热考主题•真题集训(14)　常考常新的基因工程-【新高考方案】2026年高考生物Ⅱ一轮总复习

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热考主题·真题集训(十四)　常考常新的基因工程

命题分析:基因工程是现代生物技术的前沿,教材中相关内容主要包括基因工程的基本工具、操作程序及应用,该部分内容是高考命题的重点和热点。载体的构建、限制酶的选择、PCR引物的设计与选取同时也是高考的难点。高考对基因工程的考查具有情境新、综合性强的特点,需要学生在掌握基础知识的前提下提高综合思维和创新意识。

一、选择题

1.(2024·湖南高考)某同学将质粒DNA进行限制酶酶切时,发现DNA完全没有被酶切,分析可能的原因并提出解决方法。下列叙述错误的是              (　　)

A.限制酶失活,更换新的限制酶

B.酶切条件不合适,调整反应条件如温度和酶的用量等

C.质粒DNA突变导致酶识别位点缺失,更换正常质粒DNA

D.酶切位点被甲基化修饰,换用对DNA甲基化不敏感的限制酶

2.(2024·河北高考)下列相关实验操作正确的是 (　　)

A.配制PCR反应体系时,加入等量的4种核糖核苷酸溶液作为扩增原料

B.利用添加核酸染料的凝胶对PCR产物进行电泳后,在紫外灯下观察结果

C.将配制的酵母培养基煮沸并冷却后,在酒精灯火焰旁倒平板

D.将接种环烧红,迅速蘸取酵母菌液在培养基上划线培养,获得单菌落

3.(2024·山东高考)制备荧光标记的DNA探针时,需要模板、引物、DNA聚合酶等。在只含大肠杆菌DNA聚合酶、扩增缓冲液、H2O和4种脱氧核苷酸(dCTP、dTTP、dGTP和碱基被荧光标记的dATP)的反应管①~④中,分别加入如表所示的适量单链DNA。已知形成的双链DNA区遵循碱基互补配对原则,且在本实验的温度条件下不能产生小于9个连续碱基对的双链DNA区。能得到带有荧光标记的DNA探针的反应管有              (　　)

A.①② B.②③ 

C.①④ D.③④

4.(2023·湖北高考)用氨苄青霉素抗性基因(AmpR)、四环素抗性基因(TetR)作为标记基因构建的质粒如图所示。用含有目的基因的DNA片段和用不同限制酶酶切后的质粒,构建基因表达载体(重组质粒),并转化到受体菌中。下列叙述错误的是              (　　)

A.若用Hind Ⅲ酶切,目的基因转录的产物可能不同

B.若用Pvu Ⅰ酶切,在含Tet(四环素)培养基中的菌落,不一定含有目的基因

C.若用Sph Ⅰ酶切,可通过DNA凝胶电泳技术鉴定重组质粒构建成功与否

D.若用Sph Ⅰ酶切,携带目的基因的受体菌在含Amp(氨苄青霉素)和Tet的培养基中能形成菌落

　　(2024·浙江6月选考)阅读下列材料,完成下面5~6题。

疟疾是一种严重危害人类健康的红细胞寄生虫病,可用氯喹治疗。疟原虫pfcrt基因编码的蛋白,在第76位发生了赖氨酸到苏氨酸的改变,从而获得了对氯喹的抗性。对患者进行抗性筛查,区分氯喹敏感患者和氯喹抗性患者,以利于分类治疗。

研究人员根据pfcrt基因的序列,设计了F1、F2、R1和R2等4种备选引物,用于扩增目的片段,如图甲所示。为选出正确和有效的引物,以疟原虫基因组DNA为模板进行PCR,产物的电泳结果如图乙所示。