精品解析：四川省巴中市南江县实验中学2024-2025学年高二下期3月月考生物试题

南江县实验中学2024-2025学年3月大专题训练试题 高二生物 考试时间：75分钟满分：100分 一、选择题（共60分，每题2分） 1. 泡菜制作中亚硝酸盐含量与食盐浓度的关系如下图，下列有关叙述错误的是（　　） A. 前3天，乳酸菌大量繁殖导致亚硝酸盐生成较快 B. 在制作泡菜的过程中，有机物的干重减少，种类增加 C. 泡菜“咸而不酸”的原因可能与食盐浓度过高，导致不能正常发酵有关 D. 所用的食盐水经煮沸后可除去水中的氧气并杀灭杂菌 【答案】A 【解析】 【详解】A、前3天微生物会将原料中的硝酸盐还原形成亚硝酸盐，因此在发酵初期亚硝酸盐生成较快，而不是乳酸菌大量繁殖导致亚硝酸盐生成较快，A错误； B、制作泡菜过程中，微生物消耗蔬菜中的有机物，使其干重减少，但是由于微生物的代谢活动，有机物的种类会增加，B正确； C、如果食盐浓度过高，会导致乳酸菌失水过多死亡，抑制乳酸菌等微生物的生长和发酵，从而导致泡菜“咸而不酸”，C正确； D、由于乳酸菌是厌氧型微生物，因此所用的食盐水需经煮沸后除去水中的溶解氧，有利于乳酸菌的发酵，同时煮沸还可以杀灭杂菌，防止污染，D正确。 故选A。 2. 下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（ ） A. 图1能表示在果酒的制作过程中时间因素对酵母菌产生酒精速率（V1）的影响 B. 图2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生乙酸速率（V2）的影响 C. 图3能表示在利用乳酸菌制作泡菜的过程中，泡菜坛内乳酸含量的变化趋势 D. 图4能表示在一个普通的密闭锥形瓶中加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化 【答案】D 【解析】 【分析】1、在利用酵母菌发酵时最好是先通入足够的无菌空气在有氧环境下一段时间使其繁殖，再隔绝氧气进行发酵；酒精发酵的最佳温度是在18℃～25℃，pH最好是弱酸性。 2、醋酸菌好氧型细菌，当缺少糖源时和有氧条件下，可将乙醇（酒精）氧化成醋酸；当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；醋酸菌生长的最佳温度是在30℃～35℃。 3、参与腐乳制作的微生物主要是毛霉，其新陈代谢类型是异养需氧型。腐乳制作的原理：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。 【详解】A、酵母菌酿酒初期，进行有氧呼吸，然后进行无氧呼吸，发酵后期由于产物积累，影响酒精发酵，因此曲线先从O点开始上升，再下降，A错误； B、在果醋的制作过程中，溶氧量越多，醋酸菌产生乙酸的速率（V2）越快，B错误； C、在利用乳酸菌制作泡菜过程中，一定时间内泡菜坛内乳酸越来越多，C错误； D、在一个普通的密闭锥形瓶中，加入含酵母菌的葡萄糖溶液，一定时间内随时间的延长，溶液的pH逐渐降低，D正确。 故选D。 3. 如图所示为果酒和果醋的发酵装置，下列有关说法错误的是（ ） A. 在果酒发酵时，若发酵液表面出现菌膜，最可能的原因是充气口漏气 B. 果醋发酵时，需持续通入氧气，促进醋酸生成 C. 该装置必须先进行果酒发酵，再进行果醋发酵 D. 制作果酒、果醋时均需要将排气口的弯管水封 【答案】CD 【解析】 【分析】题图分析：图示为果酒和果醋的发酵装置图，其中出料口的作用是出料、检测；充气口的作用是在果醋制作时通入氧气的；排气口是排气，其弯弯曲曲的好处是防止杂菌和浮尘的污染。 【详解】A、在果酒发酵时，若发酵液表面出现菌膜，是由于醋酸菌活动引起的，而醋酸菌是好氧菌，因此产生该现象的最可能原因是充气口漏气，A正确； B、果醋发酵时，利用的是醋酸菌，醋酸菌是好氧细菌，故需持续通入氧气，促进醋酸生成，B正确； C、该装置在氧气、葡萄糖充足的条件下，也可利用醋酸菌直接进行果醋发酵，C错误； D、排气口的作用是排气，而弯管的设置可防止空气中微生物的污染，故制作果酒、果醋时排气口的弯管不需水封，D错误。 故选CD。 4. 西番莲果皮含有多种对人有益的活性成分，采用二步发酵工艺可以生产酵母菌和复合乳酸杆菌活菌数高、总酚保留好、风味醇和的果皮浆。发酵的第一步：在西番莲果皮中加入酵母菌密封发酵8h；第二步：随后加入复合乳酸杆菌密封发酵24h。下列叙述不正确的是（ ） A. 二步法发酵时复合乳酸杆菌生长曲线的K值与单独培养时相同 B. 第一步酵母菌发酵为复合乳酸杆菌创造了杂菌少、氧含量低等良好条件 C. 酵母菌和复合乳酸杆菌的代谢类型不同，但都能进行二分裂 D. 第一步和第二步发酵液的pH均会下降的原因由同一反应产物引起 【答案】ACD 【解析】 【分析】根据题干信息分析，果皮浆利用的主要是两种微生物（酵母菌和复合乳酸杆菌）的无氧呼吸，其中酵母菌（异养兼性厌氧型）无氧呼吸的产物是酒精和二氧化碳，复合乳酸杆菌（异养厌氧型）无氧呼吸的产物是乳酸，据此分析答题。 【详解】A、环境发生变化时，K值也会发生变化，二步法发酵时，酵母菌的增殖会改变培养液的环境，因此复合乳酸杆菌生长曲线的 Ｋ值与单独培养时不同，A错误； B、酵母菌先进行有氧呼吸消耗氧气，在氧气减少到一定程度时，酵母菌开始进行无氧呼吸，产生酒精和CO2，CO2可以使培养液的pH值减小，酸性条件不利于杂菌生长，而且复合乳酸杆菌是厌氧菌，因此第一步酵母菌发酵为复合乳酸杆菌创造了杂菌少、氧含量低等良好条件，B正确； C、酵母菌的代谢类型是异养兼性厌氧型，复合乳酸杆菌的代谢类型是异养厌氧型，因此酵母菌和复合乳酸杆菌的代谢类型不同；复合乳酸杆菌属于细菌，通过二分裂的方式进行增殖，而酵母菌是真核生物，主要通过有丝分裂进行增殖，C错误； D、第一步发酵时，是CO2使培养液的pH值减小；第二步发酵时，复合乳酸杆菌无氧呼吸产生的乳酸可以使培养液的pH值减小，因此第一步和第二步发酵液的pH下降的原因不是由同一反应产物引起，D错误。 故选ACD。 5. γ-氨基丁酸（GABA）是有助于睡眠、祛毒和醒酒等作用的水溶性氨基酸。下图是腐乳在前发酵和腌制过程中GABA含量的变化，下列叙述错误的是（ ） A. 加盐能够析出豆腐中的水分，抑制杂菌的生长 B. 毛坯中GABA含量因微生物产生的蛋白酶作用而增加 C. 盐坯中GABA含量减少，可能是食盐抑制微生物生长 D. 毛坯中微生物以酵母菌为主，其代谢类型是异养需氧型 【答案】D 【解析】 【分析】腐乳制作的原理是：毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪分解成甘油和脂肪酸。制作腐乳的实验流程为：①豆腐上长出毛霉→②加盐腌制→③加卤汤装瓶→④密封腌制。 【详解】A、在腐乳腌制过程中，加盐能够析出豆腐中的水分，使豆腐块变硬，同时，加盐能抑制杂菌的生长和调节风味，A正确； B、GABA的化学本质是氨基酸，由豆腐中蛋白质水解得到，毛坯中GABA含量因微生物产生的蛋白酶作用而增加，B正确； C、盐坯中GABA含量减少，一方面与食盐抑制毛霉等微生物生长、酶活性降低有关；另一方面，豆腐中的水分渗出，部分GABA因溶于水会随水流失而导致测定值减小，C正确； D、制作腐乳时多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、毛霉、酵母、曲霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉的同化作用类型是异养型，异化作用类型是需氧型，D错误。 故选D。 6. 下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是（ ） A. 为了防止发酵液受污染，应将选取的葡萄先去枝梗，再冲洗多次然后使用 B. 缺氧、呈酸性的发酵液，酵母菌能大量生长繁殖，醋酸菌则不能正常生长 C. 三种发酵过程中都可以通过控制温度促进目的菌的生长繁殖 D. 腐乳制作过程中，有机物种类减少，含有的能量减少 【答案】C 【解析】 【分析】1、参与果醋制作的微生物是醋酸菌，其新陈代谢类型是异养需氧型。果醋制作的原理：当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的果糖分解成醋酸。当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。 2、腐乳的制作利用的微生物主要是毛霉，多种微生物参与了豆腐的发酵，如青霉、酵母、曲霉、毛霉等，其中起主要作用的是毛霉，毛霉等微生物产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸；脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，这些小分子物质有利于人体的消化和吸收。 【详解】A、为了防止发酵液受污染，应将选取的葡萄先冲洗再去枝梗，A错误； B、酵母菌在氧气充足的情况下能大量生长繁殖，缺氧条件下酵母菌主要通过无氧呼吸产生酒精，在缺氧、酸性的发酵液中酵母菌可以存活，而其他微生物则因无法适应这一环境而被抑制，B错误； C、发酵需要适宜的温度，因此三种发酵过程中都可以通过控制温度促进目的菌的生长繁殖，C正确； D、腐乳制作过程毛霉等微生物将豆腐中的蛋白质、脂肪分解成小分子有机物并利用其中一部分能量，因此腐乳制作过程中有机物种类增多，但有机物的干重减少，含有的能量减少，D错误。 故选C。 7. 葡萄酒是以葡萄为原料酿造的一种果酒，可采用传统发酵技术进行家庭制作，也可采用现代发酵技术进行工业化生产。下列关于运用这两项技术生产葡萄酒的叙述，正确的是（ ） A. 发酵产物都必须进行严格的消毒 B. 发酵前都需要对原料进行灭菌 C. 发酵菌种的繁殖都需要有氧环境 D. 发酵环境都可以实现精准控制 【答案】C 【解析】 【分析】果酒的发酵原理均是酵母菌在无氧条件下进行无氧呼吸产生酒精。 【详解】A、发酵产物为乙醇，乙醇能抑制杂菌的生长繁殖，不需要消毒，A错误； B、传统发酵技术利用的是原料自身表面带有的菌种进行发酵，故不能对原料进行灭菌处理，B错误； C、二者的发酵菌种为酵母菌，呼吸方式为兼性厌氧型，其繁殖需要大量的能量，故都需要有氧环境进行有氧呼吸供能，C正确； D、传统发酵技术的发酵环境不能实现精准控制，现代发酵技术进行工业化生产可以，D错误。 故选C。 8. 选育高产、优质的菌种是发酵工程的前提条件，下列不属于发酵工程选育菌种的条件的是（ ） A. 发酵产物需从菌中破碎分离 B. 菌种对环境应没有明显或潜在的伤害 C. 菌种遗传特性和生产能力稳定 D. 能利用充足且廉价的培养基原料 【答案】A 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、火菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。 【详解】A、选育高产、优质菌种需要根据人们的需要进行设计，而发酵产物需从菌中破碎分离不是选育菌种的条件，且发酵产物未必需要菌体破碎后获得，符合题意，A正确； B、菌种对环境应没有明显或潜在的伤害这是选育高产、优质菌种的前提条件，不符合题意，B错误； C、选育出的高产、优质的菌种应该具备遗传特性和生产能力稳定的特征，否则不能投入到生产中，不符合题意，C错误； D、选育出的高产、优质的菌种应该具备能利用充足且廉价的培养基原料的特征，这样才能降低生产成本，获得较高的经济效益，不符合题意，D错误。 故选A。 9. 下列有关发酵工程基本环节的叙述，错误的是（ ） A. 现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，其能使发酵全过程处于最佳状态 B. 在发酵过程中，环境条件的变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢物的形成 C. 发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢物的形成都与搅拌速度无关 D. 确定菌种之后，才能选择原料配制培养基 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种技术。发酵工程的内容包括菌种选育、培养基的配制、灭菌、种子扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯（生物分离工程）等方面。 【详解】A、计算机控制系统可以通过负反馈机制，使发酵罐内的发酵全过程处于最佳状态，A正确； B、发酵过程需要适宜的温度和pH，所以环境条件的变化会对微生物的生长繁殖和发酵产品产生一定的影响，B正确； C、搅拌速度会引起发酵液中的溶氧量不同，从而影响发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢物的形成，C错误； D、不同微生物对营养要求不一样，所以确定菌种之后，才能选择原料配制培养基，D正确。 故选C。 10. 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治疗神经衰弱以及配制营养注射液等。下列有关谷氨酸发酵生产的叙述，错误的是（ ） A. 发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养 B. 若发酵产品是产谷氨酸菌种，可采用过滤等方法分离 C. 发酵过程中，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸 D. 人工控制微生物代谢的唯一措施是控制生产过程中的各种条件 【答案】D 【解析】 【详解】A、发酵前对菌种进行扩大培养是为了增加菌体数量，缩短发酵周期，符合发酵工程的基本流程，A正确； B、若目标产物是菌体本身（如产谷氨酸菌种），可通过过滤、离心等方法将菌体与培养液分离，B正确； C、谷氨酸棒状杆菌在中性（pH=7）或弱碱性（pH≈7.5）条件下，谷氨酸的合成量最大；若环境偏酸性，则会生成谷氨酰胺或乙酰谷氨酰胺，C正确； D、人工控制微生物代谢的途径包括两方面：一是通过诱变育种或基因工程改变菌种的遗传特性，二是控制发酵条件（如温度、pH、溶氧量等），D错误。 故选D。 11. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其传统工业化生产流程如图。制麦、糖化分别为下一工序提供α-淀粉酶、糖浆，其中焙烤时杀死了种子中的胚。下列分析错误的是（ ） A. 若用赤霉素溶液处理大麦种子，无须发芽就能产生α-淀粉酶 B. 焙烤处理杀死活细胞但不致使所含的酶失去活性 C. 啤酒生产的主发酵阶段酵母菌主要进行有氧呼吸 D. 后发酵阶段是在低温、密闭的环境下储存一段时间 【答案】C 【解析】 【分析】啤酒发酵过程分为主发酵和后发酵两个阶段。酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成。主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒。 【详解】A、赤霉素通过促进α-淀粉酶的产生促进种子萌发，因此若用赤霉素溶液处理，可以使大麦种子无须发芽就能产生α-淀粉酶，这样能减少种子萌发对有机物的消耗，进而提高啤酒产量，A正确； B、焙烤时杀死了种子中的胚但不使α-淀粉酶失活，B正确； C、啤酒生产的主发酵阶段酵母菌主要进行无氧呼吸，将糖分解产生酒精，C错误； D、发酵过程中要适时往外排气，主发酵结束后，发酵液还不适合饮用，要在低温、密闭的环境下储存一段时间进行后发酵，这样才能形成澄清、成熟的啤酒，D正确。 故选C。 12. 发酵工程为人类提供多样的发酵产品。下列关于发酵产品的叙述正确的是（ ） A. 发酵生产的食品添加剂可延长食品保存期，不能食用 B. 酱油制作中利用黑曲霉将原料中的蛋白质分解成柠檬酸 C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵生产乙肝疫苗 D. 微生物农药是利用微生物菌体本身防治病虫害，属于生物防治 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。发酵工程在医药、食品、农业、冶金、环境保护等许多领域都得到广泛应用。 【详解】A、发酵生产的食品添加剂，实际上是可以食用的，它们的主要作用是延长食品的保存期，同时也可能改善食品的口感色泽等，A错误； B、黑曲霉在酱油制作过程中主要作用是将原料中的蛋白质分解成氨基酸，而不是柠檬酸。柠檬酸是另一种通过发酵过程可以生产的有机酸，但不是酱油制作中的主要产物，B错误； C、通过基因工程技术将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，然后通过发酵生产乙肝疫苗的过程。这是现代生物技术在医药领域的一个重要应用，通过这种方式生产的乙肝疫苗是安全有效的，C正确； D、微生物农药，实际上是利用微生物本身或其代谢产物来防治病虫害，属于生物防治的范畴，D错误。 故选C。 13. 某工厂利用制糖生产废水和沼气池废料为原料，酵母菌为菌种在连续搅拌反应器中培养酵母菌生产单细胞蛋白。下列说法错误的是（ ） A. 单细胞蛋白含有蛋白质、糖类、脂质和维生素等物质 B. 发酵过程中，通过放料口取样以便随时监测产物浓度等 C. 可采用深层通气液体发酵技术提高单细胞蛋白的产量 D. 发酵结束后，应采用提取、分离和纯化措施以获得产品 【答案】D 【解析】 【分析】发酵工程生产的产品有两类：一类是代谢产物，另一类是菌体本身。产品不同，分离提纯的方法一般不同。①如果产品是菌体，可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来；②如果产品是代谢产物，可用萃取、蒸馏、离子交换等方法进行提取。 【详解】A、单细胞蛋白（微生物菌体）不仅含有丰富的蛋白质，还含有糖类、脂质和维生素等物质，A正确； B、在发酵过程中，通过放料口取样以便随时监测产物浓度等以了解发酵进程，B正确； C、单细胞蛋白是在连续搅拌反应器中培养酵母菌生产的，连续搅拌的目的一是增加溶氧量，促进菌体的有氧呼吸，二是使菌种与培养液充分接触，提高原料的利用率，所以可采用深层通气液体发酵技术提高单细胞蛋白的产量，C正确； D、单细胞蛋白是在连续搅拌反应器中培养酵母菌生产的，是微生物菌体，所以可采用过滤，沉淀等方法将菌体从培养液中分离出来，D错误。 故选D。 14. 木质纤维素水解产物为葡萄糖和木糖。研究者筛选出能利用木糖发酵的酿酒酵母菌株YB，YB能利用可再生木质纤维素生产乙醇，在木质纤维素酶解液的培养基中接种YB进行发酵，得到如下结果： 以下分析错误的是（ ） A. 生产过程中YB优先利用葡萄糖，其次利用木糖 B. 0-24h之间，木质纤维素被酶催化分解为葡萄糖和木糖 C. 可以采用平板划线法统计YB菌株的数量 D. 发酵初期，发酵罐中应该保留适量的氧气 【答案】C 【解析】 【分析】1、接种最常用的方法是平板划线法和稀释涂布平板法。 2、分析题意和图示结果可知，酿酒酵母菌株YB能利用葡萄糖和木糖进行发酵且对酒精耐受能力强。 【详解】A、木质纤维素酶解液的培养基上有葡萄糖和木糖，根据图示结果显示，葡萄糖在48小时时已利用完，而木醇在48小时之后的一段时间浓度在降低， 说明生产过程中YB优先利用葡萄糖，其次利用木糖，A正确； B、图中0-24h之间，葡萄糖和木糖浓度在上升，乙醇含量为0，说明此时木质纤维素被酶催化分解为葡萄糖和木糖，而菌株YB还没有进行发酵，B正确； C、平板划线法可用于分离纯化YB菌株，但不能用于统计YB菌株的数量，C错误； D、酿酒酵母为兼性厌氧型微生物，发酵初期，发酵罐中应该保留适量的氧气，用于其繁殖以增加数量，D正确。 故选C。 15. 微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于无菌技术的叙述错误的是（ ） A. 通过煮沸消毒法可以杀死所有病原微生物及其芽孢 B. 实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒 C. 吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌 D. 接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌 【答案】A 【解析】 【分析】无菌操作技术有消毒和灭菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化学药剂消毒法，灭菌有灼烧灭菌法，适用于接种工具、干热灭菌法适用于玻璃器皿和金属工具、高压蒸汽灭菌法适用于培养基及容器的灭菌。 【详解】A、煮沸消毒法不能杀死所有病原微生物及其芽孢，A错误； B、实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒，以杀死微生物，B正确； C、吸管和培养皿通常采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌，也可用干热灭菌法进行，C正确； D、接种环、试管口等实验中频繁使用的常使用灼烧灭菌法，D正确。 故选A。 16. 下列关于酵母菌纯培养叙述，正确的是（ ） A. 微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌 B. 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞后直接放入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌 C. 接种环在火焰上灼烧灭菌后，立即蘸取菌液在培养基表面连续划线以分离纯化菌种 D. 稀释涂布平板法可以估算酵母菌数量，且估算值偏大 【答案】A 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌，A正确； B、将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞，包上牛皮纸并用牛皮筋勒紧后再放入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌处理，B错误； C、接种环在火焰上灼烧灭菌冷却后再蘸取一环菌液在培养基表面通过连续划线而分离纯化菌种，C错误； D、平板划线法和稀释涂布平板法都能分离、纯化菌种，但稀释涂布平板法还可以统计菌种数目，且统计值偏小，D错误。 故选A。 17. 某实验小组要对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数。下列叙述错误的是（ ） A. 取土壤时，一般要铲去表层土 B. 应每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果 C. 测定土壤中细菌的数量，一般选用101～107倍的稀释液进行平板培养 D. 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液的一个活菌 【答案】C 【解析】 【分析】稀释涂布平板计数是根据微生物在固体培养基上所形成的单个菌落，即是由一个单细胞繁殖而成这一培养特征设计的计数方法，即一个菌落代表一个单细胞。 计数时，首先将待测样品制成均匀的系列稀释液，尽量使样品中的微生物细胞分散开，使成单个细胞存在(否则一个菌落就不只是代表一个细胞)，再取一定稀释度、一定量的稀释液接种到平板中，使其均匀分布于平板中的培养基内。经培养后，由单个细胞生长繁殖形成菌落，统计菌落数目，即可计算出样品中的含菌数。 【详解】A、土壤中的细菌，绝大多数分布在距离地表约3~8cm的土壤中，因此在取样时一般要铲去表层土，A正确； B、每隔24小时统计一次菌落数目，并选取菌落数目稳定时的记录作为结果，这是因为在培养过程中，菌落数目会随着时间的推移而增加，直到达到一个稳定的状态，此时的记录可以更准确地反映样品中微生物的数量，B正确； C、测定土壤中细菌的数量，一般选用 1×104 、 1×105 和1×106倍稀释的稀释液进行平板培养，C错误； D、当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液的一个活菌，这是微生物学中的一个基本原理，即稀释平板法，通过足够的稀释，可以确保每个菌落都来源于一个活菌，D正确。 故选C。 18. 通过选择培养或鉴别培养的方法可筛选出目标培养物。下列叙述错误的是（ ） A. 在培养基中加入高浓度的氯化钠，可筛选出嗜盐菌 B. 在含有刚果红的培养基上，纤维素分解菌菌落周围会出现抑菌圈 C. 利用不含碳源的培养基可以筛选出自养微生物 D. 可用伊红-亚甲蓝培养基筛选出具有深紫色金属光泽的大肠杆菌菌落 【答案】B 【解析】 【分析】选择培养基是依据某些微生物对某些物质的特殊需求或抗性而设计，可用来培养、分离出特定微生物；鉴别培养基中能产生特定的颜色或其他变化，用来鉴别不同种类的微生物。 【详解】A、由于嗜盐菌能耐受高浓度的盐溶液，所以在培养基中加入高浓度的氯化钠，可筛选出嗜盐菌，A正确； B、刚果红能与培养基中的纤维素形成红色复合物，当纤维素被纤维素分解菌产生的纤维素酶分解后，刚果红—纤维素的复合物就无法形成，培养基中会出现以纤维素分解菌为中心的透明圈，B错误； C、自养微生物能将空气中的CO2合成有机物，故利用不含碳源的培养基可以筛选出自养微生物，C正确； D、伊红美蓝培养基常用来鉴别大肠杆菌，其原理是大肠杆菌能分解乳糖产生大量的混合酸，菌体带H+，故菌落被染成深紫色，从菌落表面的反射光中还可以看到金属光泽，D正确。 故选B。 19. 兴趣小组对枯草芽孢杆菌进行纯培养，结果如图。下列叙述正确的是（　　） A. 实验采用稀释涂布平板法进行接种 B. 接种时，顺序应为①→②→③→④ C. 培养时，应将接种后的平板倒置 D. 获得单菌落的理想区域是②区域 【答案】C 【解析】 【分析】常用的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，后者还可以用于菌落的计数。 【详解】A、图示接种方法为平板划线法，A错误； B、根据图中细菌数目的多少，①中出现单菌落，所以划线顺序是④→③→②→①，B错误； C、接种后，应该将平板导致，防止冷凝水进入培养基，C正确； D、获得单菌落的理想区域是①区域 ，得到单独菌落，D错误。 故选C。 20. L-天冬酰胺酶由细菌和真菌合成，可分解天冬酰胺释放出氨，然后与奈斯勒试剂反应呈棕色。为筛选获得L-天冬酰胺酶高产菌株，设计了如下固体培养基。固体培养基：主要成分有牛肉膏、蛋白胨、水、NaCl、琼脂、奈斯勒试剂。实验结果如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 根据实验结果可知，接种时采用的是稀释涂布平板法 B. 应选择菌落C作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养 C. 该培养基从功能来看属于选择培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏 D. 无菌技术还可以避免操作者被有害微生物感染，实验结束后的培养基不能直接丢弃 【答案】C 【解析】 【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法，将已经灭菌的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在划线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法，将待分离的菌液经过适合的稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、从接种结果来看，菌落分布较为均匀，应该采用的是稀释涂布平板法，A正确； B、菌落B和菌落C周围棕色圈的直径相同，但C的菌落直径更小，因此菌落C的单个细胞产生的L-天冬酰胺酶更多，应选择菌落C作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养，B正确； C、培养基中加入有奈斯勒试剂，若微生物能产生L-天冬酰胺酶则菌落周围会出现棕色圈，因此该培养基从功能来看属于鉴别培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏和蛋白胨，C错误； D、无菌技术可用来防止实验室的培养物被其他外来微生物污染，还可以避免操作者被有害微生物感染，但实验结束后为避免环境污染，培养基在丢弃前要进行灭菌处理，D正确。 故选C。 21. 野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法错误是（　　） A. ①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸 B. 野生型大肠杆菌能够合成赖氨酸，培养基中亦需提供氮源 C. 需将①中的菌液适当稀释后，用涂布器在②上进行涂布接种 D. 从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株 【答案】D 【解析】 【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。培养基种类：培养基按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。微生物的接种方法：平板划线法和稀释涂布平板法。①平板划线法：通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基表面。②稀释涂布平板法：将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。 【详解】A、紫外线照射菌液，使大肠杆菌产生基因突变，便于筛选赖氨酸营养缺陷突变株，由于基因突变频率较低，且不定向，因此发生突变的菌种不多，因此需要在①中添加赖氨酸来增大该突变株浓度，以便进行稀释涂布操作，②④中添加赖氨酸目的是使赖氨酸营养缺陷突变株能够在该培养基上生长，③不添加赖氨酸，赖氨酸营养缺陷突变株不能在其上繁殖形成菌落，通过③④对比，选择能在④中生长但是不能在③中生长的菌落即为赖氨酸营养缺陷突变株，故①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸，A正确； B、野生型大肠杆菌不能够合成所需的全部氨基酸，并且还有别的有机物需要氮元素，因此培养基中需要提供氮源，B正确； C、需将①中的菌液适当稀释后，用微量移液器吸取少量菌液，用涂布器在②上进行涂布接种，C正确； D、③中未添加赖氨酸，④中添加赖氨酸，经③④对比，④上的甲菌落为赖氨酸营养缺陷突变株形成的菌落，因此从④培养基中挑取甲菌落进行纯化培养即可获得所需突变株，D错误。 故选D。 22. 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，错误的是（ ） 菌种 菌落直径：C（mm） 透明圈直径：H（mm） H/C 细菌I 5.1 11.2 2.2 细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6 A. 培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B. 筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C. 细菌I、II均会产生透明圈，说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉 D. 细菌II的透明圈直径更大，说明其产生的淀粉酶分解的淀粉相对较多 【答案】D 【解析】 【分析】1、培养基的营养构成： ①各种培养基的具体配方不同，但一般都含有水、碳源、氮源和无机盐； ②不同培养基还要满足不同微生物对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 2、据图分析：图示接种方法为稀释涂布平板法，菌种Ⅰ分解淀粉的能力更强。 【详解】A、培养基一般含有碳源、氮源、水、无机盐和生长因子等成分，A正确； B、筛选淀粉分解菌时，需要对菌液进行一系列的梯度稀释，再将不同稀释度的菌液分别涂布到固体培养基上进行培养，B正确； C、由题意可知，题中两种菌均会产生透明圈，说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉，C正确； D、淀粉分解菌的H/C值越大，说明其产生的淀粉酶分解的淀粉相对越多，可说明该淀粉分解菌分解淀粉的能力越强，D错误。 故选D。 23. 玉扇是一种深受人们喜爱的多肉植物，以其肉质叶片呈扇形排列而闻名。科学家用组织培养技术实现玉扇的大规模培育。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用酒精对离体的玉扇组织消毒的时间越长，培育效果越好 B. 利用组织培养技术培养可以保持玉扇优良品种的遗传特性 C. 组织培养过程中培养基内添加的关键激素是生长素和细胞分裂素 D. 玉扇组织培养过程中用到的培养基及其他器械均需要灭菌处理 【答案】A 【解析】 【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（微型繁殖、作物脱毒、人工种子）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。 【详解】A、用酒精对离体的玉扇组织消毒时，持续的时间不能太长，否则容易杀死外植体细胞，A错误； B、利用组织培养技术培养可以实现玉扇优良品种的快速繁殖，还可以保持玉扇优良品种的遗传特性，B正确； C、决定植物脱分化和再分化的关键因素是植物激素的种类和比例，特别是生长素和细胞分裂素，因此用组织培养技术培育玉扇过程中的关键激素是生长素和细胞分裂素，C正确； D、玉扇组织培养过程中用到的培养基及其他器械均需要灭菌处理，D正确。 故选A。 24. 植物组织培养的不同阶段均涉及对光照的控制。下列叙述错误的是（ ） A. 脱分化过程通常需要避光，有利于愈伤组织的形成和生长 B. 再分化过程通常需提供光，无光条件下形成的试管苗一般为黄化苗 C. 在有光照的条件下培养植物组织，培养基中无需添加有机物成分 D. 光既是培养物光合作用的能量来源，也是调节培养物生长发育的信号 【答案】C 【解析】 【分析】植物组织培养的原理是植物细胞具有全能性，其过程为：离体的植物组织，器官或细胞经过脱分化过程形成愈伤组织（高度液泡化，无定形状态薄壁细胞组成的排列疏松、无规则的组织)，愈伤组织经过再分化过程形成胚状体，进一步发育成为植株。 【详解】A、脱分化过程通常需要避光，有利于愈伤组织的形成和生长，A正确； B、再分化过程通常需提供光，无光条件下形成的试管苗一般为黄化苗，B正确； C、在有光照的条件下培养植物组织，培养基中需添加有机物成分，C错误； D、光既是培养物光合作用的能量来源，也是调节培养物生长发育的信号，D正确。 故选C。 25. 研究者应用原生质体融合技术，利用光合细菌与嗜热菌选育出了耐高温的光合细菌。下列有关叙述不正确的是（　　） A. 用纤维素酶和果胶酶处理可得原生质体 B. 用聚乙二醇诱导原生质体融合 C. 细菌原生质体融合的原理是细胞膜的流动性 D. 取样后用低渗溶液可对去壁的细菌比例进行鉴定 【答案】A 【解析】 【分析】细菌细胞壁的成分与植物细胞壁的成分不同，原生质体融合技术一般包括去壁、促融等过程。 【详解】A、光合细菌与嗜热菌都是原核生物，它们含有细胞壁，因此融合前要先去除细胞壁，但原核生物细胞壁的主要成分是肽聚糖，不能用纤维素酶和果胶酶去除，A错误； B、诱导细胞融合时，可采用物理方法（如电激、振荡、离心）和化学方法（如聚乙二醇），B正确； C、细胞融合的原理是细胞膜的流动性，C正确； D、去壁的细菌缺失细胞壁，在低渗溶液中会吸水膨胀甚至涨破，而未去壁细菌有细胞壁的保护，在低渗溶液中不会吸水涨破，所以用低渗溶液可对去壁的细菌比例进行鉴定，D正确。 故选A。 26. 中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述不正确的是（　　） A. 组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生不定向突变 B. 过程①在接种前，外植体常用无水乙醇和次氯酸钠溶液消毒 C. ②③④过程添加的植物激素浓度和比例不相同 D. 筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分 【答案】B 【解析】 【分析】植物组织培养是指将离体的植物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术，主要包括脱分化和再分化两个步骤。 【详解】A、植物组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生突变，但突变是不定向的，A正确； B、消毒通常使用体积分数为70%的酒精，不用无水乙醇，B错误； C、②③④过程添加的植物激素种类相同，但浓度和比例不同，C正确； D、筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术进行细胞产物的工厂化生产，培养生产药用成分，D正确。 故选B。 27. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 菊花组织培养的全过程无菌操作至关重要，所用到的材料、仪器均需灭菌处理 B. 培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C. 为防止杂菌污染，从接种外植体到生成试管苗尽量在同一个锥形瓶内完成 D. 组培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培养基 【答案】D 【解析】 【分析】植物组织培养过程是：离体的植物器官、组织或细胞脱分化形成愈伤组织，然后再分化生成根、芽，最终形成植物体。植物组织培养依据的原理是植物细胞的全能性。 【详解】A、自然生长茎段的消毒属于外植体消毒不能灭菌，先用70%乙醇，再用无菌水清洗，再用5%次氯酸钠消毒处理，最后再用无菌水清洗，A错误； B、培养瓶用专用封口膜封口的目的是防止杂菌污染，并不影响气体交换，B错误； C、接种外植体到生成试管苗不能在同一个锥形瓶中完成，因为脱分化和再分化的条件以及培养基都不一样，C错误； D、组培苗需要经过炼苗过程，组培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培养基，D正确。 故选D。 28. 野生铁皮石斛是名贵的中药，因过度利用被列为国家重点保护植物。某科研团队利用植物细胞工程技术进行了种苗培育和有效物质工厂化生产的研究。下列说法错误的是（ ） A. 愈伤组织再分化形成的芽产生的生长素会抑制愈伤组织生根 B. 工厂化生产铁皮石斛的有效物质有利于其遗传多样性的保护 C. 酒精和次氯酸钠处理后用无菌水清洗可降低两者对外植体的伤害 D. 生长素和细胞分裂素是启动外植体细胞分裂和脱分化的关键激素 【答案】A 【解析】 【分析】植物组织培养是指将离体的植 物器官、组织或细胞等，培养在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。这些离体培养的植物器官、组织或细胞被称为外植体。 【详解】A、愈伤组织再分化形成的芽产生的生长素会促进愈伤组织生根，A错误； B、野生铁皮石斛是名贵的中药，工厂化生产铁皮石斛的有效物质有利于其遗传多样性的保护，B正确； C、酒精和次氯酸钠作为消毒剂，长时间处理会毒害外植体，故酒精和次氯酸钠处理后用无菌水清洗可降低两者对外植体的伤害，C正确； D、生长素促进生根，细胞分裂素促进细胞分裂，生长素和细胞分裂素是启动外植体细胞分裂和脱分化的关键激素，D正确。 故选A。 29. 为实现多肉植物的规模化生产，科研人员开展了如下研究。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①宜选择幼嫩叶片，依次用次氯酸钠和70%的酒精浸泡30分钟 B. 过程②培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于愈伤组织分化 C. 过程③芽、根的诱导过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照 D. 过程④应在珍珠岩基质中添加适量蔗糖和植物激素，为幼苗生长提供碳源 【答案】C 【解析】 【分析】在植物组织培养时，通过调节生长素和细胞分裂素的比值能影响愈伤组织分化出根或芽．生长素用量比细胞分裂素用量，比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成；比值低时，有利于芽的分化、抑制根的形成；比值适中时，促进愈伤组织的生长。 【详解】A、过程①选取的叶片应该在70%的酒精浸泡30s后，立即取出，用无菌水清洗2~3次，再用次氯酸钠溶液处理30min后，立即用无菌水清洗2~3次，A错误； B、过程②的培养基中需添加比值适中的细胞分裂素和生长素，以利于形成愈伤组织，B错误； C、诱导愈伤组织期间一般不需要光照，在芽、根的诱导过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照，C正确； D、过程④将试管苗移植到消过毒的珍珠岩基质中，是为了试管苗适应外界环境，再移栽到土壤中；试管苗能进行光合作用合成有机物，不需要在珍珠岩基质中添加碳源，D错误。 故选C。 30. 黑胫病对甘蓝型油菜的危害十分严重，黑芥能抗黑胫病，两者不能直接杂交。为解决该问题，科研人员通过下图所示过程获得抗病品系。据图分析，下列相关叙述错误的是（ ） A. 最终获得的抗病植株具有完整的甘蓝型油菜和黑芥的遗传信息 B. 过程①可使用纤维素酶和果胶酶，过程②可利用PEG进行诱导 C. 过程③发生脱分化，过程④体现出植物细胞具有全能性 D. 黑芥与甘蓝型油菜存在生殖隔离 【答案】A 【解析】 【分析】据图分析可知，图示为采用植物体细胞杂交技术和植物组织培养技术获得抗黑胫病杂种植株的流程图，图中①表示采用酶解法(纤维素酶和果胶酶)去除细胞壁的过程；②表示诱导原生质体融合的过程。原生质体融合后利用植物组织培养技术得到杂种植株。 【详解】A、黑芥的叶肉细胞原生质体经X射线照射后发生部分染色体结构破坏，因而最终获得的抗病植株不具有完整的黑芥的遗传信息，A错误； B、过程①表示去除细胞壁的过程，可以用纤维素酶和果胶酶处理；过程②表示诱导原生质体融合的过程，可利用PEG进行诱导，B正确； C、融合后的原生质体经过诱导长出细胞壁，经过程③发生脱分化和过程④后形成抗病植株，由杂种细胞培育成完整植株的过程体现出植物细胞具有全能性，C正确； D、根据题意可知，黑芥与甘蓝型油菜不能直接杂交，说明两者存在生殖隔离，D正确。 故选A。 二、非选择题（共40分） 31. 石油泄漏会对给周边生态环境带来严重的损害，还将影响居民的健康生活。为解决石油污染问题，某科研小组尝试从被石油严重污染的土壤中分离出能高效分解石油的细菌，过程如下图所示。回答下列问题： （1）防止杂菌污染是研究和应用微生物的前提，对培养基和涂布器常用的灭菌方法分别是__________。过程③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是____________________。 （2）进行过程④之前，常需要检验培养基平板灭菌是否合格，方法是____________________。 （3）通过统计过程④培养基中菌落数，可对石油分解菌进行计数原理是__________。某同学用该法进行操作时，将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为49、58和52，据此可得出每升该样品中的活菌数为__________。 （4）为筛选出高效分解石油的细菌，进行过程④→⑤的操作思路是__________。 【答案】（1） ①. 湿热灭菌（高压蒸汽灭菌）、灼烧灭菌 ②. 以石油为唯一碳源 （2）将未接种的平板倒置于恒温箱中培养24h，观察是否有菌落出现 （3） ①. 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个活菌 ②. 5．3×107 （4）从过程④的培养基中挑选单菌落，分别接种于过程⑤的液体培养基中，一段时间后测定并比较石油的剩余量 【解析】 【分析】1、在微生物学中，将允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基，称做选择培养基。 2、统计菌落数目的方法： （1）显微镜直接计数法 ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。 （2）间接计数法（活菌计数法） ①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数；③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 【小问1详解】 常采用高压蒸汽灭菌法对培养基进行灭菌，采用灼烧灭菌法对涂布器进行灭菌。由题干信息分析可知，该实验的目的是分离和纯化高效分解石油的细菌，故步骤③的培养基成分与普通液体培养基相比，步骤③培养基为选择培养基，最大的区别是步骤③培养基中以石油为唯一碳源，从而分离出能分解石油的细菌。 【小问2详解】 进行过程④之前常需要检验培养基平板灭菌是否合格的方法是：随机取若干灭菌后的平板倒置于恒温箱中培养24h，观察是否有菌落出现：若有菌落出现，则证明灭菌不合格。 【小问3详解】 过程④为通过稀释涂布平板法对石油分解菌进行计数，其原理是当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中一个活菌。将1mL样品稀释100倍在3个平板上分别接人0.1mL稀释液；经适当培养后3个平板上的菌落数分别为49、58和52，据此可得出每升样品中的活菌数为（49+58+52）÷3÷0.1×1000×100=5.3×107（个）。 【小问4详解】 为筛选出高效分解石油的细菌，可从过程④的培养基中挑选单菌落，分别接种于过程⑤的液体培养基中，一段时间后测定并比较石油的剩余量，石油剩余量越少说明其分解石油的效率越高。 32. 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜鼓胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜鼓胀病的发生。研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗鼓胀病的新型苜蓿。 （注：R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同。） （1）培育抗鼓胀病的新型苜蓿依据的生物学原理有__________。培养原生质体时，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是__________。 （2）在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是____________________。 （3）步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中__________是影响植物细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。 （4）科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对紫花苜蓿和百脉根原生质体融合率的影响，实验结果如下图。异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率，已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用。 ①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外，还可以利用的化学方法是__________。 ②实验结果表明诱导苜蓿与百脉根原生质体融合的最佳PEG浓度为__________，理由是__________。 【答案】（1） ①. 细胞膜的流动性和植物细胞的全能性 ②. 保持原生质体的完整性 （2）将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况 （3）细胞分裂素和生长素的浓度和比例 （4） ①. 高Ca2+—高pH融合 ②. 35% ③. 该浓度下异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低对细胞的毒害作用较小 【解析】 【分析】植物体细胞杂交是指将不同来源的植物体细胞，在一定条件下融合成杂种细胞，进而利用植物组织培养技术将杂种细胞培育成杂种植株。植物体细胞杂交依据的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。 【小问1详解】 由图可知，培育抗鼓胀病的新型苜蓿采用的是植物体细胞杂交技术，该生物技术的原理是细胞膜的流动性和植物细胞的全能性。将植物细胞的细胞壁去除即可获得原生质体。培养原生质体时，为了防止原生质体吸水涨破，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是保持原生质体的完整性。 【小问2详解】 在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，由于需要获得具体的浓度，因此需要将获取的原生质体分别放置在不同浓度的R-6G或IOA溶液中，培养一段时间后，观察原生质体再生情况，根据再生情况获得各自的临界值。 【小问3详解】 步骤②是脱分化，步骤③是再分化。步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中细胞分裂素和生长素的浓度和比例是影响植物细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。 【小问4详解】 ①诱导原生质体融合的化学法包括聚乙二醇（PEG）融合法、高Ca2+—高pH融合法等。 ②已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用。分析柱形图可知：当PEG浓度为35%时，异源融合率最高，同时PEG浓度相对较低，对细胞的毒害作用较小，因此诱导苜蓿与百脉根原生质体融合的最佳PEG浓度为35%。 33. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（即免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性抗体的部分过程；图2是某双特异性抗体的作用示意图。请分析回答下列问题： （1）图1中过程①需多次注射癌胚抗原，目的是__________。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是__________，过程②选用的骨髓瘤细胞__________（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 （2）如图1所示，杂交瘤杂交法是将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合，目的是为了获得__________的抗体。 （3）体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为__________、__________等因素而导致分裂受阻，需进行传代培养。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是__________。 【答案】（1） ①. 刺激小鼠产生更多的能产生特定抗体的B淋巴细胞 ②. 灭活的病毒诱导 ③. 不能 （2）既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合 （3） ①. 营养物质缺乏 ②. 有害代谢物积累 （4）双特异性单克隆抗体能特异性结合肿瘤细胞，实现长春碱对肿瘤细胞的选择性杀伤 【解析】 【分析】根据题图1分析：双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物） 的双特异性单克隆抗体。 【小问1详解】 图1中①步骤多次注射癌胚抗原的目的是发生多次免疫反应，刺激小鼠产生更多的已免疫的B淋巴细胞。动物细胞融合与植物原生质体融合的基本原理相同，诱导动物细胞融合的常用方法有PEG融合法、电融合法和灭活病毒诱导法等，动物细胞融合特有的方法是灭活病毒诱导法。小鼠B淋巴细胞在HAT培养基上可正常存活，但不能繁殖，骨髓瘤细胞在HAT培养基上无法生长，骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖。 小问2详解】 为了获得既能与长春碱结合，又能与肿瘤细胞结合的抗体，需要将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合获得杂交瘤细胞。 【小问3详解】 体外培养单克隆杂交瘤细胞，由于营养物质缺乏、有害代谢物的积累等因素，导致分裂受阻，需进行传代培养。 【小问4详解】 与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是双特异性单克隆抗体能特异性结合肿瘤细胞膜表面抗原，将长春碱靶向运输至肿瘤细胞所在位置，在原位杀死肿瘤细胞，不对其他正常细胞造成损伤。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 南江县实验中学2024-2025学年3月大专题训练试题 高二生物 考试时间：75分钟满分：100分 一、选择题（共60分，每题2分） 1. 泡菜制作中亚硝酸盐含量与食盐浓度关系如下图，下列有关叙述错误的是（　　） A. 前3天，乳酸菌大量繁殖导致亚硝酸盐生成较快 B. 在制作泡菜的过程中，有机物的干重减少，种类增加 C. 泡菜“咸而不酸”的原因可能与食盐浓度过高，导致不能正常发酵有关 D. 所用的食盐水经煮沸后可除去水中的氧气并杀灭杂菌 2. 下列关于传统发酵技术的说法中，正确的是（ ） A. 图1能表示在果酒的制作过程中时间因素对酵母菌产生酒精速率（V1）的影响 B. 图2能表示在果醋的制作过程中溶氧量对醋酸菌产生乙酸速率（V2）的影响 C. 图3能表示在利用乳酸菌制作泡菜的过程中，泡菜坛内乳酸含量的变化趋势 D. 图4能表示在一个普通的密闭锥形瓶中加入含酵母菌的葡萄糖溶液，溶液的pH随时间的变化 3. 如图所示为果酒和果醋的发酵装置，下列有关说法错误的是（ ） A. 在果酒发酵时，若发酵液表面出现菌膜，最可能的原因是充气口漏气 B. 果醋发酵时，需持续通入氧气，促进醋酸生成 C. 该装置必须先进行果酒发酵，再进行果醋发酵 D. 制作果酒、果醋时均需要将排气口的弯管水封 4. 西番莲果皮含有多种对人有益的活性成分，采用二步发酵工艺可以生产酵母菌和复合乳酸杆菌活菌数高、总酚保留好、风味醇和的果皮浆。发酵的第一步：在西番莲果皮中加入酵母菌密封发酵8h；第二步：随后加入复合乳酸杆菌密封发酵24h。下列叙述不正确的是（ ） A. 二步法发酵时复合乳酸杆菌生长曲线的K值与单独培养时相同 B. 第一步酵母菌发酵为复合乳酸杆菌创造了杂菌少、氧含量低等良好条件 C. 酵母菌和复合乳酸杆菌的代谢类型不同，但都能进行二分裂 D. 第一步和第二步发酵液的pH均会下降的原因由同一反应产物引起 5. γ-氨基丁酸（GABA）是有助于睡眠、祛毒和醒酒等作用的水溶性氨基酸。下图是腐乳在前发酵和腌制过程中GABA含量的变化，下列叙述错误的是（ ） A. 加盐能够析出豆腐中的水分，抑制杂菌的生长 B. 毛坯中GABA含量因微生物产生的蛋白酶作用而增加 C. 盐坯中GABA含量减少，可能是食盐抑制微生物生长 D. 毛坯中微生物以酵母菌为主，其代谢类型是异养需氧型 6. 下列关于果酒、果醋和腐乳制作的叙述，正确的是（ ） A. 为了防止发酵液受污染，应将选取的葡萄先去枝梗，再冲洗多次然后使用 B. 缺氧、呈酸性的发酵液，酵母菌能大量生长繁殖，醋酸菌则不能正常生长 C. 三种发酵过程中都可以通过控制温度促进目的菌的生长繁殖 D. 腐乳制作过程中，有机物种类减少，含有的能量减少 7. 葡萄酒是以葡萄为原料酿造一种果酒，可采用传统发酵技术进行家庭制作，也可采用现代发酵技术进行工业化生产。下列关于运用这两项技术生产葡萄酒的叙述，正确的是（ ） A. 发酵产物都必须进行严格的消毒 B. 发酵前都需要对原料进行灭菌 C. 发酵菌种的繁殖都需要有氧环境 D. 发酵环境都可以实现精准控制 8. 选育高产、优质的菌种是发酵工程的前提条件，下列不属于发酵工程选育菌种的条件的是（ ） A. 发酵产物需从菌中破碎分离 B. 菌种对环境应没有明显或潜在的伤害 C. 菌种遗传特性和生产能力稳定 D. 能利用充足且廉价的培养基原料 9. 下列有关发酵工程基本环节的叙述，错误的是（ ） A. 现代发酵工程使用的大型发酵罐均具有计算机控制系统，其能使发酵全过程处于最佳状态 B. 在发酵过程中，环境条件的变化不仅会影响微生物的生长繁殖，也会影响微生物的代谢物的形成 C. 发酵罐中微生物的生长繁殖、代谢物的形成都与搅拌速度无关 D. 确定菌种之后，才能选择原料配制培养基 10. 谷氨酸除用于制造味精外，还可以用来治疗神经衰弱以及配制营养注射液等。下列有关谷氨酸发酵生产的叙述，错误的是（ ） A. 发酵之前要对谷氨酸菌种进行扩大培养 B. 若发酵产品是产谷氨酸菌种，可采用过滤等方法分离 C. 发酵过程中，在中性和弱碱性条件下会积累谷氨酸 D. 人工控制微生物代谢的唯一措施是控制生产过程中的各种条件 11. 啤酒是以大麦为主要原料经酵母菌发酵制成的，其传统工业化生产流程如图。制麦、糖化分别为下一工序提供α-淀粉酶、糖浆，其中焙烤时杀死了种子中的胚。下列分析错误的是（ ） A. 若用赤霉素溶液处理大麦种子，无须发芽就能产生α-淀粉酶 B. 焙烤处理杀死活细胞但不致使所含的酶失去活性 C. 啤酒生产的主发酵阶段酵母菌主要进行有氧呼吸 D. 后发酵阶段是在低温、密闭的环境下储存一段时间 12. 发酵工程为人类提供多样的发酵产品。下列关于发酵产品的叙述正确的是（ ） A. 发酵生产的食品添加剂可延长食品保存期，不能食用 B. 酱油制作中利用黑曲霉将原料中的蛋白质分解成柠檬酸 C. 将乙型肝炎病毒的抗原基因转入酵母菌，再通过发酵生产乙肝疫苗 D. 微生物农药是利用微生物菌体本身防治病虫害，属于生物防治 13. 某工厂利用制糖生产废水和沼气池废料为原料，酵母菌为菌种在连续搅拌反应器中培养酵母菌生产单细胞蛋白。下列说法错误的是（ ） A. 单细胞蛋白含有蛋白质、糖类、脂质和维生素等物质 B. 发酵过程中，通过放料口取样以便随时监测产物浓度等 C. 可采用深层通气液体发酵技术提高单细胞蛋白的产量 D. 发酵结束后，应采用提取、分离和纯化措施以获得产品 14. 木质纤维素水解产物为葡萄糖和木糖。研究者筛选出能利用木糖发酵的酿酒酵母菌株YB，YB能利用可再生木质纤维素生产乙醇，在木质纤维素酶解液的培养基中接种YB进行发酵，得到如下结果： 以下分析错误的是（ ） A. 生产过程中YB优先利用葡萄糖，其次利用木糖 B. 0-24h之间，木质纤维素被酶催化分解为葡萄糖和木糖 C. 可以采用平板划线法统计YB菌株的数量 D. 发酵初期，发酵罐中应该保留适量的氧气 15. 微生物的实验室培养要进行严格的灭菌和消毒。下列关于无菌技术的叙述错误的是（ ） A. 通过煮沸消毒法可以杀死所有病原微生物及其芽孢 B. 实验操作者接种前要用70%的酒精棉球擦手消毒 C. 吸管和培养皿通常采用干热灭菌法进行灭菌 D. 接种环、试管口通过灼烧灭菌法进行灭菌 16. 下列关于酵母菌纯培养的叙述，正确的是（ ） A. 微生物的纯培养步骤包括制备培养基、接种和分离酵母菌、培养酵母菌 B. 将配制好的培养基转移到锥形瓶中，加上棉塞后直接放入高压蒸汽灭菌锅进行灭菌 C. 接种环在火焰上灼烧灭菌后，立即蘸取菌液在培养基表面连续划线以分离纯化菌种 D. 稀释涂布平板法可以估算酵母菌数量，且估算值偏大 17. 某实验小组要对土壤中分解尿素的细菌进行分离和计数。下列叙述错误的是（ ） A. 取土壤时，一般要铲去表层土 B. 应每隔24h统计一次菌落数目，选取菌落数目稳定时的记录作为结果 C. 测定土壤中细菌的数量，一般选用101～107倍的稀释液进行平板培养 D. 当样品稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液的一个活菌 18. 通过选择培养或鉴别培养的方法可筛选出目标培养物。下列叙述错误的是（ ） A. 在培养基中加入高浓度的氯化钠，可筛选出嗜盐菌 B. 在含有刚果红的培养基上，纤维素分解菌菌落周围会出现抑菌圈 C. 利用不含碳源的培养基可以筛选出自养微生物 D. 可用伊红-亚甲蓝培养基筛选出具有深紫色金属光泽的大肠杆菌菌落 19. 兴趣小组对枯草芽孢杆菌进行纯培养，结果如图。下列叙述正确的是（　　） A. 实验采用稀释涂布平板法进行接种 B. 接种时，顺序应为①→②→③→④ C. 培养时，应将接种后的平板倒置 D. 获得单菌落的理想区域是②区域 20. L-天冬酰胺酶由细菌和真菌合成，可分解天冬酰胺释放出氨，然后与奈斯勒试剂反应呈棕色。为筛选获得L-天冬酰胺酶高产菌株，设计了如下固体培养基。固体培养基：主要成分有牛肉膏、蛋白胨、水、NaCl、琼脂、奈斯勒试剂。实验结果如下图。下列叙述错误的是（　　） A. 根据实验结果可知，接种时采用的是稀释涂布平板法 B. 应选择菌落C作为高产L-天冬酰胺酶菌株进行大量培养 C. 该培养基从功能来看属于选择培养基，其中充当氮源的成分是牛肉膏 D. 无菌技术还可以避免操作者被有害微生物感染，实验结束后的培养基不能直接丢弃 21. 野生型大肠杆菌菌株能在基本培养基上生长，赖氨酸营养缺陷型突变菌由于发生基因突变只能在添加了赖氨酸的培养基上生长。下图为以野生型菌株为材料，诱变、纯化赖氨酸营养缺陷突变株的部分流程图，数字代表培养基，A、B、C表示操作步骤。下列有关说法错误是（　　） A. ①②④培养基中需添加赖氨酸，而③培养基中不能添加赖氨酸 B. 野生型大肠杆菌能够合成赖氨酸，培养基中亦需提供氮源 C. 需将①中的菌液适当稀释后，用涂布器在②上进行涂布接种 D. 从④培养基中挑取乙菌落进行纯化培养即可获得所需突变株 22. 筛选淀粉分解菌需使用以淀粉为唯一碳源的培养基。接种培养后，若细菌能分解淀粉，培养平板经稀碘液处理，会出现以菌落为中心的透明圈（如图），实验结果见下表。有关本实验的叙述，错误的是（ ） 菌种 菌落直径：C（mm） 透明圈直径：H（mm） H/C 细菌I 5.1 11.2 2.2 细菌Ⅱ 8.1 13.0 1.6 A. 培养基除淀粉外还含有氮源等其他营养物质 B. 筛选分解淀粉的细菌时，菌液应稀释后涂布 C. 细菌I、II均会产生透明圈，说明两种菌均可以产生淀粉酶并分泌到细胞外分解淀粉 D. 细菌II的透明圈直径更大，说明其产生的淀粉酶分解的淀粉相对较多 23. 玉扇是一种深受人们喜爱的多肉植物，以其肉质叶片呈扇形排列而闻名。科学家用组织培养技术实现玉扇的大规模培育。下列相关叙述错误的是（ ） A. 用酒精对离体的玉扇组织消毒的时间越长，培育效果越好 B. 利用组织培养技术培养可以保持玉扇优良品种的遗传特性 C. 组织培养过程中培养基内添加的关键激素是生长素和细胞分裂素 D. 玉扇组织培养过程中用到的培养基及其他器械均需要灭菌处理 24. 植物组织培养的不同阶段均涉及对光照的控制。下列叙述错误的是（ ） A. 脱分化过程通常需要避光，有利于愈伤组织的形成和生长 B. 再分化过程通常需提供光，无光条件下形成的试管苗一般为黄化苗 C. 在有光照的条件下培养植物组织，培养基中无需添加有机物成分 D. 光既是培养物光合作用的能量来源，也是调节培养物生长发育的信号 25. 研究者应用原生质体融合技术，利用光合细菌与嗜热菌选育出了耐高温的光合细菌。下列有关叙述不正确的是（　　） A. 用纤维素酶和果胶酶处理可得原生质体 B. 用聚乙二醇诱导原生质体融合 C. 细菌原生质体融合的原理是细胞膜的流动性 D. 取样后用低渗溶液可对去壁的细菌比例进行鉴定 26. 中药藿香长期种植会出现种质退化、易感染病虫害等问题。为解决这些问题，研究者对组织培养过程中不同阶段的藿香进行了辐射处理（如图），以期获得性状优良的突变株。下列叙述不正确的是（　　） A. 组织培养过程中细胞分裂旺盛，辐射处理易发生不定向突变 B. 过程①在接种前，外植体常用无水乙醇和次氯酸钠溶液消毒 C. ②③④过程添加的植物激素浓度和比例不相同 D. 筛选出目标突变株后可利用植物组织培养技术生产药用成分 27. 下列关于菊花组织培养的叙述，正确的是（ ） A. 菊花组织培养的全过程无菌操作至关重要，所用到的材料、仪器均需灭菌处理 B. 培养瓶用专用封口膜封口可防止外界杂菌侵入并阻止瓶内外的气体交换 C. 为防止杂菌污染，从接种外植体到生成试管苗尽量在同一个锥形瓶内完成 D. 组培苗移植之前，需要用流水清洗掉根部的培养基 28. 野生铁皮石斛是名贵的中药，因过度利用被列为国家重点保护植物。某科研团队利用植物细胞工程技术进行了种苗培育和有效物质工厂化生产的研究。下列说法错误的是（ ） A. 愈伤组织再分化形成的芽产生的生长素会抑制愈伤组织生根 B. 工厂化生产铁皮石斛的有效物质有利于其遗传多样性的保护 C. 酒精和次氯酸钠处理后用无菌水清洗可降低两者对外植体的伤害 D. 生长素和细胞分裂素是启动外植体细胞分裂和脱分化的关键激素 29. 为实现多肉植物规模化生产，科研人员开展了如下研究。相关叙述正确的是（ ） A. 过程①宜选择幼嫩叶片，依次用次氯酸钠和70%的酒精浸泡30分钟 B. 过程②的培养基中需添加较高浓度的细胞分裂素以利于愈伤组织分化 C. 过程③芽、根的诱导过程中，每日需要给予适当时间和强度的光照 D. 过程④应在珍珠岩基质中添加适量蔗糖和植物激素，为幼苗生长提供碳源 30. 黑胫病对甘蓝型油菜的危害十分严重，黑芥能抗黑胫病，两者不能直接杂交。为解决该问题，科研人员通过下图所示过程获得抗病品系。据图分析，下列相关叙述错误的是（ ） A. 最终获得的抗病植株具有完整的甘蓝型油菜和黑芥的遗传信息 B. 过程①可使用纤维素酶和果胶酶，过程②可利用PEG进行诱导 C. 过程③发生脱分化，过程④体现出植物细胞具有全能性 D. 黑芥与甘蓝型油菜存生殖隔离 二、非选择题（共40分） 31. 石油泄漏会对给周边生态环境带来严重的损害，还将影响居民的健康生活。为解决石油污染问题，某科研小组尝试从被石油严重污染的土壤中分离出能高效分解石油的细菌，过程如下图所示。回答下列问题： （1）防止杂菌污染是研究和应用微生物前提，对培养基和涂布器常用的灭菌方法分别是__________。过程③的培养基成分与普通液体培养基相比，最大的区别是____________________。 （2）进行过程④之前，常需要检验培养基平板灭菌是否合格，方法是____________________。 （3）通过统计过程④培养基中菌落数，可对石油分解菌进行计数原理是__________。某同学用该法进行操作时，将1mL样品稀释100倍，在3个平板上分别接种0.1mL稀释液；经适当培养后，3个平板上的菌落数分别为49、58和52，据此可得出每升该样品中的活菌数为__________。 （4）为筛选出高效分解石油的细菌，进行过程④→⑤的操作思路是__________。 32. 同源四倍体的紫花苜蓿被誉为“牧草之王”，但易造成家畜鼓胀病；二倍体的百脉根因富含缩合单宁，饲喂时可防止家畜鼓胀病的发生。研究人员设计了下列技术路线，以期获得抗鼓胀病的新型苜蓿。 （注：R-6G可阻止线粒体的呼吸作用，IOA可抑制植物细胞呼吸第一阶段，二者有效抑制不同植物细胞正常代谢的临界浓度不同。） （1）培育抗鼓胀病的新型苜蓿依据的生物学原理有__________。培养原生质体时，需要加入适宜浓度的甘露醇以保持一定的渗透压，其作用是__________。 （2）在实验前需通过预实验来探究R-6G或IOA使原生质体失去再生愈伤组织能力的临界浓度，设计思路是____________________。 （3）步骤②到步骤③需要更换新的培养基，原因之一是培养基中__________是影响植物细胞分裂、脱分化和再分化的关键因素。 （4）科研人员研究了不同浓度的聚乙二醇（PEG）对紫花苜蓿和百脉根原生质体融合率的影响，实验结果如下图。异源融合率是指不同种的原生质体发生融合的概率，已知PEG浓度较高时对细胞具有毒害作用。 ①诱导原生质体融合的方法除了使用聚乙二醇外，还可以利用的化学方法是__________。 ②实验结果表明诱导苜蓿与百脉根原生质体融合的最佳PEG浓度为__________，理由是__________。 33. 双特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是科研人员通过杂交—杂交瘤细胞技术（即免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产双特异性抗体的部分过程；图2是某双特异性抗体的作用示意图。请分析回答下列问题： （1）图1中过程①需多次注射癌胚抗原，目的是__________。与植物体细胞杂交相比，过程②特有的诱导融合的方法是__________，过程②选用的骨髓瘤细胞__________（填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。 （2）如图1所示，杂交瘤杂交法是将单克隆杂交瘤和经长春碱免疫后的B淋巴进行融合，目的是为了获得__________的抗体。 （3）体外培养到一定时期的单克隆杂交—杂交瘤细胞会因为__________、__________等因素而导致分裂受阻，需进行传代培养。 （4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是__________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$