内容正文:
检测生物组织中的
糖类、脂肪和蛋白质
二
1
学习目标
1.通过检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质,掌握检测相关物质的实验原理、方法和操作注意事项。
原理:
实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
实验原理
(1)还原糖+ 试剂 。
(2)脂肪+ 染液→ 色。
(3)蛋白质+ 试剂→ 色。
斐林
砖红色沉淀
苏丹Ⅲ
橘黄
双缩脲
紫
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
1.哪些糖是还原性糖?
2.还原糖的检测,选择什么样的材料合适?
3.还原糖用什么试剂来检测?如何使用?
4.完善下面的实验步骤
选材、制备组织样液:制浆→过滤(用单层纱布)→样液
↓
在试管中加入组织样液2 mL
↓
加斐林试剂1 mL(甲、乙液等量混合均匀后再注入)
↓
水浴加热(温度: ,时间: )
↓
观察(现象: )
活动一、还原糖的检测和鉴定
自学完成
种类 举例
单糖
六碳糖
五碳糖
二糖
多糖
半乳糖
果糖
葡萄糖
核糖
脱氧核糖
蔗糖
麦芽糖
乳糖
纤维素
淀粉
糖原
几丁质(壳多糖)
活动一、还原糖的检测和鉴定
还原糖:
非还原糖:
所有单糖、麦芽糖、乳糖
蔗糖、所有多糖
1.哪些糖是还原性糖?
2.还原糖的检测,选择什么样的材料合适?
3.还原糖用什么试剂来检测?如何使用?
活动一、还原糖的检测和鉴定
还原糖有:单糖(葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖和脱氧核糖)、麦芽糖、乳糖。
非还原糖的有:蔗糖、多糖
还原糖含量较高、无色或近于无色的植物组织。如苹果、梨、白萝卜。
斐林试剂(甲液:0.1g/mlNaOH;乙液:0.05g/ml CuSO4)
要现配现用,等量混匀;水浴加热。
甜菜、甘蔗?草莓、西瓜?苹果?马铃薯?梨?
苹果、梨、白萝卜等
活动一、还原糖的检测和鉴定
4.完善下面的实验步骤
选材、制备组织样液:制浆→过滤(用单层纱布)→样液
↓
在试管中加入组织样液2mL
↓
加斐林试剂1mL(甲、乙液等量混合均匀后再注入)
↓
水浴加热(温度: ,时间: )
↓
观察(现象: )
还原糖里面含有-CHO即醛基,它可以在加热的条件下与新配制的Cu(OH)2悬浊液反应生成砖红色沉淀Cu2O。
50~65℃
2min
浅蓝色→棕色→砖红色沉淀
1mL现配斐林试剂
蓝色
棕色
砖红色沉淀
50~65℃水浴加热2min
组织匀浆中含有还原糖
反应不彻底
2mL组织匀浆
无色
还原糖中的醛基(-CHO)被新配制的Cu(OH)2悬浊液氧化,Cu(OH)2被还原成Cu2O
不能用酒精灯直接加热,否则温度太高,形成黑色的CuO。
实验原理:
还原糖(麦芽糖、葡萄糖、果糖)与斐林试剂在水浴加热的条件下反应,生成砖红色的Cu2O沉淀。
活动一、还原糖的检测和鉴定
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活动二、脂肪的检测和观察
1.哪些植物的器官富含脂肪?
2.植物细胞中的脂肪颗粒用什么试剂鉴定?
3.完善下面的实验步骤。
花生种子(浸泡后去种皮)切片
↓
制片:取材(材料越薄越好)→染色(苏丹Ⅲ染液,染色3min)→洗去 (用 )→吸去多余酒精→滴加蒸馏水→盖盖玻片
↓
观察(先在 找到花生子叶最薄处,移至 ,将物相调节清晰;换成 。
↓
现象: 。
自学完成
1.哪些植物的器官富含脂肪?
2.植物细胞中的脂肪颗粒用什么试剂鉴定?
活动二、脂肪的检测和观察
花生种子、油菜籽和向日葵种子
苏丹Ⅲ
脂肪微粒
显微镜下被苏丹Ⅲ染色的脂肪颗粒
活动二、脂肪的检测和观察
3.完善下面的实验步骤。
花生种子(浸泡后去种皮)切片
↓
制片:取材(材料越薄越好)→染色(苏丹Ⅲ染液,染色3min)→洗去 (用 )→吸去多余酒精→滴加蒸馏水→盖盖玻片
↓
观察(先在 找到花生子叶最薄处,移至 ,将物相调节清晰;换成 。
↓
现象: 。
浮色
体积分数为50%的酒精
视野中有被染成橘黄色的脂肪颗粒
低倍镜
视野中央
高倍镜
厚薄不均会导致观察时有的
地方清晰,有的地方模糊。
实验原理:
脂肪可以被苏丹Ⅲ染液染成橘黄色,在显微镜下可观察到橘黄色脂肪颗粒。
活动二、脂肪的检测和观察
14
1.蛋白质的鉴定选用什么材料?
2.蛋白质用什么试剂检测?如何使用?
3.完善下面的实验步骤
加组织样液2 mL
↓
加双缩脲试剂A液1 mL,摇匀
↓
加双缩脲试剂B液4滴,摇匀
↓
观察(现象: )
4. 变性的蛋白质或蛋白酶处理后蛋白质,能与双缩脲试剂发生紫色反应吗?
活动三、蛋白质的检测和观察
自学完成
活动三、蛋白质的检测和观察
1.蛋白质的鉴定选用什么材料?
2.蛋白质用什么试剂检测?如何使用?
蛋清稀释液(防止实验后黏住试管,不易涮洗)、鲜肝提取液或豆浆
双缩脲试剂(A液:0.1g/mlNaOH,B液:0.01g/ml CuSO4)
先加A液(创设碱性环境)1ml摇匀;再加B液(提供Cu2+)3~4滴,摇匀。
加组织样液2mL
↓
加双缩脲试剂A液1mL,摇匀
↓
加双缩脲试剂B液4滴,摇匀
↓
观察(现象:______________)
溶液呈紫色
活动三、蛋白质的检测和观察
3.完善下面的实验步骤
2mL组织样液
1mL双缩脲试剂A液
无色
浅蓝色
4滴双缩脲试剂B液
紫色
两个及以上相邻肽键在碱性环境下与双缩脲
试剂中的Cu2+发生反应,生成紫色络合物。
变性的蛋白质或蛋白酶处理后蛋白质,能与双缩脲试剂发生紫色反应吗?
能。
双缩脲试剂(了解)
在碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。
注意:与双缩脲试剂起反应的是肽键而不是氨基酸,且被检测的反应物至少要有2个肽键。
双缩脲
实验原理:
两个及以上相邻肽键在碱性环境下与双缩脲试剂中的Cu2+发生反应,生成紫色络合物,因此双缩脲试剂可检测蛋白质和多肽。
3.蛋白质的检测:
实验:检测生物组织中的糖类、脂肪和蛋白质
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(1) 实验材料的选择
由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质,因此在实验的选材上应注意以下两点:
①材料本身应__________________,以免对结果产生干扰。
②材料应富含________________,使现象更明显。
无色或颜色较浅
被鉴定的物质
活动四、实验总结
(2) 做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?
【答案】 作实验对照。
(3) 为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?
【答案】 放置时间太久,会产生Cu(OH)2沉淀在试管底部而无法参与反应。
(4) 使用双缩脲试剂时,为什么B液只加3~4滴而不能过量?
【答案】 过量的双缩脲试剂B液会与A液反应,且使溶液呈蓝色,而掩盖生成的紫色。
活动四、实验总结
(5) 若要用物理方法鉴定脂肪存在,请叙述鉴定的方法。
【答案】 把花生子叶放在白纸上用手挤压,白纸上出现透明的油迹,说明子叶中含脂肪。
(6) 生物组织中还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定实验中需要水浴加热的是什么实验?使用显微镜的是什么实验?既不需要水浴加热也不用显微镜观察的是什么实验?
【答案】 还原糖鉴定实验。脂肪鉴定实验。蛋白质鉴定实验。
活动四、实验总结
(7) 斐林试剂与双缩脲试剂比较:
类别 斐林试剂 双缩脲试剂
甲液 乙液 A液 B液
成分
鉴定物质
鉴定原理
添加顺序
反应条件
反应现象
0.1g/mL的
NaOH溶液
0.05g/mL的CuSO4溶液
0.1g/mL的NaOH溶液
0.01g/mL的CuSO4溶液
还原糖
蛋白质
新配制的Cu(OH)2溶液与还原糖,
在加热条件下生成砖红色的Cu2O
碱性条件下的Cu2+与类似于双缩脲结构的肽键发生紫色反应
将甲液和乙液混合均匀后加入组织样液中
先将A液加入组织样液中,混合均匀,再滴入B液,摇匀
50~65 ℃水浴加热
常温
溶液呈砖红色(沉淀)
溶液呈紫色
选材→制片→加苏丹Ⅲ染液→染色→漂洗→镜检(橘黄色)
选材→制备组织样液→加双缩脲试剂A液→摇匀→加双缩脲试剂B液→摇匀→观察颜色(紫色)
选材→制备组织样液→加斐林试剂→水浴加热→显色(砖红色沉淀)
知 识 体 系
谢谢观看
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Lavf55.33.100
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$$ 高一生物导学案 编号:09 主备人:潘国强 审核人:施裕红 日期:2024.09.12
第二章 组成细胞的分子 细胞中有机物的鉴定
【学习目标】
1.尝试检测生物组织中的糖类(还原糖、淀粉)、脂肪和蛋白质。
【学习活动】
活动一、还原糖的检测和鉴定
1.哪些糖是还原性糖?
2.还原糖的检测,选择什么样的材料合适?
3.还原糖用什么试剂来检测?如何使用?
4.完善下面的实验步骤
选材、制备组织样液:制浆→过滤(用单层纱布)→样液
↓
在试管中加入组织样液2 mL
↓
加斐林试剂1 mL(甲、乙液等量混合均匀后再注入)
↓
水浴加热(温度: ,时间: )
↓
观察(现象: )
活动二、脂肪的检测和观察
1.哪些植物的器官富含脂肪?
2.植物细胞中的脂肪颗粒用什么试剂鉴定?
3.完善下面的实验步骤。
花生种子(浸泡后去种皮)切片
↓
制片:取材(材料越薄越好)→染色(苏丹Ⅲ染液,染色3min)→洗去 (用 )→吸去多余酒精→滴加蒸馏水→盖盖玻片
↓
观察(先在 找到花生子叶最薄处,移至 ,将物相调节清晰;换成 。
↓
现象: 。
活动三、蛋白质的检测和观察
1.蛋白质的鉴定选用什么材料?
2.蛋白质用什么试剂检测?如何使用?
3.完善下面的实验步骤
加组织样液2 mL
↓
加双缩脲试剂A液1 mL,摇匀
↓
加双缩脲试剂B液4滴,摇匀
↓
观察(现象: )
4. 变性的蛋白质或蛋白酶处理后蛋白质,能与双缩脲试剂发生紫色反应吗?
活动四、实验总结
1. 实验材料的选择
由于本实验是利用颜色反应鉴定不同的物质,因此在实验的选材上应注意以下两点:
①材料本身应__________________,以免对结果产生干扰。
②材料应富含________________,使现象更明显。
(2) 做还原糖、蛋白质鉴定的实验时,为什么要留出一部分样液?
(3) 为什么斐林试剂要现配现用,不能放置太久?
(4) 使用双缩脲试剂时,为什么B液只加3~4滴而不能过量?
(5) 若要用物理方法鉴定脂肪存在,请叙述鉴定的方法。
(6) 生物组织中还原糖、蛋白质、脂肪的鉴定实验中需要水浴加热的是什么实验?使用显微镜的是什么实验?既不需要水浴加热也不用显微镜观察的是什么实验?
(7) 斐林试剂与双缩脲试剂比较:
类别
斐林试剂
双缩脲试剂
甲液
乙液
A液
B液
成分
鉴定物质
鉴定原理
添加顺序
反应条件
反应现象
【反馈练习】
《自主测评》
【知识框架】
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