精品解析：江苏省镇江市七校等校联考2024-2025学年高二下学期6月期末生物试题

2024—2025学年高二教学情况调研 生物学 2025.06 一、单项选择题：共14题，每题2分，共28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 下列各组元素中，大量参与组成线粒体内膜是（ ） A. O、P、N B. C、N、Si C. S、P、Ca D. N、P、Na 2. 有诗云“鱼在在藻，依于其蒲”。“藻”多指水中藻类，“蒲”为多年生草本，其实水中除“藻”“蒲”外，还有色球蓝细菌、大肠杆菌等微生物，下列说法正确的是（ ） A. 诗中提及的“藻”“蒲”、大肠杆菌及支原体、衣原体都有细胞壁 B. “藻”“蒲”和色球蓝细菌的核小体的主要成分是DNA和蛋白质 C. 上述生物都含细胞质、细胞膜、遗传物质，体现了细胞的多样性 D. 色球蓝细菌和“藻”“蒲”都含叶绿素，是能进行光合作用的自养型生物 3. 生命依赖于水，细胞也离不开水，细胞中的水以自由水和结合水两种形式存在。正常情况下，细胞内自由水所占比例越大，细胞代谢越旺盛。在冬季来临过程中，为了增强抗寒能力，冬小麦在不同时期的含水量发生了变化（如下图所示）。下列叙述错误的是（　　） A. 冬季，冬小麦自由水的比例下降，可避免低温时自由水过多导致结冰而损害自身 B. 在冬季来临过程中，冬小麦的结合水含量升高，但其水的主要存在形式始终是自由水 C. 水分子是一种极性分子，带电分子或离子都易与水结合，因此，水是良好的溶剂 D. 细胞内结合水的存在形式主要是水与蛋白质、多糖等物质结合，从而失去溶解性 4. 发酵是指人们利用微生物代谢，将原料转化为所需产物的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 酱油、醋、泡菜、豆豉等都是传统发酵食品 B. 以毛霉为主的多种微生物参与了豆腐的发酵 C. 当缺少氧气时，醋酸菌能够将乙醇转化成乙酸 D. 传统发酵技术一般利用原材料中天然存在的微生物 5. 啤酒发酵流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等。下列有关叙述错误的是（　　） A. 焙烤过程通过加热杀死种子的胚细胞，从而使淀粉酶失活 B. 酵母菌繁殖及大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 C. 发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味的要求不同而有所差异 D. 蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌 6. 下图为实验室培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列说法正确的是（　　） A. 配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌后再调pH B. ①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行 C. 步骤④中接种环共需5次灼烧处理 D. 将接种后的平板直接放入培养箱中培养 7. 下列对灭菌和消毒的理解不正确的是（ ） A. 灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B. 消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物 C. 消毒和灭菌都是采用物理方法杀灭微生物 D. 常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌等 8. 丙草胺是一种应用广泛的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某生物兴趣小组从达活泉公园土壤中分离出能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其进行计数（如下图所示），以期为修复被丙草胺污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（ ） A. 将培养基PH调至酸性，有利于丙草胺降解菌的生长繁殖 B. 图中所用计数方法为稀释涂布平板法，用该方法计数结果往往比实际值偏小 C. 用以丙草胺为唯一氮源的液体培养基进行培养可提高丙草胺降解菌浓度 D. 通过计算得知每克土壤中的菌株数约为1．7×109个 9. 下列有关现代生物技术工程的叙述，正确的是（ ） A. 植物组织培养过程中将愈伤组织包埋在人工种皮中，就形成了人工种子 B. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得抗毒苗 C. 动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织、细胞分裂能力旺盛 D. 试管牛技术和细胞核移植技术均可实现良种牛的大量克隆 10. 下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质 B. 早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体 C. 猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴 D. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 11. 某生物兴趣小组的同学用猪肝进行DNA的粗提取与鉴定实验，主要实验流程如下图。相关叙述不正确的是（ ） A. 为了方便对材料进行处理，也可以用新鲜猪血来代替猪肝用于DNA的粗提取 B. 过程⑤加入酒精后，也可将溶液倒入离心管离心后取沉淀物 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 提取到的丝状物先溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴加热后变蓝 12. 下图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图，有关叙述正确的是 A. 此图表示桑椹胚，可作为胚胎移植的材料 B. 此图中细胞还没有分化，图中①为透明带 C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D. 进行胚胎分割时，一般取③中的细胞做性别鉴定 13. 下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①需要使用的酶是胰蛋白酶 B. 灭活病毒不能诱导过程②中A和B的融合 C. 过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种 D. 经过过程④所得到的愈伤组织细胞中含有四个染色体组 14. 甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异，相关叙述错误的是（ ） A. 可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的B淋巴细胞 B. 在HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活 C. 用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞 D. 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力 二、多项选择题：共4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 15. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B. ②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 16. 植物组织培养技术常用于商业化生产；其过程一般为：无菌培养物的建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述正确的是（ ） A. 为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养 B. 组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构 C. 提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 D. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 17. 科研人员采集了某深海冷泉附近的沉积物样品，经分离、纯化、鉴定得到了降解藻类多糖的拟杆菌菌株，具体过程如图(Ⅰ～Ⅳ是操作步骤)。下列叙述正确的有（　　） A. 步骤Ⅰ均采用湿热灭菌法对深海冷泉沉积物的样品和海水进行灭菌 B. 步骤Ⅱ可通过添加不同藻类多糖配制系列培养基①获得多种拟杆菌菌株 C. 步骤Ⅲ培养基②中以藻类多糖为唯一碳源，且需加入适量琼脂等凝固剂 D. 步骤Ⅳ可通过增加培养基③中碳源的浓度，获得高耐受藻类多糖的菌株 18. 人乳头瘤病毒（HPV）是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体 B. 单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，且可以大量制备 C. 可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 D. ③过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染 三、非选择题（共5题，共60分） 19. 下图甲为酵母菌细胞部分结构示意图，图乙是动物细胞的结构示意图，数字代表细胞结构，图丙表示图乙部分细胞器的物质组成，图丁表示动物细胞内蛋白质合成、加工及定向转运的主要途径示意图，其中a～f表示相应的细胞结构，①～⑧表示相应的生理过程。据图回答： （1）图甲中酵母菌有而动物细胞没有的结构是[ ]______（[ ]内填序号，“______”上填结构名称） （2）图甲中，葡萄糖在_______（填结构）被彻底氧化分解。能产生CO2的场所是______。（填序号） （3）图乙是动物细胞的亚显微结构模式图的理由是_______。 （4）图乙中⑤能够让水分子自由通过，一些细胞代谢需要的小分子和离子也可以通过，而其他小分子、离子和大分子则不能通过，说明此结构具有______的特点。细胞吸水后⑤的面积变大，说明此结构还具有______。 （5）若图乙细胞是垂体细胞，为研究生长激素的合成与分泌过程，常采用的方法是______；若该细胞为浆细胞，将H标记的亮氨酸注入该细胞，则抗体的合成分泌过程中可检测到放射性的细胞结构依次有________（用箭头和序号表示）。 （6）分离各种细胞器的方法是______，图丙中的A和C分别对应图乙中的[ ]______和[ ]______。 （7）图丁中通过①②途径合成的蛋白质有________（至少举2例）等。 20. 臭鳜鱼是利用新鲜鳜鱼为原料，配以食盐、花椒等辅料，由乳酸菌等多种微生物共同发酵制得的发酵鱼制品，主要的制作流程如下： a.取新鲜鳜鱼，用鱼鳞刷刷去鱼体表面鱼鳞，再经剖腹宰杀，去除内脏和鱼鳃，用自来水和10%盐水先后清洗一次。沥水待用。 b.将鱼平整码放于鳜鱼发酵专用装置内，一桶约码放30kg，每码一层，撒上若干粒干炒过的花椒（花椒总量为鱼重量的0.1%），码放结束后在上层鱼体上放置按压板。 c.向桶内加入提前配制好的腌制液，即8%（w/v）食盐溶液，以刚好浸没按压板为宜，按压板上放置扁圆状砝码（按压重量为鱼重量的40%），用以将鱼体全部浸压于腌制液液面以下。 d.合上发酵装置顶盖，以厌氧发酵方式，8℃发酵16d。 （1）臭鳜鱼制作过程中花椒作用有_______，压板和圆状砝码将鱼体全部浸压于腌制液液面以下的目的是_______。 （2）乳酸菌生长的最适宜的温度范围在25~37℃之间，但发酵温度却控制为8℃，是因为在8℃条件下________。 （3）市场上购买真空包装的臭鳜鱼，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学A怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由________。 （4）臭鳜鱼制作时要用适宜浓度的盐水浸过鱼体。所用盐水需煮沸，其目的是_______（答出1点即可）。为了缩短制作时间，通常会在冷却后的盐水中加入少量陈腌制液，目的是_______。 （5）科研人员尝试从自然发酵的臭鳜鱼中分离优质的清酒乳杆菌，实验流程如图： a.步骤②需充分振荡20min的目的是_______。 b.步骤③④分离纯化微生物的方法叫________。 c.步骤④⑤所用的MRS培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂，其中为微生物提供氮源的成分有_______。 ⑤过程重复划线培养时所挑取的菌落周围应出现________。 （6）科研人员采用以下实验流程检测分离出的一株清酒乳杆菌的代谢产物，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、丁香假单胞菌等4种病原菌的抑制效果： ①取10mL灭菌的琼脂倾注于A、B、C、D培养皿底层，待琼脂凝固后在其上均匀放置4个牛津杯。 ②将4种病原菌悬液分别与营养琼脂等比例混合，取20mL分别倾注于A、B、C、D培养皿内，待琼脂凝固后拔下牛津杯，留下的小孔分别标注为1、2、3、4号（如图）。 ③向1号孔中加入？作为对照，向2、3、4号孔中分别加入100μL含有清酒乳杆菌代谢产物的液体培养基，在适宜条件下静置培养24h，结果如下图： 步骤③中“？”加入的液体是_______，根据实验结果可以得出的结论是_______。 21. Ⅰ.中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题： （1）用________对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，动物细胞核移植技术中一般选择MⅡ期卵母细胞作为受体细胞，最主要的原因是________。 （2）体外培养动物细胞时，除需要满足无菌、无毒的环境及适宜的营养物质、温度等条件外，还需要满足的气体条件是________。 （3）为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到_________时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意_________，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 Ⅱ.黑腐皮壳菌（一种真菌）感染苹果植株可引发腐烂病。现对该菌进行分离培养和应用的研究，下表是分离培养时所用的培养基配方。请分析回答问题： 物质 马铃薯 葡萄糖 自来水 氯霉素 琼脂 含量 200g 20g 1000mL 0.3g 20g （4）上表培养基配方中，氯霉素的作用是________。 （5）为证明培养基灭菌是否合格，可进行如下操作：________。 （6）为检测某苹果植株黑腐皮壳菌的感染程度，需对该植株患病组织进行病菌计数，若采用血细胞计数板计数，则统计结果比实际值______；如何改进：________。 （7）若要对该菌进行扩大培养，研究者应将该菌接种在______培养基中。 （8）为检测某苹果植株黑腐皮壳菌感染程度，需对该株患病组织进行病菌计数研究，则应将提取的菌液采用______法进行接种。 （9）为研究苹果黑腐皮壳菌数量增长规律，研究者将该菌在液体培养基和固体培养基中培养，获得下图所示的生长速率曲线图。 17h后，该菌生长速率偏低的原因可能是_______。 22. 低温是限制农作物产量的重要胁迫因子。科学家将寒带植物中的抗寒基因CBFs转移到拟南芥中构建拟南芥耐寒模型，用于植物低温胁迫机制的相关研究。回答下列问题： 限制酶 识别序列 EcoR I 5'G↓AATTC3' BamH I 5'G↓GATCC3' Sph I 5'CGTAC↓G3' Sau3A 5'↓GATC3' Xma I 5'C↓CCGGG3' Asc I 5'G↓GCGCGGG3' Mun I 5'C↓AATTG3' （1）启动子的基本单位是________，启动子的作用是________。 （2）设计引物克隆目的基因。如图所示应选择引物________（填序号）对CBFs基因进行克隆，为了后续能将目的基因正确连接到载体上，应在CBFs基因上游引物的________端添加________（EcoRⅠ或“BamHⅠ”或“MunⅠ”）识别序列。 （3）根据图示Ti质粒的结构，应选用限制酶_________切割Ti质粒，并通过________酶进行连接。 （4）用________处理农杆菌方能将重组质粒导入。在培养基中添加________来筛选成功导入质粒的农杆菌。将拟南芥叶片浸泡在转基因农杆菌菌液中一段时间对其进行转化，然后提取叶片中的DNA，通过PCR后再通过________判断CBFs基因是否整合到拟南芥基因组中，结果如下图所示。该转基因叶片的基因组中可能已整合CBFs基因，PCR结果中显示出小分子非目标条带，产生的原因可能是________（填字母）。 A.变性温度太低 B.复性温度太低 C.复性温度太高 D.引物特异性弱 （5）已获取成功转入CBFs基因拟南芥植株，将其放置在_______环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。 23. 黏膜免疫系统作为第一道免疫防御屏障，能够参与保护生物体免受病原体的感染。多聚免疫球蛋白受体（pIgR）作为黏膜免疫防御的一个关键因子，能够介导免疫球蛋白跨过上皮细胞进行转运和分泌，发挥免疫球蛋白在黏液中清除病原体和毒素的作用。研究人员从大菱鲆提取pIgR基因，针对不同器官组织开展了pIgR基因研究（如图），其中DEPC物质可与RNA酶结合使酶发生变性。 （1）引物的作用是________，提取过程加入DEPC物质作用是________。 （2）为将pIgR基因以正确方向插入质粒需要双酶切，这就要求在设计引物时，需在引物的5′端加入相应的酶切位点。已知a链为转录模板链，引物1的5′端酶切位点的碱基序列为GAATTC，则引物2的5′端酶切位点的碱基序列为_________，理由是________。 （3）构建pIgR基因表达载体后，与处于感受态的大肠杆菌菌株混合，pIgR基因表达载体进入菌体内，此过程称为________。然后将菌液涂布在含有________的LB固体培养基培养，加入诱导剂诱导pIgR基因在大肠杆菌中表达，提取、纯化蛋白质。 （4）另一组科研人员在研究Ti质粒时，画出了如图1所示部分结构示意图，①~⑥为部分限制酶识别位点，LB与RB为T-DNA左边界序列和右边界序列，tms与tmr为激素基因，Tetr为四环素抗性基因，Ori为复制原点，Pro为启动子。图2为部分限制酶及其识别序列与切割位点。 研究人员分别将质粒A（结构如图1）、质粒B（去除了图1中tmr与tmr的Ti质粒）、质粒C（去除了图1中LB或RB的Ti质粒）导入不含质粒的农杆菌中，将导入质粒的农杆菌与植物外植体分别共培养。 ①ori通常富含碱基________，有利于解旋。 ②为获得胚状体或试管苗，研究人员用携带了质粒B的农杆菌侵染植物，而不用携带质粒A的农杆菌，原因最可能是________。 ③在农杆菌侵染植物的过程中，农杆菌会产生酶甲，甲把T-DNA的一条核苷酸链切割下来，该单链进入植物细胞后形成双链，甲识别与切割的序列应为T-DNA中的________。 ④有学者认为甲是由Vir区段的基因在酚类物质的刺激下编码产生的。研究人员利用某双子叶植物的突变体（不能合成酚类物质）、基础培养基（利于植物组织培养的培养基）、酚类物质、质粒B、不含质粒的农杆菌进行了相关实验，并证实了上述猜测是正确的。在上述农杆菌与植物外植体的共培养实验中，实验的自变量是________。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 2024—2025学年高二教学情况调研 生物学 2025.06 一、单项选择题：共14题，每题2分，共28分。每题只有一个选项最符合题意。 1. 下列各组元素中，大量参与组成线粒体内膜的是（ ） A. O、P、N B. C、N、Si C. S、P、Ca D. N、P、Na 【答案】A 【解析】 【分析】线粒体内膜属于生物膜，其主要成分是磷脂和蛋白质，蛋白质是由C、H、O、N等元素组成，磷脂的组成元素为C、H、O、N、P。 【详解】线粒体内膜属于生物膜，生物膜主要由磷脂和蛋白质组成，蛋白质是由C、H、O、N等元素组成，磷脂的组成元素为C、H、O、N、P，二者均不含Si、Ca、Na，A正确，BCD错误。 故选A。 2. 有诗云“鱼在在藻，依于其蒲”。“藻”多指水中藻类，“蒲”为多年生草本，其实水中除“藻”“蒲”外，还有色球蓝细菌、大肠杆菌等微生物，下列说法正确的是（ ） A. 诗中提及的“藻”“蒲”、大肠杆菌及支原体、衣原体都有细胞壁 B. “藻”“蒲”和色球蓝细菌的核小体的主要成分是DNA和蛋白质 C. 上述生物都含细胞质、细胞膜、遗传物质，体现了细胞的多样性 D. 色球蓝细菌和“藻”“蒲”都含叶绿素，是能进行光合作用的自养型生物 【答案】D 【解析】 【分析】原核细胞与真核细胞最明显的差异是有无核膜包被的成形的细胞核，由原核细胞构成的生物称为原核生物，由真核细胞构成的生物称为真核生物。原核细胞与真核细胞共有的特征是均有细胞膜、细胞质、核糖体，均以DNA作为遗传物质。 【详解】A、诗中提及的“藻”“蒲”、大肠杆菌及衣原体都有细胞壁，支原体没有细胞壁，A错误； B、色球蓝细菌是原核生物，没有核小体结构，B错误； C、上述生物都含细胞质、细胞膜、遗传物质，体现了细胞统一性，C错误； D、色球蓝细菌含有叶绿素和藻蓝素，“藻”“蒲”含叶绿素和类胡萝卜素，色球蓝细菌和“藻”“蒲”都含叶绿素，是能进行光合作用的自养型生物，D正确。 故选D。 3. 生命依赖于水，细胞也离不开水，细胞中的水以自由水和结合水两种形式存在。正常情况下，细胞内自由水所占比例越大，细胞代谢越旺盛。在冬季来临过程中，为了增强抗寒能力，冬小麦在不同时期的含水量发生了变化（如下图所示）。下列叙述错误的是（　　） A. 冬季，冬小麦自由水的比例下降，可避免低温时自由水过多导致结冰而损害自身 B. 在冬季来临过程中，冬小麦的结合水含量升高，但其水的主要存在形式始终是自由水 C. 水分子是一种极性分子，带电分子或离子都易与水结合，因此，水是良好的溶剂 D. 细胞内结合水的存在形式主要是水与蛋白质、多糖等物质结合，从而失去溶解性 【答案】B 【解析】 【分析】细胞中的水可以分为自由水和结合水，自由水的比例越高，新陈代谢越旺盛，结合水比例越高，抗逆性越强。 【详解】A、在冬季来临前，冬小麦的自由水比例会逐渐降低，而结合水比例会逐渐上升，以避免气温下降时自由水过多导致结冰而损害自身，A 正确； B、由图可知，约 9月中旬开始，冬小麦的结合水的相对含量明显高于自由水，B 错误； C、水分子的空间结构及电子的不对称分布，使得水分子成为一个极性分子。带有正电荷或负电荷的分子（或离子）都容易与水结合，因此，水是良好的溶剂，C正确； D、细胞内结合水的存在形式主要是水与蛋白质、多糖等物质结合，这样水就失去流动性和溶解性，成为生物体的构成成分，D正确。 故选B。 4. 发酵是指人们利用微生物代谢，将原料转化为所需产物的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 酱油、醋、泡菜、豆豉等都是传统发酵食品 B. 以毛霉为主的多种微生物参与了豆腐的发酵 C. 当缺少氧气时，醋酸菌能够将乙醇转化成乙酸 D. 传统发酵技术一般利用原材料中天然存在的微生物 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程是指采用现代工程技术手段，利用微生物的某些特定功能，为人类生产有用的产品，或直接把微生物应用于工业生产过程的一种计数。发酵工程的内容包括菌种的选育、培养基的制备、灭菌、扩大培养和接种、发酵过程和产品的分离提纯等方面。 【详解】A、酱油、醋、泡菜、豆豉等在日常生活中历史悠久，都是通过传统发酵技术制作而成的食品，A正确； B、在豆腐发酵制作腐乳的过程中，以毛霉为主的多种微生物参与其中，毛霉产生的蛋白酶能将豆腐中的蛋白质分解成小分子的肽和氨基酸，脂肪酶可将脂肪水解为甘油和脂肪酸，B正确； C、醋酸菌是好氧菌，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸，整个过程都需要氧气参与，C错误； D、传统发酵技术一般不进行严格的灭菌操作，而是利用原材料中天然存在的微生物进行发酵，D正确。 故选C。 5. 啤酒发酵流程一般都包含发芽、焙烤、碾磨、糖化、蒸煮、发酵、消毒、终止等。下列有关叙述错误的是（　　） A. 焙烤过程通过加热杀死种子的胚细胞，从而使淀粉酶失活 B. 酵母菌繁殖及大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 C. 发酵的温度和发酵的时间随啤酒品种和口味的要求不同而有所差异 D. 蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，可以终止淀粉酶的进一步作用，并对糖浆灭菌 【答案】A 【解析】 【分析】现代工业酿酒分为主发酵和后发酵，主发酵是主要的生产过程，主发酵后还要通过后发酵来促酒成熟、澄清。 【详解】A、焙烤是加热杀死种子的胚，但不使淀粉酶失活，A错误； B、主发酵是主要的生产过程，酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，B正确； C、发酵温度和发酵时间随着啤酒品种和口味要求的不同而有所差异，C正确； D、蒸煮过程中高温使淀粉酶失活，终止淀粉酶的分解作用，并对糖浆灭菌，D正确。 故选A。 6. 下图为实验室培养和纯化酵母菌的部分操作步骤，下列说法正确的是（　　） A. 配制好的培养基进行高压蒸汽灭菌后再调pH B. ①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行 C. 步骤④中接种环共需5次灼烧处理 D. 将接种后的平板直接放入培养箱中培养 【答案】B 【解析】 【分析】分析题意和图示可知：①是倒平板，②是用接种环沾取菌液，③是进行平板划线，④是培养。制备固体培养基的基本过程为计算、称量、溶化、调pH、灭菌、倒平板。 【详解】A、配制好的培养基应先调pH后进行高压蒸汽灭菌，A错误； B、培养与纯化酵母菌的过程中，为了防止杂菌污染，需要在酒精灯的火焰旁进行，因此①②③步骤操作时都需要在酒精灯火焰旁进行，B正确； C、每次划线前后都要对接种环进行灼烧处理，因此步骤④中接种环共需6次灼烧处理，C错误； D、完成平板划线后，待菌液被培养基吸收，将接种后的平板和一个未接种的平板倒置，放入恒温培养箱中培养，D错误。 故选B。 7. 下列对灭菌和消毒的理解不正确的是（ ） A. 灭菌是指杀灭环境中一切微生物的细胞、芽孢和孢子 B. 消毒是指杀死物体表面或内部的部分微生物 C. 消毒和灭菌都是采用物理方法杀灭微生物 D. 常用灭菌方法有灼烧灭菌、干热灭菌、湿热灭菌等 【答案】C 【解析】 【分析】消毒和灭菌 消毒 灭菌 概念 使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子） 使用强烈的理化因素杀死物体内外所用的微生物（包括芽孢和孢子） 常用方法 煮沸消毒法、巴氏消毒法、化学药剂消毒法、紫外线消毒法 灼烧灭菌、干热灭菌、高压蒸汽灭菌 适用对象 操作空间、某些液体、双手等 接种环、接种针、玻璃器皿、培养基等 【详解】A、灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，A正确；B、消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），B正确； C、消毒和灭菌都是采用物理或化学的方法杀灭微生物，不仅有物理方法，C错误； D、灭菌的方法比较强烈，一般是高温或高压，常用灭菌方法有灼烧灭菌法、干热灭菌法、湿热灭菌灭菌法等，D正确。 故选C。 8. 丙草胺是一种应用广泛的除草剂，能抑制土壤细菌、放线菌和真菌的生长。某生物兴趣小组从达活泉公园土壤中分离出能有效降解丙草胺的细菌菌株，并对其进行计数（如下图所示），以期为修复被丙草胺污染土壤提供微生物资源。下列有关叙述错误的是（ ） A. 将培养基PH调至酸性，有利于丙草胺降解菌的生长繁殖 B. 图中所用计数方法为稀释涂布平板法，用该方法计数结果往往比实际值偏小 C. 用以丙草胺为唯一氮源的液体培养基进行培养可提高丙草胺降解菌浓度 D. 通过计算得知每克土壤中的菌株数约为1．7×109个 【答案】A 【解析】 【分析】统计菌落数目的方法：（1）显微镜直接计数法： ①原理：利用特定细菌计数板或血细胞计数板，在显微镜下计算一定容积的样品中微生物数量；②方法：用计数板计数； ③缺点：不能区分死菌与活菌。（2）间接计数法（活菌计数法）：①原理：当样品的稀释度足够高时，培养基表面生长的一个菌落，来源于样品稀释液中的一个活菌。通过统计平板上的菌落数，就能推测出样品中大约含有多少活菌。②操作：a、设置重复组，增强实验的说服力与准确性；b、为了保证结果准确，一般选择菌落数在30～300的平板进行计数。③计算公式：每克样品中的菌株数=（c÷V）×M，其中c代表某一稀释度下平板上生长的平均菌落数，V代表涂布平板时所用的稀释液的体积（mL），M代表稀释倍数。 【详解】A、培养细菌时需将pH调至中性或微碱性，A错误； B、图中利用的是稀释涂布平板法进行计数，利用该方法计数结果往往比实际值偏小，原因是两个或多个细胞连在一起时观察到的只有一个菌落，B正确； C、由题干信息可知，该实验的目的是从某地土壤中分离获得能有效降解丙草胺的细菌菌株，故培养基应以丙草胺为唯一氮源，该培养基中只有降解丙草胺的细菌菌株才能生长，其他微生物的生长会受到抑制，故用该培养基进行培养可提高降解菌的浓度，C正确； D、5号试管的稀释倍数是105，则每克土壤中的菌株数为（168+175+167）÷3÷0.1×10×105=1.7×109个，D正确。 故选A。 9. 下列有关现代生物技术工程的叙述，正确的是（ ） A. 植物组织培养过程中将愈伤组织包埋在人工种皮中，就形成了人工种子 B. 动物细胞培养可用于检测有毒物质，茎尖组织培养可获得抗毒苗 C. 动物细胞培养材料大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织、细胞分裂能力旺盛 D. 试管牛技术和细胞核移植技术均可实现良种牛的大量克隆 【答案】C 【解析】 【详解】A、人工种子需将离体培养的胚状体、不定芽等结构包裹在人工胚乳和人工种皮中，而愈伤组织未进一步分化，不能直接作为胚状体，且缺少人工胚乳，A错误； B、动物细胞培养可通过细胞代谢变化检测有毒物质，但茎尖组织培养仅能获得脱毒苗（因茎尖病毒极少），抗毒苗需要通过基因重组获得，B错误； C、胚胎或幼龄动物的器官或组织细胞分裂能力强，易于培养，故动物细胞培养常取材于此，C正确； D、试管牛技术依赖体外受精和胚胎移植，属于有性生殖，后代遗传物质不完全相同；细胞核移植属于无性生殖，可实现大量克隆，D错误。 故选C。 10. 下列关于哺乳动物胚胎工程和细胞工程的叙述，错误的是（ ） A. 细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需要添加血清等物质 B. 早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体 C. 猴的核移植细胞通过胚胎工程已成功地培育出了克隆猴 D. 将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导后融合的细胞即为杂交瘤细胞 【答案】D 【解析】 【分析】1、胚胎移植的生理基础（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境；（2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能；（4）胚胎遗传性状不受受体任何影响。 2、浆细胞能够分泌抗体，但是不具有增殖能力，而骨髓瘤细胞具有无限增殖的能力，因此利用动物细胞融合技术将浆细胞和骨髓瘤细胞融合成杂交瘤细胞，利用该细胞制备单克隆抗体。 【详解】A、细胞培养和早期胚胎培养的培养液中通常需添加血清等物质，A正确； B、早期胚胎需移植到经同期发情处理的同种雌性动物体内发育成个体，B正确； C、我国利用核移植技术成功培养出克隆猴“中中”和“华华”，C正确； D、将骨髓瘤细胞和B淋巴细胞混合，经诱导融合后的细胞不都是杂交瘤细胞，还有B细胞自身融合的细胞、骨髓瘤细胞自身融合的细胞等，D错误。 故选D。 11. 某生物兴趣小组的同学用猪肝进行DNA的粗提取与鉴定实验，主要实验流程如下图。相关叙述不正确的是（ ） A. 为了方便对材料进行处理，也可以用新鲜猪血来代替猪肝用于DNA的粗提取 B. 过程⑤加入酒精后，也可将溶液倒入离心管离心后取沉淀物 C. 过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精都可抑制DNA酶的活性 D. 提取到的丝状物先溶于2mol/LNaCl溶液中，加入二苯胺试剂，沸水浴加热后变蓝 【答案】A 【解析】 【详解】A、哺乳动物成熟红细胞没有细胞核，因此新鲜猪血不能代替猪肝用于DNA的粗提取，A错误 B、DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些蛋白质则溶于酒精，过程⑤加入酒精后，蛋白质溶解，DNA析出，因此离心后弃上清取沉淀，B正确； C、酶活性的发挥需要适宜的温度等条件，将过滤液放入4℃冰箱或加入预冷的酒精的目的是抑制DNA酶的活性，避免DNA被水解，C正确； D、将析出的丝状物先溶于2mol/L的NaCl溶液中，然后加入二苯胺试剂，混匀后沸水浴中加热可出现蓝色，D正确。 故选A。 12. 下图为哺乳动物受精卵发育过程中某一时期的示意图，有关叙述正确的是 A. 此图表示桑椹胚，可作为胚胎移植的材料 B. 此图中细胞还没有分化，图中①为透明带 C. 胚胎从①中伸展出来的过程叫做孵化 D. 进行胚胎分割时，一般取③中细胞做性别鉴定 【答案】C 【解析】 【分析】分析题图：图示表示囊胚期胚胎示意图，其中①为透明带，在囊胚期后期会破裂；②为滋养层，将来分化成胎盘和胎膜；③为内细胞团，将来分化形成各种组织。 【详解】A、此图为囊胚期，A错误；  B、囊胚时期细胞已出现分化，B错误；  C、囊胚的扩大会导致透明带的破裂，胚胎伸展出来，这一过程叫孵化，C正确；  D、对移植前的胚胎进行性别鉴定时，宜取囊胚期的滋养层细胞进行鉴定，D错误。  故选C。 【点睛】本题结合囊胚期胚胎示意图，考查动物胚胎发育的过程、胚胎分割等知识，要求考生识记动物胚胎发育过程，能准确判断图示胚胎所处的时期及其中结构的名称；识记胚胎分割的对象及注意事项，能结合所学的知识准确判断各选项。 13. 下图表示用草木樨状黄芪（2n=32）和木本霸王（2n=22）培育抗盐新品种的过程。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①需要使用的酶是胰蛋白酶 B. 灭活病毒不能诱导过程②中A和B的融合 C. 过程②处理后得到的两两融合原生质体类型可能有3种 D. 经过过程④所得到的愈伤组织细胞中含有四个染色体组 【答案】A 【解析】 【详解】A、植物细胞壁的成分是纤维素和果胶，根据酶的专一性，过程①需要使用的酶是纤维素酶和果胶酶，目的是去除细胞壁，A错误； B、过程②为植物原生质体的融合过程，其诱导方法有PEG处理、离心、电激等，用灭活病毒是诱导动物细胞融合的手段，不能用于植物原生质体的融合，B正确； C、若只考虑两两融合的情况，则过程②处理后得到的融合原生质体类型可能有3种，分别是AA、BB、AB，C正确； D、该题中的两个植物细胞各有两个染色体组，故两细胞融合形成的细胞内含有四个染色体组，D正确。 故选A。 14. 甲型流感单克隆抗体的制备过程中，杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，不考虑基因互作和其他变异，相关叙述错误的是（ ） A. 可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得已免疫的B淋巴细胞 B. 在HAT 选择培养基上，B淋巴细胞和骨髓瘤细胞均无法长期存活 C. 用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时每一个孔尽量只接种一个细胞 D. 抗体检测呈阳性的杂交瘤细胞即具有持续产生甲型流感抗体的能力 【答案】D 【解析】 【分析】在制备单克隆抗体时，首先要给小鼠免疫，产生相应的B细胞，然后将B细胞与骨髓瘤细胞融合，经过选择培养基两次筛选，最后获得能产生所需抗体的杂交瘤细胞。在单克隆抗体的制备过程中，使用了动物细胞培养和动物细胞融合等动物细胞工程技术。 【详解】A、对动物进行间歇注射抗原处理，以刺激动物机体产生相应的B淋巴细胞，且脾脏是免疫器官，故B淋巴细胞可从多次间歇注射甲型流感疫苗的动物脾脏中筛选获得，A正确； B、B淋巴细胞和骨髓瘤细胞进行融合后，再用特定的选择培养基进行筛选，在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂交瘤细胞才能生长，B正确； C、为确保产生特异性强的抗体，用96孔板培养和筛选杂交瘤细胞时，每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，C正确； D、杂交瘤细胞在克隆化培养过程中来自B淋巴细胞的染色体往往出现随机丢失现象，若丢失的染色体含有产生甲型流感抗体的基因，则利用抗体检测筛选的杂交瘤细胞不一定具有持续产生甲型流感抗体的能力，D错误。 故选D。 二、多项选择题：共4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。 15. 下图表示研究人员利用胚胎工程培育优质奶牛的过程，下列相关说法错误的是（ ） A. ①代表体外受精，与体内受精不同的是体外受精前精子需要获能 B. ②代表体外胚胎培养，该过程中细胞既进行有丝分裂也存在细胞分化 C. ③代表胚胎分割，需均等分割桑葚胚的内细胞团，以免影响胚胎发育 D. ⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关 【答案】AC 【解析】 【分析】胚胎工程是指对动物早期胚胎或配子所进行的多种显微操作和处理技术，分析题图，①是体外受精过程，②是早期胚胎培养，③是胚胎分割，④是分割后胚胎的恢复，⑤是胚胎移植。 【详解】A、①代表体外受精，体外受精前和体内受精前精子均需要获能，A错误； B、②代表体外早期胚胎培养，该过程中细胞进行有丝分裂，当胚胎发育至囊胚阶段，会开始进行细胞分化，B正确； C、③代表胚胎分割，在对囊胚阶段的胚胎进行分割时，要注意将内细胞团均等分裂，以免影响分割后胚胎的恢复和进一步发育，而桑椹胚阶段的胚胎还未形成内细胞团，C错误； D、⑤代表胚胎移植，胚胎移植能否成功，与供体和受体的生理状态有关，要对供、受体母牛进行同期发情处理，使供体和受体的生理状态相同，D正确。 故选AC。 16. 植物组织培养技术常用于商业化生产；其过程一般为：无菌培养物的建立→培养物增殖→生根培养→试管苗移栽及鉴定。下列相关叙述正确的是（ ） A. 为获得无菌培养物，外植体要消毒处理后才可接种培养 B. 组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构 C. 提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根 D. 用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗不会出现变异 【答案】ABC 【解析】 【详解】A、植物组织培养过程中应注意无菌操作，为获得无菌培养物，外植体要经过表面消毒处理后，才能进行培养，所用的培养基必须彻底灭菌，A正确； B、组织培养过程中也可无明显愈伤组织形成，直接形成胚状体等结构，胚状体若包裹上人工种皮，可制作成人工种子，B正确； C、生长素和细胞分裂素的比值高时，有利于根的分化、抑制芽的形成，因此提高培养基中生长素和细胞分裂素的比值，有利于诱导生根，C正确； D、用同一植株体细胞离体培养获得的再生苗会出现变异，如在愈伤组织的培养过程中可能发生基因突变等变异，D错误。 故选ABC。 17. 科研人员采集了某深海冷泉附近的沉积物样品，经分离、纯化、鉴定得到了降解藻类多糖的拟杆菌菌株，具体过程如图(Ⅰ～Ⅳ是操作步骤)。下列叙述正确的有（　　） A. 步骤Ⅰ均采用湿热灭菌法对深海冷泉沉积物的样品和海水进行灭菌 B. 步骤Ⅱ可通过添加不同藻类多糖配制系列培养基①获得多种拟杆菌菌株 C. 步骤Ⅲ培养基②中以藻类多糖为唯一碳源，且需加入适量琼脂等凝固剂 D. 步骤Ⅳ可通过增加培养基③中碳源的浓度，获得高耐受藻类多糖的菌株 【答案】BCD 【解析】 【分析】1、培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质。不同的培养基的配方不同，但一般都含有水、无机盐、碳源和氮源。 2、微生物接种的方法最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。操作方法各不相同，但是核心都是要防止杂菌的污染，保证培养物的纯度。微生物常见的接种的方法： (1)平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。(2) 稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。 【详解】A、深海冷泉沉积物的样品不能灭菌，否则得不到需要的菌株，A错误； B、向基本培养基中分别添加不同藻类多糖来配制系列培养基①，可获得不同种类的拟杆菌菌株，B正确； C、步骤IV需要挑取单菌落并转接，则需要再固体培养基上接种，需要加琼脂作为凝固剂，C正确； D、本实验的目的是纯化、鉴定得到降解藻类多糖的拟杆菌菌株，步骤IV可通过增加培养基③中碳源的浓度，获得高耐受藻类多糖的菌株，D正确。 故选BCD。 18. 人乳头瘤病毒（HPV）是一种DNA病毒，可诱发细胞癌变。抗HPV的单克隆抗体可以准确检测HPV，从而及时监控宫颈癌的发生。以HPV衣壳蛋白为抗原制备单克隆抗体的过程如图所示。下列叙述正确的是（ ） A. 在HAT培养基上存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体 B. 单克隆抗体的优点是特异性强、灵敏度高，且可以大量制备 C. 可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞 D. ③过程需要添加抗生素等物质，以防止病毒污染 【答案】ABC 【解析】 【分析】单克隆抗体的制备过程：对小鼠注射特定的抗原蛋白，使小鼠产生免疫反应；得到相应的B淋巴细胞；将小鼠骨髓瘤细胞与B淋巴细胞融合，再用特定的选择培养基进行筛选；在该培养基上，未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡，只有融合的杂种细胞才能生长（这种杂种细胞的特点是既能迅速大量繁殖又能产生专一的抗体）；对上述杂交瘤细胞还需进行克隆化培养和抗体检测，经多次筛选，就可获得足量的能分泌所需抗体的细胞；最后，将杂交瘤细胞在体外条件下做大规模培养，或注射到小鼠腹腔内增殖，这样，从细胞培养液或小鼠腹水中，就可以提取出大量的单克隆抗体。 【详解】A、由于小鼠骨髓瘤细胞不能在HAT培养基上生长，浆细胞又不能增殖，所以，在HAT培养基上同种细胞的融合体以及未融合的细胞不能生长，而存活的杂交瘤细胞既能无限增殖又可以分泌抗体，A正确； B、单克隆抗体由杂交瘤细胞分泌，与血清抗体相比，其特点是灵敏度高、特异性强，可以大量制备，B正确； C、抗原和抗体可特异性结合，故可用HPV衣壳蛋白检测筛选出能产生特异性抗体的杂交瘤细胞，C正确； D、抗生素用于防止细菌污染，而非病毒污染，D错误。 故选ABC。 三、非选择题（共5题，共60分） 19. 下图甲为酵母菌细胞部分结构示意图，图乙是动物细胞的结构示意图，数字代表细胞结构，图丙表示图乙部分细胞器的物质组成，图丁表示动物细胞内蛋白质合成、加工及定向转运的主要途径示意图，其中a～f表示相应的细胞结构，①～⑧表示相应的生理过程。据图回答： （1）图甲中酵母菌有而动物细胞没有的结构是[ ]______（[ ]内填序号，“______”上填结构名称） （2）图甲中，葡萄糖在_______（填结构）被彻底氧化分解。能产生CO2的场所是______。（填序号） （3）图乙是动物细胞的亚显微结构模式图的理由是_______。 （4）图乙中⑤能够让水分子自由通过，一些细胞代谢需要的小分子和离子也可以通过，而其他小分子、离子和大分子则不能通过，说明此结构具有______的特点。细胞吸水后⑤的面积变大，说明此结构还具有______。 （5）若图乙细胞是垂体细胞，为研究生长激素的合成与分泌过程，常采用的方法是______；若该细胞为浆细胞，将H标记的亮氨酸注入该细胞，则抗体的合成分泌过程中可检测到放射性的细胞结构依次有________（用箭头和序号表示）。 （6）分离各种细胞器的方法是______，图丙中的A和C分别对应图乙中的[ ]______和[ ]______。 （7）图丁中通过①②途径合成的蛋白质有________（至少举2例）等。 【答案】（1）1细胞壁、7液泡 （2） ①. 细胞质基质、线粒体 ②. 6、8 （3）有中心体等多种细胞器，无细胞壁、叶绿体、液泡 （4） ①. 选择透过性 ②. （一定的）流动性 （5） ①. （放射性）同位素标记法 ②. ④→③→⑦→⑤ （6） ①. 差速离心法 ②. ①线粒体 ③. ④核糖体 （7）DNA聚合酶、解旋酶、RNA聚合酶、组蛋白、ATP水解酶 【解析】 【分析】分泌蛋白的合成过程大致是：首先，在游离的核糖体中以氨基酸为原料开始多肽链的合成。当合成了一段肽链后，这段肽链会与核糖体一起转移到粗面内质网上继续其合成过程，并且边合成边转移到内质网腔内，再经过加工、折叠，形成具有一定空间结构的蛋白质。内质网膜鼓出形成囊泡，包裹着蛋白质离开内质网，到达高尔基体，与高尔基体膜融合，囊泡膜成为高尔基体膜的一部分。高尔基体还能对蛋白质做进一步的修饰加工，然后由高尔基体膜形成包裹着蛋白质的囊泡。囊泡转运到细胞膜，与细胞膜融合，将蛋白质分泌到细胞外。 【小问1详解】 酵母菌是真菌，有1细胞壁、7液泡，动物细胞无。 【小问2详解】 图甲中，葡萄糖先在细胞质基质被初步分解（细胞呼吸第一阶段），后续在线粒体（有氧呼吸第二三阶段）进一步氧化分解。酵母菌无氧呼吸第二阶段（在细胞质基质，对应图甲中8）、有氧呼吸第二阶段（在线粒体，对应图甲中6）都会产生CO2。 【小问3详解】 亚显微结构能看到细胞器细节，动物细胞有中心体（参与细胞分裂），无细胞壁、叶绿体，也无大液泡，所以判断图乙是动物细胞亚显微结构 。 【小问4详解】 细胞膜（结构⑤）的特性水分子等能通过，其他分子按需通过，体现①选择透过性（细胞膜允许某些物质通过，阻止另一些物质通过的特性）。细胞吸水后，⑤面积变大，说明细胞膜具有（一定的）流动性，这是膜的结构特点。 【小问5详解】 研究生长激素（分泌蛋白）合成、分泌，常用（放射性）同位素标记法。浆细胞产生抗体（分泌蛋白），合成始于④核糖体，进入③内质网加工，再到⑦高尔基体进一步修饰，最后经⑤细胞膜分泌，路径为④→③→⑦→⑤ 。 【小问6详解】 细胞器分离与成分对应分离细胞器用差速离心法 ，依据细胞器密度差异，逐步离心分离。图丙中A（含蛋白质、脂质、核酸）对应图乙中①线粒体（线粒体有膜含脂质、蛋白质，且含少量核酸）；C（含蛋白质、核酸）对应④核糖体（核糖体由RNA和蛋白质组成）。 【小问7详解】 ①②途径合成的蛋白质在细胞内发挥作用，有DNA聚合酶、解旋酶、RNA聚合酶、组蛋白、ATP水解酶等。 20. 臭鳜鱼是利用新鲜鳜鱼为原料，配以食盐、花椒等辅料，由乳酸菌等多种微生物共同发酵制得的发酵鱼制品，主要的制作流程如下： a.取新鲜鳜鱼，用鱼鳞刷刷去鱼体表面鱼鳞，再经剖腹宰杀，去除内脏和鱼鳃，用自来水和10%盐水先后清洗一次。沥水待用。 b.将鱼平整码放于鳜鱼发酵专用装置内，一桶约码放30kg，每码一层，撒上若干粒干炒过的花椒（花椒总量为鱼重量的0.1%），码放结束后在上层鱼体上放置按压板。 c.向桶内加入提前配制好的腌制液，即8%（w/v）食盐溶液，以刚好浸没按压板为宜，按压板上放置扁圆状砝码（按压重量为鱼重量的40%），用以将鱼体全部浸压于腌制液液面以下。 d.合上发酵装置顶盖，以厌氧发酵方式，8℃发酵16d。 （1）臭鳜鱼制作过程中花椒的作用有_______，压板和圆状砝码将鱼体全部浸压于腌制液液面以下的目的是_______。 （2）乳酸菌生长的最适宜的温度范围在25~37℃之间，但发酵温度却控制为8℃，是因为在8℃条件下________。 （3）市场上购买的真空包装的臭鳜鱼，在没有漏气的状态下发生了“胀袋”现象，同学A怀疑是杂菌污染导致的，同学B怀疑是乳酸菌大量繁殖导致的，你支持谁的观点并说明理由________。 （4）臭鳜鱼制作时要用适宜浓度的盐水浸过鱼体。所用盐水需煮沸，其目的是_______（答出1点即可）。为了缩短制作时间，通常会在冷却后的盐水中加入少量陈腌制液，目的是_______。 （5）科研人员尝试从自然发酵的臭鳜鱼中分离优质的清酒乳杆菌，实验流程如图： a.步骤②需充分振荡20min的目的是_______。 b.步骤③④分离纯化微生物的方法叫________。 c.步骤④⑤所用的MRS培养基的主要成分有胰蛋白胨、牛肉膏、番茄汁、葡萄糖、碳酸钙（乳酸能与碳酸钙反应出现溶钙圈）、溴甲酚绿（pH显色剂，酸性显示黄色、碱性显示蓝绿色）、琼脂，其中为微生物提供氮源的成分有_______。 ⑤过程重复划线培养时所挑取的菌落周围应出现________。 （6）科研人员采用以下实验流程检测分离出的一株清酒乳杆菌的代谢产物，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、丁香假单胞菌等4种病原菌的抑制效果： ①取10mL灭菌的琼脂倾注于A、B、C、D培养皿底层，待琼脂凝固后在其上均匀放置4个牛津杯。 ②将4种病原菌悬液分别与营养琼脂等比例混合，取20mL分别倾注于A、B、C、D培养皿内，待琼脂凝固后拔下牛津杯，留下的小孔分别标注为1、2、3、4号（如图）。 ③向1号孔中加入？作为对照，向2、3、4号孔中分别加入100μL含有清酒乳杆菌代谢产物液体培养基，在适宜条件下静置培养24h，结果如下图： 步骤③中“？”加入的液体是_______，根据实验结果可以得出的结论是_______。 【答案】（1） ①. 调味，杀菌和防腐 ②. 创造无氧环境 （2）乳酸菌能产酸，低温也可抑制其他微生物的繁殖 （3）支持A的观点，乳酸菌代谢过程中不产生气体 （4） ①. 除氧（或杀菌） ②. 增加乳酸菌数量（相当于接种乳酸菌） （5） ①. 让菌种均匀分布于悬液中 ②. 稀释涂布平板法 ③. 胰蛋白胨、牛肉膏 ④. 溶钙圈（黄色） （6） ①. 100uL无菌水 ②. 清酒乳杆菌的代谢产物对丁香假单胞菌的抑制效果最好 【解析】 【分析】培养基：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出供其生长繁殖的营养基质，是进行微生物培养的物质基础。培养基的基本成分包括：碳源、氮源、水和无机盐。 【小问1详解】 臭鳜鱼制作过程中，香辛料（花椒）和食盐的作用是都能调味，也能防腐杀菌。由于乳酸菌是厌氧微生物，腌制时将鱼整齐叠放并压实，有利于减少氧气，创造无氧环境，利于乳酸菌等的生长和繁殖。 【小问2详解】 在8℃（低温）条件下乳酸菌既能产酸，也可抑制其它微生物的生长繁殖，所以发酵温度控制为8℃。 【小问3详解】 乳酸菌是厌氧菌，其无氧呼吸的产物是乳酸，不会产生气体，所以不会导致 “胀袋”；而杂菌污染后，有些杂菌在无氧环境下可进行发酵产生气体（如酵母菌无氧呼吸产生CO2等），从而使真空包装的臭鳜鱼出现 “胀袋” 现象 ，因此支持A的观点。 【小问4详解】 煮沸盐水可杀灭盐水中的杂菌，防止杂菌污染，也能去除盐水中的氧气，营造更适宜的厌氧环境。陈腌制液中含有大量发酵所需的乳酸菌等微生物，加入陈腌制液相当于接种乳酸菌，可增加发酵菌种的数量，从而加快发酵过程，缩短制作时间。 【小问5详解】 a.步骤②需充分振荡20min的目的是让菌种均匀分布于悬液中，避免影响后续取菌液。b.由图可知，图中步骤③④分离纯化微生物的方法叫稀释涂布平板法。c.胰蛋白胨、牛肉膏含氮元素，能为微生物提供氮源。由于乳酸能够溶解碳酸钙，所以⑤过程重复划线培养时所挑取的菌落周围应出现溶钙圈（黄色）。 【小问6详解】 根据题意，该实验的目的是检测分离出的一株清酒乳杆菌的代谢产物，对大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、腐生葡萄球菌、丁香假单胞菌等4种病原菌的抑制效果。根据实验设计遵循的等量原则和对照性原则，步骤③中加入的液体应该是100μL无菌水作为对照组，向2、3、4号孔中分别加入100μL含有清酒乳杆菌代谢产物的液体培养基，在适宜条件下静置培养24h，由图可知，丁香假单胞菌组的抑制圈最大，说明清酒乳杆菌的代谢产物对丁香假单胞菌的抑制效果最好。 21. Ⅰ.中国科学院的研究团队利用细胞工程和基因编辑技术，成功培育出世界上首例只有双母亲来源的孤雌小鼠和双父亲来源的孤雄小鼠，实现了哺乳动物的同性繁殖，实验流程如图所示。请回答下列问题： （1）用________对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞，动物细胞核移植技术中一般选择MⅡ期卵母细胞作为受体细胞，最主要的原因是________。 （2）体外培养动物细胞时，除需要满足无菌、无毒的环境及适宜的营养物质、温度等条件外，还需要满足的气体条件是________。 （3）为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到_________时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意_________，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 Ⅱ.黑腐皮壳菌（一种真菌）感染苹果植株可引发腐烂病。现对该菌进行分离培养和应用的研究，下表是分离培养时所用的培养基配方。请分析回答问题： 物质 马铃薯 葡萄糖 自来水 氯霉素 琼脂 含量 200g 20g 1000mL 0.3g 20g （4）上表培养基配方中，氯霉素的作用是________。 （5）为证明培养基灭菌否合格，可进行如下操作：________。 （6）为检测某苹果植株黑腐皮壳菌的感染程度，需对该植株患病组织进行病菌计数，若采用血细胞计数板计数，则统计结果比实际值______；如何改进：________。 （7）若要对该菌进行扩大培养，研究者应将该菌接种在______培养基中。 （8）为检测某苹果植株黑腐皮壳菌感染程度，需对该株患病组织进行病菌计数研究，则应将提取的菌液采用______法进行接种。 （9）为研究苹果黑腐皮壳菌数量增长规律，研究者将该菌在液体培养基和固体培养基中培养，获得下图所示的生长速率曲线图。 17h后，该菌生长速率偏低的原因可能是_______。 【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②. 卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核恢复分裂能力（全能性表达）的物质 （2）95%空气和5%CO2的混合气体 （3） ①. 桑葚胚或囊胚期 ②. 将内细胞团均等分割 （4）抑制细菌等杂菌的生长 （5）将接种的培养基与未接种的培养基一同放入培养箱中培养，观察未接种培养基中是否有杂菌生长和接种的培养基中菌落的生长情况 （6） ①. 高/大 ②. 统计前对细胞进行染色，只统计视野中未被染色的细胞 （7）液体 （8）稀释涂布平板法 （9）培养基中营养成分不足，有害有毒物质积累、pH改变 【解析】 【分析】1、微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。一般固体培养基中会加入琼脂作为凝固剂。 2、胚胎分割是指采用机械方法将早期胚胎切割成2等份、4等份或8等份等，经移植获得同卵双胎或多胎的技术。来自同一胚胎的后代具有相同的遗传物质，因此胚胎分割可以看作动物无性繁殖或克隆的方法之一。 【小问1详解】 用促性腺激素对雌性小鼠进行超数排卵处理可得到大量卵母细胞；动物细胞核移植技术中一般选择MⅡ期卵母细胞作为受体细胞，最主要的原因是卵母细胞的细胞质中含有促进细胞核恢复分裂能力（全能性表达）的物质。 【小问2详解】 动物细胞培养所需气体主要有O2和CO2，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液 的pH。在进行细胞培养时，通常采用培养皿或松盖培养瓶 ，并将它们置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。 【小问3详解】 为了获得更多甲的后代，在得到的重构胚发育到桑葚胚或囊胚时，对其进行分割；在分割囊胚阶段的胚胎时，应注意将内细胞团均等分割，否则会影响胚胎的恢复和进一步发育。 【小问4详解】 微生物培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，一般固体培养基中会加入琼脂作为凝固剂。分析表格物质，氯霉素能够抑制细菌的生长，而真菌可以生存。因此，氯霉素的作用是抑制细菌等杂菌的生长。 【小问5详解】 为证明培养基灭菌是否合格，可将接种的培养基与未接种的培养基一同放入培养箱培养，观察未接种培养基中是否有杂菌生长和接种的培养基中菌落的生长情况。 【小问6详解】 采用血细胞计数板计数法，因为会将活菌和死菌一同计数，因此会导致统计结果比实际值高；根据细胞膜具有选择透过性的特点，可在统计前对细胞进行染色，活细胞不会被染色，只统计视野中未染色的细胞即可。 【小问7详解】 液体培养基适合对菌种进行扩大培养。 【小问8详解】 稀释涂布平板法可用于对目标菌种进行计数。 【小问9详解】 细菌在液体培养基中的生长速率大于固体培养基，故图中a曲线表示该菌在液体培养基中的生长曲线，b曲线表示该菌在固体培养基中的生长曲线。17h 后，由于培养基中的营养成分不足、有害有毒的物质积累、pH改变等方面的影响导致该菌生长速率偏低。 22. 低温是限制农作物产量的重要胁迫因子。科学家将寒带植物中的抗寒基因CBFs转移到拟南芥中构建拟南芥耐寒模型，用于植物低温胁迫机制的相关研究。回答下列问题： 限制酶 识别序列 EcoR I 5'G↓AATTC3' BamH I 5'G↓GATCC3' Sph I 5'CGTAC↓G3' Sau3A 5'↓GATC3' Xma I 5'C↓CCGGG3' Asc I 5'G↓GCGCGGG3' Mun I 5'C↓AATTG3' （1）启动子的基本单位是________，启动子的作用是________。 （2）设计引物克隆目的基因。如图所示应选择引物________（填序号）对CBFs基因进行克隆，为了后续能将目的基因正确连接到载体上，应在CBFs基因上游引物的________端添加________（EcoRⅠ或“BamHⅠ”或“MunⅠ”）识别序列。 （3）根据图示Ti质粒的结构，应选用限制酶_________切割Ti质粒，并通过________酶进行连接。 （4）用________处理农杆菌方能将重组质粒导入。在培养基中添加________来筛选成功导入质粒的农杆菌。将拟南芥叶片浸泡在转基因农杆菌菌液中一段时间对其进行转化，然后提取叶片中的DNA，通过PCR后再通过________判断CBFs基因是否整合到拟南芥基因组中，结果如下图所示。该转基因叶片的基因组中可能已整合CBFs基因，PCR结果中显示出小分子非目标条带，产生的原因可能是________（填字母）。 A.变性温度太低 B.复性温度太低 C.复性温度太高 D.引物特异性弱 （5）已获取成功转入CBFs基因的拟南芥植株，将其放置在_______环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。 【答案】（1） ①. 脱氧核苷酸 ②. RNA聚合酶识别和结合的部位，可驱动目的基因的转录 （2） ①. ①④ ②. 5′ ③. Mun Ⅰ （3） ①. EcoR Ⅰ和Sph Ⅰ ②. DNA连接 （4） ①. Ca2+ ②. 氨苄青霉素 ③. 琼脂糖凝胶电泳（凝胶电泳） ④. BD （5）寒冷（低温） 【解析】 【分析】PCR反应过程:变性→复性→延伸。变性：当温度上升到90℃以上时，双链DNA解聚为单链，复性：温度下降到50℃左右，两种引物通过碱基互补配对与两条单链DNA结合，延伸：72℃左右时，Taq酶有最大活性，可使DNA新链由5'端向3'端延伸。 【小问1详解】 启动子是RNA聚合酶识别和结合的一段DNA序列，能驱动目的基因转录出mRNA。启动子的基本单位是脱氧核苷酸。 【小问2详解】 PCR 扩增时，引物与模板链的3'结合，沿着5'→3'的方向延伸子链，由图可知，扩增目标基因时应选择引物①④，为了保证目的基因成功转录，首先CBFs基因应插入质粒的启动子和终止子之间，其次目的基因的转录方向应与Ti质粒上的转录方向一致，可使用EcoR I和Sph I切割质粒（AmPr为氨苄青霉素抗性基因，在后期的筛选中需要使用，不能使用BamH I酶切，Sau3A也能识别并切割BamH I酶切位点），由于使用EcoR I会破坏目的基因结构的完整性，可使用Mun I切割目的基因，即上游引物的5′端添加Mun I识别序列，下游引物的5′端添加Sau3A识别序列。 【小问3详解】 BamH Ⅰ切割标记基因不能用，Sau3A的识别序列包含BamH Ⅰ的识别序列也不能用，Ti质粒的T-DNA区域需保留完整以确保目的基因转移，图示中EcoR Ⅰ和Sph Ⅰ位于T-DNA内且无重叠，切割后可产生互补末端便于连接，故选用EcoR Ⅰ和Sph Ⅰ，切割后通过DNA连接酶将目的基因和切割后的Ti质粒进行连接。 【小问4详解】 用Ca2+处理农杆菌可使其成为感受态细胞，能更好地吸收重组质粒。在培养基中添加氨苄青霉素来筛选成功导入质粒的农杆菌，因为Ti质粒上有氨苄青霉素抗性基因（Ampr）。将拟南芥叶片浸泡在转基因农杆菌菌液中一段时间对其进行转化，然后提取叶片中的DNA，通过PCR后再通过琼脂糖凝胶电泳（凝胶电泳）判断CBFs基因是否整合到拟南芥基因组中。PCR结果中显示出小分子非目标条带，原因可能是复性温度太低，导致引物与模板的结合特异性降低，引物特异性弱也会出现非特异性扩增，产生小分子条带，BD正确，AC错误。 故选BD。 【小问5详解】 将成功转入CBFs基因的拟南芥植株放在寒冷（低温）环境中检测拟南芥耐寒模型是否建立成功。 23. 黏膜免疫系统作为第一道免疫防御屏障，能够参与保护生物体免受病原体的感染。多聚免疫球蛋白受体（pIgR）作为黏膜免疫防御的一个关键因子，能够介导免疫球蛋白跨过上皮细胞进行转运和分泌，发挥免疫球蛋白在黏液中清除病原体和毒素的作用。研究人员从大菱鲆提取pIgR基因，针对不同器官组织开展了pIgR基因研究（如图），其中DEPC物质可与RNA酶结合使酶发生变性。 （1）引物的作用是________，提取过程加入DEPC物质作用是________。 （2）为将pIgR基因以正确方向插入质粒需要双酶切，这就要求在设计引物时，需在引物的5′端加入相应的酶切位点。已知a链为转录模板链，引物1的5′端酶切位点的碱基序列为GAATTC，则引物2的5′端酶切位点的碱基序列为_________，理由是________。 （3）构建pIgR基因表达载体后，与处于感受态的大肠杆菌菌株混合，pIgR基因表达载体进入菌体内，此过程称为________。然后将菌液涂布在含有________的LB固体培养基培养，加入诱导剂诱导pIgR基因在大肠杆菌中表达，提取、纯化蛋白质。 （4）另一组科研人员在研究Ti质粒时，画出了如图1所示的部分结构示意图，①~⑥为部分限制酶识别位点，LB与RB为T-DNA左边界序列和右边界序列，tms与tmr为激素基因，Tetr为四环素抗性基因，Ori为复制原点，Pro为启动子。图2为部分限制酶及其识别序列与切割位点。 研究人员分别将质粒A（结构如图1）、质粒B（去除了图1中tmr与tmr的Ti质粒）、质粒C（去除了图1中LB或RB的Ti质粒）导入不含质粒的农杆菌中，将导入质粒的农杆菌与植物外植体分别共培养。 ①ori通常富含碱基________，有利于解旋。 ②为获得胚状体或试管苗，研究人员用携带了质粒B的农杆菌侵染植物，而不用携带质粒A的农杆菌，原因最可能是________。 ③在农杆菌侵染植物的过程中，农杆菌会产生酶甲，甲把T-DNA的一条核苷酸链切割下来，该单链进入植物细胞后形成双链，甲识别与切割的序列应为T-DNA中的________。 ④有学者认为甲是由Vir区段的基因在酚类物质的刺激下编码产生的。研究人员利用某双子叶植物的突变体（不能合成酚类物质）、基础培养基（利于植物组织培养的培养基）、酚类物质、质粒B、不含质粒的农杆菌进行了相关实验，并证实了上述猜测是正确的。在上述农杆菌与植物外植体的共培养实验中，实验的自变量是________。 【答案】（1） ①. 使DNA聚合酶能够从引物的3′端开始连接脱氧核苷酸 ②. 防止RNA被降解 （2） ①. GCGGCCGC ②. a链为转录模板链，根据mRNA的合成方向，引物2的5′端靠近启动子，应有NotⅠ的酶切位点 （3） ①. 转化 ②. 氨苄青霉素 （4） ①. AT碱基对（或A-T） ②. T-DNA中的tms与tmr在植物细胞中表达，产生的激素会影响愈伤组织的形成及分化 ③. LB与RB ④. 农杆菌中的质粒B是否被去除了Vir区段、在基础培养基中是否添加酚类物质 【解析】 【分析】1、PCR原理：在高温作用下，打开DNA双链，每条DNA单链作为母链，以4种游离脱氧核苷酸为原料，合成子链，在引物作用下，DNA聚合酶从引物3'端开始延伸DNA链，即DNA的合成方向是从子链的5'端自3'端延伸的。实际上就是在体外模拟细胞内DNA的复制过程。 2、基因表达载体包括目的基因、标记基因、启动子和终止子。标记基因的作用是为了鉴别受体细胞中是否含有目的基因，从而将含有目的基因的细胞筛选出来。 小问1详解】 引物是一小段能与DNA母链的一段碱基序列互补配对的短单链核酸，引物的作用是使DNA聚合酶能够从引物的3'端开始连接脱氧核苷酸。酶具有专一性，RNA酶能水解RNA，而DEPC物质可与RNA酶结合使酶发生变性，故提取过程加入DEPC物质作用是防止RNA被降解。 【小问2详解】 引物需要与模板的3’端结合，引物1的5'端酶切位点的碱基序列为GAATTC，即选择的酶是EcoRⅠ，由于a链为转录模板链，根据mRNA的合成方向，引物2的5'端靠近启动子，应有NotⅠ的酶切位点，引物2的5'端酶切位点的碱基序列为GCGGCCGC。 【小问3详解】 IgR基因表达载体进入菌体内，此过程称为转化；据图可知，重组质粒上含有氨苄青霉素抗性基因，可作为标记基因筛选重组质粒，故将菌液涂布在含有氨苄青霉素的LB固体培养基培养，加入诱导剂诱导pIgR基因在大肠杆菌中表达，提取、纯化蛋白质。 小问4详解】 由于C-G之间有3个氢键，而A-T之间有两个氢键，因此DNA复制起点（ori）处富含AT碱基，有利于解旋。在植物组织培养过程中，生长素与细胞分裂素共同控制着愈伤组织的形成及分化；质粒A中含有tms与tmr，二者表达会产生相应的激素，质粒B不含有tms与tmr；为获得胚状体或试管苗，用携带了质粒B的农杆菌侵染植物，而不用携带质粒A的农杆菌，原因可能是进入植物细胞的T-DNA中的tms与tmr在受体细胞中表达，所产生的激素会影响愈伤组织的形成及分化。在农杆菌侵染植物的过程中，农杆菌会产生酶甲，甲将T-DNA的一条核苷酸链切割下来，该单链进入植物细胞并在植物细胞中形成双链，由题干可知LB与RB是T-DNA进入植物细胞不可缺少的结构，因此甲识别与切割的序列应为T-DNA中的LB与RB。有学者认为甲是由Vir区段的基因在酚类物质的刺激下编码产生的。欲证实上述猜测的正确性，至少需进行3组对照实验，与突变型植株的外植体共培养的农杆菌类型和所使用的培养基：含质粒B的农杆菌+基础培养基；含质粒B的农杆菌+含酚类物质的基础培养基；含去除了Vir区段的质粒B的农杆菌+含酚类物质的基础培养基。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$