组氨酸标签的基国序列设计下等钙引物，扩增时获得的序列可能比陶期的序列短 4,“DNA粗提取与鉴定的实验步骤是，研磨·去款质·析出·鉴定。下列说法情测 韵是 单元过关检测（十五}生物学第1页（共12页） 衡水真 A洋葱，菜花，香蕉，被架和指肝均可作为是取DNA的材料 B对研磨液进行离心是为了加速NA的沉淀 C,过滤液风淀过程在4℃冰葡中进行是为了陟止DNA降解 D析出时的离心转建明显高干去杂质时的离心转速 5.如图是将人的生长置素其因导人纸国B内料备“工程菌"的过程。下列说法正确的是 人的生长得者某因 2面红复青首#州 A.将重组质粒导人翎菌B营用的方法是农杆商转化法 且将完成导入后的压蒂涂本在含有四环素的培养基上，能生长的只有导人了质粒A的阳菌 C.只有导人了重组质粒的红南在含有氨苄青霉素的培养基上生长 口人的生长数素某因成功表达的标志是受体组盥中含有人的生长蠹素基因 6,DNA狼指皙履胶电球的分子第效应是指作为支持介质的琼指糖，具有网路结构，使大分子物 质在通过时受到较大阻力，性此分离不同大小的NA片段。下列说法错误的是 (》 A,DNA片段相对分子质量塘大，迁移健经慢 且凝胶制备中抽入核酸染料能与DNA分子结合，用于分离后DNA片段的检测 C将电汰暖冲液加入电泳情中，电谦逐冲液不佳没过凝较 D隐番糖凝胶电冰可用于分离、整定DNA分子的混合物 ?.重组PR技术是将两个不同的DNA连楼成为一个新DNA分子。某科研小组从猪跟大 肠杆菌中扩增得到LTB和ST门肉个基国片段，利用重组PR技术构建了LTB-ST1融 合某因，制备过程知图1，R扩增后的电这结果如图2。下列说法皆误的是 LB琴四 511晴调 P M11 2特一 11-1转合参为 刻表示辉准同基国 表不适幅L1B5I稀国的A升厚 1.2.3表余不NA电米精 A.1TB和ST门基因能够联合的关键是引物P2,P阳的闲分区戴能进行膜基互补配对 且℃R装增时，完整的H物2，图应位于子随的3'端才俺保证扩增顺利进行 C图1中过程的反应体系中不用颜外加入引物 DLTB一ST1融合基因最可能是图2中的条带3 密岳 单元过关检测（十五】生物学第2页（共12页」 5 8编典科学家斯万特·帕博凭售对已灭绝古人类某因组和人类进化的爱现蒙获022年 诺贝尔奖生理学或医学奖。他在研究过程中使用了大引物 R构建定点突变，其过程如图。下列叙述正确的是《) 雪 请收阳物。 A进行R扩增需要的悔有解旋隋和附高温的DNA聚合南 大物。一 B利用该技术将某功能蛋白的结构皮变属于蛋白历工程 C在状1中张得的大引物是指以引物1延伸得到的DNA 链为模板 D.PCR子链的延伸过醒都是从引物的'精开始的 9.干扰素是一种儿有干搅我待复制作用的锦蛋白，在格床上被广泛用于的疗滨寄感染生疾莉 如果将千扰素分子上的一个陈氨酸（斋码子，UU,汇C)变成丝氨能（密刊子，UU,℃ LUCA,G),就可以延长干扰素的体外保存时间。下列叙迷精风的是 A对干扰素的设肝和改迹，以某因的结构和功能的关系为某陆 B对干扰素某因进行定点突变(C一+G)来实观碱其的精换 C该蛋白疑工程的技术思路与中，心法则相反 几改造后的千北素的功能与天然干扰素不是完全不司 10.在DNA分子杂交的过程中，两种生物NA单链的直补碱基会结合在一起，形成桑合 双链区，在没有互补戴基序列的部位，仍然是两条游离的单链，如图所示。下列氨述正 确的是 A.在DNA分子余交之前，可在0℃的条作 离伪单陆 下使DNA变性解聚为单链 物种A的D .0/N B两个近缘物种生物韵NA分千之间进行 杂交，形成的杂合双链区较少 为0% 角合双日4 C通过设计两种DNA引物分别与DNA的 两条链结合，经PCR技术可大量扩增目的基因 D杂合双链民一条链的序列是'GCATCT-3',芳一条链的序列是3'CGUAGA 山，如图是利用基因工程技术培育新品种水稻的露分流程，序号代表操作过程。下列叙述 错误的是 A利用R技术扩增目的基国需依次授过 变性、延伸，复性阶段 FDYATI +堂杆菌 我为陟止目的某因自身环化，过程①最好使 用两种限制南 ● C常用农杆菌作为受体细鞋，原因是繁灌速 度快、有因组结构麓单 D重组T广质装上的TDNA作筹目的基因整合到宿主细围染色体上 单元过关检测（十五}生物学第3面共12面 衡水真 12.神经科学家设计了一种合成蛋白质L[MK1(结合AP坪酸化其肥标的蛋白质)，能 政售老年认知记化人胖的记亿功能。下列叙述情误的是 A.设计蛋白面L1K1时，先设计其某因的碱基序判再姓测其功能 A通过基因定点义变技术可对1.MK1蛋白基因进行碱基的替换 C,设计蛋白质LK1利用的技术是蛋白置工程，其可制造新的蛋白质 D蛋白质的高领结构十分复杂，放蛋白霞工程是一现谁度很大的工程 13,转基树产品是指利用基因工程技术我得的生物制格，其安全性月题一直是大众关注和 争论的热点。下列叙述错误的是 A,通过转基因育种可增加成消意原有生物品种的某些性状 且转基圆食品风验评估时还需考虑标记其因的安全性问通 C严格法择种植区城可碱少转基因作物发生外源基因扩酸的可健性 口只婴有证据表明某种转基因食品有害，就应全面禁止转基因技术在食品上的成用 二、多项选择颜：本桶共5小题，每小置3分，共15分。在每小给出的四个选项中，有再个 或两个以上这项特合题日要求，全部遗对得3分，慧对但不全的得1分，有选错的得0分。 题号141518 17 18 答案 1生.某研究小组利用转基因技术，将绿色黄光蛋白基因(GFP)整合到野生罐小鼠G和3禁 因一南，如图甲所示。实验得到能正常表达两种蛋白重的杂合子雕雄小鼠各1只，交 配以期获得G@3GFP基因饨合子小鼠。为了鉴定交配：获得的4具新生小鼠的基因 型，设计了引物1和可引物2川于R打扩增，R产物电泳结果如周乙： 111 部， w中 小 下列复这正跳的是 A.G山3基因的启动千可以控利GFP基国的表达 B翻译时先合成Gt3蛋白，再合成GFP蛋白 C,4号条带的小鼠是野生型，2号条量的小鼠是G3GFP基因纯合子 D若用引物1和写引物3进行PCR,能更好地区分杂合子和筑合子 15.紫色西红韩经基因输辑后可产生比晋通西红市多9倍的花青素（紧色），紫色花青素 能降低人类患心病，睛尿病的风融。如图是花青素基国(S)的DNA《DNA为某种 生物发育的某个时期的mRNA经反转录产生的互补DNA)和五质粒图。下到叙述量 误的是 蹈密在 单元过关检测（十五】生物学第4页（共12页1 I 止子 ER I A.最好达用XI,H出d南切料S基国的cDNA和TT质粒 B农杆南侵染后，常要使用抗生素的日的是抑制农杆商生长，箱选转化用胞 G扩增S基因的引物需满足两种习引物分别与两条模板链5菊的碱基序列互补尼对 若检测出标记甚因所表达的性状，则说明重组疑粒已经成功导人西红柿细盥 16.基因白动子中物险突甲林化与生物的表观通传密切相关，甲某化将异性()技术是 测定某因是杏甲某化的常用方法，其主要原理及过程如图。下列有关述正确的是〔】 入基因启动子中胞密发甲基化造成四碱基序列的改变 二A-玉{= 弘P过程中成悬据亚硫酸钠处理前后的碱基序列 要地脸物生理 设计两对引物 C、R过程中甲基化组的退火湿度比非甲基化组的低 D.代℃R完成后，可采月琼胎糖凝胶电谦或紫外分光光 度计对MP产物选行鉴定分新 1?,C求扩增时在都入一对引物的同时加入一个特异性的荧光探针，谈探针两端分别标记 一个报告荧光基厢(Q蛋白质》和一个淬灭荧光基团(R蛋白质)。开始制，探针完整地 站合在DNA任意一条单链上，服告基团发射的炎光信号被淬灭基团吸度，检测不到黄 光信号，当T明DNA象合南催化子链廷钟至探针R处，会水解停灭炎亮某团，荧光靠 测系统从前可接收到荧光背号，即每扩增一条D心A战，就有一个荧光分子形成，实现 了荧光信号的幕积与R产物形成的完全问步。下列氨 述正确的是 A.习引物、探针和模板三者之间通过碱基互补配对相互结合 我T钢DNA聚合酶维化DNA的合成方向总是从子佳的 5向3'揭延伸 CCR产物的量与荧光信号的累积成正相关 D报告荧光基团和淬灭或充基稻的姐成单位是脱氧核苻酸 18,科研人员将酸酒酵母质粒上的丙刚酸脱氢碍基因(PD)替换为植物乳杆蒂中的乳酸税 氢酶基因《L,G),可线得乳酸乙衢（白酒香球的主要米规）高产菌株，过程如图。下列 分析合理的是 】 单元注关检测（十五}生物学第5面共1？面} 衡水真型 制原 A,转人的L,PG基因表达产物雀影响喻润留母的活性 BL代G基因替美质粒上的)基因是通过同颗重组实现的 C,标记某因A网可校测是否成功构遗乳能乙酯高产菌林 D可以利用PCR枝术筛造含有L-PG基国的受体阻胞 三，非选择驱：本题共5小题，共59分。 19,(11分)重叠延伸代R定点突空试程分为两步，如图1。内皮，素能通过韩制血管内 皮细胞的增殖和直管的生成限制肿缩细韵的生长。研究人员利用重叠刻伸求定 点突变技术将内皮抑素基以m山改违为能进人籍细电并有较组抑癌作用的突变基 因m山(m),并再与抗H2(人表皮生长国子受体2)的钠米抗体基因De形成慰合 蒸因Dmmo(m),导人大肠杆菌并表达，主要过程如图2，其中Kan表示卡那霉素 抗性本因，周节基因La配I的表站产物使和操纵林因La0结合抑制某因的表达，PTG 能与La【的表达产物结合，诉导目的基因的表达。回答下列问题。 公2为F23 = 5 ,39引指内F2 格以风L0, 月动LP 博梦某构食1 密程 单元过关检测（十五）生物学第6页（共12页] (1)图1中R1和P代C2配利反应体系时需都入不可的。一，图2中构建重组 质较时使用的限制牌是 (2)下列①-⑥是相关物，其中突变1F为引物D,则突变1R,笑变2F,突变2R分别 个 DS-GOGGCATOCOGGGCGATCOCGTGACTOCCAGTGCTGTCC-3 5-CCGGAATICCATATGCGCCGOCGCCGCCGCOGCOGOOGOOGC3 5-GGACAGCACTGGCAGTCACGCGATOGOCCCGCATGCCOC-3 5-GTGGCATGGCTCGGACGCAAACGGGOGCAGGCTGS 55-ATTTCTCGAGTTACTTGGAGGCAGTCATGAAGCTG-3 S-CAGOCTGOGOOOGTTTGOGTCOGAGCCATGCCAC-3 (3)导人重纸质较的大断杆菌由于国节某因LaI的表达产物能和操纵基因La0结 合，阻止南的移动，抑制D(w)的转来。当菌橡扩大培养到一定数 量后在培养基中加人，使D网do(网)持域表达 (4)研究表明，乳腺离常出现1H2基国的高表达（不同乳腹璃细胞的表达有差异），国此 H2鼓认为是乳服检测和治疗的重要肥点。研究人员用不同依度Dm南《m) 融合蛋自处理乳腺毫组胞5KR3,DA231,C下了和正常乳藤T跑HB围100f作为 实验组，达取正常培养的乳摩癌闭陆和正常乳腺相胞作为对丽粗，一段时间后分对 测定对照组和实验印的纽椒数并计算弈制率，结果如图所示，物利的计算公式局 。D贴mmo(烟)险合蛋白对不问乳眼癌组粒的邦料率不问，其 可能原因是 91111 (5》纳米抗体是传统抗体的重皓可变区片段，只有传统抗体的1/门0，但内部存在更多的 二藏键，结构更稳定。与传统抗体相比，钠米抗体的优友是。 2级12分)人乳铁蛋白(F)具有多种生理功德，被认为是一种极具开发潜力的食品烟加 剂。如图为某食品公可利用乳腺生物反应器生产F的过程.国答以下间题： 单元过关检测（十五}生物学第7页{共12面） 衡水真见 扩情特金行可刀储己游森所几发市 F d1,1,IaI为限Mm.A为g指前，Nee为直挂性精河■图 (们)要从h山F乳腺表达载体中获《目的基因并使之成功表达生产h下，使用的限制陶 最佳是 。将目的基因导人成纤维细旅中一橙应用的技术是 (2)成纤逢领监培养液中深加H:P),一、HP)一和HO一的作用是 在学入日的基同之前，成纤雄相程需用 处理使之分藏成单个细胞 ()在核移植过程中，先将采集到的师每细园体外培养到 期后去核，再格成纤维 细胞从切口鞋射到卵混慰内，使用电刺散或化学方法醒近 ,形成重构整 ()在获取廊母红旅和胚哈移植前要注射促期泡生战散素成氢前列烯醇等性藏素。对 供明母羊注射促府泡生成徽素等散素，其目的是 ,对受体导羊 (代华羊)注射复前列烯醇，其目的是 (5》为检验乳馨生物反应器是否成功研完人员进行了抑菌实验。其结果如下： 稻用 4 几4万U青得素 人乳清 转满国学乳清 建城上物质 ?(花缩20倍】 0.25万U拉忍素 《花笔29倍) (独笔)倍) 中情图直径(m) 2.B L9 1.7 无 ①组别4使纸上的物质是 ②与人的hF相比，乳摩生物反应琴生产的h山F抑西效果 (6》为确保转基因产品的安全性，该食品公司后阶段应进行的工作是 A.实能传基因产品标识 且进行食月安全性评估 C检测转基因羊乳成分 D整定基因是香稳定遭传 21.口2分)植物在高于德内N+浓度的环境下，S区3和SO5配撤活位于厦N上的转运蛋 白S051,文1道过S0S信号通路与鞋更内姑合并将其持出细整外，隆持其正常 生命活动。国答下列问题 )植物利用SO8信号通路格N排出粗悠外，这种运输方式的特点是 (2)通过某因工程在水斯伸过量表达S0S引蛋自，以期增强水稻抗盐能力 ①为铁得编码5为】蛋白的基因，可提数野生型水稻总RNA,涯过 三获得模 板DNA,界经PCR线得S?.基因片段. 密香 单元过关检测（十五）生物学第8页（共12页] 测序表明，557某因输码序列含有3444个核甘酸，其中A+T含量占53%，便 板链中C含量为26%，那么S1基因双链序列中G+C的含量为%， ①背建表达黄体时，在下图所示体含有的制南凯湖位点蕾人3基因。序列分析 发现气5基因内部有1的俱别序列，为使载体中S气5甚因和爆色荧光蛋白基因 正确表达.应在基因两端分列漆加 两种限制南的识别序列， 将3某因能人线体前，应选用 两科限精对程切。 NG Sw I&mH ITGA 【正 ks1l Svel er An (ib灯m (ily (i山hnu情 S-ICLWA NI T-AGAICI-S S-MTAGF-I SvI 71GAn 5dMAITC.P GORI TETEAAGS (3)重组爱粒转化水稻后，选取可发绿色搅光的植依，鉴定其抗盐佳力是否增强，采取 的操作是 (4)若发现水相中过量表达51幕因并不能明琴盟高其杭盐能力，从信号通路角度 分析，可能的原因是 22.(12分)荧光素南1蛋白)由550个氢基酸组战，分为N擒和C揭2个功能片段，即 NLe蛋白(2416氢甚酸)和CLe蛋白(398一550氨基酸)，两部分不能白动重组并发 挥作用：将日标蛋白OBK1蛋白和OG2蛋白分别与NLe蛋白和Ce蛋白聪 合，若2个目标蛋白相工作用，期NLc蛋白和C?蛋白能域功组装为卖光素陶并分 解荧光素发出荧光。科研人员构建了可表达OK]HANx融合蛋白的表达载体 1和可表达0X.G2融合蛋白的表达麓体2并进行了检测，如图1所示，图中 HA为标鉴蛋白《用于目的蛋白的检调，示踪等)的码序列 肩子 h■ 站蔬体牡 销1面段载体得分结构 单元过关检测（十五}生物学第9页共12面） 衡水真星 KO! H2 《1)质粒载体有一至多个 ,供外翼DNA片段插人其中：已知 表达载体1和2上均合有卡那霸素抗性基因，目的是 ,烟草 是双子叶植物，将重组质粒导入用草叶片常用的方法是农杆菌转化法，侵染烟草叶 片纽数后的农杆菌在转化过程中表现出的特点是 《2)构健重组质粒1时，需要巴0：1K1茶因的对皮终止密弱子的3个碱基去除，原因 是 :图中HA输码序列扬入到BK1基因 箭码桂的 (填5'端成“3瑞")，编码链为转时所用梗版链的互补益。 (3》如果用抗L蛋白抗体分别检测表达震体1和2融合蛋白表达情况，结果如图2所 示，可优先选用镇 蛋白杭体进一步区分，条带1为 融合蛋白。 (4》将分划含有表送履体1和2的农杆商商液共同注射到含有变光素的烟草叶丹后可 检测到荧光，说明 3,《12分)拟南体内的基因X具有多个启扇子，通过一种光敏色素作为受体，对光刺藏 进行应答，山此避择不同的启动子并转泰出长度不司的mRNA,从而表达出存在于细 胞内不同位置的不同蛋白质，由此使拟南芥是凳出不司的生长状态。其相关蛋白的合 成过程如图所示 自林干 ● 单国区 一 MRNA XD ■一 RRNAX2 编叶样体有移值9 ■b卡折白源名 本填 (1)两种蛋白质 《填·”减“")末端的氨基截序列相同，该术南对应的是蛋白 质的 (一NH”或”一C00H")末端。a末增是引导蛋白质核运偷进入叶 绿体的信号肚夏 (2)研究人员通过特定技术，将绿色荧光蛋白(GF甲)的基因片段插入到基因X的特定 位置，使表达出的蛋白质X①、X②能墙有绿色卖光蛋白，以实现它们在幽内的可 桃化，山此得到A系植株。(GFP基因不含启动子和峰止子) 密 单无过关检测{十五」生物学第10页（共12页] ①根据图1，GFP基因片段皮插人到基因X内学母 表示的特定位置。 雪GFP基因来自于水每等动物的细图中，蛋先选择合证的限制酶痒其从染色体 DNA上切制下来。GFP基因两侧的碱基序列知图2所示，鼠据减基序列度选择下 表中的进行切 一C 限制成 积刚序列 BnHI G+GATOC CCTAGG Hnd目 T1CGA↑A G+OGGOXCGC CG0GGC◆G EcoR1 G+AATTC CTAM↑C ③酶切端需对GFP基因进行PR扩增，b侧所用引物已经确定，侧引物需在以 下4种中进行击择，根据：侧序列应选样 ,不选其能3种的理由是 在CR佼中完成4个桶环后 含有该习引物的NA片及数为 个 引物1：5 ATCCTGCTA3 引物2：5 TATGGATCC3 引物3：5 GGATOCATA3 引物4：SGGAAGGATA3 (3)研究人员在A系植株的基确上，去除产生光敏色素的基因后得到B系植株。随后， 分别在侧啼条件和红光条件下培养A,B两系植橡，培养条件及慰测到荧光的部位 如表所示 GFP黄光的片部耳农 发育条特 见暗条件 红光条件 A系植物 额离使基质 叶绿结 B聚植物组险质基陵领出数基衡 根据以上研究结果，A系植株对红光喇散作出应容被蕾活的原国是 单元过关检湖（十五}生物学第11页（共12页1 衡水真蹈密在 单元过关检测{十五」生物学第12页（共12页1