精品解析：山东省德州市夏津第一中学2024-2025学年高二下学期6月月考生物试题

山东省德州市夏津第一中学2024-2025学年高二下学期生物月考试题 2025.6 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一项符合题目要求 1. 研究发现，绵羊肺腺瘤逆转录病毒（JSRV）能诱发绵羊肺泡上皮细胞发生恶性转化，其结构如图所示，外侧由囊膜包裹，囊膜蛋白由表面蛋白（SU）和跨膜蛋白（TM）两个功能区组成，前者负责与细胞表面的特异性受体结合，后者则启动与细胞膜的融合以完成其侵染过程。下列说法正确的是（ ） A. 囊膜与细胞膜的组成成分和结构相似，都由磷脂和蛋白质组成 B. JSRV侵染过程所消耗的能量主要由宿主细胞的线粒体提供 C. SU特异性识别宿主细胞的过程体现了细胞间的信息交流功能 D. 可推测JSRV的遗传物质是DNA，增殖时需要宿主细胞的脱氧核苷酸为原料 【答案】B 【解析】 【分析】病毒是非细胞生物，是专性寄生物，病毒的培养需要在活细胞中进行，病毒侵入宿主细胞后，在其遗传物质的控制下利用宿主细胞提供的条件合成自身的核酸和蛋白质完成自身的增殖过程，病毒之所以是生物，在于能不断的侵染宿主细胞完成自身的增殖过程，细胞是最基本的生命系统，病毒不属于生命系统。 【详解】A、囊膜与细胞膜的组成成分和结构相似，主要由磷脂和蛋白质组成，A错误； B、JSRV是病毒，没有细胞结构，必须寄生在活细胞内，其侵染过程所消耗的能量主要由宿主细胞的线粒体提供，B正确； C、病毒无细胞结构，所以SU特异性识别宿主细胞的过程不能体现细胞间的信息交流功能，C错误； D、JSRV属于逆转录病毒，可推测JSRV的遗传物质是RNA，增殖时需要宿主细胞的核糖核苷酸为原料，D错误。 故选B。 2. 脂滴（LD）是最新发现的一种主要储存甘油三酯和胆固醇等脂质的新型细胞器。哺乳动物细胞在侵入的细菌脂多糖LPS作用下，会促使多种宿主防御蛋白在LD上组装成复杂的簇，引发蛋白质介导的抗菌作用。LPS还能抑制LD内脂质在线粒体内的降解，同时增加LD与细菌的接触。下列说法错误的是（　　） A. LD可能是由单层磷脂分子包裹而成的细胞器 B. LD中的胆固醇在人体内可参与血液中脂质的运输 C. LD可作为杀死细胞内病原体维持细胞稳态的细胞器 D. LPS是由哺乳动物细胞产生的信号分子，可抑制LD内脂质的代谢 【答案】D 【解析】 【分析】组成脂质的化学元素主要是C、H、O，有些脂质还含有P和N，细胞中常见的脂质有： （1）脂肪：是由三分子脂肪酸与一分子甘油发生反应而形成的，作用：①细胞内良好的储能物质；②保温、缓冲和减压作用。 （2）磷脂：构成膜（细胞膜、核膜、细胞器膜）结构的重要成分。 （3）固醇：维持新陈代谢和生殖起重要调节作用，分为胆固醇、性激素、维生素D等。①胆固醇：构成动物细胞膜的重要成分，参与血液中脂质的运输。②性激素：促进生殖器官的发育和生殖细胞的形成。③维生素D：促进肠道对钙和磷的吸收。 【详解】A、脂滴（LD）主要储存脂肪等脂质，脂质不溶于水，则脂滴可能是由单侧磷脂分子包裹而成的细胞器，尾部朝内有利于储存脂肪，A正确； B、LD中的胆固醇不仅是构成动物细胞膜的重要成分，还可参与血液中脂质的运输，B正确； C、多种宿主防御蛋白会在LD上组装成复杂的簇，引发抗菌作用，以应对细菌的侵袭，所以LD可与细菌接触，杀死病原体，维持细胞稳态，C正确； D、LPS是细菌的脂多糖，不是哺乳动物细胞产生的信号分子，D错误。 故选D。 3. 冰虫是目前已知的唯一一种在冰中生活的动物，昼伏夜出。当温度持续高于5℃时会发生“自溶”，虫体会产生溶解酶将自身溶解掉。下列说法错误的是（ ） A. 冰虫体内的蛋白质在低温下也有活性，保证冰虫在冰中生活 B. 冰虫体内的水可与多糖、蛋白质、核酸等结合形成结合水 C. 冰虫体内水分子间的氢键使水成为极性分子，并具有较高的比热容 D. 冰虫体内水分子间的弱吸引力称为氢键，其形成与断裂使水具有流动性 【答案】C 【解析】 【分析】细胞中的水有两种存在形式，自由水和结合水。自由水的主要功能：（1）细胞内的良好溶剂。（2）细胞内的生化反应需要水的参与。结合水是细胞结构的主要组成成分。 【详解】A、冰虫能在冰中生活，说明其体内的蛋白质在低温下有较高活性，A正确； B、水可以与多糖、蛋白质、核酸等结合形成结合水，B正确； C、水分子是极性分子不是因为氢键，而是因为其分子结构不对称，C错误； D.、冰虫体内水分子间存在弱吸引力即氢键，氢键不断地形成和断裂，使得水分子能够相对自由地移动，从而使水具有流动性，D正确。 故选C。 4. 甘肃陇南的“武都油橄榄”是中国国家地理标志产品，其果肉呈黄绿色，子叶呈乳白色，均富含脂肪。由其生产的橄榄油含有丰富的不饱和脂肪酸，可广泛用于食品、医药和化工等领域。下列叙述正确的是（　　） A. 油橄榄子叶细胞中含量最多的化合物是脂肪 B. 不饱和脂肪酸的熔点较高，橄榄油在室温下通常呈液态 C. 脂肪是由三分子脂肪酸与一分子甘油发生反应而形成的酯 D. 苏丹Ⅲ染液处理油橄榄果肉，在显微镜下可观察到橘黄色的脂肪颗粒 【答案】C 【解析】 【详解】A、油橄榄子叶细胞中含量最多的化合物是水，而非脂肪，水是活细胞中含量最多的化合物，A错误； B、不饱和脂肪酸的熔点较低，橄榄油富含不饱和脂肪酸，所以在室温下通常呈液态，B错误； C、脂肪又叫甘油三酯，是由三分子脂肪酸与一分子甘油发生反应形成的酯，C正确； D、油橄榄果肉呈黄绿色，会干扰实验结果，不能作为实验材料来鉴定脂肪，D错误。 故选C。 5. 胶原是哺乳动物体内含量最多的一类蛋白质，约占蛋白质总量的1/4。它由三条肽链拧成，肽链间有二硫键，部分区域呈螺旋形。如图是前胶原在两种前胶原酶的作用下形成胶原的示意图。下列选项错误的是（ ） A. 胶原至少含有3个游离的—COOH B. N-前胶原酶作用位点为端肽氨基端的肽键 C. 肽链间二硫键最可能在光面内质网中形成 D. 体内胶原用双缩脲试剂处理，无需加热即会有紫色出现 【答案】C 【解析】 【分析】1、构成蛋白质的基本单位是氨基酸，其结构特点为每种氨基酸分子至少都含有一个氨基和一个羧基，且都有一个氨基和一个羧基连接在同一个碳原子上，这个碳原子还连接一个氢和一个R基，氨基酸的不同在于R基的不同。 2、氨基酸在核糖体中通过脱水缩合形成多肽链，而脱水缩合是指一个氨基酸分子的羧基(-COOH )和另一个氨基酸分子的氨基(-NH2)相连接，同时脱出一分子水的过程，连接两个氨基酸的化学键是肽键。 【详解】A、1条肽链至少含1个游离的羧基，胶原含3条肽链，至少含有3个游离的羧基（-COOH），A正确； B、由图可知，图示左侧为氨基端，右侧为羧基端，N-前胶原酶作用位点为端肽氨基端的肽键，B正确； C、肽链间二硫键最可能在粗面内质网中形成，C错误； D、蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应，体内胶原是蛋白质，用双缩脲试剂处理，无需加热即会有紫色出现，D正确。 故选C。 6. 迁移体是清华大学研究团队发现的一种新型细胞器，是细胞迁移过程中尾部收缩丝的交叉点或末端形成的囊泡（如图所示），内含损伤的线粒体、mRNA、蛋白质等。随着细胞的迁移，该囊泡从收缩丝的末端脱落下来形成独立的细胞外囊泡，释放到细胞外或被邻近细胞吞噬。下列说法正确的是（ ） A. 迁移体、线粒体和中心体的膜都属于细胞的生物膜系统 B. 迁移体内受损的线粒体可以被内质网中的酸性水解酶降解 C. 人的成熟红细胞中线粒体损伤时，迁移体数量可能会增多 D. 迁移体中的mRNA被其他细胞摄取后可能在受体细胞内继续发挥作用 【答案】D 【解析】 【分析】迁移体是清华大学研究团队发现的一种新型细胞器，是细胞迁移过程中尾部收缩丝的交叉点或末端形成的囊泡（如图所示），内含损伤的线粒体、mRNA、蛋白质等。据此分析作答。 【详解】A、中心体是无膜的细胞器，不属于细胞的生物膜系统，A错误； B、迁移体清理受损线粒体，是通过胞吐将受损的细胞器运到细胞外或被邻近细胞吞噬，受损线粒体可被吞噬细胞内的溶酶体内的酶水解，B错误； C、人的成熟红细胞不含细胞核和线粒体等细胞器，C错误； D、由题意“迁移体内含mRNA等，随着细胞的迁移，该囊泡从收缩丝的末端脱落下来形成独立的细胞外囊泡，或被邻近细胞摄取”可推测，迁移体中的mRNA被其他细胞摄取后可能在受体细胞内继续发挥作用，D正确。 故选D。 7. 新冠病毒主要攻击人体的肺部细胞，它是一种正链RNA病毒。新冠病毒的正链RNA侵入宿主细胞后，首先作为模板合成病毒的蛋白质，然后在依赖于RNA的RNA聚合酶的作用下，合成负链RNA，进而以负链RNA为模板合成正链RNA，最终组装成子代病毒颗粒。下列有关叙述错误的是（ ） A. 新冠病毒的正链RNA具有mRNA的功能 B. 在宿主细胞内，子代新冠病毒是由有关蛋白质与负链RNA组装成的 C. 通过抑制依赖于RNA的RNA聚合酶的活性可阻止新冠病毒在人体内的增殖 D. 新冠病毒在宿主细胞中能够合成自身的蛋白质依赖于密码子的通用性 【答案】B 【解析】 【分析】病毒是一类没有细胞结构的特殊生物，只有蛋白质外壳和内部的遗传物质构成，不能独立的生活和繁殖，只有寄生在其他生物的活细胞内才能生活和繁殖，一旦离开了活细胞，病毒就无法进行生命活动。 【详解】A、新冠病毒的正链RNA具有mRNA的功能，能作为合成蛋白质的模板，A正确; B、在宿主细胞内，子代新冠病毒是由有关蛋白质与正链RNA组装成的，B错误； C、分析题干信息可知，通过抑制依赖于RNA的RNA聚合酶的活性可阻止新冠病毒在人体内的增殖，C正确； D、密码子的通用性使得病毒RNA在宿主细胞中能合成自身的蛋白质，D正确。 故选B。 8. 水势(Yw)与溶液的吸水能力呈负相关，主要受溶液浓度、压力等的影响。t0时刻将成熟植物细胞(细胞液Ψw=-0.7MPa)转移至一定浓度的蔗糖溶液中，细胞液水势的变化趋势如图所示。下列分析正确的是（　　） A. t0~t1时段，该细胞的吸水能力逐渐增强 B. t0~t1时段，细胞内外溶液的浓度差逐渐减小 C. t0~t1时段，该细胞质壁分离的程度逐渐增大 D. t1时刻后，Ψw不再增加，细胞内外渗透压相等 【答案】B 【解析】 【分析】当细胞液浓度小于外界溶液浓度时，细胞失水，原生质层对细胞壁的压力减小；当细胞液浓度大于外界溶液浓度时，细胞吸水，原生质层对细胞壁的压力逐渐增大。 【详解】A、已知水势与溶液的吸水能力呈负相关，在t0~t1时段，细胞液水势逐渐增大，那么其吸水能力应逐渐减弱，A错误； B、在t0~t1时段，细胞液水势逐渐增大，说明细胞在吸水，随着细胞吸水，细胞液浓度逐渐降低，细胞内外溶液的浓度差逐渐减小，B正确； C、t0~t1时段细胞在吸水，细胞会发生质壁分离复原，而不是质壁分离程度逐渐增大，C错误； D、t1时刻后， Ψw不再增加，可能是由于细胞壁的限制，细胞不能再继续吸水，但此时细胞内外渗透压不一定相等，D错误。 故选B。 9. 生长于NaCl浓度稳定在100 mmol/L的液体培养基中的酵母菌，可通过离子通道吸收Na+，但细胞质基质中Na+浓度超过30 mmol/L时会导致酵母菌死亡。为避免细胞质基质Na+浓度过高，液泡膜上的蛋白N可将Na+以主动运输的方式转运到液泡中，细胞膜上的蛋白W也可将Na+排出细胞。下列说法错误的是（ ） A. Na+在液泡中的积累有利于酵母细胞吸水 B. 蛋白N转运Na+过程中自身构象会发生改变 C. 通过蛋白W外排Na+的过程不需要细胞提供能量 D. Na+通过离子通道进入细胞时不需要与通道蛋白结合 【答案】C 【解析】 【分析】主动运输的特点：逆浓度梯度、需要载体蛋白、消耗能量。主动运输普遍存在于动植物和微生物细胞中，通过主动运输来选择吸收所需要的物质，排出代谢废物和对细胞有害的物质，从而保证细胞和个体生命活动的需要。 【详解】A、Na+在液泡中的积累，细胞液浓度增加，从而有利于酵母细胞吸水，A正确； B、液泡膜上的蛋白N可将Na+以主动运输的方式转运到液泡中，作为载体蛋白，蛋白N转运Na+过程中自身构象会发生改变，B正确； C、为避免细胞质基质Na+浓度过高，液泡膜上的蛋白N可将Na+以主动运输的方式转运到液泡中，细胞膜上的蛋白W也可将Na+排出细胞，外排Na+也是主动运输，需要细胞提供能量，C错误； D、Na+通过离子通道进入细胞时，Na+不需要与通道蛋白结合，D正确。 故选C。 10. 啤酒主要以麦芽、水、啤酒花为原料，经酵母菌酒精发酵而来，具体生产流程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 B. “精酿”啤酒发酵时间长，没有进行过滤和消毒处理，因此保质期较短 C. 发酵过程中要适时向外排气，在发酵后期应适当缩短排气时间间隔 D. 焙烤可利用高温杀死大麦种子胚，碾磨有利于淀粉酶与淀粉充分接触 【答案】C 【解析】 【分析】发酵工程是指利用微生物特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配制、灭菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。 【详解】A、在啤酒发酵过程中，主发酵阶段微生物大量繁殖和代谢活跃。 大部分糖在此阶段被分解，产生酒精、二氧化碳等代谢物，A正确； B、“精酿”啤酒发酵时间长，且没有经过过滤和消毒处理，导致其中存在较多微生物等，容易使啤酒变质，所以保质期短，B正确； C、发酵过程中，前期酵母菌等微生物代谢旺盛，产生二氧化碳的速率快，需要频繁排气。 随着发酵进行，后期微生物代谢减弱，产生二氧化碳速率降低，应适当延长排气时间间隔，而不是缩短，C错误； D、焙烤能利用高温杀死大麦种子的胚，防止种子发芽影响啤酒品质。 碾磨可以使淀粉更充分暴露，有利于淀粉酶与淀粉充分接触进行糖化反应，D正确。 故选C。 11. 饮用被细菌污染的水后，细菌在消化道内会繁殖并产生毒素，引起急性肠胃炎。某同学利用图1所示方法，检测饮用水的细菌含量，图2为不同稀释度下得到的平板。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 配制图1所示固体培养基时，需要先调整到适宜的pH，再灭菌 B. 图1中①～③三个培养皿菌落数的平均值乘稀释倍数即为样品中细菌数 C. 图2是稀释涂布平板法的结果，统计的菌落数比活菌的实际数目要少 D. 图2所示的平板中，a和c的计数结果不适合用于计算样品中的细菌数 【答案】B 【解析】 【分析】纯化微生物时常用的接种方法是平板划线法和稀释涂布平板法。稀释涂布平板法是将菌液进行一系列梯度稀释，然后将菌液涂布到制备好的培养基上进行培养，在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。 【详解】A、配制图1所示固体培养基时，需要先调整到适宜的pH，再分装、灭菌，A正确； B、图1中①～③三个培养皿菌落数的平均值乘稀释倍数再乘以10（各接种0.1mL），即为样品中细菌数，B错误； C、图2是稀释涂布平板法的结果，统计的菌落数比活菌的实际数目要少，这是因为当两个或多个细胞连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落，C正确； D、为了保证结果准确，在每个稀释浓度内，至少要涂布3个平板，而且选择菌落数在30～300的平板进行记数。图2所示的平板中，a中菌落数太多，c中菌落数太少，a和c的计数结果不适合用于计算样品中的细菌数，D正确。 故选B。 12. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B. 卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C. 培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D. 可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 【答案】B 【解析】 【分析】动物细胞培养的条件（1）营养条件。（2）无菌、无毒的环境：培养液和培养用具灭菌处理、无菌环境下操作、定期更换培养液。（3）适宜的温度、pH和渗透压。（4）气体环境：95%空气和5%CO2。 【详解】A、对牛乙注射促性腺激素进行超数排卵，目的是收集更多数量的卵母细胞，以便后续进行核移植操作，A正确； B、卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅱ中期进行，B错误； C、在培养动物体细胞时，需要定期更换培养液，防止细胞代谢产物的积累对细胞自身造成危害，C正确； D、PCR技术可以扩增特定的DNA片段，通过检测犊牛丁细胞中是否含有转基因的DNA片段，就可以鉴定犊牛丁是否为转基因牛，D正确。 故选B。 13. 深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（ ） 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注： “+”表示有；“一”表示无 A. 可用平板划线法对该菌计数 B. 制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C. 由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D. 由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 【答案】D 【解析】 【分析】选择培养基是将允许特定种类的微生物生长、同时抑制或阻止其他微生物生长的培养基；鉴别培养基是在培养基中加入某种试剂或化学药品，使培养后会发生某种变化，从而区别不同类型的微生物的培养基。 【详解】A、平板划线法是用来分离和纯化微生物，获得单个菌落的技术，其主要目的是分离而不是计数。用于活菌计数的方法通常是稀释涂布平板法，A错误； B、制备固体培养基（琼脂平板）的正确流程是：先将培养基成分溶解、调整pH值后，分装到三角瓶中，然后进行高压蒸汽灭菌。待培养基冷却至50℃左右时，再在无菌条件下（如超净工作台）倒入无菌的培养皿中（即“倒平板”），B错误； C、组②为常压 + 纤维素，结果无菌落，而组④为高压 + 纤维素，结果是有菌落。 这个对比恰好说明，在以纤维素为碳源的条件下，该菌不能在常压下生长，而能在高压下生长，C错误； D、③④组形成了一个对照实验，变量是碳源。实验结果表明，在高压条件下，该细菌可以利用纤维素生长（组④），但不能利用淀粉生长（组③），D正确。 故选D。 14. 反向PCR是利用已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①可用同种限制酶切割磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键 B. 过程②需用DNA连接酶将酶切片段环化以实现对未知序列的扩增 C. 过程③需添加方向相对的引物1和3以便DNA聚合酶从其3′端延伸子链 D. 过程③中将温度调至72℃的目的是使引物与模板链通过碱基互补配对结合 【答案】D 【解析】 【分析】1、PCR只能扩增两端序列已知的基因片段，反向PCR可扩增一段已知序列的两端未知序列。反向PCR的目的在于扩增一段已知序列旁侧的DNA，也就是说这一反应体系不是在一对引物之间而是在引物外侧合成DNA。2、如图所示，DNA分子被限制酶切割，然后环化并加入已知序列合成的引物，再通过PCR扩增得到中间是未知序列两侧是已知序列的DNA分子。 【详解】A、由图可知，过程①即酶切后，已知序列能环化，说明两端的黏性末端相同，故过程①是用同一种限制酶对未知序列两端进行切割，A正确； B、过程②即环化，将DNA片段连接起来，该过程中使用DNA连接酶催化相邻核苷酸之间形成磷酸二酯键，B正确； C、过程③为扩增，需添加方向相对的引物1和3以便DNA聚合酶从其3′端延伸子链，C正确； D、过程③中将温度调至72℃的目的是耐高温的DNA聚合酶，将四种脱氧核苷酸根据碱基互补配对原则合成新的DNA链，D错误。 故选D。 15. 琼脂糖凝胶电泳是用来鉴定PCR产物的常用方法。下列说法错误的是（ ） A. 配制的琼脂糖溶液浓度较高时，大分子DNA片段不易分离 B. PCR扩增时，引物特异性较弱会使电泳出现多条条带 C. 配制琼脂糖溶液时加入的指示剂可用于监测电泳进程 D. 向两个加样孔内加相同分子大小的DNA样品，得到的电泳条带位置可能不同 【答案】C 【解析】 【详解】A、琼脂糖凝胶浓度较高时，凝胶孔径较小，大分子DNA片段迁移阻力大，难以分离，A正确； B、PCR引物特异性弱会导致非特异性扩增，产生不同长度的DNA片段，电泳时出现多条条带，B正确； C、配制琼脂糖溶液时加入的是核酸染料（如EB），用于染色DNA；而指示剂（如溴酚蓝）通常存在于上样缓冲液中，用于监测电泳进程，C错误； D、相同大小的DNA若构象不同（如线状、环状），迁移速率可能不同，导致条带位置差异，D正确。 故选C。 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 2024年初，我国多地遭受冻雨自然灾害。为探究植物耐寒机制，某研究小组以洋葱鳞片叶外表皮为实验材料，先分别在常温与低温（4℃）下处理24小时，然后在常温下进行质壁分离实验，结果如下表，下列说法正确的是（ ） 组别 初始细胞质壁分离所需时间/秒 相同时间质壁分离细胞占比/% 相同时间液泡长度与细胞长度比值/% 常温处理组 80 100 41 低温处理组 166 35 80 A. 质壁分离实验过程需将实验材料置于一定浓度梯度的外界溶液中 B. 初始细胞质壁分离所需时间长短与细胞内外溶液浓度差有关 C. 液泡长度与细胞长度比值越大，说明细胞失水越少，质壁分离程度越小 D. 由实验结果推测，植物细胞可通过增加细胞液浓度适应低温环境 【答案】BCD 【解析】 【分析】渗透作用需具备两个条件：一是具有半透膜，二是半透膜两侧的溶液具有浓度差。质壁分离和质壁分离复原中水分子移动速度主要受膜两侧溶液的浓度差影响。成熟的植物细胞构成渗透系统，可发生渗透作用。质壁分离的原因：外因：外界溶液浓度＞细胞液浓度；内因：原生质层相当于一层半透膜，细胞壁的伸缩性小于原生质层。 【详解】A、本实验的自变量为处理洋葱鳞片叶外表皮的温度不同，外界溶液的浓度属于无关变量，各组应相同，即质壁分离实验过程需将实验材料置于不同温度条件下的同种外界溶液中，不需要设置浓度梯度，A错误； B、初始细胞质壁分离所需时间长短与细胞内外溶液浓度差有关，细胞内外溶液浓度差越大，初始细胞质壁分离所需时间越短，反之越长，B正确； C、液泡长度与细胞长度比值越大，说明细胞失水越少，质壁分离程度越小，C正确； D、表中数据表明，与常温状态相比，4℃处理的植物细胞的失水速率和质壁分离程度都降低，因此得出推论：植物细胞可能通过增加细胞液的浓度（比如低温下淀粉分解成可溶性糖增多），使细胞失水减少，适应低温环境，D正确。 故选BCD。 17. 和是植物利用的主要无机氮源，的吸收由根细胞膜两侧的电位差驱动，的吸收由H+浓度梯度驱动，相关转运机制如图。铵肥施用过多时，细胞内的浓度增加和细胞外酸化等因素引起植物生长受到严重抑制的现象称为铵毒。下列说法不正确的是（　　） A. 通过AMTs进入细胞消耗的能量直接来自ATP B. 通过SLAH3转运到细胞外的方式属于被动运输 C. 铵毒发生后，增加细胞外的会加重铵毒 D. 载体蛋白NRT1.1转运和H+的速度与二者在膜外的浓度呈正相关 【答案】ACD 【解析】 【分析】物质跨膜运输主要包括两种方式:被动运输和主动运输，被动运输又包括自由扩散和协助扩散，被动运输是由高浓度向低浓度一侧扩散，而主动运输是由低浓度向高浓度一侧运输。其中协助扩散需要载体的协助，但不需要消耗能量：而主动运输既需要消耗能量，也需要载体的协助。 【详解】A、由题干信息可知， NH+4 的吸收是根细胞膜两侧的电位差驱动的，所以NH+4 通过AMTs进入细胞消耗的能量不是来自ATP，A错误； B、由图上可以看到， NO-3 进入根细胞膜是H+的浓度梯度驱动，进行的逆浓度梯度运输，所以NO-3 通过SLAH3转运到细胞外是顺浓度梯度运输，属于被动运输，B正确； C、铵毒发生后，H+在细胞外更多，增加细胞外的NO3-，可以促使H+向细胞内转运，减少细胞外的H+，从而减轻铵毒，C错误； D、据图可知，载体蛋白NRT1.1转运NO3-属于主动运输，主动运输的速率与其浓度无必然关系；运输H+属于协助扩散，协助扩散在一定范围内呈正相关，超过一定范围后不成比例，D错误。 故选ACD。 18. 酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达60℃左右；将大曲和酿酒原料混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（ ） A. 堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母 B. 大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物 C. 窖池发酵过程中，酵母菌以无氧呼吸为主 D. 窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 【答案】BC 【解析】 【分析】果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是兼性厌氧微生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，把糖分解成二氧化碳和水；在无氧条件下，酵母菌能进行酒精发酵。故果酒的制作原理是酵母菌无氧呼吸产生酒精，酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃。 【详解】A、酵母菌最适宜生长繁殖的温度范围是18～30℃，堆积培养过程中温度可以达到60℃左右，高温不利于筛选酿酒酵母，A错误； B、大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，糖化是将淀粉水解形成糖浆的过程，故大曲中应存在能分泌淀粉酶的微生物，B正确； C、窖池发酵开始会有氧气进行有氧呼吸，不是只进行无氧呼吸，C正确； D、窖池密封不严使酒变酸是因为乙醇被氧化为醋酸，D错误。 故选BC。 19. 毛状根是植物感染发根农杆菌（其T-DNA含有生长素合成基因）后产生的病理结构，在生产某些次生代谢物方面具有独特的优势。下图为利用植物组织或细胞培养技术进行次生代谢物生产的流程，下列正确的有（ ） A. 诱导愈伤组织时，在酒精灯火焰旁将外植体的1/3~1/2插入培养基 B. 培养体系1制备过程中导入外源基因可采用花粉管通道法 C. 与培养体系1和2不同，培养体系3的获得不需要添加外源植物激素 D. 培养体系1和3的制备都利用了基因重组原理，且可产生相同代谢产物 【答案】AC 【解析】 【分析】植物组织培养过程中，整个过程应严格无菌无毒，外植体需将其先用体积分数为70%的酒精消毒30s后，用无菌水清洗2-3次，再用次氯酸钠处理30min后，立即用无菌水清洗2-3次。这样既考虑了药剂的消毒效果，又考虑了植物的耐受能力。 【详解】A、在诱导愈伤组织时，为了防止杂菌污染，操作应在酒精灯火焰旁进行，并且将外植体的1/3 - 1/2插入培养基，这样有利于外植体与培养基充分接触，获取营养物质等，A正确； B、培养体系1制备过程是将外源基因导入植物细胞系。PEG介导法一般用于原生质体的融合，花粉管通道法是将目的基因导入植物受精卵或早期胚胎细胞等，对于植物细胞系导入外源基因常用农杆菌转化法等，而不是PEG介导法或花粉管通道法，B错误； C、培养体系3是由毛状根培养获得的，毛状根是植物感染发根农杆菌（其 T - DNA 含有生长素合成基因）后产生的，自身能够合成生长素等植物激素，所以与培养体系1和2（需要添加外源植物激素来诱导脱分化和再分化等过程）不同，培养体系3的获得不需要添加外源植物激素，C正确； D、培养体系1是通过转基因技术获得转基因细胞系，利用了基因重组原理；培养体系 3 是利用发根农杆菌感染植物产生毛状根，发根农杆菌的T - DNA整合到植物基因组中，也利用了基因重组原理。但是由于转基因细胞系和毛状根的基因组成等不完全相同，所以不一定能产生相同代谢产物，D错误。 故选AC。 20. Southern印迹杂交是进行基因组 DNA 特定序列定位的通用方法。其基本方法是：利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的 DNA 片段，将凝胶上的 DNA变性并在原位将单链DNA 片段转移至硝酸纤维膜上并固定，再与放射性标记的探针进行杂交，利用放射自显影检测特定DNA分子。根据信息判断下列说法中错误的是（　　） A. 限制性内切酶消化 DNA片段时破坏了相邻两个核苷酸分子之间的磷酸二酯键 B. 转移至硝酸纤维膜上的 DNA片段中有2 个游离的磷酸基团 C. 标记探针与硝酸纤维膜上的 DNA 分子部分碱基序列互补 D. 可用 Southern印迹杂交法从基因组文库中获取目基因 【答案】B 【解析】 【分析】限制酶能识别双链DNA分子的特定核苷酸序列，并使特定的磷酸二酯键断开。双链DNA分子中有两个游离的磷酸基团，单链DNA分子中有一个游离的磷酸基团。探针可以和变性的DNA分子进行杂交，依据碱基互补配对原则。Southern印迹杂交可对基因组 DNA 特定序列定位，可从基因组文库中获取目的基因。 【详解】A、限制性内切酶切割DNA分子内部核苷酸分子之间的磷酸二酯键，A正确； B、转移至硝酸纤维膜上的 DNA片段是单链DNA分子，其中有1 个游离的磷酸基团，B错误； C、核酸探针通过氢键与待检测基因片段进行连接，进行碱基互补配对，C正确； D、放射性标记探针进行杂交，利用放射自显影检测特定DNA分子，可用 Southern印迹杂交法从基因组文库中获取目的基因，D正确。 故选B。 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 非酒精性脂肪肝病 （NAFLD）是我国第一慢性肝病，其特点是过多的脂质以脂滴的形式存在于肝细胞中。研究发现肝细胞内存在脂质自噬的过程可以有效降解脂滴从而减少脂质的堆积。图1 表示脂质自噬的方式及过程。 （1）非酒精性脂肪性肝炎是糖脂摄入过量，糖脂代谢异常产生的自由基攻击肝细胞的磷脂分子所致。研究人员发现患者血液中谷丙转氨酶（肝细胞内蛋白质）含量明显上升，从细胞膜的功能方面分析其原因是______。 （2）图 1中方式①和②自噬溶酶体的形成与膜的流动性有关，该特点在分子水平上主要表现为____________。方式③中脂滴膜蛋白 PLIN2 经分子伴侣 Hsc70 识别后与溶酶体膜上的LAMP2A 受体结合进入溶酶体发生降解，据此推测 PLIN2 蛋白具有______（填“促进”或“抑制”）脂质自噬的作用。 （3）非酒精性脂肪性肝炎患者血液中甘油三酯和胆固醇偏高。为探究药剂 Exendin-4 在脂质代谢中的作用，科研人员设计以下实验： a.将非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠均分为甲、乙、丙三组。 b.甲组给予____________作为对照；乙、丙两组均给予高脂饮食，乙组腹腔注射生理盐水，丙组腹腔______。 c.注射一周后检测三组小鼠血液中的甘油三酯和胆固醇含量，结果如图2。 根据实验结果可判断，Exendin-4对非酒精性脂肪性肝炎小鼠血脂的作用效果是：____。 （4）在细胞的生命活动中，下列细胞器或结构不会出现RNA分子的是______ A. 染色体 B. 溶酶体 C. 核糖体 D. 高尔基体 【答案】（1）糖脂代谢异常产生的自由基攻击肝细胞的磷脂分子，导致肝细胞细胞膜受损，细胞膜的控制物质进出细胞功能丧失 （2） ①. 构成膜的磷脂分子是可以侧向移动的，其中的蛋白质大多也是可以移动的 ②. 促进 （3） ①. 正常饮食 ②. 等量的Exendin-4 ③. 有效降低糖尿病小鼠的甘油三酯，不能有效降低胆固醇 （4）D 【解析】 【分析】这道题围绕非酒精性脂肪肝病（NAFLD ）脂质自噬及实验展开，图 1 展示脂质自噬方式，方式①中脂滴、吞噬泡等依次形成自噬小体，与溶酶体结合为自噬溶酶体实现脂滴降解；方式②依赖溶酶体内陷，经 LAMP2A 受体等介导让脂滴进入溶酶体降解；方式③里脂滴蛋白 PLIN2 经分子伴侣 Hsc70 识别，与溶酶体膜上 LAMP2A 受体结合，使脂滴进入溶酶体降解，整体展示细胞内脂质自噬的不同路径及多种结构、分子的参与 。图 2 是药物 Exendin - 4 对脂质代谢影响结果。 【小问1详解】 当糖代谢异常产生自由基攻击肝细胞膜的磷脂分子，会使肝细胞膜受损。细胞膜具有控制物质进出细胞的功能，膜受损后，这种功能丧失，原本在肝细胞内的谷丙转氨酶就会释放到血液中，所以患者血液中谷丙转氨酶含量上升。 【小问2详解】 膜流动性在分子水平上表现为构成膜的磷脂分子可以侧向移动，并且其中的大多数蛋白质分子也是可以移动的 。细胞膜主要由磷脂双分子层（磷脂分子可侧向移动 ）和蛋白质（多数能移动 ）组成，这是细胞膜具有流动性的分子基础 。因为 PLIN2 蛋白经分子伴侣识别后，能与溶酶体膜上的受体结合，进而让脂滴进入溶酶体发生降解，所以可推测 PLIN2 蛋白具有促进脂质自噬的作用 。从 “进入溶酶体发生降解” 这一过程，能判断其对脂质自噬起推动作用 。 【小问3详解】 在实验中，甲组作为对照组，要给予正常饮食 。这样可以与乙、丙组的高脂饮食形成对比，遵循对照实验设置原则（对照组为常态处理 ） ，保证实验结果的科学性，通过正常饮食组和高脂饮食组对比，能更清晰看出高脂饮食及后续处理的影响 。丙组是实验组，为保证单一变量（只有是否注射 Exendin - 4 这一变量不同 ），要腹腔注射等量的 Exendin - 4 。对比图 2 中乙组（高脂饮食 + 生理盐水 ）和丙组（高脂饮食 + Exendin - 4 ）的数据，丙组甘油三酯含量明显低于乙组，但胆固醇含量二者差异小。所以得出 Exendin - 4 能有效降低模型小鼠的甘油三酯，不能有效降低胆固醇的结论 。 【小问4详解】 A、染色体主要由 DNA 和蛋白质组成，DNA 可以进行转录产生 RNA，所以染色体会出现 RNA 分子 ，A错误； B、溶酶体中含有多种水解酶（蛋白质 ），虽然溶酶体自身没有 RNA 合成的关键过程，但细胞中存在一些 RNA 参与溶酶体相关蛋白的合成等，B错误； C、核糖体由 rRNA 和蛋白质组成，rRNA 是 RNA 的一种，所以核糖体会出现 RNA 分子 ，C错误； D、高尔基体主要功能是对来自内质网的蛋白质进行加工、分类和包装，其结构组成中不含 RNA 分子 ，D正确。 故选 D 22. 细胞为了生存和生长必须与周围环境交换物质，以吸收营养物质并排出代谢废物，细胞还通过调控细胞质基质和细胞器中各种无机离子的浓度来维持正常的生命活动。回答下列问题： （1）细胞所需的很多水溶性（亲水性）物质在没有膜转运蛋白的帮助下无法穿过脂双层，从细胞膜组成成分特性的角度分析，其原因是________。 （2）下表是一个典型的哺乳动物细胞内外的部分离子浓度比较： 离子 细胞内浓度（mmol/L） 细胞外浓度（mmol/L） Na+ 5～15 145 K+ 140 5 Mg2+ 0.5 1～2 Ca2+ 10-4 1～2 H+ 7×10-5 4×10-5 Cl- 5～15 110 ①无机盐离子所带电荷及它们对水分子的强烈吸引力阻碍了它们进入脂双层内部，因而不能以______的方式进行跨膜运输。 ②为了维持细胞内外的离子浓度差，上表中必须通过主动运输方式运入细胞的离子是______，判断依据是______。 ③某动物组织细胞内存在一种离子（物质M）：张同学认为物质M进入该细胞的方式是主动运输，李同学认为是协助扩散。欲设计实验确定哪位同学的判断正确，请写出实验思路[材料与试剂：该动物组织细胞（可培养）、含有物质M的动物细胞培养液等]：________。 （3）细胞膜上参与物质运输的转运蛋白主要有如图所示的两种： ①图示两种转运蛋白中，转移溶质速度较快的是_______（填图中字母）。 ②在肌细胞中，肌质网（一种特殊形式的内质网）膜上有一种蛋白质称为“钙泵”。当Ca2+从肌质网腔流入细胞质基质时，会刺激肌细胞收缩，为了让肌细胞恢复初始状态，钙泵会利用ATP使其自身发生磷酸化后和Ca2+结合，当钙泵向肌质网的内腔开放时，Ca2+的结合位点消失，钙泵将两个Ca2+释放到肌质网中。由此判断，钙泵将Ca2+________（填“运出”或“运入”）肌质网时的跨膜运输方式为主动运输，该过程需要上图________所示转运蛋白的协助。这种转运蛋白对离子的运输具有选择性，具体体现在_______。 【答案】（1）细胞膜的基本支架磷脂双分子层内部是磷脂分子的疏水端，水溶性分子（亲水性）物质不能自由通过 （2） ①. ①自由扩散 ②. K+、H+ ③. K+、H+在细胞内的浓度高于细胞外，物质逆浓度梯度运入 ④. 将生理状况相同的该动物组织细胞分为甲、乙两组，均置于含有等量物质M的细胞培养液中，甲组给予正常的呼吸条件，乙组加入呼吸抑制剂，培养一段时间后比较两组培养液中物质M的剩余量 （3） ①. A ②. 运入 ③. B ④. 只允许与自身结合部位（结合位点）相适应的分子或离子通过 【解析】 【分析】协助扩散的特点是：顺浓度梯度、需要转运蛋白、不消耗能量；主动运输的特点是：逆浓度梯度、需要载体蛋白、消耗能量。 【小问1详解】 细胞膜的基本支架磷脂双分子层内部是磷脂分子的疏水端，所以水溶性分子（亲水性）物质不能自由通过。 【小问2详解】 ①因为脂双层内部疏水，带电离子无法直接通过，需依赖膜蛋白协助，所以无机盐离子所带电荷及它们对水分子的强烈吸引力阻碍了它们进入脂双层内部，因而不能以自由扩散（或简单扩散）的方式进行跨膜运输。 ②为了维持细胞内外的离子浓度差，上表中必须通过主动运输方式运入细胞的离子是H+、K+，判断依据是细胞内H+、K+，浓度显著高于细胞外，逆浓度梯度运输需消耗能量（主动运输）。③为确定物质M进入某动物组织细胞的方式是主动运输还是协助扩散；将生长状况相同的若干动物组织细胞均分为甲、乙两组，甲组置于含物质M的培养液中，正常培养（提供能量）。乙组置于含物质M的培养液中，并加入呼吸抑制剂（如氰化物）或ATP合成抑制剂（如寡霉素）， 阻断能量供应，定期检测两组细胞内物质M的浓度变化，若乙组（能量抑制）中物质M的摄入量显著低于甲组，则说明物质M的运输依赖能量，支持张同学的观点（主动运输）。 若两组摄入量无显著差异，则说明物质M的运输不依赖能量，支持李同学的观 点（协助扩散）。 【小问3详解】 ①图示两种转运蛋白中，转移溶质速度较快的为A，因为A蛋白为通道蛋白，仅需离子或溶质大小合适即可快速通过；B蛋白为载体蛋白，需构象改变，速度较慢。②钙泵利用ATP磷酸化供能，逆浓度梯度运输Ca2+，B蛋白为载体蛋白，可发生构象变化，与钙泵作用机制一致，故钙泵将Ca2+运入肌质网时的跨膜运输方式为主动运输，该过程需要上图B所示转运蛋白的协助。③这种转运蛋白对离子的运输具有选择性，具体体现在：只允许与自身结合部位（结合位点）相适应的分子或离子通过。 23. 聚羟基丁酸酯（PHB）是某些细菌在碳源充足，氮源缺乏状态下产生的一类颗粒状、可作为细菌体内碳源和能量储备物的高分子化合物，能被苏丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包装材料及医药行业。天然菌中的PHB产量较低，对天然菌进行诱变和筛选可得到高产PHB合成菌。 （1）PHB合成菌的分离培养基的成分为葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和琼脂，该培养基中氮源可以合成的生物大分子（写两种以上）___________，为使PHB合成菌胞体内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是___________。 （2）将等浓度土壤稀释液接种在PHB分离培养基上后，甲组用紫外线照射，乙组不作处理。培养一段时间后，发现甲组菌落数少于乙组，原因是________。通过显微观察法初筛PHB合成菌的方法是________。复筛时需要提取胞体内的PHB，方法是________。 （3）对复筛得到的A~E五个菌株单独培养，检测PHB产量，结果如下图。A~E株菌中适于作工程菌的是___________，其它菌株不适合作工程菌的原因是__________。 （4）在发酵罐中连续发酵生产PHB时，除控制发酵温度、pH并随时检测培养液中PHB合成菌的数量外，还应__________（答出2条）。 【答案】（1） ①. 蛋白质和核酸 ②. 氮源较低 （2） ①. 紫外线会杀死细菌 ②. 在培养基中加入苏丹染料，然后在显微镜下观察，有较多橘黄色颗粒的细菌即为PHB合成菌 ③. 细胞破碎和用氯仿来萃取PHB，从而提取胞体内的PHB （3） ①. 菌株D ②. PHB产量较低、不稳定、合成效率较差 （4）检测PHB浓度、及时添加必需的营养组分 【解析】 【分析】培养基的概念及营养构成：（1）概念：人们按照微生物对营养物质的不同需求，配制出的供其生长繁殖的营养基质。（2）营养构成：各种培养基一般都含有水、碳源、氮源、无机盐，此外还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。 【小问1详解】 该培养基的成分为葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和琼脂，该培养基中氮源可以合成的生物大分子有蛋白质和核酸。为了使PHB合成菌胞体内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是氮源较低，氮源较低可以刺激细菌合成更多的PHB，因为蛋白胨中的氮可以提供细菌合成代谢产物所需的氮元素，但过高的氮源会抑制PHB的合成。 【小问2详解】 甲组用紫外线照射，乙组不作处理，培养一段时间后，发现甲组的菌落数少于乙组，故推测造成这种差异的原因是紫外线会杀死细菌。由题干可知，聚羟基丁酸酯（PHB）能被苏丹染料染色，故通过显微观察法初筛PHB合成菌的方法是：在培养基中加入苏丹染料，然后在显微镜下观察，被染色的细菌即为PHB合成菌。由题干可知，聚羟基丁酸酯（PHB）可溶于氯仿，故复筛时需要提取胞体内的PHB，方法是：细胞破碎和用氯仿来溶解PHB，从而提取胞体内的PHB。 【小问3详解】 据图可知，适合作为工程菌的是菌株D，因为它在产量和合成效率方面表现良好，并且PHB含量较高，稳定，而其他菌株的PHB产量较低、不稳定、合成效率较差，不适合作为工程菌。 【小问4详解】 发酵过程是发酵工程的中心环节，在发酵过程中，要随时检测培养液中的微生物数量、产物浓度等，以了解发酵进程，除了了解发酵进程外，还要及时添加必需的营养组分，要严格控制温度、pH等发酵条件，故在发酵罐中连续发酵生产PHB时，除控制发酵温度、pH并随时检测培养液中PHB合成菌的数量外，还应检测PHB浓度、及时添加必需的营养组分等。 24. 单克隆抗体是由可以制造这种抗体的免疫细胞与骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞产生的。当其应用于医疗中时，有助于减小副作用。一种抗原往往拥有多个不同的表位，在此杂交瘤技术发明之前，即使将纯化的某抗原注射入动物体内，也会产生可识别不同表位的多种抗体，因此抽取动物血清纯化的抗体也不够纯。 （1）根据题意一种抗原注入动物体内可产生多种抗体，原因是_______。 （2）A细胞与骨髓瘤细胞融合后，只考虑两两融合，出现的结果有_________种。这些细胞要在_________中，经过培养后得到杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的种类是多种，原因是___________。 （3）C为杂交瘤细胞在多孔培养基中的培养过程，该培养过程的操作是_____________，这是分别得到杂交瘤a、杂交瘤b、杂交瘤c的关键。 （4）D过程需要对杂交瘤细胞进行_________，就可获得能分泌所需要抗体的细胞。将这些细胞在体外大规模培养从而获取单克隆抗体。单克隆抗体与传统从动物血清中纯化的抗体相比，优点是_________（回答两项）。单克隆抗体在生活中的具体应用____________(回答两点) 【答案】（1）一种抗原拥有多个不同表位，不同表位结构不同，可分别引起体液免疫反应，分别产生识别不同表位的抗体 （2） ①. 3 ②. 特定的选择培养基 ③. B淋巴细胞有多种 （3）使每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞 （4） ①. （克隆化培养）抗体检测 ②. 能准确地识别抗原的细微差异（或特异性强）、与特定的抗原发生特异性结合，并且可以大量制备 ③. 做诊断试剂、运载药物和治疗疾病等 【解析】 【分析】1、动物体内产生的特异性抗体的种类可多达百万种以上，但每一个B淋巴细胞只分泌一种特异性抗体，故动物体内存在多种B淋巴细胞。因此，要想获得大量的单一抗体，必须克隆单一的B淋巴细胞，形成细胞群。但是一个B淋巴细胞是不可能无限增殖的，把一种B淋巴细胞与能在体外大量增殖的骨髓瘤细胞融合，所得到的融合细胞既能大量增殖，又能产生足够数量的特定抗体。 2、题图为单克隆抗体生产流程，A为能产生抗体的多种B淋巴细胞，B为B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合并筛选出杂交瘤细胞的过程，C为杂交瘤细胞在多孔培养基中进行克隆化培养过程，D为抗体检测，筛选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。 【小问1详解】 依据题干信息，一种抗原往往拥有多个不同的表位、将纯化的某抗原注射入动物体内，也会产生可识别不同表位的多种抗体可知，一种抗原拥有多个不同表位，不同表位结构不同，可分别引起体液免疫反应，分别产生识别不同表位的抗体。 【小问2详解】 A细胞为B淋巴细胞，与骨髓瘤细胞融合后，只考虑两两融合，会出现B淋巴细胞与B淋巴细胞融合、B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合的杂交瘤细胞、骨髓瘤细胞与骨髓瘤细胞融合三种情况，这些细胞在特定的选择培养基中选择培养，只有杂交瘤细胞才能生长。因为从动物体内获得的B淋巴细胞有多种，所以与骨髓瘤细胞融合后，经过选择培养得到的杂交瘤细胞有多种。 【小问3详解】 多种杂交瘤细胞在多孔培养基中培养，要使每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞，这样由一个杂交瘤细胞分裂而来的细胞群会产生同一种抗体，即单克隆抗体，所以使每一个孔中尽量只接种一个杂交瘤细胞是得到杂交瘤a、杂交瘤b、杂交瘤c的关键。 【小问4详解】 D过程需要对每一个孔中的杂交瘤细胞进行（克隆化培养）抗体检测，即用特定的抗原与每个孔中杂交瘤细胞产生的抗体进行特异性结合，抗体检测呈阳性的孔内的杂交瘤细胞即为所需的杂交瘤细胞。传统抗体从动物血清中分离，产量低、纯度低、特异性差，单克隆抗体能准确地识别抗原的细微差异（或特异性强），与特定抗原发生特异性结合，并且可以大量制备。单克隆抗体在生活中的具体应用有做诊断试剂、运载药物和治疗疾病等。 25. 种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 （1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为_____。选用图甲中的SmaI对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaI和_____对Ti质粒进行完全酶切，将产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是_____。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶_____进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为_____bp，则一定为正向重组质粒。 （2）为证明这两个突变体是由于T-DNA插入到小麦基因组中同一基因导致的，提取基因组DNA，经酶切后产生含有T-DNA的基因组片段（图乙）。在此酶切过程中，限于后续PCR难以扩增大片段DNA，最好使用识别序列为_____（填“4”“6”或“8”）个碱基对的限制酶，且T-DNA中应不含该酶的酶切位点。需首先将图乙的片段_____，才能利用引物P1和P2成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为_____（填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”）。 （3）通过农杆菌转化法将构建的含有野生型基因的表达载体转入突变植株，如果检测到野生型基因，_____（填“能”或“不能”）确定该植株的表型为野生型。 【答案】（1） ①. 复制原点 ②. XbaI ③. DNA聚合酶 ④. SmaI和SpeI ⑤. 550bp （2） ①. 4 ②. 环化 ③. 测序和序列比对 （3）不能 【解析】 【分析】基因工程技术的基本步骤： （1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成； （2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等； （3）将目的基因导入受体细胞； （4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术；个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。 【小问1详解】 DNA复制的起点是复制原点，因此Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为复制原点。根据SmaI限制酶识别序列可知，酶切形成的是平末端，若质粒仅用SmaI酶切，抗除草剂基因和质粒可以正向接入也可以反向接入，且无法区分，为了确定是否是正向重组质粒，因此在构建重组质粒时需要用到另一种限制酶，抗除草剂因需要插入到启动子和终止子之间，因此不能选择BamHI，因为该限制酶会破坏终止子，因此可选择XbaI和SmaI进行酶切，XbaI酶切会形成黏性末端，需要用DNA聚合酶聚合脱氧核糖核苷酸单体将产生的黏性末端补平（可使重组质粒最小，同时PstI酶切后产生的黏性末端无法用DNA聚合酶抹平，因为DNA聚合酶只能从3'延伸子链）。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌。重组的T-DNA片段上含有一个SmaI酶切位点和一个SpeI酶切位点，可以选择用SmaI和SpeI进行酶切，转录的方向是从模板的3'→5'，和质粒对应的方向相同，经过两种酶的酶切后并电泳呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为550bp，若反向接，较短的条带长度近似为200bp。 【小问2详解】 由于后续PCR难以扩增大片段DNA，所以最好选择识别序列为4个碱基的限制酶，原因是识别序列越短，酶切位点越多，切割产生的片段可能越小，更有利于后续的PCR扩增。由于引物是根据已知序列设计的，但此时需要扩增未知序列，因此可以将图乙的片段环化，这样就可以利用现有引物扩增出未知序列。为了确定未知序列是否是同一基因，需要准确比对其上的碱基序列，因此对同一个基因的操作为测序和序列比对。 【小问3详解】 突变植株成功导入野生型基因，但野生型基因未必可以正常表达，因此不能确定该植株的表型为野生型。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$ 山东省德州市夏津第一中学2024-2025学年高二下学期生物月考试题 2025.6 一、选择题：本题共15小题，每小题2分，共30分。每小题只有一项符合题目要求 1. 研究发现，绵羊肺腺瘤逆转录病毒（JSRV）能诱发绵羊肺泡上皮细胞发生恶性转化，其结构如图所示，外侧由囊膜包裹，囊膜蛋白由表面蛋白（SU）和跨膜蛋白（TM）两个功能区组成，前者负责与细胞表面的特异性受体结合，后者则启动与细胞膜的融合以完成其侵染过程。下列说法正确的是（ ） A. 囊膜与细胞膜的组成成分和结构相似，都由磷脂和蛋白质组成 B. JSRV侵染过程所消耗的能量主要由宿主细胞的线粒体提供 C. SU特异性识别宿主细胞的过程体现了细胞间的信息交流功能 D. 可推测JSRV的遗传物质是DNA，增殖时需要宿主细胞的脱氧核苷酸为原料 2. 脂滴（LD）是最新发现的一种主要储存甘油三酯和胆固醇等脂质的新型细胞器。哺乳动物细胞在侵入的细菌脂多糖LPS作用下，会促使多种宿主防御蛋白在LD上组装成复杂的簇，引发蛋白质介导的抗菌作用。LPS还能抑制LD内脂质在线粒体内的降解，同时增加LD与细菌的接触。下列说法错误的是（　　） A. LD可能是由单层磷脂分子包裹而成的细胞器 B. LD中的胆固醇在人体内可参与血液中脂质的运输 C. LD可作为杀死细胞内病原体维持细胞稳态的细胞器 D. LPS是由哺乳动物细胞产生的信号分子，可抑制LD内脂质的代谢 3. 冰虫是目前已知的唯一一种在冰中生活的动物，昼伏夜出。当温度持续高于5℃时会发生“自溶”，虫体会产生溶解酶将自身溶解掉。下列说法错误的是（ ） A. 冰虫体内的蛋白质在低温下也有活性，保证冰虫在冰中生活 B. 冰虫体内的水可与多糖、蛋白质、核酸等结合形成结合水 C. 冰虫体内水分子间的氢键使水成为极性分子，并具有较高的比热容 D. 冰虫体内水分子间的弱吸引力称为氢键，其形成与断裂使水具有流动性 4. 甘肃陇南的“武都油橄榄”是中国国家地理标志产品，其果肉呈黄绿色，子叶呈乳白色，均富含脂肪。由其生产的橄榄油含有丰富的不饱和脂肪酸，可广泛用于食品、医药和化工等领域。下列叙述正确的是（　　） A. 油橄榄子叶细胞中含量最多的化合物是脂肪 B. 不饱和脂肪酸的熔点较高，橄榄油在室温下通常呈液态 C. 脂肪是由三分子脂肪酸与一分子甘油发生反应而形成的酯 D. 苏丹Ⅲ染液处理油橄榄果肉，在显微镜下可观察到橘黄色的脂肪颗粒 5. 胶原是哺乳动物体内含量最多的一类蛋白质，约占蛋白质总量的1/4。它由三条肽链拧成，肽链间有二硫键，部分区域呈螺旋形。如图是前胶原在两种前胶原酶的作用下形成胶原的示意图。下列选项错误的是（ ） A. 胶原至少含有3个游离的—COOH B. N-前胶原酶作用位点为端肽氨基端的肽键 C. 肽链间二硫键最可能在光面内质网中形成 D. 体内胶原用双缩脲试剂处理，无需加热即会有紫色出现 6. 迁移体是清华大学研究团队发现的一种新型细胞器，是细胞迁移过程中尾部收缩丝的交叉点或末端形成的囊泡（如图所示），内含损伤的线粒体、mRNA、蛋白质等。随着细胞的迁移，该囊泡从收缩丝的末端脱落下来形成独立的细胞外囊泡，释放到细胞外或被邻近细胞吞噬。下列说法正确的是（ ） A. 迁移体、线粒体和中心体的膜都属于细胞的生物膜系统 B. 迁移体内受损的线粒体可以被内质网中的酸性水解酶降解 C. 人的成熟红细胞中线粒体损伤时，迁移体数量可能会增多 D. 迁移体中的mRNA被其他细胞摄取后可能在受体细胞内继续发挥作用 7. 新冠病毒主要攻击人体的肺部细胞，它是一种正链RNA病毒。新冠病毒的正链RNA侵入宿主细胞后，首先作为模板合成病毒的蛋白质，然后在依赖于RNA的RNA聚合酶的作用下，合成负链RNA，进而以负链RNA为模板合成正链RNA，最终组装成子代病毒颗粒。下列有关叙述错误的是（ ） A. 新冠病毒的正链RNA具有mRNA的功能 B. 在宿主细胞内，子代新冠病毒是由有关蛋白质与负链RNA组装成的 C. 通过抑制依赖于RNA的RNA聚合酶的活性可阻止新冠病毒在人体内的增殖 D. 新冠病毒在宿主细胞中能够合成自身的蛋白质依赖于密码子的通用性 8. 水势(Yw)与溶液的吸水能力呈负相关，主要受溶液浓度、压力等的影响。t0时刻将成熟植物细胞(细胞液Ψw=-0.7MPa)转移至一定浓度的蔗糖溶液中，细胞液水势的变化趋势如图所示。下列分析正确的是（　　） A. t0~t1时段，该细胞的吸水能力逐渐增强 B. t0~t1时段，细胞内外溶液的浓度差逐渐减小 C. t0~t1时段，该细胞质壁分离的程度逐渐增大 D. t1时刻后，Ψw不再增加，细胞内外渗透压相等 9. 生长于NaCl浓度稳定在100 mmol/L的液体培养基中的酵母菌，可通过离子通道吸收Na+，但细胞质基质中Na+浓度超过30 mmol/L时会导致酵母菌死亡。为避免细胞质基质Na+浓度过高，液泡膜上的蛋白N可将Na+以主动运输的方式转运到液泡中，细胞膜上的蛋白W也可将Na+排出细胞。下列说法错误的是（ ） A. Na+在液泡中的积累有利于酵母细胞吸水 B. 蛋白N转运Na+过程中自身构象会发生改变 C. 通过蛋白W外排Na+的过程不需要细胞提供能量 D. Na+通过离子通道进入细胞时不需要与通道蛋白结合 10. 啤酒主要以麦芽、水、啤酒花为原料，经酵母菌酒精发酵而来，具体生产流程如图。下列叙述错误的是（ ） A. 啤酒发酵过程中大部分糖的分解和代谢物的生成都在主发酵阶段完成 B. “精酿”啤酒发酵时间长，没有进行过滤和消毒处理，因此保质期较短 C. 发酵过程中要适时向外排气，在发酵后期应适当缩短排气时间间隔 D. 焙烤可利用高温杀死大麦种子胚，碾磨有利于淀粉酶与淀粉充分接触 11. 饮用被细菌污染的水后，细菌在消化道内会繁殖并产生毒素，引起急性肠胃炎。某同学利用图1所示方法，检测饮用水的细菌含量，图2为不同稀释度下得到的平板。下列相关叙述不正确的是（ ） A. 配制图1所示固体培养基时，需要先调整到适宜的pH，再灭菌 B. 图1中①～③三个培养皿菌落数的平均值乘稀释倍数即为样品中细菌数 C. 图2是稀释涂布平板法的结果，统计的菌落数比活菌的实际数目要少 D. 图2所示的平板中，a和c的计数结果不适合用于计算样品中的细菌数 12. 利用动物体细胞核移植技术培育转基因牛的过程如图所示，下列说法错误的是（ ） A. 对牛乙注射促性腺激素是为了收集更多的卵母细胞 B. 卵母细胞去核应在其减数分裂Ⅰ中期进行 C. 培养牛甲的体细胞时应定期更换培养液 D. 可用PCR技术鉴定犊牛丁是否为转基因牛 13. 深海淤泥中含有某种能降解纤维素的细菌。探究不同压强下，该细菌在以纤维素或淀粉为唯一碳源的培养基上的生长情况。其他条件相同且适宜，实验处理及结果如表所示。下列说法正确的是（ ） 组别 压强 纤维素 淀粉 菌落 ① 常压 - + - ② 常压 + - - ③ 高压 - + - ④ 高压 + - + 注： “+”表示有；“一”表示无 A. 可用平板划线法对该菌计数 B. 制备培养基的过程中，应先倒平板再进行高压蒸汽灭菌 C. 由②④组可知，在以纤维素为唯一碳源的培养基上，该菌可在常压下生长 D. 由③④组可知，高压下该菌不能在以淀粉为唯一碳源的培养基上生长 14. 反向PCR是利用已知序列设计引物对未知序列进行扩增的技术，其过程如下图。下列叙述错误的是（ ） A. 过程①可用同种限制酶切割磷酸和脱氧核糖之间的磷酸二酯键 B. 过程②需用DNA连接酶将酶切片段环化以实现对未知序列扩增 C. 过程③需添加方向相对的引物1和3以便DNA聚合酶从其3′端延伸子链 D. 过程③中将温度调至72℃的目的是使引物与模板链通过碱基互补配对结合 15. 琼脂糖凝胶电泳是用来鉴定PCR产物的常用方法。下列说法错误的是（ ） A. 配制琼脂糖溶液浓度较高时，大分子DNA片段不易分离 B. PCR扩增时，引物特异性较弱会使电泳出现多条条带 C. 配制琼脂糖溶液时加入的指示剂可用于监测电泳进程 D. 向两个加样孔内加相同分子大小的DNA样品，得到的电泳条带位置可能不同 二、选择题：本题共5小题，每小题3分，共15分。每小题有一个或多个选项符合题目要求，全部选对得3分，选对但不全的得1分，有选错的得0分。 16. 2024年初，我国多地遭受冻雨自然灾害。为探究植物耐寒机制，某研究小组以洋葱鳞片叶外表皮为实验材料，先分别在常温与低温（4℃）下处理24小时，然后在常温下进行质壁分离实验，结果如下表，下列说法正确的是（ ） 组别 初始细胞质壁分离所需时间/秒 相同时间质壁分离细胞占比/% 相同时间液泡长度与细胞长度比值/% 常温处理组 80 100 41 低温处理组 166 35 80 A. 质壁分离实验过程需将实验材料置于一定浓度梯度的外界溶液中 B. 初始细胞质壁分离所需时间长短与细胞内外溶液浓度差有关 C. 液泡长度与细胞长度比值越大，说明细胞失水越少，质壁分离程度越小 D. 由实验结果推测，植物细胞可通过增加细胞液浓度适应低温环境 17. 和是植物利用的主要无机氮源，的吸收由根细胞膜两侧的电位差驱动，的吸收由H+浓度梯度驱动，相关转运机制如图。铵肥施用过多时，细胞内的浓度增加和细胞外酸化等因素引起植物生长受到严重抑制的现象称为铵毒。下列说法不正确的是（　　） A. 通过AMTs进入细胞消耗的能量直接来自ATP B. 通过SLAH3转运到细胞外的方式属于被动运输 C. 铵毒发生后，增加细胞外的会加重铵毒 D. 载体蛋白NRT1.1转运和H+的速度与二者在膜外的浓度呈正相关 18. 酿造某大曲白酒的过程中，微生物的主要来源有大曲和窖泥。大曲主要提供白酒酿造过程中糖化所需的微生物，制曲过程需经堆积培养，培养时温度可达60℃左右；将大曲和酿酒原料混合，初步发酵后放入窖池；窖池发酵是白酒酿造过程中微生物发酵的最后阶段。下列说法正确的是（ ） A. 堆积培养过程中的高温有利于筛选酿酒酵母 B. 大曲中存在能分泌淀粉酶的微生物 C. 窖池发酵过程中，酵母菌以无氧呼吸为主 D. 窖池密封不严使酒变酸是因为乳酸含量增加 19. 毛状根是植物感染发根农杆菌（其T-DNA含有生长素合成基因）后产生的病理结构，在生产某些次生代谢物方面具有独特的优势。下图为利用植物组织或细胞培养技术进行次生代谢物生产的流程，下列正确的有（ ） A. 诱导愈伤组织时，在酒精灯火焰旁将外植体的1/3~1/2插入培养基 B. 培养体系1制备过程中导入外源基因可采用花粉管通道法 C. 与培养体系1和2不同，培养体系3的获得不需要添加外源植物激素 D. 培养体系1和3的制备都利用了基因重组原理，且可产生相同代谢产物 20. Southern印迹杂交是进行基因组 DNA 特定序列定位的通用方法。其基本方法是：利用琼脂糖凝胶电泳分离经限制性内切酶消化的 DNA 片段，将凝胶上的 DNA变性并在原位将单链DNA 片段转移至硝酸纤维膜上并固定，再与放射性标记的探针进行杂交，利用放射自显影检测特定DNA分子。根据信息判断下列说法中错误的是（　　） A. 限制性内切酶消化 DNA片段时破坏了相邻两个核苷酸分子之间的磷酸二酯键 B. 转移至硝酸纤维膜上的 DNA片段中有2 个游离的磷酸基团 C. 标记探针与硝酸纤维膜上的 DNA 分子部分碱基序列互补 D. 可用 Southern印迹杂交法从基因组文库中获取目基因 三、非选择题：本题共5小题，共55分。 21. 非酒精性脂肪肝病 （NAFLD）是我国第一慢性肝病，其特点是过多的脂质以脂滴的形式存在于肝细胞中。研究发现肝细胞内存在脂质自噬的过程可以有效降解脂滴从而减少脂质的堆积。图1 表示脂质自噬的方式及过程。 （1）非酒精性脂肪性肝炎是糖脂摄入过量，糖脂代谢异常产生的自由基攻击肝细胞的磷脂分子所致。研究人员发现患者血液中谷丙转氨酶（肝细胞内蛋白质）含量明显上升，从细胞膜的功能方面分析其原因是______。 （2）图 1中方式①和②自噬溶酶体的形成与膜的流动性有关，该特点在分子水平上主要表现为____________。方式③中脂滴膜蛋白 PLIN2 经分子伴侣 Hsc70 识别后与溶酶体膜上的LAMP2A 受体结合进入溶酶体发生降解，据此推测 PLIN2 蛋白具有______（填“促进”或“抑制”）脂质自噬的作用。 （3）非酒精性脂肪性肝炎患者血液中甘油三酯和胆固醇偏高。为探究药剂 Exendin-4 在脂质代谢中的作用，科研人员设计以下实验： a.将非酒精性脂肪性肝炎模型小鼠均分为甲、乙、丙三组。 b.甲组给予____________作为对照；乙、丙两组均给予高脂饮食，乙组腹腔注射生理盐水，丙组腹腔______。 c.注射一周后检测三组小鼠血液中的甘油三酯和胆固醇含量，结果如图2。 根据实验结果可判断，Exendin-4对非酒精性脂肪性肝炎小鼠血脂的作用效果是：____。 （4）在细胞的生命活动中，下列细胞器或结构不会出现RNA分子的是______ A. 染色体 B. 溶酶体 C. 核糖体 D. 高尔基体 22. 细胞为了生存和生长必须与周围环境交换物质，以吸收营养物质并排出代谢废物，细胞还通过调控细胞质基质和细胞器中各种无机离子的浓度来维持正常的生命活动。回答下列问题： （1）细胞所需的很多水溶性（亲水性）物质在没有膜转运蛋白的帮助下无法穿过脂双层，从细胞膜组成成分特性的角度分析，其原因是________。 （2）下表是一个典型的哺乳动物细胞内外的部分离子浓度比较： 离子 细胞内浓度（mmol/L） 细胞外浓度（mmol/L） Na+ 5～15 145 K+ 140 5 Mg2+ 0.5 1～2 Ca2+ 10-4 1～2 H+ 7×10-5 4×10-5 Cl- 5～15 110 ①无机盐离子所带电荷及它们对水分子的强烈吸引力阻碍了它们进入脂双层内部，因而不能以______的方式进行跨膜运输。 ②为了维持细胞内外的离子浓度差，上表中必须通过主动运输方式运入细胞的离子是______，判断依据是______。 ③某动物组织细胞内存在一种离子（物质M）：张同学认为物质M进入该细胞的方式是主动运输，李同学认为是协助扩散。欲设计实验确定哪位同学的判断正确，请写出实验思路[材料与试剂：该动物组织细胞（可培养）、含有物质M的动物细胞培养液等]：________。 （3）细胞膜上参与物质运输的转运蛋白主要有如图所示的两种： ①图示两种转运蛋白中，转移溶质速度较快的是_______（填图中字母）。 ②在肌细胞中，肌质网（一种特殊形式的内质网）膜上有一种蛋白质称为“钙泵”。当Ca2+从肌质网腔流入细胞质基质时，会刺激肌细胞收缩，为了让肌细胞恢复初始状态，钙泵会利用ATP使其自身发生磷酸化后和Ca2+结合，当钙泵向肌质网的内腔开放时，Ca2+的结合位点消失，钙泵将两个Ca2+释放到肌质网中。由此判断，钙泵将Ca2+________（填“运出”或“运入”）肌质网时的跨膜运输方式为主动运输，该过程需要上图________所示转运蛋白的协助。这种转运蛋白对离子的运输具有选择性，具体体现在_______。 23. 聚羟基丁酸酯（PHB）是某些细菌在碳源充足，氮源缺乏状态下产生的一类颗粒状、可作为细菌体内碳源和能量储备物的高分子化合物，能被苏丹染料染色，可溶于氯仿。PHB具有生物可降解性和生物相容性，用于可降解包装材料及医药行业。天然菌中的PHB产量较低，对天然菌进行诱变和筛选可得到高产PHB合成菌。 （1）PHB合成菌的分离培养基的成分为葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨、NaCl和琼脂，该培养基中氮源可以合成的生物大分子（写两种以上）___________，为使PHB合成菌胞体内积聚更多PHB，该培养基成分配比的特点是___________。 （2）将等浓度土壤稀释液接种在PHB分离培养基上后，甲组用紫外线照射，乙组不作处理。培养一段时间后，发现甲组菌落数少于乙组，原因是________。通过显微观察法初筛PHB合成菌的方法是________。复筛时需要提取胞体内的PHB，方法是________。 （3）对复筛得到的A~E五个菌株单独培养，检测PHB产量，结果如下图。A~E株菌中适于作工程菌的是___________，其它菌株不适合作工程菌的原因是__________。 （4）在发酵罐中连续发酵生产PHB时，除控制发酵温度、pH并随时检测培养液中PHB合成菌的数量外，还应__________（答出2条）。 24. 单克隆抗体是由可以制造这种抗体的免疫细胞与骨髓瘤细胞融合后的杂交瘤细胞产生的。当其应用于医疗中时，有助于减小副作用。一种抗原往往拥有多个不同的表位，在此杂交瘤技术发明之前，即使将纯化的某抗原注射入动物体内，也会产生可识别不同表位的多种抗体，因此抽取动物血清纯化的抗体也不够纯。 （1）根据题意一种抗原注入动物体内可产生多种抗体，原因是_______。 （2）A细胞与骨髓瘤细胞融合后，只考虑两两融合，出现结果有_________种。这些细胞要在_________中，经过培养后得到杂交瘤细胞。杂交瘤细胞的种类是多种，原因是___________。 （3）C为杂交瘤细胞在多孔培养基中的培养过程，该培养过程的操作是_____________，这是分别得到杂交瘤a、杂交瘤b、杂交瘤c的关键。 （4）D过程需要对杂交瘤细胞进行_________，就可获得能分泌所需要抗体细胞。将这些细胞在体外大规模培养从而获取单克隆抗体。单克隆抗体与传统从动物血清中纯化的抗体相比，优点是_________（回答两项）。单克隆抗体在生活中的具体应用____________(回答两点) 25. 种子休眠是抵御穗发芽的一种机制。通过对Ti质粒的改造，利用农杆菌转化法将Ti质粒上的T-DNA随机整合到小麦基因组中，筛选到2个种子休眠相关基因的插入失活纯合突变体。与野生型相比，突变体种子的萌发率降低。小麦基因组序列信息已知。 （1）Ti质粒上与其在农杆菌中的复制能力相关的结构为_____。选用图甲中的SmaI对抗除草剂基因X进行完全酶切，再选择SmaI和_____对Ti质粒进行完全酶切，将产生的黏性末端补平，补平时使用的酶是_____。利用DNA连接酶将酶切后的包含抗除草剂基因X的片段与酶切并补平的Ti质粒进行连接，构建重组载体，转化大肠杆菌；经卡那霉素筛选并提取质粒后再选用限制酶_____进行完全酶切并电泳检测，若电泳结果呈现一长一短2条带，较短的条带长度近似为_____bp，则一定为正向重组质粒。 （2）为证明这两个突变体是由于T-DNA插入到小麦基因组中同一基因导致的，提取基因组DNA，经酶切后产生含有T-DNA的基因组片段（图乙）。在此酶切过程中，限于后续PCR难以扩增大片段DNA，最好使用识别序列为_____（填“4”“6”或“8”）个碱基对的限制酶，且T-DNA中应不含该酶的酶切位点。需首先将图乙的片段_____，才能利用引物P1和P2成功扩增未知序列。PCR扩增出未知序列后，进行了一系列操作，其中可以判断出2条片段的未知序列是否属于同一个基因的操作为_____（填“琼脂糖凝胶电泳”或“测序和序列比对”）。 （3）通过农杆菌转化法将构建的含有野生型基因的表达载体转入突变植株，如果检测到野生型基因，_____（填“能”或“不能”）确定该植株的表型为野生型。 第1页/共1页 学科网（北京）股份有限公司 $$